转基因棉花种子生产经营许可规定
根据《中华人民共和国种子法》《农业转基因生物安全管理条例》和《农作物种子生产经营许可管理办法》规定，我部修订了《转基因棉花种子生产经营许可规定》，现予公布，自2016年10月18日起施行。农业部2011年9月6日发布的《转基因棉花种子生产经营许可规定》（农业部第1643号公告）同时废止。
特此公告。
农业部
2016年9月18日
转基因棉花种子生产经营许可规定
第一条为加强转基因棉花种子生产经营许可管理，根据《中华人民共和国种子法》《农业转基因生物安全管理条例》《农作物种子生产经营许可管理办法》，制定本规定。
第二条转基因棉花种子生产经营许可证，由企业所在地省级农业主管部门审核，农业部核发。
第三条申请领取转基因棉花种子生产经营许可证的企业，应当具备以下条件：
（一）具有办公场所200平方米以上，检验室150平方米以上，加工厂房500平方米以上，仓库500平方米以上；
（二）具有转基因棉花自育品种或作为第一选育人的品种1个以上，或者合作选育的品种2个以上，或者受让品种权的品种3个以上；生产经营的品种应当通过审定并取得农业转基因生物安全证书。生产经营授权品种种子的，应当征得品种权人的书面
同意；
（三）具有净度分析台、电子秤、样品粉碎机、烘箱、生物显微镜、电子天平、扦样器、分样器、发芽箱、PCR扩增仪及产物检测配套设备、酸度计、高压灭菌锅、磁力搅拌器、恒温水浴锅、高速冷冻离心机、成套移液器等仪器设备，能够开展种子水分、净度、纯度、发芽率四项指标检测及品种分子鉴定；
（四）具有种子加工成套设备，成套设备总加工能力1吨/小时以上，配备棉籽化学脱绒设备；
（五）具有种子生产、加工贮藏和检验专业技术人员各3名以上，农业转基因生物安全管理人员2名以上；
（六）种子生产地点、经营区域在农业转基因生物安全证书批准的区域内；
（七）符合棉花种子生产规程以及转基因棉花种子安全生产要求的隔离和生产条件，生产地点无检疫性有害生物；
（八）有相应的农业转基因生物安全管理、防范措施；
（九）农业部规定的其他条件。
第四条申请转基因棉花种子生产经营许可证的企业，应当向审核机关提交以下材料：
（一）转基因棉花种子生产经营许可证申请表（式样见附件1）；
（二）单位性质、股权结构等基本情况，公司章程、营业执照复印件，设立分支机构、委托生产种子、委托代销种子以及以
购销方式销售种子等情况说明；
（三）种子生产、加工贮藏、检验技术人员和农业转基因生物安全管理人员的基本情况及其企业缴纳的社保证明复印件，企业法定代表人和高级管理人员名单及其种业从业简历；
（四）种子检验室、加工厂房、仓库和其他设施的自有产权或自有资产证明材料；办公场所自有产权证明复印件或租赁合同；种子检验、加工等设备清单和购置发票复印件；相关设施设备的情况说明及实景照片；
（五）品种审定证书和农业转基因生物安全证书复印件；生产经营授权品种种子的，提交植物新品种权证书复印件及品种权人的书面同意证明；
（六）委托种子生产合同复印件或自行组织种子生产的情况说明和证明材料；
（七）种子生产地点检疫证明；种子生产所在地省级农业主管部门书面意见；
（八）农业转基因生物安全管理、防范措施说明；
（九）农业部规定的其他材料。
第五条审核机关应当自受理申请之日起二十个工作日内完成审核工作。审核机关应当对申请企业的办公场所和种子加工、检验、仓储等设施设备进行实地考察，并查验相关申请材料原件。符合条件的，签署审核意见，上报核发机关；审核不予通过的，书面通知申请人并说明理由。
核发机关应当自收到申请材料和审核意见之日起二十个工作日内完成核发工作。核发机关认为有必要的，可以进行实地考察并查验原件。符合条件的，发给种子生产经营许可证并予公告；不符合条件的，书面通知申请人并说明理由。
第六条转基因棉花种子生产经营许可证设主证、副证（式样见附件2）。主证注明许可证编号、企业名称、统一社会信用代码、住所、法定代表人、生产经营范围、生产经营方式、有效区域、有效期至、发证机关、发证日期；副证注明生产种子的作物种类、种子类别、品种名称及审定编号、转基因安全证书编号、生产地点、有效期至等。转基因棉花种子生产经营许可证加注许可信息代码。
（一）许可证编号为“G（农）农种许字（xxxx）第xxxx号”，第二个括号内为首次发证时的年号，“第xxxx号”为四位顺序号；
（二）生产经营方式按生产、加工、包装、批发、零售填写；
（三）生产地点为种子生产所在地，标注至县级行政区域。
第七条转基因棉花种子生产经营许可证有效期为5年，同时不得超出农业转基因生物安全证书规定的有效期限。
在有效期内变更主证、副证载明事项的，应当按照原申请程序办理变更手续，并提供相应证明材料。
许可证期满后继续从事转基因棉花种子生产经营的，企业应当在期满六个月前重新提出申请。
第八条转基因棉花种子生产经营许可的其他事项，按照
《农作物种子生产经营许可管理办法》有关规定执行。
第九条本规定自2016年10月18日起施行。农业部2011年9月6日公布、2015年4月29日修订的《转基因棉花种子生产经营许可规定》（农业部第1643号公告）同时废止。
本规定施行之日前已取得的转基因棉花种子生产、经营许可证有效期不变，有效期在本规定公布之日至2016年12月31日届满的企业，其原有转基因棉花种子生产、经营许可证的有效期自动延展至2016年12月31日。
对转基因棉花的浅析
