蓝莓组培关键技术汇总
蓝莓组培关键技术汇总
一、愈伤组织的培养
（一）几个概念
1.外植体（explant）：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。
2.分化（differentiation）：细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变，从而在个发育中形成各类组织和器官完成整个生活周期。
3.脱分化（dedifferentiation）:已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分化组织状态的过程。
4.再分化（redifferentiation）:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。
5.愈伤组织（callus）:在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。
6.胚状体（embroid）:-对应于胚（embryo），在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。胚状体原始细胞特征：原生质浓厚，细胞核较大，处于细胞质中央。
7.人工种子(artificial seed):指将植物离体培养产生的体细胞胚包埋在含有营养成分和保护功能的物质中,在适宜条件下发芽出苗的颗粒体。
（二）愈伤组织类型及特征
1.结构致密型：表面光滑有光泽，结构致密，多为淡黄色或白色，易于再生芽
2.结构松散型：多为白色，可以用于悬浮系建立。
3.胚性愈伤组织：具有产生胚状体能力。
（三）愈伤组织的形成：大致经过起绐期、分裂期和形成期，但三个时期没严格界限。
1.起始期指细胞准备进行分裂的时期，当外植体已分化的活细胞在外源植物生长物质的作用下，通过脱分化起动而进入分裂和形成愈伤组织。
2.分裂期表现为外层细胞出现分裂，细胞分裂进入最旺盛时期，细胞体积最小，细胞核和核仁较大，RNA含量最高。
3.形成层的特征是细胞大小趋于稳定,细胞分裂从分裂期的周缘细胞分裂为主转向了内部组织。
（四）愈伤组织中的形态发生：愈伤组织通过再分化形成再生植株的方式主要有：
1.先产生芽后,在茎的基部长根。
2.先长根,再长芽。
3.愈伤组织的不同部位分别形成根和芽。
（五）胚状体特点
1. 有分化明显的生物两端，根端和芽端。
2.单细胞起源。
3.发育程序同合子胚相似，也经过球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚。
4.和周围细胞之间有隔离。
5. 和培养物质没有维管束联系，所以容易从培养物质上剥离。
6.可以在不附加任何激素的培养基上萌发。
（六）胚状体发生途径
1. 直接胚状体发生。
2.间接胚状体发生（愈伤组织分化出胚状体）。
3.从悬浮培养的细胞中诱导。
4.由花粉产生的单倍体胚状体。
5.由原生质体产生胚状体。
（七）胚状体异常现象
1. 单片子叶；
2.多子叶；
3.杯状胚状体；
4.柱状胚状体。
二、器官培养
器官培养主要指植物根、叶、茎、花及小果实等器官在离体条件下的无菌培养。其特点在于能保持器官所具有的特征结构。
1.根的培养(以番茄离体根培养为例)
(1) 种子用70%酒精消毒;(2)用饱和漂白液消毒10分钟;(3)用无菌水洗三次;(4)将6-10粒种子放入培养皿中的湿滤纸上;(5)培养皿放入暗中培养直至胚根长至30-40mm;(6)切取10mm长的根尖用无菌的接种环接种于培养液中;(7)在25度下培养直到长出侧根。
影响根分化的因素
培养基的成分：⑴基本培养基⑵生长调节物质⑶生长素⑷细胞分裂素
培养条件：⑴光经常抑制根生长⑵温度21－30℃均可诱导生根
2.茎的培养(可分为茎尖培养和茎段培养)
茎段培养是指带有腋(侧)芽或叶柄、长数厘米的茎节段进行离体培养。
培养流程：
3.叶的培养
三、花药和花粉培养
（一）几个概念
单倍体细胞：植物的花粉母细胞经减数分裂形成的，其染色体数目只有体细胞的一半。
花粉和花药培养：指花粉在培养基上改变其正常发育和机能，不经受精而发生细胞分裂，由单个花粉发育成完整植株的技术。
单倍体植物：用离体培养花药的方法使其中的花粉发育在一个完整的植株。（二）影响花粉和花药培养的因素有哪些?
1. 不同基因型对培养反应不同。
2.材料的生理状态。
3.发育阶段。
4.培养基：
⑴基本培养基⑵激素⑶蔗糖⑷其它：铁盐、活性炭。5.预处理：花蕾低温处理2－7天为宜，也可高温、辐射、黑暗处理。6.培养方式：固体培养、液体培养。（三）什么时期花粉易单倍体培养成功?
单核期小孢子。
（四）花药培养中非单倍体出现的原因有哪些?
1. 花药愈伤组织的多倍化－核内有丝分裂。
2.核融合--产生多倍体。
3.不正常的非单倍体花粉产生的植株。
4.花药壁、花丝等二倍体体细胞参与愈伤组织的形成。
5.愈伤组织染色体的变化。
（五）花药培养中花粉发育途径有哪些。
⒈1.均等分裂发育途径，2.营养核分裂发育途径，3.生殖核分裂发育途径，4.营养核和生殖核发育途径。
（六）单倍体植株染色体加倍方法是什么?
1. 自然加倍：发生频率低，主要是由核内有丝分裂产生的。也有花粉内营养核和生殖核二者的融合而达到加倍目的。
2. 人工诱导加倍：用0.5%秋水仙素溶液处理植株。
使用方法：植株处理：植株用0.5%秋水仙素处理24～48h洗净后种植。
花序处理：植物倒置使花序浸入0.1%秋水仙素溶液中24～48h。
生长点处理：用0.1～0.4%秋水仙素和羊毛脂（3：2）涂抹。
3. 从愈伤组织再生二倍体植株：用单倍体植株茎段培养使之产生愈伤组织，愈伤组织中可发现核内有丝分裂，从而造成染色体加倍。
（七）如何利用花粉培养直接获得纯合二倍体？
切取花蕾组织→在不同转速下离心→分离出纯花粉→染色体加倍→培养→纯合二倍体植株。
四、细胞培养
(一）悬浮培养
1.悬浮培养的基本特点
是从愈伤组织的液体培养的基础上发展起来的一种培养技术，主要有两个基本特点：
1）细胞可以不断增殖，形成高密度的细胞群体，适于大规模生产
2）可以提供大量的比较均匀的细胞，为深入研究细胞的生长、分化创造了一种很好的实验方法和条件；愈伤组织只能提供细胞间可能已明显分化的细胞。但是，这种理想状态不容易得到。到目前为止，还不能完全做到只有游离的单细胞，通常里面还有小细胞团，这是由于植物细胞具有聚集在一起的特性。
2.悬浮培养的目的
主要用于生产次生代谢产物，所以保持细胞停留在增殖阶段是十分重要的，细胞勿需继续分化
3.悬浮系的制备
将疏松的愈伤组织放入液体培养基中，经过摇床不断振动，使细胞分散。
一般来说，分散比较好的细胞悬浮物是由薄壁细胞组成的。但有时还存在一些木质化的类管胞等成分，这些类管胞成分是引起细胞聚合的重要因素。通常适于愈伤组织生长的液体培养基也适用于同种植物细胞的悬浮培养。有时需要调节激素的浓度。
（二）单细胞培养
1.分离单细胞的方法
1）物理方法：
将疏松的愈伤组织放入液体培养基中，经摇床不断振动，使细胞分散。若向细胞悬浮液中吹入脉冲压缩气体，细胞分散的更好。
2）化学方法：
胡萝卜细胞悬浮培养中加入草酸钙（100μg/L）得到较分散的细胞。因为草酸盐能结合细胞间质中果胶钙的钙离子。
秋水仙素（0.1mmol/L）或2,4-D或水解乳蛋白对细胞分散有一定的作用
3）酶法：
果胶酶和纤维素酶有利于细胞分离，但使用浓度不当容易引起细胞降解。2.单细胞的培养方法
1）液体浅层培养：
先将细胞制成一定密度的细胞悬浮液，用吸管将悬浮液移到培养皿中形成浅层，一般1mm左右，石蜡膜封口，静置培养。
优点：培养物与空气接触面大，通气性好；细胞代谢产物容易扩散，不会造成有害物质的危害,继代培养方便、便于观察。
缺点：由于细胞可以游动，不能进行定点观察
2）微室培养（微滴培养）：40-100μl
优点：可以连续观察细胞的分化和发育；缺点：通气性差。
3）平板培养：
优点：便于定点观察；缺点：通气性较差
4）看护培养；适用于难于培养的植物种类
3.培养细胞的密度及生活率的测定
1）起始密度的测定：起始密度一般为104-108个/ml
用记数板统计细胞数目
2）植板率的测定：
用平板培养的需要统计植板率，即每个平板接种细胞总数中形成细胞团的百分数。
4.植株再生
获得了细胞团以后继续培养形成愈伤组织
将大块的细胞团或愈伤组织转到分化培养基上再生植株。
五、原生质培养和体细胞杂交
（一）原生质体及其特点
原生质体是去掉了细胞壁后剩下的细胞部分。
特点：1.易于摄取外来遗传物质、细胞器、细菌、病毒等
2.在一定条件下可诱导原生质体融合，形成杂种细胞
（二）原生质体培养的步骤
1.原生质体的分离
以芸薹属植物为例：
2.原生质体培养
将纯合后的原生质体以5-6×104/ml的密度用培养基浅层培养
3.愈伤组织的产生及植株再生
当小愈伤组织长到直径1mm时转到固体培养基上增殖培养，然后再转入分化培养基上再生植株。
（三）原生质体融合：又叫体细胞杂交
1．自发融合：
酶解过程中，常有相邻的同缘原生质体互相粘连，最后融合在一起形成同核体
有时也出现多核融合体。
2．诱导融合：
（1）PEG法：把两种原生质体放在一起，加入诱导融合剂如PEG（聚乙烯二醇），在高Ca+、高pH条件下，异源原生质体容易发生融合，形成异核体。
（2）电融合法：利用交变电流
植物快繁的途径和方法
植物快速繁殖就是应用组织培养技术,快速繁殖名优特新品物,使其在较短时间内繁衍较多的植株。快繁是当前植物工程中应用最广泛，又最有效的方法之一。
一、植物快速繁殖的类型与方式
类型方式特点事例
器官型腋芽萌发，以芽增殖芽，扩大繁殖系数繁殖系数高，遗传性稳定，是快繁的主要方式甘蔗、香蕉、香石竹、丝石竹
器官发生型通过脱分化形成愈伤组织，再分化出苗可获得与母株相同的小植株，繁殖系数较低，可用于细胞分化的研究烟草、油菜等
胚状体发生型从愈伤组织或直接从子叶、下胚轴和花药培养中产生首先证明植物细胞的全能性，繁殖系数高甘蔗、胡萝卜、石刁柏等
原球茎型由茎尖或腋芽产生原球茎放入培养基中发育成小植株遗传性较稳定，原球茎可作为繁殖系母体兰花
球茎芽型叶柄表面产生圆球形小突起（球茎芽），一端出芽一端出根遗传性较稳定，球茎芽可直接放入土中种植观叶海棠
块茎型叶片或叶柄上形成粒状芋块，进一步分化出芽和根块茎芽可为繁殖系母体，不断切割繁殖移栽，成活率高花叶芋
鳞茎型鳞片近轴面或边缘直接形成带根的小鳞茎在试管内形成小鳞茎需较长时间百合、郁金香、贝母等
孢子型用成熟或未成熟的孢子进行培养孢子繁殖最困难的是表面消毒，萌发时间较长地钱、狼尾蕨等
根茎型蕨类具有横向的茎及直立的短根茎，为组培的最佳外值体根状茎上产生蕨叶及根，繁殖速度较孢子型快肾蕨、裂叶肾蕨、波士顿蕨等
微枝扦插型带芽的小插条在试管内进行无菌扦插为木本植物进行快速繁殖的主要方式葡萄、杨树
二、继代培养：当初代培养的试管苗在瓶内长满到瓶塞，或培养基养分利用完时就要转瓶，这就是继代培养。在此过程中会产生两种现象，即驯化现象和衰退现象。
驯化现象：开始继代培养要加入生长调节物质，其后加入少量或不加入就可以生长的现象。
衰退现象：长期继代培养的材料也会逐渐衰退，丧失形态发生能力，具体表现在生长不良，再生能力和增殖率下降等。
二、培养物的脱毒及脱毒苗的鉴定
一、为什么茎尖培养除去病毒：因为病毒运转速度慢，加上茎尖分生组织没有维管束，病毒只能通过胞间连丝传递，赶不上细胞分裂和生长的速度，所以生长点的病毒数量极少，几乎检测不出来。
二、无病毒苗的获得：（1）材料的培养和灭菌；（2）茎类剥离；（3）茎尖培养；（4）提高脱毒效果：高温、低温、化学处理。
三、其他途径脱毒：（1）愈伤组织脱毒；（2）珠心胚培养脱毒；（4）茎尖微体嫁接脱毒；（5）培育抗病毒栽培种。
四、脱毒苗的鉴定：（1）直接测定法；（2）指示植物法；（3）抗血清鉴定法；（4）酶联免疫吸附法；（5）电子显微镜检查法；（6）免疫吸附电镜法。
三、种质保存
一、种质是指亲代通过生殖细胞或体细胞传递给子代的遗传物质。植物种质保存是利用天然或人工创造的适宜环境，使个体中所含有的遗传物质保持其遗传完整性，有高的活力，能通过繁殖将其遗传特性传递下去。种质保存主要有两种方式：原地保存和异地保存。前者通过建立自然保护区和天然公园来实现，后者通过植物园、种质圃、种子库以及离体保存来实现。
二、种质保存的主要方法：（1）常温保存；（2）常低温和低温保存；（3）超低温保存。
稀酸、稀碱的配制及酒精稀释法
在培养基的配制过程中，常需要用氢氧化钾或氢氧化钠和盐酸来来调整培养基的酸碱度。
1.1摩尔/升KOH液的配制:称取57.1克KOH,加蒸馏水至1000毫升.
