分子生物学常用技术 习题
第五章常用分子生物学技术的原理及其应用习题（引自网络精品课程）
一、选择题
（一）A型题
1 ．分子杂交实验不能用于
A ．单链DNA 与RNA 分子之间的杂交
B ．双链DNA 与RNA 分子之间的杂交
C ．单链RNA 分子之间的杂交
D ．单链DNA 分子之间的杂交
E ．抗原与抗体分子之间的杂交
2 ．关于探针叙述错误的是
A ．带有特殊标记
B ．具有特定序列
C ．必须是双链的核酸片段
D ．可以是基因组DNA 片段
E ．可以是抗体
3 ．下列哪种物质不能用作探针
A ．DNA 片段
B ．cDNA
C ．蛋白质
D ．氨基酸
E ．RNA 片段
4 ．印迹技术可以分为
A ．DNA 印迹
B ．RNA 印迹
C ．蛋白质印迹
D ．斑点印迹
E ．以上都对
5 ．PCR 实验延伸温度一般是
A ．90 ℃
B ．72 ℃
C ．80 ℃
D ．95 ℃
E ．60 ℃
6 ．Western blot 中的探针是
A ．RNA
B ．单链DNA
C ．cDNA
D ．抗体
E ．双链DNA
7 ．Northern blotting 与Southern blotting 不同的是
A ．基本原理不同
B ．无需进行限制性内切酶消化
C ．探针必须是RNA
D ．探针必须是DNA
E ．靠毛细作用进行转移
8 ．可以不经电泳分离而直接点样在NC 膜上进行杂交分析的是
A ．斑点印迹
B ．原位杂交
C ．RNA 印迹
D ．DNA 芯片技术
E ．DNA 印迹
9 ．下列哪种物质在PCR 反应中不能作为模板
A ．RNA
B ．单链DNA
C ．cDNA
D ．蛋白质
E ．双链DNA
10 ．RT-PCR 中不涉及的是
A ．探针
B ．cDNA
C ．逆转录酶
D ．RNA
E ．dNTP
11 ．关于PCR 的基本成分叙述错误的是
A ．特异性引物
B ．耐热性DNA 聚合酶
C ．dNTP
D ．含有Zn 2+ 的缓冲液
E ．模板
12 ．DNA 链末端合成终止法不需要
A ．ddNTP
B ．dNTP
C ．引物标记
D ．DNA 聚合酶
E ．模板
13 ．cDNA 文库构建不需要
A ．提取mRNA
B ．限制性内切酶裂解mRNA
C ．逆转录合成cDNA
D ．将cDNA 克隆入质粒或噬菌体
E ．重组载体转化宿主细胞
14 ．标签蛋白沉淀是
A ．研究蛋白质相互作用的技术
B ．基于亲和色谱原理
C ．常用标签是GST
D ．也可以是6 组氨酸标签
E ．以上都对
15 ．研究蛋白质与DNA 在染色质环境下相互作用的技术是
A ．标签蛋白沉淀
B ．酵母双杂交
C ．凝胶迁移变动实验
D ．染色质免疫沉淀法
E ．噬菌体显示筛选系统
16 ．动物整体克隆技术又称为
A ．转基因技术
B ．基因灭活技术
C ．核转移技术
D ．基因剔除技术
E ．基因转移技术
17 ．目前主要克隆的致病基因是
A ．糖尿病致病基因
B ．恶性肿瘤致病基因
C ．单基因致病基因
D ．多基因致病基因
E ．高血压致病基因
18 ．基因疫苗主要是指
A ．DNA 疫苗
B ．RNA 疫苗
C ．反义核酸
D ．核酶
E ．小干扰RNA
19 ．目前基因治疗中选用最多的基因载体是
A ．噬菌体
B ．脂质体
C ．逆转录病毒
D ．腺病毒相关病毒
E ．腺病毒
20 ．目前基因治疗多采用的方法是
A ．基因增补
B ．基因置换
C ．基因矫正
D ．基因灭活
E ．基因疫苗
（二）B型题
A ．Southern blotting
B ．Northern blotting
C ．Western blotting
D ．dot blotting
E ．in situ hybridization
1 ．不需要电泳、转膜等程序
2 ．电泳前不需进行限制性内切酶消化
3 ．靠电转移完成生物大分子的转移
4 ．直接在组织切片或细胞涂片上进行杂交
A ．逆转录PCR
B ．原位PCR
C ．实时PCR
D ．多重PCR
E ．RFLP
5 ．将目的基因扩增与定位相结合
6 ．能动态检测反应过程中的产物量
7 ．将RNA 的逆转录和PCR 反应联合应用的一项技术
8 ．在同一反应中采取多对引物
A ．功能克隆
B ．定位克隆
C ．转基因技术
D ．核转移技术
E ．基因剔除
9 ．也叫基因靶向灭活
10 ．该技术中，被导入的目的基因称为转基因
11 ．从对基因编码产物的功能的了解出发克隆致病基因
A ．基因疫苗
B ．基因矫正
C ．基因置换
D ．基因增补
E ．基因失活
12 ．目前基因治疗采用最多的方法是
13 ．将致病基因的异常碱基进行修正的基因治疗方法是
14 ．将正常基因经体内基因同源重组原位替换致病基因的基因治疗方法是
15 ．利用特定的反义核酸阻断变异基因异常表达的基因治疗方法是
A ．酵母双杂交技术
B ．标签蛋白沉淀
C ．电泳迁移率变动测定
D ．染色质免疫沉淀
E ．荧光共振能量转换效应分析
16 ．凝胶阻滞实验
17 ．需要设计诱饵基因
18 ．近年该技术与芯片技术结合在一起，成为一项鉴定特定核蛋白的DNA 结合靶点的新技术
（三）X型题
1 ．核酸探针可以是
A ．人工合成寡核苷酸片段
B ．基因组DNA 片段
C ．RNA 片段
D ．cDNA 全长或部分片段
E ．核苷酸
2 ．核酸分子杂交可以形成的杂化双链有
A ．DNA/DNA
B ．RNA/RNA
C ．DNA/RNA
D ．寡核苷酸/RNA
E ．寡核苷酸/DNA
3 ．PCR 技术主要用于
A ．目的基因的克隆
B ．基因的体外突变
C ．DNA 和RNA 的微量分析
D ．DNA 序列测定
E ．基因突变分析
4 ．分子杂交技术的原理涉及
A ．分子杂交特性
B ．基因文库
C ．印迹技术
D ．生物芯片
E ．探针技术
5 ．关于DNA 链末端合成终止法正确的是
A ．需加入的链终止剂ddNTP
B ．dNTP 需要标记
C ．引物也需要标记
D ．又称Sanger 法
E ．ddNTP 缺乏5 ' -OH
6 ．基因组DNA 文库建立需要
A ．基因组进行限制性内切酶消化
B ．DNA 片段克隆到相应载体中
C ．重组体感染宿主菌
D ．筛选目的基因可以通过核酸分子杂交的方法进行
E ．以λ 噬菌体为载体的人基因组DNA 文库的克隆数目至少应在10 6 以上
7 ．用于构建基因组DNA 文库的载体有
A ．酵母人工染色体
B ．粘粒
C ．λ 噬菌体
D ．腺病毒
E ．脂质体
8 ．基因诊断较常规诊断其特点有
A ．属于病因诊断
B ．特异性强
C ．适用范围窄
D ．灵敏度高
E ．有放大效应
9 ．基因失活的常用技术包括
A ．基因疫苗
B ．核酶
C ．小干扰RNA
D ．反义核酸
E ．基因置换
10 ．克隆羊多莉的产生属于
A ．同种异体细胞转移技术
B ．同种异体细胞核转移技术
C ．试管内受精
D ．无性繁殖
E ．同种异体细胞转基因技术
11 ．疾病动物模型可用于
A ．探讨疾病的发生机制
B ．克隆致病基因
C ．新治疗方法的筛选系统
D ．新药物的筛选系统
E ．新疾病模型的筛选系统
12 ．蛋白质芯片主要应用于
A ．蛋白质结构的研究
B ．蛋白质表达谱的研究
C ．蛋白质功能的研究
D ．蛋白质之间的相互作用研究
E ．疾病的诊断和新药的筛选
13 ．研究蛋白质相互作用的技术包括
A ．标签蛋白沉淀
B ．酵母双杂交
C ．凝胶阻滞实验
D ．噬菌体显示筛选系统
E ．DNA 印迹
14 ．基因治疗的基本程序包括
A ．治疗性基因的选择
B ．基因载体的选择
C ．靶细胞的选择
D ．基因转移
E ．回输体内
15 ．目前可用作基因治疗的基因载体包括
A ．腺病毒相关病毒
B ．噬菌体
C ．腺病毒
D ．逆转录病毒
E ．粘粒
二、是非题
1 ．Southern blot 主要用于RNA 的定性和定量分析。
2 ．蛋白质印迹分析技术中蛋白质的转移，可以用电转移，也可以靠毛细作用转移。
3 ．实时PCR 技术与普通PCR 技术相比，它可以动态监测反应过程中产物的量。
4 ．Sanger 法在测定核酸序列时，反应管中加入的dNTP 仅标记一种即可。
5 ．生物芯片可以是DNA 芯片、cDNA 芯片或蛋白质芯片。
6 ．酵母双杂交技术是分析DNA—蛋白质相互作用的一项重要技术。
7 ．核转移技术，是指将动物体细胞核全部导入另一个体去除了胞核的卵细胞内，使之发育成个体。
8 ．基因矫正是用正常的基因通过体内基因同源重组，替换致病基因来达到治疗目的。
9 ．目前基因治疗多采用基因增补的方式。
10 ．RNA 印迹技术中，RNA 分子在转移前需进行限制性内切酶切割。
11 ．PCR 反应中变性主要是使模板DNA 完全变性为单链。
12 ．实时PCR 技术中，TagDNA 聚合酶在链延伸过程中遇到荧光探针，可发挥3 ' →5 ' 核酸外切酶活性。
13 ．酵母双杂交系统可用于证明两种已知基因序列的蛋白质可以相互作用的生物信息学推测。
14 ．转基因技术即动物克隆技术，是无性繁殖。
15 ．内源基因结构突变发生在生殖细胞可引起恶性肿瘤。
16 ．基因转移和基因剔除技术在医学中最重要的用途是建立疾病动物模型。
17 ．定位克隆是指从对基因编码产物的功能的了解出发来克隆致病基因。
18 ．目前DNA 序列分析是找出患者有关基因变异所在的最为直接和确切的基因诊断法。