对转基因棉花的浅析 摘要：1990年，美国利用生物技术，合成B.t杀虫基因，导入棉花获得抗虫转基因棉花，成为世界上第一个拥有转基因抗虫棉的国家。我国“抗虫棉研究”在“七五”期间开始进行。“八五”期间，在“863”计划资助下，也人工合成了CryIA(b)和CryIA(c)杀虫基因导入我国棉花主栽品种获得成功，成为继美国之后，第二个拥有自主研制抗虫棉的国家。 关键词：转基因；棉花；抗虫；种植 正文： 转基因棉花是指把其他物种中的有用基因导入棉花的基因组后，获得了该基因功能的棉花。1990年，美国利用生物技术，合成B.t杀虫基因，导入棉花获得抗虫转基因棉花，成为世界上第一个拥有转基因抗虫棉的国家。我国“抗虫棉研究”在“七五”期间开始进行。“八五”期间，在“863”计划资助下，也人工合成了CryIA(b)和CryIA(c)杀虫基因导入我国棉花主栽品种获得成功，成为继美国之后，第二个拥有自主研制抗虫棉的国家。“九五”开始，“抗虫棉”的研究又被国家“863”计划立为重大项目，进一步开展单价基因、双价基因及多价基因抗虫棉的研究，分离新的抗虫基因及抗刺吸式口器害虫（蚜虫）新基因的分离，改造及合成融合蛋白基因，对获得的新基因进行重组，构建高效植物表达载体。同时“九五”期间，“863”计划还将根据目前单价抗虫棉可能存在的棉铃虫产生抗性的问题，在生产中使用的持久性问题，环境释放安全性问题，遗传分离及稳定性问题，以及田间加代选择农艺性状以及蚜虫危害等问题作深入的研究。（中国转基因棉花产业化背景） 1、转基因棉花的现状 1.1我国的转基因棉花情况 来自中国农业科学院棉花研究所的最新统计显示，今年全国转基因抗虫棉种植面积达4000多万亩，占棉花总面积一半以上。今年全国转基因抗虫棉种植面积达4656万亩，而国产转基因抗虫棉种植面积达到70％左右。目前全国种植转基因抗虫棉的省份有11个。其中河北、山东、河南、安徽4省实现了100％的种植,据中国农业科学院棉花研究所有关负责人介绍，我国目前已经建成高效、工厂化的棉花转基因技术体系，培育成功的转基因棉花新品种已达8个，年产转
棉花种子的质量控制与识别技术
棉花种子的质量控制与识别技术 近年来，随着科技和市场深入结合，棉花种子产业化体系经历了起步、发展、成熟和逐步完善的过程。杂交棉、抗虫棉推动了棉花育种事业市场化，促进了棉花生产发展。全国棉花常年种植面积在5000khrn2左右，棉种年需求量在150k t以上这使得棉花种业经济一片繁荣，种子经营企业越来越多，棉花种子质量是种业经济的生命线，贯穿于种子生产、加工、销售及售前售后服务各个环节。在棉花种子市场监督检验体系中，种子质量检验通常包括四项必检指标：纯度、发芽率、水分、净度。而在种子生产过程中，是通过严格的质量控制过程来实现这几项指标达标的。 1 棉种的品种性状质量控制与识别 在棉种生产过程中，品种性状质量反应的是种子纯度指标，它取决于棉种生产前期；但是，种子纯度的提高和保护却贯穿种子生产全过程。（1）亲本或原种的纯度控制；亲本或原种的纯度是生产用种纯度的基础，保纯要求相当严格。棉种繁育应采取株系隔离种植，收获加工时做到单收、单晒、单轧，防止人为混杂和机械混杂。（2）田间杂株剔除；有特异性状的棉株，根据性状有无剔除杂株；无特异性状的，可对照典型株形态描述拔除杂株。抗虫棉在棉苗3-4片真叶时，喷施2 4 g／L的卡那霉素溶液，然后根据叶色反应剔除不抗虫杂株。（3）收获前保纯；常规棉种收取中上部种花，收获前要拔除异型株；杂交棉种收获前要组织技术人员进行自交铃检查摘除工作。杂交铃铃型明显不同于自交铃，杂交铃基部扁平，铃体近于锥形，铃底萼片残破缺损；而自交铃铃体近于卵形，铃底萼片完好。同时，要登记杂交田块的自交铃率，对自交铃率超过3％的田块，不能作为棉种采收。 2 棉种的种子性能质量控制与识别 棉种的发芽率指标是决定种子性能质量关键指标，它涉及制种全过程，与种子田栽培水平、收获管理力度等密切相关，可塑性大，是棉种质量控制中工作量相对较大的一部分，可细分为种子的成熟度、健康程度、水分含量和贮存。其次是净度指标，它主要体现在种子的加工过程中。（1）种子成熟度与休眠；在外观识别上，棉花种子成熟度表现在种子的色泽、种粒大小和比重3个方面。区别种子是否成熟，一是看种皮的颜色，其成熟变化为灰白、红色、黑褐色，种皮越近黑褐色，种子成熟度越高；二是用浓硫酸直接对毛子脱绒清洗时，成熟的种子沉于底部，且个体略小，漂浮于水面的多为嫩子、秕子、空子等，一般来说，漂浮水面的种子达15％，就没有作种用加工价值。棉花种子休眠是生理现象，一般新收获的种子休眠子多，在化学调节剂使用过多和成熟后期遭遇低温多雨情况下，棉种休眠率也增加。在发芽试验中表现为新鲜不发芽和硬实(仅占1％～2％)属于休眠种子。（2）种子病虫害；对种子的健康程度，首先是在制种田块选择上应该严格规避有病田块；其次是收获种花时规避有病虫害的种子。对检测病害子粒，可在培养皿中放入2～3层吸水纸，滴入无菌水湿润，放上脱绒光子，在2 0 度环境中放置4～5天，有变色及异常者为病害子粒。（3）水分含量；种子的水分含量直接影响到种子发芽率。收获后，务必及时晒干，晒干后以回潮率不超过8％为准，水分超标的种子不可加工。（4）加工与存放质量；加工质量对棉种发芽率和净度指标有影响，加工质量控制取决于棉种生产管理水平和在子棉轧花、剥绒、脱绒、包衣、包装等过程中的机器效率与运行管理。 陈文钢 2012年6月4日
转基因棉花的应用研究
转基因棉花的应用研究 1.引言 自1990年美国合成苏云金芽胞杆菌基因（BT基因）并导入棉花获得世界上第一株抗虫转基因棉花以来，世界各国纷纷展开对转基因农作物的研究，发达国家把发展转基因技术作为抢占未来科技制高点和增强农业国际竞争力的战略重点，发展中国家也积极跟进。研究的主要方向分别是抗虫、耐除草剂、抗病、纤维改良、抗旱和耐盐碱[1]。 上个世纪90年代，在中国大部分种植棉花的地区持续性发生棉铃虫害，给棉花生产带来了巨大的威胁，大大增加了棉花种植成本，给种植棉花的农户造成了一定的经济损失。“八五”期间，中国人工合成的Cry1Ab和Cry1Ac杀虫基因导入棉花中获得成功，成为了世界上继美国之后第二个拥有自主研制抗虫棉的国家[2]。培育更加具备优良性状的转基因棉花品种，应用于棉花生产，解决棉花 病虫害给棉花生产带来的巨大损失，减少化学农药的使用量，保护环境和生态平衡，成为了当代转基因技术研究工作者的目标。 2.转基因棉花的技术来源与应用实践 2.1 转基因技术介绍 随着生物基因技术的出现，在技术工具理性的驱动下，人类获得了打破物种间固有边界并根据人类自身的意愿重新改造生物的能力。转基因技术的原理是将人工分离或修饰过的优质基因，导入到生物体基因组中，从而达到改造生物的目的。其理论基础来源于进化论衍生来的分子生物学[3]。基因片段的来源可以是 提取特定生物体基因组中所需要的目的基因，也可以是人工合成指定序列的DNA 片段。 