手性药物拆分技术研究进展_李根容

*基金项目:霍英东基金[98-9-8]、国家新药基金[96-7-8]与重庆市应用基础研究[01-3-6]及重庆药友研发项目[03-9-8]资助

手性药物拆分技术研究进展

*

李根容,李志良

(重庆大学化学化工学院,重庆400044)

[摘要] 对外消旋体进行拆分是获得手性药物的重要方法。综述了手性拆分方法及其分类,分别为结晶拆分法,包括直接结晶法、形成非对映体的结晶法、组合拆分法等;复合和包合拆分法,包括包结拆分法;色谱拆分法等,并结合一些药物对新近发展起来的手性药物拆分技术做了介绍。 [关键词] 手性拆分;异构体;消旋体;复合和包结拆分;色谱拆分

[中图分类号]R91415;R927 [文献标识码]A [文章编号]1003-3734(2005)08-0969-06

Advances in the chiral drug resolutions

LI Gen -rong,LI Zh-i liang

(College o f Chemistry and Chemical Engineering ,Chongqing University ,Chongqing 400044,China )[Abstract ] Significant progresses in developing the techniques of chiral resolution offer possibilities in the preparation of ne w chiral compounds.This article revie ws the methodology and classification of raceme resolutions,including direct crystallization (spontaneous resolution,preferential crystallization,combinational resolution and converse resolution),inclusion resolution and c hromatography.The direct crystallization is currently the most popular due to its simplicity and easy manipulation.Ne w technologies using chromatographic resolution,combinational resolution and inclusion resolution may be expec ted to promote the development of more effective chiral drugs.

[Key words ] c hiral resolution;isomer;race me;complex and inclusion resolution;chromatographic resolution

手性是自然界的一种普遍现象,构成生物体的基本物质如氨基酸、糖类等都是手性分子。随着对手性分子认识的不断深入,人们对单一手性物质的

需求量越来越大,对其纯度的要求也越来越高[1]

。单一手性物质的获得方法大致有3种:1手性源合成法,最常用但合成步骤繁多,产物成本高昂。o不对称合成法,不对称化学合成所得产物的旋光纯度对于多数应用仍不够高;生物的不对称合成具有很高的选择性,反应条件温和,但对底物要求高、反应慢、产物的分离困难,因而在应用上也受到一定的限制。?外消旋体拆分法,成本较低,应用广泛,大约有65%的非天然手性药物是由外消旋体或中间产物拆分得到的[2]

。笔者据相关报道,总结了外消旋体拆分的一些相关技术。1 手性药物的结晶拆分方法

用结晶的方式进行外消旋体的分离,是手性化合物拆分的最常用也是最主要的方法。按结晶过程

的不同,有直接结晶法和间接结晶法。111 直接结晶法

11111 自发结晶拆分法(spontaneous resolution) 自

发结晶拆分是指当外消旋体在结晶的过程中,自发的形成聚集体。最早巴士德报道的拆分方法就是这种方法。自发结晶法的先决条件是外消旋体必须能形成聚集体,但实际情况下,大概只有5%~10%的有机化合物能形成聚集体。为了能增加生成这种聚集体的可能性,可将非聚集体的化合物通过衍生化的方法转变成具有聚集体性质的化合物。

如将A -苯乙醇和3,5-二硝基苯甲酸形成酯后可得到聚集体性质的固体从而进行拆分,见图1

。

图1 A -苯乙醇聚集体的形成

)

969)

11112 优先结晶法(preferential crystallization) 优先结晶方法也称诱导结晶法,是在饱和或过饱和的外消旋体溶液中加入其中一个对映异构体的晶种,使该对映异构体稍稍过量而造成不对称环境,结晶就会按非平衡的过程进行。

优先结晶法是在巴士德的研究基础上发现的。文献最早报道的优先结晶法是用于肾上腺素的拆分。1934年,Duschinsky 第一次用该方法分离得到盐酸组氨酸,使人们认识到该方法的实用性[3]

。但直到1963年工业化学家Secor 对该方法进行综述后,才引起人们的关注并逐渐发展成为众所周知的科学实用方法[4]

。

应当指出的是,优先结晶方法仅适用于拆分能形成聚集体的外消旋体,而且该聚集体是稳定的结晶形式。换句话讲,假若该外消旋体可以是以聚集物或外消旋化合物的形式存在,但在某一定的温度范围内,只可以用聚集物的形式结晶出来,而不是产生外消旋化合物的结晶。例如盐酸组氨酸在45e 以上温度进行的优先结晶拆分。而对减肥药物芬氟拉明(fenfluramine)及其前体去乙基芬氟拉明的拆分研究说明了优先结晶拆分有局限性,可用其他方法

补充,如文献报道的半量结晶法[5]

。

R:)CH 2CH 3 芬氟拉明)H 去乙基芬氟拉明

聚集体通常在一定的温度范围内是稳定的,一旦超过该温度范围则可能形成聚集体的亚稳态的形式。例如外消旋的3-(3-氯苯基)-3-羟基丙酸,可以形成热力学稳定的聚集体的形式,但在溶剂中结晶时总是生成亚稳态的外消旋化合物,难以用优先结

晶法进行结晶。

外消旋的3-(3-氯苯基)-3-羟基丙酸

优先结晶法是一种高效、简单而又快捷的拆分方法,晶种的加入造成2个对映异构体具有不同的结晶速率是该动态过程控制的关键。得到晶体后,反复的重结晶可进一步提高产物的光学纯度。如抗肿瘤辅助治疗药物(6R ,S )-亚叶酸钙[6]

,本课题组根据该物质的结构,采用优先结晶法,利用三步重结晶,得到了收率和含量均较高的且具药物活性的(6S )-亚叶酸钙。实际生产中,常利用优先结晶法进行循环往复的结晶分离。如将这一方法用于氯霉素的中间体D -苏型-对硝基苯基-2-氨基-1,3-

丙二醇的拆分。

R:)COCH 2Cl 2 氯霉素

)H D -苏型-对硝基苯基-2-氨基-1,3-丙二醇

利用循环优先结晶方法进行拆分的实例:如抗高血压药物L -甲基多巴的拆分[4]

。其他应用优先

结晶方法的例子还有氢化苯偶因的拆分等[7]

。

L -甲基多巴

优先拆分法效率的高低可用拆分指数(resolution index,RI)来进行评价。拆分指数定义为:所得拆分产物的质量(以纯对映异构体计算W 产物,对映体纯度记为ep )与该对映异构体最初过量

(E 过量)时的质量比[3]

。

RI =[W 产物@ep -W 晶种]P E 过量

(1)

影响优先结晶拆分的因素有多种:外消旋体的成盐形式、溶解度比(A X =S R P S A ,S R 和S A 分别为外消旋体和一种对映异构体的溶解度)、搅拌速度、晶种的颗粒大小和组成等。

11113 逆向结晶法 逆向结晶法是在外消旋体的

饱和溶液中加入可溶性某一种构型的异构体[如(R )-异构体],添加的(R )-异构体就会吸附到外消旋溶液中的同种构型异构体结晶的表面,从而抑制了这种异构体结晶的继续生长,而外消旋体溶液中相反构型的(S )-异构体结晶速度就会加快,从而形成结晶析出。例如在外消旋的酒石酸钠铵盐的水溶液中溶入少量的(S )-(-)-苹果酸钠铵或(S )-(-)-天冬酰胺时,可从溶液中结晶得到(R ,R )-(+)-酒石酸钠铵。

