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核酸提取原理及方法

金矿提炼技术简介

金矿提炼技术简介 金在矿石中的含量极低,为了提取黄金,需要将矿石破碎和磨细并采用选矿方法预先富集或从矿石中使金分离出来。黄金选矿中使用较多的是重选和浮选,重选法在砂金生产中占有十分重要的地位,浮选法是岩金矿山广为运用的选矿方法,目前我国 80% 左右的岩金矿山采用此法选金,选矿技术和装备水平有了较大的提高。 (一)破碎与磨矿 据调查,我国选金厂多采用颚式破碎机进行粗碎,采用标准型圆锥碎矿机中碎,而细碎则采用短头型圆锥碎矿机以及对辊碎矿机。中、小型选金厂大多采用两段一闭路碎矿,大型选金厂采用三段一闭路碎矿流程。 为了提高选矿生产能力,挖掘设备潜力,对碎矿流程进行了改造,使磨矿机的利用系数提高,采取的主要措施是实行多碎少磨,降低入磨矿石粒度。 (二)重选 重选在岩金矿山应用比较广泛,多作为辅助工艺,在磨矿回路中回收粗粒金,为浮选和氰化工艺创造有利条件,改善选矿指标,提高金的总回收率,对增加产量和降低成本发挥了积极的作用。山东省约有 10 多个选金厂采用了重选这一工艺,平均总回收率可提高 2% ~ 3% ,企业经济效益好,据不完全统计,每年可得数百万元的利润。河南、湖南、内蒙古等省(区)亦取得好的效果,采用的主要设备有溜槽、摇床、跳汰机和短锥

旋流器等。从我国多数黄金矿山来看,浮—重联合流程(浮选尾矿用重选)适于采用,今后应大力推广阶段磨矿阶段选别流程,提倡能收、早收的选矿原则。 (三)浮选 据调查,我国 80% 左右的岩金矿山采用浮选法选金,产出的精矿多送往有色冶炼厂处理。由于氰化法提金的日益发展和企业为提高经济效益,减少精矿运输损失,近年来产品结构发生了较大的变化,多采取就地处理(当然也由于选冶之间的矛盾和计价等问题,迫使矿山就地自行处理)促使浮选工艺有较大发展,在黄金生产中占有相当的重要地位。通常有优先浮选和混合浮选两种工艺。近年来在工艺流程改造和药剂添加制度方面有新的进展,浮选回收率也明显提高。据全国 40 多个选金厂,浮选工艺指标调查结果表明,硫化矿浮选回收率为 90% ,少数高达 95% ~97%; 氧化矿回收率为 75% 左右 ; 个别的达到 80% ~ 85% 。近年来,浮选工艺流程的革新改造以及科研成果很多,效果明显。阶段磨浮流程,重—浮联合流程等,是目前我国浮选工艺发展的主要趋势。如湘西金矿采用重—浮联合流程,进行阶段磨矿阶段选别,获得较好指标,回收率提高 6% 以上;焦家金矿、五龙金矿、文峪金矿、东闯金矿等也取得一定的效果。又如新城金矿,原流程为原矿直接浮选,由于含泥较高(矿石本身含泥高,再加采矿尾砂胶结充填强度不够,带入部分泥砂)使选矿指标连续下降。经考查试验,采用了泥砂分选工艺流程,回收率由 93.05% 提高到

核酸提取新技术

核酸提取新技术 核酸提取被用于许多分子生物化学试验和诊断,是克隆、转化、酶切、体外转录、扩增、测序等试验的第一个步骤。然而由于细胞内存在大量蛋白质、碳水化合物、原始样品中的代谢物以及其它污染物,提取高质量的核酸并非易事。现阶段的层析柱核酸提取方法有: 1、一种新的层析柱技术-双层柱技术 时间:2012年 人物: 美国科学家丁少峰教授和刘强教授 事件: 发明了一种新的层析柱技术-双层柱技术,以及基于该新双层柱的核酸提取方法,用来克服常用的基于硅胶提取和基于阴离子交换提取核酸两者的缺点,使核酸提取方法更加简单、快速、高效、可靠,特别是在血浆和尿液的液体活检中具有非常重要的应用价值13-14。 结构: 双层柱由2种膜组成:第一层为阴离子交换膜二乙胺(DEAE),第二层为二氧化硅膜 (Fig.1)。 原理: (1)样品中的核酸结合到第一层阴离子交换膜上,起核酸浓缩器的作用, (2)已结合的核酸从第一层膜洗脱, 然后结合到第二层二氧化硅膜, 这是因为采用了双功能洗脱/结合液, 也称为耦联液, (3)最终使用低盐缓冲液将游离核酸从第二层膜洗脱,获得目的产物 (Fig.2)。 优点: (1)特别适用于分离和纯化含有极度稀释的大容量的核酸样品,例如10mL血浆或50mL尿液; (2)游离的小片段DNA(80~250bp)回收率高,可比常规硅胶提取法高出4倍, 适用于血浆及尿液游离核酸的提取; (3)不需要蛋白酶处理; (4)提供更高纯度和更少抑制剂的核酸样品; (5)洗脱的核酸可直接用于下游应用, 包括焦磷酸化激活的聚合反应(Pyrophosphorolysis Activated Polymerization,PAP)和聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)、及二代测序等; (6)此外,本方法快速、简便,无需接触苯酚及氯仿等毒性强烈的有机溶剂,无需复杂繁琐的实验操作,操作全程可在短时间内完成。 以下为常用的两种方法。

c16全自动核酸提取仪操作说明

c16全自动核酸提取仪操作说明 仪器构造简介: 1 触控屏HID-Pro 320 2 仪器前门 3 样品盘适配器 4 LED指示灯 5 触摸感应器 1 带滤芯的枪头 2 收集管 3 枪头、洗脱管放置架 4 压板 5 样品槽(可直接放置试 剂板或加装适配器后放置 试剂条) 6 传送轨道 7 试剂条适配器

样品架穿孔工具 1 InnuPure接口 2 网络接口 3 USB接口 简易操作说明: 1.插上仪器电源线,打开仪器背部的电源开关,仪器前面LED指示灯显示红色,此时仪器 为待机状态。用手指轻触触摸感应器圆形键一秒钟(注意,不要使劲按),手指拿开后LED指示灯由红色变为绿色,此时仪器为工作状态。 开机后界面如下图所示:

