香菇菌种生产的方法与步骤

香菇菌种生产的方法与步骤

(一)母种生产培养基的配方选择

一是马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基(PDA)：去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂16~23克，水1 000毫升。氢离子浓度1 000~10000纳摩／升(pH5~6)，用于分离、培养菌种。

二是PDA改良培养基(甲)：马铃薯(去皮)200克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾(KH2PO4)2克，硫酸镁(MgSO4)0．5克，维生素B110毫克，琼脂20克，水1000毫升，灭菌后氢离子浓度3163～10000纳摩／升(pH5．0～5．5)，用于培养、分离菌种。

三是PDA改良培养基(乙)：马铃薯(去皮)200克，麸皮或米糠50克，硫酸镁0.5克，维生素B110毫克，琼脂20克，灭菌后氢离子浓度3163～3981纳摩／升(pH5．4～5．5)。

四是PDA改良培养基(丙)：心材木200克，细米糠(或麸皮)100克，硫酸铵1克，麦芽糖(或葡萄糖)20克，琼脂20克，水1 000毫升，灭菌后氢离子浓度3163～10000纳摩／升

(pH5.0～5.5)，用于分离菌种。

五是麦芽浸膏、酵母浸膏、琼脂培养基(MYD)：麦芽浸膏3克，葡萄糖10克，酵母浸膏3克，琼脂20克，蛋白胨5克，水1 000毫升(用于菌种培养)。

六是麦芽浸膏、蛋白胨培养基(MPA)：麦芽浸膏20～25克，蛋白胨10克，琼脂20克，水1 000毫升(用于分离、培养、保存菌种)。

上述6个培养基配方中，马铃薯、葡萄糖、琼脂(PDA)配方应用最普遍。在此着重介绍PDA培养基的配制方法与步骤：

1．制备培养基的操作程序

选择优质马铃薯，去皮或挖去发芽眼，削去发青皮，切成薄片，称取200克，置于钢精锅，加水1 000毫升，煮沸后小火保持30分钟，趁热用8层纱布过滤后放人有1 000毫升刻度的量杯(或量筒)中，补充水到1 000毫升，倒回钢精锅，加琼脂继续加热，待琼脂溶化后，再加葡萄糖，再补水至1000毫升，用玻璃棒搅均匀，趁热分装试管，或装入三角瓶备用。

2．分装试管

将配制好的PDA培养基，趁热(60℃)倒人事先准备好的量杯或玻璃漏斗，分装试管。每支试管装培养基为管长的1／4，培养液不可贴附管口内壁，如有沾附物必须揩拭干净。

3．做棉塞

取适量棉花做成较紧实的棉塞，塞入试管约2厘米左右，外留1厘米，紧贴试管内壁，松紧度

以用手指提起棉塞而不脱掉为宜，光圆不起皱(如图3—1)，尔后将试管放入铁丝筐内。

4．灭菌

将装有培养基的试管放人灭菌锅的铁丝筐内，上面盖上牛皮纸或聚丙烯塑料薄膜，包扎好，以防棉塞受潮。加热灭菌时，排尽锅内的冷气，当温度升到121℃时，维持30分钟后停止加热。待指针回到零点，先打开锅盖的1／10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出试管。

5．在斜面上摆放试管

将取出的试管冷却到50～60℃后，放到用木架或木条摆成一定角度的斜面上，小试管斜面长2厘米，大试管(18×200)斜面长6厘米左右。待完全凝固后，收取备用。

6．灭菌效果检查

随机取3管斜面，放在28℃下进行空白培养5～7天后，检查斜面上有无细菌和霉菌菌落。如果发现有杂菌，说明灭菌不彻底，要重新灭菌。

(二)接种与培养

1．接种

在无菌室(接种室)或接种箱内，酒精灯火焰旁进行无菌操作。具体程序如下：左手拿菌种管和待接种的斜面试管，右手拿接种耙，在火焰上来回烧红，拔去菌种管的棉塞，将管口在火焰上烧一下，再把接种耙烧一下，迅速插入种管，稍加冷却，切取米粒大小菌丝块(一定要带培养基)，迅速放入待接种管斜面中心位置(为争取时间，在斜面接两点以上为宜)，拿出接种耙后，再把管口烘烤一下，烧一下棉塞，迅速塞好棉塞，灼烧一下接种耙。到此即完成了一个接种程序，以下依此类推。

2．培养

将接种后的试管，放入培养箱或培养室进行恒温培养(25℃±1℃)，或利用适宜的自然气温培养。要保证培养室空气新鲜，环境干净，无光或弱光。为此，必须保持空气相对湿度

70％左右，在试管上盖上纱布，或盖上薄棉毯，拉上窗帘，形成无光培养。因试管斜面长短不同，一般需经8～14天培养，才能长满试管斜面。

(三)母种质量检查及提高纯度对策

1．斜面优质菌丝形态

在马铃薯、葡萄糖、琼脂(PDA)培养基斜面上，菌丝生长洁白，呈棉绒状，密度一致，前沿菌丝(先端)整齐，粗壮。有的棉绒状菌丝发达，如苏香1号，Cr-02；有的棉绒状菌丝不发达，如271A，271B，早生一号。后者比前者菌丝生长快，但菌龄较长。

2．斜面菌丝不纯现象

在斜面上菌丝灰白，棉毛菌丝不平坦不整齐，前沿菌丝不齐、有缺口，这说明有杂菌污染。如斜面上有异色，可能是镰刀菌污染。如斜面上特别是菌丝边缘出现粘稠状物即蜡状、油状，可能是细菌污染。如斜面上呈黄、绿、黑等颜色，则可肯定是霉菌污染。若斜面产生色素，也表明有杂菌污染。将斜面对着光看背面，如有小黑点遮光，说明杂菌菌落被香菇菌丝覆盖了。

3．提高香菇母种纯度的措施

必须使培养基彻底灭菌，严格无菌操作，保持培养环境干燥、清洁、恒温、无光、空气流畅，从而保证菌丝健壮生长。如发现母种有异常现象，应予剔除。

二、原种生产与质量标准及保证对策

原种和栽培种的培养料配方制作技术基本相同，只是装料容器大小不同。因此，本节只介绍原种生产技术，栽培种生产技术在相关章节中介绍。

(一)培养料配方选择

共有7个配方可供选择，前3个为常用配方，后4个为参考配方。①木屑78％，麸皮(或米糠)20％，蔗糖1％，石膏1％。②木屑63％，棉籽壳20％，麸皮15％，蔗糖1％，石膏

1％。⑧木屑60％，蔗渣18 %，麸皮20％，蔗糖1％，石膏1％。④稻草(麦草)58 %，砻糠30％，木屑10%，糖1％，石膏1％。⑤发酵松树、杉树木屑50％，木屑28％，麸皮20％，糖1％，石膏1％。⑥棉籽壳40％，木屑40％，麸皮18 %，糖1％，石膏1％。⑦花生壳80％，杂木屑19％，石膏1％。

上述7个配方都要求含水量在60％左右，氢离子浓度(pH值)随自然情况。配方中各原料一般在3个月前备好。

(二)培养料配制的方法和步骤

1．时间安排

春、秋、冬季节皆可，晴天或阴天配料装瓶最为理想。夏天宜在每天早、晚配料装瓶，应在4小时内装好瓶。

2．生产组织

使用一台机器，由6人操作。其中1人向斗内铲料，1人装瓶，1人洗瓶，2人做棉塞，1人运输。

3．配料前的木屑处理

首先过筛(2～3目)，用竹筛或铁筛皆可，筛除掉有棱角的木块、木条、木片等硬物。然后，按照生产

计划和配方成分(百分率)，称好主料、辅料和添加剂。接着，将各种原料混合拌匀，有机器用机器拌，无机器用人工来回拌3～4次。最后，再加入适量的水，继续用机器拌3分钟或用人工拌3～4次。对出现的团块一定要拍散，或用铁筛过筛。

在配料过程中，需灵活掌握以下3点：

(1)灵活掌握含水量：对干料、细料、质松料，加水宜多一些；对粒硬、吸水差的料，加水宜少一些。在晴天、高温、秋千天气而水蒸发量较大时，加水宜多些；在阴雨、空气偏湿而水不易蒸发时，则加水宜少一些。在水泥场地拌料，加水可少一些；在干泥渗水场地拌料，加水宜多一些。在高海拔地区，加水宜多一些

(2)拌料要均匀：要做到主料、辅料、添加剂均匀，干湿均匀，酸碱度均匀，不结块。

(3)操作要敏捷快速：在气温28℃，如拌料灭菌时间过长，则料易变酸，接种后轻则发菌慢，重则不发菌，而且易使杂菌病毒发生。因此，必须根据机械化水平和劳动者的技术熟练程度，安排好每日的生产量，保证适时快速装袋(瓶)，及时灭菌。在高温期间从拌料到灭菌，不能超过4小时；在低温期间从拌料到灭菌，要求不过夜。

(4)搞好环境卫生：选用的原材料要无霉变，配料前要曝晒，拌料装瓶环境要清洁，尽量减少空气中的杂菌孢子率。

(三)装瓶(袋)