在结晶法拆分过程中,若将优先结晶法中/加入某种单一对映异构体晶体可诱导相同构型结晶生长0的原理和逆向结晶中/加入另一个对映异构体溶液可抑制相同构型的对映异构体生长0的原理相结

合,可使结晶拆分的效率大大提高。

11114 外消旋体的不对称转化和结晶拆分 外消旋体的不对称转化有2种情况。一级不对称转化,这种转化常发生在非对映异构体之间。二级不对称转化指在平衡混合物中,其中一个对映异构体自发缓慢的结晶或加入纯对映异构体晶种结晶时,由于

)

970)

其结晶速度比平衡速度慢,则溶液中的平衡不断被打破,形成外消旋体的不对称转化和结晶拆分。这种情况又被称为/结晶诱导的不对称转化0,是将外消旋体转变为单一纯对映异构体。如外消旋体季铵盐的拆分;对甲氧基苯基苄酮在碱性条件下的转化;非甾体抗炎药萘普生等的不对称转化等[8]。

112通过形成非对映体的结晶法

利用外消旋体(dl A)的化学性质使其与某一光学活性试剂(拆分剂)(d B或l B)作用以生成2种非对映异构体的盐或其他复合产物,然后利用2种非对映异构体的盐的溶解度差异,将它们分离,最后再脱去拆分剂,便可以分别得到一种对映异构体。这是一种经典的应用最广的方法。适用于这类光学拆分方法的外消旋体有酸、碱、醇、酚、醛、酮、酰胺及氨基酸。

dl A+d B y d A#d B+l A#d B[3,8](2)另一个对拆分方法进行的重要改进是/相互拆分0(mutual resolution)的方法。这一新的方法中采用外消旋体[dl(?)-B]来代替实验中原有的光学活性体[(-)或(+)-B]作为拆分剂。这样拆分剂和待拆分的化合物都是外消旋体,拆分剂和待拆分的化合物之间相互进行拆分,同时形成4个非对映异构体d A#d B,d A#l B,l A#d B#和l A#l B。

使用拆分剂对外消旋体进行拆分在医药生产中应用广泛[8]。如用碱类化合物:生物碱、萜类化合物、氨基酸及其碱性的衍生物等来拆分酸和内酯;手性羧酸如酒石酸及其酰基衍生物、扁桃酸及其衍生物等来分别拆分外消旋的胺类化合物,有报道用四氢吡喃保护的扁桃酸THP MA来拆分抗心律失常药物美西律可得到光学纯度达99%e.e.(enantiomeric e xceed)的(R)和(S)2个对映体;用于保护后的氨基酸拆分的拆分试剂有番木鳖碱、喹啉、麻黄碱及酪氨酸酰肼等,未保护的氨基酸可直接用手性酸试剂进行拆分;含羟基的化合物可选择扁桃酸及其衍生物、Mosher酸、顺式-2-苯甲酰氨基环己烷羧酸、萘普生等;外消旋醛和酮的拆分也是先进行转化后再选择酒石酸及其衍生物、(R,R)-2,3-丁烷二醇、氨基酸酯、肼和N-(S)-二甲基-苯基亚砜胺等;用于拆分酸和酯的氨基酸及其衍生物如(S)-(+)-精氨酸、(S)-对羟基苯甘氨酸、L-苯丙氨酰胺等[3,9]。

113组合拆分

组合拆分(combinatorial resolution)是近年来报道的一种新方法,其原理为采用一组同一结构类型的手性衍生物的拆分剂家族(resolving agent family)代替单一的手性拆分剂进行外消旋化合物的拆分。这些拆分剂家族是以常用的手性拆分剂为原料经结构修饰得到的衍生物,也可以是含有不同取代基的某一类结构类型的化合物,如A-苯乙胺类拆分剂家族PE-I,PE-II和PE-III及邻氨基醇PG,通常用于酸性化合物的拆分;酒石酸类衍生物的拆分剂家族T和TA,对位取代的扁桃酸(M),N-取代的苯甘氨酸(PGA),邻位取代的苯丙二醇磷酸酯(P)等,通常用于碱性化合物的拆分,其中拆分剂家族P,PGA和M 还可以用于氨基醇类化合物的拆分[3,10],见图2

。

图2组合拆分中的部分拆分剂家族

这种组合拆分方法和前述的经典拆分方法比较,具有结晶速度快,收率高,纯度高等特点。实际操作时是将拆分底物与拆分剂家族以1B1的形式于同一溶剂中进行拆分。研究还发现,拆分剂家族也可以用含有消旋物的混合物进行拆分。

2复合拆分和包合拆分方法

在结晶拆分中,对于那些结构中不存在明显的可利用官能团时,结晶拆分方法的应用会受到一些限制,而新近发展起来的复合拆分和包合拆分可以解决这些问题。复合拆分和包合拆分是利用氢键或范德华力等化学的相互作用而产生的性质差异达到拆分的目的。但其本质仍属于结晶拆分法,也是化学拆分法方法之一。

211复合拆分方法

复合拆分适合具有P电子的外消旋的烯烃、芳香族化合物以及富有孤电子对的元素有机化合物如有机硫化物、有机砷化物、有机磷化物等的拆分。在拆分过程中,烯烃或芳香族化合物由于存在大P电子,能和含P电子的手性试剂形成电子转移复合物,或与手性有机金属配合物形成配位物,这些电子转移复合物和金属配位物具有非对映异构体的特点而易于被分离。有机硫、磷和砷的化合物由于这些元素的电子空轨道或含有的孤对电子,能与Le wis酸性或Lewis碱性的手性试剂形成复合物而被分离。212包合拆分方法

)

971

)

包合拆分法(inclusion resolution)是外消旋化合物拆分的一种新方法,是利用非共价键体系的相互作用而使外消旋体与手性拆分剂发生包结,再通过结晶方法将2个对映体分开。包合拆分的原理是利用拆分剂分子(主体分子)中存在的一些空穴,这些空穴能够允许一定形状和大小的被拆分分子(客体分子)包合在其中,形成非对映异构体的包合物来进行分离。这些具有空穴的主体分子与被拆分的客体分子在分子-分子体系层次产生手性匹配和选择。

包合物的形成主要有2种形式:一种是洞穴包合物(cavitates),另一种是笼状包合物(clathrates)。在洞穴包合物中,手性的底物(客体分子)部分或全部被主体分子中的手性洞穴包合着;而在笼状包合物中,客体分子被数个主体分子包合,形成笼状或隧道的形状。包合拆分形成的基本原理是利用构型不同的客体化合物与主体的空穴之间形成氢键和范德华力能力的差异,对其中一个对映异构体产生优先包合[3,12]。

213包结拆分方法

包结拆分方法(inclusion-based resolution)是近20年来新发展起来的一种拆分方法。最早是由日本的Toda教授发现和报道,Toda等采用氯化N-苄基辛可尼定作为包结主体在甲醇中首次成功地拆分了外消旋的联二萘酚(100%e.e.)。其基本原理是利用手性的主体化合物通过弱的分子间作用力,如氢键或分子间P-P作用力,选择性地与外消旋的客体化合物中的一个对映异构体形成稳定的超分子配合物,即包结复合物(inclusion comple x)析出,从而达到使对映异构体分离的目的。

包结配合物形成的原因是要求主体化合物(如联萘二酚或称为2,2c二羟基-1,1c-联萘、2,2c-二羟基-9, 9c-联二蒽)对客体化合物分子间形成有效的且较强的分子识别能力。由于包结拆分中使用的主体化合物是手性分子,被识别的客体化合物是一对手性对