Menu:菜单 Select protocol:选择程序 Tools:工具 Settings:一般设置 2.样品准备和纯化 1)样品盘放入样品架,打开夹板。 2)将试剂板放入样品槽。试剂板上的红线要 与样品槽上的红点对齐。 3)将条管适配器放入样品槽。同样适配器上 的红点要与样品槽上的红点对齐。

4)将试剂条放入样品槽。注意:有“AJ”字样的一头朝向样品盘上刻字的一边。 5)试剂条管放完后,放下压板。 6)放入枪头和收集管。注意:没放试剂条的位 置不要放。 7)将试剂条管第一和第三孔刺穿,可以使用穿 孔工具也可以使用干净的枪头。(“AJ”字样边为第一 孔) 8)将裂解后的样品加入第一孔。(具体操作详见 试剂盒说明) 9)准备好的样品盘放入仪器内,轻推,样品盘 会自动进入。

10) 根据起始样本选择合适的程序,点击开始即可。 11) 纯化完成后样品盘会自动退出,盖子盖好纯化产物放冰箱保存待用。 3. 软件功能介绍 ① 菜单: 设置新用户、设置开机密码等 ② 日期时间: 设置日期 时间 ③ 选择程序: 开始、导入、删除程序 ④ 工具: 自动校正、仪器初始化、磁力测试等仪器自检功能 ⑤ 一般设置: 用户管理、语言、更新等 ⑥ 版本信息

核酸的提取经验及原理总结

一、核酸 核苷酸单体聚合而成的生物大分子,是生物细胞最基本和最重要的成分。一般认为,生物进化即始于核酸,因为在所有生命物质中只有核酸能够自我复制。今天已知核酸是生物遗传信息的贮藏所和传递者。一种生物的蓝图就编码在其核酸分子中。核酸是1869年米歇尔(F.Miescher)在脓液的白细胞中发现的。他当时称之为核素。阿尔特曼(R.Altmann)于1889年认识其酸性后,定名为核酸。 二、核酸的分类和功能 核酸分为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)两大类。这两类核酸有某些共同的结构特点,但生物功能不同。 DNA贮存遗传信息,在细胞分裂过程中复制,使每个子细胞接受与母细胞结构和信息含量相同的DNA;RNA主要在蛋白质合成中起作用,负责将DNA的遗传信息转变成特定蛋白质的氨基酸序列。 核酸的基本结构单元是核苷酸,核苷酸含有含氮碱基、戊糖和磷酸3种组分。碱基与戊糖构成核苷,核苷的磷酸酯为核苷酸。DNA和RNA中的戊糖不同,RNA中的戊糖是D-核糖;DNA不含核糖而含D-2-脱氧核糖(核糖中2位碳原子上的羟基为氢所取代)。核酸就是根据其中戊糖种类来分类的,DNA和RNA的碱基也有所不同。 三、核酸的理化性质 RNA和核苷酸的纯品都呈白色粉末或结晶,DNA则为白色类似石棉样的纤维状物。除肌苷酸、鸟苷酸具有鲜味外,核酸和核苷酸大都呈酸味。DNA、RNA和核苷酸都是极性化合物,一般都溶于水,不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂,它们的钠盐比游离核酸易溶于水,RNA钠盐在水中溶解度可达40g/L,DNA钠盐在水中为10g/L,呈黏性胶体溶液。在酸性溶液中,DNA、RNA易水解,在中性或弱碱性溶液中较稳定。天然状态的DNA 是以脱氧核糖核蛋白(DNP)形式存在于细胞核中。要从细胞中提取DNA 时,先把DNP抽提出来,再把P除去,再除去细胞中的糖,RNA 及无机离子等,从中分离DNA 。 四、细胞裂解: (一)裂解原理在核酸提取过程中,细胞裂解是非常重要的。经典的裂解液几乎都含有去污剂(如SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20 等) 和盐(如Tris、EDTA、NaCl 等)。 盐的作用,除了提供一个合适的裂解环境(如Tris),还包括抑制样品中的核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏(如EDTA)、维持核酸结构的稳定(如NaCl) 等。去污剂则是通过使蛋白质变性,破坏膜结构及解开与核酸相连接的蛋白质,从而实现核酸游离在裂解体系中。裂解体系中还可能加入蛋白酶,利用蛋白酶将蛋白质消化成小的片段,促进核酸与蛋白质的分开,同时,也便于后面的纯化操作以及获得更纯的核酸。也有直接使用高浓度的蛋白质变性剂(如GIT、GuHCl 等) 裂解的,该方法已经成为了RNA 抽提的主流,却不是基因组DNA 抽提的主流。 (二)细胞的裂解方法

MATLAB 软件使用简介 轮廓线提取 实验2 图像轮廓线提取技术 实验3 RGB向量空间中的图像分割技术 实

MATLAB 软件使用简介 MATLAB 是一个功能强大的数学软件, 它不但可以解决数学中的数值计算问题, 还可以解决符号演算问题, 并且能够方便地绘出各种函数图形。MATLAB自1984年由美国的MathWorks公司推向市场,现已成为国际最优秀的科技应用软件之一。 一、MATLAB 的工作界面 启动MATLAB后, 出现MATLAB命令窗口,空白区域是MATLAB 的工作区, 在此可输入和执行命令。 二、 MATLAB 操作的注意事项 ●在工作区输入MATLAB命令后, 按下Enter键才能执行命令。 ●MATLAB 是区分字母大小写的。 ●如果不想显示结果,只要在所输入命令的后面加上一个分号“;”即可。 如:x= 2 + 3↙ x=5 x = 2 + 3 ; ↙不显示结果5 ●如果一个表达式一行写不下,可以在行尾键入“...”来换行。 如:q=5^6+sin(pi)+exp(3)+(1+2+3+4+5) ... -5+1/2-567 ●命令行与M文件中的百分号“%”标明注释。 三、MATLAB的变量与表达式 ●MATLAB的变量名 MATLAB的变量名是用一个字母打头,后面最多跟19个字母或数字。应该注意不要用MATLAB中的内部函数或命令名作为变量名。列出当前工作空间中的变量命令为: who 将内存中的当前变量以简单形式列出; whos 列出当前内存变量的名称、大小、类型等信息;

