生物分离工程答案
生物分离工程答案
【篇一：生物分离工程答案卷】
-解吸…），达到分离的目的。
生物本科函授《生物分离工程》考试试卷
命题人：沈洁审核人：
二、选择(每题1分，共20分。) 1．hplc是哪种色谱的简称（c）。 a．离子交换色谱 b.气相色谱 c.高效液相色谱 d.凝胶色谱 2．针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是（ c ）。 a.凝胶过滤 b.离
子交换层析 c.亲和层析 d.纸层析
3．盐析法沉淀蛋白质的原理是（ b ） a.降低蛋白质溶液的介电常
数 b.中和电荷，破坏水膜 c.与蛋白质结合成不溶性蛋白 d.调节蛋白
质溶液ph到等电点 4．适合小量细胞破碎的方法是（ b ）
高压匀浆法 b.超声破碎法 c.高速珠磨法 d.高压挤压法 5．基因工
程药物分离纯化过程中，细胞收集常采用的方法（ c ） a．盐析 b.
超声波 c.膜过滤 d.层析
6．氨基酸的结晶纯化是根据氨基酸的（ a ）性质。 a.溶解度和等
电点 b.分子量 c.酸碱性 d.生产方式
7．人血清清蛋白的等电点为4.64，在ph为7的溶液中将血清蛋白
质溶液通电，清蛋白质分子向（a）
a.正极移动；
b.负极移动；
c.不移动；
d.不确定。 8．凝胶色谱分离
的依据是（ b ）。
a.固定相对各物质的吸附力不同
b.各物质分子大小不同
c.各物质在流动相和固定相中的分配系数不同
d.各物质与专一分子
的亲和力不同 9．用来提取产物的溶剂称（ c ）。 a.料液 b.萃取
液 c.萃取剂 d.萃余液。
一、名词解释(每题2分，共20分)
1.凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分
散状态，使胶体粒子聚集的过程。
2.过滤：是在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，
使液体通过，固体颗粒留下，是固液分离的常用方法之一。
3.萃取过程：利用在两个互不相溶的液相中各种组分（包括目的产物）溶解度的不同，从而达到分离的目的
4.反渗析：当外加压力大于渗透压时，水将从溶液一侧向纯水一侧
移动，此种渗透称之为反渗透。
5.离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂上，然后利用合适的
洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。
6.超临界流体：超临界流体是状态超过气液共存时的最高压力和最
高温度下物质特有的点——临界点后的流体。
7.生物分离技术：是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工
程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产品中提取、分离、纯化
有用物质的技术过程。
8.盐析：是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶
液中加入一定量的中性盐，使原溶解的物质沉淀析出的分离技术。
9.超滤：凡是能截留相对分子量在500以上的高分子膜分离过程称
为超滤，它主要是用于从溶剂或小分子溶质中将大分子筛分出来。
10.色谱技术：是一组相关分离方法的总称，色谱柱的一般结构含有
固定相（多孔介质）和流动相，根据物质在两相间的分配行为不同（由于亲和力差异），经过多次分配（吸附-解吸
10.分配层析中的载体（ c ）。 a.对分离有影响 b.是固定相c.能吸
附溶剂构成固定相 d.是流动相 11.结晶过程中，溶质过饱和度大小（ a ）
a.不仅会影响晶核的形成速度，而且会影响晶体的长大速度
b.只会
影响晶核的形成速度，但不会影响晶体的长大速度 c.不会影响晶核
的形成速度，但会影响晶体的长大速度 d.不会影响晶核的形成速度，而且不会影响晶体的长大速度 12.供生产生物药物的生物资源不包括（ d ） a.动物 b植物c.微生物d.矿物质 13.发酵液的预处理方法不
包括（ c ） a.加热b絮凝c.离心d. 调ph
14.其他条件均相同时，优先选用那种固液分离手段（ b ） a.离心分离b过滤c. 沉降d.超滤 15.那种细胞破碎方法适用工业生产（ a ） a.高压匀浆b超声波破碎c. 渗透压冲击法d. 酶解法 16.物理萃取即
溶质根据（b ）的原理进行分离的 a.吸附 b.相似相溶c分子筛d 亲
和 17.纳米过滤的滤膜孔径（ d ）
19.高效液相色谱仪的种类很多，但是无论何种高效液相色谱仪，基
本上由（ d）组成。 a.高压输液系统、进样系统、分离系统、过滤
系统、记录系统或色谱工作站等五大部分 b.进样系统、分离系统、
检测系统、记录系统或色谱工作站四大部分 c.高压输液系统、进样
系统、分离系统、检测系统四大部分
d.高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色
谱工作站等五大部分
20.影响电泳分离的主要因素（ b）
a.光照
b.待分离生物大分子的性质
c.湿度
d.电泳时间三、填空(每
空1分，共20分)
1.发酵液常用的固液分离方法有（离心）和（过滤）等。
2.常用的
蛋白质沉析方法有（等电点沉淀），（盐析）和（有机溶剂沉
淀）。
3.膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为
（微滤膜），（超滤膜），（纳滤膜）和（反渗透膜）。
4.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其（等电点（pi））的不同；
5.典型的工业过滤设备有（板框压滤机）和（真空转鼓过
滤机）。 6.分配色谱的基本构成要素有（载体）、（固定相）和
（流动相）。
7.过饱和溶液的形成方法有（饱和溶液冷却）、（部分溶剂蒸发）、（解析）和（化学反应结晶）。
四、问答题（每题10分，共40分） 1.简述生物分离过程的特点?答: 1.产品丰富：产品的多样性导致分离方法的多样性 2.绝大多数生
物分离方法来源于化学分离 3.生物分离一般比化工分离难度大（1）成分复杂
（2）悬液中的目标产物浓度低（3）生物活性，条件相对温和（4）生物产品要求高质量（5）获得高纯度的干燥产品（6）卫生
2. 膜分离技术的类型和定义？
答：膜分离过程的实质是物质透过或被截留于膜的过程，近似于筛
分过程，依据滤膜孔径大小而达到物质分离的目的，故而可以按分
离粒子大小进行分类：
合于分离酶、蛋白质等生物大分子物质；（3）反渗透：是一种以
压力差为推动力，从溶液中分离出溶剂的膜分离操作，孔径范围在
为反渗透）；（4）纳滤：以压力差为推动力，从溶液中分离
300~1000小分子量的膜分离过程，孔径分布在平均2nm；
（5）电渗析：以电位差为推动力，利用离子交换膜的选择透过性，从溶液中脱除或富集电
解质的膜分离操作；
3. 液一液萃取时溶剂的选择要注意以下几点哪些问题？
（1）选用的溶剂必须具有较高选择性，各种溶质在所选的溶剂中之分配系数差异愈大愈好。（2）选用的溶剂，在萃取后，溶质与溶剂要容易分离与回收。
（3）两种溶剂的密度相差不大时，易形成乳化，不利于萃取液的分离，选用溶剂时应注意。（4）要选用无毒，不易燃烧的价廉易得的溶剂。 4．试述柱层析的基本操作过程。答：1.装柱：①干法装柱
②湿法装柱
注意：湿法装柱中柱内预留一部分水，防止气泡的产生，装柱过程
要连贯。平衡。
2.加样：①干法加样②湿法加样
注意：加样过程中，要防止产生飞溅，量要适中。
3.洗脱：以设定好的流速加入洗脱剂，可以是单一溶剂，也可以梯
度洗脱。注意：不使柱表面的溶液流干，柱上端保留一层溶液。
4.收集：每隔10ml收集一试管，使用层析的手段或紫外检测器进行实时的检测，合并具有相同物质的流份。
【篇二：青岛科技大学生物分离工程答案】
和沉淀：生物亲和作用与沉淀分离相结合的蛋白质类生物大分子的
分离纯化技术。
2.热沉淀：利用在较高温度下，热稳定性差的蛋白质发生变性沉淀
的现象，分离纯化热稳定性高的目标蛋白的方法。
等电点沉淀：在等电点时，蛋白质分子以两性离子形式存在，其分
子净电荷为零(即正负电荷相等)，此时蛋白质分子颗粒在溶液中因
没有相同电荷的相互排斥，分子相互之间的作用力减弱，其颗粒极
易碰撞、凝聚而产生沉淀
4.支撑液膜：是由溶解了载体的膜相液，在表面张力作用下，也考
聚合凝胶层中的化学反应或带电荷材料的静电作用，含浸在多孔支
撑体的微孔内而制成。
5.流动液膜：也是一种支撑液膜，液膜可循环流动，可弥补膜相易
流失的缺点；膜相强制流动或减小厚度可减小传质阻力。
6.亲和膜：利用亲和配基修饰的微滤膜为亲和吸附介质亲和纯化目
标蛋白质，是固定床亲和层析的变型。
7.膜生物反应器：膜分离过程与生物反应过程耦合的生物反应装置。
8.膜蒸馏：膜技术与蒸馏过程相结合的膜分离过程，它以疏水微孔
膜为介质，在膜两侧蒸气压差的作用下，料液中挥发性组分以蒸气
形式透过膜孔，从而实现分离的目的。
