食用菌多糖提取
1.6桑黄多糖多糖的生理功能
《本草纲目》中记载桑黄“味微苦，能利五脏、软坚、排毒、止血、活血等”；《神农本草经》中认为桑黄“久服轻身不老延年”；《药性论》记载，桑黄味微苦，性寒，在我国传统中药中用于治疗痢疾、盗汗、血崩、血淋、脐腹涩痛、脱肛泻血、带下、闭经。《药性本草》记载“治女子崩中带下，月闭血凝，产后血凝，男子玄癖”等。
1、抗癌：从桑黄中分离的多糖类物质主要为酸性多糖、蛋白结合多糖，，大多数没有直接抑癌功效，主要是通过免疫调节、抑制癌细胞转移、抗突变、抗血管生成降低肝线粒体中药物代谢酶(如P450等)活性等而起到肿瘤抑制和预防作用。
2、免疫调节：大多数真菌多糖的抗肿瘤作用是作为生物反应调节剂．通过增强宿主免疫调节功能即宿主介导抗肿瘤活性来实现的，而且对正常细胞几乎没有毒性。真菌多糖可通过多条途径、多个层面对免疫系统发挥调节作用。
3、保肝和抗肝硬化：桑黄提取物不仅能保护肝细胞，促进肝功能恢复，而且同时抑制肝脏内胶原纤维增生，改善肝组织结构．呈现出明确的抗肝纤维化效果。
4、抗氧化清除自由基的功能：：桑黄提取物对超氧阴离子的清除、抗坏血酸引起油脂氧化的抑制过氧化物和一氧化氮的清除有很好的效果。
5、降血糖：桑黄多糖能够降低血糖，同时减少总胆固醇、三酰甘油和天冬氨酸转氨酶。降低血脂，防止动脉硬化，防止心脑血管病的发生。
6．预防和治疗类风湿性关节炎
7．桑黄提取物能够完全抑制尿酸，对痛风有良好效果。
8．抗过敏，对过敏性鼻炎、久治不愈的湿疹疗效很好。有关研究表明，桑黄及提取物对人体无毒无害，即使长期大剂量服用亦无任何毒副作用。
1.7其他多糖的生理功能
1.7.1姬松茸多糖的生理功能
姬松茸源自南美巴西，所以称巴西蘑菇.姬松茸是珍稀菇类佳品，其菌蕾肥厚，菌柄肥整，脆嫩滑爽，美味可口，有较高的营养价值和药用价值。干品中粗蛋白含量为8.67%，氨基酸总量为9.22%。其中人体必须氨基酸的含量占总氨基酸的50%，多糖含量为6.55%，粗灰分5—7%，粗脂肪3—4%，此外还含有维生素B1、B2。子实体还含有多种具有抗癌活性的多糖成分，尤其是对腹水癌的抑制效果更为显著，还具有治疗痔瘘、增强精力、防治心血管病的作用，深受消费者欢迎，甚至把它作为茶来饮用。
姬松茸多糖具有抗肿瘤，降血糖、降胆固醇、改善动脉硬化，防治中风，心肌梗塞的功效，另外对痔疮、神经痛都有一定功效。
1.7.2云芝多糖的生理功能
云芝隶属担子菌亚门、层菌纲、非褶菌目(多孔菌目)、多孔菌科、栓菌属。云芝是一种木腐菌，主要是野生，生于多种阔叶树木桩、倒木和枝上。广泛分布于我国各个省区。云芝子实体一般小，无柄、平伏面反卷，或扇形、贝壳状，往往相互边接在一起，呈覆瓦状排列. 菌盖宽1-8cm，厚0.1-0.3cm，革质表面有细长绒毛和多种颜色组成的狭窄的同心环带，绒毛常有丝绢光彩，边缘薄，波浪状。菌肉白色。管孔面白色、淡黄色，每毫米3-5个。
从云芝子实体中提取的多糖分子量在10万以上，它富含β-1，4、β-1，3或β-1，4、β-1，6糖苷键的葡聚糖，另有甘露糖、木糖、半乳糖、鼠李糖和阿拉伯糖.同时，多糖链上结合着小分子蛋白质(多肽)组成蛋白多糖( psp)，它是一种口服有效的多糖，临床用于治疗慢性乙型肝炎、酒精肝，加强消化系统，肺及宫颈，乳腺等部位的癌症放化疗作用，可明显提高患者的细胞免疫功能和体液免疫功能，增强机体对化学治疗的耐受性减少感染与出血，提高患者生命质量.云芝多糖有强烈的抑制癌细胞活性的作用，研究发现，起作用的成分主要是云芝多糖以及含蛋白质的云芝多糖蛋白.云芝多糖对小白鼠肉瘤1 80和艾氏癌的抑制率分别可达80%和100%。云芝还是一种有多种代谢产物的真菌，有蛋白酶、过氧化酶、淀粉酶、虫漆酶以及革酶等，有其广泛的经济用途。
1.7.3虫草多糖生理功能
天然的冬虫夏草仅分布于中国海拔4000米以上的高山上，异常珍贵，是数百年来我国和亚洲人民视为比天然人参、鹿茸更名贵的滋补中药材，享有极高的声誉。《本草纲目拾遗》记：冬虫夏草性温暖，补精益髓，此物保肺气，能治百虚百损，治腰膝间痛楚，与雄鸭同煮食，宜老人。现代研究及临床应用证明，虫草对中枢神经系统能起镇静、抗惊厥、降温作用；对心血管系统有降压、降低心肌耗氧量、改善心肌缺血、抗心律失常作用；对呼吸系统能扩张支气管、祛痰平喘，另外对慢性肾炎、肾功能衰竭都有显著疗效。
现代药理实验表明，冬虫夏草的有效成分主要是虫草多糖。该多糖是由甘露糖、虫草素、腺苷、半乳糖、阿拉伯糖、木糖精、葡萄糖、岩藻糖组成的多聚糖，另外含虫草酸约7%，蛋白质约25%，脂肪约8.4%（其中82.2%为人体不能合成而又必需的不饱和脂肪酸），还含有游离氨基酸12种，水解后有氨基酸18种，其中成年人必需从食物中供给的8种氨基酸均具备，还有幼儿生长发育所必需的组氨酸。此外，尚含有维生素B12、麦角脂醇、六碳糖醇、生物碱等。
1.7.4猴头菇多糖生理功能
猴头菇又叫猴头菌、猴头、猴头蘑、剌猬菌、菜花菇等。隶属于担子菌亚门、层菌纲、猴头菌目、猴头菌科、猴头菌属。猴头菇是中国传统珍贵食用菌，与熊掌、海参、鱼翅并称“四大名菜”，并有“山珍猴头、海味燕窝”之说。据记载，猴头菇性平味甘，有利五脏，助消化、滋补的功能。
猴头菇多糖是猴头菇中最主要活性物质，它的活性部分为β-（1→3）糖苷键连接的主链和β（1→6）糖苷键连接的支链构成的葡聚糖，它对小白鼠肉瘤180和艾氏腹水癌有明显的抑制作用；其具有抑制肿瘤细胞生长，提高免疫功能，消除化学药物和放射性射性射线对机体的损害的作用；猴头菇多糖还能益气养血，扶正培本，对胃及十二指肠溃疡的愈合有效率为93%。临床应用证明，癌症患者手术后或化疗后期间，服用猴头菇制品可增强机体免疫力，缩小肿块，延长生存期。现代医学研究证明，猴头菇中含有的多肽、多糖和脂肪族的酞胺物质，有治疗癌症和有益人体健康的功效。对消化道系统肿瘤有一定的抑制和医疗作用。对胃溃疡、胃炎、胃病和腹胀等也有一定的疗效。民间还常把它用作治疗神经衰弱的良药。
1.7.5茶树菇多糖的生理功能
茶树菇春、秋生于茶树、水杨柳、枫香等阔叶树的腐木上，或活树的枯枝上，可食、美味可口。据《福建通志》记载：浙闽产录异云，茶菇生于茶树上，其菇簿而柄长，茶菇味在柄，浓郁中得清气，尤胜得菇。所产不多，不堪装载。自古以来，客家民间称为＂神菇＂。茶树菇营养丰富，蛋白质含量高达19.55%。所含蛋白质中有18种氨基酸，其中含量最高的是蛋氨酸占2.49%，其次为谷氨酸、天门冬氨酸、异亮氨酸、甘氨酸和丙氨酸。总氨基酸含量为16.86% .人体必需的8种氨基酸含量齐全，并且有丰富的B族维生素和钾、钠、钙、镁、铁、锌等矿质元素。中医认为，该菇性甘温、无毒，有健脾止泻之功效。
茶树菇多糖能治疗腰痛、头晕头痛、腹痛；抗衰老；降低胆固醇；防癌和抗癌；治疗冠心病；利尿健脾。
1.7.6黄伞多糖的生理功能