使用机器装瓶，平均每人每日可装720多瓶。具体操作程序如下：装料至瓶颈，清洁瓶口，用小木棒或试管将料压实，并呈凹式，将瓶口内外壁洗净。

(四)做好棉塞

取一块完整而略大于掌心的棉絮，其大小厚薄正好适合瓶口的大小长短，平摊在左掌心，右手捏住棉絮边缘往内卷成圆形，尔后用右手的拇指和中指相对捏住棉絮，接着用左手的

拇指和食指也相对捏住棉絮，再用右手趁势捏成棉球，塞人管口或瓶口2／3处。

(五)灭菌

常用的高压灭菌锅分为立式或卧式两种。在高度密封的高压锅内，通入高压蒸气，达到彻底灭菌的方法，称为高压蒸气灭菌，又叫湿热灭菌。原种和栽培种的培养料，由于不易被

蒸气穿透，灭菌时必须在150千帕即1．5千克／厘米2。条件下灭菌2.0～2.5小时。在灭菌的全过程中，要严格操作规程，并注意掌握3点：①料瓶和料袋排放密度要适当，使蒸气流畅，无死角。②通蒸气前，检查安全阀是否灵活，有无故障。③通蒸气后，打开排气阀，驱散锅内冷空气(自身发生蒸气的高压锅应加足水)，或关上排气阀，接通蒸气。待压力升至0.5千克／厘米。时，开阀放气。待指针回到0位时，保持5分钟，再关上排气阀。等压力升到1.5千克／厘米。时，灭菌2.0～2.5小时。然后让其自然冷却，当压力指针回到0位时，打开锅盖或门的1／4开度，继续让热烘烤棉塞，防止骤冷。

接着趁热取出料瓶(袋)，送入清洁消毒过的冷却室。

也可以用常压灭菌法，常用的是灭菌灶或灭菌箱。以低压蒸气进行灭菌的方法，称为常压蒸气灭菌法。这种灭菌法投资省，可自行建造，取材容易，成本低廉，适用于农村。缺点是灭菌时间长，能耗大。常压灭菌法的具体操作程序是：①当点火发生蒸气时，打开放气阀排出冷空气，直至见到放出的直冲蒸气后，再排气5分钟，接着关上阀门，待气温升到100~102℃时，开始计时，连续保持8小时以上。②料瓶叠放，瓶颈朝内，瓶底朝外。料袋按品字形叠放，以求压力平衡。行间要留有间隙。③点火前，将铁锅内加足水。在灭菌的全过程中要注意铁锅内的水位，保持通水流畅，且水温较高。④在灭菌的全过程中，火力应按猛攻→恒温→徐降的程序掌握。即开始升温火力宜猛，尽快达到100℃，防止升温缓慢，时间过长，引起原料变酸。当温度升到100℃时，要保持温度不变，不能时高时低，以免影响灭菌效果。当到达灭菌时间后，让仓(膛)内温度缓缓降低，直降至60℃，方可开门取物。

(六)冷却接种①接种前必须使料瓶(袋)冷却到适宜温度，防止高温接种热死种菌。接种前半小时，将原种瓶、接种工具及用品放入接种箱(或接种室)，然后用5 %石炭酸液向上下周壁喷雾消毒，并开启紫外线灯照射灭菌半小时。启用久停不用的接种箱(室)，事先必须用高锰酸钾和甲醛薰蒸处理。

②接种时，操作人员进入接种室前，先用肥皂洗手，换工作服，戴上口罩和工作帽，穿上工作鞋，手在1％～2％来苏儿液或0.25％新洁尔灭液中浸泡2分钟。尔后，用5％石炭酸液，对接种室上下及四壁、工作台、凳等喷雾消毒，边喷边后退到缓冲室，关上接种室的门。待5分钟后，将菌种带入室内进行接种操作。

③接种前1分钟，用75％酒精擦手，严格无菌操作(同母种无菌操作法)，要求有序不乱，操作敏捷快速，减少室内空气流动。接种时，将种管用脱脂棉蘸上75％酒精，进行种管外壁消毒。接着，拔取棉塞，用火焰烧一下管口(或瓶口)，把烧过的接种耙迅速插入种管内冷却。尔后将斜面前端1厘米长的菌丝块挖去，剩余斜面分成4～6段，分别取出接人原种瓶的穴位中心。一管母种可接4～6瓶原种。

(七)接种结束后的工作

接种完成后，立即将台面收拾干净，将各种剩余物，如种管、洒落的培养基、消毒用过的棉花等均拿出室外，照前述方法进行第二轮接种前处理。

(八)培养管理

第一，对培养室必须进行清洗、消毒处理后，方可使用。

第二，将接种后的原种瓶(袋)搬人培养室，保持温度在24±1℃，调节空气湿度在70％左右。垂吊黑色窗帘，进行无光培养。待菌丝吃料1／5后，加强通风换气，保持室内空气新鲜。一般培养40～50天，菌丝即可长满种瓶(250毫升瓶装)。

第三，培养期间可能出现的异常现象：一是在原种瓶内的不同部位滋生杂菌。二是菌种块不萌发。三是菌丝不吃料。

第四，异常现象发生原因及防治对策：

一是由于棉花塞受潮，易滋生粉红链孢霉菌。瓶周壁发生分散杂菌落，可能是瓶子破裂，也可能是灭菌有死角。若到处有杂菌发生，肯定是灭菌不彻底，应重新灭菌。少数原种瓶发

生杂菌，应及时清除。接种块四周发生杂菌，是接种工具消毒灭菌不严或空气污染造成的。种块滋生杂菌，可能是母种块带杂菌，或接种工具烧灼灭菌不严。发现上述杂菌危害后，必须密切注视，及早清除，以防蔓延。大批发生杂菌感染，应及早重新彻底灭菌，重新接种，不可延误。

二是种块不萌发的原因很多，主要有以下几种情况：接种工具烧灼后未冷却就挖取菌丝块，菌丝被烫死；菌丝被火焰烧死；母种干涸老化，失去萌发力；消毒熏蒸过头，使菌丝受毒害；培养温度不适宜。针对上述情况，可采取如下防治对策：加强计划性，培养适龄母种，不用老化母种，以提高萌发力；熏蒸消毒要适量，避免过量，防止将菌丝杀死；接种工具烧灼后，冷透后方可取种菌丝；菌丝离火焰稍远一些，以防烧死菌丝。

三是菌丝种块虽能萌发，但不吃料，其原因主要是：接种块与培养料结合不紧密；培养料含水偏少；培养料中有抑制菌物存在，使菌丝不能生长；培养室控温失灵，高温热死菌丝。针对上述情况，可采取如下防治对策：接入种块时，应将种块向料内揿一下，使其与培养料紧密结合；坚持随拌料，随装瓶，及时灭菌，防止培养料变酸；购买木屑要严格选择，不要购买有抑制菌丝生长的木屑；时常检查温控是否失灵，发现问题及时修理，以防高温烧死菌丝；配料时不要随意添加或过量添加有害物质，以防菌丝生长受到抑制。

(九)原种的质量标准

1．优良原种的主要标准

从外观看，菌丝浓白呈棉绒状，木屑培养料变为淡黄色，菌丝粗壮，双核有锁状联合，菌丝长满瓶后10天左右表面分泌褐色水珠，有少量菌丝扭结或有原基出现，或菌丝将培养料包成块状(结合相当牢)。这种原种应视为良种，无疑可用于生产。

2．劣势原种的主要表现

菌丝表面出现拮抗线，菌丝纤细，生长速度缓慢，单核无锁状联合，菌丝脱壁、萎缩、发黄、老化，这种原种不能用于生产，更不能用于转接生产种(或再生原种)。受热害后，恢复生长原种，可以用于生产。

香菇菌种质量退化现象及预防

一、菌种质量检验及标准

菌种质量的优劣，直接关系到栽培的成败及香菇的品质。菌种质量检查主要包括两个方面：一是菌株纯度识别；二是菌种质量优劣识别。

(一)菌种质量标准

一个好的菌种，应具备自身的质量标准，包括标名、菌丝形态、菌丝长势、菌丝纯度、特种香

味等主要指标。

1．标名

相当于商品的标牌。菌种生产单位应在种管(瓶)上标明名称、编号、温型、接种日期，购买者亦应检查有无标名。

2．纯度

一是指菌株菌丝的纯度；二是指杂菌污染程度。菌株的纯度通过培养菌丝形态特征来识别。在多级(一、二级)菌种培养基中，凡是发现有其他生物体存在，都可认为是菌种不纯，这种菌种不可使用。反之，在多级菌种培养基中，只有香菇菌株生长，无其他生物体存在，则认为是高纯，可以用于生产。

3．香味

当打开棉塞(或其他包扎物)闻到有独特的芳香味，而无异味，应认为是优良菌种。反之，当打开棉塞闻到霉味，这是霉菌滋生感染；如有恶心味，并在培养基边缘和管壁交界处出现

淡黄色或乳白色糊状物，这是细菌感染，均应淘汰。

4．长势

是指菌丝形态正常，生长旺盛，而无抑制线、无吐水、无萎缩现象。优良菌丝生长形态呈绒毛状，浓密，粗壮，均匀齐整，生长速度快，分解培养料能力强，出菇快，出菇适时，出菇多，转潮快，产量高。反之，生活力差的菌株，菌丝生长缓慢，分解培养料能力弱，出菇迟，产量低。