三、填空题
1 ．分子杂交是利用DNA 和这一基本性质来进行DNA 或RNA 定性、定量分析的。
2 ．在印迹技术中，将DNA 片段在琼脂糖凝胶中使其成为，利用使胶中的生物大分子转移到膜上，使之成为固相化分子。
3 ．印迹技术的基本流程依次为、、和。
4 ．Southern blotting 主要用于定性和定量分析，亦可用于和的分析。
5 ．Northern blotting 主要用于检测的表达水平，敏感性较PCR ，但其具有和的优点。
6 ．Western blotting 主要用于检测样品中的存在、细胞中以及的相互作用研究等。
7 ．PCR 的基本反应步骤包括、、。
8 ．基因芯片适用于分析不同组织细胞或同一细胞不同状态下的，其原理是基于。
9 ．在转基因技术中，被导入的目的基因称为，目的基因的受体动物称为。
10 ．标签融合蛋白结合实验主要用于证明是否存在直接的物理结合，分析结合的及筛选细胞内与融合蛋白相结合的。
11 ．染色质免疫沉淀法是目前可以研究与相互作用的主要方法。
12 ．目前克隆致病相关基因主要有和两大策略。
13 ．根据受体细胞的类型不同，基因治疗分为的基因治疗和的基因治疗两大类。
14 ．目前使用的基因载体有和两大类。
15 ．在人类基因治疗实施中，导入基因的方式有和两大类。
四、名词解释
1 ．probe
2 ．blotting technologe
3 ．gene libary
4 ．核转移技术
5 ．gene chip
6 ．gene therapy
7 ．gene diagnosis
8 ．基因疫苗
9 ．gene inactivation
10 ．gene replacement
11 ．gene augmentation
12 ．PCR
13 ．ex vivo
五、问答题
1 ．简述印迹技术的分类及应用。
2 ．简述PCR 反应体系的基本成分、PCR 的基本反应步骤和主要用途。
3 ．简述PCR 技术的基本原理。
4 ．简述逆转录PCR 、原位PCR 和实时PCR 技术的基本原理和主要区别。
5 ．简述DNA 链末端合成终止法（Sanger 法）测序的基本原理。
6 ．简述基因转移和基因剔除技术在医学发展中的作用。
7 ．简述酵母双杂交技术的基本原理及应用。
8 ．试述染色质免疫沉淀法基本原理及用途。
9 ．简述基因诊断的概念及特点。
10 ．何为基因治疗，目前基因治疗有哪些基本策略
11 ．试述基因治疗的基本程序。
12 ．欲生产一种药用多肽，科学家已经将此多肽的基因与某真核表达质粒重组在一起。请你设计一个实验，利用PCR 方法鉴定此重组表达质粒是否含有这一多肽的基因。
13 ．请设计一个实验，利用酵母双杂交系统检测从某一癌组织中提取、纯化的一种未知蛋白质X 与两种已知蛋白质 a 、 b 之间是否有相互作用。
14 ．请为某一单基因遗传病（低表达或不表达）的患者设计一个基因治疗方案。
参考答案
一、选择题
（一）A型题
1 ．B
2 ．C
3 ．D
4 ．E
5 ．B
6 ．D
7 ．B
8 ．A
9 ．D 10 ．A 11 ．D 12 ．C 13 ．B 14 ．E 15 ．D 16 ．C 17 ．C 18 ．A 19 ．D 20 ．A
（二）B型题
1 ．D
2 ．B
3 ．C
4 ．E
5 ．B
6 ．C
7 ．A
8 ．D
9 ．E 10 ．C 11 ．A 12 ．D 13 ．B 14 ．C 15 ．E 16 ．C 17 ．A 18 ．D
（三）X型题
1 ．ABCD
2 ．ABCDE
3 ．ABCDE
4 ．ACE
5 ．ABD
6 ．ABCDE
7 ．ABC
8 ．ABDE
9 ．BCD 10 ．BD 11 ．ACD 12 ．BCDE 13 ．AB 14 ．ABCD 15 ．ACD
二、是非题
1 ．B
2 ．B
3 ．A
4 ．A
5 ．A
6 ．B
7 ．B
8 ．B
9 ．A 10 ．B 11 ．A 12 ．B
13 ．A 14 ．B 15 ．B 16 ．A 17 ．B 18 ．A
三、填空题
1 ．变性复性
2 ．变性单链毛细作用NC
3 ．电泳转移杂交放射自显影或化学显色
4 ．DNA 重组质粒噬菌体
5 ．mRNA 差特异性强假阳性率低
6 ．特异性蛋白质的存在特异性蛋白质的半定量分析蛋白质分子
7 ．变性退火延伸
8 ．基因差异表达情况双色荧光探针杂交
9 ．转基因转基因动物
10 ．两种蛋白质分子具体结构部位未知分子
11 ．体内DNA 蛋白质
12 ．功能克隆定位克隆
13 ．体细胞生殖细胞
14 ．病毒载体非病毒载体
15 ．直接体内疗法间接体内疗法
四、名词解释
1 ．探针，是指带有特殊可检测标记（放射性核素或其它化合物标记）的核酸片段，它具有特定的序列，能够与待测的核酸片断互补结合，因此可用于检测核酸样品中特定的基因。
2 ．印迹技术，是指将在凝胶中分离的生物大分子转移或直接放在固定化介质上并加以检测分析的技术。它包括DNA 印迹技术、RNA 印迹技术和蛋白质印迹技术等。
3 ．基因文库，是指一个包含了某一生物体全部DNA 序列的克隆群体。基因文库可以分为基因组DNA 文库和cDNA 文库。
4 ．核转移技术，即所谓动物整体克隆技术，是指将动物体细胞核全部导入另一个体去除了胞核的激活的卵细胞内，使之发育成个体。这样的个体所携带的遗传性状仅来自一个父亲或母亲个体，因而为无性繁殖。从遗传角度上讲，是一个个体的完全拷贝，故称之为克隆。
5 ．基因芯片，又称DNA 微阵列，包括DNA 芯片(DNA chip) 和cDNA 芯片(cDNA chip) ，是指将许多特定的DNA 片段或cDNA 片段作为探针，有规律地紧密排列固定于支持物上，然后与待测的荧光标记样品进行杂交，杂交后用荧光检测系统等对芯片进行扫描，通过计算机系统对每一位点的荧光信号做出检测、比较和分析，从而迅速得出定性和定量的结果。
6 ．基因诊断，是指利用现代分子生物学和分子遗传学的技术和方法，直接检测基因结构及其表达水平是否正常，从而对疾病作出诊断的方法。
7 ．基因治疗，从广义上讲，是指将某种遗传物质转移到患者细胞内，使其在体内发挥作用，以达到治疗疾病目的的方法。
8 ．基因疫苗，主要是指DNA 疫苗，是第三代疫苗。其将编码外源性抗原的基因插入到真核表达质粒中，直接导入人体内，抗原基因在一定时间内持续表达，不断刺激机体免疫系统，达到治病或防病目的。
9 ．基因失活，是指将特定的序列导入细胞后，在转录或翻译水平阻断某些基因的异常表达，已达到治疗疾病的目的。
10 ．基因置换，是指用正常的基因通过体内基因同源重组，原位替换致病基因，使细胞内的DNA 完全恢复正常状态。
11 ．基因增补，是指将目的基因导入病变细胞或其它细胞，不去除异常基因，而通过目的基因的非定点整合，使其表达产物弥补缺陷基因的功能或使原有的功能增强。
12 ．聚合酶链反应，指以DNA 分子为模板，以一对与模板序列相互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA 聚合酶的作用下，完成新的DNA 的合成，重复这一过程使目的DNA 片段得到扩增。这一技术可以将微量目的DNA 片段扩增一百万倍以上。
13 ．间接体内疗法，是指在体外将外源基因导入靶细胞内，再将这种基因修饰过的细胞回输病人体内，使带有外源基因的细胞在体内表达相应产物，已达到治疗的目的。
五、问答题
1 ．简述印迹技术的分类及应用。
答：印记技术是指将在凝胶中分离的生物大分子转移或直接放在固定化介质上并加以检测分析的技术。它主要包括DNA 印迹技术(Southern blot) 、RNA 印迹技术(Northern blot) 和蛋白质印迹技术(Western blot) 等。
DNA 印迹技术主要用于基因组DNA 的定性和定量分析，例如对基因组中特异基因的定位及检测等，此外亦可用于分析重组质粒和噬菌体。
RNA 印迹技术主要用于检测某一组织或细胞中已知的特异mRNA 的表达水平，也可以比较不同组织和细胞中的同一基因的表达情况。
蛋白质印迹技术，也叫免疫印迹，用于检测样品中特异性蛋白质的存在、细胞中特异蛋白质的半定量分析以及蛋白质分子的相互作用研究等。
2. 简述PCR 反应体系的基本成分、PCR 的基本反应步骤和主要用途。
答：组成PCR 反应体系的基本成分包括模板DNA 、特异性引物、耐热性DNA 聚合酶、dNTP 以及含有Mg 2+ 的缓冲液。
PCR 的基本反应步骤包括：
(1) 变性：将反应体系加热至95 ℃，使模板DNA 完全变性为单链，同时因物自身以及引物之间存在的局部双链也得以消除。
(2) 退火：将温度下降至适宜温度使引物与模板结合。
(3) 延伸：将温度升至72 ℃，DNA 聚合酶以dNTP 为底物催化DNA 的合成反应。PCR 主要用途：(1) 目的基因的克隆；(2) 基因的体外突变；(3)DNA 和RNA 的微量分析；(4)DNA 序列测定；(5) 基因突变分析。
3 ．简述PCR 技术的基本原理及应用。
答。这种变性- 复性- 延伸的过程就是一个PCR 循环，PCR 就是在合适条件下的这种循环的不断重复。主要用于目的基因的克隆、基因的体外突变、DNA 和RNA 的的微量分析、DNA 序列测定和基因突变分析等。
4. 简述逆转录PCR 、原位PCR 和实时PCR 技术的基本原理和主要区别。