映异构体,其识别过程是手性的识别过程[11,12]

。

2,2c-二羟基-1,1c-

联萘2,2c-二羟基-9,9c-联二蒽

近年,人们通过定量计算和X-衍射分析分子的手性识别现象在手性拆分剂的设计和筛选上进行了有益的尝试。组合方法在药物先导化合物的筛选中发挥着越来越重要的作用,并在化学研究中得到了广泛的应用。Wynberg等首次将组合方法应用于化学拆分中,他们设计了一系列芳香环取代的衍生物组成不同的拆分剂家族,如酒石酸类衍生物[11]。研究表明这类拆分剂的组合能以高收率和近于100% e.e的选择性与几乎所有试验的消旋体迅速地形成非对映体的结晶,结晶是以固定比例的拆分剂形成的混合物,这在拆分方法学上是一个重大的突破[13]。

3色谱拆分

用色谱方法进行手性化合物或手性药物的分离是近年来文献中报道得最多的方法,但绝大多数报道只是将此方法作为一种手段进行手性化合物的分离、分析和纯度测定[14],如气相色谱法[15]、高效液相色谱法、毛细管电泳色谱法等,下对几种重要的、发展较快的色谱拆分法进行叙述。

311液相色谱的制备拆分方法

制备规模的拆分方法通常是用于共价非对映异构体混合物的分离,在许多情况下,甚至通过快捷和简便的快速色谱技术(flash chromatography),用硅胶成功地拆分非对映异构体;而在这种情况下也只需将薄层层析(TLC)的展开系统稍做改动,就可以扩大到较大规模的柱层析拆分之中去。另外一种色谱拆分方法是基于以光学活性的高分子化合物为固定相的拆分方法。

制备拆分所用的试剂有天然吸附剂(如纤维素衍生物)、手性聚合物、基于蛋白质的固定相(如P-酸和P-碱固定相)和用于配位体交换的手性相等。31111纤维素衍射物纤维素也可用作填充材料来进行对映异构体的制备拆分。例如三醋酸纤维微晶,它是一个优良的光学活性固定相,对于易消旋的化合物效果较好。它具有层状排列的结构,当外消旋物伸入到层间的空穴中时,由于在不对称环境中的配合性不同而达到分离。又如,骨骼肌松弛药氯美扎酮(chlormezanone),以三醋酸纤维素为固定相,每批量可拆分250~700mg。

31112手性聚合物当手性的聚酰胺出现后,人们将其作为一种重要的色谱拆分试剂使用。例如用交联的手性聚酰胺柱拆分沙利度胺(thalidomide,反应停),以获得足够量的(R)-和(S)-异构体,用于药理和毒理研究。

31113P-酸和P-碱固定相随着人工合成的手性拆分试剂的出现,人们开始用手性拆分试剂附着在非手性的支持物上来进行消旋体的制备拆分。一是通过离子键将手性化合物(如D-苯甘氨酸的二硝基

)

972 )

苯甲酰衍生物)结合到硅胶上,例如苯二氮类镇静催眠药奥沙西泮(oxazepam)用3,5-二硝基苯甲酰基苯基甘氨酸(DNBPG)为拆分剂,可获得单一对映体。通过酰胺键将手性分子结合在硅胶上是另一途径

[3,16,17]

。另外还可通过醚键及胺基将手性拆分试

剂结合到硅胶上,如奥沙西泮新戊酸酯(oxazepa m pivalate)以DNB PG 为拆分剂,可以制备拆分获得单

一对映体。

奥沙西泮新戊酸酯

常用的还有分批洗脱色谱法(elusion batch chromatography),随着技术的进步,又出现了一些新的方法,如闭环循环色谱法(closed loop rec ycling chromatography,CLRC )和模拟流动床色谱法(simulated moving bed chromatography,SMB)等[18,19]

。

由于技术和其他原因,这些技术尚在完善中,在应用上也还仅限于比较贵重的手性药物的制备拆分

[3,23]

。

312 毛细管电泳拆分方法

毛细管电泳用于手性药物的拆分,是近年来发

展较快的技术,它具有高效、快速、简便的特点,可广泛适用于手性药物的研究领域。按毛细管电泳的操作模式可将其分为:毛细管区带电泳、胶束电动毛细管色谱、毛细管凝胶色谱和毛细管电色谱体系[21,22]

等,因已有文献详细[21]

介绍,在此不再详述。313 超(亚)临界流体色谱的制备拆分方法

超(亚)临界流体色谱的制备拆分方法(supercritical fluid chromatography ,SFC)是从20世纪80年代中期迅速发展起来的一项拆分技术,该方法采用超临界状态的二氧化碳做流动相[3,20,22]

。该方法在个别特殊领域里得到了一些应用,但由于对条件要求高,应用不是很广泛。4 结论及展望

结晶拆分法是目前工业上工艺成熟且应用广泛的方法,得到了比较普遍的运用,但存在操作烦琐、拆分收率低、拆分剂消耗大等缺点;组合拆分是近年来报道的一种新方法,Wynberg 首次将该方法引入,发现其具有拆分效率高和收率高等特点,但要推广应用则还需进一步研究。复合拆分和包合拆分方法将拆分领域进一步扩展了,它们具有操作简单、成本低廉、易于规模生产等特点,其应用将逐渐推广。其

中的包结拆分方法具有操作工艺简单、手性拆分试剂易回收、拆分收率高等优点,逐渐得到人们的关注;但其理论还不太成熟,有待进一步研究。色谱拆分法目前国内只用于小量拆分,国外的模拟流动床色谱的成功应用,使运用色谱拆分法实现手性物质的大量制备成为可能,特别是制备性色谱用于手性拆分将会在今后得到进一步推广;毛细管电泳用于手性药物的拆分,更是近年来发展较快的技术,它具有高效、快速、简便的特点,适用于手性药物的研究领域[23~25]

。随着对各种对映体拆分机制的更加深入的研究,手性拆分技术必将得到进一步完善。

[作者简介] 李根容(1979-),女,硕士研究生。

[通讯作者] 李志良(1962-),男,博士生导师。主要研究方向:化学生物信息及组学、药物合成与分析、分子模拟与设计。联系电话:(023)65106677,E -mail:zlli2662@https://www.wendangku.net/doc/5816385780.html, 。

[

参

考

文

献

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(接受日期:2005-02-01)

生物技术药物在血管炎中的应用

颜淑敏,曾小峰

(中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院风湿免疫科,北京100730) [摘要]血管炎常用糖皮质激素和免疫抑制剂治疗,但疗效不尽如人意。近年来,不断有新的生物技术药物应用于原发性血管炎,包括肿瘤坏死因子抑制剂、重组人干扰素A-2a、抗CD52抗体P抗CD4抗体、抗CD20抗体及抗CD18抗体。初步结果显示生物技术药物对难治性血管炎具有较好的疗效,是治疗血管炎的一个新的途径,但其确切疗效及不良反应有待今后大规模的多中心、随机对照试验证实。

[关键词]生物技术药物;血管炎;肿瘤坏死因子抑制剂;重组人干扰素A-2a

[中图分类号]R392111;R54315[文献标识码]A[文章编号]1003-3734(2005)08-0974-05

Clinical application of biologic agents in vasculitis

YAN Shu-min,ZENG Xiao-feng

(De p artment o f Rheumatology,Peking U nion Medical College Hospital, Peking Union Medical College,Chinese Academ y o f Medical Sciences,Beijing100730,China)

[Abstract]Despite the presence of relapse and treatment failure,the adjunctive therapy of corticosteroids to immunosuppressant has been conventionally used in the trea tment of vasculitis,significant advances have been made in the field of biologic agents used in the treatment of vasculitis over the past decade.Such biologic agents include ant-i tumor necrosis factor agents,interferon alfa-2a,ant-i CD52antibody P ant-i C D4antibody,ant-i CD20antibody and ant-i CD18antibody.Preliminary studies have sho wn some promising results.Ho wever,further clinical studies are required to evaluate their efficac y and long-term safety to achieve the full potential of vasculitis therapy.