5．活力

从原种瓶(袋)中随机挖取一块菌种，感觉到有韧性，不松散，培养料呈淡黄色。将样块置于新的培养基上，在29℃±1℃下培养，观察菌种块四周新菌丝萌发快慢。萌发快者可使

用，恢复活力差者不宜采用。

(二)菌种质量检验方法

在生产中通过直接观察和出菇试验，判断菌种优劣，确定其能否使用。

1．直接观察

不管是自己选育还是引进的菌株，都必须仔细观察菌株的性状，如色泽、味道、长势，活力恢复，生长速度及均匀度等，并确认有无其他生物体存在。

2．显徽镜检查

选取小量菌丝制片，观察菌丝有无分枝、有无细胞横隔、有无锁状联合及其他细胞结构特征，

这些均与出菇多少有关。

3．菌丝生长速度测量

在一般情况下，用斜面或平板培养菌株，测量菌丝生长速度，要求菌丝表面平坦，扩殖均匀，菌丝前沿整齐。

4．耐高温试验

菌株经斜面培养l周后，分出1组试管置于30～33℃下培养24小时，再放回适温下培养，观察菌株的生活力和适应环境变化的能力。

5．吃料能力观察

将菌株接人最佳原种培养料中，适温培养1周后，观察接种块菌丝萌发和吃料的情况。这种方法也是选择培养料配方的一种手段。

6．出菇试验

这是选择优良菌株最基本的方法，即菌株用于生产前，必须作出菇试验。可采用瓶(袋)栽培的方法作出菇试验，以当家菌株为对照，每个菌株栽培的瓶(袋)不少于10个，最好50

个。在试验过程中，观察记载某菌株的出菇期、出菇数量、菇形大小、肉质厚薄、菌柄长短及菌盖颜色等，最后进行产量和质量分析。

(三)母种原种质量标志

1．母种

采用马铃薯、葡萄糖、琼脂(PDA)培养基，在斜面25℃培养10~14天后进行观察。优良母种的质量标志是：菌丝长满斜面，略有爬壁现象，菌丝洁白，有光泽，粗壮，分枝多，生长浓密，呈绒毛状，平坦，紧贴管壁；培养基含水量适宜，不干缩，不黄化；转接到新培养基上，萌发吃料快，长势又快又旺。早熟菌株存放时间长会形成原基，因此必须掌握适龄使用，避免原基形成。

2．原种

优良原种的质量标志是：菌丝长满瓶后，菌丝洁白，粗壮浓密，生长均匀，有光泽，香味浓郁；培养35~45天后，表面菌丝(即绒毛菌丝)生长旺盛，菌丝分泌棕褐色水珠，培养料变为淡黄色，且不松散，有一定弹性，菌丝聚集成白色小棉球，在此以前使用最好。如果菌丝与瓶壁脱离、萎缩，产生较厚的褐色菌膜，说明菌种已老化，要尽快使用，并去掉老化膜，取用中间菌种块。如木屑培养料未变黄，说明培养时间短，可继续培养一段时间，尔后再使用。

二、菌种退化现象及预防

(一)菌株退化现象

在生物的进化过程中，遗传性变异是绝对的，而稳定性却是相对的；退化性变异是大量的，而进化性变异却是个别的。因此，优良菌株种性不是永恒的，而是变化的。

1．现象

在菌株用于生产及保藏过程中，常常出现菌株渐渐丧失原来的生活力和丰产性状，如长势差了、出菇迟了、产量低了、质量劣了等现象，这通常可以认为是菌株退化了。具体地说，

菌株退化的主要表现是：菌丝生长速度慢，在培养基上出现白色浓密的扇形菌落，对不良的外界环境抵抗力弱，子实体提前形成或推迟，出菇潮次不明显，菌盖菌柄畸形多，产量下降，品质变劣。

2．原因①菌株种性不稳，多为杂合性，细胞核杂合，遗传上出现分离变异，丧失原有的某些种性。②培养条件不适宜，长期在人工培养条件下不能满足野性要求，失去自我调节能力，失去正常生理功能，不能表现出优良性状。③就某菌株而言，随着培养和使用时间的延长，个体菌龄越来越大，新陈代谢机能逐渐减退，失去抗逆能力或高产性能，严重者丧失使用价值。④菌株被病毒寄生。香菇菌株退化与感染病毒的症状类似，即菌丝长势减弱，分解培养料的能力下降，导致畸形菇增多，产量及质量下降。据研究，不正常菌丝体内分离出4纳米(nm)的球状病毒颗粒，而正常菌株菌丝内没有发现这种病毒颗粒。这一结果表明，香菇感染病毒后，菌丝体内的代谢活力受到严重抑制，分解木质素、纤维素和半纤维素能力下降，致使出现菌丝生长速度转慢、形态失常和退化等典型病毒感染症状。因此，可以认为病毒感染的菌丝症状，是菌株退化的一种主要表现。

(二)菌株退化的预防

将表现出退化的菌株进行种性恢复的技术过程，称为复壮，这是预防菌株退化的主要途径。

1．控制传代次数

菌株退化是一个渐变过程。为了减缓或预防这种渐变的发生，应控制传代次数，最好保持传代1～3次为好。

2．更换培养基营养成分

在生产中长期使用一种培养基，常会引起退化。因此要注意变换培养基的营养成分和配方，最好让菌株回到适宜树种段木或适宜树种木块上培养，并给予适宜的环境条件，这样可

以增强菌株生活力和丰产性状。

3．选用适当的分离方法

即利用有性繁殖的方法获得菌株，再以无性繁殖方法保持其优良性状，使菌株的变异遗传朝着生产需要的方向发展。

4．控制病毒侵染途径

科学研究认为，病毒是通过菌丝融合而传播，控制有性杂交过程是防止病毒侵染的主要方法。因此，可采用酶标免疫技术、单克隆抗体技术或DNA探针技术，检测香菇菌株是否感染病毒，对香菇菌株退化进行监测和预防。

香菇菌种生产的方法与步骤

香菇菌种生产的方法与步骤 (一)母种生产培养基的配方选择 一是马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基(PDA)：去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂16~23克，水1 000毫升。氢离子浓度1 000~10000纳摩／升(pH5~6)，用于分离、培养菌种。 二是PDA改良培养基(甲)：马铃薯(去皮)200克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾(KH2PO4)2克，硫酸镁(MgSO4)0．5克，维生素B110毫克，琼脂20克，水1000毫升，灭菌后氢离子浓度3163～10000纳摩／升(pH5．0～5．5)，用于培养、分离菌种。 三是PDA改良培养基(乙)：马铃薯(去皮)200克，麸皮或米糠50克，硫酸镁0.5克，维生素B110毫克，琼脂20克，灭菌后氢离子浓度3163～3981纳摩／升(pH5．4～5．5)。 四是PDA改良培养基(丙)：心材木200克，细米糠(或麸皮)100克，硫酸铵1克，麦芽糖(或葡萄糖)20克，琼脂20克，水1 000毫升，灭菌后氢离子浓度3163～10000纳摩／升 (pH5.0～5.5)，用于分离菌种。 五是麦芽浸膏、酵母浸膏、琼脂培养基(MYD)：麦芽浸膏3克，葡萄糖10克，酵母浸膏3克，琼脂20克，蛋白胨5克，水1 000毫升(用于菌种培养)。 六是麦芽浸膏、蛋白胨培养基(MPA)：麦芽浸膏20～25克，蛋白胨10克，琼脂20克，水1 000毫升(用于分离、培养、保存菌种)。 上述6个培养基配方中，马铃薯、葡萄糖、琼脂(PDA)配方应用最普遍。在此着重介绍PDA培养基的配制方法与步骤： 1．制备培养基的操作程序 选择优质马铃薯，去皮或挖去发芽眼，削去发青皮，切成薄片，称取200克，置于钢精锅，加水1 000毫升，煮沸后小火保持30分钟，趁热用8层纱布过滤后放人有1 000毫升刻度的量杯(或量筒)中，补充水到1 000毫升，倒回钢精锅，加琼脂继续加热，待琼脂溶化后，再加葡萄糖，再补水至1000毫升，用玻璃棒搅均匀，趁热分装试管，或装入三角瓶备用。 2．分装试管 将配制好的PDA培养基，趁热(60℃)倒人事先准备好的量杯或玻璃漏斗，分装试管。每支试管装培养基为管长的1／4，培养液不可贴附管口内壁，如有沾附物必须揩拭干净。 3．做棉塞 取适量棉花做成较紧实的棉塞，塞入试管约2厘米左右，外留1厘米，紧贴试管内壁，松紧度

有机香菇的操作规程

一香菇生产技术规程 1范围 本部分规定了南漳县民益香菇种植专业合作社有机段木香菇栽培的术语和定义、栽培场地、菌棒生产、田间管理、病虫害防治等管理过程。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB3095 环境空气质量标准 GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB/T19630.1、3、4-2011 有机产品国家标准 3 术语和定义 椴木香菇栽培 将直径在10cm左右花栎木截成1.2米的木段，每木段打孔48-50个接种香菇后，放置于室内或林下进行香菇种植的模式。 4 栽培场地 4.1 场地选择 灌溉水质、环境空气质量应符合GB/T19630的要求，东西方向长，南北方面窄，排灌方便。 4.2 场地整理 平整场地，清除杂物，修建蓄水池，安装喷灌设施；栽培场的周围开挖排水沟，沟宽×沟深以30cm×50cm为宜。 4.3 菇场设备 干湿温度计、水管、抽水装置、打孔钻。 4.4 菇棚 4.4.1 椴木香菇人字架栽培 荫棚高3m-4M，东西走向；椴木前期平放于地面，放置3-4层，操作道0.6m～0.7m，层宽0.45m（单边操作）～0.9m（双边操作），遮荫度50%～80%，后期通过搭人字架震动菌丝出菇。 5 生产季节安排