2.0.1摩尔/升KOH液的配制:取10毫升1摩尔/升KOH液加蒸馏水90毫升.
3.1摩尔/升NaOH液的配制:称取40克NaOH,加蒸馏水至1000毫升.
4.0.1摩尔/升NaOH液的配制:取10毫升1摩尔/升NaOH液加蒸馏水90毫升.
5.1摩尔/升HCL液的配制:取浓盐酸(比重1.19)82.5毫升加蒸馏水至1000毫升.配制时先将浓盐酸缓缓加入约800毫升的蒸馏水中,然后用蒸馏水补足至1000
毫升.
6.0.1摩尔/升HCL液的配制:取10毫升1摩尔/升HCL液加蒸馏水90毫升.
7.酒精是组培工作中常用的消毒液,广泛用于外植体材料、接种用具及接种人员双手的消毒，也用于培养室的酒精喷雾消毒等。酒精的消毒效果以70%为最好。所以常将市售95%的酒精稀释至70%-75%。
常见培养基中植物激素配方类型
激素配方再生方式及用途
1.无植物激素：诱导生根、无性胚、愈伤组织形成
2.单加生长素:：诱导生根、愈伤组织、无性胚、不定芽
3.单加细胞分裂素；诱导不定芽、侧芽增殖、愈伤组织形成
4.高生长素低细胞分裂素：诱导芽、原球茎增殖、愈伤组织形成
5.低生长素高细胞分裂素：诱导丛芽、愈伤组织形成
6.低生长素低细胞分裂素：诱导不定芽、侧芽增殖
7.等量生长素与细胞分裂素：诱导侧芽增殖
8.加生长仰制剂（多效唑、矮壮素等）：壮苗、延缓生长、利于试管苗保存
9.加GA3 ：打破种子、芽休眠，促进伸长生长
培养物的不良表现及改进措施(初始培养阶段)
1.培养物水浸状、变色、坏死、茎断面附近干枯
可能原因：表面杀菌剂过量，消毒时间过长，外植体选用不当（部位或时期）。改进措施：调换其他杀菌剂或降低浓度，缩短消毒时间，试用其他部位，生长初期取材。
2.培养物长期培养几乎无反应
可能原因：基本培养基不适宜，生长素不当或用量不足，温度不适宜。
改进措施：更换基本培养基或调整培养基成分，尤其是调整盐离子浓度，增加生长素用量，试用2,4-D，调整培养温度。
3.愈伤组织生长过旺、疏松，后期水浸状
可能原因：激素过量，温度偏高，无机盐含量不当。
改进措施：减少激素用量，适当降低培养温度，调整无机盐（尤其是铵盐）含量，适当提高琼脂用量增加培养基硬度。
4.愈伤组织太紧密、平滑或突起，粗厚，生长缓慢
可能原因：细胞分裂素用量过多，糖浓度过高，生长素过量。
改进措施：减少细胞分裂素用量，调整细胞分裂素与生长素比例，降低糖浓度。
5.侧芽不萌发,皮层过于膨大,皮孔长出愈伤组织
可能原因:枝条过嫩,生长素、细胞分裂素用量过多。
改进措施：减少激素用量，采用较老化枝条。
培养物的不良表现及改进措施(继代培养阶段)
1.苗分化数量少、速度慢、分枝少、个别苗生长细高
可能原因：细胞分裂素用量不足，温度偏高，光照不足。
改进措施：增加细胞分裂素用量，适当降低温度，改善光照，改单芽继代为团块（丛芽）继代。
2.苗分化过多，生长慢，有畸形苗，节间极短，苗丛密集，微型化
可能原因：细胞分裂素用量过多，温度不适宜。
改进措施：减少或停用细胞分裂素一段时间，调节温度。
3.分化率低,畸形,培养时间长时苗再次愈伤组织化
可能原因:生长素用量偏高,温度偏高。
改进措施：减少生长素用量，适当降温。
4.叶粗厚变脆
可能原因：生长素用量偏高，或兼有细胞分裂素用量偏高。
改进措施：适当减少激素用量，避免叶片接触培养基。
5.再生苗的叶缘、叶面等外偶有不定芽分化出来
可能原因：细胞分裂素用量偏高，或表明该种植物适于该种再生方式。
改进措施：适当减少细胞分裂素用量，或分阶段地利用这一再生方式。
6.丛生苗过于细弱，不适于生根或移栽
可能原因：细胞分裂素浓度过高或赤霉素使用不当，温度过高，光照短，光强不足，久不转移，生长空间窄。
改进措施：减少细胞分裂素用量，免用赤霉素，延长光照时间，增强光照，及时转接，降低接种密度，更换封瓶纸的种类。
7.幼苗淡绿，部分失绿
可能原因：无机盐含量不足，PH值不适宜，铁、锰、镁等缺少或比例失调，光照、温度不适。
改进措施：针对营养元素亏缺情况调整培养基，调好PH值，调控温度、光照。
8.幼苗生长无力、发黄落叶、有黄叶、死苗夹于丛生苗中
可能原因：瓶内气体状况恶化，PH值变化过大，久不转接导致糖已耗尽，营养元素亏缺失调，温度不适，激素配比不当。
改进措施：及时转接、降低接种密度，调整激素配比和营养元素浓度，改善瓶内气体状况，控制温度。
培养物的不良表现及改进措施(生根阶段)
1.培养物久不生根，基部切口没有适宜的愈伤组织
可能原因：生长素种类、用量不适宜；生根部位勇气不良；生根程序不当；PH 值不适，无机盐浓度及配比不当。
改进措施：改进培养程序，选用适宜的生长素或增加生长素用量，适当降低无机盐浓度，改用滤纸桥液培养生根等。
2.愈伤组织生长过快、过大，根茎部肿胀或畸形，几条根并联或愈合。
可能原因：生长素种类不适，用量过高，或伴有细胞分裂素用量过高，生根诱导培养程序不对。
改进措施：调换生长素种类或几种生长素配合使用，降低使用浓度，附加VB2或PG等减少愈伤，改变生根培养程序等。
组培介绍
一、组培的概念和重要性
（一）.植物组织培养的含义
（广义）又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
（狭义）组培指用植物各部分组织，如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
（二）、植物组织培养的重要意义：
1. 加速无性繁殖;
2. 获取脱毒苗;
3. 扩大变异范围：
(1)克服远缘杂交后代不育性和杂交不亲和性。
(2)通过原生质体融合获得体细胞杂种和胞质杂种。
(3)倍性育种：通过胚乳培养获得三倍体；通过花粉和花药培养进行单倍体育种。
(4)结合诱变育种在试管内进行优良变异的诱导.选择和繁殖。
4.加速亲本材料的纯化。一般选育自交系需4－6代花粉培养获得单倍体植株，染色体加倍后即为纯合二倍体。
5.种质资源的试管保存。
6.为基因工程的全面实施人工控制遗传方向打下基础。
二、植物组织培养的理论依据
（一）植物细胞的全能性
指每个植物细胞都具有形成完整植株的能力，因为每个细胞都具有全套的遗传基因，无论是性细胞还是体细胞在特定条件下可以进行表达。1902年德国植物生理学家Haberlandt提出了“细胞的全能性”原理。但在当时的技术条件下，在实践上并没做到，经过几十年来组织培养技术的不断改进，目前细胞的全能性不但在理论上完全被证实，而且为组织培养在实践上的应用奠定了基础。
（二）植物细胞要表现出全能性，须经过几个步骤：
成熟细胞(外植体)→分生细胞→胚状体→完整植株。
成熟细胞(外植体)→愈伤组织→出根出芽→完整植株。
成熟细胞(外植体)→诱导侧芽生长→出根出芽→完整植株。
脱分化也就是已经分化定型的细胞，经过诱导成为重新恢复了分裂能力（也就是成为分生状态）细胞的过程。
不但植物体细胞可以表现全能性，花粉在培养条件下也可能进行脱分化，通过愈伤组织或胚状体发育成单倍体植株。
三、植物组织培养的理论依据
（一）植物细胞的全能性
指每个植物细胞都具有形成完整植株的能力，因为每个细胞都具有全套的遗传基因，无论是性细胞还是体细胞在特定条件下可以进行表达。1902年德国植
物生理学家Haberlandt提出了“细胞的全能性”原理。但在当时的技术条件下，在实践上并没做到，经过几十年来组织培养技术的不断改进，目前细胞的全能性不但在理论上完全被证实，而且为组织培养在实践上的应用奠定了基础。
（二）植物细胞要表现出全能性，须经过几个步骤：
成熟细胞(外植体)→分生细胞→胚状体→完整植株。
成熟细胞(外植体)→愈伤组织→出根出芽→完整植株。
成熟细胞(外植体)→诱导侧芽生长→出根出芽→完整植株。
脱分化也就是已经分化定型的细胞，经过诱导成为重新恢复了分裂能力（也就是成为分生状态）细胞的过程。
不但植物体细胞可以表现全能性，花粉在培养条件下也可能进行脱分化，通过愈伤组织或胚状体发育成单倍体植株。
四、植物组织培养的应用
1.无性系快速繁殖:应用组织培养和细胞培养技术,快速繁衍珍稀濒危植物,使物种得以保存;以及快速繁殖名优新品种,使其在一定时间内繁衍为一定数量的植株。
2.花药培养和花粉单倍体育种:离体花药--花粉培养的单倍体育种法,与常规方法相比,可以在短时间内得到作物的纯系,从而加快育种过程.据不完全统计,我国各地用花药或花粉培育出的植物已有22科52属160个种,取得了较大的成就。
3.药用植物的工厂化生产:当前各地采用组织培养来加速药用植物(如人参、紫草、贝母、三分三、甘草等)的繁殖生长已获得成功，并投入工厂化生产。
4.种质的保存和基因库的建立：组织培养材料的体积小，利于在低温（如低温冰箱）或超低温（如液态氮）中长期保存。
5.突变体的筛选培育：在组培进程中，基因型易发生变异，人们采用紫外线、X射线、r射线、对培养物照射，或者在培养基中加入叠氮化合物等，以诱导和提高突变频率，产生人们需要的突变体，供人们筛选培育。
蓝莓组培
一、实验室设计
1.准备室:(1)进行药品的保存、配置、消毒、分装等。(2)器具的洗涤、干燥、消毒。(3)生理生化指标的测定等。