转基因技术的应用可以使重组生物增加人们所期望的新性状，培育出新品种。转基因作物的大规模商业化种植始于1996年，主要的转基因作物有棉花、大豆、玉米和油菜[4]。转基因技术的遗传转化方法按是否需要通过组织培养分成两大类，一类需要通过组织培养再生植株，常用的方法有农杆菌介导转化法、基因枪法；另一类方法不需要通过组织培养，比较成熟的主要有花粉管通道法[5]。 2.2转基因棉花介绍 棉花，属于锦葵科棉属，是世界上最主要的经济作物之一。全世界植棉国家和地区有96个，其中产量较高的国家有中国、美国、印度等[6]。中国是世界产棉大国，年植棉面积470万公顷，棉花产量占世界总产量的1/4[7]。病虫害对棉花的种植有很大的影响，制约了棉花的发展。与此同时，化学农药的大量使用导致了一些棉花害虫抗药性的产生，严重威胁了棉花的生产，并且使环境污染日益恶化。 随着转基因技术的发展，利用植物基因工程和遗传育种技术手段培育的转基因抗虫、耐除草剂棉花，为棉花害虫和草害的控制提供了新的手段。转基因棉花受到了棉农的喜爱，得到了进一步的推广。转基因棉花，就是将人们预想的可以得到表达的基因（比如抗病虫害的苏云金芽胞杆菌基因）通过遗传转化方法进行
棉花转基因技术研究
收稿日期:2008201215 基金项目:国家“863”计划现代农业技术领域重大项目资助(编号2006AA10A211)。 作者简介:魏艳丽,(1978-)女,助理研究员,从事农业微生物研究。 3为通讯作者,E 2mail :yanght @https://www.wendangku.net/doc/337788425.html, 文章编号:100224026(2008)0320038204棉花转基因技术研究 魏艳丽1,黄玉杰1,李红梅1,孙红星1,2,杨合同1,23 (1.山东省科学院中日友好生物技术研究中心,山东省应用微生物重点实验室,山东济南250014; 2.山东理工大学,山东淄博255049) 摘要:棉花是一种重要的经济作物,在我国广泛种植。 培育转基因棉花被看作是解决产量和生态环境问题最 根本和最有效的方式。本文介绍了转基因棉花主要的研究方法,包括转化方法以及转入的基因等,并对转基 因棉花的发展趋势作了相关探索。 关键词:转基因;棉花;遗传转化;Bt 中图分类号:S562.032 文献标识码:A A Survey of Cotton Transgene Technology WEI Y an 2li 1,H UANG Y u 2jie 1,LI H ong 2mei 1,S UN H ong 2xing 1,2,Y ANG He 2tong 1,23 (1.Biotechnology Research Center ,Shandong Academy o f Sciences ;K ey Laboratory o f Applied Microbiology o f Shandong Province ,Jinan 250014,China ; 2.School o f Life Sciences ,Shandong Univer sity o f Technology ,Zibo 255049,China ) Abstract :C otton is one of im portant industrial crops ,and is widely planted in China.The cultivation of transgenic cotton is considered the m ost efficient way of increasing yield and res olving environmental problems.We introduced three dominant approaches in the development of genetic cotton and s ome useful target genes ,and forecast its probable future w ork. K ey w ords :transgene ;cotton ;genetic trans formation ;Bt 1 引言 棉花是一种以利用纤维为主的农作物。据估计,棉花每年创造的产值有1800～2000亿美元,全世界有18亿人口以种植棉花为生[1]。棉花同时又是一种非常容易感染病虫害的农作物,我国棉花每年因虫害造成 的产量损失约为10%～15%,而每年用于棉花防治的杀虫剂的剂量约占杀虫剂使用总量的2Π3[2]。随着生物 技术特别是基因工程技术的成熟,人们认识到利用转基因技术改造棉花,是提高棉花产量以及解决环境问题的根本途径。 1979年Price 和Smith 报道通过克劳茨基棉细胞悬浮培养得到胚状体[3],1986年,美国Agracetus 公司的第21卷 第3期 2008年6月 山东科学SH ANDONG SCIE NCE V ol.21 N o.3Jun.2008
棉花化学打顶与人工打顶效果对比分析
棉花化学打顶与人工打顶效果对比分析
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棉花化学打顶与人工打顶效果对比分析-农学论文 棉花化学打顶与人工打顶效果对比分析 南鹤 （兵团第八师一四一团物资技术站，新疆石河子832028） 摘要：打顶是棉花栽培过程中的一个关键环节，直接影响棉花的产量和品质。通过打顶可消除棉花顶端生长优势，调节体内水分、养分等物质的运输方向，使较多的养分供生殖器官生长，减少无效果枝对水肥的消耗，促使棉株早结铃、多结铃，减少脱落，有明显的增产增收效果。传统的人工打顶技术需消耗大量的人力成本，而化学打顶技术具有省时、省力、高效的特点。本试验通过对人工打顶和化学打顶棉花的生长发育特点及性状的对比分析，以探索化学打顶的关键措施，对加速棉花全程机械化进程具有重要意义。 关键词：人工打顶；化学打顶；棉花性状比较 1 材料与方法 1.1 试验地点 本试验设在第八师一四一团1连1#地，土壤为沙壤土，肥力中上。棉花采用2膜12行，1膜3管滴灌，膜上精量点播，株行距为66 cm + 10 cm。 1.2 参试棉花品种 陆地棉902。 1.3 试验设计 试验设置2个处理，处理1为化学打顶，喷施氟节胺100 g/667 m2；处理2为人工打顶，每个处理重复3次，随机区组排列，小区面积500 m2。 1.4 数据调查