答：逆转录PCR 是将RNA 的逆转录和PCR 反应联合应用的一种技术。即首先以RNA 为模板，在逆转录酶的作用下合成cDNA ，再以后者为模板通过PCR 反应来扩增目的基因。
原位PCR 是在固定液固定、石蜡包埋的组织切片或细胞涂片上的单个细胞内进行的PCR 反应，然后用特异性探针进行原位杂交，即可检出待测DNA 或RNA 是否在该组织或细胞中存在。
实时PCR 的基本原理是引入了荧光标记分子，并使荧光信号强度与PCR 产物量成正比，对每一反应时刻的荧光信号进行实时分析，计算出PCR 产物量。根据动态变化数据，可以精确计算出样品中最初的含量差异。
逆转录PCR 与传统PCR 相比，将RNA 的逆转录和PCR 反应联合起来，可以对已知序列的RNA 进行定性及半定量分析。常规PCR 或RT-PCR 技术的产物不能在组织细胞中定位原位，因而不能与特定的组织细胞特征表型相联系，原位PCR 技术可以将目的基因的扩增与定位相结合。实时PCR 技术与传统PCR 反应相比，在常规正向和反向引物之间，增加了一特殊引物作为探针。该技术可以通过动态监测反应过程中的产物量，消除了产物堆积对定量分析的干扰。
5. 简述DNA 链末端合成终止法（Sanger 法）的基本原理。
答：DNA 链末端合成终止法基本原理是：将 2 ' ， 3 ' - 双脱氧核苷酸(ddNTP) 代替部分dNTP 作为底物掺入到新合成的DNA 链中，由于ddNTP 缺乏 3 ' -OH ，一旦ddNTP 掺入到DNA 链中，就不能与下一核苷酸形成磷酸二酯键，因此合成反应终止。测定时，首先将模板分为四组，每一组分别加入引物和DNA 聚合酶及由32 P 或35 S
标记的dNTP ，启动DNA 合成，一定时间后，每一组加入四种ddNTP 中的一种，就可以获得在不同部位终止的、长短不同的DNA 链，经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离这些片段，通过反射自显影就可以读出DNA 的序列。
6. 简述基因转移和基因剔除技术在医学发展中的作用。
答：基因转移和基因剔除技术在医学中最重要的用途是建立疾病动物模型。以往的遗传疾病动物模型主要是自然发生或用化学药物、放射诱导等方式获得。基因转移和基因剔除技术为直接建立动物模型提供了有效的手段。这些模型可用于探讨疾病的发生机制，更重要的是可作为新的治疗方法和新的药物的筛选系统。
建立动物模型：(1) 单基因决定疾病模型：应用基因剔除模拟基因失活，如动脉硬化症疾病模型。(2) 多基因决定疾病模型
7 ．简述酵母双杂交技术的基本原理及应用。
答：酵母双杂交系统目前已成为分析细胞内未知蛋白相互作用的主要手段之一。该技术是基于酵母转录激活因子GAL4 分子的DNA 结合区(BD) 和促进转录的活性区(AD) 被分开后将丧失对下游基因的激活作用，但BD 和AD 分别融合了具有配对相互作用的两种蛋白质分子后，就可以依靠所融合的蛋白质分子之间的相互作用而恢复对下游基因的表达激活作用。
酵母双杂交系统可以用于(1) 证明两种已知基因序列的蛋白质可以相互作用的生物信
息学推测；(2) 分析已知存在相互作用的两种蛋白质分子的的相互作用功能结构域或关键的氨基酸残基；(3) 将拟研究的蛋白质的编码基因与BD 基因融合成为“ 诱饵” 表达质粒，可以筛选AD 基因融合的“ 猎物” 基因表达文库，筛选未知的相互作用蛋白质。
8 ．试述染色质免疫沉淀法基本原理及用途。
答：染色质免疫沉淀技术是目前可以研究体内DNA 与蛋白质相互作用的主要方法。
该法可以研究蛋白质与DNA 在染色质状态下的相互作用，阐明真核生物基因表达机制。它的基本原理是在活细胞状态下用化学交联试剂固定蛋白质-DNA 复合物，并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过免疫学方法沉淀此复合体，再利用PCR 技术特异性的富集目的蛋白结合的DNA 片段，从而获得蛋白质与DNA 相互作用的信息。
9 ．简述基因诊断的概念及特点。
答：基因诊断是指利用现代分子生物学和分子遗传学的技术和方法，直接检测基因结构及其表达水平是否正常，从而对疾病作出诊断的方法。
基因诊断与其他诊断方法相比，基因诊断的方法特点是：
（ 1 ）针对性强，以基因作为检查材料和探察目标，属于“ 病因诊断” 。
（ 2 ）特异性强，用分子杂交技术选用特定基因序列作为探针，故有很高的特异性。（ 3 ）灵敏度高，所用技术具有放大效应，故诊断灵敏度高
（ 4 ）适用性强，诊断范围广。
10 ．何为基因治疗，目前基因治疗有哪些基本策略
答：从广义上讲，是指将某种遗传物质转移到患者细胞内，使其在体内发挥作用，以达到治疗疾病目的的方法，均谓之基因治疗。
(1) 缺陷基因精确的原位修复包括对致病基因的突变碱基进行矫正的基因矫正和用正
常基因通过重组原位替换致病基因的基因置换。这两种方法是对缺陷基因精确的原位修复，不涉及基因组的任何改变，是最为理想的治疗方法，但技术上目前尚未突破。(2) 基因增补是指将目的基因导入病变细胞或其它细胞，不去除异常基因，而通过目的基因的非定点整合，使其表达产物弥补缺陷基因的功能或使原有的功能增强。目前基因
治疗多采用此法。
(3) 基因失活是指将特定的序列导入细胞后，在转录或翻译水平阻断某些基因的异常表达，已达到治疗疾病的目的。
(4) 基因疫苗主要是指DNA 疫苗，是第三代疫苗。其将编码外源性抗原的基因插入到真核表达质粒中，直接导入人体内，抗原基因在一定时间内持续表达，不断刺激机体免疫系统，达到治病或防病目的。
11 ．试述基因治疗的基本程序。
答：基本程序如下：
(1) 治疗性基因选择选择对疾病有治疗作用的特定目的基因。
(2) 基因载体的选择有病毒载体和非病毒载体，常用的是病毒载体。
(3) 靶细胞的选择基因治疗根据受体细胞种类的不同分为体细胞和生殖细胞的基因治疗，目前进行的基因治疗均是体细胞基因治疗和间接体内疗法。
(4) 基因转移基因导入人体的方式：间接体内疗法，即在体外将外源基因导入靶细胞内，再将这种基因修饰过的细胞回输病人体内，使带有外源基因的细胞在体内表达相应产物，达到治疗的目的；直接体内疗法，将外源基因直接导入体内有关的器官组织，使其进入相应细胞进行表达。
12 ．欲生产一种药用多肽，科学家已经将此多肽的基因与某真核表达质粒重组在一起。请你设计一个实验，利用PCR 方法鉴定此重组表达质粒是否含有这一多肽的基因。答：实验步骤如下：
(1) 利用国际基因文库等信息资源，获得这一多肽的基因序列
(2) 根据多肽的基因序列，设计PCR 引物
(3) 提取转化菌中的重组表达质粒和空载质粒
(4)PCR 扩增
(5)PCR 扩增产物的鉴定
13 ．请设计一个实验，利用酵母双杂交系统检测从某一癌组织中提取、纯化的一种未知蛋白质X 与两种已知蛋白质 a 、 b 之间是否有相互作用。
答：实验方案如下：
(1) 测定X 的氨基酸序列；a 与b 氨基酸序列已知
(2) 根据氨基酸序列，推测X 、a 、b 的cDNA 序列
(3) 构建诱饵基因与猎物基因表达质粒各两种
(4) 分三组共转染酵母细胞
(5) 检测下游报告基因表达产物，若下游报告基因表达则两蛋白质之间有相互作用；否则无相互作用
表达质粒及共转染分组如下：
X 的cDNA 与BD 基因融合为诱饵表达质粒；
a 的cDNA 与AD 基因融合为猎物表达质粒；
X 的cDNA 与BD 基因融合为诱饵表达质粒；
b 的cDNA 与AD 基因融合为猎物表达质粒。
14 ．请为某一单基因遗传病（低表达或不表达）的患者设计一个基因治疗方案。
答：(1) 基因治疗方法：基因增补是指将目的基因导入病变细胞或其它细胞，不去除异常基因，而通过目的基因的非定点整合，使其表达产物弥补缺陷基因的功能或使原有的功能增强。目前基因治疗多采用此法。
( 2) 基因导入方式：间接体内疗法，即在体外将外源基因导入体细胞内，再将这种基因修饰过的细胞回输病人体内，使带有外源基因的细胞在体内表达相应产物，以达到基因
治疗的目的。
(3) 基因治疗步骤：治疗性基因的选择→ 基因载体的选择→ 重组体的构建→ 靶细胞的选择→ 基因转移→ 外源基因表达的筛选→ 回输体内→ 检测疗效
a ．治疗性基因的选择：选择该单基因遗传病的野生型基因作为治疗性基因。
b ．基因载体的选择：选用重组腺病毒相关病毒作为载体
c ．靶细胞的选择：选择该患者的淋巴细胞作为靶细胞
现代分子生物学复习题
现代分子生物学复习题
现代分子生物学 一.填空题 1.DNA的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。 2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。 4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导，蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。 5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：核心启动子元件和上游启动子元件。 6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染 小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两个实验中主要的论点证据是：生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点： hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、 mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′ 东隅已逝 2 桑榆非晚！