黄伞（Pholiota adiposa），又名多脂鳞伞、柳蘑等，属担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、球盖菌科、环锈伞属的一种食药兼用真菌。该菌属木腐性菌类，主要分布在我国的河北、河南、山西、吉林、浙江、西藏、广西、甘肃、青海、山西、新疆、四川、云南等地。一般在气温较低，温度差极大的8~10月生长于杨、柳及桦等树干上，有时也生于针叶树上，单生至丛生，多数丛生。黄伞菌丝淡黄至黄褐色，子实体黄色。菌盖直径3~12cm左右[6]，初期扁半球形，边缘内卷，后渐平展，中部稍凸起，表面有黄褐色近平伏的鳞片。湿润时粘滑，菌肉粘厚淡黄色，菌褶淡黄至锈褐色，直生或近弯生，稍密而长短不一。菌柄长5～10cm，粗1～3cm，圆柱形，内部实，呈纤维质，与菌盖同色。
黄伞具有较高的营养和药用价值，除含有大量蛋白质外，已知在子实体表面有粘液状核酸物质，其有利于人体脑力和体力的恢复，黄伞多糖对小鼠腹腔巨噬细胞有激活效应，对小鼠肉瘤和艾氏腹水癌有抑制作用，可预防葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎杆菌和结核杆菌感染，此外还有抗疲劳的生化特性。
1.7.7滑菇多糖的生理功能
滑菇学名：Pholiota nameko（t.Ito）S.Itoet Imai。英文名：Nameko；Slime Pholiota，Viscid Mushroom。别名：滑子蘑、珍珠菇、真珠菇、光帽黄伞、光帽鳞伞。隶属于真菌门、担子菌纲、伞菌目、丝膜菌科、鳞伞属（白永莉和张玲勤，2000），滑菇子实体丛生，伞形小，结菇多，因其表面有粘胶质，故而得名。
动物实验表明：滑菇多糖能显著提高荷瘤小鼠的存活率；能提高荷瘤或正常小鼠的机体免疫功能。主要表现为：能有效地促进荷瘤小鼠和正常小鼠脾脏的生长和分化，增加脾脏的重量；能提高正常小鼠血清中TNF-a的含量，而且能有效降低荷瘤小鼠血清中的含量水平；能显著抑制荷瘤小鼠血清中IL-6的含量，但对正常小鼠没影响；能通过降低肿瘤组织中LDH 的活性而对肿瘤的生长起抑制作用。滑菇多糖是一种很有前途的癌症治疗或辅助治疗药物。
松本保久的研究发现：热水提取的滑菇多糖（PNP）对小白鼠肉瘤180的抑制率达86.5%。此外，滑菇子实体的沸水提取物对小鼠S-180的抑制率为60%；氢氧化钠溶液提取物对小白鼠肉瘤180的抑制率达90%，对艾氏腹水癌的抑制率达70%。但滑菇多糖的抑瘤机制及对免疫功能影响的研究报道仅限于动物实验，尚未有临床的实验证明。
滑菇多糖对衰老模型鼠不同时期免疫功能的影响结果表明：滑菇多糖可以通过提高胸腺指数、脾指数和脾淋巴细胞转化率增强机体免疫力，发挥抗衰老作用；也可以通过提高SOD 活力、增强抑制活性氧生成的能力，以及降低脂褐素的含量发挥抗衰老作用（崔英俊，2003）。已有研究表明多种食药用真菌多糖均有抗衰老作用，但是关于滑菇多糖（pholiota nameko polysaccharide）抗衰老效果的研究，在国内外还未有详细报道。
1.7.8平菇多糖的生理功能
隶属担子菌纲、伞菌目、口蘑科、侧耳属。文献记载：我国食用平菇已历史悠久，远在我国金朝时代朱弁的“谢崔致君响天花”一诗里，就赞美天花蕈（平菇）的风味。平菇含丰富的营养物质，每百克干品含蛋白质20—23 克.平菇中游离氨基酸的含量丰富，其种类有天门冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸等23中之多，特别重要的谷氨酸含量最多，还含有P、K、Te、Zn、Cu、Co、Mo等多种金属元素和VC。矿物质含量也十分丰富。
平菇性味甘、温。具有追风散寒、舒筋活络的功效。用于治腰腿疼痛、手足麻木、筋络不通等病症。平菇中的蛋白多糖体对癌细胞有很强的抑制作用，能增强机体免疫功能。常食平菇不仅能起到改善人体的新陈代谢，调节植物神经的作用，而且对减少人体血清胆固醇、降低血压和防治肝炎、胃溃疡、十二指肠溃疡、高血压等有明显的效果。另外，对预防癌症、调节妇女更年期综合症、改善人体新陈代谢、增强体质都有一定的好处。
香菇多糖提取工艺的研究进展
香菇多糖提取工艺的研究进展 香菇多糖提取工艺的研究进展 香菇Lentinusedodes 为担子菌纲伞形科真菌，是世界上第二大食用菌。香菇多糖是香菇中最重要的一种生物活性物质，具有抑制肿瘤、调节免疫、抗病毒和抗氧化等多方面的药理活性，且毒副作用小。香菇多糖的提取常用水提醇沉法、酸碱提取法，但存在提取工艺复杂、溶剂使用量大、时间长等缺点，而且容易造成多糖降解，生物活性降低。本文主要对近年来香菇多糖提取工艺优化研究方面的进展进行阐述。 1.超声波提取 超声波提取法是利用超声波特殊的物理性质，加速介质质点运动、空化作用、振动匀化等以增大物质分子运动频率和速度，增加溶剂穿透力，从而使药效物质加速融人溶剂提高有效成分的得率。 王恒等用超声波辅助法从香菇中提取香菇多糖，通过实验优化确定出香菇多糖最佳提取工艺为超声功率200W ，料液比 35：1，超声时间40min ，香菇多糖提取率为6.72 ％。王俊颖等采用超声法浸提香菇多糖通过正交试验设计确定的最佳工艺为料水比1 : 25，超声温度60° C超声时间30min , 超声功率300W ，多糖得率为8.72 ％。李宏睿等采用正交试验设计，对香菇多糖的提取条件进行优化，并与单纯的热水浸提进行比较。结果表明，在料水比 l：25 ，超声时间35min ，超声功率105W ，热水浸提温度 90 ％，浸提时间20min 的条件下，提取效果最好，多糖提取率为13.75 ％，比单纯热水浸提法提高6.22％。 2.微波提取 微波辅助提取技术主要是通过调节微波加热的参数，有效地加热物料中的目标成分，对目标成分进行选择性提取。刘小丽等研究微波辅助法提取香菇多糖采用单因素试验对固液比、微波辐射功率、辐射时
食用菌多糖提取
1.6桑黄多糖多糖的生理功能 《本草纲目》中记载桑黄“味微苦，能利五脏、软坚、排毒、止血、活血等”；《神农本草经》中认为桑黄“久服轻身不老延年”；《药性论》记载，桑黄味微苦，性寒，在我国传统中药中用于治疗痢疾、盗汗、血崩、血淋、脐腹涩痛、脱肛泻血、带下、闭经。《药性本草》记载“治女子崩中带下，月闭血凝，产后血凝，男子玄癖”等。 1、抗癌：从桑黄中分离的多糖类物质主要为酸性多糖、蛋白结合多糖，，大多数没有直接抑癌功效，主要是通过免疫调节、抑制癌细胞转移、抗突变、抗血管生成降低肝线粒体中药物代谢酶(如P450等)活性等而起到肿瘤抑制和预防作用。 2、免疫调节：大多数真菌多糖的抗肿瘤作用是作为生物反应调节剂．通过增强宿主免疫调节功能即宿主介导抗肿瘤活性来实现的，而且对正常细胞几乎没有毒性。真菌多糖可通过多条途径、多个层面对免疫系统发挥调节作用。 3、保肝和抗肝硬化：桑黄提取物不仅能保护肝细胞，促进肝功能恢复，而且同时抑制肝脏内胶原纤维增生，改善肝组织结构．呈现出明确的抗肝纤维化效果。 4、抗氧化清除自由基的功能：：桑黄提取物对超氧阴离子的清除、抗坏血酸引起油脂氧化的抑制过氧化物和一氧化氮的清除有很好的效果。 5、降血糖：桑黄多糖能够降低血糖，同时减少总胆固醇、三酰甘油和天冬氨酸转氨酶。降低血脂，防止动脉硬化，防止心脑血管病的发生。 6．预防和治疗类风湿性关节炎 7．桑黄提取物能够完全抑制尿酸，对痛风有良好效果。 8．抗过敏，对过敏性鼻炎、久治不愈的湿疹疗效很好。有关研究表明，桑黄及提取物对人体无毒无害，即使长期大剂量服用亦无任何毒副作用。 1.7其他多糖的生理功能 1.7.1姬松茸多糖的生理功能 姬松茸源自南美巴西，所以称巴西蘑菇.姬松茸是珍稀菇类佳品，其菌蕾肥厚，菌柄肥整，脆嫩滑爽，美味可口，有较高的营养价值和药用价值。干品中粗蛋白含量为8.67%，氨基酸总量为9.22%。其中人体必须氨基酸的含量占总氨基酸的50%，多糖含量为6.55%，粗灰分5—7%，粗脂肪3—4%，此外还含有维生素B1、B2。子实体还含有多种具有抗癌活性的多糖成分，尤其是对腹水癌的抑制效果更为显著，还具有治疗痔瘘、增强精力、防治心血管病的作用，深受消费者欢迎，甚至把它作为茶来饮用。