9.渗透气化：通过渗透气化膜，在膜两侧溶质分压差的作用下，根据溶质间透过速度的不同，并在透过侧发生气化，使液体混合物得到分离的膜分离法。
10.透析：通过小分子经过半透膜扩散到水（或缓冲液）的原理，将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。
11.萃取：利用溶质在互不相溶两相间分配系数的不同使溶质得到纯化或浓缩的方法
12.液膜萃取：液膜是由水溶液或有机溶剂（油）构成的液体薄膜，将与之不能互溶的液体分隔开来，使其中一侧液体中的溶质选择性透过液膜进入另一侧，实现溶质间的分离。
13. 超临界流体：温度、压力略超过或靠近临界温度和临界压力的流体。
14.离子交换层析：利用离子交换剂为固定相，根据荷电溶质与离子交换剂之间静电相互作用力的差别进行溶质分离的洗脱层析法。
15.凝胶过滤层析：根据蛋白质的大小和形状进行分离和纯化。
16.盐溶:分子在等电点时，相互吸引，聚合沉淀，加入少量盐离子后破坏了这种吸引力，使分子分散，溶于水中。
盐析：蛋白质在高离子强度溶液中溶解度降低，发生沉淀的现象。
17.临界胶束浓度：表面活性剂在水溶液中形成胶团的最低浓度。
18.正胶团：向水中加入表面活性剂，浓度达到一定值后，将发生表面活性剂分子的缔合或自聚集，形成正胶团。
反胶团：向有机溶剂中加入表面活性剂，浓度超过一定值时形成反胶团。
19.蛋白质的变性作用：蛋白质分子受到某些物理、化学因素的影响时，发生生物活性丧失，溶解度降低等性质改变，但是不涉及一级结构改变，而是蛋白质分子空间结构改变，这类变化称为蛋白质变性作用。
20.生物亲和作用：生物分子间的特异性作用，生物分子能在某种情况下能够识别特定物质并与之吸引结合的一种现象。
1、生物下游加工过程的特点。
（1）严格控制操作条件，维持生物物质的生物活性；
（2）需采用快速的分离纯化方法除去影响目标产物稳定性的杂质，如蛋白酶等；一般需用特殊的高效分离技术纯化目标产物；
（3）一般需用特殊的高效分离技术纯化目标产物；
（4）生物产物一般用作医药、食品和化妆品，因此，要求除去有害人体健康的物质，如热原和具有免疫原性的异体蛋白等；原料液中
目标产物的浓度一般都很低，甚至是极微量的，有必要对原料液进
行高度浓缩，从而使下游加工过程的成本显著增大。
2、细胞的机械破碎法有哪些？细胞的化学破碎法的原理是什么？
细胞破碎的化学法与机械法相比各有何优缺点？
机械破碎法：1高温匀浆法 2珠磨破碎 3撞击破碎 4超声波破碎
化学破碎法
1.化学试剂处理：增大细胞器或细胞膜的通透性或者降低降低胞内
物质间相互作用，使目的产物易于释放。
2.酶溶：利用溶解细胞壁的酶处理菌体细胞，增大胞内产物的通透性。物理破碎法1.渗透压冲击法 2.冻结-融化法
机械破碎法：
优点：处理量大，破碎效率高，速度快，适用于工业规模的细胞破碎。缺点：操作剧烈，易造成细胞过度破碎，不利于后续处理。化
学破碎法：
优点：选择性高，胞内产物总释放率低，料液粘度小，利于后续处理。缺点：适用范围小，通用性差，破碎速度慢，处理时间长，不
适于大规模破碎操作，多用于实验室。
3、简述有机溶剂沉淀法的原理，应用本方法须注意哪些问题？
定义：向蛋白质溶液中加入丙酮或乙醇等水溶性有机溶剂，造成蛋
白质分子表面水化程度降低，从而发生沉淀的方法。注意下列各点：（1）降低温度，能增加收率和减少蛋白质变性，加有机溶剂于水常为放热反应，故操作时需冷却。
（2）所选溶剂必须能与水互溶，而和蛋白质不起作用常用乙醇、丙酮。
（3）蛋白质分子量越大，产生沉淀需加入的有机溶剂量越少。
（4）一种蛋白质溶解度会由于另一种蛋白质存在而降低。
（5）沉淀的蛋白质如不能再溶解，就可能已经变性。
（6）接近等电点时，引起沉淀所需加入有机溶剂量少。
（7）少量中性盐（0.1~0.2moll-1)的存在能产生盐溶作用，增加蛋
白质在有机溶液水溶液中的溶解度，使沉淀蛋白质所需有机溶剂量
增大，一般 i =0.05 或稍低为最好，既能使沉淀迅速形成，又能对蛋
白质起保护作用。
（8）盐析法制蛋白质透析除盐，进一步纯化可用有机溶剂沉淀。
4.、什么是盐析沉淀？盐析盐应满足的条件是什么？常见的盐析盐
有哪些？
定义：蛋白质在高离子强度溶液中溶解度降低，发生沉淀的现象。
条件：1.溶解度大2.溶解度受温度影响较小
3.盐溶液密度不高，利于沉淀的沉降或离心分离
常用：（nh4）2so4,na2so4,nacl
5、何为反胶团萃取？反胶团萃取影响蛋白质萃取率的因素有哪些？反胶团萃取：利用表面活性剂在有机相中形成的反胶团，从而在有
机相内形成分散的亲水微环境，使生物分子在有机相（萃取相）内
存在于反胶团的亲水微环境中，消除了生物分子，特别是蛋白质类
生物活性物质难于溶解在有机相中或在有机相中发生不可逆变性的
现象。影响因素：
1.静电相互作用
反胶团萃取一般使用离子型表面活性剂，所形成反胶团内表面带负
电荷或正电荷。当水相ph偏离蛋白质等电点时，蛋白质带正电荷或
负电荷，与表面活性剂间的静电相互作用影响其萃取率。
2.空间相互作用
反胶团含水率降低，直径减小，空间排阻作用增大，蛋白质萃取率
降低；蛋白质相对分子量增大，空间排阻作用增大，蛋白质萃取率
降低。
3.疏水性相互作用
蛋白质的疏水性影响其在反胶团中的溶解形式，因而影响其萃取率。
6、何为超临界流体萃取？超临界流体萃取有哪几种操作方式？超临界流体萃取法有哪些优点？
定义：利用超临界流体，即温度，压力略超过或靠近理解温度和临
界压力的流体为萃取剂，从固体或液体原料中提取目的产物。操作
方法：
1等温法：改变操作压力实现溶质的萃取和回收，操作温度保持不变。 2等压法：通过改变操作温度实现溶质的萃取和回收。
3吸附法：利用选择性吸附目标产物的吸附剂回收目标产物。超临
界流体萃取法优点
（1）萃取速度高于液体萃取，特别适合于固态物质的分离提取
（2）在接近常温的条件下操作，能耗抵于一般的精馏法，适用于热敏性物质和易氧化物质的分离
（3）传热速率快，温度易于控制
（4）适合于非挥发性物质的分离。
7、什么是液膜萃取？简述液膜萃取的机理。
定义：液膜是由水溶液或有机溶剂（油）构成的液体薄膜，将与之不能互溶的液体分隔开来，使其中一侧液体中的溶质选择性透过液膜进入另一侧，实现溶质间的分离。
液膜萃取机理根据待分离溶质种类的不同，主要分为：
（1）单纯迁移：又称物理渗透，主要基于溶质间分配系数的差别实现分离。无溶质浓缩效应。
（2）反萃相化学反应促进迁移：又称为Ⅰ型促进迁移，在有机酸等弱酸性电解质的分离中，可利用强碱（如naoh）溶液为反萃相。溶质在反萃相可得到浓缩，并且反应速度快。
（3）膜相载体输送：又称Ⅱ型促进迁移。在膜相加入可与目标产物发生可逆化学反应的萃取剂（流动载体）。特点：可提高溶质的渗透性和选择性，而且载体输送具有能量泵的作用，使目标溶质从低浓区沿反浓度梯度方向向高浓区持续迁移。根据向流动载体供能方式不同，分为：
1）反向迁移：供能物质与目标溶质迁移方向相反;氨基酸及有机酸的载体输送是典型的反向迁移。
2）同向迁移：供能物质与目标溶质迁移方向相同。钾离子的载体输送（钾离子泵）是典型的同向迁移。
8、膜分离在生物产物的分离纯化方面有哪些应用？
1培养基除菌；2发酵液中细胞的收集或除去；
3细胞破碎后碎片的除去；
4目标产物部分纯化后的浓缩或洗滤除去小分子溶质；
5最终产品的浓缩和洗滤除盐；6制备无热原水等。
9、理想的膜材料应满足哪些条件？防止膜污染有哪两方面的措施？选择膜清洗剂主要从哪三方面考虑？
条件：1有效膜厚度小，uf和mf膜孔隙率高，过滤阻力小； 2膜材料为惰性，不易污染和堵塞；
3适用的ph和温度范围广，稳定性高，使用寿命长；
4容易通过清洗恢复透过性能；
5能满足实现分离目的的各种要求。
措施：1对膜进行预处理2对料液经行预处理
方面：1优先考虑水2具有良好的去污能力3不损害膜的过滤性能 10、对称膜与不对称膜在膜的结构及性能上有何差别？
(1)对称膜，即膜截面的膜厚方向上孔道结构均匀，传质阻力大，透过通量低，容易污染，清洗困难，微滤膜大多为对称膜；
（2）不对称膜，由表面活性层(0.2~0.5 m)和惰性层(50~100 m)构成，透过通量大，膜孔不易堵塞，容易清洗，目前超滤和反渗透膜多为不对称膜。
11、如何获得超滤膜的截留曲线？超滤膜的截留分子量是如何定义的？截留分子量(mwco)–截留曲线：测定分子量不同的球形蛋白质或水溶性聚合物的截留率，所得到的膜的截留率与溶质分子量之间关系的曲线。膜的截留分子量：指在截留曲线上截留率为0.90的溶质分子量。12、常用的双水相系统有哪两类？分别举例说明其上下相的组成。为什么该系统特别适合用于胞内蛋白质的萃取？
双水相系统：某些亲水性高分子聚合物的水溶液超过一定浓度后可形成两相系统。除双聚合系统，聚合物与无机盐也可形成双水相。形成原因：聚合物的不相容性，即聚合物分子的空间阻碍作用，无法形成均一相，具有相分离倾向，一定条件下分成两相。
双水相萃取法可选择性地使细胞碎片分配于下相，目标产物分配于上相，同时实现目标产物的部分纯化和细胞碎片的除去，从而节省利用离心或膜分离除碎片的操作过程。因此，双水相萃取用于胞内蛋白质的萃取是非常有利的。13、生物分离中常用双水相系统是什么？影响因素有哪些？
2、聚合物与无机盐：聚乙二醇(peg)/磷酸钾（kpi)。该系统上相富含peg，下相富含kpi。