本试验调查分2次进行，分别在每小区中间和两边各连续选5株，于7月19日（第2次喷施氟节胺后2 d）和8月14日定点调查棉花株高、叶龄、果枝台数、果枝长度及果枝结铃情况，收获期调查产量性状，收获后各小区单独计产[1]。 2 结果与分析 2.1 农艺性状比较 从表1可以看出，化学打顶棉花的株高、叶龄、果枝台数均较人工打顶高。表明人工打顶对棉花顶端生长优势控制的较好。 从表2可以看出，化学打顶棉花的果枝长度明显小于人工的果枝长度，依然表明人工打顶对棉花顶端生长控制的较好。 2.2 棉花花、蕾、铃数比较 从表3可以看出，化学打顶棉花蕾数明显多于人工打顶。说明化学打顶处理棉花的蕾仍然继续生长发育，导致后期化学打顶棉花的花和铃多于人工打顶处理。 2.3 棉花产量比较
转基因棉花种子生产经营许可规定
根据《中华人民共和国种子法》《农业转基因生物安全管理条例》和《农作物种子生产经营许可管理办法》规定，我部修订了《转基因棉花种子生产经营许可规定》，现予公布，自2016年10月18日起施行。农业部2011年9月6日发布的《转基因棉花种子生产经营许可规定》（农业部第1643号公告）同时废止。 特此公告。 农业部 2016年9月18日 转基因棉花种子生产经营许可规定 第一条为加强转基因棉花种子生产经营许可管理，根据《中华人民共和国种子法》《农业转基因生物安全管理条例》《农作物种子生产经营许可管理办法》，制定本规定。 第二条转基因棉花种子生产经营许可证，由企业所在地省级农业主管部门审核，农业部核发。 第三条申请领取转基因棉花种子生产经营许可证的企业，应当具备以下条件： （一）具有办公场所200平方米以上，检验室150平方米以上，加工厂房500平方米以上，仓库500平方米以上； （二）具有转基因棉花自育品种或作为第一选育人的品种1个以上，或者合作选育的品种2个以上，或者受让品种权的品种3个以上；生产经营的品种应当通过审定并取得农业转基因生物安全证书。生产经营授权品种种子的，应当征得品种权人的书面
同意； （三）具有净度分析台、电子秤、样品粉碎机、烘箱、生物显微镜、电子天平、扦样器、分样器、发芽箱、PCR扩增仪及产物检测配套设备、酸度计、高压灭菌锅、磁力搅拌器、恒温水浴锅、高速冷冻离心机、成套移液器等仪器设备，能够开展种子水分、净度、纯度、发芽率四项指标检测及品种分子鉴定； （四）具有种子加工成套设备，成套设备总加工能力1吨/小时以上，配备棉籽化学脱绒设备； （五）具有种子生产、加工贮藏和检验专业技术人员各3名以上，农业转基因生物安全管理人员2名以上； （六）种子生产地点、经营区域在农业转基因生物安全证书批准的区域内； （七）符合棉花种子生产规程以及转基因棉花种子安全生产要求的隔离和生产条件，生产地点无检疫性有害生物； （八）有相应的农业转基因生物安全管理、防范措施； （九）农业部规定的其他条件。 第四条申请转基因棉花种子生产经营许可证的企业，应当向审核机关提交以下材料： （一）转基因棉花种子生产经营许可证申请表（式样见附件1）； （二）单位性质、股权结构等基本情况，公司章程、营业执照复印件，设立分支机构、委托生产种子、委托代销种子以及以
农杆菌介导棉花转基因的方法
目录 摘要 (4) 1 前言 (4) 1.1植物转基因的意义 (4) 1.2棉花转基因常用的方法 ............................. 错误！未定义书签。 1.2.1基因枪法 (5) 1.2.2 PEG法 (5) 1.2.3显微注射法、电击法及激光法 (5) 1.2.4花粉管通道法 (6) 1.2.5农杆菌介导法 (6) 1.3植物耐盐相关的SOS2 基因 (9) 1.3.1SOS2 基因的定位克隆 (9) 1.3.2SOS2 编码一个假定的丝氨酸/ 苏氨酸蛋白激酶错误！未 定义书签。 1.4农杆菌介导棉花的作用 (10) 2 供试材料 ............................................................. 错误！未定义书签。 2.1棉花的胚性愈伤 ......................................... 错误！未定义书签。 2.2介导菌种 ..................................................... 错误！未定义书签。 3 方法与结果 ......................................................... 错误！未定义书签。 3.1实验方法 ..................................................... 错误！未定义书签。 3.1.1平板划线 ............................................ 错误！未定义书签。
棉花转基因技术研究进展
农业生物技术课程论文 题目：棉花转基因技术研究进展 院（系）：农学院 专业：农学 班级：农学081 姓名：秦绍龙 学号：01108012 成绩： 完成日期：2011年5月25日