香菇多糖提取工艺
香菇多糖提取工艺的研究 1引言 多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分，广泛存在于动物、植物和微生物细胞壁中,是生物体内除核酸和蛋白质以外的又一类重要的生物分子,尤其是一类重要的信息分子[1]。到目前为止，已有近300种的多糖化合物从天然产物中分离出来，其中植物提取水溶性多糖最为重要。从植物中提取多糖主要根据不同溶解度来选择溶剂进行。香菇多糖的提取一般有热水提取法、酸提取法、碱提取法、酶提取法和微波助提法等方法[2]，本文进行了浸提香菇多糖的工艺条件研究，以期获得香菇多糖的最佳提取条件，为其产业化生产提供有效的方法和技术参数。本实验采用各种溶剂和酶的处理,提取香菇多糖,保持多糖的生物活性，效果是明显的。 1.1香菇多糖的组成与药理价值 香菇多糖(LentinanLNT) 是一种β—1,3—葡聚糖，系从担子菌纲伞菌科真菌香菇子实体中提取分离纯化获得的均一组分的多糖。多糖以甘露糖为主，含少量的葡萄糖、微量的岩藻糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等；肽链由天冬氨酸、组氨酸、丝氨酸、赖氨酸、谷氨酸等18种氨基酸组成。LNT的化学结构是一种以β—D—[1~3]葡萄糖残基为主链，侧链为(1—6)葡萄糖残基的葡聚糖，平均分子量约为50万道尔顿[3]。 香菇多糖1969年在日本首先发现，自此，国内外学者对LNT作了许多深人的研究。近年来，LNT广泛药理作用研究取得了很大进展。主要的药理价值有：免疫调节作用；抗肿瘤作用[4]；抗病毒作用；对寄生虫、霉菌、细菌等感染均有治疗作用；有抗衰老、抗辐射作用，还具有预防实验性高脂血症和高血糖作用。在临床上LNT还用于治疗小儿反复呼吸道感染，糖尿病，寻常型银屑病，硬皮病，面部扁平，尖锐湿疹等。此外，硫酸化香菇多糖具有显著抗HIV作用，香菇多糖在治疗胃
多糖的提取分离方法
1.多糖的提取方法 生物活性多糖主要有真菌多糖、植物多糖、动物多糖3 大类。多糖的提取首先要根据多糖的存在形式及提取部位，决定在提取之前是否做预处理。动物多糖和微生物多糖多有脂质包围，一般需要先加入丙酮、乙醚、乙醇或乙醇乙醚的混合液进行回流脱脂，释放多糖。植物多糖提取时需注意一些含脂较高的根、茎、叶、花、果及种子类，在提取前，应先用低极性的有机溶剂对原料进行脱脂预处理，目前多糖的提取方法主要有溶剂提取法、生物提取法、强化提取法等。1．1溶剂法 1．1．1水提醇沉法 水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法。多糖是极性大分子化合物，提取时应选择 水、醇等极性强的溶剂。用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提渗滤，然后将提取液浓缩后，在浓缩液中加乙醇，使其最终体积分数达到70 %左右，利用多糖不溶于乙醇的性质，使多糖从提取液中沉淀出来，室温静置 5 h，多糖的质量分数和得率均较高。影响多糖提取率的因素有：水的用量、提取温度、浸提固液比、提取时间以及提取次数等。 水提醇沉法提取多糖不需特殊设备，生产工艺成本低，安全，适合工业化大生产，是一种可取的提取方法。但由于水的极性大，容易把蛋白质、苷类等水溶性的成分浸提出来，从而使提取液存放时腐败变质，为后续的分离带来困难，且该法提取比较耗时，提取率也不高。 1．1．2酸提法 为了提高多糖的提取率，在水提醇沉法的基础上发展了酸提取法。如某些含葡萄糖醛酸等酸性基团的多糖在较低pH 值下难以溶解，可用乙酸或盐酸使提取液成酸性，再加乙醇使多糖沉淀析出，也可加入铜盐等生成不溶性络合物或盐类沉淀而析出。 由于H＋的存在抑制了酸性杂质的溶出，稀酸提取法提取得到的多糖产品纯度相对较高，但在酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂，且酸会对容器造成腐蚀，除弱酸外，一般不宜采用。因此酸提法也存在一定的不足之处。 1．1．3碱提法 多糖在碱性溶液中稳定，碱有利于酸性多糖的浸出，可提高多糖的收率，缩短提取时间，但提取液中含有其它杂质，使粘度过大，过滤困难，且浸提液有较浓的碱味，溶液颜色呈黄色，这样会影响成品的风味和色泽。 1．1．4超临界流体萃取法 超临界流体萃取技术是近年来发展起来的一种新的提取分离技术。超临界流 体是指物质处于临界温度和临界压力以上时的状态，这种流体兼有液体和气体的特点，密度大，粘稠度小，有极高的溶解，渗透到提取材料的基质中，发挥非常有效的萃取功能。而且这种溶解能力随着压力的升高而增大，提取结束后，再通过减压将其释放出来，具有保持有效成分的活性和无溶剂残留等优点。由于CO2的超临界条件（TC＝304．6 ℃，Tp＝7．38 MPa）容易达到，常用于超临界萃取的溶剂，在压力为8～40 MPa 时的超临界CO2足以溶解任何非极性、中极性化合物，在加入改性剂后则可溶解极性化物。 该法的缺点是设备复杂，运行成本高，提取范围有限。 1．2酶解法 1．2．1单一酶解法 单一酶解法指的是使用一种酶来提取多糖，从而提高提取率的生物技术。其中经常使 用的酶有蛋白酶、纤维素酶等。蛋白酶对植物细胞中游离的蛋白质具有分解作用，使其结构变得松散；蛋白酶还会使糖蛋白和蛋白聚糖中游离的蛋白质水解，降低它们对原料的结合力，有利于多糖的浸出。
香菇多糖提取作业
香菇多糖提取 提取法： 用物理提取的方法生产精细化学品，即通过将某一种物质按一定的要求从混合物中提取出来从而获得产品的方法。 张杨杨 精化1122 1、认识香菇多糖 (1)香菇多糖结构式 分子式：〔C42H72O36〕n 分子量：〔1152.9995〕n