6 菌棒生产 6.1 菌棒 6.1.1菌棒来源 自具有林业部门颁发的砍伐证的农户和木材商人处收购椴木，在厂区加工成1.2米的木段。 所有椴木均应来自未受到有机农业禁用物质污染的林区。 椴木来源周边1000米内应当没有常规农业生产区域。 收购前，应向提供椴木方说明企业对椴木的要求，不合适的椴木不应收购。6.1.2菌棒生产工艺流程 备料（栎木段）打孔→接种→养菌→培养管理。 6.2 备料：选取10-20CM直径的栎木段，切成1.2米长得木段。 6.3 打孔 在段木上勇打孔机打孔，每段木头48-50个孔。 6.4 接种 将栽培菌种接种在段木孔里，然后用木片盖住菌口。 6.5. 养菌 将接种好的木头段子整齐堆放在基地空地上，这样养菌。 6.6 培养管理 6.9.1 培养场所使用前应进行地面采用生石灰消毒。22℃～25℃的气温条件下，每1000段菌棒必须拥有20m2以上培养面积。气温30℃以上时，应采取有效的降温措施。 6.9.2 将养好的菌棒人字架叠起，自然长菌出菇。 7病虫害综合防治 7.1 防治原则 遵循“预防为主、综合治理”的方针，综合运用各种防治措施，将各类病虫害控 制在允许的经济阈值以下。 7.2 农业防治 ——选用抗病虫性好、抗逆性强、适应性好的菌种。 ——采用科学的培养料配方。 ——适时栽培。 ——科学管理。 7.3 物理防治 7.3.2 菇棚周围做好排水沟，搞好菇棚及周围环境卫生。

食用菌栽培技术汇总

食用菌栽培技术——香菇 一、概述 香菇又名香蕈、香信、香菰、椎茸，属担子菌纲伞菌目侧耳科香菇属。香菇的人工栽培在我国已有800多年的历史，长期以来栽培香菇都用“砍花法”，是一种自然接种的段木栽培法。一直到了60年代中期才开始培育纯菌种，改用人工接种的段木栽培法。70年代中期出现了代料压块栽培法，后又发展为塑料袋栽培法，产量显著增加。我国目前已是世界上香菇 生产的第一大国。 香菇是著名的食药兼用菌，其香味浓郁，营养丰富，含有18种氨基酸，7种为人体所必需。所含麦角甾醇，可转变为维生素D，有增强人体抗疾病和预防感冒的功效；香菇多糖有抗肿瘤作用；腺嘌呤和胆碱可预防肝硬化和血管硬化；酪氨酸氧化酶有降低血压的功效；双链核糖核酸可诱导干扰素产生，有抗病毒作用。民间将香菇用于解毒，益胃气和治风破血。 香菇是我国传统的出口特产品之一，其一级品为花菇。 二、生物学特性 1.形态特征 香菇菌丝白色，绒毛状，具横隔和分枝，多锁状联合，成熟后扭结成网状，老化后形成褐色菌膜。子实体中等大至稍大。菌盖直径5～12厘米，扁半球形，边缘内卷，成熟后渐平展，深褐色至深肉桂色，有深色鳞片。菌肉厚，白色。菌褶白色，密，弯生，不等长。菌柄中生至偏生，白色，内实，常弯曲，长3～8厘米，粗0.5～1.5厘米；中部着生菌环，窄，易 破碎消失；环以下有纤维状白色鳞片。孢子椭圆形，无色，光滑。 2.生活条件 (1)营养 香菇是木生菌，以纤维素、半纤维素、木质素、果胶质、淀粉等作为生长发育的碳源，但要经过相应的酶分解为单糖后才能吸收利用。香菇以多种有机氮和无机氮作为氮源，小分子的氨基酸、尿素、铵等可以直接吸收，大分子的蛋白质、蛋白胨就需降解后吸收。香菇菌丝生长还需要多种矿质元素，以磷、钾、镁最为重要。香菇也需要生长素，包括多种维生素、核酸和激素，这些多数能自我满足，只有维生素B1需补充。 (2)温度 香菇菌丝生长的最适温度为23～25℃，低于10℃或高于30℃则有碍其生长。子实体形成的适宜温度为10～20℃，并要求有大于10℃的昼夜温差。目前生产中使用的香菇品种有高温型、中温型、低温型三种温度类型，其出菇适温高温型为15～25℃，中温型为7～20℃，低温型为5～15℃。 (3)水分 香菇所需的水分包括两方面，一是培养基内的含水量，二是空气湿度，其适宜量因代料栽培与段木栽培方式的不同而有所区别。 ①代料栽培。长菌丝阶段培养料含水量为55%～60%，空气相对湿度为60%～70%；出菇阶段培养料含水量为40%～68%，空气相对湿度85%～90%。 ②段木栽培。长菌丝阶段培养料含水量为45%～50%，空气相对湿度为60%～70%；出菇阶段培养料含水量为50%～60%，空气相对湿度80%～90%。 (4)空气 香菇是好气性菌类。在香菇生长环境中，由于通气不良、二氧化碳积累过多、氧气不足，菌丝生长和子实体发育都会受到明显的抑制，这就加速了菌丝的老化，子实体易产生畸形， 也有利于杂菌的滋生。新鲜的空气是保证香菇正常生长发育的必要条件。 (5)光照 香菇菌丝的生长不需要光线，在完全黑暗的条件下菌丝生长良好，强光能抑制菌丝生长。子实体生长阶段要散射光，光线太弱，出菇少，朵小，柄细长，质量次，但直射光又对香菇

香菇的菌种制作

香菇的菌种制作 人工栽培食用菌成功的关键是菌种，只有优良的菌种才能达到优质高产。香菇菌种根据来源和生产目的分为母种(原始种称一级种)、原种(母种繁育而成称二级种)和栽培种(母种繁育用于生产栽培的种，称三级种)。 母种直接用于栽培造价高，自己生产母种需要设备和技术，成本太高。自己繁育原种和栽培种，可以减少设备投入，降低成本，并能得到优质的菌源。 1 原种制作 1.1 培养基的配制 选新鲜、干燥、无霉变硬杂木细木屑55%、麦麸20%、棉籽壳20%、玉米面3%、石膏2%、料水比1∶1.1，均匀搅拌，装入15厘米×30厘米聚乙稀原种袋。装袋松紧适宜，松装料少，紧装不透气，均影响质量和产量。 1.2 常压蒸汽灭菌 条件具备用高压锅灭菌(在0.015兆帕压力下保持2小时)。一般采用常压高温灭菌，少量可采用农村大锅蒸，要求升温快，升到100 ℃时保持12小时，闷锅8小时。假如效果不好，可换间歇式灭菌法，将料袋在蒸锅内100 ℃条件下蒸3次，每次2小时，每次之间间歇24小时，虽耗时、麻烦，但效果好。 工厂化生产，采用常压蒸汽罩灭菌。选耐高温、寿命长的塑料膜两层和一层花格布，组成一个密封的大空间，空间内摆放料袋，一次放4 500个，罩外用重物压严，以免漏气，在蒸汽罩底部放置排气管，管上用砖盖平，以免通气不匀造成死角，放气管与锅炉相连，温度上升至100 ℃时，蒸24小时，焖12小时。然后将灭菌后的料袋运至灭过菌的房间，以备接种。 1.3 接种 选通风良好的房间，将接种钩、铲、试管架放入接种箱，用必洁士或克霉灵烟雾剂对房间和接种箱消毒灭菌，经12小时烟雾自然散尽后，再开窗通风以备接种。接种前用75%酒精浸泡的毛巾或棉球擦拭手，接种工具，点燃酒精灯使火焰周围为无菌区，并将接种铲、钩和母种的试管口经火焰烧灼，待凉后立即将试管中母种切成三块，将原种料袋口解开，放入一块菌种，立即系好袋口，动作要快，接种完毕后贴上标签，将接过种的袋移至消过毒的地方。

袋料香菇栽培最新技术要点

袋料香菇高产栽培技术 一、栽培条件 (一)物质条件 1、原料：(1)各种新鲜无霉烂、无变质的阔叶树木屑和农作物秸秆，以及各种菌草等。(2)麸皮、米糠、玉米粉，新鲜、无霉变、无虫蛀均可。 2、药品：硫磺、甲醛(或气雾消毒剂)、酒精、石灰等。 3、生产用器材：塑料袋15厘米×55厘米×0.05厘米、接种钳、棉花等。 (二)设备设施条件 1、发菌室：发菌室需符合三个条件：(1)房间清洁干燥；(2)保温性能好，调温方便；（3)使用方便，环境卫生，无污染源。 2、灭菌灶：我县目前广泛使用常压灭菌灶，将3-4个油桶装上约3/4的水，作产生蒸汽的发热源，用管子将蒸汽直接通入用塑料膜紧紧包围的料袋堆内完成灭菌，每次可灭菌2500—3000筒料袋。 3、菇棚：位置应选择在通风、向阳处。菇棚按3500袋生产规模设计：菇棚用端正的竹竿或木杆搭架，菇棚长18米，宽4米，中墙高2.8米，边墙高1.7米，棚架上面盖上6丝以上厚的薄膜，薄膜上面铺草帘，在中墙上面1米高处用遮阳网搭建荫棚，荫棚落地与薄膜之间距离为0.6米。菇棚内走道宽0.8米，两边棚架为六层，中间棚架为七层，层架宽0.4米，层距0.25米，第一层距地面0.10米，菌筒间距离为3厘米。菇棚间距为3米。 二、栽前准备 袋栽香菇生产规模可大可小，要量力而行。以每个劳动力管理3000袋为宜。 一般每生产1000袋(15cm×55cm)香菇应备足下列原辅材料： 杂木屑800公斤（干木屑）或1250公斤（湿木屑），麦麸150—175公斤，糖9-10公斤，石膏粉12.5公斤，过磷酸钙0.5公斤, 香菇营养素2包。内袋1000个，外袋1000个。甲醛500毫升，高猛酸钾300毫克，新洁尔灭500毫升，酒精500毫升，或气雾消毒盒(科达、菇保)3盒，香菇栽培种17袋(13×55)，灭菌用柴700公斤，捆扎袋子的塑料绳1斤左右。 同时，事先备好常压灭菌锅(灶)、装袋机、接种箱、培养室以及拌料和接种所需的工用具等。