[Key words]biologic agents;vasculitis;ant-i tumor necrosis factor agents;interferon alfa-2a

血管炎是一组以血管的炎症与破坏为主要病理改变的异质性疾病,具体病理机制尚不清楚。目前认为,免疫机制如免疫细胞之间、淋巴细胞与内皮细胞之间以及细胞因子和黏附分子之间的相互作用在血管炎的发病中起重要作用,为生物技术药物在血管炎的应用提供了依据。生物技术药物作用的理论基础是针对免疫应答反应中某主要分子(环节)进行抑制从而阻断免疫反应的进行。本文就目前生物技术药物在血管炎中的应用做一叙述。

1肿瘤坏死因子(TNF)抑制剂

研究表明,TNF在血管炎发病中起着重要的作用。包括:在缺乏TNF时肉芽肿的形成受抑制[1];韦格纳肉芽肿(WG)患者外周血单个核细胞中TNF 基因转录增加[2],CD4+T细胞TNF水平增高[3];活

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手性分子的拆分技术

手性分子的拆分技术 Document serial number【LGGKGB-LGG98YT-LGGT8CB-LGUT-

手性分子的拆分技术 郝婷玉 57 15级材料工程 摘要：对外消旋体实施拆分是获得手性物质的重要途径。本文综述了外消旋体的拆分方法，主要有直接结晶拆分法、化学拆分法、动力学拆分法、色谱拆分法( 含毛细管电泳法) 和手性膜拆分法等五大类。其中, 包括目前作为手性拆分主要方法的色谱技术在内的前 4 类方法, 由于批处理能力小、工业放大成本高 ,不适合大规模生产 ; 相反,膜分离技术具有能耗低、易于连续操作等优点 ,被普遍认为是进行大规模手性拆分非常有潜力的方法之一,具有良好的应用前景。 关键词：手性分子；拆分；对映体；外消旋化合物 手性是自然界存在的一种普遍现象, 在药物化学领域尤为突出 ,已知药物中有 30 %～ 40 %是手性的。手性是生物体系的一个基本特征, 很多内源性大分子物质,如酶、蛋白、核酸、糖, 以及各种载体、受体等都具有手性特征。此外，手性还在医药、食品添加剂、杀虫剂、昆虫性信息素、香料和材料等领域有着深刻影响。特别是在医药行业，手性药物对映体通过与体内大分子的立体选择性结合, 产生不同的吸收、分布、代谢和排泄过程, 可能具有不同的药理毒理作用。随着医药行业对手性单体需求量的增加和对药理的探究，如何获得高纯度手性单体已成为一个令人困扰的问题。因此 ,手性药物的分离分析就显得尤为重要。随着对手性分子认识的不断深入，人们对单一手性物质的需求量越来越大，对其纯度的要求也越来越高。 单一手性物质的获得方法大致有以下三种：（1）手性源合成法：是以手性物质为原料合成其它手性化合物，这是最常用的方法。但由于天然手性物质的种类有限，要合成多种多样的目的产物会遇到很大困难，而且合成路线步骤繁多，也使得产物成本十分高昂。（2）不对称合成法：是在催化剂或酶的作用下合成得到过量的单一对映体化合物的方法。化学不对称合成高旋光收率的反应仍然有限，即使如此，所得产物的旋光纯度对于多

手性药物拆分的研究进展

手性药物拆分的研究进展 许多药物具有光学活性(opitical activeity)。一般显示光学活性的药物分子，其立体结构必定是手性(chirality)的，即具有不对称性。手性是指其分子立体结构和它的镜像彼此不能重合。互为镜像关系而又不能重合的一对分子结构称为对映体(enantiomer)。虽然对映异构体药物的理化性质基本相同，但由于药物分子所作用的受体或靶位是由氨基酸、核苷、膜等组成的手性蛋白质和核酸大分子等，后者对与之结合的药物分子的空间立体构型有一定的要求。因此，对映异构体在动物体内往往呈现出药效学和药动学方面的差异。鉴于此，美国食品药品监督管理局规定，今后研制具有不对称中心的药物，必须给出手性拆分结果，欧盟也提出了相应的要求。因此，手性拆分已成为药理学研究和制药工业迫切需要解决的问题。 目前，利用酶法、超临界流体色谱(SFC)法、化学法、高效液相色谱(HPLC)法、气相色谱(GC)法、毛细管电泳(capillary electrophoreisis，CE)法和分子烙印法拆分对映体，已成为新药研究和分析化学领域的重要课题。笔者在本文综述了近年来利用上述方法拆分手性药物的研究进展。 1酶法 酶的活性中心是一个不对称结构，这种结构有利于识别消旋体。在一定条件下，酶只能催化消旋体中的一个对映体发生反应而成为不同的化合物，从而使两个对映体分开。该法拆分手性药物已有较久的历史，反应产物的对映过剩百分率可达100％。酶催化的反应大多在温和的条件下进行，温度通常在0～50℃，pH 值接近7.0。由于酶无毒、易降解、不会造成环境污染，适于大规模生产。酶固定化技术、多相反应器等新技术的日趋成熟，大大促进了酶拆分技术的发展。脂肪酶、酯酶、蛋白酶、转氨酶等多种酶已用于外消旋体的拆分。脂肪酶是最早用于手性药物拆分的一类酶，是一类特殊的酯键水解酶，具有高度的选择性和立体专一性，反应条件温和，副反应少，适用于催化非水相递质中的化学反应，在B 一受体阻滞药、非甾体类抗炎药和其他多种药物的手性拆分中都有广泛的应用。意大利的Batlistel等用固定于载体Amberlite AD-7上的脂肪酶对萘普生的乙氧基乙酯进行酶法水解拆分，对温度、底物浓度和产物抑制等进行了研究，最后使用500 mL的柱式反应器，在连续进行了1200h的反应后，得到了l8kg的光学纯S-萘普生，且酶活性几乎无损失。另外，酯酶具有很高的工业价值，其应用前景也极为广阔。Jiaxin等利用pseudomaonas cepacia脂肪酶拆分了一类酰基取代的1．环己烯衍生物，通过酶催化酯交换反应，得到产率较高的光学纯化合物，且提供了反应过程监测方法。这种方法可推广到该类化合物系列衍生物的合成与拆分。 2 SFC法 根据手性选择剂种类不同，该分离方式主要包括氨基酸和酰氨类手性固定相、Prikle型手性固定相、环糊精型键合固定相如聚甲基异丁烯酯等。由于SFC 法尚处于发展阶段，各种参(如温度、压力、流动相的组成和密度等) 对分离度的影响机制还未完全清楚。SFC法具有简单、高效、易于变换操作条件等优点，已成为与HPLC法和GC法互补的拆分方法，因其具有独特的优越性，应用前景极为广阔。Nozal等用Chiralpak AD柱和Chiralcel OD柱在SFC条件下拆分了驱肠蠕虫药阿苯唑亚砜化合物，并研究了甲醇、乙醇、乙丙醇及乙腈等有机溶剂对立体构型的影响。结果表明，在以Chiralpak AD柱为固定相时，用2丙醇可以获得最好的拆分效果；而在Chiralcel OD柱上用甲醇效果最好。