(2)香菇多糖性质 香菇多糖（l e n t i n a n;L N T）是从香菇中分离纯化的一种葡聚糖，是以增强T细胞和巨噬细胞功能为主的免疫增强剂。 密度：1.88g/c m3；沸点：1472℃a t760m m H g。 溶于碱溶液或甲酸，微溶于热水或二甲亚砜，不溶于冷水、醇、乙醚、氯仿、吡啶或六甲基磷酰胺。对硫酸和盐酸稳定。 (3)香菇多糖的功能 香菇多糖具有激活细胞免疫、调节多种体液免疫因子、诱导α-干扰素生成，调节机体免疫应答反应，诱导白细胞对肿瘤浸润，导致肿瘤部位血管扩张、出血、坏死，阻止病毒与宿主细胞的结合，提高S O D〔超氧化物歧化酶〕活性，抑制M D A〔丙二醛〕生成，抗脂质氧化，降低胆固醇，调节糖代谢、改善糖耐量、扩张胃肠道产生饱腹感而减轻食欲，降低血糖等功能。 【丙二醛】 英文名：M a l o n d i a l d e h y d e;m a l o n i c d i a l d e h y d e;P r o p a n e d i a l 简称：M D A 分子式O H C-C H2-C H O 分子量72.0634 无色针状晶体，熔点72～74℃，一般含两个结晶水，60℃下真空干燥可得无水物，易潮解，纯的丙二醛在中性条件下稳定，但在酸性条件下不稳定。 由乙醛和甲酸乙酯在碱作用下缩合而得，可在高真空下升华精制，主要用于医药中间体、感光色素的原料。与蛋白质不相容，有潜在的致癌性。
真菌多糖的功能
真菌多糖的功能 在国际上，真菌多糖被称为称为“生物反应调节物”，简称“BRM”，按研究表明，药用菌的活性多糖成份β－D（1－73）葡萄糖对异源的、同源的甚至遗传性的肿瘤都有变化。此外，它还具有抗细菌、抗病毒和抗凝聚的作用，提高肝功能和解毒力，提高动物耐缺氧能力和氧的利用率，降低血液的粘稠度，增加心肌收缩力，改善心律，降血糖、镇静、镇痛、平喘、止咳、化痰的功效。 一、多糖对肿瘤的作用 1、多糖对肿瘤的治疗作用不是直接杀伤肿瘤细胞，而是通过增强患者的免疫防御系统，达到防癌抗癌的效果。实验证明，从香菇、黄芪、柏树菌中提出的多糖能增强 T 细胞的功能，使免疫功能低下的动物恢复正常，特别对具有杀伤肿瘤细胞功能的 T细胞 NK 细胞及LAK 细胞有激活作用。 2 、多糖又是免疫 B 细胞活化剂，像黄芪多糖、香菇多糖、柏树菌多糖、灵芝多糖等等能促进B细胞的增殖，使其产生大量免疫球蛋白抗体，从而增强抗病能力。 3 、巨噬细胞，特别是毒性巨噬细胞对肿瘤的细胞有很强杀伤力，它能合成和分泌肿瘤坏死因子（TNF），使肿瘤出血坏死。多糖类的物质是强大的 TNF 诱导剂，给动物注射多糖第 8 天，TNF 的产生达到高峰，从而发挥抗癌功效。 4 、干扰素（IFN）是机体内自己制造的抗病毒和抗癌物质。柏树菌多糖能够诱导机体产生干扰素。加进每毫升10－100微克浓度的柏树菌可使正常人产生α干扰素和γ干扰素的分别提高 8 倍和 4 倍。 5 、白细胞介素2（I L－2）为T细胞生长因子，由活化的 T 细胞所产生，即能维护免疫 T 细胞长期存活，又可诱导 T 杀伤细胞及 LAK 细胞的生长，因此成为治疗肿瘤和爱滋病等病毒的最新药物。多糖类药物可激活 T 细胞诱导内源性白介素2 产生，从而避免商品白介素2 的毒性与副反应。还能提高细胞对白介素2 的敏感性，使其能在较低剂量下产生最大治疗效果。 二、真菌多糖对糖尿病和哮喘的作用 研究发现真菌多糖治疗糖尿病是通过两方面发生作用的。二是改变血液循环，使机体胰脏血液循环加快，胰岛 B细胞得到了足够的氧，从而增加了胰岛素的分泌量。另一方面，提高肌肉细胞胰岛素靶细胞受体的功能，使得同样量的胰岛素能发挥更大的效果。有些老年糖尿病患者的内分泌功能检测时，胰岛素的量处于正常范围，其所以会产生糖尿病，主要是胰岛素靶细胞对胰岛素敏感性降低的原因。 哮喘患者气管肥大细胞的细胞透性较大，所以致喘物质组织胺容易从肥大细胞中释放出来。哮喘患者服用真菌多糖后，气管平滑肌肥大细胞、细胞膜的创作修复就会加快人。肥大细胞之组织胺释放受到了抵制，从而抑制了哮喘。真菌多糖的抗疲劳作用，现在知道，也是提高细胞生理功能，提高细胞乳酸脱酶的活性实现的。 三、真菌多糖抗病毒抗感染的作用 研究发现，是由于真菌多糖对细胞的作用。真菌多糖可以提高机体细胞的生理功能，修
快速食用菌基因组提取方法
草菇基因组DNA提取方法 1.收集菌丝（可提前几天收集）。用滤纸吸干菌丝，包裹于做好标记的锡箔纸中，迅 速扔进液氮中，等所有菌丝收集完毕后，用镊子将样品从液氮中取出，保存于-80℃冰箱备用。 2.称取0.1-0.2g滤纸吸干、包于锡箔纸、冷冻保存的菌丝。用液氮研磨，在粉末融化 前将粉末快速转入用液氮预冷的1.5mL离心管中，快速盖上离心管盖子，扔进液氮中备用（继续研磨下一个样品，快速装进离心管后迅速扔进液氮保存）。 3.用镊子将离心管从液氮中夹出，放在96孔板，快速往离心管中加入400ul提取缓冲液（SDEB），立即涡旋混匀直到变成匀浆（一个一个加样，避免加样前，离心管中的粉末已经融化，涡旋震荡加用手弹使粉末充分溶于SDBE）。（此时开启离心机，4℃预冷） 4.往离心管中加入400ul 2XcTAB缓冲液（2XcTAB）。 5.在通风厨中，往离心管中加入250ul 苯酚，250ul 氯仿:异戊醇(24:1)，室温涡旋5分钟。 6.13000 rpm，4oC，离心5分钟。（此时可以收拾清洗研钵、收拾擦干桌面） 7.小心吸取650ul 上清，转移到一个干净的1.5毫升管中(千万不要吸到任何苯酚或分层处的东西!)。 8.往上清液中加入455ul（0.7倍体积）的异丙醇，上下颠倒混匀10次。 9.13000 rpm，4oC，离心10分钟。（此时可以继续收拾清洗研钵、收拾擦干桌面） 10.用手倒掉上清，13000rpm，4℃，离心10秒，用200ul 的黄色枪头将离心管中残余的上清弃除。 11.往离心管沉淀中加入900 ul 70%乙醇，用手指弹一弹使白色沉淀悬浮（备选：可放置-20℃冰箱放置1-2h，休息一下，或者去吃饭）。 12.13000 rpm,4oC，离心10分钟。（此时可以打开55℃水浴锅） 13.用1mL蓝色枪头轻轻吸走上清，注意不要把白色沉淀吸走了（千万不能用手把上清倒掉，一定要用枪轻轻吸）。 备选：可重复11-13一次。 14.13000rpm，4℃，离心10秒，用200ul 的黄色枪头将离心管中残余的上清弃除。 15.在通风厨中，打开离心管盖子，放在96孔板上，让96孔板板面与通风厨台面成90度直角，放置10min(不要太久，没有酒精味了即可!)。（此时可以先配置含1/30-1/50浓度RNase的TE，再制备1%琼脂糖凝胶） 16.往离心管中加入50-100 ul含有RNase酶的TE, 55℃水浴30分钟。 17.将溶解后的DNA暂存于冰上，用微量测定仪测DNA浓度和纯度，跑1% 脂糖凝胶检测DNA质量。 Buffers: 2x CTAB: 2% CTAB 100mM Tris-HCl pH8.0 20mM EDTA pH8.0 1.4M NaCl 1% PVP (polyvinyl pyrrolidone) Soil DNA extraction buffer:
植物多糖及其提取方法
植物多糖及其提取方法 1 前言 多糖是自然界和生物体中广泛存在的物质，它是生物体内除蛋白质和核酸以外的又一类重要的信息分子。它具有多种生物活性，与生物机能的维持密切相关，与蛋白质、脂类形成的糖蛋白、脂多糖在细胞的识别、分泌以及在蛋白质的加工、转移方面起着不容忽视的作用。近年来，植物、海洋生物及菌类等来源的多糖已作为有生物活性的天然产物中的一个重要类型出现，各种多糖所具有的抗肿瘤、免疫、抗凝血、降血糖和抗病毒活性已相继被发现。我国对多糖研究始于20世纪70年代，植物多糖由于它们独特的功能和低毒性，作为新药发展的方向具有广阔的应用前景，越来越多的研究人员将目光投向植物多糖。 2 植物多糖的结构 植物多糖是由许多相同或不同的单糖以a或p一糖苷键所组成的化合物，普遍存在于自然界植物体中，包括淀粉、纤维素、多聚糖、果胶等。多糖有复杂的四级结构，一级结构指糖基的组成、排列顺序、相邻糖基的连接方式、异头碳构型及糖链有无分支、分支的位置与长短等；二级结构指多糖主链以氢键为主要次级键而形成的有规则构象；三、四级结构是指以二级结构为基础，糖单位之间的非共价相互作用，导致二级结构在有序地空间产生规则构象。植物多糖的