clear 清除内存中的所有变量与函数。 ● MATLAB 常用的预定义变量 ans :保存计算结果的缺省变量;Inf 或inf :无穷大; i 或j pi :圆周率π。 ● MATLAB 的运算符 数学运算符:+,-,*, \(左除), / (右除) , ^ (乘幂) 关系运算符:<, >, <=, >=, = =(等于), ~= (不等于) 逻辑运算符:&(逻辑与), |( 逻辑或), ~( 逻辑非) ● MATLAB 的表达式及语句 表达式由运算符、函数、变量名和数字组成的式子。MATLAB 语句由变量、表达式及MATLAB 命令组成,用户输入的语句由MATLAB 系统解释运行。MATLAB 语句的2种最常见的形式为: 形式1:表达式 形式2:变量=表达式 在第一种形式中,表达式运算后产生的结果如果为数值类型,系统自动赋值给变量ans ,并显示在屏幕上。 例1:用两种形式计算3 6sin 5e ++π算术运算结果。 解:形式1: 5^6+sin(pi)+exp(3) ↙ ans = 1.5645e+004 形式2: a=5^6+sin(pi)+exp(3) ↙ a = 1.5645e+004 例2:已知矩阵 ?? ? ???=???? ??=22 11 ,2121B A ,对它们做简单的关系与逻辑运算 解:A=[1,2;1,2]; ↙ B=[1,1;2,2]; ↙ C=(A

核酸提取的一些常规方法

1. 乙醇沉淀乙醇沉淀乙醇沉淀乙醇沉淀DNA原理是什么原理是什么原理是什么原理是什么????乙醇能够消除核酸的水化层,使带负电荷的磷酸基团暴露出来。Na+之类的平衡离子能够与这些带电基团结合,在沉淀形成部位降低多核苷酸链之间的排斥作用。因此只有在阳离子的量足以中和暴露的磷酸残基的电荷时才会发生乙醇沉淀。 最常用的阳离子:1)醋酸铵:贮存液10.0mol/L 终浓度 2.0~2.5mol/L 常用于减少多余的杂质(如DNTP及多糖)与核酸的共沉淀。例如在2mol/L醋酸铵存在的情况下连续两次DNA沉淀可从DNA制品中除去>99%的dNTP。在通过琼脂糖酶消化琼脂糖之后沉淀核酸时,使用醋酸铵也是最佳选择,这种阳离子可以减少寡糖消化产物共沉淀的可能性。然而若用沉淀的核酸进行磷酸化时,就不要用醋酸铵沉淀核酸,因为铵离子能够抑制T4噬菌体多核苷酸激酶。2)氯化锂:贮存液8.0mol/L 终浓度0.8mol/L 常用于需高浓度乙醇进行的沉淀(如沉淀RNA)。LiCl在乙醇溶液中的溶解度很高而且不随核酸共沉淀。小分子RNA(如tRNA及5S RNA)在高离子强度下(没有乙醇时)是可溶的,而大分子RNA则不溶。可以利用这个差异在高浓度LiCl(0.8mol/L)中纯化大分子RNA。3)氯化钠:贮存液 5.0mol/L 终浓度0.2 mol/L (0.2 mol/L)用于DNA样品中存在SDS时。这种去污剂在70%乙醇中仍为可溶。4)醋酸钠:贮存液 3.0mol/L(ph5.2)终浓度0.3 mol/L (0.3mol/L,ph5.2)在DNA和RNA的常规沉淀中最为常用。 2. 乙醇沉淀乙醇沉淀乙醇沉淀乙醇沉淀DNA和异丙醇沉淀和异丙醇沉淀和异丙醇沉淀和异丙醇沉淀DNA的区别是什么的区别是什么的区别是什么的区别是什么???? 异丙醇和酒精都是有机溶剂,一般来讲,提取质粒的时候一开始都要用异丙醇沉淀,因为异丙醇沉淀的效果要好一些,如二楼所讲,但最后大多用酒精沉淀,因为酒精容易挥发,对下游的实验影响小。异丙醇比较疏水,能很更好地沉淀核酸,用乙醇的目的是去盐,它比异丙醇更亲水,所以能去掉一些盐离子。有时还用70%的乙醇洗样品也是为了增加盐的溶解度。在沉淀核酸时可用乙醇与异丙醇,乙醇的极性要强于异丙醇,所以一般用2倍体积乙醇沉淀,但在多糖、蛋白含量高时,用异丙醇沉淀可部分克服这种污染,尤其用异丙醇在室温下沉淀对摆脱多糖、杂蛋白污染更为有效。异丙醇沉淀核酸时,高浓度盐存在将使大量多糖存在在溶液中,从而可达到去多糖的作用。但高浓度的盐存在会影响核酸的进一步操作,因此必须用乙醇多次洗涤脱盐。 异丙醇沉淀核酸:优点:为所需容积小且速度快,适用于浓度低,而体积大DNA样品的沉淀。0.54~1.0倍体积的异丙醇可选择性沉淀DNA和大分子rRNA和mRNA;但对5sRNA、tRNA和多糖产物不产生沉淀,一般不需要在低温条件下长时间放置。缺点:易使盐类(如NaCl、蔗糖)与DNA共沉淀;在DNA沉淀中异丙醇难以挥发除去,所以常规需要用70%的乙醇漂洗DNA沉淀数次。 乙醇沉淀核酸:沉淀DNA乙醇是首选的有机溶剂,对盐类沉淀少,DNA沉淀中所含的衡量乙醇易蒸发去处,不影响以后的实验。在适当的盐浓度下,2倍样品容积的95%乙醇可有效沉淀DNA,对于RNA则需要将乙醇量增加至2.5倍. 缺点是总体积较大。需在-20度放置很长时间,30分钟-1小时。同样需要70%乙醇洗涤 “蛋白质的变性”是指蛋白质分子中的次级键被破坏。主要是氢键和离子键。甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂可以提供自己的羟基或羰基上的氢或氧去形成氢键,从而破坏了蛋白质中原有的氢键,使蛋白质变性。而引起蛋白质沉淀的原因一方面是由于甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂加入水中使溶剂介电常数降低,增加了相反电荷的吸引力,另一方面是因为这些有机溶剂是强亲水试剂,争夺蛋白质分子表面的水化水,破坏蛋白质胶体分子表面的水化层而使分子聚集沉淀。