末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。 9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一 种经济的方法、可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。 10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是： SC构型、 oc 构型、 L构型。在电泳中最前面的是SC构型。 11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、 CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。 12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转 录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。 13.转基因动物常用的方法有：逆转录病毒感染法、DNA 显微注射法、胚胎干细胞法。 14.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、 TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是： D、A、B、E 。 其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。 15.酵母DNA按摩尔计含有32.8%的T,则A为_32.8%_,G 为_17.2%_和C为_17.2%__。 16.操纵子包括_调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。 17.DNA合成仪合成DNA片段时，用的原料是模板DNA 东隅已逝 3 桑榆非晚！
(完整版)分子生物学试题及答案(整理版)
分子生物学试题及答案 一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。 3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。 9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA、-35区的TGACA 及增强子，弱化子等。 12．DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13．SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。 14．单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15．考斯质粒：是经过人工构建的一种外源DNA载体，保留噬菌体两端的COS区，与质粒连接构成。16．蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。 17．顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。18．Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（IF-2）和（IF-3）。 4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（DNA重组技术）三部分。7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接，）、 （mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法）、（可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响）、（活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭）。 10．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11．半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（ S2）开始，无G时转录从（ S1）开
分子生物学题库
分子生物学备选考题 名词解释: 1.功能基因组学 2.分子生物学 3.epigenetics 4.C值矛盾 5.基因簇 6.间隔基因 7.基因芯片 8.基序（Motifs） 9.CpG岛 10.染色体重建 11.Telomerase 12.足迹分析实验 13.RNA editing 14.RNA干涉（RNA interference） 15.反义RNA 16.启动子（Promoter） 17.SD序列(SD sequence) 18.碳末端结构域（carboxyl terminal domain，CTD） 19.single nucleotide polymorphism，SNP 20.切口平移（Nick translation） 21.原位杂交 22.Expressing vector 23.Multiple cloning sites 24.同源重组 25.转座 26.密码的摆动性 27.热休克蛋白嵌套基因 28.基因家族增强子 29.终止子 30.前导肽RNAi 31.分子伴侣 32.魔斑核苷酸 33.同源域 34.引物酶 35.多顺反子mRNA 36.物理图谱、 37.载体（vector） 38.位点特异性重组 39.原癌基因（oncogene） 40.重叠基因、 41.母源影响基因、
42.抑癌基因（anti-oncogene）、 43.回文序列（palindrome sequence）、 44.熔解温度（melting temperature, Tm） 45.DNA的呼吸作用（DNA respiration） 46..增色效应（hyperchromicity）、 47.C0t曲线（C0t curve）、 48.DNA的C值（C value） 49.超螺旋(superhelix) 、 50.拓扑异构酶（topoisomerase）、 51.引发酶(primase) 、 52.引发体(primosome) 53.转录激活(transcriptional activation) 54.dna基因(dna gene)、 55.从头起始(de novo initiation) 、 56.端粒（telomere） 57.酵母人工染色体（yeast artificial chromosome, YAC）、 58.SSB蛋白（single strand binding protein）、 59.复制叉(replication fork)、 60.保留复制(semiconservative replication) 61.滚环式复制(rolling circle replication)、 62.复制原点(replication origin)、 63.切口(nick) 64.居民DNA (resident DNA) 65.有义链(sense strand) 66.反义链(antisense strand) 67.操纵子(operon) 、 68.操纵基因(operator) 69.内含子(内元intron) 70.外显子(外元exon) 、 71.突变子(muton) 、 72.密码子（codon）、、 73.同义密码（synonymous codons）、 74.GC盒(GC box) 75.增强子(enhancer) 76.沉默子(silencer) 77.终止子(terminator) 78.弱化子（衰减子）(attenuator) 79.同位酶(isoschizomers) 、 80.同尾酶(isocandamers) 81.阻抑蛋白（阻遏蛋白）(repressor) 82.诱导物（inducer）、 83.CTD尾（carboxyl-terminal domain ） 84.载体（vector）、 85.转化体(transformant)
分子生物学实验思考题答案