主链与支链形成了特殊的构型一凹形槽。凹形槽是一级结构与构象的体现。凹形槽的支链与活性关系为：支链度越大，凹形槽越多，生物活性越大。近年来，人们对多糖的结构和活性的研究不断深入，进一步阐明了多糖作用机制与结构的关系，其多样性的生理活性更加受到重视。 3 植物多糖的功能 多糖与蛋白质一样，具有生物大分子的复杂结构，具有一定的生理和生物学活性，概括起来多糖的生物活性包括：免疫调节性、抗肿瘤活性、降血糖活性、降血脂活性、抗病毒活性、抗衰老活性(抗氧化活性)、抗疲劳、抗突变活性，除此之外，还具有其他生物活性，包括抗凝血、抗炎、抗菌、抗惊厥、镇静、止喘及降血压等作用。 (1)免疫调节功能。由于现代医学、细胞生物学及分子生物学快速发展，人们对免疫系统的认识越来越深入。免疫系统紊乱，会导致人体衰老和多种疾病的发生。植物多糖是一种免疫调节剂。多糖对肌体的免疫调节作用，包括激活巨噬细胞，激活网状内皮系统，激活T和B细胞，激活补体，进干扰素的生成，促进白细胞介素的生成，诱生肿瘤坏死因子等。 2)抗肿瘤活性植物多糖主要是通过增强机体的免疫功能来达到杀伤肿瘤细胞的目的，许多高等植物中都含有抗肿瘤活性的多糖，如芦荟多糖、香菇多糖提取物、人参多糖具有
香菇多糖的提取纯化及其理化性质的研究_张欣
香菇多糖的提取纯化及其理化性质的研究3 张 欣 吕作舟 (华中农业大学 武汉 430070) 摘要 本研究以香菇菌盖、菌柄、菌丝体为试材,采用水浸法、碱浸法提取香菇多糖。并且,从香菇菌盖中提取纯化得到两种新多糖:香菇多糖A(水浸物)和香菇多糖B(碱浸物)。 关键词 香菇 菌盖 多糖 提取 纯化 理化性质 香菇(Lentinula edodes)不仅是一种美味佳肴,也是一种著名的药用菌。我国历代的医药学家对香菇的药性及功能均有著述,如《日用本草》认为香菇“益气、不饥、治风、破血”〔1〕。现代研究结果表明,香菇中含有能降低血浆胆固醇的香菇嘌呤〔2〕,含有诱生干扰素的双链核糖核酸〔3〕,且含有抗肿瘤活性物质———香菇多糖及香菇糖肽〔4,5〕。 1970年G oro Chihara首先从香菇子实体中浸提出6种香菇多糖,并证明其中一种具有明显的抗肿瘤作用,定名为Lentinan〔5〕。自此,世界各地掀起了一股从大型真菌中寻找抗肿瘤药物的热潮。有关香菇多糖的研究尤其活跃,包括提取工艺及分离纯化研究,香菇多糖理化性质及药用价值研究〔6,7,8〕。但对多糖理化性质、结构、药效、药理等方面仍无定论,仍须继续深入研究。 本研究以香菇的菌盖、菌柄、菌丝体为试材,分别采用水浸法、碱浸法提取香菇多糖,检测分析了粗多糖、多糖、蛋白质与原材料之间量的关系,并且,从香菇菌盖中提纯了两种新多糖,对其理化性质和结构进行了初步研究,为进一步对香菇多糖的结构分析、药效、药理实验提供参考。 本研究主要结果如下: 11以香菇菌盖、菌柄、菌丝体为试材,采用水浸法、碱浸法提取香菇多糖。粗多糖、多糖得率都以菌盖的水浸物为最高,而以菌丝体的碱浸物为最低。蛋白质得率以菌柄水浸物为最高,以菌丝体的碱浸物为最低。 21氨基酸自动分析仪的分析结果表明:香菇菌盖水浸物、碱浸物中氨基酸含量丰富,其中包括人体必需氨基酸。水浸物主要含天门冬氨酸、谷氨酸;碱浸物主要含天门冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸。 31采用水浸法、碱浸法从香菇菌盖中提取粗多糖,然后经乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白、CT AB (十六烷基三甲基溴化铵)络合沉淀、氨化钠溶液溶解、透析,得到两种多糖:香菇多糖A(水浸物)和香菇多糖B(碱浸物)〔9〕。这种纯化方法具有简便、经济的特点。 41多糖的纸层析结果表明:多糖A、多糖B均仅为一个斑点,R f值分别为0152,0120。多糖的PAGE电泳结果表明:多糖A,B均为紫红色的单一谱带,R f值分别为0151,0162;它们均从负极向正极移动,表明它们是酸性多糖。紫外光谱分析结果表明:多糖A、多糖B均未发现核酸(260nm)和蛋白质(280nm)特征吸收峰〔10〕。组分含量分析表明:多糖A、多糖B均无含氮物质存在,但含少量灰分和水分。以上对多糖的鉴定结果表明:多糖A、多糖B均一性高,多糖A的纯度为7911%,多糖B的纯度为8312%,符合化学定性定量标准;它们是酸性多糖。 51多糖A,B均为灰白色粉未。多糖B不溶于稀酸。多糖A,B均溶于水、稀碱,尤易溶于热水,不溶于乙醇、丙酮、乙醚、乙酸乙酯等有机溶剂,其水溶液透明粘稠状,可被5%CT AB络合沉淀。旋光计测得多糖A的旋光率为〔α〕D25℃+ 4311°(水),多糖B的旋光率为〔α〕D25℃+2513°(水)。采用改良型膜渗透压法测得香菇多糖A的数均分量为8131×104,香菇多糖B为9140×104。 61红外光谱分析结果表明,多糖A、多糖B具类似结构,但不属同一种物质。两种多糖在890cm-1均具吸收峰,在840cm-1均无吸收峰,表明它们为β-糖苷〔11〕;多糖A,B都含有-C OO-基团。因此,香菇多糖A、香菇多糖B均是β-酸性异多糖。 71纸层析结果表明:多糖A,B均由葡萄糖(G lc)、半乳糖(G al)、阿拉伯糖(Ara)、木糖(X yl)、鼠李糖(Rha)构成。用正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶5)为展开剂,以葡萄糖的R f值为1100,则它们的R f值之比为,G lc∶G al∶Ara∶X yl∶Rha= 1100∶1117∶1152∶1176∶2117。气相色谱检测多糖的单糖组成及摩尔比,多糖A为Ara∶Rha∶X yl∶G al∶G lc= 4136∶2103∶1100∶5164∶13180;多糖B为Ara∶Rha∶X yl∶G al∶G lc=9137∶1100∶1164∶7119∶23136。 3 湖北省重点科技计划项目。收稿日期 1999—07—20 43中国食用菌 E DI BLE FUNGI OF CHI NA V ol118,N o16
多糖提取实验设计流程【复习准备】