因素：1聚合物分子量2聚合物浓度3盐的种类和浓度4.ph值5温度
14、简述乳状液膜的制备过程。乳状液稳定性的因素及破乳方法？制备过程：向溶有表面活性剂和添加剂的油中加入水溶液，进行高速搅拌或超声波处理，制成w/o型乳化液；将上步制得的乳化液分散到第二水相（通常为待分离的料液）进行第二次乳化即可制成(w/o)/w型乳状液膜，此时第二水相为连续相。
因素：①界面上保护膜是否形成；②液滴是否带电；③介质黏度。方法：1过滤或离心分离2加热3释法4加电解质
5吸附法6顶替法7转型法
15、亲和层析可采用哪两种洗脱方法。
亲和层析原理:利用偶联亲和配基的亲和吸附介质为固定相亲和吸附目标产物，使目标产物得到分离纯化的液相层析法。洗脱方法有:
(1)特异性洗脱利用含有与亲和配基或目标产物具有亲和作用的小分子化合物溶液为洗脱剂，通过竞争性结合作用，脱附目标产物，相当于顶替展开。特点：条件温和，有利于保护目标产物的活性和提高纯度。
(2)非特异性洗脱通过调节洗脱液的ph值、离子强度、离子种类或温度等理化性质降低目标产物的亲和作用，使之脱附。是较多采用的洗脱方法。要求操作对目标产物活性无影响。
16、简述疏水性相互作用层析的分离原理及操作。
原理：
疏水作用层析（hic）利用表面偶联弱疏水性基因的疏水性吸附剂为固定相，根据蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行蛋白质类生物大分子分离纯化的洗脱层析法。亲水性蛋白质表面均含有一定量的疏水性基团，可与亲水性固定相表面偶联的短链烷基、苯基等弱疏水基发生疏水性相互作用，被固定相（疏水性吸附剂）所吸附。操作：
与iec不同，蛋白质的吸附在高浓度盐溶液中进行，洗脱则主要采用降低流动相离子强度的线性梯度洗脱法或逐次洗脱法。
原因：根据蛋白质盐析沉淀原理，在离子强度较高的盐溶液中，疏水性相互作用增大。所以，蛋白质在疏水性吸附剂上的分配系数随流动相盐浓度（离子强度）的提高而增大。
17、简述亲和错流过滤技术分离蛋白质的原理和操作过程
原理：acff又称亲和过滤或亲和超滤，是生物亲和作用与膜分离相结合的蛋白质类生物大分子的分离纯化技术，是亲和层析的另一种变形。利用被膜截留的水溶性高分子化合物或不溶性微粒为载体的固定亲合配基。亲合吸附目标蛋白从而增大目标分子和杂蛋白尺寸差别。分子量差10倍才能完全分离。
操作：一般包括进料吸附、清洗、洗脱和再生等步骤。
18、用强酸性阳离子交换柱来分离核糖核酸酶（分子量14000、pi 7.8）、胃蛋白酶（分子量36000、pi 1.5）、及胰岛素（分子量5700、 pi5.3）, 指出以上物质洗脱顺序，并简要说明分离原理。答：ph-pi大，带电荷多。
阳离子交换柱。phpi带正电荷，带正荷①③②
吸附性强，m大①③②
洗脱顺序：②③①
19、用增加盐离子强度的方法，从指定的离子交换柱上洗脱下列蛋
白质，指出它们被洗脱下来的先后顺序，并说明理由。已知细胞色
素c的pi=10.6，溶菌酶pi=11.0，卵清蛋白pi=4.6，肌红蛋白
pi=7.0，胃蛋白酶pi=1.0，脲酶pi=5.0，血红蛋白pi=6.8。
（1）细胞色素c，溶菌酶，卵清蛋白，肌红蛋白（阴离子交换柱）（2）细胞色素c，胃蛋白酶，脲酶，血红蛋白（阳离子交换柱
【篇三：生物分离工程试题答案】
。
2.发酵液常用的固液分离方法有和等。
3.离心设备从形式上可分为，
4.膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为膜，纳滤膜和反渗透膜；
5.多糖基离子交换剂包括葡聚糖离子交换剂和离子交换纤维素两
大类。
6.工业上常用的超滤装置有，和
7.影响吸附的主要因素有，盐浓
度，吸附物浓度和吸附剂用量
8.离子交换树脂由，和组成。
9.电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是引发剂；甲叉双丙烯酰胺
的作用是交联剂；temed的作用是增速剂；
10.影响盐析的因素有，，和；
11.在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有，和种起晶法；
12.简单地说，离子交换过程实际上只有外部扩散，内部扩散和化
学交换反应三个步骤；
13.在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循langmuir吸
附方程，其形式为q＝q14.反相高效液相色谱的固定相是的，而流
动相是的；
常用的固定相有和甲醇和乙睛；
15.超临界流体的特点是与气体有相似的，与液体有相似的密度；
16.离子交换树脂的合成方法有和
17.常用的化学细胞破碎方法有和处理法；
18.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其等的不同；
19.离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有和；
20.晶体质量主要指和三个方面；
4. 亲和吸附原理包括，和三步。
11.根据分离机理的不同，色谱法可分为和凝胶色谱。
13.过饱和溶液的形成方式有：学反应结晶和盐析。
14. 蛋白质分离常用的色谱法有，，和疏水作用色谱。
17. sds page电泳制胶时，加入十二烷基磺酸钠（sds）的目的是
消除各种待分离蛋白的电荷和分子形状差异，而将分子量作为分
离的依据。
19.高效液相色谱分离方法中，液-液色谱是以作为流动相；以相载
体表面的液体作为固定相。
20. 常用的蛋白质沉析方法有和
10.简答：常用的包含体分离和蛋白质复性的工艺路线之一。 11. b 可以提高总回收率。
a.增加操作步骤
b.减少操作步骤
c.缩短操作时间
d.降低每一步的收
率 12.重力沉降过程中，固体颗粒不受 c 的作用。 a.重力b.摩擦力c.静电力d.浮力 13.过滤的透过推动力是 d 。
a.渗透压
b.电位差
c.自由扩散
d.压力差 14.在错流过滤中，流动的
剪切作用可以 b 。
a.减轻浓度极化，但增加凝胶层的厚度
b.减轻浓度极化，但降低凝
胶层的厚度c.加重浓度极化，但增加凝胶层的厚度d.加重浓度极化，但降低凝胶层的厚度
15.目前认为包含体的形成是部分折叠的中间态之间 a 相互作用的
结果。 a.疏水性 b.亲水性 c.氢键 d.静电
17.菌体和动植物细胞的重力沉降操作，采用 d 手段，可以提高沉
降速度。 a.调整ph b.加热 c.降温 d.加盐或絮状剂 18.撞击破碎适
用于 d 的回收。
a.蛋白质
b.核酸
c.细胞壁
d.细胞器
19.重力沉降过程中，固体颗粒受到重力，浮力，摩擦阻力的
作用，当固体匀速下降时，三个力的关系重力=浮力+摩擦阻力。
20.为了提高最终产品的回收率：一是提高每一级的回收率，二是
减少操作步骤。21.评价一个分离过程效率的三个主要标准是：①
浓缩程度②分离纯化程度③回收率。 22.区带离心包括差速区
带离心和平衡区带离心。
23.差速区带离心的密度梯度中最大密度 b 待分离的目标产物的密度。 a.大于 b.小于 c.等于 d.大于或等于 24.简答：管式和碟片式
离心机各自的优缺点。
25.单从细胞直径的角度，细胞越小，所需的压力或剪切力越大，细
胞越难破碎。
1.防止蛋白质沉淀的屏障有蛋白质周围的水化层
和双电层
和双电层
厚度，可以破坏蛋白质溶液的稳定性，实现蛋白质沉淀。
3 4.常用的蛋白质沉淀方法有：盐析
沉淀，等电点
沉淀，有机溶剂
对蛋白质溶解度的影响。 a.无机盐的种类 b.ph值和温度 c.ph值和盐的种类 d.温度和离子强度 8.cohn方程中，ks越大
，盐析效果越好。 9.蛋白质溶液的ph接近其等电点时，蛋白质的溶解度b 。a.最大 b.最小 c.恒定 d.零 10.蛋白质溶液的ph在其等电点时，蛋白质的静电荷数为0
和 ph=pi
，则有机溶剂用量越少
；在溶液等电点附近，则溶剂用量越少
。 16.变性活化能 a
的蛋白质可利用热沉淀法分离。 a.相差较大 b.相差较小 c.相同
d.相反 17.在相同的离子强度下，不同种类的盐对蛋白质盐析的效果不同，一般离子半径 a
效果好。
4 a.小且带电荷较多的阴离子 b.大且带电荷较多的阴离子 c.小且带电荷较多的阳离子 d.大且带电荷较多的阳离子 18.盐析沉淀时，对a蛋白质所需的盐浓度低。 a.结构不对称且高分子量的 b.结构不对称且低分子量的 c.结构对称且高分子量的d.结构对称且低分子量的19.盐析常数ks随蛋白质的相对分子量的增高
或分子结构的不对称
性而增加。。
生物分离工程试题
