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MOI值-感染复数或复感染指数,感染时病毒和细胞数量的比值。

MOI值-感染复数或复感染指数,感染时病毒和细胞数量的比值。

MOI值-感染复数或复感染指数,感染时病毒和细胞数量的比值。

MOI值-感染复数或复感染指数,感染时病毒和细胞数量的比值。

学术术语来源---

慢病毒携带增强型绿色荧光蛋白转染的人脐静脉内皮细胞

文章亮点:

文章的创新性在于应用慢病毒携带增强型绿色荧光蛋白转染体外培养的人脐静脉内皮细胞,观察增强型绿色荧光蛋白在人脐静脉内皮细胞中的表达,获得其最佳感染复数值,以研究人脐静脉内皮细胞在动物模型体内发生的形态学和生物学转变,从而为后期人脐静脉内皮细胞示踪提供实验依据。

关键词:

组织构建;血管内皮细胞;慢病毒;增强型绿色荧光蛋白;人脐静脉内皮细胞;国家自然科学基金

主题词:

慢病毒属;绿色荧光蛋白质类;脐静脉;内皮细胞;转染

摘要

背景:人脐静脉内皮细胞转染慢病毒携带增强型绿色荧光蛋白方便后期示踪该细胞,掌握转染的最佳感染复数(MOI)和产生较强荧光强度的时间,可为后期观察人脐静脉内皮细胞在动物模型体内的示踪奠定基础。

目的:观察慢病毒携带增强型绿色荧光蛋白在人脐静脉内皮细胞中的表达,找到稳定标记人脐静脉内皮细胞的方法。

方法:采用胶原酶灌注消化分离人脐静脉内皮细胞,将其置于含有体积分数20%胎牛血清、内皮细胞生长因子的培养基内培养,倒置显微镜观察内皮细胞生长情况,消化离心重悬后进行计数,平均分成4组,每组细胞数5.0×105个,接种于24孔培养皿,空白组加入10 μL的DMEM无血清培养基,剩余3组加入慢病毒携带增强型绿色荧光蛋白进行转染,MOI分别为2,3,4,每组3个皿。

结果与结论:分离的人脐静脉内皮细胞在体外培养5-7 d可长成单层,光镜下胞体为单层鹅卵石状排列,第Ⅷ因子相关抗原的检测为阳性。转染后24 h可见绿色荧光,72 h荧光达到最强,细胞转染率与MOI 值呈线性增长关系,至21 d 时仍可见绿色荧光。转染后0,7,14,21 d,MOI=3 组的人脐静脉内皮细胞数量均与空白组差异无显著性意义,表明转染后细胞增殖能力不受慢病毒携带增强型绿色荧光蛋白影响。提示慢病毒携带增强型绿色荧光蛋白转染人脐静脉内皮细胞效率高,绿色荧光蛋白基因可持续表达21 d,且标记后不影响人脐静脉内皮细胞的增殖活性。

中国组织工程研究杂志出版内容重点:组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程

PI染色检测细胞周期

1、离心收集细胞,弃上清,用预冷PBS洗细胞两次。 2、加入预冷70%乙醇,于4℃固定过夜,或-20℃长期固定(4℃过夜一般隔天就进行检测,如果想推迟几天测,那就保存在-20℃,有资料说-20℃可以保存一个月,个人建议尽量在最短时间内检测,有些实验是在不同时间点上收细胞,这时我就等最后一次固定完了一块测,基本上也多在一周内检测完毕,没有特地去比较保存时间对检测结果的影响)。 3、细胞染色 离心收集细胞,以1mL的PBS洗细胞一次,加入500uLPBS含50ug/mL溴化乙锭(PI),100ug/mL RNase A,0.2% Triton X-100,4℃避光孵育30分钟(PI我是直接用PBS配成工作浓度,然后加入细胞沉淀混匀,RNA酶现加,但有时不加发现对实验结果也没太大的影响)。 4、流式分析 以标准程序用流式细胞仪检测,一般计数2-3万个细胞,结果用细胞周期拟和软件ModFit分析。 分析时,使用FL2-w和FL2-A显示,去除联体细胞,具体如下图。 细胞周期流式后一般分为G0/G1,S,G2/M期三部份,如果有凋亡,在G0/G1期前面有个凋亡峰(也称sub-G0期),而如果分析时细胞窗口没设置好,可能在最前面还有细胞碎片峰。 结果解读 G0/G1期细胞占总的61.2%,峰位于横座标的45.76 G2/M期占13.07,峰位于横座标的91.43 S期占25.73 G2/G1为2.0(即G2期为4倍体细胞,而G1期为2倍体细胞,比值为2) 峰的变异系数为4.54%(好) 细胞碎片为0.48%,细胞聚集体有0.06%。 总的细胞数(仪器检测到的)为17525个, 在细胞周期中分析的细胞数为17431个(即排除了碎片及聚集体后)

复数单元测试题含答案 百度文库

一、复数选择题 1.复数3 (23)i +(其中i 为虚数单位)的虚部为( ) A .9i B .46i - C .9 D .46- 2. 212i i +=-( ) A .1 B .?1 C .i - D .i 3.在复平面内复数Z=i (1﹣2i )对应的点位于( ) A .第一象限 B .第二象限 C .第三象限 D .第四象限 4.复数312i z i =-的虚部是( ) A .65i - B .35 i C . 35 D .65 - 5.已知复数1z i i =+-(i 为虚数单位),则z =( ) A .1 B .i C i D i 6.已知复数5 12z i =+,则z =( ) A .1 B C D .5 7.复数z 的共轭复数记为z ,则下列运算:①z z +;②z z -;③z z ?④z z ,其结果一定是实数的是( ) A .①② B .②④ C .②③ D .①③ 8.若复数2i 1i a -+(a ∈R )为纯虚数,则1i a -=( ) A B C .3 D .5 9.在复平面内,复数z 对应的点为(,)x y ,若2 2 (2)4x y ++=,则( ) A .22z += B .22z i += C .24z += D .24z i += 10.已知2021(2)i z i -=,则复平面内与z 对应的点在( ) A .第一象限 B .第二象限 C .第三象限 D .第四象限 11.复数()()212z i i =-+在复平面内对应的点位于( ) A .第一象限 B .第二象限 C .第三象限 D .第四象限 12.已知i 为虚数单位,则43i i =-( ) A . 2655 i + B . 2655 i - C .2655 i - + D .2655 i - -