食用菌多糖的提取方法有水提法、碱提法和酶提法等，其中酶提法是利用酶对细胞结构的破坏作用，使存在于细胞内部的多糖释放出来，从而提高了多糖的得率。 本次实验采用纤维素酶和果胶酶对紫蘑菇进行水解，研究香菇多糖的最佳提取工艺，并探讨蘑菇粒度、蘑菇溶解方法以及酶法提取中多糖提取效果的评价方法。 可以同步做三组对比试验：⑴采用水提，不加酶；⑵采用酶法提取；⑶采用酶空白（只加酶，不加蘑菇粉）。 由于酶中也含有少量的糖类成分，其存在将会对蘑菇多糖的提取产生影响。因此，在计算酶法提取多糖的效果时，要减去酶本身所引入的糖。在确定最佳酶浓度时更要考虑。 一、实验流程：蘑菇干燥→粉碎过筛→加水浸泡0.5h→调PH→加入纤维素酶→提取→离心过滤→测多糖提取率 式中：n一提取液稀释倍数； C一提取液中多糖的浓度（mg/mL）； V一提取液体积（mL）； m一蘑菇的质量（mg）。 测定时取三个平行样，结果数据为平行样的平均数值。 二、具体实验步骤： 1、多糖标准曲线的绘制 精密称取105℃干燥恒重的葡萄糖标准品100mg,置于100 mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。精密吸取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8 mL分别置于50 mL 容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。精密吸取上述各种溶液2.0 mL,分别加入5%苯酚溶液1.0 mL,摇匀,迅速加入5.0 mL浓硫酸,振摇5min,置沸水浴上加热15 min,然后置冷水浴中冷却30 min,随行空白,在490 nm波长处测定吸光度。以标准溶液浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标绘制标准曲线，并计算其标准曲线回归方程。 （1）精密度试验:精密吸取1.0 ml供试液按“标准曲线的制备”项下操作，分别测定吸光度，求得RSD。 （2）重现性及多糖含量测定:精密称取巴西蘑菇多糖0.1000g，按“供试液
食用菌多糖深层发酵与提取可行性研究报告
*****生物科技有限公司 菌蔬果生物多糖深层发酵萃取深加工项目 可行性研究报告 建设单位：*****生物科技有限公司 单位地址：**省**县**工业园10号 邮政编码：332100 联系电话： 传真： 编制单位：*****生物科技有限公司 编制时间：二〇一一年四月
序言 二十世纪九十年代末，作为中国科学技术界最权威的香山学术会议破天荒地连续二次就我国生物多糖的发展战略举办论坛。一时权威云集，惠永正教授阐述了中国传统药物与与糖化学和糖生物学的密切关系。他说，中国传统药物是中华民族优秀的文化瑰宝。现在已知，许多传统药物的药理活性源于药用植物的皂苷（Saponin），皂苷结构的多样性是由于皂苷中配糖体结构（糖型）的多样性，而配糖体的结构与皂苷的生理活性密切相关。这为从事糖化学和糖生物学研究的工作者提出了课题和广阔的研究空间。 中国中医研究院吴志奎教授认为，多糖或糖缀合物是中国传统药物发挥独特功效的重要物质基础，呼吁糖生物学者应促进中国传统药物的现代化研究。中外学者均认识到对生命过程中糖链生物学作用的阐明，将为菌类治病机理的研究提供理论基础和生物模型，而糖化学研究的进展对药效成分的鉴定和合成是菌类国际化不可缺少的工具。 中国药理学的泰斗、中国军事医学科学院一级研究员周金黄教授指出：“近年来我们的研究证明：多糖成分是许多菌类药理活性很强的成分。多糖类广泛存在于多种菌类中。多糖也是生命必需的成分，存在于一切细胞结构中，参与生命功能活动。“我们认为21世纪是多糖生命科学的时代，就像二十世纪是肽类，氨基酸与核糖核酸时代。”中国工程院院士、青岛海洋大学校长管华诗也在全国权威的香山会议上指出：“我们不应当忽视科学家们在十年前的预言：今后的数十年将是多糖的时代。对多糖生物功能和结构的关系研究将成为继蛋白质和核酸之后探索生命奥秘的新的里程碑。” 重要提示 什么是“多糖”： 多糖是存在于自然界的醛糖或酮糖通过糖甙链连接在一起的活性多聚物，广泛存在于动物细胞膜，植物和微生物细胞壁中, 是构成生命的三大物质基础之一，具有多种生物活性。它作为生物效应调节剂，主
食用菌多糖研究进展
微生物专题报告——食用菌多糖功能的研究概况 141201019 微生物学魏华 食用菌作为天然食药资源，营养丰富，含蛋白质、必需氨基酸、多糖、维生素等多种成分。食用菌多糖虽然含量比例仅占0.48-0.87%，却具特异的生物学功能活性。如具有抗肿瘤活性；可显著提高巨噬细胞吞噬量，刺激抗体产生，增强人体免疫功能；可降血糖、降血脂；可显著增加脑和肝脏组织中的过氧化物歧化酶SOD酶活力，抗氧化、抗衰老；保肝、抗辐射等等。 1971 年，Maeda 等从香菇中分离出一种具有抗肿瘤活性的多糖，这个研究发现影响重大，使更多的科学家开始研究真菌中的活性多糖[14]。截至目前，国内外已从食用菌中筛选出200 种有生物活性的多糖。同时，对于多糖的研究不仅只是研究其的生物学活性，更多的是利用生物学手段研究多糖分子的化学结构及结构与功能之间的关系[13]。国内对多糖的研究起步较晚，但在研究糖类的作用机理时，紧密与中医药的理论相结合，进展甚快。70 年代以来，我国在云芝、银耳、灵芝、黑木耳、裂褶菌、冬虫夏草、猴头菌和竹荪等中分离得到具有显著生理活性的、单一成分的多糖物质。目前，我国对药用多糖的研究仍多偏重于提取、分离、纯化、和研究药理活性等方面。虽然已有用于治疗癌症的商业化产品，但积累的临床资料仍很缺乏，大部分多糖产品尚处于实验阶段或仅用于保健品，还需重视新兴的糖生物学及工程学，提高研究水平。 1.食用菌多糖的种类 近年来研究报道的真菌多糖，主要有四类，葡聚糖、甘露聚糖、杂多糖、糖蛋白。 1.1葡聚糖 葡聚糖（Glucan），尤其是β(1-3)连接的葡聚糖具有多种活性[15-20]。如从金顶侧耳（Pleurotus citrinopileatus）子实体中分离的多糖，分子量为1.89×104，可能的结构是主链为β(1-3)连接的葡聚糖，支链为β(1-6)连接的葡萄糖[21]。从黑石耳（Dermatocarpon miniatum）子实体中分离的具有抗氧化功能的多糖，主要结构为α(1-4)(1-6)连接的葡聚糖，分子量为1.80×106[22]。从栓菌（Trametes suareclens）中分离的多糖分子量5.0×10 4，主链为β(1-3)-D-Glucan，支链为β(1—6)连接的葡萄糖。从斜顶菌（Clitopilus caepitosus)）多糖分子量1.32×106，主链为β(1-3)连接的葡聚糖，支链有较多的β(1-6)连接的葡聚糖链和较少的β(1-4)连接的葡聚糖链，分别连在主链的O-6 位和O-4 位。 1.2甘露聚糖
废弃食用菌菌包的提取工艺