2.接种室：进行材料的接种，内置超净工作台或接种箱。外设缓冲间-放置拖鞋、工作服、工作帽等。
3.培养室：植物材料的无菌培养，室内主要有培养架和控制温度及光照的设备。
4.细胞学观察实验室：进行培养材料的组织学、细胞学、观察照相等。
二、常用设备和器材
1.高压蒸气灭菌锅：用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒。
2.超菌工作台：用于培养物的无菌操作。（由鼓风机、滤板、操作台、紫外灯和照明灯组成）
3.接种工具：包括双筒实体显微镜、镊子、剪刀、解剖刀、洒精灯等。
4.培养设备：包括空调机、定时器、温度控制器、增湿机或去湿机、培养架、
摇床或旋转床、日光灯、光照培养箱等。
5.化学实验及分析设备：包括天平、酸度计、蒸馏水器、烘箱或玻璃仪器烘干器、电炉、药品柜、冰箱、晾干架等
高压灭菌锅手提式灭菌锅培养箱超净工作台烘干箱电子天秤
三、玻璃器皿的选择和清洗
1.玻璃器皿的选择
*试管- 适合于用少量培养基及试验各种不同配方时选用。
*三角锥瓶- 适用于各种培养（如固体培养、液体培养、大规模培养或一般培养）。*L形管和T形管- 为专用的旋转式液体培养试管。
*培养皿- 适于作单细胞的固体平板培养、胚和花药培养和无菌发芽。
*角形培养瓶和圆形培养瓶- 适用于液体培养用，如单细胞和原生质体的浅层培养。
*果酱瓶- 常用作试管苗大量繁殖用的培养瓶。
2.玻璃器皿的清洗
（1）清洗玻璃器皿用的洗涤剂有肥皂、洗洁精、洗衣粉、和铬酸钾洗涤液。（2）清洗时先将器皿中的残渣除去，用清水洗净，再用热的肥皂水或洗洁精洗净，清水冲洗干净后用蒸馏水冲洗一次，干后备用。
（3）洗净的玻璃器皿应透明发亮、内外壁水膜均匀，不挂水珠。
四、影响植物组培的因素
1.植物因素：(1)基因型，(2)植物年龄，(3)组织和器官的年龄，(4)植物的生理状态，(5)取材年份及生长条件，(6)取材部位及大小。
2. 培养基因素：无机盐、有机化合物、植物激素、天然提取物、琼脂、PH值、渗透压、活性炭。植物组织培养的成功与否，除了培养材料本身的因素外，很大程度上取决于对培养基的选择。培养基的种类、成份等直接影响培养材料的生长发育。故应根据培养材料的种类和部位，选取适宜的培养基。
3.外植体的选择和灭菌:不同品种、不同器官之间的分化能力有差别，且组织培养是建立在无菌操作基础之上的专门技术，因此在进行植物组织培养时，必须选择合适的外植体进行灭菌操作，以确保组织培养工作的顺利进行。
4.环境因素：(1)光照：包括光强、光质、光周期，(2)温度，(3)湿度，(4)气体。
五、培养基的主要成分及制作程序
（一）、培养基的主要成分：
1.无机盐：(1)大量元素：C.H.O.N.P.K.Ca.Mg.S.Cl。(2)微量元素：
Fe.Cu.Mo.Zn.Mn.Co.B.Na。(3)水：培养基95%是水，应使用蒸馏水、双蒸水或使用去离子水,水应放在塑料容器中。
2.有机化合物：(1)糖(碳源和能源)，(2)维生素类：有维生素b1(盐酸硫胺素)、维生素b6(盐酸砒哆醇)、生物素、烟酸、叶酸等，(3)氨基酸类(有机氮源)。
3.植物激素（生长调节物质）：
（1）生长素：主要包括IAA（吲哚乙酸）、NAA（萘乙酸）、2,4-D（2，4-二氯苯氧乙酸）、IBA（吲哚丁酸）；它们的主要作用是诱导愈伤组织的形成、胚状体的产生以及试管苗的生根，更重要的是配合一定比例的细胞分裂素诱导腋芽及不定芽的产生；作用的强弱顺序为：2，4- D>NAA>IBA>IAA。
（2）细胞分裂素：天然：6-BA（6－苄基酰嘌呤）、KT（激动素，糠基酰嘌呤）；
人工：ZT（玉米素）、2-iP（2-异戊烯酰嘌呤）；它们的主要作用是促进细胞的分裂和器官的分化、延缓组织的衰老、增强蛋白质的合成、抑制顶端优势、促进侧芽的生长及显著改变其他的激素作用；作用的强弱顺序为：
TDZ,4PU>ZT>2-iP>6-BA>KT。
（3）赤霉素：GA3。
（4）乙烯及乙烯抑制剂。
4.天然提取物（如椰乳、酵母提取物、番茄汁、香蕉泥等），其作用是提供一些必要的微量营养成分、生理活性物质和生长激素等。
5.琼脂（是从海藻中提取的一种高分子碳水化合物），其主要作用是使培养基在常温下凝固，同时不参与代谢。
6.活性炭：加入培养基中的目的主要是利用其吸附能力，减少一些有害物质的影响，如可以防止酚类物质污染而引起组织褐化死亡。
（二）、1962年Marshing和Shong发明了MS培养基
（三）、培养基的制作程序：
六、外植体的选择和灭菌
（一）、外植体的选择:(1)外植体部位;(2)取材季节;(3)器官和生理状态和发育年龄;(4)外植体的大小。
(二)、外植体的灭菌方法
1、常用灭菌药剂的使用和效果：
消毒剂使用浓度/% 清除难易消毒时间/min 灭菌效果
次氯酸钠 2 易 5-30 很好
次氯酸钙 9-10 易 5-30 很好
漂白粉饱和溶液易 5-30 很好
升汞 0.1-1 较难 2-10 最好
酒精 70-75 易 0.2-2 好
过氧化氢 10-12 最易 5-15 好
溴水 1-2 易 2-10 很好
硝酸银 1 较难 5-30 好
抗菌素 4-50mg/L 中 30-60 较好
2.灭菌方法:
(1)茎尖、茎段及叶片等的消毒：用清洁剂清洗---75%酒精浸泡10-20min---无菌水洗2-3次---Naclo或升汞溶液泡10-15min---无菌水洗3-4次
（2）果实和种子的消毒：自来水冲洗10-30min---70%酒精漂洗---2%Naclo液浸10min---无菌水2-3次---取出种子培养
（3）根及地下部器官的消互毒：自来水冲洗---纯酒精漂洗---升汞浸5-10min 或2%Naclo液浸10-15min---无菌水洗3次
（4）花药的消毒：70%酒精浸泡数秒钟---无菌水洗2-3次---漂白粉上清液浸10min---无菌水洗2-3次。
七、外植体接种和培养
1.外植体的接种
（1）接种室的消毒:用70%酒精喷雾使细菌和真菌孢子随灰尘的沉降而沉降,再用紫外灯照射20min；或用高锰酸钾与甲醛蒸气熏蒸。超净工作台可用新吉尔灭
或酒精擦洗，其它一切器皿、衣物都要经严格的灭菌才能带进接种室。
（2）接种：左手拿试管或三角瓶，右手拿接种针或镊子接种，瓶口要靠近酒精灯火焰、接种动作要快，以免造成污染。
2.培养方法
（1）根据外植体不同可分为：胚胎培养、器官培养、组织培养、细胞培养、原生质体培养
（2）根据培养方式不同可分为：固体培养、液体培养、半固体培养、双层培养
3.培养条件：温度、湿度、光照、PH值、氧和其它气体
4.外植体褐变及其防止:(1)培养基中加入抗氧化剂；(2)用抗氧化剂浸泡外植体后再接种；(3)减少光照强度或在黑暗条件下培养；(4)多次更换培养基达到稀释释效应；(5)加入多胺类物质，如精胺、亚精胺通过刺激细胞分裂，加速组织生长，减少褐化。
5.试管植物的玻璃化现象及其预防措施
外植体接种全过程
酒精擦拭手外植体消毒浸泡5min 器械消毒酒精灯灼烧酒精擦拭培养皿
酒精擦拭旋转灼烧修剪外植体取外植体接种塞回瓶塞培养
蓝莓组织培养技术的操作技术要点专家回复：（1）田间取材生长季节选择生长健壮的半木质化的新梢。最好将外植体取材苗木盆栽于日光温室中，每年的
3-5月取材。（2）接种将材料适当分割，在超净工作台上用0.1％升汞灭菌6—10分钟后，用无菌水冲洗5次，接入到培养基中。 (3)诱导培养用改良WPM培养基，温度20-30℃,光照12hr，30天后可长出新枝。 (4)继代培养对已建立的无菌培养物，进行继代培养，每40--50天一代，以达到育苗数量上的要求。温度20--30℃，光照2000-3000LX，12—16hr (5)炼苗将准备移栽的瓶苗，放在强光下，并逐渐打开瓶口，使之适应外界条件。一般需7-15天时间。 (6)移栽将苗从瓶中取出，去掉基部的培养基然后在大棚内插到苗盘上。正常情况下，一个月后即可成活。（7）日光温室促成育苗：于9越-11月，将组培室瓶内幼枝出瓶，剪成5-10cm枝段，用1000-2000ppm IAA 或生根粉速蘸，扦插在基质中，空气湿度90%，温度控制在20-28C。用生物灯补充光照16hr，以防短日照苗木休眠。优点：相对春季5-6月份而言，9-11月份日光温室内温度温和，容易控制，生根率可达90%上。在扦插生根前30天内不施肥，生根后，每周喷施1-5%浓度二铵一次，一直到翌年的三月份，停止施肥。 5月中旬，随着气温升高，温室逐渐放风炼苗，约20-30天，全部打开。此时，幼苗高度约20-30cm,3-5
个分枝。 6月中旬，将苗木移栽到12-15cm 口径营养钵中，露地抚育。营养基质按照与原图：草炭：有机肥=1：1：1，加入硫粉2kg/立方米。到秋季即可培育成大苗，即可定植。（8）幼枝催吊生根如果繁殖的幼枝需要远途运输或暂时不能扦插时，则可采用室内吊挂催根方法。即用盛冰淇淋用的
10cm×10cm×5cm的塑料食品盒（透明）。剪宽 1cm、长30cm的滤纸条，吸足IBA溶液10cm/L后平铺与桌面，然后每隔2～2.5cm摆好的幼枝上，然后卷成小卷儿，立放于塑料盒中，每盒放 8～10卷，共100个幼枝，盒底加入2～3ml 10mg/L 的IBA溶液，盖好盖，保持湿度。用普通地膜作成长筒，两头扎住，然后把盒放