山科大生物分离工程试题（ A ）卷 一、填充题（40分，每小题2分） 1. 生物产品的分离包括R ，I ，P 和P 。 2. 发酵液常用的固液分离方法有和等。 3. 离心设备从形式上可分为，，等型式。 4. 膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为，和； 5. 多糖基离子交换剂包括和两大类。 6. 工业上常用的超滤装置有，，和。 7. 影响吸附的主要因素有，，，，和。 8. 离子交换树脂由，和组成。 9. 电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是；甲叉双丙烯酰胺的作用 是；TEMED的作用是； 10 影响盐析的因素有，，和； 11.在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有，和； 12.简单地说，离子交换过程实际上只有，和三个步骤； 13.在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir吸附方程，其形式为； 14. 反相高效液相色谱的固定相是的，而流动相是的；常用的固定相有和；常用的流 动相有和； 15.超临界流体的特点是与气体有相似的，与液体有相似的； 16.离子交换树脂的合成方法有和两大类； 17.常用的化学细胞破碎方法有，，，和； 18.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其的不同； 19.离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有和； 20. 晶体质量主要指，和三个方面； 三.计算题（30分） 1、用醋酸戊酯从发酵液中萃取青霉素，已知发酵液中青霉素浓度为0.2Kg/m3，萃取平衡常数为K=40，处理能力为H=0.5m3/h，萃取溶剂流量为L=0.03m3/h，若要产品收率达96%，试计算理论上所需萃取级数？（10分） 2、应用离子交换树脂作为吸附剂分离抗菌素，饱和吸附量为0.06 Kg（抗菌素）/Kg（干树脂）；当抗菌素浓度为0.02Kg/m3时，吸附量为0.04Kg/Kg；假定此吸附属于Langmuir等温吸附，求料液含抗菌素0.2Kg/m3时的吸附量（10分） 3、一种耐盐细胞其能积累细胞内低分子量卤化物，适应高渗透压，能在含有0.32mol/LNaCl, 0.02mol/LMgCl2, 0.015mol/LCaCl2, 0.01mol/LFeCl3 的培养基这培养，当其从含盐量高的培养基中转移至清水中，在数分钟内能将胞内
生物分离工程实验
PART B 生物分离工程实验 实验十二香菇多糖的分离提取 一、实验目的 让学生了解香菇多糖的理化性质及提取工艺流程，掌握真空浓缩技术。 二、实验原理 香菇是一种药食两用真菌，具有提高免疫力、抗癌、降糖等多种生理功能。水溶性多糖作为香菇主要活性成分之一，主要以β-1,3-葡聚糖的形式，分子量从几万到几十万不等。通过有机溶剂提取，真空浓缩技术进行分离提取。 三、实验材料与试剂 原料：干香菇500g 试剂：氯仿、正丁醇、医用纱布、浓硫酸、重蒸酚、工业酒精 四、实验仪器 组织捣碎机、水浴锅、旋转蒸发器、1cm比色皿、751分光光度计、电子天平、台式离心机、试管、量筒、烧杯、玻璃棒 五、提取工艺流程 1. 1kg干香菇切成小块，以1：10（重量比）加入水，用组织捣碎机进行均质； 2. 取200mL均质液放入1L烧杯中，再加入300mL蒸馏水，加热至沸后，温 火煮沸1小时，（注意：煮沸过程中用玻璃棒不断搅拌，以免烧杯底部发生糊结；并间歇加入少量水，使杯内液体体积保持在500mL左右； 3. 加热完毕后，将杯内液体用8层纱布过滤，除去残渣，上清液转入另一烧杯 中； 4. 将上清液倒入圆底烧瓶中，在旋转浓缩仪上进行浓缩，浓缩条件为-0.1MPa 、 60℃，浓缩液体积至100mL左右停止； 5. 将浓缩液在1×10000g离心10min，将上清液转入另一烧杯，除去残渣； 6. 上清液中加入等体积的氯仿正丁醇浓液（体积比为4：1），搅拌5min，静置 30分钟； 7. 将混合液体在1×5000g下离心20min,分离水相；
8. 在水相中加入终浓度为80%的酒精，搅拌均匀，静置20min，1×5000g下离 心10min； 9. 取出沉淀物，放入已称重的干燥表面皿中，在真空干燥箱中80℃下真空干燥； 10. 干燥后，称重，计算多糖的产率； 11. 准确称取干燥后多糖20mg于500ml容量瓶中，加水定容； 12. 取定容液2ml加入6%苯酚1ml，混匀，再加入浓硫酸5ml，混匀，放置20min 后，于490nm测吸光度； 13. 葡萄糖标准曲线的制定：准确称取葡萄糖20mg定容于500ml容量瓶中，分 别取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml，补水至2ml，依12步骤反应液，并分别测吸光度，根据葡萄糖浓度和吸光度绘制标准曲线； 14. 根据香菇多糖吸光度和葡萄糖标准曲线，计算多糖纯度。 六、思考题 1. 根据以上实验步骤，表达多糖产率及纯度的计算公式； 2. 利用所学生物化学知识，分析多糖沉淀原理。
生物分离工程期末考试试卷B
试卷编号： 一、名词解释题（本大题共3小题，每小题3分，总计9分） 1.Bioseparation Engineering：回收生物产品分离过程原理与方法。 2.双水相萃取：某些亲水性高分子聚合物的水溶液超过一定浓度后可形成两相， 并且在两相中水分均占很大比例，即形成双水相系统(two aqueous phase system)。 利用亲水性高分子聚合物的水溶液可形成双水相的性质，Albertsson于50年代 后期开发了双水相萃取法(two aqueous phase extraction)，又称双水相分配法(two aqueous phase partitioning)。 3.电渗：在电场作用下，带电颗粒在溶液中的运动。 二、辨别正误题并改正，对的打√，错的打×（本大题共15小题，每小题2分，总计30分） 1.壳聚糖能应用于发酵液的澄清处理是由于架桥作用。错（不确定） 2.目前国内工业上发酵生产的发酵液是复杂的牛顿性流体,滤饼具有可压缩性。错 3.盐析仅与蛋白质溶液PH和温度有关，常用于蛋白质的纯化。错 4.超临界流体是一种介于气体和液体之间的流体，可用于热敏性生物物质的分离。 对 5.膜分离时，当截留率δ=1时,表示溶质能自由透过膜。错 6.生产味精时，过饱和度仅对晶体生长有贡献。对 7.阴离子纤维素类离子交换剂能用于酸性青霉素的提取。对 8.卡那霉素晶体的生产可以采用添加一定浓度的甲醇来沉淀浓缩液中的卡那霉 素。 9.凝胶电泳和凝胶过滤的机理是一样的。错 10.PEG-硫酸钠水溶液能用于淀粉酶的提取。对 11.乙醇能沉淀蛋白质是由于降低了水化程度和盐析效应的结果。对 12.冷冻干燥一般在-20℃—-30℃下进行，干燥过程中可以加入甘油、蔗糖等作为保 护剂。对 13.反相层析的固定相和流动相都含有高极性基团，可用来分离生物物质。错 14.大网格吸附剂由于在制备时加入致孔剂而具有大孔径、高交联度，高比表面积 的特点。错（不确定） 15.PEG沉淀蛋白质是基于体积不相容性。错 三、选择题（本大题共10小题，每小题2分，总计20分） 1.对于反胶束萃取蛋白质，下面说法正确的是：A A 在有机相中，蛋白质被萃取进表面活性剂形成的极性核里 B 加入助溶剂，可用阳离子表面活性剂CTAB萃取带正电荷的蛋白质 C 表面活性剂浓度越高越好 D 增大溶液离子强度，双电层变薄，可提高反胶束萃取蛋白质的能力 2.能进行海水脱盐的是：C A 超滤 B 微滤
生物分离工程实验
生物分离工程实验 实验一茶多酚标准曲线的测定 仪器：紫外分光光度计，比色皿，天平，容量瓶，移液管，pH计、试管 药品：没食子酸丙酯或茶多酚，酒石酸钾钠，硫酸亚铁，磷酸氢二钠，磷酸二氢钾。 方法： A溶液配制 没食子酸丙酯标准溶液配制 准确称取25mg没食子酸丙酯，蒸馏水溶液，移入25mL容量瓶并稀释至刻度，摇匀，配制成1mg/mL的标准溶液 酒石酸亚铁溶液配制 准确称取0.1g硫酸亚铁，和0.5g酒石酸钾钠，混合，蒸馏水溶解后移入100mL容量瓶，稀释至刻度，摇匀。 pH7.5磷酸盐缓冲液配制 磷酸氢二钠：准确称取分析纯磷酸氢二钠2.969g，蒸馏水稀释溶解，移入250mL容量瓶，加水稀释至刻度，摇匀，为a液 磷酸二氢钾：准确称取分析纯磷酸二氢钾，、2.2695g，蒸馏水溶解，移入250mL容量瓶，定容，B。 取A液体85mL，B液体15mL混合均匀，即成。 B．标准曲线绘制 分别吸取0、0.25、0.50、0.75、1.0、1.25mL的没食子酸丙酯标准液于25mL容量瓶中，加入蒸馏水4mL，再加入酒石酸亚铁溶液5mL，用pH7.5的磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度，摇匀，分光光度计在540nm处，1cm比色皿，分别测定吸光度。空白参比操作同上，不加没食子酸丙酯。以容量瓶中没食子酸丙酯的绝对含量mg为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，做线性回归。 C 样品测定 取适量样品加入容量瓶，操作同上，没食子酸丙酯含量乘以换算系数1.5，求得茶多酚。