废弃食用菌栽培块中纤维素酶的提纯工艺研究 杜 宁，许甜甜，李先富，夏志华，陈 军* (上海师范大学生命与环境科学学院，上海 200234) 摘 要：利用废弃食用菌栽培块通过浸提、膜浓缩、盐析和双水相萃取等方法提取加工工业级和高纯度纤维素酶制剂。结果表明：采用含体积分数0.2% Triton X-100的pH5.0、0.2mol/L 乙酸-乙酸钠缓冲液作为酶浸提液，在25℃浸提3h 条件下可以抽提出102.64U/mL 的纤维素酶溶液，再在质量分数60%的(NH 4)2SO 4饱和度条件下可回收65.54%的纤维素酶总活力，制备成酶活力达到2865.47U/mL 的工业级纤维素酶制剂；再经质量分数22%聚乙二醇6000(PEG6000)-20%(NH 4)2SO 4双水相体系在pH5.5、7mmol/L NaCl 条件下常温萃取，可获得酶活力为10208.46U/mL ，酶比活力106.62U/mg 的高纯度纤维素酶，酶总活力得率为51.22%，纯度是浸提液的12.85倍。关键词：废弃食用菌栽培块；纤维素酶；双水相萃取；提取纯化 Extraction and Purification of Cellulase from Spent Mushroom Compost DU Ning ，XU Tian-tian ，LI Xian-fu ，XIA Zhi-hua ，CHEN Jun* (College of Life and Environment Sciences, Shanghai Normal University, Shanghai 200234, China) Abstract ：Spent mushroom compost (SMC) was used to prepare industrial grade cellulase by solvent extraction, membrane filtration and salting out and high-purity cellulase by further aqueous two-phase extraction. The results showed that crude cellulase solution with an enzymatic activity of 102.64 U/mL was obtained after 3 h of extraction at 25 ℃ with an extraction solvent composed of 0.2 mol/L acetic-acetate sodium buffer at pH 5.0 and 0.2% Triton X-100. Subsequent salting out at 60% (NH 4)2SO 4saturation could recover 65.54% of the total cellulase activity, and industrial grade cellulase with an enzymatic activity of 2865.47 U/mL was obtained. After further aqueous two-phase extraction with a system made up of 22% polyethylene glycol 6000 (PEG6000) and 20% (NH 4)2SO 4 under the conditions of 7 mmol/L NaCl, pH 5.5 and normal temperature, the cellulase activity and specific activity were 10208.46 U/mL and 106.62 U/mg, respectively and a total activity yield of 51.22% was achieve,revealing a 12.85-fold increase when compared with that of crude enzyme solution. As a result, high-purity cellulase was obtained. Key words ：spent mushroom compost(SMC)；cellulose ；aqueous two-phase extraction ；extraction and purification 中图分类号：TS209 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2012)01-0125-06 收稿日期：2011-02-14 基金项目：国家自然科学基金项目(50678102；0000005472)；上海市教委青年基金项目(03DQ25)； 上海师范大学科技基金项目(SK201228)；上海市大学生科研创新活动计划项目(CX016) 作者简介：杜宁(1986—)，女，硕士研究生，研究方向为微生物分子生物学。E-mail ：Duing@https://www.wendangku.net/doc/0c1608380.html, *通信作者：陈军(1966—)，男，副教授，博士，研究方向为微生物酶学。E-mail ：cj7206@https://www.wendangku.net/doc/0c1608380.html, 我国年产食用菌约为1000万t ，占世界产量的70%以上，每年产生大量食用菌栽培废料(s p e n t m u s h r o o m compost ，SMC)，而目前这些废料大多是通过堆积或燃烧方式加以处理, 既浪费了资源，又对环境造成了严重的污染[1]。近年来，对SMC 的利用已经开展了一些有益的探索，如Bisaria 等[2-4]利用SMC 发酵制备燃料沼气；Sochtig 等[5-7]利用SMC 加工有机肥用于园艺和食用菌的生产；Chiu 等[8-10]成功地利用SMC 生物降解有害物质。此外，有关SMC 中的生物活性物质分析讨论也有不少报道[11-15]。 食用菌生长过程中菌丝体会分泌大量纤维素酶来分解栽培料中的纤维素物质，以获得生长需要的碳源和能源[16]。在菌菇培养时期纤维素酶活性一般不易失活，整个栽培期间栽培料中会积累较多的纤维素酶活力。因此，在菌菇收获后的废弃栽培块中通常含有一定活力的纤维素酶，而从工艺上研究废弃栽培块中纤维素酶回收的报道并不多见[17-18]。目前商品纤维素酶的来源主要是通过发酵法来生产的，生产成本较为昂贵。本实验通过生化分离技术将积累在SMC 中的纤维素酶提取加工精
微波辅助法提取香菇多糖的工艺