中药提取技术与酶法提取

中草药所含成分十分复杂,既有有效成分,又有无效成分和有毒成分。为了提高中草药的治疗效果,就要尽最大限度提取有效成分,去除无效成分及有毒成分。因此,中草药提取对于提高中药制剂的内在质量和临床疗效最为重要。但常用的提取方法(如煎煮法。回流法、浸渍法。渗漉法等)在保留有效成分,去除无效成分方面,存在着有效成分损失大、周期长、工序多。提取率不高等缺点。近10年来,在中药提取方面出现了许多新技术、新方法,这些新技术和方法的应用,使得中草药提取既符合传统的中医理论,又能达到提高有效成分的收率和纯度的目的。本文就这方面作一综述。 1. 超临界流体萃取技术 超临界流体萃取(简称SC FEFE)是一种以超临界流体(简称SCF)代替常规有机溶剂对中草药有效成分进行革取和分离的新型技术,其原理是利用流体(溶剂)在临界点附近某区域(超临界区)内与待分离混合物中的溶质具有异常相平衡行为和传递性能,且对溶质的溶解能力随压力和温度的改变而在相当宽的范围内变动,利用这种SCF作溶剂,可以从多种液态或固态混合物中萃取出待分离组分。常用的SCF为CO。,因为CO。无毒,不易燃易爆,价廉,有较低的临界压力和温度,易于安全地从混合物中分离出来。超临界CO。萃取法与传统提取方法相比,最大的优点是可以在近常温的条件下提取分离,几乎保留产品中全部有效成分,无有机溶剂残留,产品纯度高,操作简单,节能。 廖周坤等用不同浓度的乙醇作夹带剂,对藏药雪灵芝进行了总皂苷粗品及多糖的苹取试验,与传统溶剂萃取工艺相比较,收率分别提高至旧.9倍和 1.62倍。何春茂、梁忠云利用超临界CO。卒取技术从黄花蒿中革取所得的萃取物中杂质(蜡状物)含量低,青蒿素提纯精制简单,收率高产品质量好。雷正杰等利用超临界CO。流体萃取技术,对厚朴的有效成分进行萃取和分离,革取物为淡黄色膏状物,经分析该萃取物由厚朴酚等11个化学成分组成,其中厚朴酚和厚朴酚的相对含量高达46.81%和45.00%。葛发欢等探讨了从黄山药中萃取薯预皂素的最佳条件,同时进行了中试放大,证明应用超临界CO。萃取薯预皂素进行工业化生产是可行的,与传统的汽油法相比较,收率提高15倍,生产周期大大缩短,避免使用汽油有易燃易爆的危险。葛发欢等研究了超临界CO。萃取柴胡挥发油和皂苷的工艺,STh-CO。法提取柴胡挥发油,与传统水蒸气蒸馏法相比较,能大大提高收率,缩短提取时间,而挥发油组成一致,只是各成分含量有差异。原永芳等通过五因素一四水平正交试 验法,用超临界流体萃取技术对川穹的挥发油萃取条件进行了优化选择,结果最佳萃取条件为压力34.smPa,温度60℃,改性剂乙醇0.3ml,静态苹取时间10min,动态萃取量10ml,以水作为吸收。与水蒸气蒸馏法相比较,该法具有耗时少,提取安全等优点。 SCFE技术对于提取分离挥发性成分、脂溶性物质、高热敏性物质以及贵重药材的有效成分显示出独特的优点,但SCFE设备属高压设备,一次性投资较大,运行成本高,因此这一技术目前在工业生产中还难以普及。 2. 超声提取技术 超声提取技术的基本原理主要是利用超声波的空化作用加速植物有效成分的浸出提取,另外超声波的次级效应,如机械振动、乳化、扩散。击碎、化学效应等也能加速欲提取成分的扩散释放并充分与溶剂混合,利于提取。与常规提取法相比,具有提取时间短、产率高、