PI染色检测细胞周期实验步骤

protocol : PI染色检测细胞周期 1、收集细胞:胰酶(含EDTA)消化收集对数生长期细胞(加热处 理后损失多的组宜多收集细胞保证细胞有 0.5-2 X 10*6个),吸取旧培养基到一个新离心管里;少量常温PBS (根据培养皿大小决定量,PBS洗可以保证消化效率)洗2次,清洗的PBS也要收集到上述离心管内【检测凋亡才需收集旧培养基及清洗的 PBS J ;然后胰酶消化 (注意一定要消化完全,显微镜下观察细胞呈单个,而不是成片脱落)后利用旧培养基中和胰酶;离心(1000r/300g 5mi n)收集细胞沉淀。 2、用预冷的PBS清洗细胞两次。 3、固定细胞:用0.5ml预冷的PBS重悬细胞沉淀,使细胞充分悬浮成单细胞,再将重悬细胞加入1.2ml预冷的99.7%无水乙醇(乙醇终浓度70%),吹打混匀以免细胞团聚,4C固定2H至过夜。 4、细胞染色:离心(1000r/300g 5min )收集固定的细胞,以1.8 mL的PBS洗细胞一次,离心(第一次实验时用7000rpm才把细胞离心下来,但最后流式结果显示细胞没有碎)再次获取细胞沉淀后加入1 00卩IRNaseA 于37 C水浴30min,最后加入400卩lPI避光染色30 min (常温或4C 均可) 【有的试剂盒说明是:每个样本加入500uL染色剂(据样本数,用P BS 临时配好总量,其中 PI 50ug/ml、RNase A 100ug/mL、Trit on X-100 0.2% ) 4 C避光染色30分钟】 5、流式分析以标准程序用流式细胞仪检测,一般计数2-3万个细胞,结

果用细胞周期拟和软件ModFit分析。分析时,使用FL2-W和FL2-A显示,去除联体细胞。

《复数》单元测试题 百度文库

一、复数选择题 1.已知复数1z i =+,则2 1z +=( ) A .2 B C .4 D .5 2.已知i 是虚数单位,复数2z i =-,则()12z i ?+的模长为( ) A .6 B C .5 D 3.若复数1z i i ?=-+,则复数z 的虚部为( ) A .-1 B .1 C .-i D .i 4.已知a 为正实数,复数1ai +(i 为虚数单位)的模为2,则a 的值为( ) A B .1 C .2 D .3 5.已知,a b ∈R ,若2 ()2a b a b i -+->(i 为虚数单位),则a 的取值范围是( ) A .2a >或1a <- B .1a >或2a <- C .12a -<< D .21a -<< 6.已知复数z 满足()3 11z i i +=-,则复数z 对应的点在( )上 A .直线12 y x =- B .直线12 y x = C .直线1 2 x =- D .直线12 y 7. )) 5 5 11-- +=( ) A .1 B .-1 C .2 D .-2 8.满足313i z i ?=-的复数z 的共扼复数是( ) A .3i - B .3i -- C .3i + D .3i -+ 9.设复数2i 1i z =+,则复数z 的共轭复数z 在复平面内对应的点位于( ) A .第一象限 B .第二象限 C .第三象限 D .第四象限 10.在复平面内,复数z 对应的点是()1,1-,则1 z z =+( ) A .1i -+ B .1i + C .1i -- D .1i - 11.复数2i i -的实部与虚部之和为( ) A . 35 B .15- C .15 D . 3 5 12.复数112z i =+,21z i =+(i 为虚数单位),则12z z ?虚部等于( ). A .1- B .3 C .3i D .i - 13.复数21i i +的虚部为( ) A .1- B .1 C .i D .i -

复数的三角形式

复数的三角形式 1、复数的三角形式 (1)复数的幅角:设复数Z=a+bi对应向量,以x轴的正半轴为始边,向量所在的射线(起点为O)为终边的角θ,叫做复数Z的辐角,记作ArgZ,其中适合0≤θ<2π的辐角θ的值,叫做辐角的主值,记作argZ. 说明:不等于零的复数Z的辐角有无限多个值,这些值中的任意两个相差2π的整数倍. (2)复数的三角形式:r(cosθ+isinθ)叫做复数Z=a+bi的三角形式,其中. 说明:任何一个复数Z=a+bi均可表示成r(cosθ+isinθ)的形式.其中r为Z的模,θ为Z的一个辐角. 2、复数的三角形式的运算: 设Z=r(cosθ+isinθ),Z1=r1(cosθ1+isinθ1),Z2=r2(cosθ2+isinθ2).则

3、应用 例1求下列复数的模和辐角主值 (1)i +1 (2) i -3 解:(1) 211122=+=+i 又 a b tan =θ=1,点(1,1)在第一象限。所以41πθ=+=)(i arg (2) 213322=-+=-)()(i 有31 -=θtan ,点( 13-,)在第四象限,所以611623π π πθ=-=-=)(i arg 想一想:怎样求复数i z 43-=的辐角? 想一想:复数的三角形式有哪些特征?下列各式是复数的三角形式吗? (1)θθcos sin i + (2)[])()(?-+?-30302sin i cos (3))(6655ππsin i cos + 例2 把下列复数转化为三角形式 (1)-1;(2)i 2; (3) i -3 解:(1)2201+-=)(r =1,辐角主值为θ=π=-)(1arg ,所以 -1=ππsin i cos +