香菇是我国传统的药食两用食品，含有多种有效药用成分。尤其是香菇多糖,是一种宿主免疫增强剂,具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能。医学研究证明,它是通过刺激机体的免疫系统使机体的免疫功能得到恢复和提高,由机体本身的抵抗力去杀死肿瘤细胞。它的作用是间接的，毒副作用小,在临床上具有很好的应用前景[1-2]。香菇多糖在日本已生产并外销。但因工艺复杂,收率低,成本高,普通肿瘤病人无法接受。为此,我们对香菇多糖的提取工艺进行研究,初步探讨出较为理想的浸提工艺,希望为其工业化生产提供一定的理论参考。 1材料与方法 1.1材料与试剂 香菇：购自西安市农贸市场；D318型阴离子交换树脂,LX-200型阴离子交换树脂，D201×7型阴离子交换树脂，LX-67型阴离子交换树脂：均购自西安蓝深公司;葡萄糖,苯酚,浓硫酸,无水乙醇,考马斯亮蓝G-205等均为分析纯。 1.2主要仪器设备 752型紫外可见分光光度计：上海光谱仪器有限公司；WP700TL23-K5微波炉：格兰仕电器有限公司；电热恒温水浴锅：北京长源实验设备厂；80-2B台式低速离心机：湖南星科科学仪器有限公司；Delta320pH 计：梅特勒－托利多仪器（上海）有限公司。 1.3提取工艺[3-4] 干香菇→粉碎→加水浸泡20min→微波辐射→热水浸提30min→离心取上清液→浓缩→加乙醇沉淀多糖→离心分离多糖→多糖粗品制成溶液→上树脂柱去除杂蛋白→流出液真空干燥得香菇多糖产物试验中均以1g干香菇粉为提取对象。 1.4检测方法 香菇多糖含量测定：采用苯酚硫酸法[5]。测得标准 微波辅助法提取香菇多糖的工艺 刘小丽，黄晋杰 （长安大学环境科学与工程学院，陕西西安710054） 摘要：研究微波辅助法提取香菇多糖并用离子交换树脂去除杂质蛋白的工艺方法。采用单因素试验对固液比、微波辐射功率、辐射时间、乙醇用量以及杂蛋白的去除条件分别进行了考察。试验结果表明最佳提取工艺条件为:固液比1g∶20mL,微波辐射功率为280W，辐射时间5min，乙醇与多糖提取液体积比为4∶1，香菇多糖提取率可达到9.46%； 采用LX-67阴离子交换树脂在料液pH9时可有效去除蛋白质杂质，多糖纯度可达到85%。 关键词：香菇多糖；微波；离子交换树脂 Study on Microwave-assisted Extraction of Lentinan from Mushroom LIU Xiao-li，HUANG Jin-jie （College of Environmental Science and Engineering，Chang＇an University，Xi'an710054,Sh a anxi，China）Abstract:The methods of extracting lentinan from mushroom with micowave assisting were studied.The ratio of solid to water（g/mL）,microwave power,microwave extraction time,the usage of ethanol,and the remove of protein were studied respectively by the single factor test.The results showed that the optimum conditions of extraction were as follows:the ratio of material to liquid of1g∶20mL,microwave radiation power of280W,the radiation time for5min,the volume ratio of ethanol to liquor of4∶1,under this conditions the extraction rate of polysaccharide can get9.46%.The LX-67negative ion exchange resins were used to remove protein from the rude lentinan with the liquor at pH9,and the purity of lentinan can get85%. Key words:lentinan；microwave；ion exchange resins 作者简介：刘小丽（1975—），女（汉），讲师，在读博士，研究方向：食 品和药物中有用成分提取与分离。
多糖各种提取方法
一、植物多糖的提取 1 溶剂提取法 1．1 水提法 水对植物组织的穿透力强，提取效率高，在生产上使用安全、经济。用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提。一般植物多糖提取采用热水浸提法，该法所得多糖提取液可直接或离心除去小溶物；或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质，沉淀提纯多糖；但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同，它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离；还可按多糖不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离；其中，以乙醇沉淀最为普遍。但以根茎为主的植物体,细胞壁多糖含量高,热水直接提取率不高。此时为破坏细胞壁,增加多糖的溶出，有两种处理方法:一为酶解,二为弱碱溶解。 1．2酸碱提法 有些多糖适合用稀酸提取，并且能得到更高的提取率。但酸提法只在一些特定的植物多糖提取中占有优势，目前报道的并不多。而且即使有优势，在操作上还应严格控制酸度，因为酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂。 有些多糖在碱液中有更高的提取率，尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。采用的稀碱多位为0．1mol／L氢氧化钠、氢氧化钾，为防止多糖降解，常通以氮气或加入硼氢化钠或硼氢化钾。同样，碱提优势也是因多糖类的不同而异。与
酸提类似，碱提中碱的浓度也应得到有效控制，因为有些多糖在碱性较强时会水解。另外，稀酸、稀碱提取液应迅速中和或迅速透析，浓缩与醇析而获得多糖沉淀。
1．4 生物酶提取法 酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术，在多糖的提取过程中，使用酶可降低提取条件，在比较温和的条件中分解植物组织，加速多糖的释放或提取。此外，使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等的产物，常用的酶有蛋白酶，纤维素酶，果胶酶等。 1．5 超声提取法 超声波是一种高频率的机械波，其主要原理是利用超声波产生的“空化作用”对细胞膜的破坏，有利用植物有效成分的释放，而且超声波能形成强大的冲击波或高速射流，有效地减小、消除与水相之间的阻滞层，加大了传质效率，有助于溶质的扩散。另外，超声波的热效应使水温基本在57℃，对原料有水浴作用。超声波提取与传统的提取方法相比，有提取效率高、时间短、耗能低等优点。超声提取的影响因素有：超声时间、超声频率（一般低频中提取效率高，但也有例外）、料液比和温度等。 1．6 微波提取 微波是频率介于300MHz和300GHz之间的非电离电磁波，微波提取的原理是微射线辐射于溶剂并透过细胞壁到达细胞内部，由于溶剂及细胞液吸收微波能细胞内部温度升高，压力增大，当压力超过细胞壁的承受能力时，细胞壁破裂，位于细胞内部的有效成份从细胞中释放出来，传递转移到溶剂周围被溶剂溶解。微波技术应用于植物细胞破壁，有效地提高了收率。具有穿透力强、选择性高、加