实验二超声法和回流法提取茶多酚的比较 实验仪器： 超声提取器、布氏漏斗、抽滤瓶、真空泵、烧瓶、量筒、分光光度计、比色皿、容量瓶等、实验试剂 茶叶、纯净水、茶多酚（没食子酸丙酯）、硫酸亚铁、酒石酸钾钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾等 操作方法 1、材料准备 称取一定量的茶叶，研钵粉碎。备用 2、提取 A、超声提取法 称取5g粉碎后茶叶末，放入烧瓶（塑料袋密封），加入100mL水，于超声提取器，50℃提取20min，抽滤，定容至100mL，待测。 B、回流提取法 称取10g粉碎后茶叶末，放入圆底烧瓶，加入100mL水，80℃提取40min，分别在1、3、5、7、10、15、20、30、40min取3mL样品，小漏斗过滤后，待测。测得茶多酚含量（mg/mL）以茶多酚含量为纵坐标，时间为横坐标绘制曲线。 3. 含量测定 按照标准曲线的方法测定含量。 所需试剂及仪器 试剂： 没食子酸丙酯或者茶多酚，酒石酸钾钠，硫酸亚铁，磷酸氢二钠，磷酸二氢钾， 仪器： 紫外分光光度计，水浴锅，电子天平，pH计，超声提取器，量筒（100mL*1），容量瓶（25mL*8，100mL*4, 250mL*2），比色皿*5，移液管（1.0mL*2, 0.5mL*2, 2mL*2, 5mL*4） 三角瓶250mL*2，小漏斗*2，试管架
生物分离工程期末复习
生物分离工程复习题 第一章绪论 简答题： 1、简述生物分离技术的基本涵义及内容。 答：基本涵义：生物分离技术是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产品中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。 内容主要包括：离心分离、过滤分离、泡沫分离、萃取分离、沉淀（析）分离、膜分离、层析（色谱）分离、电泳分离技术以及产品的浓缩、结晶、干燥等技术。 2、物质分离的本质是有效识别混合物中不同溶质间物理、化学和生物学性质的差别，利用能够识别这些差别的分离介质和扩大这些差别的分离设备实现溶质间的分离或目标组分的纯化。请从物质的理化性质和生物学性质几个方面简述生物活性物质分离纯化的主要原理。 答：生物大分子分离纯化的主要原理是： 1）根据分子形状和大小不同进行分离，如差速离心与超离心、膜分离、凝胶过滤等； 2）根据分子电离性质（带电性）差异进行分离，如离子交换法、电泳法、等电聚焦法； 3）根据分子极性大小及溶解度不同进行分离，如溶剂提取法、逆流分配法、分配层析法、盐析法、等电点沉淀及有机溶剂分级沉淀等； 4）根据物质吸附性质的不同进行分离，如选择性吸附与吸附层析等； 5）根据配体特异性进行分离，如亲和层析法等。 填空题： 1.为了提高最终产品的回收率：一是提高每一级的回收率，二是减少操作 步骤。 2、评价一个分离过程效率的三个主要标准是：①浓缩程度②分离纯化程
度③回收率。 判断并改错： 原料目标产物的浓度越高，所需的能耗越高，回收成本越大。(×)改：原料目标产物的浓度越低。 选择题： 1. B 可以提高总回收率。 A.增加操作步骤 B.减少操作步骤 C.缩短操作时间 D.降低每一步的收率2．分离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用（ A ） A、分离量大分辨率低的方法 B、分离量小分辨率低的方法 C、分离量小分辨率高的方法 D、各种方法都试验一下，根据试验结果确定 第二章细胞分离与破碎 概念题： 过滤：是在某一支撑物上放多孔性过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒被截留，是固液分离的常用方法之一。 离心过滤：使悬浮液在离心力作用下产生离心压力，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高。 填空题： 1.在细胞分离中，细胞的密度ρ S 越大，细胞培养液的密度ρ L 越小，则细 胞沉降速率越大。 2.过滤中推动力要克服的阻力有介质阻力和滤饼阻力，其中滤饼占主导作 用。 3.重力沉降过程中，固体颗粒受到重力，浮力，摩擦阻力的作用，当 固体匀速下降时，三个力的关系重力=浮力+摩擦阻力。 4.区带离心包括差速区带离心和平衡区带离心。
(完整版)ydm生物分离工程复习题一(第1-9章16K含答案),推荐文档
《生物分离工程》复习题一（第1~3章） 一、选择题 1、下列物质不属于凝聚剂的有（C）。 A、明矾 B、石灰 C、聚丙烯类 D、硫酸亚铁 2、发酵液的预处理方法不包括（C） A. 加热B絮凝 C.离心 D. 调pH 3、其他条件均相同时，优先选用哪种固液分离手段（B） A. 离心分离B过滤 C. 沉降 D.超滤 4、那种细胞破碎方法适用工业生产（A） A. 高压匀浆B超声波破碎 C. 渗透压冲击法 D. 酶解法 5、为加快过滤效果通常使用（C） A.电解质B高分子聚合物 C.惰性助滤剂 D.活性助滤剂 6、不能用于固液分离的手段为（C） A.离心B过滤 C.超滤 D.双水相萃取 7、下列哪项不属于发酵液的预处理：（D ） A.加热 B.调pH C.絮凝和凝聚 D.层析 8、能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是（C） A．过滤B．萃取C．离子交换D．蒸馏 9、从四环素发酵液中去除铁离子，可用（B） A．草酸酸化B．加黄血盐C．加硫酸锌D．氨水碱化 10、盐析法沉淀蛋白质的原理是（B） A.降低蛋白质溶液的介电常数 B.中和电荷，破坏水膜 C.与蛋白质结合成不溶性蛋白 D.调节蛋白质溶液pH到等电点 11、使蛋白质盐析可加入试剂（D） A：氯化钠；B：硫酸；C：硝酸汞；D：硫酸铵 12、盐析法纯化酶类是根据（B）进行纯化。 A.根据酶分子电荷性质的纯化方法 B.调节酶溶解度的方法 C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法 D.根据酶分子专一性结合的纯化方法 13、盐析操作中，硫酸铵在什么样的情况下不能使用（B） A.酸性条件B碱性条件 C.中性条件 D.和溶液酸碱度无关 14、有机溶剂沉淀法中可使用的有机溶剂为（D） A.乙酸乙酯B正丁醇 C.苯 D.丙酮 15、有机溶剂为什么能够沉淀蛋白质（B） A.介电常数大B介电常数小 C.中和电荷 D.与蛋白质相互反应 16、蛋白质溶液进行有机溶剂沉淀，蛋白质的浓度在（A）范围内适合。 A. 0.5％～2％B1％～3％ C. 2％～4％ D. 3％～5％ 17、生物活性物质与金属离子形成难溶性的复合物沉析，然后适用（C ）去除金属离子。 A. SDS B CTAB C. EDTA D. CPC 18、单宁沉析法制备菠萝蛋白酶实验中，加入1%的单宁于鲜菠萝汁中产生沉淀，属于(D )沉析原理。 A盐析B有机溶剂沉析C等电点沉析D有机酸沉析 19、当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（C ）
生物分离工程复习题库
生物分离工程复习题 一、名词解释 1.凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。 2.分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里，达到平衡后，它在两相的浓度为一 常数叫分配系数。 3.絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程 4.过滤：是在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒留下，是固液分离的常 用方法之一。 5.萃取过程：利用在两个互不相溶的液相中各种组分（包括目的产物）溶解度的不同，从而达到分离的目的 6.吸附：是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力，使其富集在吸附剂表面的过程。 7.反渗析：当外加压力大于渗透压时，水将从溶液一侧向纯水一侧移动，此种渗透称之为反渗透。 8.离心沉降：利用悬浮液或乳浊液中密度不同的组分在离心力场中迅速沉降分层，实现固液分离 9.离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液， 而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高 10.离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂 上，然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。 11.固相析出技术：利用沉析剂（precipitator）使所需提取的生化物质或杂质在溶液中的溶解度降低而形成无定 形固体沉淀的过程。 12.助滤剂：助滤剂是一种具有特殊性能的细粉或纤维，它能使某些难以过滤的物料变得容易过滤 13.色谱技术：是一组相关分离方法的总称，色谱柱的一般结构含有固定相（多孔介质）和流动相，根据物质在两 相间的分配行为不同（由于亲和力差异），经过多次分配（吸附-解吸-吸附-解吸…），达到分离的目的。 14.有机溶剂沉淀：在含有溶质的水溶液中加入一定量亲水的有机溶剂，降低溶质的溶解度，使其沉淀析出。 