手性拆分液膜及固膜的研究进展

2008年第27卷第11期CHEMICAL INDUSTRY AND ENGINEERING PROGRESS ·1703· 化工进展 手性拆分液膜及固膜的研究进展 郑熙，胡小玲 （西北工业大学理学院应用化学系，陕西西安 710072） 摘要：对外消旋体的手性拆分是获得单一对映体的有效途径，在诸多拆分方法中，膜拆分法以其能耗低、易连续操作、易工业放大的优点受到广泛关注，被认为是最有前途的方法。本文将膜技术分为液膜和固膜两部分，分别介绍了两者在手性物质拆分中的研究进展，并总结了各种方法的优缺点，在此基础上提出了存在的问题和今后的研究方向。 关键词：手性拆分；外消旋体；液膜；固膜 中图分类号：TQ 028.8 文献标识码：A 文章编号：1000–6613（2008）11–1703–07 Development of membranes for chiral resolution ZHENG Xi，HU Xiaoling （Department of Chemistry，Northwestern Polytechnical University，Xi’an 710072，Shaanxi，China）Abstract：Raceme resolution is the main route to get pure enantiomer．Among all kinds of the resolution methods，membrane resolution methods are considered as the most promising ones because of their special advantages，such as low energy consumption，continuous operation mode and convenient up-scaling and so on．In this paper，we consider membrane as two parts：liquid membranes and solid membranes，and introduce their development in chiral resolution respectively．The advantages and disadvantages of each method are also summarized．Moreover，the problems which need to be resolved and the trend of development are discussed． Key words：chiral resolution；raceme；liquid membranes；solid membranes 手性是自然界的本质属性之一。作为生命活动重要基础的生物大分子，如蛋白质、多糖、核酸和酶等，几乎都是手性的，这些大分子在体内往往具有重要的生理功能[1]。分子药理学研究发现，含有手性因素的药物对映体在人体内的毒性反应、药理活性和代谢过程都存在着显著差异。通常情况下，只有一种对映体具有药理活性，而另一个对映体不仅无药理活性，还会产生一定副作用。例如，抗帕金森氏病药物只以左旋多巴（L-多巴）单一对映体的形式销售，因为D-多巴会使得体内粒细胞减少，白、红细胞丧失，导致患者易于感染，严重的甚至危及生命[2]。因此，早在1992年美国食品与药物管理局（FDA）就发布了手性药物指导原则，要求在新药的使用说明中必须明确量化各种对映异构体的药理活性和毒性反应。这一条例的颁发不仅大大降低了医疗事故，同时也使手性药物开发这一年销售额超过1000亿美元的新兴产业得到了健康有序的发展[3]。 目前，对外消旋体的拆分是获得单一对映体的最有效途径。据统计，大约有65%的非天然手性药物是通过外消旋体或中间产物的手性拆分得到的[4]。当前用于外消旋体拆分的方法主要包括结晶法、化学拆分法、生物酶法、萃取法、色谱法、手性膜拆分法等[5]。其中以色谱法为代表的前5类方法都存在着批处理量小、放大成本高、连续性差等缺点，难以达到大规模工业化生产的要求。而手性膜拆分法以其能耗低、易连续操作、易工业放大等优点引起了国内外研究学者的广泛关注。近年来，关于手性拆分液膜和手性拆分固膜的研究时有报 收稿日期：2008–05–07；修改稿日期：2008–06–09。 第一作者简介：郑熙（1984—），男，硕士，主要从事膜分离方面的研究。E–mail jmacaulay@https://www.wendangku.net/doc/5816385780.html,。

手性化合物的拆分技术

手性化合物的拆分技术研究进展 许多药物具有光学活性。一般显示光学活性的药物分子，其立体结构必定是手性的，即具有不对称性。手性是指其分子立体结构和它的镜像彼此不能重合。互为镜像关系而又不能重合的一对分子结构称为对映体。虽然对映异构体药物的理化性质基本相同，但由于药物分子所作用的受体或靶位是由氨基酸、核苷、膜等组成的手性蛋白质和核酸大分子等，后者对与之结合的药物分子的空间立体构型有一定的要求。因此，对映异构体在动物体内往往呈现出药效学和药动学方面的差异。鉴于此，美国食品药品监督管理局规定，今后研制具有不对称中心的药物，必须给出手性拆分结果，欧盟也提出了相应的要求。因此，手性拆分已成为药理学研究和制药工业迫切需要解决的问题。 1.生成非对映体拆分 此方法是利用外消旋混合物与手性试剂反应后生成有不同性质的非対映体，从而利用生成物的不同物理性质（溶解度、蒸汽压、结晶速率等）将其分离，再将分离后的物质分别还原成之前的対映体。 还可以使用拆分剂家族代替单一拆分剂进行拆分，所谓拆分剂家族是指有类似结构的2~3个手性剂拆分剂。组合拆分提高了产品收率和纯度。 2.动力学拆分 利用两个対映体和手性试剂发生反应的速度不一样，在混合物中添加不足量的手性试剂。一个対映体与手性试剂结合，从而得到纯的反应慢的対映体。可以分为经典动力学拆分和动态动力学拆分，动态动力学拆分是指将经典动力学拆分和底物消旋化相结合的拆分方法，理论产率可以达到100%。底物消旋化分为化学消旋化和酶消旋化，由于酶消旋化具有操作条件温和、产率高、副反应少等优点而具有广泛的工业应用价值[4]。 3.液膜拆分 将具有手性识别功能的物质溶解在溶剂中制备液膜，利用内外向间推动力（浓度差、pH 差等）使待分离物中的某种物质得到富集。液膜分离方法又分为本体液膜、乳化液膜、支撑液膜3种类型。 4.固体膜拆分 此方法是基于対映体间亲和力的差异，利用推动力（浓度差、压力差、电势差）进行分