棉花转基因技术研究进展 摘要：近些年来，转基因技术被广泛应用于遗传育种中，尤其是在棉花遗传育种和基因改良方面取得了重大的突破，本文主要通过查阅参考文献，综合阐述了三大转基因技术手段及其在棉花抗虫、抗病、抗除草剂以及品质改良等方面的应用与最新进展，并对棉花转基因研究进展中存在的主要问题进行分析。 关键词：棉花；转基因；育种；外源基因；进展 转基因技术又称外源基因导入技术, 它是通过采用农杆菌介导技术、花粉管通道技术与基因枪导入技术, 将外源基因导入受体作物的细胞，并得到整合与表达的一种现代高新育种技术。在国家“863”项目的支持下，我国自20世纪80年代末开始棉花转基因育种技术研究与开发应用,该项技术在我国发展很快，也取得了一些重大的成就与技术突破。在转基因技术的正确指引下，目前棉花转基因育种中已获得了大量转基因抗病、抗虫、抗除草剂等方面的优良抗性株系,并选育出了多个转基因抗病虫品种,这些品种在增强抗病虫性的同时，基本上延续了受体亲本原有的高产、优质的良好性状，但所选育的转基因棉花品种仍不同程度地存在种子活力低、前期生长发育偏慢、中期易发生茎枯病、后期易脱肥早衰、抗性范围窄且随生育进程强度下降等缺陷。 一、转基因棉花研究的概况 自从1983年，人类首次获得转基因烟草、马铃薯以来，植物转基因技术在基础研究和应用开发中获得了显著进展，成功培育一批具有抗虫、抗病、耐除草剂和高产优质等外源优异性状的农作物新品种，对农业的生产方式和经济效益产生了深刻影响。棉花是利用转基因技术进行遗传改良最为成功的作物之一，仅我国自主研制的CryA+CpTI双价抗虫等基因就已被转育到41个棉花品种中。棉花作为主要的经济作物之一，对一个国家国民经济发展起到了举足轻重的作用，也曾一度被列入我国战略储备物资行列。近年来，随着基因工程技术的不断发展，利用生物技术来创新棉花种质资源和培育新品种是一条非常有效的途径，极大地推动了棉花遗传育种的发展随着国际转基因技术的不断发展和转基因生物安全性方面的相关法律法规的不断完善，转基因作物的大面积推广和种植势不可挡。美国转基因抗虫棉大田种植已超过其棉田总面积的70%，澳大利亚和中国超过30%，全球转基因棉花种植面积达到680万公顷，占世界棉花种植面积的20%。 棉花为我国主要农作物之一，其基因工程方面的研究进展迅速，在抗虫、抗病、抗除草剂、棉纤维品质改良和生态效应方面均取得了一系列重要研究成果。1992 年中国农科院
抗草甘膦转基因大豆的操作步骤
抗草甘膦转基因大豆的操作步骤 转基因大豆可以抵抗杀草剂——草甘膦（毒滴混剂）。草甘膦会把普通大豆植株与杂草一起杀死。这种大豆被称为转基因大豆。而这种转基因技术终于走出实验室和试验田，进入像玉米、大豆和棉花作物的日常耕作。 抗草甘膦转基因大豆针对草甘膦的作用机理，导入能够使植物表达更多的4252合成酶的基因，使植株对草甘膦不敏感从而能够忍受正常剂量或更高剂量的草甘膦而不被杀死。从鼠伤寒沙门氏菌及大肠杆菌中可以直接分离出抗草甘膦的4252编码AroA，美国Monsonto公司利用该机制将该抗性基因导入大豆中成功地获得了抗草甘膦转基因大豆。这种转基因大豆对草甘膦的忍耐能力是普通大豆的69倍，从而使大豆田中的绝大部分一年生或多年生杂草得到控制而大豆本身不受伤害。除了抗草甘膦作物之外，还有抗草丁膦除草剂的作物，不过草丁膦与草甘膦杀灭植物的原理并不相同，而培养这两类作物所转的基因也不同。而当前转基因大豆主要用来提炼大豆油。 抗草甘膦转基因大豆的操作步骤;（1）分离克隆基因，搞清楚基因功能。（2）构建表达载体，也就是运输工具，即质粒或载体。（3）遗传转化，也就是所说的转基因，利用各种方法，把备转移的质粒DNA转移到植物细胞的细胞核中，让外源DNA在细胞中复制。本次使用的转基因方法是根癌农杆菌法。根癌农杆
菌是一种土壤农杆菌，在它的细胞中有一个环形的质粒，叫Ti 质粒，质粒上有一段可转移的DNA，叫T-DNA。这段T-DNA 上带有编码肿瘤的基因，根癌农杆菌侵染大豆后，这段T-DNA 可以切下来，转移到大豆的细胞中，是植物中产生肿瘤。把T-DNA 编码肿瘤的基因切除，插入所需转移的目的基因上，使大豆具有新的特性。转入目的基因的同时，还需转入一个选择标记基因，以便后面筛选和鉴定出转化的细胞。即获得目的基因的细胞是少数，大多数仍是非转基因的细胞，要筛选出转化的细胞，需要在转化后把非转基因细胞杀死。本次使用的标记基因是除草剂抗性标记基因，在培养大豆细胞阶段，在培养基中加入抗草甘膦除草剂，没有转入的基因的细胞不具有抗除草剂。在转基因大豆幼苗期，使用飞机或大型机动喷雾器对转基因大豆直接喷洒草甘膦，大豆苗长高封行后，收割前五十天左右不用再喷洒，等待收割即可。草甘膦杀死了除抗除草剂转基因大豆以外的杂草，使产量提高。转基因大豆的草甘膦残留一般很低，或者根本检测不出，五十天时间草甘膦残留几乎为零。 抗草甘膦转基因大豆的优缺点：优点（1）增加粮食生产、减少生产的投入，有助于解决世界范围的粮食问题（2）转基因大豆具有抗病虫害、抗除草剂的特性，可减少杀虫剂、除草剂的使用，有利于环境保护。（3）通过利用某些基因，增加食物品种，改善食物品质，使食物更加可口。缺点（1）转基因技术使不同物种的基因相互融合，而对其后果却无法控制，因而可能造成基因污
棉花转基因
基金项目：863子项目“特殊生境植物资源的开发利用技术”（No ：2007AA021401）转基因专项“转新型基因的棉花种质资源材料创造”（No ：2008ZX08005-004）。 第一作者简介：张煜星，男，1967年出生，副教授，博士生，从事植物基因工程研究。通信地址：571101海口市城西学院路，中国热带农业科学院热带生物技术研究所国家重点实验室周鹏转张煜星，Tel ：015109875070，E-mail ：zyx2027193@https://www.wendangku.net/doc/337788425.html, 。 通讯作者：男，1963年出生，研究员，博士生导师，从事植物基因工程研究。E-mail ：Zhp6301@https://www.wendangku.net/doc/337788425.html, 。 收稿日期：2009-04-16，修回日期：2009-05-07。 棉花accD 基因植物表达载体的 构建与遗传转化的研究 张煜星1,2,3，崔燕3，祝建波3，周鹏2 （1海南大学农学院，海南儋州571737； 2中国热带农业科学院热带生物技术研究所国家重点实验室，海口571101； 3石河子大学生命科学学院农业生物技术重点实验室，新疆石河子832003） 摘要：乙酰辅酶A 羧化酶(ACCase)催化脂肪酸合成的第一步，是脂肪酸合成的限速酶。采用PCR 方法分别从陆地棉和拟南芥基因组中扩增出ACCase 羧基转移酶β-CT 亚基编码基因accD ，ACCase 羧基转移酶α-CT 亚基编码基因CAC3的定位于叶绿体的转运肽序列。