中药提取技术

中药提取技术 1.1.1 概述 中药有效成分的提取是中药生产过程重要的单元操作,其工艺特点、工艺流程的选择和设备配置都直接关系到被提取有效成分的数量和质量,从而进一步影响到产品的质量、经济效益等。因此探明中药提取的机理、优化提取工艺参数等逐渐成为中药生产和研究的重点内容。 广义的中药提取也称为分离,是指从中药材原料开始,经过一道或多道操作工序,最终的到所需要的药物或其半成品的全过程。按照分离手段的不同,溶质分离方法重要包括机械方式和化工传质方式。机械方式即是榨取发法,通过机械方法使含液固体组织发生体积变化和破裂,进而分离液体和固体。化工传质方式是用液体溶媒从固体药材中浸出有效成分的操作过程,称为浸提、浸出或浸取,它是现代中药生产的重要提取方法。由于中药材的药性、有效派成分的不同,所适用的浸取方式显然不同,选择合适的浸取方法与工艺对浸出生产是保持中药有效成分的生物活性非常重要。目前浸取生产的传统方法按固液接触状态可分为静态方式和动态方式,具体有煎煮法、浸渍法、渗漉法、回流法等[1]。 1.1.2 煎煮法 煎煮法是以水为提取溶剂,将药材加热煮沸一定时间而获得煮出液,并重复进行若干次,以提取其有效成分的一种传统方法,又称煮提法或煎取法。 本质上,水煎煮法是一种强化的浸渍提取方法,只是操作温度较高,达到了溶媒沸点,是中药最早、最常用的制剂方法之一。但水煎煮法的操作工艺基本上是依据经验指导,其工艺参数,如浸泡及煎煮时间、次数、煎出量等均无最佳操控标准,往往导致产品质量或疗效的显著性差异;另外,水作为一种溶媒并不能完全提取所有有效成分;实际上现代中药理论研究表明,许多中药的生物活性对加热都有不同程度的敏感,因此使煎煮法的应用受到一定限制。 1.1.3 浸渍法 浸渍法属于静态提取方法,是在常温或在加热条件下浸泡药材,使其所含的有效成分被浸出的方法。 通过浸渍法所得到的浸出液在不低于浸渍温度下能较好地保持其澄清度;操作简单易行,但所需时间较长,溶剂用量大,出液系数高,有效成分浸出率低;另外,浸渍状态下固液间通常呈静止状态,溶剂的利用率低,有效成分浸出不完全。 1.1.4 渗漉法 将药材粉碎后装入特制的渗漉筒或渗漉罐中,从渗漉罐上方连续通入溶媒,使其渗过罐内药材积层,发生固液传质作用,从而浸出有效成分,自罐体下部出口排出浸出液,这种方法叫渗漉法。由于浸出液浓度在渗漉过程中不断提高而密度增大,逐渐向下移动,由上层溶剂或更稀浸出液置换其位置,连续造成较大浓度差,使扩散能较好地进行。 (1).渗漉的特点: 渗漉提取过程类似多次浸出过程,浸出液可以达到较高的浓度,其浸出效果好。 不需要加热,可常温操作。 溶剂用量少,过滤要求低,简化了渣液分离操作过程。 操作技术要求高,否则影响提取效率。 工艺操作周期较长。 (2)渗漉法工艺流程及工作目的 流程: 药材粉碎浸润装筒,排空气浸渍渗漉 渗漉各操作工序目的: 渗漉提取前药材需经适当粉碎才能装筒。通常,渗漉提取的药材颗粒多为中等粒度以上,不宜过细,负否则增加吸附性,溶剂将难以顺利通过,不利于溶质的浸出,生产中药材切片厚度一般为0.5 mm。颗粒过粗则会减少接触面积,降低浸出效率;浸润的目的在于装筒前就使药材组织充分膨胀,避免装罐后堆积过紧或膨胀不均,防止溶剂的流动不畅或不均匀通过,影响提取效果,通常浸润溶剂量为药材量的0.7~1倍,充分均匀后放置时间为1~4 h;装筒时要注意压力要均匀,松紧合适。装的过松,溶媒通过速度过快,造成短路,浸提效果不好,且占用容积大,溶媒耗用多。装的过紧会使通道阻塞而使渗漉无法进行;扩散的效果与时间密切相关,故渗漉前的浸渍是非常必要的。装筒完毕后,自上部缓缓通入溶媒,则罐内药粉间的残存空气便可由罐底部打开的出口排出,至没有气泡为止关闭出口,继续加溶媒至高出药层几厘米处,加盖放置24~28h。浸渍时要尽量排出空气,并阻止空气重新渗入。否则残存气泡将冲挤药层,使药粉层原有的松紧改变,产生空隙,溶媒由空隙流过。渗漉过程中,液面应始终保持高于药层,否则表层药粉会产生干涸裂缝,溶媒将同样由空隙流过而影响渗漉。 1.1.5 回流法 回流法是以乙醇等易挥发的有机溶剂不提取溶剂,对浸出液加热蒸馏,其中挥发性溶剂馏出后又被冷凝,重

核酸提取仪如何选择及常见误区

核酸提取仪如何选择及常见误区 伴随着大健康基因检测时代的来临以及分子生物学技术的大发展,核酸是分子实验最基本的模板,如何选择一款合适的核酸提取仪就成为了分子实验室最关心的事情,很多人容易陷入选择误区,下面举例说明最常见的二种选择误区: 误区一、核酸提取仪和工作站的区别及选择误区 很多工作站的厂家在推销工作站的时候经常和客户说,工作站提核酸是全自动的,而核酸提取仪是半自动的,客户也主观认为工作站可以移液,提取,什么都能干,好像只要把样本放进去,什么都不用管就可以得到想要的核酸了,等到工作站到位的时候发现,实际情况并不是那样,不仅没想象中的那么好,甚至连基本的提取核酸都困难,那么原因是什么呢? 第一个问题,开盖问题,采血管、唾液保存管、二维码冻存管等的盖子结构都不一样,大小也不一样,厂家也不一样,工作站如何自动化开盖?这个问题就解决不了。 第二个问题,条码录入问题,条形码和二维码,还有一些手动贴的标签和手写的标签,所以扫码还是手动为主,很难自动化。 第三个问题,加液自动化,工作站可以实现自动加试剂,好像是个优势,但是加一个96深孔板需要花15~30分钟左右的时间,而提取一般需要六种试剂,也就是六个板子,大约1.5小时时间,提取试剂很多含有高浓度的乙醇,这么长时间,乙醇浓度会发生改变,影响提取效率和灵敏度,再说了,很多提取仪的厂家(比如百泰克,百源基因等)都有配套预装试剂盒,不需要加液,自动加试剂这个功能就是个鸡肋。提取仪加自动移液工作站的配置就是个套路,通常见某飞公司为了弥补没有预装试剂盒的缺陷,而给客户做的方案。 第N个问题,工作站提取核酸还要解决比如加热,震荡,混匀,磁吸等等问题,每个都是一个模块,你先确定你买的工作站有没有这个模块,还要考虑震荡是否能达到充分混匀的效果,磁珠回收率的问题,有没有配套试剂盒的问题,仪器编程是否简单以及是否有应用工程师能帮你优化提取条件等等问题,毕竟提取高质量的核酸不仅仅需要硬件还需要试剂配套和程序优化。

植物提取设备的技术优势介绍

植物提取设备的技术优势介绍

我们平时都喜欢劝家人多吃蔬菜水果,那是因为蔬菜水果对肝脏的保护功效。蔬菜中含有丰富的维生素、矿物质、纤维等,对于肝脏有保护作用。专家指出,一些黄绿色蔬菜中含有的胡萝卜素更有预防肝癌的作用,比如西红柿、胡萝卜等,因此,平时可以适当的多吃,但也要注意全面、均衡饮食,注意搭配。其实,除了蔬菜和水果之外,很多植物提取物也具有这样的功效。 哪些提取物可以保护你的“小心肝”呢? 鼠李皮提取物