手性药物的合成与拆分的研究进展

手性药物的合成与拆分的研究进展 手性是自然界的一种普遍现象，构成生物体的基本物质如氨基酸、糖类等都是手性分子。手性化合物具有两个异构体，它们如同实物和镜像的关系，通常叫做对映异构体。对映异构体很像人的左右手，它们看起来非常相似，但是不完全相同。 目前市场上销售的化学药物中，具有光学活性的手性药物约占全部化学药40% } 50%，药物的手性不同会表现出截然不同的生物、药理、毒理作用，服用对映体纯的手性药物不仅可以排除由于无效(不良)对映体所引起的毒副作用，还能减少药剂量和人体对无效对映体的代谢负担，对药物动力学及剂量有更好的控制，提高药物的专一性，因而具有十分广阔的市场前景和巨大的经济价值[Dl 1由天然产物中提取 天然产物的提取及半合成就是从天然存在的光活性化合物中获得，或以价廉易得的天然手性化合物氨基酸、菇烯、糖类、生物碱等为原料，经构型保留、构型转化或手性转换等反应，方便地合成新的手性化合物。如用乳酸可合成(R)一苯氧基丙酸类除草剂[}z}。天然存在的手性化合物通常只含一种对映体用它们作起始原料，经化学改造制备其它手性化合物，无需经过繁复的对映体拆分，利用其原有的手性中心，在分子的适当部位引进新的活性功能团，可以制成许多有用的手性化合物。 2手性合成 手性合成也叫不对称合成。一般是指在反应中生成的对映体或非对映体的量是不相等的。手J险合成是在催化剂和酶的作用下合成得到过量的单一对映体的方法。如利用氧化还原酶、合成酶、裂解酶等直接从前体化合物不对称合成各种结构复杂的手性醇、酮、醛、胺、酸、酉旨、酞胺等衍生物，以及各种含硫、磷、氮及金属的手性化合物和药物，其优点在于反应条件温和、选择性强、不良反应少、产率高、产品光学纯度高、无污染。 手性合成是获得手性药物最直接的方法。手J险合成包括从手性分子出发来合成目标手性产物或在手性底物的作用下将潜在手性化合物转变为含一个或多个手性中心的化合物，手性底物可以作为试剂、催化剂及助剂在不对称合成中使用。如Yamad等和Snamprogetti 等在微生物中发现了能催化产生N-氨甲酞基一D-氨基酸的海因酶( Hy-dantoinase)。海因酶用于工业生产D一苯甘氨酸和D一对轻基苯甘氨酸。D一苯甘氨酸和D一对轻基苯甘氨酸是生产重要的临床用药半合成内酞胺抗生素(氨节青霉素、轻氨节青霉素、氨节头炮霉素、轻氨节头炮霉素)的重要侧链，目前国际上每年的总产量接近SOOOto 3外消旋化合物的拆分 外消旋拆分法是在手性助剂的作用下，将外消旋体拆分为纯对映体。外消旋体拆分法是一种经典的分离方法，在工业生产中己有100多年的历史，目前仍是获得手性物质的有效方法之一。拆分是用物理化学或生物方法等将外消旋体分离成单一异构体，外消旋体拆分法又可分为结晶拆分法;化学拆分法;生物拆分法;色谱拆分法;膜拆分和泳技术。 3. 1结晶拆分法 3.1.1直接结晶法 结晶法是利用化合物的旋光异构体在一定的温度下，较外消旋体的溶解度小，易拆分的性质，在外消旋体的溶液中加入异构体中的一种(或两种)旋光异构体作为晶种，诱导与晶种相同的异构体优先(分别)析出，从而达到分离的目的。在。一甲基一L一多巴的工业生产中就是使两种对映体同时在溶液中结晶，而母液仍是外消旋的，把外消旋混合物的过饱和溶液通过含有各个对应晶种的两个结晶槽而达到拆分的目的[3]。结晶法的拆分效果一般都不太理想，但优点是不需要外加手性拆分试剂。若严格控制反应条件也能获得较纯的单一对应体。 3. 1. 2非对映体结晶法

毛细管电泳色谱在手性药物拆分中的应用

毛细管电泳色谱在手性药物拆分中的应用 摘要：毛细管电泳色谱法是手性药物拆分的重要方法之一，是一种高效、快速、简便的手性分离手段。该技术在药物对映体的拆分、定量方面发挥了重要作用。近年来，手性药物的毛细管电泳拆分技术得到快速发展，本文参阅了国内外相关文献，对毛细管电泳技术的手性拆分模式及主要手性选择剂作了简单介绍，并介绍了一些新的手性选择剂在手性药物拆分中的应用。 关键词：毛细管电泳手性试剂手性拆分

The Application of Capillary Electrophoresis in Chiral Drug Separation Abstract:Capillary Electrophoresis is one of the crucial methods in chiral drug analysis. It is an important method with highly efficient, rapid and convenient features. This technology plays a crucial role in enantiomeric separation and quantitative analysis. In recent years, the application of capillary electrophoresis in chiral drug analysis has been developing rapidly. According to recent references, this paper makes a brief discription about the application of capillary electrophoresis in chiral drug separation. Keywords: Capillary electrophoresis; Chiral reagent; Chiral separation; 引言 手性是自然界的基本属性，也是生命系统最重要的属性之一，比如蛋白质、氨基酸、多糖、核酸、酶等生命活动重要基础物质都是手性的。据统计，在研发1200种新药中，有820种是手性的，占世界新药开发的68 %以上[1]，而用于治疗的手性化合物中约88 %为外消旋体，作为单一对映体用药的只占手性药物的11%左右[2]。手性药物的立体结构与其生物活性有着密切的关系。药物在吸收、分布、代谢与排泄过程中，通过与体内大分子的不同立体结合，产生不同的药理作用和不良反应。如著名的“反应停事件”，沙利度胺只有( S ) -对映体具有致畸作用，( R ) -对映体具有镇静作用而无致畸作用。 目前，手性药物的拆分方法主要有经典结晶法、化学拆分法、生物拆分法、膜分离法、手性液-液拆分法和色谱法等[3, 4]，其中色谱法由于简便快捷、分离效

手性药物拆分技术的研究进展

手性药物拆分技术的研究进展 摘要:简要阐述了手性药物的世界销售市场。综述了目前实验室和工业生产领域手性药物的拆分方法,包括:结晶拆分法,化学拆分法,动力学拆分法,生物拆分法,色谱拆分法,手性萃取拆分法和膜拆分法等,并简要介绍了每种方法的应用情况及优缺点。 关键词:手性药物; 外消旋体; 手性拆分 自然界存在各种各样的手性现象,比如蛋白质、氨基酸、多糖、核酸、酶等生命活动重要基础物质,都是手性的。据统计,在研发的1200种新药中,有820种是手性的,占世界新药开发的68%以上[ 1 ]。美国FDA在1992年发布了手性药物指导原则,该原则要求各医药企业今后在新药研发上,必须明确量化每一对映异构体的药效作用和毒理作用,并且当两种异构体有明显不同作用时,必须以光学纯的药品形式上市。随后欧共体和日本也采取了相应的措施。此项措施大大促进了手性药物拆分技术的发展,手性药物的研究与开发,已经成为当今世界新药发展的重要方向和热点领域[ 2 ]。当前大多数药物是以外消旋体的形式出现,即药物里含有等量的左右两种对映体。但是近年来单一对映体药物市场每年以20%以上的速度增长。1993年全球100个热销药中,光学纯的药物仅仅占20%;然而到了1997年, 100个中就有50个是以单一对映体形式存在,手性药物已占到世界医药市场的半壁江山。在1993年,手性药物的全球销售额只有330亿美元;到了1996年,手性药物世界市场已增长到730亿美元; 2002年总销售额更是达到1720亿美元, 2010年可望超过2500亿美元[ 3～5 ]。广阔的应用前景和巨大的市场需求触发了更多的医药企业和学者探索更新更高效地获得单一手性化合物的方法。 不同的立体异构体在体内的药效学、药代动力学和毒理学性质不同,并表现出不同的治疗作用与不良反应,研究与开发手性药物是当今药物化学的发展趋势。随着合理药物设计思想的日益深入,化合物结构趋于复杂,手性药物出现的可能性越来越大;另一方面,用单一异构体代替临床应用的混旋体药物,实现手性转换,也是开发新药的途径之一[ 1 - 3 ]。1985～2004年上市的550个新化学合成药物中,有313个药物具有手性中心,其中以单一异构体上市的手性药物为167个,手性药物数量呈逐年上升趋势; 2005年世界药物的销售总额为6 020亿美元,而手性药物的销售总额为 2 250亿美元,占全球制药市场销售总额的37% , 2010年可望超过 5 000亿美元[ 4 - 6 ]。总之, 手性药物大量增长的时代已经来临,手性药物制备技术的发展亦日趋完善,这为以制备和生产手性药物为主要内涵的手性工业的建立和发展奠定了基础。 手性药物的制备技术由化学控制技术和生物控制技术两部分组成。手性药物的化学控制技术可分为普通化学合成、不对称合成和手性源合成3类;手性药物的生物控制技术包括天然物的提取分离技术和控制酶代谢技术。以前手性化合物为原料,经普通化学合成可得到外消旋体,再将外消旋体拆分制备手性药物中间体或手性药物,这是工业生产手性药物的主要方法。1985～2004年上市的58个含有一个手性中心的手性药物中,有27个手性药物是通过手性拆分法生产的[ 4 ]。 1结晶法拆分 结晶法拆分包括直接结晶法拆分( direct crys ta llization resolution )和非对映异构体拆分( dias te reom er crys tallization resolution) ,分别适用于外消旋混合物( conglom e rate)和外消旋化合物( racem ic compound)的拆分。在一种外消旋混合物的过饱和溶液中,直接加入某一对映体的晶种,即可得到一定量的该对映体,这种直接结晶的拆分方法仅适用于外消旋混合物,其应用几率不到10%。外消旋化合物较为常见,大约占所有外消旋体的90%。通过与非手性的酸或碱成盐可以使部分外消旋化合物转变为外消旋混合物,扩大直接结晶法拆分的应用范围。 对于外消旋化合物,可采用与另一手性化合物(即拆分剂, reso lving agent)形成非对映异