将CAC3基因转运肽序列与accD 基因进行体外重组，构建融合植物表达载体pBI-CAC3tp-accD 。重组质粒通过冻融法转化根癌农杆菌GV3101。渗透法转化拟南芥，收种子，在含卡那霉素的MS 培养基中发芽筛选。用叶盘法转化烟草，经不定芽诱导、生根培养，获转基因烟草植株。T1代转基因拟南芥和转基因烟草植株经卡那霉素检测、PCR 、RT-PCR 检测后，初步表明目的基因已在植株中转化成功，并可以正常转录。 关键词：陆地棉；拟南芥；accD 基因 中图分类号：S336文献标识码：A 论文编号：2009-0791 Construction of Plant Expression Vector on accD Gene fom Gossypuum hirsutum and Its Genetic Transformation Zhang Yuxing 1,2,3,Cui Yan 3,Zhu Jianbo 3,Zhou Peng 2(1College of Agronomy,Hainan University ,Danzhou Hainan 571737; 2National Key Biotechnology Laboratory for Tropical Crops, Institute of Bioscience and Biotechnology,CATAS,Haikou,571101; 3Laboratory of Agricultural Biotechnology ,College of Life Science,Shihezi Universit ,Shihezi Xinjiang 832003) Abstract:The acetyl-CoA carboxylase (ACCase)is the rate-limiting enzyme of fatty acids synthesis.The accD Gene and transit peptide of CAC3Gene was amplified from Gossypuum hirsutum Genome and Arabidopsis thaliana Geneome.Plant Expression Vector of Fusion Transit Peptide of CAC3Gene and accD Gene was constructed.The Vector of pBI-CAC3tp -accD were transferred into Agrobacterium tumefaciens https://www.wendangku.net/doc/337788425.html,ing infiltration and leaf discs method,the gene were transferred into Arabidopsis thaliana and tobacco cell.The seeds of Arabidopsis thaliana were selected on solid medium containing Kanamycin.Transferred leafs of tobacco were selected on solid medium containing Kanamycin.Transgenic Arabidopsis thaliana (T1)and tobacco plants were found containing purpose gene by PCR.After RT-PCR,it shows that the CAC3tp -accD gene could transcript normally.Key words:Gossypuum hirsutum,rabidopsis thaliana,accD Gene 中国农学通报2009,25(18):36-40 Chinese Agricultural Science Bulletin
棉花『促花控旺』剂“鼎安”实验报告
棉花『促花控旺』剂“鼎安” 大田棉花（免打顶）示范试验 1.实验目的 为了不断研究、开发棉花生产新技术，充分挖掘棉花生产节本增效潜力，将目前常规人工摘除顶尖和群尖的方法，改为利用生长调节剂进行整枝和抑制生长点的生长，达到一次施药全面整枝的化学整枝技术，最大限度简化棉田整枝工序，降低植棉成本，促进棉花生产向质量效益转变。 2.试验 2.1试验地点：试验地设在石河子总场三分场四连1#地，面积150亩。试验田整块地土质基本一致，熟地，肥力中等以上。膜上点播，滴灌，一膜两管6行，苗匀，长势偏旺。 2.2.试验材料 2.2. 1供试品种：当地主栽品种新陆早—54。 2.2.2棉花棉花『促花控旺』剂“鼎安”由漯河市斯诺丰（加拿大）生物科技有限公司提供。产品由“鼎安”1号（喷施型）和“鼎安”2号（滴灌型）组成。 2.2.3试验设计 处理1：打顶前3-5天，亩用50ml “鼎安”1号冠层喷雾，10天后亩用“鼎安”2号20ml滴灌。 处理2：平均株高65cm、可见果枝6台以上，（长势偏旺棉田），用“鼎安”2号滴灌，首次亩用4-6ml，15-20天后15-25ml/亩（看长势而定）。 处理3：打顶前5天滴灌“鼎安”2号20ml/亩。 处理4：打顶后倒一果枝长出3cm左右时滴灌“鼎安”2号20-30ml/亩（看长势而定）。
以上各处理面积平均30亩，制剂处理后不再进行人工打顶。 处理5（ ck）：同步人工打顶管理，不使用任何化学打顶剂，面积30亩。 2.3使用方法 1#制剂稀释400-500倍液使用，新疆棉区最佳喷施时间为早上11点前至下午6点钟后，喷后4小时遇雨应重新补喷。2#制剂滴灌使用时，在肥料施完后，滴水结束前2小时，即可加入本剂。 3.1调查方法 各处理在同一水平线的相同位置，选取长势基本一致的棉花20株，进行定点调查，自6月25日开始，10天一次。8月25日后对各试验小区进行测产和生产成本分析。 表1 试验地基本情况调查表
草甘膦与转基因作物