入，每筒叠放8～10盒，吊挂于室内光照好的地方，一般1个月左右即可生根。在冬季组培增殖幼枝，无温室条件扦插时，可采用此种方法促进生根。
蓝莓组织培养
蓝莓组织培养方案 1、植物介绍： 1）供试材料来源： 选取长势旺盛的幼嫩枝条，去除多余的叶片，切取除顶芽外的第3节~第10节作为外植体。提供的材料希望老师可以从组培室提供。 2）技术路线： 外植体处理→接种→增殖培养→生根培养→移栽 2方法步骤： 1）外植体的剪取与消毒程序的筛选： 切取除顶芽外的第3节~第10节作为外植体段去叶片留叶柄→流水冲洗30min→75%酒精浸泡30s→0.1%升汞溶液消毒 3~7min→无菌水冲洗4~5次→用滤纸吸去水分→将茎段切成带有1~2个腋芽的小段 2)初代培养基的筛选： 选用MS为最基本的培养基，根据需要的不同，添加激素6-BA、
NAA、ZT。 3)增殖培养基的筛选： 以MS为基本培养基，按激素6-BA、NAA、ZT含量的不同， 诱导增殖培养基设4系列处理（培养基1~4号），生根培养 基设2系列处理（培养基5~6号），培养基配方表如下： 表中培养基蔗糖含量：分化和继代培养基为30g/L，pH值5.6~5.8， 在115MPa气压下灭菌20min。 4)生根培养基的筛选 不同的培养基进行生根的优势也不一样，根据大量的材料表明1/4 MS中的小苗生根均明显优于全量的MS培养基，所以用激素以IBA 0.5mg/L效果最好，生根情况好且所需天数也最短。最适培养基应
该为1/4 MS+IBA 0.5mg/L 5)试管苗移栽试验： 当苗根长到1~1.5cm时，打开瓶盖，取出小苗，洗净培养基。用多灵菌500~800倍浸泡30min左右，然后栽入0.1%高锰酸钾消毒过的苗床上。苗床基质分5个处理，分别为沙：草炭土=1:1、沙：蛭石=1：1、纯沙、纯蛭石、腐苔藓。（根据资料查找以腐苔藓为基质最好，成活率达80%以上，草炭土和沙半量也可达50%的成活率。）
蓝莓生产的成本分析
蓝莓生产的成本分析 蓝莓苗木生命期在50－100年。果实丰产期为30年左右。 1．露地栽培（元/亩，土地费用除外，按15年计算） （1）投入：土地改良及材料费1000元×3次＝3000元／亩； 苗木费350×15元＝5250元； 人工费1000元×15年＝15000元； 灌溉费300元×15年＝4500元。合计27750 （2）产出：如果以15年为核算周期，前3年控制结实，则产果期为12年。 生产期12年×1000kg×30元/kg＝360000元 （3）15年纯利润：360000-27750＝332250元； 15年内年平均利润为22150元/亩 2．保护地栽培（元/亩，土地费用除外，按15年计算） （1）投入：温室建设费40000元； 土地改良费1000元×3次＝3000元； 苗木费500×15元＝7500元； 人工费1000元×15年＝15000元； 灌溉费300元×15年＝4500元。合计70000元 （2）产出：如果以15年为核算周期，前3年控制结实，则产果期为12年。 生产期12年×1300kg×100元/kg＝1560000元 （3）15年纯利润：1560000－70000＝1490000元； 15年内年平均利润为99333元/亩 本土蓝莓率先“登陆”山东每公斤成本价高达640元 时报6月15日讯(记者苏珊)对许多市民来说，蓝莓口味的饼干、酸奶并不陌生，但却极少在市场上购买到新鲜的蓝莓。记者今天了解到，由我国本土培育的蓝莓已经在我省率先上市，但目前每公斤成本价约为640元。 记者从今天召开的“全国首家蓝莓组培繁育基地成果汇报会”上了解到，这种蓝莓由我国第一家工厂化蓝莓组培繁育基地培繁育，适合北方区域广泛种植。 据介绍，蓝莓学名“越橘”，属北美洲特产，具有多种食用及药用功效。蓝莓在欧美的加工已实现产业化，而我国蓝莓种植业发展缓慢，目前全国种植面积仅有200公顷左右，品种单一，品种适应性和栽培技术也不成熟。 省果树研究所育种室研究员刘庆忠长期从事莓栽培技术研究，据其介绍，由于首批蓝莓的成本价过高、产量有限，目前市民在市场上还购买不到价格适中的蓝莓。但今后通过加快科研速度、降低成本和提高产量，鲜果蓝莓预计在三年到五年时间将走入“寻常百姓家”。《种植蓝莓效益高》 花青素是一类可溶性的色素，颜色从蓝色一直到红色。花色甙成分药理研究发现有促进视红素再合成、改善循环、抗溃疡、抗炎症等多种药理活性。可以明显改善用眼疲劳。由于蓝莓果实中所含的花青素类和其他具有保健作用的化合物，如细菌抑制因子、叶酸、维他命A和C、胡萝卜素、鞣花酸和纤维素等，在41种水果蔬菜中的抗氧化能力最强。蓝莓中的抗氧化能力和有特殊作用的化合物能够防御自由基的氧化作用。 蓝莓。本来是野生植物，90年代初开始，才开始人工种植。经悉心的栽培及改良，今天蓝莓已变得外形浑圆肉厚，鲜甜多汁，而且易于采摘。树莓原产美国，属浆果类果树，是多年生落叶小灌木，树高1.5－2米，果实长于树上，果实椭圆形，成串成簇，晶莹乌亮，香甜多汁，口感清香爽口，非常好吃，平均果重5.5-6.7g，生长强壮，单株平均产量6.9kg，亩产量可达1000kg，抗寒性较强，有些品种可耐-30℃的低温。适合北方广大地区发展。维
蓝莓组培关键技术汇总
蓝莓组培关键技术汇总 一、愈伤组织的培养 （一）几个概念 1.外植体（explant）：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。 2.分化（differentiation）：细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变，从而在个发育中形成各类组织和器官完成整个生活周期。 3.脱分化（dedifferentiation）:已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分化组织状态的过程。 4.再分化（redifferentiation）:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。 5.愈伤组织（callus）:在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。 6.胚状体（embroid）:-对应于胚（embryo），在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。胚状体原始细胞特征：原生质浓厚，细胞核较大，处于细胞质中央。 7.人工种子(artificial seed):指将植物离体培养产生的体细胞胚包埋在含有营养成分和保护功能的物质中,在适宜条件下发芽出苗的颗粒体。 （二）愈伤组织类型及特征 1.结构致密型：表面光滑有光泽，结构致密，多为淡黄色或白色，易于再生芽 2.结构松散型：多为白色，可以用于悬浮系建立。 3.胚性愈伤组织：具有产生胚状体能力。 （三）愈伤组织的形成：大致经过起绐期、分裂期和形成期，但三个时期没严格界限。 1.起始期指细胞准备进行分裂的时期，当外植体已分化的活细胞在外源植物生长物质的作用下，通过脱分化起动而进入分裂和形成愈伤组织。 2.分裂期表现为外层细胞出现分裂，细胞分裂进入最旺盛时期，细胞体积最小，细胞核和核仁较大，RNA含量最高。 3.形成层的特征是细胞大小趋于稳定,细胞分裂从分裂期的周缘细胞分裂为主转向了内部组织。 （四）愈伤组织中的形态发生：愈伤组织通过再分化形成再生植株的方式主要有： 1.先产生芽后,在茎的基部长根。 2.先长根,再长芽。 3.愈伤组织的不同部位分别形成根和芽。 （五）胚状体特点 1. 有分化明显的生物两端，根端和芽端。 2.单细胞起源。 3.发育程序同合子胚相似，也经过球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚。 4.和周围细胞之间有隔离。 5. 和培养物质没有维管束联系，所以容易从培养物质上剥离。 6.可以在不附加任何激素的培养基上萌发。 （六）胚状体发生途径 1. 直接胚状体发生。 2.间接胚状体发生（愈伤组织分化出胚状体）。 3.从悬浮培养的细胞中诱导。 4.由花粉产生的单倍体胚状体。 5.由原生质体产生胚状体。
蓝莓盆栽种植技术