手性拆分进展

手性拆分技术进展

手性拆分技术进展 手性拆分(chial resolution)称光学拆分或外消旋体拆分(optical resolution)，为立体化学上，用以分离外消旋化合物成为两个不同的镜像异构的方法。近几十年在工业上应用很广，尤其在手性药物开发上，已逐渐成为新药发展重要方向和热点领域。当前，用于手性物质拆分的方法主要有：化学拆分法、毛细管电泳技术、色谱分析法、萃取拆分法、聚合膜拆分法。 一、化学拆分法 （一）晶种结晶法是在饱和或过饱和的外消旋体溶液中加入其中一个对映异构体的晶种, 使该对映异构体稍稍过量而造成不对称环境, 结晶就会按非平衡的过程进行。应当指出的是,优先结晶方法仅适用于拆分能形成聚集体的外消旋体, 而且该聚集体是稳定的结晶形式。换句话讲,假若该外消旋体可以是以聚集物或外消旋化合物的形式存在, 但在某一定的温度范围内,只可以用聚集物的形式结晶出来,而不是产生外消旋化合物的结晶。1934 年，Duschinsky【1】首次应用该方法实现了盐酸组氨酸的分离。 (二）外消旋体的不对称转换一对合成的外消旋体由于在非手性条件下物理、化学性质相同，普通的分离方法如蒸馏、重结晶等在这种情况下时无能为力的。因此要设法先将一对对映异构体变成非对映体，然后再借用二者物理、化学性质的区别，将他们分开，制纯，再分别将非对映异构体分解，得回两个纯的对映体。这种方法一般需要被拆分的分子中有一个易发生反应的基团，如羧酸、碱基等，然后让它们与一个纯的（+）或（-）光活性化合物反应，形成盐或酯，这样就形成了一对非对映异构体。如： 常用的光化学试剂有：光活性碱：奎宁、马钱子碱等 光活性酸：酒石酸、樟脑磺酸等 1853 年，Pastrure【2】对该种拆分方法进行了全面概括酸碱性的外消旋体的拆分方面具有明显的优势，但也存在一定的局限性拆分过程中使用的手性试剂是拆分成功与否的关键合适的拆分剂应具备以下条件: 1 、必须容易与外消旋体中的2、个对映体结合生成非对映异构体，经拆分后又容易实现原

手性拆分

手性拆分 手性拆分（Chiral resolution），亦称光学拆分（Optical resolution）或外消旋体拆分，为立体化学上，用以分离外消旋化合物成为两个不同的镜像异构物的方法。[1]为生产具有光学活性药物的重要工具。 与不对称合成法比较，手性拆分的缺点为尽有50％的产率。有时在拆分的同时将不需要的对映异构体外消旋化，使其不断转化为需要的一个对映体，将拆分和外消旋化同时进行，从而使拆分的产率超过50％。这种方法称为动态动力学拆分。酮的烯醇化是常用的外消旋化反应。 拆分方法 结晶拆分法 晶种结晶法：也称优先结晶法。是向热的饱和或过饱和的外消旋溶液中，加入一种纯光活性异构体的晶种，创造出不对称的环境。冷却到一定的温度。这时稍微过量的与晶种相同的异构体就会优先结晶出来。滤去晶体后，在剩下的母液中再加入水和消旋体制成的热饱和溶液，再冷却到一定的温度。这时另一个稍微过剩的异构体就会结晶出来。理论上讲，如果原料能形成聚集体的外消旋体，那么将上述过程反复进行就可以将一对对映体转化为纯的光学异构体。 没有纯对映异构体晶种的情况下，有时用结构相似的手性化合物，甚至用非手性的化合物作晶种，也能成功进行拆分。 晶种结晶法是在路易·巴斯德的工作的基础上发现的。文献上最早报道的应用是肾上腺素的拆分。 路易·巴士德首先发现酒石酸有右旋和左旋现象，并于1849年第一次进行手性拆分以分离两者。直到1882年，他示范了借着引晶技术从过饱和的酒石酸钠铵溶液中生成d-晶体及l-晶体，相反的手性晶体将会排列成相反的形状。 直接结晶拆分法：也称自发结晶拆分法。这是巴斯德最早发现的拆分方法。是指外消旋体在平衡时结晶自发形成聚集体（conglomerate），两个对映体都自发析出等量的互为镜像的对映结晶。对映结晶可以人工分开。 外消旋美沙酮可以通过这种方法拆分。[2]以50g的dl-美沙酮为起始原料，溶于石油醚并浓缩，加入两个毫米大小d-和l-晶体，在40°C下搅拌125小时后便可得到两个大的d-和l-晶体，产率各为50％。