草甘膦与转基因作物 草甘膦与转基因作物有关系么？有，也没有。1970年，孟山都公司的化学家John E. Franz合成了草甘膦。1974年，草甘膦作为除草剂在美国成功登记注册。由于除草效果超级好，草甘膦受到广大农民的热烈欢迎。在草甘膦成功商业化20多年后，1996年第一例转基因抗草甘膦大豆问世了。草甘膦比转基因大20岁。 直接关系：在生产应用上，草甘膦与转基因抗除草剂作物建立了一一对应的关系。 在技术研发上，二者没有关系。 间接关系：由于使用草甘膦，而不用其它除草剂，转基因抗草甘膦作物中草甘膦的残留量相应增加，其他除草剂残留量相应减少。 转基因作物自身安全性与草甘膦农药的安全性没有关系。 抗草甘膦作物为什么能够抗草甘膦呢？ 找一种聪明的EPSPS酶，转到植物中去，它能够分得清草甘膦和PEP，并且更喜欢与PEP在一起。即使喷上草甘膦，它也能有效地找到PEP，发挥正常EPSPS
酶的功能。 比如占美国大豆种植面积90%以上的抗草甘膦大豆，就是被转入了一个来源于土壤中常见细菌的基因，因为分离得到这个基因的菌株叫CP4，这个基因表达出来的“聪明”酶就被命名为CP4 EPSPS。 抗草甘膦作物种植面积增加了，草甘膦使用量不就变多了吗？ 没错。但是草甘膦的用量上升了，其他除草剂的用量减少了，除草剂总的用量最终减少了。1996-2013年期间，仅转基因耐除草剂棉花大规模种植就使得除草剂用量减少了两万多吨。并且，草甘膦是目前已知的对环境最友好的绿色农药,
没有之一。这么说，转基因技术和草甘膦的配套应用还促进了绿色环保。 草甘膦会残留在食物中吗？ 当然会，但残留量很低，远小于联合国粮农组织和世界卫生组织建议的摄入量。在耐草甘膦作物中，大部分草甘膦通过根系排放到土壤中，少部分留在植株中,主要被代谢为AMPA，并进一步转化为简单化合物及天然产物，并且，草甘膦残留量在作物不同部位差异很大，籽粒中的残留明显低于其他部位。 国际食品法典委员会（CODEX）对草甘膦在各类食品中的最大残留量有明确规定。玉米为每公斤5毫克，大豆为每公斤20毫克。 联合国粮农组织和世界卫生组织的下属农药残留专家联席会议（JMPR）在2011年建议，草甘膦每日最大摄入量（ADI）为每公斤体重0至1毫克。结合CODEX 最大残留量规定，成年人一天中要吃4公斤大豆，或16公斤玉米才会达到JMPR 所建议的草甘膦每日最大摄入量。 2015年11月12日，欧盟食品安全局（EFSA）和欧盟成员国完成对草甘膦的重新评估。评估小组结论是草甘膦不大可能对人类有致癌风险。按照欧盟法规（EC）1272/2008号，这些证据不支持将草甘膦归为潜在致癌性一类。2016年欧盟委员会根据欧盟实施条例（EU）2016/1056决定续登记草甘膦至2017年12月31日。
转基因棉花在生产应用上的风险与安全控制
转基因棉花在生产应用上的风险与安全控制 植物转基因技术的诞生，对生物工程技术和世界农业都产生了巨大影响。棉花是纤维植物，由于遗传转化的限制，棉花的转基因研究起步较晚，但近几年进展迅速。一方面，随着转基因技术的发展，抗虫、抗病、抗除草剂基因等先后成功导入棉花载体中并应用于大田生产，使得转基因抗虫棉成为我国唯一大面积种植并实现产业化的转基因农作物。对缓解棉铃虫给棉花生产造成的为害、减少化学农药的使用量和保护生态环境起到了重要的作用；另一方面，随着转基因棉花的大面积应用，其安全性问题逐渐引起了人们的重视，转基因棉花的田间种植是否会引起外源基因向其他物种渗透，是否会对生态环境造成危害，这都是转基因植物进入商业化生产前都必须明确的问题¨1。但目前人们还很难准确预测外源基因导入一个新的遗传背景会产生什么样的后果心1。因此，必须采取措施预防转基因棉花在生产应用中可能存在的安全风险，作者以目前应用面积最大的转Bt基因抗虫棉为基础，进行转外源基因棉花在生产上应用对生态环境安全的影响分析，并提出转Bt基因抗虫棉在生产应用上的风险预防和安全控制措施。 1 转基因棉花在生产应用上的风险
1.1抗除草剂棉花有成为杂草的可能 杂草生长迅速并且具有强大生存竞争力，能够广泛传播，阻碍农作物的生长。所以，杂草常常给农业生产造成巨大损失。虽然转基因棉花在抗病虫性、抗逆性和生活力等方面比非转基因棉花强，但由于棉花不具有杂草特性，不会入侵其他植物栖息地，破坏自然种群平衡，一般情况下，转基因棉花不会出现杂草化问题。但近年来棉田除草普遍使用除草剂对棉花造成伤害，为了减少除草剂对棉花的伤害而开展的抗除草剂棉花选育。有使其成为杂草的可能，如果抗除草基因从棉花漂移到杂草上，也就有可能出现抗（耐）除草剂的“超级杂草”。1.2基因漂移威胁棉花近缘物种基因漂移是指基因通过花粉授精杂交等途径在种群之间扩散的过程。棉花是常异花授粉作物，转基因棉花的外源基因花粉可以通过风力、昆虫等向近缘非转基因植物转移，不仅影响近缘物种的遗传纯度，使近缘物种有获得选择优势的潜在可能性，如果近缘物种获得抗病、抗虫或抗除草剂基因。也可能使其成为另一种“超级杂草”。这样会促使大量化学农药的应用，造成严重的环境危害。另外，随着转基因棉花的大面积推广应用，还可能向其他物种渗透，若大量外源基因漂移进入野生植物基因库并扩散开来，可能会影响基因库的遗传结 构，给生物多样性造成危害心1。
转基因技术及其在棉花育种中的应用
转基因技术在棉花育种中的应用 杨金惠 812031001 作物领域 2012级 摘要：棉花是一种重要的经济作物，在我国广泛种植。培育转基因棉花被看作是解决产量和生态环境问题最根本和最有效的方式。本文介绍了转基因棉花主要的研究方法，包括转化方法以及转入的基因等，并对转基因棉花的发展趋势作了相关探索。此外，本文总结了转基因技术在棉花遗传改良中的应用，包括棉花抗病、抗虫、抗除草剂、抗逆以及品质改良等方面的最新进展，并对棉花转基因研究中存在的主要问题和今后的研究与应用前景进行分析和展望。 关键词：转基因；棉花；育种 1973 年美国科学家科恩等人第一次将两种不同的DNA 分子进行体外重组, 并且在大肠杆菌中表达以来, 基因工程技术发展飞速, 该技术正在极大地改变着地球生物固有的进化进程。据不完全统计, 目前全球已有60 多种转基因园艺植物和大田作物相继问世, 其中转基因工程技术在棉花品种改良中的应用, 成效卓著。 