15.等电点沉淀：调节体系pH值，使两性电解质的溶解度下降，析出的操作称为等电点沉淀。 16.膜分离：利用膜的选择性（孔径大小），以膜的两侧存在的能量差作为推动力，由于溶液中各组分透过膜的迁 移率不同而实现分离的一种技术。 17.化学渗透破壁法：某些化学试剂，如有机溶剂、变性剂、表面活性剂、抗生素、金属螯合剂等，可以改变细胞 壁或细胞膜的通透性，从而使胞内物质有选择地渗透出来。 18.超临界流体：超临界流体是状态超过气液共存时的最高压力和最高温度下物质特有的点——临界点后的流体。 19.反渗透：在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧，形成大于渗透压的压力差，就可以使溶剂发生倒流，使溶液达到 浓缩的效果，这种操作成为反渗透。 20.树脂工作交换容量：单位质量干树脂或单位体积湿树脂所能吸附的一价离子的毫摩尔数称为树脂交换容量，在 充填柱上操作达到漏出点时，树脂所吸附的量称为树脂工作交换容量。 21.色谱阻滞因数：溶质在色谱柱（纸、板）中的移动速率与流动相移动速率之比称为阻滞因数，以Rf表示。 22.膜的浓差极化：是指但溶剂透过膜，而溶质留在膜上，因而使膜面浓度增大，并高于主体中浓度。 23.超滤：凡是能截留相对分子量在500以上的高分子膜分离过程称为超滤，它主要是用于从溶剂或小分子溶质中 将大分子筛分出来。 24.生物分离技术：是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产品 中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。 25.物理萃取：即溶质根据相似相溶的原理在两相间达到分配平衡，萃取剂与溶质之间不发生化学反应。 26.化学萃取：则利用脂溶性萃取剂与溶质之间的化学反应生成脂溶性复合分子实现溶质向有机相的分配。 27.盐析：是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入一定量的中性盐，使原溶解的物质沉 淀析出的分离技术。 28.有机聚合物沉析：利用生物分子与某些有机聚合物形成沉淀而析出的分离技术称为有机聚合物沉析。 29.离子交换平衡：当正反应、逆反应速率相等时，溶液中各种离子的浓度不再变化而达平衡状态，即称为离子交 换平衡。 30.功能基团：离子交换树脂中与载体以共价键联结的不能移动的活性基团，又称功能基团 31.平衡离子：离子交换树脂中与功能基团以离子键联结的可移动的平衡离子，亦称活性离子。 32.树脂的再生：就是让使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程，树脂的再生反应是交换吸附的逆反应。 33.层析分离：是一种物理的分离方法，利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差别，使各组分以不同的程度 分布在两个相中。 34.流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或租临界体等，都称为流 动相。 35.正相色谱：是指固定相的极性高于流动相的极性，因此，在这种层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性 大的分子移动的速度快，先从柱中流出来。
生物分离工程期末复习题
填空题 1. .根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为物理吸附、化学吸附和交换吸附； 2. 比表面积和孔径是评价吸附剂性能的主要参数。 3. 层析操作必须具有固定相和流动相。 4. 溶质的分配系数大，则在固定相上存在的几率大，随流动相的移动速度 小。 5. 层析柱的理论板数越多，则溶质的分离度越大。 6. 两种溶质的分配系数相差越小，需要的越多的理论板数才能获得较大的 分离度。 7. 影响吸附的主要因素有吸附质的性质，温度，溶液pH值，盐的浓度和吸附物的浓度与吸附剂的用量； 8. 离子交换树脂由网络骨架（载体），联结骨架上的功能基团（活性基）和可交换离子组成。 9. 电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是引发剂（提供催化丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚合所必需的自由基）；甲叉双丙烯酰胺的作用是交联剂（丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺催化剂的作用下聚合而成的含酰胺基侧链的脂肪族长链）；TEMED的作用是增速剂（催化过硫酸胺形成自由基而加速丙烯酰胺和双丙烯酰胺的聚合）； 10. 影响盐析的因素有溶质种类，溶质浓度，pH 和温度； 11. 在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有自然起晶法，刺激起晶法和晶种起晶法； 12. 简单地说离子交换过程实际上只有外部扩散、部扩散和化学交换反应三步；
13. 在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir 吸附方程，其形式为c K c q q 0+= 14. 反相高效液相色谱的固定相是 疏水性强 的，而流动相是 极性强 的； 15. 等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其 等电点 的不同； 16. 离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有 静态洗脱 和 动态洗脱 ； 17. 晶体质量主要指 晶体大小 ， 形状 和 纯度 三个方面； 18. 亲和吸附原理包括 配基固定化 ， 吸附样品 和 样品解析 三步； 19. 根据分离机理的不同，色谱法可分为 吸附、离交、亲和、凝胶过滤色谱 20. 蛋白质分离常用的色谱法有 免疫亲和色谱法， 疏水作用色谱法 ， 金属螯合色谱法 和 共价作用色谱法 ； 21. SDS-PAGE 电泳制胶时，加入十二烷基磺酸钠（SDS ）的目的是消除各种待分离蛋白的 分子形状 和 电荷 差异，而将 分子量 作为分离的依据；加入二硫叔糖醇的目的是 强还原剂，破坏半胱氨酸间的二硫键 ； 22. 影响亲和吸附的因素有 配基浓度 、 空间位阻 、 配基与载体的结合位点 、 微环境 和 载体孔径 ； 23. 阳离子交换树脂按照活性基团分类，可分为 强酸性阳离子交换树脂 、 弱酸性 和 中强酸性 ；其典型的活性基团分别有 3 、 COOH - 、2)(OH PO -； 24. 阴离子交换树脂按照活性基团分类，可分为强碱性、 弱碱性 和 中强碱 性 ；其典型的活性基团分别有-+OH CH RN 33)(、2NH -、兼有以上两种基团； 25. 影响离子交换选择性的因素有 离子水合半径 、 离子价 、 离子强度 、 溶液pH ，温度 、溶液浓度 、 搅拌速率 、和 交联度、膨胀度、颗粒大小 ；
生物分离工程题库+答案
《生物分离工程》题库 一、填充题 1. 生物产品的分离包括R 不溶物的去除 ，I 产物分离 ，P 纯化 和P 精 制 ； 2. 发酵液常用的固液分离方法有 过滤 和 离心 等； 3. 离心设备从形式上可分为 管式 ， 套筒式 ， 碟片式 等型式； 4. 膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为 微滤膜 ， 超滤膜 ， 纳滤膜 和 反渗透膜 ； 5. 多糖基离子交换剂包括 离子交换纤维素 和 葡聚糖凝胶离子交换剂 两大类； 6. 工业上常用的超滤装置有 板式 ， 管式 ， 螺旋式和 中空纤维式 ； 7. 影响吸附的主要因素有 吸附质的性质 ， 温度 ， 溶液pH 值 ， 盐的浓度 和 吸附物的浓度与吸附剂的用量 ； 8. 离子交换树脂由 网络骨架 （载体） ， 联结骨架上的功能基团 （活性基） 和 可 交换离子 组成。 9. 电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是 引发剂（ 提供催化丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚 合所必需的自由基） ； 甲叉双丙烯酰胺的作用是 交联剂（丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺催化剂的作 用下聚合而成的含酰胺基侧链的脂肪族长链） ； TEMED 的作用是 增速剂 （催化过硫酸胺形成自由基而加速丙烯酰胺和双丙烯酰胺的 聚合 ）； 10 影响盐析的因素有 溶质种类 ， 溶质浓度 ， pH 和 温度 ； 11.在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有 自然起晶法 ， 刺激起晶法 和 晶种起晶法 ； 12.简单地说离子交换过程实际上只有 外部扩散 、内部扩散 和化学交换反应 三步； 13.在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir 吸附方程，其形式为c K c q q 0+= 14.反相高效液相色谱的固定相是 疏水性强 的，而流动相是 极性强 的；常用的固定相有C 8 辛烷基 和 十八烷基C 18 ；常用的流动相有 乙腈 和 异丙醇 ； 15.超临界流体的特点是与气体有相似的 粘度和扩散系数 ，与液体有相似的 密度 ； 16.离子交换树脂的合成方法有 加聚法 和 逐步共聚法 两大类；