蓝莓种植技术 蓝莓为多年生落叶或常绿灌木，果实呈蓝色，近圆形，单果重0.5～2.5克，种子极小。果肉细腻，甜酸适度，有香气。可鲜食，亦可加工成果酱、果汁、果酒等。蓝莓栽培最早始于美国，我国原始蓝莓品种几乎都是野生的，不适合栽培。20多年前我国开始引进国外优良品种，至今已引进20多个品种，但尚未形成大规模的生产能力。为推进我国蓝莓生产的发展，现将其栽培技术介绍如下： 一、建园 1.园地选择：蓝莓栽培范围较广，可根据当地气候选择适宜品种，但干旱少雪、易受霜冻的北方地区不宜发展。选择的园地坡度要小，不宜超过10度；土壤pH值4.0～5.5，最适范围4.3～4.8；土壤有机质含量不低于5%；土壤疏松，通气良好，湿润但不积水。 2.园地准备：园地选好后，在定植前一年结合压绿肥深翻，深度以20～25厘米为宜，深翻熟化后整地。在定植前还要对不完全符合要求的土壤进行改良，以利蓝莓生长。 3.定植：蓝莓春、秋栽植均可，以秋栽成活率高，春栽则宜早不宜晚。株行距，兔眼蓝莓常用2米×2米或1.5米×3米，高丛蓝莓用1.2米×2米，矮丛蓝莓用0.5～1米×1米。兔眼蓝莓白花不实，最好配置高丛蓝莓作授粉品种。高丛和矮丛蓝莓白花结果率较高，但配置授粉树可提高果实品质和产量。主栽品种与授粉品种的配置比例为1∶1或1∶2。 二、土肥水管理 1.土壤管理：蓝莓根系分布较浅，而且纤细，没有根毛，因此要求土壤疏松，通气良好。 ①清耕法。从早春至8月份都可进行清耕，入秋后清耕对其越冬不利。高丛蓝莓在沙壤土上栽培常用清耕法。清耕深度以5～10厘米为宜，过深易伤害根系。 ②生草法。采用行间生草，而行内用除草剂。生草法与清耕法相比，同样有利于提高产量，并且具有保持土壤湿度、便于机械作业的优点。 ③土壤覆盖。土壤覆盖在蓝莓生产上应用广泛，它有增加土壤有机质、改善土壤结构、调节和保持土壤湿度、降低土壤pH值、控制杂草等多种作用。给矮丛蓝莓土壤覆盖5～10厘米锯末，在3年内产量可提高30%，单果重增加50%。树叶、稻草及其他作物秸秆也可应用，但效果不如锯末。 ④除草。在蓝莓园管理中，除草是非常重要的一环，做好了可使产量提高1倍以上。在蓝莓生产中，广泛应用化学除草剂。这是因为人工除草费用高，又易伤害根系，特别是矮丛蓝莓栽培，由于根状茎串生行走，几年后整个果园连成一片，根本无法人工除草。蓝莓园常用的除草剂有敌草隆、西玛津、氯苯氨灵、2，6二氯苯、草甘膦、百草枯等。
蓝莓组培快繁技术实例 · 附配方
蓝莓（Vaccinium corymbosum）属杜鹃花科，越橘属植物。起源于北美，多年生灌木小浆果果树。因果实呈蓝色，故称为蓝莓国际粮农组织将其列为人类五大健康食品之一。 本试验以蓝莓半木质化茎段为外植体，并通过瓶外生根技术，建立起植株再生体系。 1 材料与方法 1.1 外植体材料及培养条件 1.1.1 外植体选择 高灌蓝莓半木质化茎段。 1.1.2 外植体预处理及灭菌 剪取蓝莓半木质化枝条，立即去掉上部叶片带回室内，剪成带有一个叶芽2-3厘米长茎段，在流动自来水中冲洗20-30分钟，在超净工作台上用75%酒精消毒2-3分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水后在0.1%升汞中消毒5-8分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水分，剪去茎段两端约 0.5-1厘米，立即接种到初代培养基中。 1.1.3 培养条件 诱导培养基：改良WPM + ZT 1.0mg/L 增殖培养基：改良WPM + IAA 0.1mg/L + ZT 2.0mg/L 复壮培养基：改良WPM + IBA 0.1mg/L WPM具体改良为：以硝酸钙 684mg/L、硝酸钾 190mg/L、EDTA铁钠 73.4mg/L和盐酸硫胺素0.1mg/L代替原WPM培养基中的硫酸钾、氯化钙、硫酸亚铁和乙二胺四乙酸钠。 以上培养基均加蔗糖3%，琼脂0.7%，pH值5.2。 培养温度为25℃，光照强度为2000lx，光照时长为12-16时/天。
2 结果与分析 2.1 初代诱导培养 将处理好的外植体立即接种到诱导培养基中，5-6天叶芽开始萌动，10天开始展叶，20天腋芽长到1厘米长，30天腋芽长到1.5-2.5厘米长。 2.2 继代增殖培养 将初代培养长出的茎剪成1.5-2厘米长茎段转接到增殖培养基中。30-35天增殖5-7倍，增殖苗生长健壮。 2.3 复壮培养 将继代苗剪成1-1.5厘米茎段，转接到壮苗培养基，复壮培养30-40天，复壮苗高5-6厘米且粗壮。 2.4 瓶外生根培养
我国蓝莓_越桔_栽培研究现状及发展措施
文章编号:1002-1728(2003)03-0021-03 我国蓝莓(越桔)栽培研究现状及发展措施 Ξ 修英涛,常凤英,姜 河,杨伟力,候利军 (沈阳农业科技开发院,辽宁沈阳 110161) 中图分类号:Q949.772.3文献标识码:B 蓝莓(Blueberry )又名越桔,属于杜鹃花科越桔属(V accinium )植物,灌木小浆果果树,广泛分布于北半球,从北极到热带高山地区均有分布。其果可生食,亦可加工果汁、果酒、果酱等,从其加工果汁的果渣中,可以提取越桔红,是优良的天然食品红色素。蓝梅具有较高经济 价值和广阔开发前景[1、29] 。蓝莓果实含有防止脑神经衰老、增强心脏功能、明目及抗癌等独特功效物质,因此被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一[17]。近年来,美国、加拿大、日本、智利和欧洲的很多国家都把蓝莓视为保健与功能食品,倍受人们青睐,国际市场售价昂贵,供不应求[2]。蓝莓的栽培驯化工作1900年始于美国,到目前为止,已选育出适合各地气候条件的优良品种100余个,总栽培面积近20000hm 2,年产量达20万t ,形成了缅因州、佛罗里达州、新泽西州、明尼苏达州等十余个主要产区。继美国之后,荷兰、加拿大、德国、波兰、澳大利亚、新西兰、日本等国竞相引种栽培,根据自己国家的气候特点和资源优势开展了具有本国特色的蓝莓研究和栽培工作,并相继进入商业性栽培[3]。尽管中国也有越桔属植物分布,但对其研究很少。随着人们生活水平的提高,蓝莓、树莓、沙棘、酸枣等以风味独特,营养保健作用日益受到人们的关注,被列入世界第三代水果的行 列[10、11]。自20世纪80年代后,我国科学工作者对我国 野生蓝莓资源的现状及开发利用状况进行了调查,分析了蓝莓的营养成分,并对野生蓝莓进行了初步的加工利 用研究[4、5、6、7、8、9、12、29]。我国蓝莓栽培起步较晚,自1983 年后,有关单位先后从国外引进100个左右蓝莓品种,并进行一些栽培研究工作,筛选出了一些适合我国南方、北方气候条件栽培的品种,并进行了有关育苗、栽培环境与栽培管理方面的研究。 1 栽培品种与育苗技术 111 栽培品种 我国东北山区有着丰富的越桔属资源,其中以笃斯越桔(V .ulginosum )和红豆越桔(V .vitis 2idaea )面积校大、储量较多,集中分布于大小兴安岭、长白山。大兴安岭产量可占全国的90%,丰年产量可达数十万吨[5]。大兴安岭素以高寒著称,被认为是水果栽培的禁地,而野生越桔却生长繁茂。因此要加强对这一地区野生越桔资源保护和开发利用,同时要引进推广适于这一高寒环境的 优质高产栽培品种进行商业化栽培。我国有许多适于蓝 莓栽培的生态区,仅长白山就有近百万亩的强酸沼泽地,稍加改造即可进行商业化栽培。但大面积开发,需要与各地环境相适应的优良品种和大量优质苗木[13]。野生蓝莓品种果实小,产量低,口味差,难以适应商业化栽培需要,因此,自20世纪80年代初以来,吉林农业大学、南京植物研究所、山东省果树研究所等单位先后从美国、加拿大、波兰、芬兰、德国等国家引进蓝莓品种100个左右,并进行了栽培筛选与育苗研究。根据树体特征、果实特点及区域分布分为四类。 矮丛蓝莓:树体矮小,一般高30～50cm ,抗旱能力较强,且有极强抗寒能力,极适宜于东北高寒山区大面积商业化栽培,果实较小,适于做加工原料。代表品种有美登(Biomidom )、斯卫克(Brunswick )、坤蓝(Cumber 2 land )[14、16、27] 。 半高丛蓝莓:一般树高50～100cm ,果实比矮丛蓝莓大,比高丛蓝莓小,抗寒力强,一般可抗-35℃低温,适于北方寒冷地区栽培。代表品种有北陆(Northland )、北村(Northcountry )、北蓝(Northblue )、圣云(St.cloud )[14,16]。 高丛蓝莓:株高2～3m ,果实较大,品质佳,鲜食口感好,可以作鲜果市场销售主栽品种。分为南高丛蓝莓和北高丛蓝莓两类。南高丛蓝莓喜湿润、温暖气候条件,适于我国黄河以南地区发展;北高丛蓝莓喜冷凉气候,抗寒力较强,有些品种可抵抗-30℃低温,适于我国北方沿海湿润地区及寒地发展。代表品种有艾文蓝(Avonblue )、蓝丰(Bluecrop )、爱国者(Patroit )、泽西(Jersey )、艾朗 (Aron )[17、21、27] 。 兔眼蓝莓:一般株高达7m 以上,生产上控制在3m 以下,寿命长、抗湿热,对土壤条件要求不严,且抗旱。适于我国长江以南地区的丘陵地带栽培。代表品种有巨丰(Dellite )、杰兔(Premier )、粉蓝(Powerblue )[27]。112 育苗技术 蓝莓苗木繁殖方法主要有3种,即硬枝扦插、绿枝扦插和组织培养方法。 硬枝扦插:主要适合于高丛蓝莓和矮丛蓝莓。一般于每年春季(3～4月)剪取1年生的营养枝,扦插条长度以15cm 为宜。上部切口为平切,下部切口为斜切,正好位于芽下,扦插基质为腐苔藓或草碳与河沙(1∶1)的混合基质,枝条插入基质时只留一个顶芽,扦插苗床应支离地 Ξ收稿日期:2002-05-08 辽宁农业科学 2003(3):21～23Liaoning Agricultural Sciences