食用菌液体菌种生产方法

食用菌液体菌种的生产方法（发酵罐法) 传统菌种生产工艺，一般是由试管母种扩繁成二级种、三级种，生产周期长、污染率高、成本高、需大量人工、管理困难。液体菌种生产具有纯度高、活力强、繁殖快的特点，接种到培养料内有流动性好、萌发点多，发菌迅速等特种点。应用于生产与固体菌种相比有以下优点： 1．菌种生产周期短。固体种一般需25—40天，而液体种仅需3—7天。 2．接种后，萌发点多萌发点多、发菌快、出菇周期短。接种24小时菌丝布满料面，3—15天长满菌袋，一般品种10天左右可出菇。 3．接种方便、成本低。用液体菌种接种一般每袋成本是1—3分，每人每小时可接800袋以上，提高效益4—5倍。 4．适宜工厂化生产。可直接用于栽培料进行出菇，大批量生产菌袋。为食用菌集约化、标准化生产创造了条件。因此，适宜我国国情的液体菌种设备的出现，必将在食用菌生产领域引发一场新的革命。 液体菌种具有固体（颗粒）菌种无可比拟的优势，但是液体菌种生产设备是近几年刚发展起来并逐渐成熟的，因此很多人对此很陌生。在这里我们对此进行简单介绍 一、液体菌种设备基本原理 任何一种食用菌自身的生长必须满足其对温度、湿度、需氧量、养分等的需要，同时必须避免杂菌感染。在深层发酵技术上称之为选择性发酵技术，如啤酒生产技术当属此例，而白酒生产则是生物菌群发酵技术。 液体菌种发酵设备（包括四大系统，温控系统由控制器、电热管等组成；供气系统由空气压缩机、输送管道、空气过滤器等组成；冷却系统由热交换器、进出水管道组成；搅拌系统由射流器、提升管等组成。 二、液体菌种生产的关键技术 1、溶氧量 液体菌种生产中最关键的是培养液中氧的溶解量，因为在菌丝生长过程中，必须不断的吸收溶解其中的氧气来维持自身的新陈代谢，氧气在液体（水）中的溶解量与压力、温度有关，同时与培养液的接触面积、渗透压有很大的关系。因此我们设计发酵设备时有效地解决了这些问题，如安装射流器使气泡细碎度增加等。 2、空气过滤 技术的关键就是保证进入的空气无菌度高，因此必须选择孔径小、材料先进的过滤膜。一般细菌直径在0.5-5um,酵母菌在1-10um，病毒一般在20-400mu，所以选择过滤膜时应综合考虑以上因素。当然如果选的太小，成本将大幅度提高。另外环境对于空气影响很大,在空气压缩机房、制种车间必须保持环境清洁。 3、培养液 培养液是菌丝生长发育的营养源，要求营养全面均衡。不同的菌种对营养要求偏重不同。配制原料有糖、麸皮、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素、蛋白胨、土豆汁、酵母浸膏等。配置培养液时，先将土豆片、麸皮一起煮熟，将汁液滤出，后加入其它辅料混匀即可。 4、接种 培养器上端有接种口，也是装料口，将母种并瓶后加入抑菌剂，而后必须在火焰圈的保护下倒入罐体内，要求动作快、操作准确。

食用菌香菇栽培技术要点

食用菌香菇栽培技术要点 主讲人：谭新华 一、香菇菌种的制备 1、母种的培养:香菇“母种”是指利用香菇的孢子、组织（菇肉）或菇木分离培养而成的菌种。香菇母种的培养，用马铃薯和洋菜做培养基。培养基的制作配方为:去皮的马铃薯（或甘薯）200克、葡萄糖（或蔗糖）20克、洋菜20克及水1千克。按上述比例，把已去皮的马铃薯洗净切碎后，放入锅中加水适量煮沸20—30分钟，用几层纱布过滤去渣，把滤液加水至足量，再加入洋菜和葡萄糖，并加热使之融化。接着趁热分装到试管中，管口塞上棉花并束扎成捆，包上牛皮纸，立置在高压锅内，在15磅压力下维持30分钟，或放在蒸笼中蒸2—3次（每日一次，每次一小时），同样能达到灭菌的目的。将灭过菌的试管趁热斜置在桌子上，待凝固后即成。母种的培养要选择出菇早，朵形正常，菇盖厚，菇柄短胖，无病虫害，7—8厘米成熟的香菇，放入接种箱（无菌箱）或接种室（无菌室）中，用刀片刮下表皮后，取干净无菌的菇肉约一粒绿豆大，用接种针接到上述培养基上，一管一块即可。将接种后的试管置于25—27℃环境（保温室或温箱）中培养，2—3天后在接种块四周，就长出孢状的白色菌丝。（试管内如发现有绿色、黑色等杂色菌或酵母状东西，说明其中有杂菌，应把它淘汰掉。）约培养半个月后，菌丝体就布满洋菜表面，母种培养即告成功。在分离和接种时，所用工具均需经灭

菌处理。母种移到新的培养基上，进行扩大培养一般称之为“原种”。用作直接种到段木上去的菌种，一般称为栽培种。 2、栽培种的制备:目前香菇人工栽培所用的菌种，主要是木屑菌种和种木菌种二种。 ⑴制备木屑菌种的培养基配方为:适合香菇生长的各种硬质什木的干木屑7.5千克，米糠或麸皮2.2千克，蔗糖0.15千克，石膏粉0.15千克及水15千克。按上述比例，把木屑、米糠先拌匀，把蔗糖和石膏粉溶在10千克水中，然后倒入上述混合物中和匀，再将余下的5千克水加入调匀随即分装到菌种瓶中，至近瓶肩，稍压实（下部稍松，上部稍实），再用尖形木棒钻一个直达瓶底的洞孔。然后瓶口塞上棉花塞，并用牛皮纸扎起棉花塞，移到蒸茏中续蒸4—6小时（从水开算起，火要猛）、或放在高压锅中，在15磅压力下维持1小时，进行灭菌。灭菌后，取出冷却，即可用来接种。接种过程要在无菌条件下操作，用接种针挑取经过扩大培养的原种1小块，接种在上述的木屑培养基上，接种后把它放置在25—27℃环境中培养一个月左右（或20—25℃培养1—2个月），待菌丝体长满全瓶后，即可接种到段木上去。 ⑵种木菌种的制备:香菇的种木菌种，主要是三角木和圆木两种。三角木是把适合种香菇的木材加工成厚0.8厘米、宽1厘米的木条，然后再加工成三角木块（规格是:厚0.8厘米、宽1厘米、高1—1.5厘米）。圆木是先把木材横锯成1.2厘米的木片，再用皮带冲一个一个冲下来。加工出来的三角木或圆木，应立即

液体菌种培训教材(四)液体菌种的制作过程及方法

液体菌种培训教材(节选四) 2010年4月10日 三、液体菌种的制作过程及方法 （一）试管种的生产：液体菌种对试管的纯度要求很高。所以要自己会做试管种。 试管种的制作其实很简单，在我们要用种的前三个月，到市场上去看哪个菇符合要求，就买回来（也可以用自己保存的试管种均可）。在接种箱内进行常规气雾（最好是高锰酸钾和甲醛）消毒，30分钟后，开始分离。分离时先将用具消毒，然后用手把菇体分开，用镊子夹一小块菇肉（不同的菇取种位置不同），放到试管里。塞上棉塞就行了。这样的成功率一般在80%以上。在菌丝生长阶段，要经常观察菌丝的生长情况。对菌丝生长不整齐的，有污染的，全部淘汰。只留下没什么问题的，长满试管后，再取特定部位进行转管（见实操）。菌丝长到**cm时，从菌丝生长的尖端提取一小块，一般地认为，取****大小就可以了，不过从试验上看，提得**效果越好。平菇一般提二次就可以了，提到五次，基本上与脱毒菌种效果差不多。别的品种要多些，最多不超过五次，都可以达到提纯的目的。 （二）三角瓶专用母种生产：专用母种分固体和液体两种。 从生产技术上看，液体专用母种要难一些，是用电磁搅拌器或摇瓶机进行生产。整个过程要4-7天时间，生产的液体种稍经加工就可以直接使用。

液体菌种专用母种的配方就是用PDA加富配方去掉琼脂。用三角瓶盛装，在高压锅里121℃保持30分钟就行了。待三角瓶的温度降到30℃以下时，在超净工作台或接种箱内进行接种。马上就可以进行搅拌或摇瓶了。 固体种生产时间要长些，保存的时间也长，而且方便运输。固体专用母种一般污染要严重一些，有的人污染率要达到20-30左右。 固体专用母种我们现在一般不用，污染率太高，而且不好发现，最糟糕的是容易堵枪。配方是把木屑过20-40目的筛，用去掉琼脂的PDA配方拌料，在121℃高压下灭菌2小时，待温度下降到30度以下时，在超净工作台或接种箱内进行常规接种。一般20多天可以长好。具有运输和贮存方便等特点。 搅拌器是应用磁性材料N、S极的异性吸引，同性相斥的原理制成的。工作时，机械的磁转子转动时，瓶内 的磁转子在瓶内跟着转，带动液体旋转，为液体供氧。液体菌种培养基本条件是有一定的氧气、菌丝、水份和营养，几个因素溶合才能使菌丝快速繁殖。由于转子的高速旋转，产生的菌丝被剪切成菌丝片段。 摇瓶机就是通过摇动液体，使空气与水溶合，增加液体中的氧气含量。通过摇动，液体在瓶内翻滚，使菌丝滚动成菌球。 我们用液体专用母种。 （三）发酵罐生产 生产时要先进行培养料的配制。配料时先将土豆去皮切片，与麸