生物分离工程期末复习资料
第一章 1．生物分离工程的一般过程P4 答：①发酵液的预处理主要采用凝聚和絮凝等技术来加速固相，液相分离，提高过滤速度。过滤、离心是其最基本的单元操作。 ②产物的提取采用沉淀、吸附、萃取、超滤等单元操作。 ③产物的精制常采用色谱分离技术，有层析、离子交换、亲和色谱、吸附色谱、电色谱。 ④成品的加工处理浓缩、结晶、干燥 第二章 一、概念： 1.发酵液的预处理：指采用凝聚和絮凝等技术来加速固相、液相分离，提高过滤速度。 2.凝集（凝聚）：指在投加的化学物质（如水解的凝聚剂，铝、铁的盐类或石灰等）作用下，发酵液中的 胶体脱稳并使粒子相互凝集成为1mm大小块状絮凝体的过程。 3.絮凝：指某些高分子絮凝剂能在悬浮粒子之间产生桥梁作用，使胶粒形成粗大絮凝团的过程。 4.离心分离：指在离心场的作用下，将悬浮液中的固相和液相加以分离的方法。主要用于颗粒较细的悬 浮液和乳浊液的分离。（分为差示离心、均匀介质离心、密度梯度离心、等密度梯度离心和平衡等密度离心。） 5.等电点沉淀法：利用蛋白质等两性化合物在等电点时溶解度最低，易产生沉淀的性质，用酸化剂或碱化 剂调节发酵液的pH，使其达到菌体蛋白的等电点而产生沉淀。 二、填空： 1、按过滤时料液流动方向的不同，分为常规过滤和错流过滤。 2、可溶性杂蛋白的去除法包括：等电点沉淀法、热处理法、化学变性沉淀法和吸附法 三、问答 1、发酵液的一般特征？ ①组成大部分为水； ②发酵产物的浓度较低； ③发酵液中的悬浮固形物主要是菌体和蛋白的胶状物； ④含有培养基中的残留成分，如无机盐类、非蛋白质大分子及其降解产物； ⑤含有其他少量代谢副产物；
⑥含有色素、毒性物质。热原质等有机杂质。 2、常用的絮凝剂有什么？ 无极絮凝剂：Al2(SO4)3·18H2O (明矾)、氯化钙、氯化镁碱式氯化铝、高分子无机聚合物等。 有机絮凝剂：壳多糖及其衍生物、明胶、丙烯酰胺类、聚苯乙烯类、聚丙烯酰类聚乙烯亚胺类。 3、影响絮凝效果的因素？ 答：①絮凝剂的种类； ②絮凝剂浓度； ③ pH; 最关键因素，影响絮凝剂活性基团的解离度。 ④搅拌转速和时间。 4、发酵液预处理的方法？ 答：①凝聚和絮凝方法 ②加热法 ③调节PH法 ④加水稀释法 ⑤加入助滤剂法 ⑥加吸附剂法或加盐法 ⑦高价态无机离子去除法 Ca2+——草酸、草酸钠→形成草酸钙沉淀 Mg2+——三聚磷酸钠(Na5P3P10)→形成三聚磷酸钠镁可溶性络合物 Fe3+——黄血盐(K4Fe(CN)6) →普鲁士蓝淀 ⑧可溶性杂蛋白的去除法 3、VB12发酵液絮凝预处理的研究 答：由正交试验确定影响絮凝的主要因素，结果表明，最佳絮凝条件：絮凝剂为聚合氯化铝、加入体积分数7%，pH6、搅拌速度14r/min、搅拌时间45s。通过加压过滤实验，得到絮凝后
生物分离工程总复习题
第一章复习题 1.生物分离工程在生物技术中的地位？ 2.生物分离工程的特点是什么？ 3.生物分离工程可分为几大部分，分别包括哪些单元操作？ 4.在设计下游分离过程前，必须考虑哪些问题方能确保我们所设计的工艺过程最为经济、可靠？ 5.生物分离效率有哪些评价指标？ 第二章复习题 1．简述细胞破碎的意义 2．细胞破碎方法的大致分类 3．化学渗透法和机械破碎法相比有哪些优缺点？ 第三章复习题 1．常用的蛋白质沉淀方法有哪些？ 2．影响盐析的主要因素有哪些？ 3．何谓中性盐的饱和度？ 4．盐析操作中，中性盐的用量（40% 硫酸铵饱和度）如何计算？5．简述盐析的原理。6．简述有机溶剂沉析的原理。 7．简述等电点沉析的原理。 第四章复习题 1．膜分离技术的概念 2．膜的概念 3．根据膜孔径大小，膜分离技术的分类 4．基本的膜材料有哪些？ 5．常用的膜组件有哪些？ 6．何谓反渗透？实现反渗透分离的条件是什么？其特点有哪些？ 7．强制膜分离的概念？ 8．电渗析的工作原理？ 9．膜污染的主要原因是什么？常用的清洗剂有哪些？如何选择？ 10．膜分离在生物产物的回收和纯化方面的应用有哪些方面？ 第五章复习题 1.什么是萃取过程？ 2.液－液萃取从机理上分析可分为哪两类？ 3.常见物理萃取体系由那些构成要素？ 4.何谓萃取的分配系数？其影响因素有哪些？ 5.何谓超临界流体萃取？其特点有哪些？有哪几种方法？ 6.何谓双水相萃取?常见的双水相构成体系有哪些？ 7.反胶团的构成以及反胶团萃取的基本原理 第六章复习题 1.影响吸附的主要因素？ 2.亲和吸附的原理和特点是什么？ 3.常用的离子交换树脂类型有哪些？ 4.影响离子交换速度的因素有哪些？ 5.用于蛋白质提取分离的离子交换剂有哪些哪些特殊要求，主要有哪几类？ 第七章复习题
生物分离工程期末复习题
填空题 1. 为了提高最终产品的回收率一是（提高每步分离效率），二是（减少分离步骤）。 2. 评价一个分离过程效率的三个主要标准是：（浓缩率），（分离系数）和（产品回收程度） 3?生物产品的分离过程包括发酵液的预处理和（液固分离），（产品的提取），（产品的精制） 和（产品的加工处理）。 4?生化反应所起的作用是产生目的产物，指标是（产率）和（转化率），而生物分离解决的 是如何从反应液中获取这些物质，涉及的是（收率）和（纯度）。 5?生物分离的主要任务：从发酵液和细胞培养液中以（最高的效率），（理想的纯度）和（最小的能耗）把目的产物分离出来。 6?生物分离过程的特点包括：（生物分离过程的体系特殊），（生物分离过程的工艺流程特殊），（生物分离过程的成本特殊）。 7. 物质分离的本质是识别混合物中不同溶质间（物理），（化学）和（生物）性质的差别利用 能识别这些差别的（分离介质）和扩大这些差别的（分离设备） 8. 性质不同的溶质在分离操作中具有不同的（传质速率）和或（平衡状态） 9. 平衡分离是根据溶质在两相间（分配平衡）的差异实现分离；溶质达到分配。平衡为扩散 传质过程，推动力仅取决于系统的（热力学性质）。 10. 差速分离是利用外力驱动溶质迁移产生的（速度差）进行分离的方法。 1. 在细胞分离中，细胞的密度越（大），细胞培养液的密度越（小），则细胞沉降 2. 区带离心包括（差速）区带离心和（等密度）区带离心。
3. 为使过滤进行的顺利通常要加入（惰性助滤剂）。 4. 发酵液常用的固液分离方法有（离心）和（过滤）等。 5?常用离心设备可分为（离心沉降）和（离心过滤）两大类； 6?常用的工业絮凝剂有（无机絮凝剂）和（有机絮凝剂）两大类。 7. 工业生产中常用的助滤剂有（硅藻土）和（珍珠岩粉）。 8. 重力沉降过程中，固体颗粒受到（重力），（浮力），（摩擦阻力）的作用， 固体匀速下降时，三个力的关系（重力=浮力+摩擦阻力）。 9. 发酵液预处理的方法包括：（凝集），（絮凝），（加热法）；（调节pH法），（加水稀释法），加入（助滤剂）和（吸附剂）。 10. 发酵液中胶粒保持稳定的原因：（双电层）和（蛋白质周围水化层）结构。 11. 发酵液预处理过程中的相对纯化主要包括去除（高价态无机离子），（可溶性杂蛋白质），（色素）和（多糖类物质）。 12. 发酵液中杂蛋白的去除方法主要有（等电点沉淀法），（热处理法）和（化学变性沉淀法）。 13. 差速区带离心用于分离（大小）不同的颗粒，与颗粒（密度）无关。等密度区带离心包 括（预形成梯度密度离心）和（自形成梯度密度离心）两种方式。离心达到平衡后，样品颗粒的区带形状和平衡位置（不再发生变化）。 1?单从细胞直径的角度，细胞（直径越小），所需的压力或剪切力越大，细胞越 2. 常用的化学细胞破碎方法有（.酸碱法），（盐法），（表面活性剂处理），（有机溶剂法）和（螯合剂）。 3. 包涵体的溶解需要打断蛋白质分子和分子间的（共价键），（离子键），疏水作用及静电 作用等，使多肽链伸展。因此，包涵体的溶解需要强的变性剂，如（8mol/L尿素）和（6mol/L 盐
生物分离工程练习题
《生物分离工程》练习题 绪论 1.生物分离过程包括目标产物的提取、浓缩、纯化。 2.生物分离过程的显着特点是什么？ 1、条件温和 2、安全性、卫生性要求高 3、方法需要具有高选择性 4、对原 料高度浓缩 3.评价一个分离过程的效率主要有三个标准，目标产物的浓缩程 度、分离纯化程度、回收率。 4.图中F表示流速，c表示浓度；下标T和X分别表示目标产物和杂质。C、P 和W分别表示原料、产品和废料。写出产品浓缩率m、分离因子α、回收率REC 的计算公式。书本第九页 第一章细胞分离与破碎 1.在细胞分离中，细胞的密度ρ S 越大，细胞培养液的密度ρ L 越小，则细 胞沉降速率越大。 2.过滤中推动力要克服的阻力有过滤介质阻力和滤饼阻力，其中滤 饼占主导作用。 3.B可以提高总回收率。 A.增加操作步骤 B.减少操作步骤 C.缩短操作时间 D.降低每一步的收率 4.重力沉降过程中，固体颗粒不受C的作用。 A.重力 B.摩擦力 C.静电力 D.浮力 5.过滤的透过推动力是 D 。 A.渗透压 B.电位差 C.自由扩散 D.压力差 6.在错流过滤中，流动的剪切作用可以B。 A.减轻浓度极化，但增加凝胶层的厚度 B.减轻浓度极化，但降低 凝胶层的厚度 C.加重浓度极化，但增加凝胶层的厚度 D.加重浓度极化，但降低 凝胶层的厚度