分子生物学实验思考题答案 实验一、基因组DNA的提取 1、为什么构建DNA文库时，一定要用大分子DNA? 答、文库的大小(即数目)取决于基因组的大小和片段的大小，片段大则文库数目小一些也可以包含99%甚至以上的基因组。而文库数目小则方便研究人员操作和文库的保存。所以构建文库要用携带能力大的载体克隆尽量大的DNA片段. 2、如何检测和保证DNA的质量？ 答、用凝胶电泳看，有没有质白质和RNA等物质的污染，还可以测OD，用OD260/280来判断，当OD260/OD280< 1.8，表示蛋白质含量较高当OD260/OD280> 2.0，表示RNA含量较高当OD260/OD280=1.8～2.0，表示DNA较纯。 实验二、植物总RNA的提取 1、RNA酶的变性和失活剂有哪些？其中在总RNA的抽提中主要可用哪几种？ 答、有DEPC,Trizol，氧钒核糖核苷复合物，RNA酶的蛋白抑制剂以及SDS，尿素，硅藻土等；在总RNA提取中用PEPC,Trizol 2、怎样从总RNA中进行mRNA的分离和纯化。 答、、利用成熟的mRNA的末端具有polyA尾的特点合成一段oligo(dT)的引物，根据碱基互补配对原则，可将mRNA从总RNA中分离出来 实验四、大肠杆菌感受态细胞的制备 1、感受态细胞制备过程中应该注意什么？ 答、A）细菌的生长状态：不要用经过多次转接或储于4℃的培养菌，最好从-80℃甘油保存的菌种中直接转接用于制备感受态细胞的菌液。细胞生长密度以刚进入对数生长期时为宜，可通过监测培养液的OD600 来控制。DH5α菌株的OD600为0.5时，细胞密度在5×107 个/mL左右，这时比较合适。密度过高或不足均会影响转化效率。 B）所有操作均应在无菌条件和冰上进行；实验操作时要格外小心，悬浮细胞时要轻柔，以免造成菌体破裂，影响转化。 C）经CaCl2处理的细胞，在低温条件下，一定的时间内转化率随时间的推移而增加，24小时达到最高，之后转化率再下降（这是由于总的活菌数随时间延长而减少造成的）；D）化合物及无机离子的影响：在Ca2+的基础上联合其他二价金属离子（如Mn2+或Co2+）、DMSO或还原剂等物质处理细菌，可使转化效率大大提高（100-1000倍）； E）所使用的器皿必须干净。少量的去污剂或其它化学物质的存在可能大大降低细菌的转化效率； 2、感受态细胞制备可用在哪些研究和应用领域？ 答、在基因工程中将质粒导入受体细胞是如果受体细胞是细菌则将它用Ca2+处理变为感受态细胞质粒进入。 实验五、质粒在大肠杆菌中的转化和鉴定 1、在热激以后进行活化培养，这时的培养基中为什么不加入抗生素？ 答、活化培养用的一般是SOC培养基，这种培养基比LB培养基营养，此时进行的活化培养只是为了让大肠杆菌迅速复苏，恢复分裂活性，此时的细胞还不具抗性，加入抗生素会细胞会死亡。 2、什么是质粒？根据在细菌中的复制，质粒有几种类型？用于基因重组的主要用到哪些质粒？
关于分子生物学试题及答案
分子生物学试题（一） 一.填空题(,每题1分,共20分) 一.填空题(每题选一个最佳答案,每题1分,共20分) 1. DNA的物理图谱是DNA分子的（）片段的排列顺序。 2. 核酶按底物可划分为（）、（）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（）、（）和（）。 4．蛋白质的跨膜需要（）的引导，蛋白伴侣的作用是（）。5．真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：（）和（）。6．分子生物学的研究内容主要包含（）、（）、（）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（）、（）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（）、（）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（）、（）、（）。 10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11.半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP-CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP-CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（S2 ）开始，无G时转录从（S1 ）开始。 12．DNA重组技术也称为（基因克隆）或（分子克隆）。最终目的是（把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体）。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤： ①提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上（克隆载体），形一个新的重组DNA分子。 ②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。 ③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。 ④对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。 13、质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为（严紧型质粒），不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为（松弛型质粒）。 14．PCR的反应体系要具有以下条件： a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的 DNA引物（约20个碱基左右）。 b、具有热稳定性的酶如：TagDNA聚合酶。 c、dNTP d、作为模板的目的DNA序列 15．PCR的基本反应过程包括：（变性）、（退火）、（延伸）三个阶段。 16、转基因动物的基本过程通常包括： ①将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中； ②接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫；
分子生物学实验技术考试题库
一、名词解释 1.分配常数：又称分配系数，是指一种分析物在两种不相混合溶剂中的平衡常数。 2.多肽链的末端分析：确定多肽链的两末端可作为整条多肽链一级结构测定的标志，分为氨基端分析和羧基端分析。 3.连接酶：指能将双链DNA中一条单链上相邻两核苷酸连接成一条完整的分子的酶。 4.预杂交：在分子杂交实验之前对杂交膜上非样品区域进行封闭，用以降低探针在膜上的非特异性结合。 5.反转录PCR：是将反转录RNA与PCR结合起来建立的一种PCR技术。首先进行反转录产生cDNA,然后进行常规的PCR反应。 6.稳定表达：外源基因转染真核细胞并整合入基因组后的表达。 7.基因敲除：是指对一个结构已知但功能未知或未完全知道的基因，从分子水平上设计实验，将该基因从动物的原基因组中去除，或用其它无功能的DNA片断取代，然后从整体观察实验动物表型，推测相应基因的功能。 8.物理图谱：人类基因组的物理图是指以已知核苷酸序列的DNA片段为“路标”，以碱基对(bp，kb，Mb)作为基本测量单位(图距)的基因组图。 9.质谱图：不同质荷比的离子经质量分析器分开后，到检测器被检测并记录下来，经计算机处理后所表示出的图形。 10.侧向散射光：激光束照射细胞时，光以90度角散射的讯号，用于检测细胞内部结构属性。
11.离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行的层析。 12.Edman降解：从多肽链游离的N末端测定氨基酸残基的序列的过程。 13.又称为限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)：是能够特异识别双链DNA序列并进行切割的一类酶。 14.电转移：用电泳技术将凝胶中的蛋白质，DNA或RNA条带按原位转移到固体支持物，形成印迹。 15.多重PCR：是在一次反应中加入多对引物，同时扩增一份模板样品中不同序列的PCR 过程。 16.融合表达: 在表达载体的多克隆位点上连有一段融合表达标签（Tag），表达产物为融合蛋白（有分N端或者C端融合表达），方便后继的纯化步骤或者检测。 17.同源重组：发生在DNA同源序列之间，有相同或近似碱基序列的DNA分子之间的遗传交换。 18.遗传图谱又称连锁图谱(linkage map)，它是以具有遗传多态性的遗传标记为“路标”，以遗传学距离为图距的基因组图。 19.碎片离子：广义的碎片离子为由分子离子裂解产生的所有离子。 20.前向散射光：激光束照射细胞时，光以相对轴较小角度向前方散射的讯号用于检测细胞等离子的表面属性，信号强弱与细胞体积大小成正比。 21.亲和层析:利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其他分子的一种层析法。(利用分子与其配体间特殊的、可逆性的亲和结合
分子生物学复习题(有详细答案)