鼠李皮是一种泻药,通常用于结肠问题或便秘,可以将人体中的代谢废物排出体外。不过需要注意的是,鼠李皮提取物不可长时间使用,不然容易导致身体脱水。 水飞蓟素 水飞蓟素是从一种名为乳蓟植物中提炼而成的抗氧化剂,它可以稳定肝细胞膜,维持肝细胞的完整性,使毒素无法穿透破坏肝脏,并能加速合成肝脏细胞的DNA(脱氧核糖核酸),能抑制肝癌、前列腺癌、乳癌及子宫颈癌细胞的生长和分化。 姜黄素 姜黄是一种种广受欢迎的富含抗氧化剂草药,在烹饪中也被广泛使用。姜黄素有很强的抗炎特性,经常被用来帮助治疗心脏病、消化系统紊乱和控制血糖水平。脂肪肝影响着三分之一的美国人,姜黄素作为饮食和锻炼的补充,可以大大减少脂肪肝和肝损伤,这让它在美国极受欢迎。这种功能活性成分还能通过刺激胆汁分泌和调节酶水平,从而帮助人体控制胆固醇代谢。 这些物物质如何提取呢? 可以应用植物提取进行提取、分离、纯化。德兰梅勒植物提取设备提取纯化功能齐全,提取液可进行有效的浓缩,有机溶剂可回收。此设备还可用于低温浓缩提取,有效减少热敏性有效成分的丧失。系

统与物料接触材质均为卫生级材质,可定期使用巴士灭菌,进行灭菌处理。 提取浓缩机组浓缩系统与药接触部位采用了卫生级304材料制造,符合国家药品监督管理局关于《药品生产质量管理规范》中有关设备条文的要求及国家相关标准的要求。设备符合实验室条件下使用要求,便于操作、维护。 德兰梅勒纯化分离设备还可用于高等院校、科研机构、医院等作为新药提取、新工艺技术参数的确定、中间试验、新品种研制、贵重药材提取、和药液浓缩之用。同等处理量情况下,该纯化分离设备可根据需求对目标产物进行有效的提纯分离。同时,纯化分离设备料液存留时间短、提取效率高、节省投资费用。

核酸提取方法

核酸提取方案 一、DNA提取 1.向离心管中加入200μl样品, 200μl消化液,涡旋震荡15秒 2.加入蛋白酶K 10μl混匀(RnaseA根据需要决定是否添加) 3.56℃孵育15分钟,短暂离心,将管壁上的溶液收集到管底 4.加入250 μl无水乙醇,涡旋震荡15秒,室温放置5分钟,短暂离心,将管壁上的溶液收集到管底 5.将步骤4中所得溶液加入到已装入收集管(RNaseFree Tube 2 ml)的吸附柱(RNaseFree Column RS)中,若一次不能加完溶液,可分多次转入,8,000 rpm离心1分钟6.向吸附柱中加入500 μl洗液(使用前检查是否已加入无水乙醇),8,000 rpm 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中 7.向吸附柱中加入500 μl无水乙醇,8,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中 8.12,000 rpm(13,400×g)离心3分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干 9.将吸附柱置于一个新的收集管(RNaseFree Tube 1.5 ml)中,向吸附柱膜的中间部位悬空加入20-150 μl Buffer RE或灭菌水,室温放置2-5分钟,10,000 rpm离心1分钟,收集核酸溶液 二、RNA提取 1.向离心管中加入200μl样品,加入500μl裂解液,充分混匀,静置3~5min(有杂质离心) 2.将吸附柱套入收集管,样品处理液转入吸附柱中(尽量不要吸到颗粒杂质,以免堵塞柱子),4℃条件下12000rpm,离心1min 3.弃去收集管中液体,加入500μL洗液,4℃条件下12000rpm,离心1min 4.重复步骤3; 5.弃去收集管中液体,瞬离除去残液; 6.将吸附柱转入新的无RNA酶的1.5ml EP管中,向柱中央加入20-30μL洗脱液,室温静置2min溶解RNA, 4℃条件下12000rpm,离心1min,管中液体即为模板RNA

核酸提取常见试剂的作用原理复习课程

核酸提取常见试剂的 作用原理

异硫氰酸胍 强用力的蛋白质变性剂,能迅速溶解蛋白质,导致细胞结构破碎,核蛋白由于其二级结构的破坏消失而迅速与核酸分离。胍盐是破坏蛋白质三维结构的离液剂,在通常使用的蛋白质变性剂中作用最强的是异硫氰酸胍,它们可以使多数蛋白质转换成一随机的卷曲状态。含有强力的阴离子和阳离子基团,它们可以形成较强的氢键。在还原剂存在的情况下,异硫氰酸胍可以断裂氢键,而去垢剂,如SDS存在的情况下,可以破坏疏水作用。 盐酸胍、尿素 盐酸胍是一个核酸酶的强抑制剂,它并不是一种足够强的变性剂,可以允许完整的RNA从富含RNase的组织中提取出来。 4-8M可断裂氢键,有两种可能机制:1变性蛋白和盐酸胍、尿素优先结合,形成变性蛋白-变性剂复合物,当复合物被除去,从而引起N-D反应平衡向右移动,随着变性剂浓度增加,天然状态的蛋白不断转变为复合物,最终导致蛋白质完全变性;2盐酸胍、尿素对氨基酸的增溶作用,能形成氢键,当浓度高时,能破坏水的氢键结构,结果盐酸胍、尿素就称为非极性残基的较好溶剂,使蛋白质内部的疏水残基伸展和溶解性加强,盐酸胍、尿素引起的变性往往是不可逆的。 高浓度尿素使蛋白质变性并抑制Rnase活性 十二烷基肌氨酸钠 使蛋白质解体变性 巯基试剂 1防止蛋白质或酶等(如辅酶A)分子中SH基团氧化成二硫键,2在某些酶反应过程中维持体系的还原环境。DTT,DDTE、巯基乙醇应用最广,谷胱甘肽也常应用,由于他是生物体内的还原剂,同时氧化后能被谷胱甘肽还原酶原位释放。DNA提取中,常使用巯基乙醇,维持缓冲液的还原环境,防止多酚类氧化,由于具有一定的毒性,浓度不应高于2%。 巯基乙醇 β-巯基乙醇的主要作用是破坏RNase蛋白质中的二硫键(肽和蛋白质分子中的半胱氨酸残基中的键)。