香菇种植技术

香菇种植技术 -标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII

香菇种植技术 一、概述： 香菇是我国特产之一，多年一直出口，我国香菇产量1999年已达100多万吨，居世界第一。香菇也是世界性消费的菇类。我国香菇多以干品销售，近年也有一定鲜品出口。 二、栽培方式、工艺和品种类型 1、栽培方式及工艺 香菇有段木栽培、人造菇木栽培和地栽三大基本方式，随着代料栽培技术的不断完善和人们保护森林意识的增强，近几年段木栽培已经很少，我国香菇主要来自代料栽培，其基本工艺为配料--分袋—灭菌—接种—发菌—出菇。 2、栽培季节 主要有春栽和秋栽两大季节，有早春播种春末夏出，春播夏出，春播秋冬出，秋播冬春出这样几大生产运作方式。 3、品种类型 香菇品种繁多，可按需要划分品种类型，可按栽培基质划分、按出菇早晚划分、按销售型式划分、按大小划分、按出菇温度划分等。 （1）、按栽培法划分。香菇可段木栽培，可代料栽培，代料又分为若干类型，为木屑、蔗渣、玉米芯、稻草等。因此，可划分为段木种、木屑种（代料种）、草料种、菌草种、段木代料两用种等五大类型。 （2）、按出菇早晚划分。按此划分可分为早生种（接种后70-80天出菇）、迟生种（接种后120天以上出菇）。

（3）、按适宜的产品型式。这主要分为干销种和鲜销种，干销种相对菇质紧密，含水量低，出干率高，适于干制；鲜销种则菇质较疏松，含水量较高。 （4）、按大小划分。可分为大叶种、中大叶种、小叶种三大类。前者菌盖多在5-15厘米，后者4-6厘米，居二者大小之中的为中大叶种。 （5）、按出菇温度划分。可分为低温种、中温种、高温种、广温种4类。 低温种：出菇的中心温度大致为5-15℃。 中温种：出菇的中心温度大致为10-20℃。 高温种：出菇的中心温度大致为15-25℃。 广温种：出菇温度范围较广，在5-28℃，但以10-20℃出菇最高，品质最好。栽培者要根据自己的实际需求选择适当品种。 三、代料栽培的主要品种 近年我国代料栽培香菇已占总产量的90%以上，段木栽培已是一种限制生产的栽培方式，因此，本文不再对段木种和栽培技术进行介绍，而只介绍代料栽培的品种。为了便于栽培者了解品种及其合理使用，本文以栽培季节介绍品种。 1、春栽迟生品种 目前，代料香菇应用的主要有241-4、庆元9015（花菇939）、花菇135三个菌株。 （1）、名称、来源和基本性状 ①、241-4香菇菌株是我国第一个大量应用于代料栽培香菇的春栽迟生型品种，从1988年始至今累计应用量约25亿袋以上。该品种由

香菇栽培技术操作规程

㈡香菇栽培技术操作规程 栽培季节与生产周期 1、接种期最佳接种期为8月20日至9月30日。以最高气温不超过28℃接种为最宜。迟 至10月份接种，每推迟10天，出菇期将推迟1个月。最佳接种期的确定，是依据当地与香菇栽培有关的日平均气温稳定通过界限温度的平均日期。 2、菌丝生长期接种后9月至11月上旬是香菇菌丝生长最佳季节，需60～70天可长满袋。 只要外界条件适宜，当菌丝长满袋，出现瘤状物后，10～15天可完成转色。如果11月上中旬完不成转色，出菇要推迟，得不到好的产量和效益。 3、出菇期只要菌丝转色及时正常，11月下旬即可出菇，春节前可收2～3茬香菇，春节 后收1～2茬香菇及1～2茬厚菇或薄菇。11月至3月正是低温干燥天气，利于培育香菇。 小棚大袋立体培育香菇技术，从接种到采收完毕，整个生产周期约9个月左右。 培养料选择与配制培养料是香菇生长发育的基础，选料是否最优、配比是否合理、掺合是否均匀、干湿度是否合适，直接影响香菇菌丝的生长和产量高低。在多种主料中，以栎树木屑为最佳，木屑粗细以米粒大小为适宜，要求无杂质、无霉变、干燥，桑枝条、苹果树枝条、棉秆等粉碎后也是较好的主料。棉籽壳也可搭配使用。常用配方是：木屑78千克，稻糠20千克,石膏粉、石灰粉各１千克，料水比1：1.6～2.0。注意水分切勿过量。拌料可用人工，也可用搅拌机，但不论什么方法，一定要拌匀。 装袋与灭菌常用宽24～25厘米、厚0.04～0.05毫米的低压聚乙烯筒料，截成55厘米长，筒料一端先用线扎紧，用火熔封，以不漏气为准。每千克可截100个左右，每个袋子可装干料2千克，每吨主料可装500个左右的袋子。搅拌均匀的培养料要立即装袋，配制好后放置时间过长会发酵变酸，影响菌丝生长。要求从开始配料到装袋结束尽量在4小时内完成。袋装的松紧要适当，以手指压稍有顶手感为适。装好后用线扎口，再折转扎1次，防止漏气。装袋过程要细心，不要刺破料袋。装好的袋约湿重4～4.5千克。袋装完后要立即装入常压灭菌灶灭菌。袋在灶内堆放要平稳，上下对直叠放，灶中间和四周要留一定的通气道。当灶内温度达100℃时维持20～24小时。注意严防烧干锅，要勤加水；防料灭不透夹生，要消灭灶内死角；防料变酸，要大火攻头，升到100℃后不能下降。灭菌完毕，当温度降至60～70℃时趁热出锅，将灭过菌的袋子移入接种室冷却。 菌丝培养期间管理 1、管理的任务菌丝培养期间的管理任务是使香菇菌种迅速萌发、定植、蔓延，在60～80天之内长满全袋，并完成转色，为出菇打下基础。 2、菌袋的堆放方式菌袋的堆放方式有顺码式和“井”字形两种。当室温低于20℃时，可堆成顺码式；室温达25℃以上时摆成“井”字形。 3、菌丝生长期环境条件的控制保持发菌室干燥，空气相对湿度控制在70％以下；调节室温在24±2℃，料温不超过28℃；注意通风换气，保持室内空气新鲜，有充足的氧气；室内黑暗，不要光线为最佳。 4、及时翻堆接种后喷洒3%甲醛，一般要密闭发菌室门窗，保持暗光，2天后打开门窗进行通气半小时。7～10天翻堆1次，使菌袋上下、内外互调位置，以使发菌一致，并检查处理污染菌袋。以后每隔10天要进行1次翻堆。 5、适时刺孔增氧接种后15～20天，接种穴菌丝伸长8～12厘米，把枝条种摇动或抽去以增氧。25天左右当菌丝圈相连时，在菌丝生长前沿1厘米内用牙签刺孔10数个，以增加袋内氧气，利于气体交换。35～40天当菌丝逐渐长满袋时，可再刺孔10数个（用毛衣针刺）。注意刺孔要结合翻堆进行，刺孔后菌丝在袋内呼吸加速，生长加快，会使袋内温度升高，要勤检查，严防“烧堆”。有时袋温比室温高5～8℃，要采取措施，通风、散堆降温。 6、排去袋内积水 50天以后菌丝发满全袋后出现一些瘤状

香菇生产技术流程

香菇生产技术流程 一、 香菇又名香蕈、香信、香菰、椎茸，属担子菌纲伞菌目侧耳科香菇属。香菇的人工栽培在我国已有800多年的历史，长期以来栽培香菇都用“砍花法”，是一种自然接种的段木栽培法。一直到了60年代中期才开始培育纯菌种，改用人工接种的段木栽培法。70年代中期出现了代料压块栽培法，后又发展为塑料袋栽培法，产量显著增加。我国目前已是世界上香菇生产的第一大国。香菇是著名的食药兼用菌，其香味浓郁，营养丰富，含有18种氨基酸，7种为人体所必需。所含麦角甾醇，可转变为维生素D，有增强人体抗疾病和预防感冒的功效；香菇多糖有抗肿瘤作用；腺嘌呤和胆碱可预防肝硬化和血管硬化；酪氨酸氧化酶有降低血压的功效；双链核糖核酸可诱导干扰素产生，有抗病毒作用。民间将香菇用于解毒，益胃气和治风破血。香菇是我国传统的出口特产品之一，其一级品为花菇。 1. 老化后形成褐色菌膜。子实体中等大至稍大。菌盖直径5～12厘米，扁半球形，边缘内卷，成熟后渐平展，深褐色至深肉桂色，有深色鳞片。菌肉厚，白色。菌褶白色，密，弯生，不等长。菌柄中生至偏生，白色，内实常弯曲，长3～8厘米，粗0.5～1.5厘米；中部着生菌环，窄， 2.(1)营养香菇是木生菌，以纤维素、半纤维素、木质素、果胶质、淀粉等作为生长发育的碳源，但要经过相应的酶分解为单糖后才能吸收利用。香菇以多种有机氮和无机氮作为氮源，小分子的氨基酸、尿素、铵等可以直接吸收，大分子的蛋白质、蛋白胨就需降解后吸收。香菇菌丝生长还需要多种矿质元素，以磷、钾、镁最为重要。香菇也需要生长素，包括多种维生素、核酸和激素，这些多数能自我满足，只有维生素B1需补充。(2)温度香菇菌丝生长的最适温度为23～25℃，低于10℃或高于30℃则有碍其生长。子实体形成的适宜温度为10～20℃，并要求有大于10℃的昼夜温差。目前生产中使用的香菇品种有高温型、中温型、低温型三种温度类型，其出菇适温高温型为15～25℃，中温型为7～20℃，低温型为5～15℃。

