日本血吸虫感染小鼠血清中虫体核酸来源的实验研究

中国人兽共患病学报

Chi nese J o u rnal of Z oo no ses

2008,24(3)

文章编号:1002-2694(2008)03-0260-03

日本血吸虫感染小鼠血清中虫体核酸来源的实验研究

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许　静1,张惠琴1,骆　伟1,龚　唯1,时长军2,荣　荣2,夏超明1

摘　要:目的　探讨日本血吸虫感染小鼠血清中核酸的来源,为血吸虫病核酸诊断方法的早期诊断及疗效考核提供理论依据。方法　用PCR 法检测单、双性感染小鼠1w ～12w 血清中的特异的日本血吸虫DNA 片断。结果　在单性感染小鼠1w ～4w 的血清可通过PCR 扩增到特异性DNA 片段,感染小鼠5w 后的血清中则未能测出阳性结果;在双性感染小鼠组中,应用PCR 从1w ～12w 的血清中均可扩增到特异的阳性条带。结论　在日本血吸虫感染早期,小鼠血清中的核酸可能主要来自在体内移行的日本血吸虫童虫及虫体在发育过程中的代谢产物;在感染的急性期和慢性期,血清中的核酸则可能主要来自小鼠体内崩解死亡的虫卵组织。

关键词:日本血吸虫;核酸;PCR

中图分类号:R383.2　文献标识码:A

An exper imental study on the sour ce o f the par asit ic nucleic a cid in ser um of mice inf ected w ith Schist osoma j ap onicum

XU Jing ,ZHAN G Hui 2qin ,L UO Wei ,GON G Wei ,S HI Chang 2j un ,RON G Rong ,XIA Chao 2ming

(De pa rtment of P athogenic ,School of Medical ,Suzhou University ,S uz hou 215123,China )

ABSTRACT:To investigate the source of the pa rasitic nucleic acid in serum of mice infected with Schisto soma j a ponicum for t he sake of ea rly de tection of this inf ectio n ,PCR a ssay was used to de tect the pr ese nce of t he specific DNA f ragme nt in se r 2um of the inf ecte d mice during 1to 12weeks af ter single a nd dual infections with ce rcariae of S.ja ponicum.In sera of mice wit h single inf ec tio n t he specific DNA f ragment could be detected by PCR a mplification in sera of infected mice f ro m 1to 4weeks after inf ection ,but t hey disappear ed 5weeks afte r infection.In ca se of mice wit h dual inf ection ,t he specific positive bands as demonstra ted by PCR amplification could be detecte d f rom 1to 12wee ks afte r in f ection.These experimental re sults suggest that the nucleic acids in se rum of mice mainly come f ro m sc histosomula and epider mis tissues in t he ea rly inf ectious pe 2riod ,however ,in the ac ute a nd chronic stage s of inf ec tio n ,they essentially come f rom tissue s with broke n or dea d eggs of wor ms

KE Y W O RDS :Sc histosoma j a ponicum ;nucleic acid ;PCR

3江苏省“六大人才高峰”资助项目(62B 26) 通讯作者夏超明,zx z @ 作者单位苏州大学医学院寄生虫教研室,苏州　53;

苏州新力生物技术研究所,苏州

目前,日本血吸虫病仍然是一种危害严重的人兽共患寄生虫病,及时发现并控制传染源是有效阻断血吸虫病传播的重要措施,虽然目前已有多种免疫学诊断方法应用于血吸虫病的检测,但作为早期诊断及疗效考核的方法均不理想。国内外的很多学者都在致力于寻求一种灵敏、特异的早期诊断血吸虫病的方法,PCR 扩增技术成为当前的研究热点之一,目前已有应用PCR 法从曼氏血吸虫感染小鼠模型血清中检测到曼氏血吸虫特异性DNA 片断的报道〔122〕,尤其是本课题组已用PCR 法成功从日本血吸虫感染的家兔模型的外周血清中扩增出日本血吸虫特异性DNA 片断〔3〕,研究证明在动物模型的外周血清中存在血吸虫特异性的DN ,本文则在上述研究的基础上进一步探讨动物模型体内日本血吸虫特异的核酸物质的来源,为血吸虫病的早期诊断和

疗效考核提供理论依据。1　材料与方法

1.1　实验动物模型的建立　昆明小鼠40只,雌性,18～22g (购自苏州大学实验动物中心),阳性钉螺30只(购自无锡血吸虫病防治研究所),小鼠随机分为两组,组Ⅰ以单只钉螺逸出的尾蚴感染小鼠,每只小鼠感染(200±10)条尾蚴;组Ⅱ以多只钉螺逸出的尾蚴感染小鼠,每只小鼠感染(30±2)条尾蚴。1.2　血清的收集　小鼠自感染日本血吸虫尾蚴起,每周断尾采集小鼠外周血,静置离心取血清,收集

1w ～12w 血清。

62001:Email :s c m n si na .co m :1.21122.A