PI染色检测细胞周期实验步骤

protocol:PI染色检测细胞周期 1、收集细胞:胰酶(含EDTA)消化收集对数生长期细胞(加热处理后损失多的组宜多收集细胞保证细胞有0.5-2×10*6个),吸取旧培养基到一个新离心管里;少量常温PBS(根据培养皿大小决定量,PBS洗可以保证消化效率)洗2次,清洗的PBS也要收集到上述离心管内【检测凋亡才需收集旧培养基及清洗的PBS】;然后胰酶消化(注意一定要消化完全,显微镜下观察细胞呈单个,而不是成片脱落)后利用旧培养基中和胰酶;离心(1000r/300g5min)收集细胞沉淀。 2、用预冷的PBS清洗细胞两次。 3、固定细胞:用0.5ml预冷的PBS重悬细胞沉淀,使细胞充分悬浮成单细胞,再将重悬细胞加入1.2ml预冷的99.7%无水乙醇(乙醇终浓度70%),吹打混匀以免细胞团聚,4℃固定2H至过夜。 4、细胞染色:离心(1000r/300g5min)收集固定的细胞,以1.8 mL的PBS洗细胞一次,离心(第一次实验时用7000rpm才把细胞离心下来,但最后流式结果显示细胞没有碎)再次获取细胞沉淀后加入1 00μlRNaseA于37℃水浴30min,最后加入400μlPI避光染色30 min(常温或4℃均可) 【有的试剂盒说明是:每个样本加入500uL染色剂(据样本数,用P BS临时配好总量,其中PI 50ug/ml、RNase A 100ug/mL、Triton X-100 0.2%)4℃避光染色30分钟】 5、流式分析

以标准程序用流式细胞仪检测,一般计数2-3万个细胞,结果用细胞周期拟和软件ModFit分析。分析时,使用FL2-w和FL2-A显示,去除联体细胞。

(完整版)复数单元测试题(一)

一、选择题 1、复数12z i =-+对应的点在复平面的( ) A 、第一象限 B 、第二象限 C 、第三象限 D 、第四象限 2、已知复数34z i =-,则z =( ) A 、34i + B 、34i -+ C 、34i -- D 、43i -+ 3、复数z 满足12i z 24i -+-=-+,那么z =( ) A 、12i + B 、3i -+ C 、12i - D 、36i -+ 4、复数2 z i i =+的模等于( ) A 、1 B C 、0 D 、2 5、下列命题中,假命题是( ) A 、两个复数不可以比较大小 B 、两个实数可以比较大小 C 、两个虚数不可以比较大小 D 、一虚数和一实数不可以比较大小 6、复数22(56)(3)0m m m m i -++-=,则实数m =( ) A 、2 B 、3 C 、2或3 D 、0或2或3 7、计算 1i i +的结果是( ) A 、1i -- B 、1i -+ C 、1i + D 、1i - 8、方程20x x a -+=有一个复根是122 -,则另一个复根是( ) A 、12+ B 、12-+ C 、12- D 、无法确定 二、填空题 9、若z a bi =+,则z z -=____________,z z ?=____________。 10、1i =____________, 11i i +=-____________。 11、复数234z i i i i =+++的值是___________。 12、在复平面内,平行四边形ABCD 的三个顶点A 、B 、C 对应的复数分别是13i +,i -,2i +,则点D 对应的复数为 。 13 o o 。 三、解答题 14、已知复数22 (32)(2)z m m m m i =++++-,m R ∈。 根据下列条件,求m 值。 (1)z 是实数;(2)z 是虚线;(3)z 是纯虚数。

巨细胞病毒和巨细胞病毒感染的诊断

巨细胞病毒和巨细胞病毒感染的诊断 文章来源: 2006-7-22 11:39:26 巨细胞病毒和巨细胞病毒感染的诊断 中华儿科杂志 1999年第7期第37卷专论 作者:方峰董永绥 单位:430030 武汉,同济医科大学附属同济医院儿科临床病毒研究室 巨细胞病毒感染(cytomegalovirus infection)是由人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,CMV)引起[1],在我国相当普遍,且大多在幼年时期发生。据我们1995年至1997年连续3年对1 678例就诊小儿筛查结果发现,1~3岁组幼儿CMV感染率83.2%,~7岁组83.7%,~14岁组87.3%;成人组高达95%。虽然大多数感染者无明显症状,但在婴儿期和有免疫抑制的个体可引起严重疾病[2]。现在,国内不少单位已开展CMV感染的诊断工作,但存在不少问题。有必要对近年来有关CMV的病毒学研究和怎样正确诊断CMV感染予以介绍。 一、有关CMV的病毒学研究进展 (一)CMV的结构及其生物学特性[1]: CMV属疱疹病毒科(herpesviridae),不同毒株间核苷酸序列具有80%以上的同源性,有共同抗原,暂定为一个血清型,因此在临床检测上可以不受毒株型别影响。近年来,国外的病毒学家们对CMV的分子结构作了很多研究,现知完整的病毒颗粒直径约230 nm,内核为CMV DNA;其外为外径约110 nm的二十倍体,称核衣壳(nucleocapsid),由162个壳粒构成。病毒的最外层为厚约10 nm的膜状囊膜,或称包膜(envelope),包膜与核衣壳之间为无明显构型的被膜(tegument),厚约50 nm。CMV基因为线性双股DNA分子,长约230 kb,由长单一序列(U L)和短单一序列(U S)构成。CMV DNA携带大约200个开放读码框(ORFs)。与其他疱疹病毒的表达特性相似,CMV前早期(immediate-early,α)、早期(early,β)和晚期(late,γ)蛋白基因连锁调控,呈时序级联地相继表达。前早期抗原(immediate early antigen,IEA)主要包括IE1(72 000,UL123)和IE2(18 000~86 000,UL122)蛋白,在感染后1小时开始出现在感染细胞核内,这些转录调控蛋白与细胞蛋白相互作用,调节后继病毒基因的表达。早期抗原(early antigen,EA)在感染后3小时出现在感染细胞核和胞浆中,为一组合成子代DNA和蛋白质所需的酶和调控因子,如病毒DNA多聚酶(140 000,UL54)、核DNA结合蛋白(140 000,UL57)和一组核磷蛋白(分子量分别为34 000,43 000,50 000和 84 000,UL112)。另一种核DNA结合磷蛋白(52 000,UL44)在不同启动控制下于感染早期和晚期表达,可促进病毒DNA多聚酶的活性。晚期抗原(late antigen,LA)在感染后6~24小时内表达,为病毒结构蛋白。核衣壳含三种高丰余蛋 1