香菇菌种培养基及其设备制作方法与设计方案

本技术涉及一种香菇菌种培养基，其由下列组分制备而成，各组分的重量份为：土豆1822、梨树锯末2832、葡萄糖1822、琼脂2426、水11501250、硫酸镁0.40.6、破壁灵芝粉12。先将土豆刮皮切碎，然后与梨树锯末一起煮沸，过滤，滤液加热后再与其它成分混合，装入试管，灭菌即可。本技术提供的香菇菌种培养基，生产的香菇菌种纯度好、菌丝浓密、旺盛、抗病、抗杂菌能力强，污染率低于1%，营养丰富，培养出的香菇出具有普通香菇的营养外，还增加了微量元素和灵芝粉中的营养成分，提高了抗癌防癌性能，具有降脂、降糖的功能。 权利要求书 1.一种香菇菌种培养基的制备方法，其特征在于包括以下步骤：先将土豆刮皮洗净取20 克的土豆切成薄片，加入梨树锯末 30 克，梨树锯末以新鲜梨树锯为佳，加水 1200 克，沸煮3-5 分钟，冷却至 30 摄氏度，用双层纱布过滤去渣，得到溶液；加热溶液至摄氏 80度，加入葡萄糖20 克、琼脂25 克和硫酸镁0.5 克、灵芝粉1.5g, 搅拌溶解，然后将溶液分装入不同的试管中，每管中溶液占试管容积的三分之一；对装有溶液的试管进行真空摄氏138 度持续灭菌半小时，自然冷却至常温，即制得本技术的香菇菌种培养基。 技术说明书 一种香菇菌种培养基及其制备方法 技术领域 本技术涉及食用菌栽培技术，具体涉及一种香菇菌种培养基及其制备方法。

背景技术 目前，众所周知的香菇菌种培养基多数是采用一定比例的土豆、葡萄糖、琼脂、水，制成香菇菌种培养基，这就是俗称的 PDA 培养基，但是，这种栽培基容易遭受杂菌感染，易产生香菇菌丝死亡，另外，由于这种培养基缺乏香菇菌丝需要的木质素，所以香菇菌丝生长不旺盛，降低了香菇菌种的产量和品质，此外，现有的香菇菌种培养基易受杂菌感染。 技术内容 本技术提供了一种香菇菌种培养基及其制备方法。本技术的香菇菌种培养基克服了常用香菇培养基木质素含量不足的缺陷，同时具有营养丰富、不易受杂菌感染的特点。 为实现上述目的本技术采用的技术方案如下： 一种香菇菌种培养基，其特征在于，其由下列组分制备而成，各组分的重量份为： 土豆 18-22、梨树锯末 28-32、葡萄糖 18-22、琼脂 24-26、灵芝粉 1-2、水1150-1250、硫酸镁 0.4-0.6。 所述的香菇菌种培养基，其特征在于，其由下列组分制备而成，各组分的重量百分含量为： 土豆 20、梨树锯末 30、葡萄糖 20、琼脂 25、水 1200、硫酸镁 0.5、破壁灵芝粉 1.5。 所述的香菇菌种培养基的制备方法，其特征是，包括以下步骤： (1) 首先将土豆刮皮洗净，切成薄片； (2) 按配方比例称取各组分原料； （3）将称量好的土豆片、梨树锯末加水混合，并煮沸，煮沸后转小火再煮 3-5 分钟，然后停止加热，让其冷却；

食用菌液体菌种生产方法(发酵罐法)

食用菌液体菌种生产方法（发酵罐法） 传统菌种生产工艺，一般是由试管母种扩繁成二级种、三级种，生产周期长、污染率高、成本高、需大量人工、管理困难。液体菌种生产具有纯度高、活力强、繁殖快的特点，接种到培养料内有流动性好、萌发点多，发菌迅速等特种点。应用于生产与固体菌种相比有以下优点： 1．菌种生产周期短。固体种一般需25—40天，而液体种仅需3—7天。 2．接种后，萌发点多萌发点多、发菌快、出菇周期短。接种24小时菌丝布满料面，3—15天长满菌袋，一般品种10天左右可出菇。 3．接种方便、成本低。用液体菌种接种一般每袋成本是1—3分，每人每小时可接800袋以上，提高效益4—5倍。 4．适宜工厂化生产。可直接用于栽培料进行出菇，大批量生产菌袋。为食用菌集约化、标准化生产创造了条件。因此，适宜我国国情的液体菌种设备的出现，必将在食用菌生产领域引发一场新的革命。 液体菌种具有固体（颗粒）菌种无可比拟的优势，但是液体菌种生产设备是近几年刚发展起来并逐渐成熟的，因此很多人对此很陌生。在这里我们对此进行简单介绍 一、液体菌种设备基本原理 任何一种食用菌自身的生长必须满足其对温度、湿度、需氧量、养分等的需要，同时必须避免杂菌感染。在深层发酵技术上称之为选

择性发酵技术，如啤酒生产技术当属此例，而白酒生产则是生物菌群发酵技术。 液体菌种发酵设备（包括四大系统，温控系统由控制器、电热管等组成；供气系统由空气压缩机、输送管道、空气过滤器等组成；冷却系统由热交换器、进出水管道组成；搅拌系统由射流器、提升管等组成。 二、液体菌种生产的关键技术 1、溶氧量 液体菌种生产中最关键的是培养液中氧的溶解量，因为在菌丝生长过程中，必须不断的吸收溶解其中的氧气来维持自身的新陈代谢，氧气在液体（水）中的溶解量与压力、温度有关，同时与培养液的接触面积、渗透压有很大的关系。因此我们设计发酵设备时有效地解决了这些问题，如安装射流器使气泡细碎度增加等。 2、空气过滤 技术的关键就是保证进入的空气无菌度高，因此必须选择孔径小、材料先进的过滤膜。一般细菌直径在0.5-5um,酵母菌在1-10um，病毒一般在20-400mu，所以选择过滤膜时应综合考虑以上因素。当然如果选的太小，成本将大幅度提高。另外环境对于空气影响很大,在空气压缩机房、制种车间必须保持环境清洁。 3、培养液 培养液是菌丝生长发育的营养源，要求营养全面均衡。不同的菌种对营养要求偏重不同。配制原料有糖、麸皮、磷酸二氢钾、硫酸镁、

香菇菌种生产的方法与步骤

香菇菌种生产得方法与步骤 （一)母种生产培养基得配方选择 一就是马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基（PDA):去皮马铃薯20０克,葡萄糖2０克，琼脂16～2３克，水1 0０0毫升。氢离子浓度１０00~10000纳摩/升(pH５~6),用于分离、培养菌种。 二就是PＤA改良培养基（甲):马铃薯（去皮)20０克,葡萄糖20克,磷酸二氢钾(KH2PＯ4)2克,硫酸镁(ＭｇSＯ4）0.5克,维生素Ｂ11０毫克,琼脂20克，水10００毫升，灭菌后氢离子浓度31６３～10000纳摩／升（pH5。0~５。5),用于培养、分离菌种。 三就是PDA改良培养基(乙)：马铃薯（去皮）2００克,麸皮或米糠50克，硫酸镁０。５克,维生素B１10毫克,琼脂20克,灭菌后氢离子浓度31６3～39８1纳摩／升（pH５.４～5．５）. 四就是PＤA改良培养基(丙)：心材木２0０克,细米糠（或麸皮)10０克,硫酸铵1克,麦芽糖（或葡萄糖）20克,琼脂2０克，水1 0０0毫升,灭菌后氢离子浓度３1６3~1０００0纳摩／升 (ｐH5、0~５、5),用于分离菌种. 五就是麦芽浸膏、酵母浸膏、琼脂培养基(MYD):麦芽浸膏3克,葡萄糖10克，酵母浸膏3克,琼脂２0克,蛋白胨5克,水1 0０0毫升（用于菌种培养)。 六就是麦芽浸膏、蛋白胨培养基(MPA）:麦芽浸膏2０~25克,蛋白胨1０克,琼脂20克,水１000毫升(用于分离、培养、保存菌种)。 上述6个培养基配方中,马铃薯、葡萄糖、琼脂(PDA)配方应用最普遍。在此着重介绍PＤA培养基得配制方法与步骤: １。制备培养基得操作程序 选择优质马铃薯,去皮或挖去发芽眼，削去发青皮,切成薄片，称取200克，置于钢精锅，加水１ 0０0毫升，煮沸后小火保持30分钟,趁热用8层纱布过滤后放人有1 000毫升刻度得量杯（或量筒)中,补充水到１００0毫升,倒回钢精锅,加琼脂继续加热,待琼脂溶化后,再加葡萄糖,再补水至1000毫升,用玻璃棒搅均匀,趁热分装试管,或装入三角瓶备用. 2．分装试管 将配制好得PＤA培养基，趁热（6０℃)倒人事先准备好得量杯或玻璃漏斗,分装试管。每支试管装培养基为管长得１/4，培养液不可贴附管口内壁,如有沾附物必须揩拭干净。 3。做棉塞 取适量棉花做成较紧实得棉塞，塞入试管约2厘米左右，外留1厘米,紧贴试管内壁,松紧度以