世界蓝莓生产现状和我国蓝莓发展趋势
世界蓝莓生产现状和我国蓝莓发展趋势 李亚东教授(吉林农业大学浆果研究所) 蓝莓又称越橘，为杜鹃花科越橘属植物，是具有较高经济价值和广阔开发前景的新兴果树树种。果实为蓝色，果实大小因种类不同而异，一般单果重为0.5-2.5g，其果实果肉细腻，种子极小，甜酸适口，有清爽宜人的香气。同时，蓝莓具有较高的保健作用和药用价值，在国内外极受欢迎，并已被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一。 蓝莓的种类、品种很多，近几年通过农业科技工作者的努力，现已选育出适合寒带、温带、亚热带等不同气候条件下栽培的种类和优良品种，在很多地区已经推广种植，并取得了很好的经济价值。蓝莓管理技术简便，见果年限短，经济效益大，一般栽后l-2年即可结果，3年进入盛果期，植株寿命长。 一、栽培历史 蓝莓的栽培历史不到一个世纪，最早始于美国。1906年，F.V.coville首先开始了野生选种工作，1937年将选出的15个品种，进行商业性栽培。到上世纪80年代，已选育出适应各地气候条件的优良品种100多个，形成了缅因州、佐治亚州、佛罗里达州、新泽西州、密执安州、明尼苏达州、俄勒冈州主要经济产区，总面积1.9万hm2，产量20万t。目前，蓝莓已成为美国主栽果树树种。到2003年，北美地区栽培面积达到96.9hm2，总产量超过40万t。继美国之后，世界各国竞相引种栽培。各国根据自己的气候特点和资源优势开展了具有本国特色的蓝莓研究和栽培工作。荷兰、加拿大、德国、奥地利、丹麦、意大利、
芬兰、英国、波兰、罗马尼亚、澳大利亚、保加利亚、新西兰和日本等国相继进入商业性栽培。据统计，全球已有30多个国家和地区开始蓝莓产业化栽培，总面积目前达到12万hm2，但仍处于市场供不应求状态。 我国蓝莓栽培起步较晚，但发展速度较快。上世纪80年代初期，吉林省和黑龙江省采集野生资源加工果酒、饮料。吉林省安图县山珍酒厂生产的蓝莓酒曾获农业部银质奖，其产品在市场上很畅销。但由于依靠野果原料供应不稳及果酒市场的衰退，未能形成一个稳定的产业。在采集野生资源基础上，一些林业部门曾作过野生笃斯越橘的家植驯化栽培，但由于产量及产值低，栽培效益差，生产上也难于推广。针对这一问题，吉林农业大学于1983年率先在我国开展了蓝莓引种栽培工作，到1997年，从美国、加拿大、芬兰、德国引入抗寒、丰产的蓝莓优良品种70余个，其中包括高丛蓝莓、半高丛蓝莓、矮丛蓝莓等六大类型。1989年，解决了蓝莓组织培养工厂化育苗技术，扩繁后，在长白山建立了5个蓝莓引种栽培基地。1995年，初步选出适宜长白山区栽培的蓝莓优良品种4个，并开始向生产推广。对一些基本的栽培技术和育苗、土壤管理等也作了研究。1999年，吉林农业大学与日本的环球贸易公司合作，率先在我国开展了蓝莓的产业化生产栽培工作。2000年开始，相继在辽宁、山东、黑龙江、北京、江苏、浙江、四川等地引种试栽。2004年在吉林、辽宁和山东省发展300hm2，总产量300t，产品80%出口日本。到2006年为止，国内种植已经遍布全国各个省市，总面积已近千公顷。 二、经济意义 (一)营养价值及医学价值
蓝莓温室大棚栽培技术_陈宏毅
多种经营 Diversity Management PR ACT I CAL FOR ES TRY T EC HN OLOGY 43 二〇〇九年第五期 林业实用技术 蓝莓温室大棚栽培技术 陈宏毅1 王贺新 2 (1.天津农学院 天津 300384;2.大连大学) 垛高度。高温季节摆2～3层防烧菌,低温季节可放6～7层,通过袋内料升温加速发菌。在垛好后再用打孔器(4分铁管一端加尖)在每个菌棒中央扎一大孔让其通透至另一 端以达充分透气。发菌前10d 要特 别注意料温,控制在35℃以下。10d 左右翻垛1次,依上述操作成品率可达100%。从接种到菌丝长满袋筒一般在45d 左右,可以说菌丝长势一天一个样,可为高产打下良好基础。出菇时处理好环境和袋内温度、湿度和通风等几个因素,保持充分的氧气供应,一般以棉籽壳为主料的转化率150%～200%,头茬每 棒平均出菇0.75～1kg ,收回成本有盈余。以后几茬菇利润要看市场价格而定。 5 科学采菇和销售 实现高收益要把好质量关,掌握好采收时期,平菇子实体多为鲜 菇上市销售,同一品种差别很大,出菇时可从以下几方面进行调整。5.1 及时采收商品菇一般在七成熟时(当菌盖色变浅,边缘开始向上反卷并充分展开菌盖和菌柄连接处有绒毛 时)应及时采收,每堆菇最好在500g 左右,采摘后立即上市。5.2 计划好采摘时间 要估计采摘量和中途运输时 间,摘后的鲜菇最好在2～3h 到达批发市场,若清晨3∶00-4∶00批发,则在午夜采摘装盒,比头天采摘的菇新鲜度好价格高。5.3 合理包装 实践中用泡沫箱简便易行,每箱采菇定量,每堆菇最好在500g 左右,方便消费者。5.4 销售灵活 销售时批发和零售相结合,随时掌握准确价格,不能完全依赖于商贩。5.5 信息反馈 在销售中随时反馈销售情况。在均衡采摘基础上,依市场行情决定是催菇或降温限制生长。★ [摘要] 蓝莓温室大棚促成栽培技术的 关键在于对影响蓝莓种植的诸多因素实现人工控制和调节,从而实现反季节生产 和高产、高效、优质的目标。本文对蓝莓 温室大棚栽培中的温室建造、品种选择、 土壤改良、定植密度以及栽培管理等方面 的关键技术进行了阐述,旨在为我国北方 地区利用温室进行蓝莓反季节促成栽培 提供技术参考。 [关键词] 蓝莓 温室大棚 促成栽培技术蓝莓是全球新兴的保健浆果。自20世纪80年代引种以来,蓝莓种植在我国得到了较快的发展。由于蓝莓种植对气候、土壤、水质等条件要求较高,再加上果实成熟期集中,收获期短,鲜果保存难度大等原因,难以实现一年内蓝莓鲜果的长期供应,蓝莓种植业的发展也受到了一定的制约。为了解决这些问题,2005年起,我们开始了温室大棚栽培试验,并形成了一整套温室栽培促成生产和管理技术。实验表 明:采用温室大棚促成栽培技术,能 提高蓝莓种植的地域适应性,增加 产量,实现反季节生产,提高果实的商品价值,同时实现蓝莓生产的高产、优质和高效的目标。现将蓝莓温室大棚促成栽培的主要技术介绍如下。 1 日光温室大棚的建造 1.1 温室大棚的选址 日光温室大棚应选择地势平坦、光照好、土壤有机质含量高、排灌方便、水土空气无污染的地点建造。在选择种植地块时要了解或测定土壤pH 值和有机质含量。若是山地要尽量选择阳坡中、下部,坡度不宜超过15°,大于15°时要修筑最低8m 宽的梯田。 1.2 温室大棚的规格标准 温室跨度一般在8～10m 左右,墙体厚度为1m ,脊高4m ,后墙高度3m ,在后墙距地面1.5m 高度横向每隔4m 设一个60cm ×60cm 的通风口,温室长度不限;温室后墙土堆和砖砌式均可;温室间应有一定间距,间距不少于温室高度的1.8倍,以不遮光为原则。薄膜可用以聚乙烯为主要原料的PE 无滴水塑料薄膜和以聚氯乙烯为主要原料的PVC 无滴水塑料薄膜两种;棚内较适合蓝莓生长的温度为20～25℃,最高不能超过30℃,最低不能低于12℃。 2 品种的选择 虽然蓝莓温室大棚促成栽培有更大的适应性,但为了节约成本、易于生产管理,品种选择时仍然要依据当地土壤、气候条件、品种特性、DOI :10.13456/j .cn ki .lykt .2009.05.012
蓝莓组织培养与快速繁育技术分析
蓝莓组织培养与快速繁育技术分析 发表时间：2019-06-21T16:40:22.097Z 来源：《工程管理前沿》2019年第06期作者：孙丰 [导读] 采用改进的MW培养基+适量植物激素的组合成功概率最高；生根阶段采用半营养MW培养基+NAA的组合，生根状况最佳。 大兴安岭地区农林科学院 165000 【摘要】本文以栽种于四川的蓝莓无性繁殖品系为外植体来源、对比试验为手法，测试了一系列培养基配方、植物激素种类与用量对蓝莓组织培养的影响，并最终得出结论：在蓝莓的启动与分化培养阶段，采用改进的MW培养基+适量植物激素的组合成功概率最高；生根阶段采用半营养MW培养基+NAA的组合，生根状况最佳。 【关键词】蓝莓；组织培养；对比实验 蓝莓(Blueberry)又名越橘, 属于杜鹃花科乌饭属 (Vaccinum)多年生落叶或常绿果树, 呈灌木状生长。因为果实外表呈深蓝色，故而得名。蓝莓原产于北美，但是实际上在北半球均有分布。我国的蓝莓多生长在华东、华中及东北地区，多为海拔在400至1400米的丘陵或山地地区。其果实为蓝色近圆形浆果，单果重0.5~2.5克，最大可达3.5~5.0克。蓝莓果实具有酸甜适中、香气宜人、果核极小等优点，既可作为水果生食，又可以作为加工果汁、果酒、果干的原料。蓝莓的营养相当丰富，每百克蓝莓鲜果中含有约550毫克蛋白质、500毫克左右脂肪、大约14克碳水化合物；而维生素含量也普遍高于其他水果。蓝莓对气候、土壤的要求很低，适应能力极强，而且病虫害很少，故种植过程中一般无需考虑施用农药。