流式检测细胞周期要点

1.收集细胞; ~5000rpm离心5min,收集沉淀,重悬于200ul的PBS中,再次离心收集沉淀; %冰冻乙醇(-20度保存)4度固定过夜or-20度固定1h; 4.离心收集沉淀,PBS洗一次(视沉淀量可忽略); 5.沉淀重悬于200~500ul的PBS,加入Rnase A 37度水浴1h; 目纱布过滤至流式管,加入PI染色,4度避光30min-1h,上机器。 1、Q:要做胃粘膜组织的DNA含量及倍体检查,但取材后要等几个星期才会做流式细胞术检查,请问:胃组织要怎样保存好呢?用低温保存,还是用乙醇固定?或者固定后再低温下保存? A:我做过乳腺细胞的DNA含量测定,取得组织以后,先处理成单细胞悬液,然后再加70%冰乙醇固定,要保证冰乙醇的最终浓度为50%,这样固定的细胞悬液可以至少保存12小时,最多可保存一个月,上机检测前再加PI综合染液。我就是这样做的,保存了将近三个星期,结果还可以,变异系数为5%. 2、实验中想用PI分析细胞周期及凋亡率,请教几个问题: Q:(1)所用的RNAs酶用什么配制呢?用PBS配吗? A:RNaseA用PBS配制没有问题,但是注意要沸水浴去除DNase的活性。 Q:(2)测细胞周期和凋亡率时都要用RNAs酶,可以一起检测吗? A:用流式细胞仪测定时细胞周期和凋亡率是同时测定的,不用担心。 Q:(3)Triton-x-100是固定剂吧,用了70%的冷乙醇(是4℃吗?),是不是就不用Triton-x-100固定了? A:Triton X-100是起透化作用的,不是固定剂,可以用75%的乙醇于-20度固定。 Q:(4)还要设什么内参标准(5%鸡红细胞)吗?

复数单元测试题含答案

一、复数选择题 1.复数1 1z i =-,则z 的共轭复数为( ) A .1i - B .1i + C . 1122 i + D . 1122 i - 2.已知复数2z i =-,若i 为虚数单位,则1i z +=( ) A . 3155 i + B . 1355i + C .113 i + D . 13 i + 3.已知复数1=-i z i ,其中i 为虚数单位,则||z =( ) A . 12 B . 2 C D .2 4.已知复数()123z i i +=- (其中i 是虚数单位),则z 在复平面内对应点在( ) A .第一象限 B .第二象限 C .第三象限 D .第四象限 5.已知,a b ∈R ,若2 ()2a b a b i -+->(i 为虚数单位),则a 的取值范围是( ) A .2a >或1a <- B .1a >或2a <- C .12a -<< D .21a -<< 6.复数312i z i =-的虚部是( ) A .65i - B .35 i C . 35 D .65 - 7.满足313i z i ?=-的复数z 的共扼复数是( ) A .3i - B .3i -- C .3i + D .3i -+ 8.在复平面内,复数z 对应的点是()1,1-,则1 z z =+( ) A .1i -+ B .1i + C .1i -- D .1i - 9.复数12i z i = +(i 为虚数单位)在复平面内对应的点位于( ) A .第一象限 B .第二象限 C .第三象限 D .第四象限 10.已知复数z 的共轭复数212i z i -=+,i 是虚数单位,则复数z 的虚部是( ) A .1 B .-1 C .i D .i - 11.复数z 满足22z z i +=,则z 在复平面上对应的点位于( ) A .第一象限 B .第二象限 C .第三象限 D .第四象限 12.已知复数z 满足()1+243i z i =+,则z 的虚部是( ) A .-1 B .1 C .i - D .i

巨细胞病毒感染对新生儿的危害

巨细胞病毒感染对新生儿的危害 巨细胞病毒(简称CMV对全世界人群不管你是富有还是贫穷都能感染的一种疾病。大多数人(包括妈妈)感染后没有什么症状,但是对于免疫机制发育不成熟的胎儿和新生儿,包括先天免疫缺陷、器官移植以及艾滋病患者则可发生危及生命的病变。目前对于CMV研究一直是国际医学界关注的热点。 CMV感染是CM\侵入人体,在人体细胞内繁殖,造成组织病变。病变不但可以侵犯人的脑实质、消化系统、呼吸系统,包括肾上腺、生殖系统,怀孕的妈妈巨细胞病毒还能侵犯胎盘以及胎儿。对于小儿来说CMVft容易使肝脏受累,造成肝细胞坏死。严重者危及生命。 CMVt染途径: 主要是母婴传播:1,宫内传播。宫内感染可以发生在怀孕的各个阶段,所以我国产科建议育龄妇女在准备怀孕前最好做CMV佥查,如果处于感染阶段就要治疗后再怀孕。如果已经怀孕建议大约在孕21周左右做TORC筛查。2,经过产道筛查:新生儿在娩出时吸入了被CMV亏染的母亲宫颈、阴道分泌物而感染。3,母乳传播:专家的科学研究证实母乳传播存在。 其次是水平传播,即家庭内传播、集体机构如托儿所,幼儿园等通过玩具和环境相互传播、医源性传播,CMV S过输血、血制品以及器官和骨髓移植传播。 临床表现: 1 ,无症状感染,。成人感染后没有任何症状,但是小儿感染后病毒终身存在体内,一旦小儿患其它疾病,CMW以活跃起来。 2,有症状感染:中枢神经系统感染可以造成脑膜脑炎、小脑畸形、颅内钙化、脑积水、脑瘫、视神经萎缩、智能或体格发育障碍,癫痫发生。 3,耳聋 4,肝炎,婴儿时期感染CMV尤其是先天性和围产期感染对于婴儿来说常常累计肝脏,发生四种肝炎:①亚临床型肝炎。孩子可能没有症状,也没有肝功能损伤,但是常常伴有肝硬变或者脾肿大。②无黄疸肝炎可以出现肝炎的症状,肝功能异常伴有食欲减退,呕吐、腹泻。③黄疸型肝炎。出现不同程度的黄疸,同时具有无黄疸肝炎的所有症状。④急性淤胆型。症状重,黄疸较深,出现类似肝内胆汁淤积的表现。 5,还包括体内其它各系统的感染。这里就不一一再述。 治疗:对于CMV感染目前行之有效的治疗方法不多,都不能彻底消灭病毒而治愈。所以预防是关键。 孕21周需要做TORC筛查 今天女儿打电话着急地告诉我,前几天抽血做的TORC筛查今天出结果了:巨细胞病毒(CMV)血清抗体IgG阳性,其余是阴性。女儿一看是CM\抗体阳性心里没了底,虽然医生告诉她没有问题,但是对于不懂的医学的人来说,唯恐这个“阳性”对胎儿有影响,于是赶紧给我打电话咨询。