香菇的组织分离及培养

香菇的组织分离和培养 一、实验目的 1、了解食用菌的基础知识。 2、了解、掌握食用菌培养基的配置原理。 3、通过平菇栽培实验，掌握食用菌代料栽培的一般方法。 二、实验原理 （食用菌的组织分离法） 食用菌的母种一般是采用孢子分离法或组织分离法得到的纯培养物。利用食用菌子实体内部组织进行分离，是获得母种最简便的方法。 三、实验材料 1、原种制作实验材料 （1）食用菌：香菇。 （2）培养基：PDA培养基斜面。 （3）仪器或其他用具： 75%酒精棉球、接种针记号笔等。 2、食用菌的组织离 2、食用菌的组织分离 （1）试剂：棉籽壳、麸皮、蔗糖、CaCO3 （2）仪器或其他用具：平菇菌种、香菇菌种、金针菇菌种、姬菇菌种、茶树菌种、台秤、盆子、聚丙烯塑料袋、颈圈、封口膜、橡皮筋、高压蒸气灭菌锅、pH试纸（pH 5.5—9.0）、记号笔、麻绳等 四、实验步骤 1、原种制作实验材料 （1）拌料按培养料配方准确称取所需棉籽壳和麸皮放入大盆中用手搅拌混合均匀，将所需的蔗糖和CaCO3溶于水中，然后泼洒在棉籽壳和麸皮上，边加水边搅拌，直至均匀。搅拌好后，焖30分钟，使培养料吸水均匀。 （2）侧培养水分培养料搅拌好后，用于抓一把培养料握在手中，攥紧，手指缝中有水印但无水滴滴下，这时的含水量适合，为60%—62%，若含水量不足，可再加少量的水，充分搅拌均匀，在检测，直至含水量合适为止。 （3）装袋边加边将培养料压实，装至3/4左右，袋口套上颈圈，用木棒在培养料中打一洞，盖上封口膜，用橡皮筋扎紧。（4）灭菌 126 ℃高压蒸气灭菌90分钟。 （5）接种栽培袋冷却到25℃左右，在超净工作台上用镊子或接种枪夹取所需菌种（1个鸡蛋大小）放入培养料袋的洞中。 （6）培养接种后的栽培袋，放入23- 25℃培养室，堆放高度三至四层，空气湿度60%-65%，每周翻堆一次，使上下发菌一致，同时挑出污染的栽培袋丢弃，一般30-40天，菌丝即可长满菌袋。 （7）出菇管理 （8）采收

枝条菌种制作

枝条菌种制作技术 一、什么是枝条菌种？ 枝条菌种是指用竹签、木条、雪糕棒等制作的食用菌菌种，通常枝条菌种用来制作三级种，也叫竹签菌种、小棒菌种。 在液体菌种没有普及之前，枝条菌种在杏鲍菇工厂化、黑木耳工厂化生产中广泛使用，随着液体菌种的普及，枝条菌种的使用逐渐减少，但是对于不具备液体菌种生产条件的小规模企业首选还是枝条菌种。 二、哪些品种可以使用枝条菌种？ 香菇、平菇、金针菇、杏鲍菇、黑木耳等常规品种都可以使用枝条菌种。 三、枝条菌种的优点和缺点 优点： 1、枝条菌种萌发较快，因为菌丝生长到枝条内部，不容易死亡和老化； 2、接种方便，速度快； 3、不需要打开全部袋口，培养基暴露的时间段，较少污染机会。 4、枝条可以深入培养基内部，发菌快。 缺点： 1、对制作技术要求相对较高； 2、对灭菌要求较高，最好采用高压灭菌的方式。 四、枝条菌种制作技术 1、材料准备 枝条：杨木、桑木、柞木、椴木、柳木等能够栽培食用菌的木材都可以制作枝条菌种，杨木的价格较低，较为常用。现在有专门生产食用菌专用枝条的厂家，也

可以用雪糕棒，枝条长度一般12-15cm，宽0.5-0.7cm，厚0.5-0.7cm，枝条的规格要根据栽培袋的大小进行选择。 菌种：提前准备好二级种，二级种的纯度和活性直接影响到枝条菌种的质量，一定要做好。 菌袋：枝条菌种一般使用17cm×30cm，或者15cm×28cm的聚丙烯折角袋，聚丙烯的菌袋透明度好，便于观察菌丝长势和污染情况，如果采用高压灭菌则必须使用聚丙烯菌袋，可以用棉花封口，最好。 辅料准备：木屑、麦麸、白灰、石膏，用来填充枝条之间的空隙；白糖、磷酸二氢钾、硫酸镁，用来配置浸泡枝条的营养液。 2、浸泡枝条 营养液配置：白糖10g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁1g，水1000ml，按照比例配置配置适量营养液，将枝条整捆放入营养液中浸泡15小时，浸泡时间要根据枝条的规格、气温进行调整，目的是枝条要泡透，可以将枝条敲碎，观察是否有白芯，如果有说明没有泡透。 3、配置辅料 木屑：50%，麦麸48%，石膏1%，白灰1%，含水量：60-65%，木屑需要提前预湿，拌好备用。注：其中白灰要根据酸碱度的实际情况进行调整。 4、装袋 将浸泡好的枝条和配置好的辅料混合，每根枝条表面都沾上辅料，袋底部先装入少量的辅料，然后装入枝条，每个菌袋可以装入150-200个枝条，在枝条表面覆盖少量的辅料，然后封口，准备灭菌。 5、灭菌

香菇栽培技术

香菇栽培技术 一、生产工艺流程 无公害备料→配料→装袋→灭菌→冷却→接种→菌丝培养→脱袋排场→转色管理→变温催菇→出菇管理→采收→加工 二、生产季节 根据当地气候条件和菌种特性（在当前栽培的品种中，有高温型、中温型、低温型之分），再确定具体的接种和出菇季节。山东一般选择在秋季栽培。 三、培养基配制 1、配方。 （1）阔叶树木屑78%～79%，麦麸或米糠20%，石膏1%～2%。 （2）阔叶树木屑77%～80%，麦麸或米糠15%，玉米粉3%～5%，石膏1%～2%。料水比均为1：1～1.2，调至pH5.5～6.5。 2、配制方法。按配方比例准确称好主料和辅料，反复搅拌均匀，适量加水，达到适宜的料水比。 四、装袋灭菌 1、装袋。栽培香菇专用薄膜筒，有低压聚乙烯、聚丙烯和高压聚乙烯三种，其筒宽12厘米、15厘米、15.5厘米、16厘米，各地可根据自己的情况，选择不同型号的塑料筒料，截成长50～55厘米的袋子，装料前先将一端用线扎口，用火融封。培养料配制好后，要在当天装完灭菌，装袋不论手工还是机械分装，都要求装紧实，以用手托起时不留指凹为度。 2、灭菌。培养基灭菌有高压蒸汽灭菌和常压蒸汽灭菌两种途径，高压蒸汽灭菌工作压力1.4公斤/厘米2，温度126℃，保持1.5～2.0小时，常压蒸汽灭菌温度达100℃，保持10～12小时，灭菌过程应根据所用塑料袋的耐热性而采用相应的灭菌方式。 3、冷却。灭菌后的菌袋及时搬进冷却室内，按井字形4袋交叉排叠，让袋温散热冷却，待袋内温度下降到28℃时方可转入接种工序。 五、接种培养

1、打穴接种。严格按无菌操作技术要求进行，接种室要求在接种前做到“两次消毒”，即空室先消毒，料袋进入后再消毒一次。打穴时，先擦去袋面残留物，用打洞器在袋面等距离打3个穴，再翻至背面错开打2个接种穴。口径1.5厘米，深2厘米，为了使穴内周围平整，最好用与穴口粗细相同的木钻。打穴后要立即接种。接种时用接种刀挖去菌种表层菌膜，并挖除上层老菌丝，用接种器从菌种瓶内取菌种，迅速地通过酒精灯火焰，移入接种穴内，尽量接满穴。菌种接入穴后，立即用胶布将穴口密封。打穴、接种、贴胶布要连续进行，流水作业。一般750毫升菌瓶的菌种，可接20～25袋。 2、培养。培养室使用前要消毒，室温控制在25～27℃，室内空气相对湿度不应高于70%，送进发菌室的袋子，应以井字形堆叠，横向每行3～4袋，依次重叠10层为一堆，堆与堆之间要留出通风道，袋子的接种穴要朝向袋距空间，不可互相压叠。接种后3～5天内，培养室的温度要控制在27℃左右；接种后4～5天后，应把室温降至25℃左右。培养5～7天后要进行一次翻堆，认真检查发菌情况和菌袋是否有杂菌感染，污染袋及时处理。一般60～90天菌丝可长满全袋。 六、脱袋排场 经过发菌室适温培育60～70天可以脱袋，但时间并不是决定脱袋的标准，脱袋要适期，主要看袋壁周围菌丝体是否膨胀、皱褶、隆起瘤状物占整个袋面2/3，手握菌袋的瘤状菌丝体，有弹性松软感，而不是很硬，在接种穴四周有微棕褐色出现。脱袋最好在气温22℃以下，无风的晴天或阴天进行。雨天刮风、气温高于25℃以上不宜脱袋。菌棒排放在菇床的竹木条横杆上，与地面成70°～80°夹角，呈倾斜状。棒与棒间距3～4厘米。 七、菌筒转色 在脱袋排场后，如环境条件适宜，需要8～12天，若气温低，则向后拖延3～5天。脱袋后5～6天，菌棒表面长满浓白色的气生菌丝时，要抖动薄膜，每天通风2～3次，每次20～30分钟，以增加氧气和光照，拉大菌棒表面的干湿差。通常7～8天菌丝开始转色，此时应增加通风次数与时间，每天喷水几次，加快转色。转色的温度以15～22℃为最适，如果脱袋后处于12℃以下的低温或处于28℃以上的高温，均会造成转色困难，因此要注意控制温度。