同时，蓝莓果实中含有大量花青素、鞣酸等物质，对于人体细胞抗氧化、减缓衰老有很好的保健作用，故被誉为“水果之王”。本文对蓝莓茎段组织培养技术作了详细的探讨，现展示如下。 1、材料与方法 1.1蓝莓品系 本次实验采用的是日本佐贺县上场营农中心引进的南、北高丛杂交无性后代种苗中，适应四川生长环境最佳的18A、18B、18C三个品系。 1.2无菌材料的制取 将外植体表面用洗衣粉洗净，置于流水下冲洗30min，然后于超净工作台上用70%乙醇进行表面灭菌。1min后采用0.1%氯化亚汞溶液继续浸泡10min，浸泡完毕后用无菌水冲洗5次。冲洗完毕的外植体在解剖镜下去掉芽鳞，再用0.1%氯化亚汞溶液消毒4min，无菌水冲洗5次，最后将枝条切成0.5~1.0cm长的、带腋芽的茎段即可。 1.3实验方法 本次实验采取的培养基是在MS培养基和WPS培养基基础上改良的MW培养基，分别加入不同浓度的BA和NAA制成。本文的目的之一便是从上述不同植物激素配比的培养基中选出最适合蓝莓组织培养的配比。培养基制成之后，调节pH至4.0~5.0，在121摄氏度、131kPa的条件下灭菌20min。植株培养温度（24±2）摄氏度，每日光照16个小时，亮度控制在（1600±200）lx。 2结果与分析 2.1培养基与外植体形式对初始分化的影响 本节分别取MS、WPS、MW三种培养基与休眠芽、嫩芽两种外植体形式进行了六组实验。实验结果证明，使用MW培养基作培养环境、嫩芽为外植体的组合具有最高的生长分化率（~86%），而且采用新抽嫩茎作为外植体的消毒过程十分简便、污染率低，是最佳的培养基与外植体方案。 2.2激素的种类对蓝莓芽组织培养的影响 以改良的MW培养基为基础，加入不同类型、不同浓度的植物激素以及其组合（其中第一组试验是对照组，不额外添加任何植物激素），对蓝莓芽分化情况作对比。具体搭配如下表： B组合中只添加了低浓度的生长素NAA，未添加细胞分裂素，导致只有个别南亚完成了分化，没有形成植株；C组合只添加了细胞分裂素BA，未添加生长素，也只有少量的个体完成了分化，形成的苗数量很少。D组合只添加少量细胞分裂素KT，结果和C组类似。而结合使用了细胞分裂素与生长素的E、F组合，其分化生长的状况明显更好。所以，在培养基中同时加入适量的细胞分裂素和生长素，对植株的生长分化有明显的促进作用。 2.3激素的浓度对蓝莓芽组织培养的影响 本节将蓝莓嫩芽培养瓶分为12个批次，平均分配给2个对照组：甲组6个批次全部添加浓度为0.05的NAA，然后向其中添加不等量的BA，浓度分别为0/0.1/0.3/0.5/0.8/1.0 ；乙组6个批次的处理方式与甲组类似，所有培养瓶中均添加浓度为0.5的BA，然后按照
有机蓝莓生产技术操作规程
宜春蓝玉有机农业开发有限公司 宜春蓝玉有机蓝莓生产技术操作规程 有机蓝莓生产技术规程规 程
本标准规定了蓝莓生产技术操作规程的建园、土肥水管理、整形修剪、病虫害防治、其他管理及采收、包装、运输、贮藏。 2 规范性引用文件 GB19630[1].1有机产品第一部分：生产 3选地 选择远离“工业三废”污染的区域，其环境条件应符合有机食品产地环境技术条件（GB/T19630）的要求。生产场地应清洁卫生，地势平坦，排灌方便，土质疏松、肥沃，土层深厚，富含有机质，地下水洁净、充足的地块进行生产。 3.1 隔离措施 有机果园设立宽10米的隔离带，与周围常规作物区别开。水源采用单独的有机果园专用水源，不能与周围常规作物混用，同时隔离带周围要有明显的沟渠或拢地，以防止周围常规作物雨水流入到有机果园。 3.2 整地 土壤耕翻平整。行向以南北向栽植为宜，不规则丘陵地可沿等高线栽植。根据灌丛大小确定株行距。高丛蓝莓品种为2.0m～2.5m×1.0m～1.2m，半高丛蓝莓品种为1.5m～2.0m×0.8m～1.0m。挖50cm×50cm×50cm定植穴，或50cm×50cm定植沟。平地应起垄栽植。 3.3土壤改良 当土壤pH值大于5.5时，应施用200目～300目的硫磺粉进行调整。土壤有机质含量低于5%时，应通过添加适量草炭土（泥炭土）、松针、锯木屑和烂树皮等酸性基质进行改良。
选择适宜丘陵地、平地的北方高丛蓝莓、半高丛蓝莓品种。苗木质量选择株高50cm以上、主茎基部直径0.5cm以上的2年或3年生苗木建园。要求植株健壮、分枝多、根系发达、无病虫害和明显伤害。 3.5 栽植 大田栽植在4月中旬～5月上旬，温室栽植无时间限制，苗木枝芽萌动前栽植。栽植时将表土、基质与肥料混匀后回填，边回填边踩踏，防止后期苗木下沉。栽植时应避免苗木根系与肥料直接接触。栽植深度以苗木根茎部位与地面保持平行为宜。定植后及时浇透水。 3.6授粉树配置 按主栽品种与授粉品种2：1或3：1的比例配植授粉树。 4 土、肥、水管理 4.1 土壤管理 4.1.1 清耕法 根据田间杂草发生情况，在整个生长季节中耕3次～5次。中耕深度以5cm 左右为宜，行间不超过15cm。 4.1.2 生草法 行间种植三叶草、大豆等豆科作物，每年刈割三次，覆于行间。 4.1.3 覆草法 土壤覆盖物以松针、作物秸秆和锯末为主。覆盖物厚度在10㎝以上。 4.2 施肥 4.2.1 原则
最新版蓝莓果汁饮料项目可行性研究报告
蓝莓果汁饮料项目可行性研究报告 蓝莓果汁饮料项目可行性研究报告
第一章总论 第一章总论 1.1 项目概要 1.1.1 项目单位基本情况 (1) 项目单位名称：某某饮料有限公司 (2) 企业所有制形式：有限责任公司 (3) 财务状况：2014 年公司总资产8922 万元，资产负债率42.6%，实现销售收入13875.68 万元，利润1237.89 万元，销售利 润率8.92%。经营状况良好。银行信用等级为 A 级。 1.1.2 项目建设内容 项目名称：某某公司蓝莓浓缩果汁饮料项目 项目说明：本项目可行性分析报告书所涉及的，是以生长在北大 兴安岭原始森林中的野生蓝莓果实为主要原料，采用生物工程技术和现 代饮料工业化方法生产的无菌大袋200KG包装野生蓝莓浓缩果汁和PET 瓶500ml 包装野生蓝莓果汁饮料项目的投资可行性分析。 项目性质：新建 建设地点：某某市农业科技示范基地 建设规模：年产1600 吨野生蓝莓浆果浓缩果汁，年产量10000 吨野生蓝莓果汁饮料（PET瓶）。 主要建设内容： (1) 拟建一条每小时处理10 吨蓝莓野果原料的浓缩果汁生产线； (2) 拟建一条每小时生产能力6000PET 瓶野生蓝莓果汁饮料的生产线；
蓝莓果汁饮料项目可行性研究报告 （3）生产线配套方案，冷库等。 1.1.3 项目建设方案 技术来源及先进性：某某饮料有限公司是集优质水果原料采集、 加工、销售于一体的科技型农业产业化省级龙头企业，与东北农业 大学、内蒙古农业大学、北京农业大学、等多家科研院所建立广泛 的联系与合作，在水果压榨方面取得了一批重大成果。在野生蓝莓果汁及饮料的生产中，采用生物工程高新技术和现代饮料工业化方法。本项目依托公司本身的技术力量，及各科研院所对产品生产的技术支 撑，其加工工艺、设备工艺处于国际领先水平。 某某工业协会的下属单位——某某工业信息咨询中心技术工程部可 为本投资项目提供建厂技术方案、生产工艺、生产线配套方案设计、成 套设备供应及其安装、调试、指导试生产、技术培训等交钥匙工程一体 化服务。 该项目如果由某某工业信息咨询中心技术工程部实施并正式投产 后，某某工业协会可以同生产企业签定该产品的“某某工业协会监制” 的服务协议，以提高该企业产品在国内外果汁和饮料市场中的权威性。 项目进度安排： 1、可行性分析阶段。（计划20 天内完成） 撰写项目可行性分析报告书。 2、建厂设计阶段。（计划在30 天内完成） 确定配方、工艺路线、技术参数； 根据以上数据，完成生产流程的物料平衡计算； 根据物料平衡参数，完成生产线设备配套方案和设备清单； 根据生产线流程和设备清单，完成设备管线连接图；
蓝莓栽培管理技术