绪论 思考题：（P9） 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义？ 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念，即将分子生物学的范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面？什么是反向生物学？什么是 后基因组时代？ 研究内容： DNA的复制、转录和翻译；基因表达调控的研究；DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学：是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能，在体外使基因突变，再导入体内，检测突变的遗传效应，即以表型来探索基因结构。 后基因组时代：研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式，人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件（年代、发明者、简要内容） 1953年Watson和Click发表了?脱氧核糖核苷酸的结构?的著名论文，提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年，重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术，并完成了第一个细菌基因的克隆，开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的？ 随着基因组计划的完成，人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代，人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生，如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题：（P130） 1、基因的概念如何？基因的研究分为几个发展阶段？ 概念：基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段：○120世纪50年代以前，主要从细胞的染色体水平上进行研究，属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后，主要从DNA大分子水平上进行研究，属于分
分子生物学实验复习题附答案(最新整理)
分子生物学复习题 实验一DNA的制备 （1）为什么分子生物学实施时要担心EB？ 溴化乙锭（Ethidium bromide）是DNA诱变剂，溴化乙锭可以嵌入碱基分子中，导致错配。具有高致癌性(接触致癌) （2）DNA加样缓冲液的用途是什么？ 由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响，在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。 线状DNA大小/kb60-520-110-0.87-0.56-0.44-0.23-0.1 （4）琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理是什么 DNA分子在pH值高于其等电点的溶液中带负电荷，在电场中向阳极移动。DNA分子在电场中通过琼脂糖凝胶而泳动，除了电荷效应以外，还有分子筛效应。由于DNA分子可片段的相对分子质量不同，移动速度也不同，所以可将相对分子质量不同或构象不同的DNA分离。DNA片段迁移距离（迁移率）与碱基对的对数成反比，因此通过已知大小的标准物移动的距离与未知片段的移动距离时行比较，便可测出未知片段的大小。但是当DNA分子大小超过20kb时，普通琼脂糖凝胶就很难将它们分开。此时电泳的迁移率不再依赖于分子大小，因此，就用琼脂糖凝胶电泳分离DNA时，分子大小不宜超过此值。 （5）琼脂糖凝胶电泳时胶中DNA是靠什么发出荧光的？为什么？ 溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,可插入DNA双螺旋结构的两个碱基之间，形成一种荧光络合物。在254nm波长紫外光照射下，呈现橙黄色的荧光。用溴化乙啶检测DNA，可检出10-9g以上的DNA 含量。 （6）制备基因组DNA时用到的以下试剂分别起什么作用？ CTAB等离子型表面活性剂，能溶解细胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚，从而使DNA得以游离出来 氯仿有机溶剂，能使蛋白质变性，并使抽提液分相，因核酸(DNA、RNA)水溶性很强，经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。 无水乙醇上清液中加入无水乙醇使DNA沉淀，沉淀DNA溶于TE溶液中，即得植物总DNA溶液。75%乙醇,乙醇轻轻洗涤管壁 实验二RNA的制备 1.制备RNA时通常要注意些什么？为什么？ 应该要注意(1)不要徒手操作,必须带手套;(2)加样时不能够大声说话,防止唾液等进入; 由于RNA分子的结构特点，容易受RNA酶的攻击反应而降解，加上RNA酶极为稳定且广泛存在，因而在提取过程中要严格防止RNA酶的污染，并设法抑制其活性，这是本实验成败的关键。 2.制备的RNA通常有哪些用途？制备的DNA通常又有哪些用途？ 研究基因的表达和调控时常常要从组织和细胞中分离和纯化RNA。 质粒DNA构建克隆载体,分离目的基因 3.RNA制备好后是通过什么方法检测其有没有降解的？从胶上检测什么指标来判断RNA质量好坏？为什么？
(完整版)分子生物学》试题及答案
《分子生物学》考试试题B 课程号：66000360 考试方式：闭卷 考试时间： 一、名词解释（共10题，每题2分，共20分） 1. SD 序列 2. 重叠基因 3．ρ因子 4．hnRNA 5. 冈崎片段、 6. 复制叉(replication fork) 7. 反密码子(anticodon)： 8. 同功tRNA 9. 模板链(template strand) 10. 抑癌基因 二、填空题（共20空，每空1分，共20分） 1.原核基因启动子上游有三个短的保守序列,它们分别为____和__区. 2.复合转座子有三个主要的结构域分别为______、______、________。 3.原核生物的核糖体由_____小亚基和_____大亚基组成，真核生物核糖糖体由_____小亚基和_______大亚基组成。 4.生物界共有___个密码子，其中__ 个为氨基酸编码，起始密码子为__ _______；终止密码子为_______、__________、____________。 5. DNA生物合成的方向是_______，冈奇片段合成方向是_______。 6.在细菌细胞中，独立于染色体之外的遗传因子叫_______。它是一
种_______状双链DNA，在基因工程中，它做为_______。 三．判断题（共5题，每题2分，共10分） 1.原核生物DNA的合成是单点起始，真核生物为多点起始。( ) 2.在DNA生物合成中，半保留复制与半不连续复制指相同概念。( ) 3.大肠杆菌核糖体大亚基必须在小亚基存在时才能与mRNA结合。( ) 4.密码子在mRNA上的阅读方向为5’→ 3’。( ) 5.DNA复制时，前导链的合成方向为5’→ 3’，后随链的合成方向也是5’→ 3’。（） 四、简答题（共6题，每题5分，共30分） 1.简述三种RNA在蛋白质生物合成中的作用。 2.蛋白质合成后的加工修饰有哪些内容? 3.简述人类基因组计划的主要任务。 4.简述现代分子生物学的四大研究热点。 5.何谓转座子?简述简单转座子发生转座作用的机理。 6.简述大肠杆菌乳糖操纵子与色氨酸操纵子在阻遏调控机制上有那些区别？ 四、问答题（共2题，共20分） 1.叙述蛋白质生物合成的主要过程。（10分） 2.请叙述真核基因的表达调控主要发生在那些环节？分别是怎样进行 的？（10分）
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核酸的生物合成 一、试题题目 (一)名词解释 1．中心法则 2．半保留复制 3．DNA聚合酶 4．解旋酶 5．拓扑异构酶 6．单链DNA结合蛋白 7．DNA连接酶 8．引物酶及引物体 9．复制叉 10．复制眼、θ结构11.前导链 12．冈崎片段、后随链 13．半不连续复制14．逆转录 15．逆转录酶 16．突变 17，点突变 18．结构畸变 19．诱变剂 20．修复 21．光裂合酶修复 22．切除修复 23．重组修复 24．诱导修复和应急反应 25．DNA 重组 26．基因工程 27．转录 28．模板链(反意义链) 29．非模板链(编码链) 30．不对称转录 31．启动子 32．转录单位 33．内含子 34．外显子 35．转录后加工 36．核内不均一RNA 37．RNA复制 (二)问答题 1．试述Meselson和Stahl关于DNA半保留复制的证明实验。 2．描述大肠杆菌DNA聚合酶I在DNA生物合成过程中的作用。 3．试述DNA复制过程，总结DNA复制的基本规律。 4．什么是逆转录?病毒中的单链RNA如何利用逆转录酶合成双链DNA，并整合到寄主细胞的基因组中?