自从1983年人类首次获得转基因烟草、马铃薯以来，植物重组DNA技术在基础研究和应用开发中获得了显著进展，培育成功一批具有抗虫、抗病、耐除草剂和高产优质等外源优异性状的农作物新品种，对农业的生产方式和经济效益产生了深刻影响。棉花是利用转基因技术进行遗传改良最为成功的作物之一，仅我国自主研制的,CryA+CPTI双价抗虫等基因就已被转育到41个棉花品种中。美国转基因抗虫棉大田种植已超过其棉田总面积的70%，澳大利亚和中国超过30%，全球转基因棉花种植面积达到680万公顷，占世界棉花种植面积的20%。 1.转基因技术 棉花转基因技术是指将外源DNA通过物理、化学或生物学方法导入棉花细胞并得到整合和表达的过程。在棉花遗传转化体系中，主要有农杆菌介导、花粉管通道和基因枪3种转化方法。本研究拟对. 种方法的主要技术特点及研究和应用动态进行综述，旨为棉花分子育种提供参考。 1.1．农杆菌介导法 1.1.1农杆菌转化技术的理论基础 与棉花遗传转化有关的根癌农杆菌是一种土壤习居菌，在自然状态下能感染棉花等大多数双子叶植物营养器官的伤口，导致冠瘿瘤的发生。根癌农杆菌含有一种Ti质粒，侵染时通过棉花器官的伤口进入寄主组织，但其本身不进入寄主植物细胞，只把Ti质粒的T-DNA片断导入棉花的基因组中并得以表达，且外源DNA 表达通常表现出典型的孟德尔遗传规律。由于Ti质粒本身能插入大到50kb的外源DNA，因此利用此转化载体，将Ti质粒上致瘤基因切除，代之以有益的外源DNA 序列，并插入由真核型启动子和细菌抗生素抗性选择标记基因或报告基因组成的嵌合基因，将改造后的农杆菌侵染棉花器官或细胞，在加有相应选择因子的培养基上选择转化再生植株，进而可得到转基因植株。 1.2.花粉管通道法 1.2.1花粉管通道转化技术的理论基础 从整体上说，远缘亲本间的染色体结构是不亲和的。但从进化的角度来看，任何生物DNA均由4种核苷酸组成，这样就可能在顺序上出现不同程度的相同排
转基因棉花种子生产经营许可规定(2015修订)
转基因棉花种子生产经营许可规定(2015修订) 【法规类别】种子 【发文字号】中华人民共和国农业部令2015年第1号 【失效依据】农业部公告第2436号――转基因棉花种子生产经营许可规定(2016修订)【发布部门】农业部 【发布日期】2015.04.29 【实施日期】2015.04.29 【时效性】失效 【效力级别】部门规章 转基因棉花种子生产经营许可规定 （2011年9月6日农业部公告第1643号公布，2015年4月29日农业部令2015年第1 号修订） 第一条为加强转基因棉花种子生产、经营许可管理，根据《中华人民共和国种子法》、《农业转基因生物安全管理条例》和《农作物种子生产经营许可管理办法》，制定本规定。 第二条转基因棉花种子生产、经营许可证，由生产所在地省级人民政府农业行政主管部门审核，农业部核发。 第三条申请领取转基因棉花种子生产许可证的，应当具备以下条件：
（一）注册资本不少于3000万元； （二）生产的品种取得农业转基因生物安全证书并通过品种审定；生产具有植物新品种权的种子，还应当征得品种权人的书面同意； （三）具有完好的净度分析台、电子秤、置床设备、电泳仪、电泳槽、样品粉碎机、烘箱、生物显微镜、电冰箱各1台（套）以上，电子天平（感量百分之一、千分之一和万分之一）1套以上，扦样器、分样器、发芽箱各2台（套）以上，pcr扩增仪、酸度计、高压灭菌锅、磁力搅拌器、恒温水浴锅、高速冷冻离心机、成套移液器、酶标仪、洗板机、凝胶成像系统各1台（套）以上；检验室150平方米以上； （四）有仓库500平方米以上，晒场1000平方米以上或者相应的种子干燥设施设备； （五）有专职的种子生产技术人员、贮藏技术人员和经省级以上人民政府农业行政主管部门考核合格的种子检验人员各3名以上；有专职的农业转基因生物安全管理人员1名以上； （六）生产地点在农业转基因生物安全证书批准的区域内，无检疫性有害生物； （七）符合棉花种子生产规程以及转基因棉花种子安全生产要求的隔离和生产条件； （八）有相应的农业转基因生物安全管理、防范措施； （九）农业部规定的其他条件。 第四条申请转基因棉
转基因棉花
转基因抗虫棉的发展以及存在的问题 张文亮26 摘要：棉花是重要的农作物以及经济产物，自上个世纪90年代以来， 由于棉铃虫在我国大部分棉区持续性大发生或爆发，给棉花生产带来 了巨大的威胁，因此开始进行抗虫棉的研究。本文叙述了抗虫棉的发 展过程以及抗虫棉的特点，从而对转基因抗虫棉有了更深刻的了解， 不仅仅停留在其优点，也发现了它的潜在危害，毕竟所有事物都是有 两面性的。 关键词：转基因棉花、抗虫棉、抗虫性、Bt蛋白、 Abstract：Cotton is one of the important crops and economic product, since the 90s of last century, because of the cotton bollworm in major cotton growing areas of China continuing occurrence or outbreak, cotton production has brought great threat, so start study on insect resistant cotton. This paper describes the Bt cotton in the development process and characteristics of the insect resistant cotton, thus of insect resistant transgenic cotton have more profound understanding, not only stay in the utility model has the advantages of, also found the potential harm, after all, all things are two sides.