细胞周期同步化

细胞周期同步化 在细胞培养过程中,细胞多处于不同的细胞周期时相中,其中有少数细胞在进行有丝分裂活动,其余细胞分别处于G1、S和G2各期。不同时相的细胞对药物干预存在不同反应,会影响实验的重复性,因此,需要获得周期一致性的细胞。利用细胞同步化技术可使细胞大量的处于同一细胞时期,并可获得该时期大量的物质,如细胞中期时的染色体。细胞周期同步化(synchronization)是指为了研究某一时相细胞的代谢、增殖、基因表达或凋亡,借助某种自然或人为的实验手段,使细胞群体中处于细胞周期不同时相的细胞停留在同一时相( 除了G0期的细胞)的现象。细胞同步化本质上包括用一定的方法获得一定数量的同步化细胞群和使细胞进入同步化生长的两层含义。 DNA 合成抑制法是通过抑制DNA合成将细胞同步于同一时期的方法。高浓度TdR(胸腺嘧啶核苷)双阻断法是目前常用的抑制DNA 合成的同步化方法。它可逆地抑制DNA 合成,而不影响其他时期细胞的转运,最终可将细胞群阻断在S 期或G1 /S 交界处。其原理是: Td R是细胞DNA 合成不可缺少的前体,但向培养基中加入过量TdR,可形成过量的三磷酸腺苷,后者能反馈抑制其他核苷酸的磷酸化,从而抑制DNA 合成。它将细胞同步于G1 /S期交界处,同步化程度高,适用于任何培养体系,可将几乎所有的细胞同步化,但是容易产生非均衡生长,个别细胞体积增大。TdR双阻断法因为简单易行且可逆,在肿瘤药理方面对细胞周期同步化的实验中得到了广泛的应用。羟基脲、5-氟脱氧尿嘧啶、阿糖胞苷、氨甲蝶呤和高浓度ADR、GDR也属于DNA合成抑制剂,它们与TdR作用相似,均可通过抑制DNA合成达到同步化的目的。 中期阻断法是利用破坏微管的药物将细胞阻断在M期从而得到同一时期细胞的方法,常用的药物有秋水仙素等。秋水仙素通过抑制微管的聚合,进而抑制有丝分裂装置的形成,将细胞阻断于有丝分裂中期然后再释放使细胞达到同步化。中期阻断法非平衡生长问题不明显,但可逆性比较差,当阻断时间过长时,许多细胞产生异常分裂。过去研究中也发现,同步后的细胞的生长能力明显不如撤去阻断剂后得到的S期细胞旺盛。秋水仙胺、Nocodazole也是目前常用的中期阻断剂。 经过同步化之后的细胞可以通过流式细胞术对其周期进行分析。将细胞用PI(碘化丙啶)染液进行染色,使用流式细胞仪对细胞内DNA的相对含量进行测定,可分析细胞周期各时相的百分比。由于细胞的DNA含量在不同时期有显著的差异,因此可以将细胞分成

细胞增殖细胞周期的测定方法

苑中2011 届高三生物二轮专题复习学案 1 “细胞增殖”相关知识的建构(2 课时)一、减数分裂与基因的分离、自由 组合定律请画出能体现基因自由组合现象的细胞分裂图像 例1、(08 江苏)某种昆虫长翅(A)对残翅(a)为显性,直翅(B)对弯翅(b)为显性,有刺刚毛(D)对无刺刚毛(d)为显性,控制这3 对性状的基因均位于常染色体上。现有这种昆虫一个体基因型如下图所示,请回答下列问题。(1)长翅与残翅、直翅与弯翅两对相对性状的遗传是否遵 循基因自由组合定律,并说明理由。。(2)该昆虫一个初级精母细胞产生的精细胞的基因型为____________。(3)该昆虫细胞有丝分裂后期,移向细胞同一极的基因有。(4)该昆虫细胞分裂中复制形成的两个D 基因发生分离的时期 有______ 。(5)为验证基因自由组合定律,可用来与该昆虫进行交配的异性个体的基因型分别是 _______________________________________________ ____________________________ 。二、细胞分裂与可遗传变异请画出可遗传变异种类的概念图苑中2011 届高三生物二轮专题复习学案 2 1、基因重组(非同源染色体的自由组合、交叉互换)例2、(07 广东)在减数分裂中每对同源染色体配对形成四分体,四分体中的非姐妹染色单体 之间经常发生交换。实验表明,交换也可以发生在某些生物体的有丝分裂中,这种现

象称为有丝分裂交换。图39—1 是某高等动物一个表皮细胞发生有丝分裂交换的示意图,其中D 和d,E 和e,F 和 f 表示某对同源染色体上的三对等位基因。图39—1 交换 过程示意图(左:交换前的染色体;右:交换后的染色体)(1)请问该细胞在发生有丝分裂交换后,产生几种基因型 的子代表皮细胞?并分别写出基因型 _______________________________________________ __________________。(2)如果不考虑该生物产生配子时发生的交换,那么该生物产生的配子有几种基因型?并 写出基因型 _______________________________________________ _____________。(3)如果图39—1 是该生物的精原细胞在产生精细胞时发生减数分裂交换后的结果,请问由它产 生的配子类型有几种?并写出基因型 ______________________________。(4)如果细胞在减数分裂和有丝分裂中都发生交换,你认为哪一种分裂方式对于遗传多样性的贡献更大?为什么? _______________________________________________。 2、染色体变异(染色体结构变异、染色体数目变异)例 3、(10 苏州高二期末)右下图表示某生物体的细胞进行减数 分裂过程中,其中联会的两对染色体之间出现异常的