5．DNA的损伤原因是什么? 6．简述基因工程的基本操作步骤及其应用意义。 7．试比较转录与复制的区别。 8. 试列表比较常染色质DNA与端粒DNA的复制。 9. 将大肠杆菌从37度转移到42度时，其基因表达如何变化？ 10.简述原核生物转录作用的过程。 11.试比较真核生物与原核生物mRNA转录的主要区别。 (三)填空题 1．Meselson-Stahl的DNA半保留复制证实试验中，区别不同DNA用_______方法。分离不同DNA用_______方法，测定DNA含量用_______方法， 2．DNA聚合酶I(E．coli)的生物功能有_______、_______和_______作用。用蛋白水解酶作用DNA聚合酶I，可将其分为大、小两个片段，其中_______片段叫Klenow 片段，具有_______和_______作用，另外一个片段具有_______活性。 3．在E．coli中，使DNA链延长的主要聚合酶是_______，它由_______亚基组成。DNA聚合酶Ⅱ主要负责DNA的_______作用。 4．真核生物DNA聚合酶有_______，_______，
分子生物学题(含答案)
1.哪些因素引起DNA的突变？简要叙述生物体存在的修复方式。 突变引起的物理因素：辐射、紫外线等，化学因素：聚乙二醇，致癌物质等，生物因素：仙台病毒等。 修复方式：错配修复恢复错配 切除修复（碱基、核苷酸）切除突变的碱基和核苷酸片段 重组修复复制后的修复，重新启动停滞的复制叉 DNA直接修复修复嘧啶二体或甲基化DNA SOS系统DNA的修复，导致变异 2.描述乳糖操纵子的调控机制。（看不懂题目，乱写的） 乳糖操纵子的调控属于可诱导调节。在以乳糖为碳源的培养基中，在单个透过酶分子的作用下，少量乳糖分子进入细胞，又在单个β-半乳糖苷酶分子作用下转变成异构乳糖。某个异构乳糖与结合在操纵区上的阻遏物结合后使后者失活离开操纵区，开始了lac mRNA的生物合成。Lac mRNA翻译后生成大量的透过酶和β-半乳糖苷酶，加速了乳糖分子的转变。当乳糖分子都被消耗完毕时，阻遏物仍在不断被合成，有活性的阻遏物浓度超过了异构乳糖浓度，使细胞重新建立起阻遏状态，导致lac mRNA合成被抑制。mRNA半衰期短，不到一个世代生长期，mRNA几乎从细胞消失，透过酶和β-半乳糖苷酶的合成也趋于停止。 3.简述DNA半保留复制的概念。 每个子代分子的一条链来自亲代DNA，另一条链则是新合成的，这种复制方式被称为DNA的半保留复制。 4.对生物体转录和复制的特征进行说明比较？（网上找的） DNA复制和RNA转录在原理上是基本一致的，体现在：①这两种合成的直接前体是核苷三磷酸，从它的一个焦磷酸键获得能量促使反应走向合成；②两种合成都需要RNA聚合酶和四种核苷酸；③两种合成都是以DNA为模板；④合成前都必须将双链DNA解旋成单链；⑤合成的方向都是5’→ 3’。 DNA复制和RNA转录的不同点体现在：①复制和转录所用的酶是不同的，复制用的是DNA聚合酶，而转录用的是RNA聚合酶；②所用前体核苷三磷酸种类不同，DNA复制用四种脱氧核糖核苷三磷酸，即dA TP、dGTP、dCTP、dTTP，而RNA转录用四种核糖核苷三磷酸，即A TP、GTP、CrP、UTP做前体底物；③在DNA复制时是A与T配对，而RNA转录是A与U配对；④DNA复制时两条链均做模板，而RNA转录时只以其中一条链为模板；⑤DNA复制是半不连续的，可产生冈崎片段，而RNA转录是连续的；⑥DNA复制时需RNA做引物，而RNA转录无需引物；⑦DNA复制时需连接酶的参与，而RNA 转录时不需要。 5.阐述蛋白质生物合成途径 氨基酸的活化→翻译的起始（核糖体结合mRNA且甲硫氨酰-tRNA*结合到核糖体）→肽链的延伸（后续AA-tRNA与核糖体的结合，肽键生成，移位）→肽链终止→蛋白质前体加工→蛋白质的折叠 6.简要叙述真核生物mRNA的转录后加工的方式，这些加工方式各有何意义 RNA的编辑：某些RNA，特别是mRNA前体的一种加工方式，如插入、删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA所编码的遗传信息的改变。因为经过编辑的mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化。 生物学意义：校正作用有些基因突变在突变过程中丢失的遗传信息可能通过RNA的编辑得以回复
分子生物学习题与答案
第0章绪论 一、名词解释 1.分子生物学 2.单克隆抗体 二、填空 1．分子生物学的研究内容主要包含（）、（）、（）三部分。 三、是非题 1、20世纪60年代，Nirenberg建立了大肠杆菌无细胞蛋白合成体系。研究结果发现poly(U)指导了多聚苯丙氨酸的合成，poly(G)指导甘氨酸的合成。（×） 四、简答题 1. 分子生物学的概念是什么？ 2. 你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的？ 3. 分子生物学研究内容有哪些方面？ 4. 分子生物学发展前景如何？ 5. 人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么？ 6．简述分子生物学发展史中的三大理论发现和三大技术发明。 7. 简述分子生物学的发展历程。 8. 二十一世纪生物学的新热点及领域是什么？ 9. 21世纪是生命科学的世纪。20世纪后叶分子生物学的突破性成就，使生命科学在自然科学中的位置起了革命性的变化。试阐述分子生物学研究领域的三大基本原则，三大支撑学科和研究的三大主要领域？ 答案： 一、名词解释 1.分子生物学：分子生物学就是研究生物大分子之间相互关系和作用的一门学科，而生物大分子主要是指基因和蛋白质两大类；分子生物学以遗传学、生物化学、细胞生物学等学科为基础，从分子水平上对生物体的多种生命现象进行研究。
2.单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 二、填空 1.结构分子生物学，基因表达与调控，DNA重组技术 三、是非题 四、简答题 1. 分子生物学的概念是什么？ 答案： 有人把它定义得很广：从分子的形式来研究生物现象的学科。但是这个定义使分子生物学难以和生物化学区分开来。另一个定义要严格一些，因此更加有用：从分子水平来研究基因结构和功能。从分子角度来解释基因的结构和活性是本书的主要内容。 2. 你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的？ 分子生物学是从分子水平研究生命本质的一门新兴边缘学科，它以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象，是当前生命科学中发展最快并正在与其它学科广泛交叉与渗透的重要前沿领域。狭义：偏重于核酸的分子生物学，主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调节控制等过程，其中也涉及与这些过程有关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。分子生物学的发展为人类认识生命现象带来了前所未有的机会，也为人类利用和改造生物创造了极为广阔的前景。所谓在分子水平上研究生命的本质主要是指对遗传、生殖、生长和发育等生命基本特征的分子机理的阐明，从而为利用和改造生物奠定理论基础和提供新的手段。这里的分子水平指的是那些携带遗传信息的核酸和在遗传信息传递及细胞内、细胞间通讯过程中发挥着重要作用的蛋白质等生物大分子。这些生物大分子均具有较大的分子量，由简单的小分子核苷酸或氨基酸排列组合以蕴藏各种信息，并且具有复杂的空间结构以形成精确的相互作用系统，由此构成生物的多样化和生物个体精确的生长发育和代谢调节控制系统。阐明这些复杂的结构及结构与功能的关系是分子生物学的主要任务。 3. 分子生物学主要包含以下三部分研究内容：A.核酸的分子生物学，核酸的分子生物学研究核酸的结构及其功能。由于核酸的主要作用是携带和传递遗传信息，因此分子遗传学（moleculargenetics）是其主要组成部分。由于50年代以来
分子生物学实验题库
1、氯仿-异戊醇的比例？及其与饱和酚除蛋白的区别？ 氯仿:异戊醇=24:1 氯仿-异戊醇没有饱和酚除蛋白彻底，但是氯仿-异戊醇可多次除蛋白，也可充分震荡，但是饱和酚除蛋白必须轻微震荡，以免DNA断裂。 2、DNA提取中EDTA、CTAB、SDS分别的作用是什么？ 去污剂（SDS,CTAB）使蛋白质变性,和DNA分离. EDTA是DNA酶的抑制剂,防止细胞破碎后DNA被降解 3、琼脂糖凝胶电泳的一般过程。 制胶—制胶板—点样—电泳—取胶观察结果 4、移液枪使用的注意事项? 严禁吸取有枪挥发性和强腐蚀性液体 5、酶切反应是否进行的完全，主要控制因素和你将采取的措施。 6、质粒DNA提取的注意事项？ 7、cDNA合成主要反应体系成分。 8、上样缓冲液的主要成分及作用。 9、PCR反应操作：设计一个循环过程。 10、DNA或RNA提取常用液氮研磨为什么？ 11、PCR的基本原理。 12、DEPC水的主要作用是什么? 13、DNA marker的作用。 14、2%CTAB的主要成分是什么？ 15、RNA提取的注意事项？ 16、RNA研究的重要性? 17、RNA提取与DNA提取有何异同？ 18、去除酚需要怎样操作？去除氯仿呢？去除盐呢？ 19、植物DNA提取的基本原理？ 20、RT-PCR为何加内参基因？