7.重力沉降过程中，固体颗粒受到重力，浮力，流体摩擦阻力的 作用，当固体匀速下降时，三个力的关系平衡 8.撞击破碎适用于D的回收。 A.蛋白质 B.核酸 C.细胞壁 D.细胞器 9.区带离心包括差速区带离心和平衡区带离心。 10.管式和碟片式离心机各自的优缺点。 管式，优点:离心力较大缺点：沉降面积小，处理能力降低 碟片式，优点：沉降面积大缺点：转速小，离心力较小 11.单从细胞直径的角度，细胞直径越小，所需的压力或剪切力越大，细 胞越难破碎 12.细胞的机械破碎主要方法有高压匀浆、珠磨、喷雾撞击破碎、 超声波破碎 13.细胞的化学破碎技术包括酸碱处理、酶溶、化学试剂处 理。 第二章初级分离 1.防止蛋白质沉淀的屏障有蛋白质周围水化层和双电层。 2.判断：当蛋白质周围双电层的ζ电位足够大时，静电排斥作用抵御蛋白质分子之间的分子间力，使蛋白质溶液处于稳定状态而难以沉淀。（正确） 3.降低蛋白质周围的水化层和双电层厚度，可以破坏蛋白质溶液的稳定性，实现蛋白质沉淀。 4.常用的蛋白质沉淀方法有：盐析沉淀，等电点沉淀，有机溶剂沉淀。
生物分离工程期末总复习
第一章绪论 一、生物分离工程在生物技术中的地位？ 二、生物分离工程的特点是什么？ 1．产品丰富产品的多样性导致分离方法的多样性 2．绝大多数生物分离方法来源于化学分离 3．生物分离一般比化工分离难度大 3.生物分离工程可分为几大部分，分别包括哪些单元操作？ 三、生物分离过程一般分四步： 1.固-液分离（不溶物的去除） 离心、过滤、细胞破碎 目的是提高产物浓度和质量 2.浓缩（杂质粗分） 离子交换吸附、萃取、溶剂萃取、反胶团萃取、超临界流体萃取、双水相萃取 以上分离过程不具备特异性，只是进行初分，可提高产物浓度和质量。 3．纯化 色谱、电泳、沉淀 以上技术具有产物的高选择性和杂质的去除性。 4．精制结晶、干燥 四、在设计下游分离过程前，必须考虑哪些问题方能确保我们所设计的工艺过程最为经济、可靠？ （1）产品价值 （2）产品质量 （3）产物在生产过程中出现的位置 （4）杂质在生产过程中出现的位置 （5）主要杂质独特的物化性质是什么？ （6）不同分离方法的技术经济比较 上述问题的考虑将有助于优质、高效产物分离过程的优化。 五、.生物分离效率有哪些评价指标？ 1.目标产品的浓缩程度——浓缩率m 2．系数α回收率REC 第二章细胞分离与破碎
1．简述细胞破碎的意义 一、细胞破碎的目的 由于有许多生化物质存在于细胞内部，必须在纯化以前将细胞破碎，使细胞壁和细胞膜受到不同程度的破坏（增大通透性）或破碎，释放其中的目标产物，然后方可进行提取。 二、细胞破碎方法的大致分类 破碎方法可归纳为机械破碎法和非机械破碎法两大类，非机械破碎法又可分为化学（和生物化学）破碎法和物理破碎法。 1．机械破碎 处理量大、破碎效率高速度快，是工业规模细胞破碎的主要手段。 细胞的机械破碎主要有高压匀浆、研磨、珠磨、喷雾撞击破碎和超声波破碎等。 2．化学（和生物化学）渗透破碎法 （1）渗透压冲击法（休克法）（2）酶溶（酶消化）法 3．物理破碎法 1）冻结－融化法（亦称冻融法）（2）干燥法 空气干燥法真空干燥法冷冻干燥法喷雾干燥法 三、化学渗透法和机械破碎法相比有哪些优缺点？ 化学渗透破碎法与机械破碎法相比优点：化学渗透破碎法比机械破碎法的选择性高，胞内产物的总释放率低，特别是可有效地抑制核酸的释放，料液的粘度小，有利于后处理过程。 化学渗透破碎法与机械破碎法相比缺点：化学渗透破碎法比机械破碎法速度低，效率差，并且化学或生化试剂的添加形成新的污染，给进一步的分离纯化增添麻烦。 第三章初级分离 一、常用的蛋白质沉淀方法有哪些？ 盐析沉淀,等电点沉淀,有机溶剂沉淀,热沉淀 二、影响盐析的主要因素有哪些？ （1）离子强度：Ks和β值, 强度越大,蛋白质溶解度越小； （2）蛋白质的性质:因相对分子质量和立体结构而异,结构不对称、相对分子质量大的蛋白质易于盐析； （3）蛋白质的浓度：蛋白质浓度大，盐的用量小，共沉作用明显，分辨率低；蛋白质浓度小，盐的用量大，分辨率高；2.5%～3.0% 时最适合； （4）pH值：通常调整到pI附近，盐浓度较大会对等电点产生较大影响，pH对不同蛋白质的共沉影响；
生物分离工程复习题一(第1-9章16K含答案)
1、下列物质不属于凝聚剂的有（C）。 A、明矾 B、石灰 C、聚丙烯类 D、硫酸亚铁 2、发酵液的预处理方法不包括（C） A. 加热B絮凝 C.离心 D. 调pH 3、其他条件均相同时，优先选用哪种固液分离手段（B） A. 离心分离B过滤 C. 沉降 D.超滤 4、那种细胞破碎方法适用工业生产（A） A. 高压匀浆B超声波破碎 C. 渗透压冲击法 D. 酶解法 5、为加快过滤效果通常使用（C） A.电解质B高分子聚合物 C.惰性助滤剂 D.活性助滤剂 6、不能用于固液分离的手段为（C） A.离心B过滤 C.超滤 D.双水相萃取 7、下列哪项不属于发酵液的预处理：（D ） A.加热 B.调pH C.絮凝和凝聚 D.层析 8、能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是（C） A．过滤B．萃取C．离子交换D．蒸馏 9、从四环素发酵液中去除铁离子，可用（B） A．草酸酸化B．加黄血盐C．加硫酸锌D．氨水碱化 10、盐析法沉淀蛋白质的原理是（B） A.降低蛋白质溶液的介电常数 B.中和电荷，破坏水膜 C.与蛋白质结合成不溶性蛋白 D.调节蛋白质溶液pH到等电点 11、使蛋白质盐析可加入试剂（D） A：氯化钠；B：硫酸；C：硝酸汞；D：硫酸铵 12、盐析法纯化酶类是根据（B）进行纯化。 A.根据酶分子电荷性质的纯化方法 B.调节酶溶解度的方法 C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法 D.根据酶分子专一性结合的纯化方法 13、盐析操作中，硫酸铵在什么样的情况下不能使用（B） A.酸性条件B碱性条件 C.中性条件 D.和溶液酸碱度无关 14、有机溶剂沉淀法中可使用的有机溶剂为（D） A.乙酸乙酯B正丁醇 C.苯 D.丙酮 15、有机溶剂为什么能够沉淀蛋白质（B） A.介电常数大B介电常数小 C.中和电荷 D.与蛋白质相互反应 16、蛋白质溶液进行有机溶剂沉淀，蛋白质的浓度在（A）范围内适合。 A. ％～2％B1％～3％ C. 2％～4％ D. 3％～5％ 17、生物活性物质与金属离子形成难溶性的复合物沉析，然后适用（C ）去除金属离子。 A. SDS B CTAB C. EDTA D. CPC 18、单宁沉析法制备菠萝蛋白酶实验中，加入1%的单宁于鲜菠萝汁中产生沉淀，属于(D )沉析原理。 A盐析B有机溶剂沉析C等电点沉析D有机酸沉析
题库名称：生物分离工程
题库名称：生物分离工程 一、名词解释 1．质量作用定律：化学反应的速率与参加反应的物质的有效质量成正比。 2．凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。 3．分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里，达到平衡后，它在两相的浓度为一常数叫分配系数。 4．干燥速率：干燥时单位干燥面积，单位时间内漆画的水量。 5．CM-Sephadex C-50：羧甲基纤维素、弱酸性阳离子交换剂，吸水量为每克干胶吸水五克。6．絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程 7．过滤：是在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒留下，是固液分离的常用方法之一。 8．萃取过程：利用在两个互不相溶的液相中各种组分（包括目的产物）溶解度的不同，从而达到分离的目的 9．吸附：是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力，使其富集在吸附剂表面的过程。 10．反渗析：当外加压力大于渗透压时，水将从溶液一侧向纯水一侧移动，此种渗透称之为反渗透。 11．离心沉降：利用悬浮液或乳浊液中密度不同的组分在离心力场中迅速沉降分层，实现固液分离 12．离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高 13．离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂上，然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。 14．固相析出技术：利用沉析剂（precipitator）使所需提取的生化物质或杂质在溶液中的溶解度降低而形成无定形固体沉淀的过程。