《复数》单元测试题

一、复数选择题 1.复数()1z i i =?+在复平面上对应的点位于( ) A .第一象限 B .第二象限 C .第三象限 D .第四象限 2.i =( ) A .i - B .i C i - D i 3.若复数z 满足()13i z i +=+(其中i 是虚数单位),复数z 的共轭复数为z ,则( ) A .z 的实部是1 B .z 的虚部是1 C .z = D .复数z 在复平面内对应的点在第四象限 4.若复数1z i i ?=-+,则复数z 的虚部为( ) A .-1 B .1 C .-i D .i 5.满足313i z i ?=-的复数z 的共扼复数是( ) A .3i - B .3i -- C .3i + D .3i -+ 6.在复平面内,复数z 对应的点是()1,1-,则1 z z =+( ) A .1i -+ B .1i + C .1i -- D .1i - 7.复数z 满足22z z i +=,则z 在复平面上对应的点位于( ) A .第一象限 B .第二象限 C .第三象限 D .第四象限 8.复数112z i =+,21z i =+(i 为虚数单位),则12z z ?虚部等于( ). A .1- B .3 C .3i D .i - 9.若( )()3 24z i i =+-,则在复平面内,复数z 所对应的点位于( ) A .第一象限 B .第二象限 C .第三象限 D .第四象限 10. 122i i -=+( ) A .1 B .-1 C .i D .-i 11.设21i z i +=-,则z 的虚部为( ) A .12 B .12 - C . 32 D .32 - 12.复数()()212z i i =-+在复平面内对应的点位于( ) A .第一象限 B .第二象限 C .第三象限 D .第四象限

流式检测细胞周期和凋亡实验步骤

流式细胞技术检测细胞周期分布 1) 已转染miRNA mimics的细胞培养达到85%融合时,用胰酶消化细胞。1000 rpm,离心5min,收集细胞沉淀; 2) 已消毒的PBS重悬细胞,1000 rpm/min,离心5 min,收集细胞。重复此步骤2次,以除去胰酶; 3) 加入预冷的70%乙醇固定细胞过夜; 4) 第二天1000rpm,离心5 min,收集细胞沉淀,PBS重悬两次,以除去乙醇; 5) 离心后加入500ul PBS重悬细胞,加入碘化丙锭(PI)染色液(含50mg/L PI,1g/L Triton X-100,100g/L RNase)混匀,4℃避光孵育30min。 6)流式细胞仪FACStar (美国BD公司) 检测。接收的信号经Cellquest软件处理,对检测细胞的荧光强度进行分析。实验重复3次。 2.11流式细胞技术检测细胞凋亡水平 1) 已转染BART6-3p mimics的细胞培养达到85%融合时,将上清培养液收集至离心管内;常常 2)PBS清洗贴壁细胞3次,用胰酶消化细胞(注意:消化时不可过度),收集于第一步的离心管内; 3) 1000 rpm离心5min,弃上清收集细胞,PBS轻轻重悬后,加入195 ulAnnexin V-FITC结合液,吹打混匀,重悬细胞,加入5ul Annexin V,轻轻混匀。避光室温孵育15min; 4) 加入10 ul PI染色液,轻轻混匀,避光孵育; 空白:Annexin V—FITC结合液200ul 双染:185ul结合液+5 ulAnnexin V—FITC+10ul PI 单染:195ul结合液+5ul Annexin V—FITC 190ul结合液+10PI 5) 进行流式细胞仪检测,Annexin V-FITC为绿色荧光,PI为红色荧光。

复数的三角形式的运算(一) 教案示例

复数的三角形式的运算(一)·教案示例 目的要求 1.掌握复数三角形式的乘法运算法则. 2.理解复数三角形式的乘法运算的几何意义,并能简单地应用. 内容分析 1.在代数形式下,两个复数的乘积(a +bi)(c +di)按照多项式展开,从而得出乘法运算法则.在三角形式下,两个复数的乘积r1(cos θ1+isin θ1)·r2(cos θ2+isin θ2)仍可按代数形式(r1cos θ1+ir1sin θ1)(r2cos θ2+ir2sin θ2)来计算.但这样运算较繁杂,而且没有体现出三角形式下模与辐角的特征和作用,因此很有必要研究两个复数的乘积的结果(也是一个复数)的模与原来两个复数的模、辐角与原来两个复数的辐角之间的关系. 2.三角形式下两个复数z1=r1(cos θ1+isin θ1)与z2=r2(cos θ2+isin θ2)的乘法公式及法则: r1(cos θ1+isin θ1)·r2(cos θ2+isin θ2)=r1r2[cos(θ1+θ2)+isin(θ1+θ2)] 即,两个复数相乘,积的模等于各复数的模的积,积的辐角等于这两个复数的辐角的和. 上述法则中,注意“积的辐角等于这两个复数的辐角的和”指的是积的辐角的集合等于原来两个复数的辐角集合中各自任取一个,求和角,所有和角组成的集合.而积的辐角主值不一定等于这两个复数的辐角主 值的和.如-=π,-=π,--==π≠π+π.arg(i)arg(1)arg[(i)(1)]argi 32232 arg(z1·z2)与argz1、argz2的关系是 arg(z1·z2)=argz1+argz2+2k π(k 取某一整数) 其中整数k 使argz1+argz2+2k π∈[0,2π). 3.根据三角形式的乘法法则,结合向量知识,可以对复数乘法的几何意义解释如下: 在复平面内作出z1、z2对应的向量,将向量按逆时针方向旋转一个角θ2(若θ2<0,则 按顺时针方向旋转一个角|θ2|),再把它的模变为原来的r2倍,所得向量 就表示积z1z2. 也就是说,复数乘法实质上就是向量的旋转和伸缩.旋转方向与角度取决于从另一复数的辐角集中取出来的值,伸长或缩短及其倍数取决于另一复数的模的大小. 4.将两个复数相乘的结果推广到有限个复数相乘,即为 r1(cos θ1+isin θ1)·r2(cos θ2+isin θ2)·…·rn(cos θn +isin θn) =r1r2…rn[cos(θ1+θ2+…+θn)+isin(θ1+θ2+…+θn)](n ≥2). 可以用数学归纳法说明: 1°当n =2时,乘法公式成立.