图像与视频提取技术综述

https://www.wendangku.net/doc/2715545070.html,
图像与视频提取技术综述1
韩 峰,李仁发,曾庆光,刘 彦
湖南大学计算机与通信学院,湖南长沙 (410082)
E-mail: https://www.wendangku.net/doc/2715545070.html,@https://www.wendangku.net/doc/2715545070.html,
摘要:近年来,图像与视频提取技术逐渐成为图像处理领域的研究热点,也是机器视觉、模 糊识别等系统开发中的关键技术之一。 本文回顾了图像与视频提取技术的发展过程, 并归纳 了其主要的研究方向。 在总结了图像与视频提取领域中重要研究活动的基础上, 提出了图像 与视频提取的两大研究思路, 给出了相关的评估标准。 探讨了现有研究的不足之处及其原因, 并提出解决方案构想。最后,展望了图像与视频提取技术的发展前景和面临的挑战。 关键字:α-通道,Trimap,图像提取,视频提取,可重构计算 中图法分类号:TP391.41
1. 引言
当人们在阅读书籍、 欣赏图画、 观看影视作品时, 会有意识地对需要获得的文字、 物体、 人物等信息不断地进行提取,并将该类信息提供给大脑进行对比、分析、记忆。其实,由计 算机系统完成的图像与视频提取和上面过程及其相似, 只不过计算机处理离散数字信息, 而 人眼提取的是连续的模拟信息。 虽然图像与视频提取技术研究是建立在数学和概率统计表示 法的基础上,但相比之下,人的自觉和分析在技术的选择上起到了决定作用[1]。 图像与视频提取技术并不局限于对人眼视觉功能的模仿, 更是对人类认识、 分析手段的 拓展。在医学领域,对 X 光片、CT 片上的骨骼和组织图像的提取比对,可以使医生更准确 和方便地确诊; 在天文学领域, 对航空及卫星图像的提取便于提高科学家识别天体和探索宇 宙的能力;特别是在电影电视领域,影视特技、现实中不存在的奇幻景观的制作都依赖于图 像提取合成技术。此外,在自动字体识别、机器视觉、军事识别、指纹自动处理和血样分类 处理等多个方面都不同程度地运用了图像提取技术。 图像与视频提取技术源自于电影和视频产品的发展[2],比如在电影的制作中经常需要将 在电影棚内拍摄片段中的演员合成到另一个环境中。随后 20 年间,电影制作要求的不断提 高, 以及对图像与视频提取技术领域越来越多的需求, 促使大批学者对图像与视频提取技术 展开了深入和系统的研究。其中,最具影响力的研究是由 Porter 和 Duff 提出的 α 通道的概 念[3],对图像与视频提取技术的离散特性进行了规范,为这一研究领域奠定了基础,使其成 为图像处理领域一个较独立的重要分支。近 10 年来,研究人员不断改进拍摄技术并引入统 计学知识,使图像与视频提取技术研究领域不断地得到充实。
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基金项目:湖南省科技厅计划项目“视频路由关键技术” (项目编号:2006GK3098) 。
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提取技术介绍

企业简介 河北宝恩生物科技有限公司是专业从事天然植物提取物的研发、生产及销售的高科技企业。公司成立于2004年,占地面积38000平米,现有职工150余人,其中80%具有大专以上学历。公司成立以来,我们以“回归自然,健康人生”为企业宗旨,坚持人才战略、科技兴企战略、大营销大平台销售战略和扎扎实实做好实体产业四大发展战略。不断创新技术和企业管理,实现了企业与国内多家科研院校的强强联合,为企业的技术创新,人才培养,企业发展壮大奠定了基础,增添了活力。 公司产品包括葡萄籽系列、大豆异黄酮系列、紫花苜蓿系列、银杏叶红景天等标准化植物提取系列产品60余种,以及用于提取分离的吸附树脂系列产品,中空纤维超滤膜系列产品等。公司投资4500万元建成了符合GMP要求的天然产物提取生产线,拥有现代化的提取浓缩、层析、膜过滤、喷雾干燥设备,具备一个中试生产车间和一个现代化的实验室,;同时有吸附树脂生产车间及抗污染超滤膜中试车间. 公司严格按照ISO9001:2008质量管理体系认证标准,现在年可生产各种提取物400吨;大孔吸附及离子交换树脂3000吨。 公司先后与北京大学医学部、中科院过程研究所、国家天然药物工程研究所、中国药科大学、沈阳药科大学等单位有着广泛的合作。并完成了国家科技支撑项目“中药产业区域发展特色产品研究开发、高含量苜蓿皂甙和叶蛋白产业化、青蒿素的提取及分离、银杏叶葡萄籽等植物高生物活性成分、高纯度花生衣红色素研制,抗污染超滤膜研制\”等十几个项目的开发研制。中科院过程研究所天然产物研发中试基地、国家中医药管理局机关事务局天然产物中试基地、北京化工大学天然产物中试基地、天津大学化工学院膜技术联合研究中心在我公司挂牌。经过多年来的企校合作、技术创新与研发,公司获得了河北省高新技术企业称号和沧州农业开发经营龙头企业称号,并多次获得农业部、科技部、河北省政府的奖励与支持。 为满足客户对植物及中药提取物的GMP认证要求,公司于2012年与百善唐威(沧州)药业有限公司合作,以该公司GMP提取车间为依托,以我公司的技术为支撑, 从而确保能为我们的顾客提供更高科技含量、更高品质的产品和服务。 我们敬业,我们专业,我们是植物提取产品的生产者。我们拥有强大的产品研发团队,标准化的质量管理体系,科学的生产工艺流程,完善的销售和服务网络。我们愿与国内外的合作伙伴共同奋斗共同发展,为人们更美丽更健康更幸福的生活而不懈努力和竭诚贡献。

植物提取技术大全

植物提取技术全介绍 超声循环提取技术 (2) 超声波提取萃取器系列 (2) 植物提取物:修整前进步伐前景利好 (4) 陕南目前最大植物提取生产线城固县投产 (6) 植物提取物出口快速增长拉动产业升级 (6) 湖州荣凯植物提取有限公司 (7) 美国从植物中提取胰岛素 (7) 浙江金华康恩贝生物制药有限公司 (7) 我国植物提取物行业科技发展现状 (8) 我国植物提取物市场分析 (18) 植物提取物出口突破4亿美元 (24) 植提标准谁来统?? (25) 2006年7月份提取物企业出口排名 (27) 浙江省植物提取行业 (29) 陕西方舟天然营养制品有限公司 (30) 2007年上半年提取物出口形势分析及展望 (32) 业内专家:植物提取物产业发展须突破四大瓶颈 (35) 中国原料药因环保问题涨价波及印度制药业 (36) 青蒿素企业困境:WHO采购新规和产能过剩 (37) 植物提取物:修整前进步伐前景利好 (38) 我国广义生物产业产值已近5000亿元 (40) 咖啡有助于防止蛀牙 (41) 枳实提取物外经贸行业标准 (42) 更多资料摘自https://www.wendangku.net/doc/2715545070.html,/