蓝莓栽培管理技术 1、土壤管理技术 蓝莓根系分布较浅，而且纤细，没有根毛，因此要求加强土壤管理以达到适合蓝莓生长所需的理想土壤条件。 土壤管理的核心是通过一系列栽培措施消除限制蓝莓生长的各种障碍因子，主要包括：土壤有机质低（不足5%）、土壤酸度不够（PH大于5）、土壤结构性差（板结或漏水漏肥等）、土壤有效养分不足且不平衡、土壤微生物不丰富等。 通过松土、穴改或槽改、压绿肥、床面覆盖等可提高蓝莓根系土壤有机质，改良土壤结构。当土壤PH值大于5.5时，需施硫磺粉、草炭、松针等调酸，施用量根据土壤PH值高低确定，从而为蓝莓根系发育创造良好的土壤条件。 2、肥料管理技术 2.1蓝莓植物需肥特点： 从整个树体营养水平分析，蓝莓为寡营养植物，与其他果树相比，体内N、P、K、Ca、Mg含量低，由于蓝莓根系分布较浅，而且纤细，没有根毛，所以施肥不当极易引起根系与树体的伤害。蓝莓的另一特点是喜铵态氮果树，对土壤中的铵态氮比硝态氮有较强的吸收能力。蓝莓对氯很敏感，极易引起过量中毒，因此选择肥料种类时不要选用含氯的肥料，如氯化铵、氯化钾等。 2.2蓝莓种植适宜肥料种类： ⑴化肥与有机肥相比，蓝莓更适合营养齐全、微生物丰富、盐分低的有机肥。如：发酵鸡粪、猪粪、牛粪、各种饼肥、骨粉等有机肥。 ⑵蓝莓种植适宜的化学肥料主要有： 硫铵、二铵、硫酸钾、过磷酸钙、重过磷酸钙、各种微量元素肥料等 碳铵（碱性）、硝铵（硝态氮）、氯化铵（含氯）、尿素、氯化钾（含氯）等不适合蓝莓种植。 化肥种类多，蓝莓对不同种类的化肥的反应因土壤类型及肥力高低相差很大。 氮肥：施肥试验表明，随着氮肥施入量增加，产量有下降趋势，果个变小，果实成熟期延迟，而且越冬抽条严重。因此、应因土科学合理施用氮肥。 磷肥：长白山区的非农田土壤往往缺磷，增施磷肥增产效果显著。但当土壤中磷素含量较高时（前茬旱田），增施磷肥不但不能增加蓝莓产量反而延迟果实成熟。 钾肥：钾肥对蓝莓增产显著，而且提早成熟，提高品质，增强抗逆性。但过量无增产作用反而使果实变小，越冬受害严重，并且导致缺镁症发生。在大多数土壤类型上，蓝莓适宜施钾量为硫酸钾40kg/公顷。 2.3施肥量： 蓝莓过量施肥极易造成树体伤害甚至整株死亡。因此，施肥量的确定要慎重，要视土壤肥力及树体营养状况而定。对不同蓝莓产区、不同品种，应根据多年生产试验及研究结果，通过叶片分析技术和土壤分析技术，制定出蓝莓施肥指标体系，科学用于生产，从而避免习惯施肥与盲目施肥。 2.4施肥方式及时期： 高丛蓝莓可采用沟施，深度以10～15cm为宜。矮丛蓝莓成园后连成片，以撒施为主。土壤施肥时期一般是在早春萌芽前进行，可分2次施入，在浆果转熟期再施1次。 2.5蓝莓常见的营养缺素症 缺铁失绿症：是蓝莓常见的一种营养失调症。其主要症状是叶脉间失绿，严重时叶脉也失绿，新梢上部叶片症状较重。引起缺铁失绿的主要原因有土壤pH值过高，石灰性土壤，有机质含量不足等。最有效的方法是施用硫酸亚铁、酸性肥料硫酸铵，若结合土壤改良掺入酸性草炭则效果更好。叶面喷施整合铁0.1%-0.3%，效果较好。 缺镁症：浆果成熟期叶缘和叶脉间失绿，主要出现在生长迅速的新梢老叶上，以后失绿部位变黄，最后呈红色。缺镁症可对土壤施氧化镁或硫酸镁来矫治。 缺硼症：其症状是芽非正常开绽，萌发后几周顶芽枯萎，变暗棕色，最后顶端枯死。引起缺硼症的主要原因是土壤水分不足。充分灌水，叶面喷施0.3%～0.5%硼砂溶液即可矫治。 3、水分管理技术： 3.1蓝莓需水特点：
蓝莓种植技术
蓝莓种植技术
蓝莓栽培技术 1、植苗 一般都在春季种植，秋季种植冬季管理不当容易遭受冻害。春季种植通常在3～4月份，苗木新芽萌动前栽植。一般选用2～3年生的苗木，这样的苗木成活率较高。苗木的高度一般在30cm以上，但因品种而异。判断苗木优劣的指标不仅仅是高度，更取决于根系和枝条的粗壮程度。优质苗木的根系发达，钵苗其根系基本长满钵内，而且地上枝条粗壮发达，有基生枝出现。另外，除主栽品种以外，还要选用1～2个以上品种苗木做授粉树，以提高产量。植苗方法定植时将苗木从钵内取出，观察根系的状况，如果根系已经密集网络于底部，则需要用刀将底部轻轻切开呈十字形，用手把中心部的土壤取出并将根系理顺。如果是裸根苗，则需要将根系展开后栽植。栽植苗木时，需要在事先准备好的定植穴或种植床上挖深度为10～15cm、幅度20～30cm的小坑。在小坑内填入一些湿的酸性草炭土或事先配制好的种植土，然后再将苗栽入并将根系展开，让添进的混合草炭土等包围在苗根周围，并向上轻轻提苗1次，以便使根系充分与种植土壤结合，最后覆土至与地面相平。 2、地表覆盖 定植后，就地就近取材在栽植穴的表面覆上一层稻草、腐叶土、树皮、木屑等有机物。地表覆盖具有可以调节地温、防止地表水分
以上，每m3施用硫磺粉1kg可降低草炭pH值到4.0以下，种植时要均匀拌入穴内。其他有机质指粉碎后的作物秸秆、稻壳、麦壳、树叶、锯屑等，经发酵后可作为种植蓝莓的较好资材。如果现在土壤的pH值在7.0以上，种植蓝莓的难度较大，需加大施用硫磺粉和添加土壤有机质来解决，具体方案需专业人员会诊后另行决定。如果土壤的pH值大于7.5，同时灌溉用水的pH值也大于7.5，这样的地块种植蓝莓容易失败，最好不选用种植蓝莓。 4、土壤酸度调整 种植后第2年，有些地块可能会出现土壤pH值上升的情况，需要定期的检测土壤pH值的变化。如果土壤的pH值上升，需要施用硫磺粉进行调整。硫磺粉可结合春季施肥施入。 5、栽植株数 我国种植蓝莓的行间距离因品种、土地状况和管理方式而异。一般高丛蓝莓的行距在 2.0～2.5m，如果考虑到机械作业可扩大到2.5～3.0m。兔眼蓝莓的株行距较北高丛蓝莓大一些，在2.5～3.0m。即使是植株较小的矮丛蓝莓和一些半高丛、南高丛蓝莓的种植行距也要保持在2.0m的行距，这样便于作业管理。一般在较贫瘠的土壤上种植株距可小一些，在较肥沃的土壤上可大一些。北高丛蓝莓的株距一般在1.0～2.0m，南高丛和半高丛蓝莓的株距在1.0～1.5m，兔眼蓝莓的株距在1.5～2.5m左右。 6、施肥
组织培养技术汇总
农高会组培生产汇总 本次农高会参展组培苗的企业有21家。主要有陕西（12家）、山东（7家）、天津（1家）、宁夏（1家）。其中苹果组培有8家、樱桃7家、草莓2家、猕猴桃1家、蓝莓1家、花卉1家、十月光辉1家、马铃薯1家。 一、组培苗企业 （一）陕西 1.陕西华圣现代农业集团种苗 （1）品种：苹果砧木B9、T337 （2）瓶苗长势（分化）：T337分化2-3,一瓶4株，愈伤组织大、瓶底愈伤发黑、叶片大但顶尖叶片干枯、茎干粗壮，拔高不明显（如图）。 （3）穴盘苗：穴盘50孔，深度8cm左右；基质：草炭 长势：苗子整齐一致，叶片大，高度8cm。 （4）年产量：20万株（压条繁殖为主） （5）组培苗单价：根据等级不同，价格不一样，2-5元/株。
（6）技术沟通：未见到组培技术人员 2.海升现代农业有限公司 （1）品种：苹果砧木T337、樱桃、草莓 （2）瓶苗长势（分化）：樱桃分化3,，愈伤组织小、苗子健壮，拔高明显（如图）。 （3）穴盘苗：穴盘：樱桃：50孔，草莓：32孔，穴盘无纹隙，基质：珍珠岩+草炭 长势：樱桃：须根多，盘根紧致，叶片大、绿，高度20cm，长势好（如图）。 草莓：叶片大，叶色正常，苗子长势旺。 樱桃草莓 （4）年产量：未说
（5）组培苗单价：樱桃16元/株，苹果砧木不卖 （6）技术沟通：未见到组培技术人员 3.陕西果业（新世界）种苗集团有限公司 （1）品种：苹果砧木T337、M26、樱桃吉塞拉6号（12号）、猕猴桃、花椒（根据订单） （2）瓶苗长势（分化）：苹果分化2，每瓶15株，愈伤组织小、苗子健壮，高（如图）。 猕猴桃：分化3，叶片绿，苗子粗壮，但拔高不明显（如图）。 T337 猕猴桃 生根：M26根系10条左右，根长2-3cm，苗子茎干粗壮，拔高不明显，25-30天可驯化（如图）。
年产5000吨蓝莓果汁工厂设计
年产15000吨蓝莓果汁工厂设计说明书 指导老师：高爱武 组长：吴琼 组员：祁晓霞杨靓王丹李瑞芬赵沛帆 班级：09级食项一班 日期：2012年6月 摘要：随着我国改革开放的不断深入，在当前国民经济稳定快速发展的形势下，人民消费水平不断提高，为饮料行业的发展创造了一个良好的环境。本论文设计主要是对中国的饮料行业进行了调查和分析，确定了项目的选址、设计和实施方案。本次项目是一个年产15000吨的蓝莓饮料项目，可以直接扩大蓝莓饮料企业原有的市场，有利于开发新市场，促进了我国蓝莓市场的发展需求。本设计包括厂址选择报告、工艺设计、生产车间平面布置图、全厂的平面布置图等相关叙述。 前言 蓝莓的营养价值高于苹果、葡萄、橘子等水果，其果实除富含水果中常见的多种营养成分外，还含有花青素、类黄酮等抗氧化剂，属高氨基酸、高锌、高铁、高铜、高维生素的果品，堪称“世界水果之王”。在世界卫生组织公布的十大健康食品中，蓝莓是入选的水果之一，也被称为“人类五大健康食品之一”;在欧美、日本等发达国家，蓝莓也深受消费者的青睐。
蓝莓中含有的花青素对眼睛有良好的保健作用，能够缓解眼部疲劳。自2000年开始，美国教育部将蓝莓列为中小学生保护眼睛的营养配餐食品，要求每人每周至少食用一杯蓝莓鲜果或加工品;在日本，人们把蓝莓视为“聪明之果”，中、小学生已从昔日“每天一杯牛奶、提高一代人体质”，转为“每天一袋蓝莓、聪明一代脑”。而今，这股蓝莓的清香也渐渐飘向了中国。在上海一些餐饮机构，一瓶野生蓝莓饮品竟然能卖到38元，远远高于“大酒仓”的零售价，即使如此，蓝莓汁依然是宾客们优先选择饮品之一。 野生的蓝莓多生长在高寒的原始森林地区，这使得我国大兴安岭成为野生蓝莓的产区之一，在当地形成了以生产野生蓝莓及相关食品和饮品的产业链。新鲜野生蓝莓每公斤200多元的价格让普通消费者望而止步。而将蓝莓生产成饮料，价格大幅下降，中档的饮料价格让普通的消费者也都喝得起，这预示着在不久的将来，中国的“蓝莓时代”也将到来。 本次项目是一个年产15000吨的蓝莓饮料项目，可以直接扩大蓝莓饮料企业原有的市场，有利于开发新市场，促进我们蓝莓市场的发展需求。本设计包括厂址选择报告、工艺设计、生产车间平面布置图、全厂的平面布置图等相关叙述。 在编写中，参考了大量书籍和硕士论文，并吸收了大量知识，在此谨向有关编著者和指导老师表示诚挚的谢意。 参考书目及论文列于书后。 由于编者水平和经验所限，书中不足之处在所难免，敬请广大读