高二选修2-2《复数》单元测试卷及其答案

复数单元测试题 一、选择题。(每小题5分,共60分) 1.若i 为虚数单位,则=+i i )1(( ) A .i +1 B .i -1 C .i +-1 D .i --1 2.0=a 是复数(,)a bi a b R +∈为纯虚数的( ) A .充分条件 B.必要条件 C.充要条件 D.非充分非必要条件 3.在复平面内,复数i i +-12对应的点位于 ( ) A.第一象限 B.第二象限 C.第三象限 D.第四象限 4.设复数ω++-=ω1,2 3 21则i =( ) A .ω- B .ω-1 C .2ω D .2 1ω 5.设R ,,,∈d c b a ,则复数))((di c bi a ++为实数的充要条件是( ) A .0ad bc -= B .0ac bd -= C .0ac bd += D .0ad bc += 6.如果复数i bi 212+-的实部与虚部互为相反数,那么实数b 等于( ) A .3 2- B .3 2 C .2 D .2 7.若复数z 满足方程022=+z ,则3z 的值为( ) A .22± B .22 - C .i 22± D .i 22- 8.设O 是原点,向量,对应的复数分别为i 32-,i 23+-,那么向量BA 对应的复数是( ) A .i 55- B .i 55+- C .i 55+ D . i 55-- 9.i 表示虚数单位,则2008321i i i i ++++Λ的值是( ) A .0 B .1 C .i D .i - 10.复数8)11(i +的值是 ( ) A . i 16 B . i 4 C .16 D . 4 11.对于两个复数i 232 1+ -=α,i 2 3 21--=β,有下列四个结论:①1=αβ;

巨细胞病毒感染不能吃什么,巨细胞病毒感染的注意事项

巨细胞病毒感染不能吃什么,巨细胞病毒感染的注意 事项 文章目录*一、巨细胞病毒感染的饮食和注意事项1. 巨细胞病 毒感染的饮食注意事项2. 巨细胞病毒感染的其他注意事项*二、巨细胞病毒感染的简介*三、巨细胞病毒感染的高发人群和危害 巨细胞病毒感染的饮食和注意事项 1、巨细胞病毒感染的饮食注意事项最好不要吃辛辣食物。 禁忌烟酒。 1.1、胡椒粉 胡椒粉辛热助阳,食用后会加重病情,并且影响药物治疗。辣椒、生姜都少吃为好。 1.2、动物油 动物油油腻,会影响营养物质的吸收,同时影响疾病痊愈。肥肉也少吃为好。 1.3、大葱 大葱辛辣,辛热助阳,食用后会加重病情,并且影响药物治疗。尽量避免食用。 2、巨细胞病毒感染的其他注意事项 2.1、进行有意识的身体素质的锻炼,提高机体免疫机能及抗病能力,特别是育龄期妇女, 以减少巨细胞病毒对胎儿的严重危害。

2.2、注意环境卫生,饮食卫生。 2.3、乳汁中巨细胞病毒阳性者,不应哺乳。 巨细胞病毒感染的简介巨细胞病毒感染症是由巨细胞病毒(CMV)引起的先天性或后天性感染。感染巨细胞病毒后的临床表现和转归与个体的免疫功能状态密切相关。免疫功能正常者因密切接触感染者的分泌物感染人巨细胞病毒,多表现为隐性感染, 部分为单核细胞增多症样表现。免疫功能缺陷者因输血(血液制品)或器官移植等感染CMV或CMV再活化后,可表现为单个或多个脏器受累,最常见为间质性肺炎、肝炎、胃肠炎、视网膜炎等。更昔洛韦可用于治疗巨细胞病毒感染。 巨细胞病毒感染的高发人群和危害1、高发人群: 1.1、母亲孕期有原发感染或再发感染的新生儿。 1.2、1岁一下婴儿。 1.3、艾滋病患儿。 1.4、接受骨髓、干细胞或实体器官移植者。 1.5、接受大剂量或长期免疫抑制剂或糖皮质激素治疗者。 1.6、其他免疫抑制的患儿。 2、危害:孕妈妈感染巨细胞病毒后,对胎儿的危害特别大。

细胞周期测定实验

细胞周期测定实验 细胞计数法: 实验方法原理体外培养细胞生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。 分裂指数指细胞群体中分裂细胞所占的百分比,它是测定细胞周期的一个重要指标,也是不同实验研究选择细胞的重要依据。 实验材料细胞 试剂、试剂盒胰酶甲醇培养液冰醋酸Giemsa染液 仪器、耗材CO2培养箱普通显微镜培养皿盖玻片吸管 实验步骤一、消化细胞,将细胞悬液接至内含盖玻片的培养皿中。 二、CO2培养箱中培养48小时,使细胞长在盖片上。 三、取出盖片,按下列顺序操作: PBS漂洗3分钟→甲醇:冰醋酸=3:1固定液中固定30分钟→Giemsa液染色10分钟→自来水冲洗。 四、盖片晾干后反扣在载玻片上,镜检。 五、计算 分裂指数=分裂细胞数/总细胞数×100% 展开 注意事项1. 操作时动作要轻,以免使盖片上的细胞脱落。 其他一、Giemsa染液配制 称Giemsa粉末0.5 g,加几滴甘油研磨,再加入甘油(使加入的甘油总量为33 ml)。56℃中保温90-120分钟。加入33 ml甲醇,置棕色瓶中保存,此为Giemsa原液。使用时按

要求用PBS稀释。一般稀释10倍。 BrdU参入法 实验方法原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。 单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。 BrdU(5-溴脱氧尿嘧啶核苷)加入培养基后,可做为细胞DNA复制的原料,经过两个细胞周期后,细胞中两条单链均含BrdU的DNA将占l/2,反映在染色体上应表现为一条单体浅染。如经历了三个周期,则染色体中约一半为两条单体均浅染,另一半为一深一浅。细胞如果仅经历了一个周期,则两条单体均深染。计分裂相中各期比例,就可算出细胞周期的值。 实验材料细胞 试剂、试剂盒BrdU 甲醇冰醋酸Giemsa染液秋水仙素SSC 柠檬酸三钠NaCl 仪器、耗材冰箱玻片水浴锅锅盖紫外灯光学显微镜 实验步骤一、试剂配制 1. BrdU配制 BrdU 10 mg加双蒸水10 ml ,4℃下避光保存。 2. 2×SSC配制 NaCl 1.75 g,柠檬酸三钠0.88 g,加水至100 ml,4℃保存。 二、细胞生长至指数期时,向培养液中加入BrdU,使最终浓度为10 μg/ml。 三、44小时加秋水仙素,使每ml中含0.1 μg。 四、48小时后常规消化细胞至离心管中,注意培养上清的漂浮细胞也要收集到离心管中。

复数单元测试题含答案 百度文库(1)