超声循环提取技术 超声循环提取技术是中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室的科研人员,针对我国目前在天然产物提取过程中存在的突出问题,在海洋“863”和国家“九五”科技攻关项目的支持下,研究开发出的具有自主知识产权、国内国际先进水平的专利技术,是将超声波强化提取技术运用在传统天然产物提取生产领域中的革命性技术突破。 超声波具有“空化现象”、“机械振动”以及“热效应”等特性,“空化现象”可产生瞬间几千个压力,使提取介质中的微小气泡压缩、爆裂,破碎被提取原料和细胞壁,加速天然药用成份的溶出,“机械振动”和“热效应”进一步强化了溶出成份的扩散,使药用成份在提取介质中快速达到浓度平衡,可大大缩短提取时间,提高产品质量,是当前浸出提取中最具前途的提取技术。中科院过程工程所的研究人员采用超声循环提取技术解决了超声波提取工程放大题,攻克了超声波应用于提取生产的最大障碍。“弘祥隆”高效超声循环提取机就是在此专利技术基础上研制开发的新一代中药材及其它天然产物高效提取装置。 超声波提取萃取器系列 超声波提取(也称为萃取)以其提取温度低、提取率高、提取时间短的独特优势被具有创新意识者应用于中药材 和各种动、植物有效含量的提取,是替代传统剪切工艺方法实现高效、节能、环保式提取的现代高新技术手段。 本公司产品采用了全数字式技术,数显时钟控制、数显功率可调、数显低频调制。 超声波提取优点 1.提取效率高:超声波独具的物理特性能促使植物细胞组织破壁或变形,使中药有效成分提取更充分,提取率比传 统工艺显著提高达50—500%; 2.提取时间短:超声波强化中药提取通常在24—40分钟即可获得最佳提取率,提取时间较传统方法大大缩短2/3以 上,药材原材料处理量大; 3.提取温度低:超声提取中药材的最佳温度在40—60℃,对遇热不稳定、易水解或氧化的药材中有效成分具有保护 作用,同时大大节能能耗; 4.适应性广:超声提取中药材不受成分极性、分子量大小的限制,适用于绝大多数种类中药材和各类成分的提取; 5.提取药液杂质少,有效成分易于分离、纯化;

法医实验室几种常用DNA提取方法及比较

法医实验室几种常用DNA提取方法及比较 (一)Chelex100法 原理:Chelex100是一种螯合树脂,由苯乙烯、二乙烯苯共聚体组成,含有成对的亚氨基二乙酸盐离子,起着螯合基团作用,对多价金属离子有极强亲和力。在低离子强度、碱性及100℃煮沸条件下,可以使细胞膜裂解,并使与DNA结合的蛋白质变性,DNA游离。检材基质中一般含有大量金属离子,在低离子强度及加热条件下,金属离子可以辅助脱氧核糖核酸酶降解DNA,也可以抑制PCR反应,所以在提取DNA时,加入Chelex100,螯合了金属离子,防止了DNA降解,提高了PCR扩增成功率。 方法:剪取适量血斑、精斑、汗斑、鼻涕斑、指甲、毛根、软组织等等生物检材,置于0.5ml 离心管内,加入适量纯水,室温浸泡,13,000rpm离心5min,上清丢弃,管底留约20μl左右液体及检材基质,加入100-200μl 5%Chelex100(有时需加适量PK)56℃15min至数10小时不等,100℃8min,13,000rpm离心5mim,上清备用。 评述: Chelex100法已经成为DNA提取的基本方法,Chelex100法是万能的。目前,我们一切纯化方法都在Chelex100法的基础上进行,Chelex100法又不是万能的。 Chelex100法提取前的检材清洗非常重要,因为现场检材往往均较脏,脏东西可以抑制PCR 反应,所以往往不止清洗一次,清洗检材时可能损失部分DNA。所以应平衡清洗抑制剂与损失DNA之间的关系。特别强调清洗时应“把根留住”,很多情况下已知样本DNA检验失败的原因是把根没有留住。DNA检验时还有另外一句名言:“一个萝卜一个坑”,防止混乱检材。肝素抑制PCR反应,血红素抑制PCR反应,所以长时的浸泡、多次清洗往往可能洗除肝素及血红素。在已知样本多次无检验结果疑为肝素抗凝的情况下,多洗是检验成功所必须的。血红素对普通Taq酶的抑制作用是明显的,而目前mtDNA扩增一般用普通Taq酶,所以同一样品除进行STR检验外尚需进行mtDNA检测时,尽量去除干净血红素,显得尤为重要。现场提取毛发或样本毛发,用毛根进行STR检验时,纯水清洗也非常重要,如果没有清洗干净,毛根DNA本身很少,很易检出为混合型。因为现场毛发及样本毛发很易粘附另一人成份。毛根清洗的特点为振荡洗涤,不离心,多换水。 清洗后检材中加入5%Chelex100量视检材而定。检材参考加入量 0.5×0.5cm血斑150ul-200ul 二步法精斑100ul 毛根10ul 烟头30-50ul 对于组织,难溶检材,有疑问检材,均可加入终浓度为100ug/ml左右PK,有时间隔一段时间,补加适量PK,PK(蛋白水解酶K)作用最佳pH为8.0。 5、加入Chelex100后,56℃浸泡时间,血斑≥15min;组织≥30min,二步法精斑≥1h。 6、PCR扩增前应离心。PCR扩增时不应吸入Chelex100,因为Chelex100为PCR抑制剂。 7、Chelex100使用浓度5%,有些人用10%,有些人用20%,各人爱好。配制好5%Chelex100 pH应在10—11之间,否则应丢弃,不应人为调整Chelex100悬液pH值。 (二)有机法 原理:有机法提取DNA一般是指用平衡酚(又叫饱和酚)、氯仿等按不同比例混合,采用不同方法提取DNA。DNA易溶于水,不溶于有机溶剂,蛋白质分子表面带有亲水性基因,很容易进行水合作用,并在表面形成一层水化层,使蛋白质分子能够顺利地进入到水溶液中,形

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