21、PCR反应体系的主要成分及作用？ 22、冷冻离心机的注意事项？与普通离心机有何不同？ 23、质粒提取的原理？ 24、电泳缓冲液、上样缓冲液、EB替代物的主要成分及作用？ 25、分子生物学实验与其他一些实验有何区别？ 26、DNA提取用到的哪些试剂需要做好防护？
分子生物学实验考试操作试题
分子生物学实验考试操作试题 A 电泳 1、配制一块20ml的琼脂糖凝胶，做到加热一步。 2、请将制备好的琼脂糖溶液倒入制胶槽制胶。 3、请进行20ul电泳点样样品的准备； 4、请将20ul样品进行电泳点样； 5、请将10ul样品进行电泳点样。 B 提取质粒或RNA 1、请收集1-2ml菌体用于质粒提取； 2、请将溶液I 100ul加入离心管中，混匀。 3、请将溶液Ⅱ100ul加入离心管中，混匀。 4、请将溶液Ⅲ100ul加入离心管中，混匀。 5、请将氯仿抽提的质粒转移到新管中； 6、请将离心管中的质粒用乙醇沉淀。 7、请用乙醇溶液洗涤离心管中的质粒。 C PCR及酶切 1、请按照下面的要求加入所缺的灭菌水 灭菌蒸馏水 引物1 0.5ul 引物2 0.5ul 模板1ul PCR mix 10ul 总体积20ul 2请将加好的PCR样品混匀做好放入PCR仪的准备。3、请按照下面的要求加入所缺的缓冲液 内切酶EcoR I 0.5ul 内切酶Hind Ⅲ0.5ul 质粒5ul
10×M缓冲液 灭菌水12ul 总体积20ul 4、请按照下面的要求加入所缺的水 内切酶EcoR I 0.5ul 内切酶Hind Ⅲ0.5ul 质粒5ul 10×M缓冲液2ul 灭菌水 总体积20ul 5、请按照下面的要求加入所缺的酶EcoR I 内切酶EcoR I 0.5ul 内切酶HindⅢ0.5ul 质粒5ul 10×M缓冲液2ul 灭菌水12ul 总体积20ul 6、请按照下面的要求加入所缺的酶HindⅢ 内切酶EcoR I 0.5ul 内切酶HindⅢ0.5ul 质粒5ul 10×M缓冲液2ul 灭菌水12ul 总体积20ul 7、请将加好的酶切样品混匀做好放入水浴锅或保温箱的准备。 D 感受态制备和转化 1．请在超净台上取出1ml菌，放在灭菌离心管中。 2. 请在超净台上加入2ul质粒到感受态细胞中，并混匀。 3. 请在超净台上涂40ul菌液到固体培养基上。 4、请将涂布好的平板封口，放在培养箱中培养。 5、请在超净台上将氨苄青霉素贮液加到20ml左右的液体LB培养基中。
分子生物学试题及答案
生命科学系本科2010-2011 学年第1 学期试题分子生物学（ A ）答案及评分标准 一、选择题，选择一个最佳答案（每小题 1 分，共15分） 1、1953 年Watson和Crick 提出（A ） A、多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B、D NA 的复制是半保留的，常常形成亲本——子代双螺旋杂合链 C、三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D、遗传物质通常是DNA而非RNA 2、基因组是（D ） A、一个生物体内所有基因的分子总量 B、一个二倍体细胞中的染色体数 C、遗传单位 D、生物体的一个特定细胞内所有基因的分子总量 3、下面关于DNA 复制的说法正确的是（D ） A、按全保留机制进行 B、按3Z V方向进行 C、需要4种NTP加入 D、需要DNA聚合酶的作用 4、当过量的RNA 与限量的DNA 杂交时（A ） A、所有的DNA均杂交 B、所有的RNA均杂交 C、50%的DNA 杂交 D、50%的RNA 杂交 5、以下有关大肠杆菌转录的叙述，哪一个是正确的？（ B ） A、-35 区和-10区序列间的间隔序列是保守的 B、-35 区和-10区序列距离对转录效率非常重要 C、转录起始位点后的序列对于转录效率不重要 D、-10区序列通常正好位于转录起始位点上游1Obp处 6、真核生物mRNA 转录后加工不包括（A ） A、加CCA—OH B、5,端帽子”结构 C、3,端poly （A）尾巴 D、内含子的剪接 7、翻译后的加工过程不包括（ C ） A、N端fMet或Met的切除 B、二硫键的形成 C、3,末端加poly （A ）尾 D、特定氨基酸的修饰
8、有关肽链合成的终止，错误的是（C ） A、释放因子RF具有GTP酶活性 B、真核细胞中只有一个终止因子 C、只要有RF因子存在，蛋白质的合成就会自动终止 D、细菌细胞内存在3种不同的终止因子：RF1、RF2、RF3 9、酵母双杂交体系被用来研究（C） A、哺乳动物功能基因的表型分析 B、酵母细胞的功能基因 C、蛋白质的相互作用 D、基因的表达调控 10、用于分子生物学和基因工程研究的载体必须具备两个条件（B） A、含有复制原点，抗性选择基因 B、含有复制原点，合适的酶切位点 C、抗性基因，合适的酶切位点 11、原核生物基因表达调控的意义是（D） A、调节生长与分化 B、调节发育与分化 C、调节生长、发育与分化 D、调节代谢，适应环境 E、维持细胞特性和调节生长 12、乳糖、色氨酸等小分子物质在基因表达调控中作用的共同特点是（E） A、与DNA结合影响模板活性 B、与启动子结合 C、与操纵基因结合 D、与RNA聚合酶结合影响其活性 E、与蛋白质结合影响该蛋白质结合DNA 13、Lac阻遏蛋白由（D ）编码 A、Z基因 B、Y基因 C、A基因 D、I基因 14、紫外线照射引起DNA损伤时，细菌DNA修复酶基因表达反应性增强，这种现象称为（A） A、诱导 B、阻遏 C、正反馈 D、负反馈 15、ppGpp在何种情况下被合成？（A） A、细菌缺乏氮源时 B、细菌缺乏碳源时 C、细菌在环境温度太高时 D、细菌在环境温度太低时 E、细菌在环境中氨基酸含量过高时 、填空题（每空1分，共10 分）
分子生物学试题及答案(20200524090730)
生命科学系本科2010-2011学年第1学期试题分子生物学（A）答案及评分标准 一、选择题，选择一个最佳答案（每小题1分，共15分） 1、1953年Watson和Crick提出（ A ） A、多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B、DNA的复制是半保留的，常常形成亲本——子代双螺旋杂合链 C、三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D、遗传物质通常是DNA而非RNA 2、基因组是（ D ） A、一个生物体内所有基因的分子总量 B、一个二倍体细胞中的染色体数 C、遗传单位 D、生物体的一个特定细胞内所有基因的分子总量 3、下面关于DNA复制的说法正确的是（ D ） A、按全保留机制进行 B、按3＇→５＇方向进行 C、需要4种NTP加入 D、需要DNA聚合酶的作用 4、当过量的RNA与限量的DNA杂交时（ A ） A、所有的DNA均杂交 B、所有的RNA均杂交 C、50%的DNA杂交 D、50%的RNA杂交 5、以下有关大肠杆菌转录的叙述，哪一个是正确的？（ B ） A、-35区和-10区序列间的间隔序列是保守的 B、-35区和-10区序列距离对转录效率非常重要 C、转录起始位点后的序列对于转录效率不重要 D、-10区序列通常正好位于转录起始位点上游10bp处 6、真核生物mRNA转录后加工不包括（ A ） A、加CCA—OH B、5＇端“帽子”结构 C、3＇端poly（A）尾巴 D、内含子的剪接 7、翻译后的加工过程不包括（ C ） A、N端fMet或Met的切除 B、二硫键的形成 C、3＇末端加poly（A）尾 D、特定氨基酸的修饰
— 8、有关肽链合成的终止，错误的是（ C ） A、释放因子RF具有GTP酶活性 B、真核细胞中只有一个终止因子 C、只要有RF因子存在，蛋白质的合成就会自动终止 D、细菌细胞内存在3种不同的终止因子：RF1、RF2、RF3 9、酵母双杂交体系被用来研究（ C ） A、哺乳动物功能基因的表型分析 B、酵母细胞的功能基因 C、蛋白质的相互作用 D、基因的表达调控 10、用于分子生物学和基因工程研究的载体必须具备两个条件（ B ） A、含有复制原点，抗性选择基因 B、含有复制原点，合适的酶切位点 C、抗性基因，合适的酶切位点 11、原核生物基因表达调控的意义是（ D ） A、调节生长与分化 B、调节发育与分化 C、调节生长、发育与分化 D、调节代谢，适应环境 E、维持细胞特性和调节生长 12、乳糖、色氨酸等小分子物质在基因表达调控中作用的共同特点是（ E ） A、与DNA结合影响模板活性 B、与启动子结合 C、与操纵基因结合 D、与RNA聚合酶结合影响其活性 E、与蛋白质结合影响该蛋白质结合DNA 13、Lac阻遏蛋白由（ D ）编码 A、Z基因 B、Y基因 C、A基因 D、I基因 14、紫外线照射引起DNA损伤时，细菌DNA修复酶基因表达反应性增强，这种现象称为（ A ） A、诱导 B、阻遏 C、正反馈 D、负反馈 15、ppGpp在何种情况下被合成？（ A ） A、细菌缺乏氮源时 B、细菌缺乏碳源时 C、细菌在环境温度太高时 D、细菌在环境温度太低时 E、细菌在环境中氨基酸含量过高时