一、复数选择题 1.设复数1i z i =+,则z 的虚部是( ) A .12 B .12 i C .12 - D .12 i - 2. 212i i +=-( ) A .1 B .?1 C .i - D .i 3.已知复数()123z i i +=- (其中i 是虚数单位),则z 在复平面内对应点在( ) A .第一象限 B .第二象限 C .第三象限 D .第四象限 4.在复平面内复数Z=i (1﹣2i )对应的点位于( ) A .第一象限 B .第二象限 C .第三象限 D .第四象限 5.已知i 为虚数单位,复数12i 1i z +=-,则复数z 在复平面上的对应点位于( ) A .第一象限 B .第二象限 C .第三象限 D .第四象限 6.设2i z i +=,则||z =( ) A B C .2 D .5 7.若1i i z ,则2z z i ?-=( ) A . B .4 C . D .8 8.复数11z =,2z 由向量1OZ 绕原点O 逆时针方向旋转3 π而得到.则21 arg()2z z -的值为( ) A . 6 π B . 3 π C . 23 π D . 43 π 9.复数 2i i -的实部与虚部之和为( ) A .35 B .15- C .15 D . 3 5 10.若复数z 满足213z z i -=+,则z =( ) A .1i + B .1i - C .1i -+ D .1i -- 11.已知i 为虚数单位,则43i i =-( ) A . 2655 i + B . 2655 i - C .2655 i - + D .2655 i - -

细胞周期同步化

在细胞培养过程中,细胞多处于不同的细胞周期时相中,其中有少数细胞在进行有丝分裂活动,其余细胞分别处于G1、S和G2各期。不同时相的细胞对药物干预存在不同反应,会影响实验的重复性,因此,需要获得周期一致性的细胞。利用细胞同步化技术可使细胞大量的处于同一细胞时期,并可获得该时期大量的物质,如细胞中期时的染色体。细胞周期同步化(synchronization)是指为了研究某一时相细胞的代谢、增殖、基因表达或凋亡,借助某种自然或人为的实验手段,使细胞群体中处于细胞周期不同时相的细胞停留在同一时相( 除了G0期的细胞)的现象。细胞同步化本质上包括用一定的方法获得一定数量的同步化细胞群和使细胞进入同步化生长的两层含义。 DNA 合成抑制法是通过抑制DNA合成将细胞同步于同一时期的方法。高浓度TdR(胸腺嘧啶核苷)双阻断法是目前常用的抑制DNA 合成的同步化方法。它可逆地抑制DNA 合成,而不影响其他时期细胞的转运,最终可将细胞群阻断在S 期或G1 /S 交界处。其原理是: Td R是细胞DNA 合成不可缺少的前体,但向培养基中加入过量TdR,可形成过量的三磷酸腺苷,后者能反馈抑制其他核苷酸的磷酸化,从而抑制DNA 合成。它将细胞同步于G1 /S期交界处,同步化程度高,适用于任何培养体系,可将几乎所有的细胞同步化,但是容易产生非均衡生长,个别细胞体积增大。TdR双阻断法因为简单易行且可逆,在肿瘤药理方面对细胞周期同步化的实验中得到了广泛的应用。羟基脲、5-氟脱氧尿嘧啶、阿糖胞苷、氨甲蝶呤和高浓度ADR、GDR也属于DNA合成抑制剂,它们与TdR作用相似,均可通过抑制DNA合成达到同步化的目的。 中期阻断法是利用破坏微管的药物将细胞阻断在M期从而得到同一时期细胞的方法,常用的药物有秋水仙素等。秋水仙素通过抑制微管的聚合,进而抑制有丝分裂装置的形成,将细胞阻断于有丝分裂中期然后再释放使细胞达到同步化。中期阻断法非平衡生长问题不明显,但可逆性比较差,当阻断时间过长时,许多细胞产生异常分裂。过去研究中也发现,同步后的细胞的生长能力明显不如撤去阻断剂后得到的S期细胞旺盛。秋水仙胺、Nocodazole也是目前常用的中期阻断剂。 经过同步化之后的细胞可以通过流式细胞术对其周期进行分析。将细胞用PI(碘化丙啶)染液进行染色,使用流式细胞仪对细胞内DNA的相对含量进行测定,可分析细胞周期各时相的百分比。由于细胞的DNA含量在不同时期有显著的差异,因此可以将细胞分成 G1/G0期(1倍),S期(1-2倍)和G2/M期(2倍)。流式细胞仪可以根据DNA含量在不同时间内的变化,从而确定细胞周期的长短,也可以直接标记DNA复制(放射性同位素标记),统计细胞数量与标记细胞的百分比,对细胞周期进行综合分析. 连续分裂的细胞从上一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂完成所经历的整个过程为细胞周期(cell cyc1e)。细胞周期包含四个阶段:①G1期(first gap),又称合成前期,指前一次有丝分裂完成到DNA复制前的一段时期;②S期(synthesis phase),即DNA合成期,为真核细胞分裂(cell pision)间期中进行DNA合成的阶段;③G2期(second gap),为DNA合成后期,指DNA合成结束至有丝分裂开始之间的一个阶段;④M期 (mitosis or pision) ,又称D期,是染色体真正开始分离时期。细胞周期又可分为有丝分裂期(M期)和分裂间期(即G1→S→G2)两个时期。尽管细胞周期中各期的持续时间因不同细胞类型而异,但相对而言M期最短,S期较长。流式细胞仪(flow cytometer;FCM)的工作原理是在样品管中放入待测细胞,在气体的压力下使待测细胞进入充满鞘液的流动室。在细胞流动室里单细胞悬液被鞘流液包绕通过流动室内一定孔径的孔,形成细胞柱。然后通过对流动液体中单列的细胞进行逐一检测,得到单个细胞的光散射和荧光指标,在功能水平上定量分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等的物理、化学特征等多个参数。流式细胞仪不仅可以根据不同时间内DNA含量的变化来确定细胞周期的长短,还可以直接用放射性同位素标记DNA复制,通过统计细胞数目与比较各时相细胞的百分比来检测是否达到预期目的,从而对细胞周期各时相进行综合分析。流式细胞分析法与传统的荧光镜检查相比,具有速度快、精度高、准确性好等优点,已成为当代最先进的细胞定量分析技术。

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