手性药物的结晶拆分方法

手性药物的结晶拆分方法－－直接结晶法－－－逆向结晶法 在优先结晶法中，通过加入不溶的添加物即晶种形成晶核，加快或促进与之晶型或立体构型相同的对映异构体结晶的生长。而逆向结晶法则是在外消旋体的饱和溶液中加入可溶性某一种构型的异构体[如(R)—异构体]，添加的(R)—异构体就会吸附到外消旋体溶液中的同种构型异构体结晶体的表面，从而抑制了这种异构体结晶的继续生长，而外消旋体溶液中相反构型的（S）—异构体结晶速度就会加快，从而形成结晶析出。例如在外消旋的酒石酸钠铵盐的水溶液中溶入少量的(S)—（—）—苹果酸钠铵或(S)—（—）—天冬酰胺时，可从溶液中结晶得到(R，R)—(十)—酒石酸钠铵。 逆向结晶中的添加物必须和溶液中的化合物在结构和构型上有相关之处。这样所添加的物质才能嵌入生长晶体的晶格中，取代其正常的晶格组分并能阻止该晶体的生长。逆向结晶是一种晶体生长的动力学现象，添加物的加入造成了结晶速度上的差别。由于逆向结晶是晶体生长的动力学的现象，因此当结晶时间无限制的延长下之，最终得到的仍是外消旋的晶体。从化合物的性质上来看，逆向结晶只能用于能形成聚集体的化合物。在结晶法的拆分过程中，若能将优先结晶法中“加入某种单—对映异构体晶体可诱导相同构型结晶生长”的原理和逆向结晶中“加入另一个对映异构体溶液可抑制相同构型的对映异构体生长”的原理相结合，可使结晶拆分的效率大大提高 手性药物的结晶拆分方法－－直接结晶法－－－优先结晶法 优先结晶方法(preferential crystallization)是在饱和或过饱和的外消旋体溶液中加入一个对映异构体的晶种，使该对映异构体稍稍过量因而造成不对称环境，结晶就会按非稍的过程进行，这样旋光性与该晶种相同的异构体就会从溶液中结晶出来。优先结晶方法是在巴士德的研究基础上发现的。文献最早报道的优先结晶方法是用于肾上腺素的拆分。1934年Duschinsky第一次用该方法分离得到盐酸组氨酸，使人们认识到该方法的实用性。但直到1963年工业化学家Secor对该方法进行综述后，才引起人们关注并逐渐发展成为众所周知的科学实用方法。Secor根据优先结晶法是聚集物的结晶的原理，可用其溶解度曲线的相图来进行结晶分离过程的分析。20世纪60~70年代，优先结晶方法在工业生产上大规模的用于由丙烯腈制备L—谷氨酸的拆分，每年的产量可达1．3万吨。这一技术不仅在工业生产上有非常显著的应用价值，在'实验室也可用于拆分数克到数十克的光学活性的化合物。应当指出的是，优先结晶方法仅适用于拆分能形成聚集体的外消旋体，而且该聚集体是稳定的结晶形式。换句话讲，假若该外消旋体可以是以聚集物或外消旋化合物的形式存在，但在某一定的温度范围内，只可以以聚集物的形式结晶出来，而刁；是产生外消旋化合物的结晶。例如盐酸组氨酸在45℃以上温度进行的优先结晶拆分。减肥药物芬氟拉明(fenfluramine，6)及其前体去乙基芬氟拉明(7)的拆分研究说明了优先结晶拆分的局限性。在对(6)和(7)与非手性的有机酸形成的50多个盐进行聚集物性质研究时，发现只有五个(6)的盐和三个(7)的盐是聚集体，但其中有两个盐不能使用优先结晶法结晶，这两个盐是(6)的苯氧乙酸盐和(7)的二氯乙酸盐。(6)的苯氧乙酸盐在室温下以不稳定的聚集体和稳定的外消旋化合物的形式发生共结晶，而(7)的二氯乙酸盐在结晶过程中会发生异手性(heterochiral growth)生长，即—种对映异构体的晶体生长在另一种异构体晶体的表面，得到晶体的光学纯度很低。聚集体通常在一定的温度范围内是稳定的，一旦超过该温度范围则叫咱S形成聚集体的亚稳态的形式，这种亚稳态的形式也可以用优先结晶的方法拆分，但得到的将是亚稳态多晶型的形式。例如盐酸组氨酸在25℃时的结晶。也有些化合物，例如外消旋的3—(3—氯苯基)—3—羟基丙酸(8)，可以形成热力学稳定的聚旧体的形式，但在溶剂中结晶时总是生成亚稳态的外消旋化合物，而且该外消旋化合物的溶解度约是其对映异构体的7倍，这种情况难以用优先结晶法进行结晶。优先结晶法是一种高效、简单而又快捷的拆分方法，晶种的加入造成两个对映异构体具有不同的结晶速率是该动态过程控制的关键。延长结晶时间可提高产品的产率，但产品的光学纯度有所下降。从优先结晶法中得到晶体后，如要进一步提高产物的光学纯度，可经过反复的重结晶实现。 在实际应用过程中，尤其在工、限生产过程中，利用优先结晶方法的特点进行循环往复的结晶分离。这一方法从20世纪50年代起用于抗生素氯霉素(chloramphenicol，9)的中间体D—苏型?1—对硝基苯基—2—氨基—1，3—丙二醇(10)的拆分，至今工业生产中仍然在使用。循环优先结晶方法又称为“交*诱导结晶拆分

手性拆分技术

手性拆分技术 手性药物的制备技术由化学控制技术和生物控制技术两部分组成。化学控制技术:普通化学合成、不对称合成和手性源合成. 生物控制技术:天然物的提取分离技术和控制酶代谢技术。 手性拆分法: 结晶法拆分、动力学拆分、色谱分离法拆分、膜拆分法、萃取拆分法 1.结晶拆分法 结晶法拆分包括直接结晶法拆分和非对映异构体拆分分别适用于外消旋混合物和外消旋化合物的拆分。 在一种外消旋混合物的过饱和溶液中, 直接加入某一对映体的晶种,即可得到一定量的该对映体, 这种直接结晶的拆分方法仅适用于外消旋混合物, 其应用几率不到10% 外消旋化合物较为常见, 大约占所有外消旋体的90%。通过与非手性的酸或碱成盐可以使部分外消旋化合物转变为外消旋混合物, 扩大直接结晶法拆分的应用范围使部分外消旋化合物转变为外消旋混合物。也可采用与另一手性化合物(即拆分剂)形成非对映异构体混合物的方法, 利用这对非对映异构体盐的溶解度和结晶速去率的差异, 通过结晶法进行分离, 最后脱去拆分剂即得单一构型的异构体。最常见的拆分剂是手性酸或手性碱。 近年出现了组合拆分、复合拆分、包合拆分和包结拆分等新技术, 是对非对映异构体拆分的有效补充。 1.1 组合拆分 组合拆分是指采用结构类型相同的2～3个手性化合物构成的拆分剂家族代替单一拆分剂进行外消旋化合物拆分的新方法。拆分剂家族一般是将常用的手性拆分剂(如α-甲基苄胺、α-氨基苯乙醇、酒石酸、扁桃酸等)进行结构修饰而形成的一组衍生物。在拆分剂家族中, 每个化合物之间要具有非常强的结构类似性和立体化学均一性。 实际操作过程是将拆分剂家族和被拆分的外消旋化合物以物质的量比1∶1

手性拆分方法——包结拆分法原理及应用

手性拆分方法——包结拆分法原理及应用 摘要：简要介绍了包结拆分方法的原理及其应用 关键词：包结拆分、包结复合物、氢键 A novel method of resolution—Chiral Inclusion Complexation Abstract：The resolution of racemic compound by chiral inclusion complexation .The chiral recognition principles in inclusion complex is also discussed. Key words：resolution, chiral recognition, hydrogen bond. 手性是自然界的一种普遍现象，构成生物体的基本物质如氨基酸、糖类等都是手性分子[1]。基本物质如氨基酸、糖类等都是手性分子。手性分子的重要性不仅表现在与生物相关的领域，在功能材料领域，如液晶、非线性光学材料、导电高分子方面也显示出诱人前景。 医药和生物技术的发展，人们对光学活性化学物质的需求不断增加。目前在市场上手性药物占有很大的比例，许多具有生物活性的化合物，其对映异构体一般具有不同程度的话性，甚至具有不同的生理作用。手性对

映体药物在吸收、分布、代谢与排泄过程中，通过与体大分子的不同立体结合，产生不同的药理作用。它们的药理作用是通过与体大分子之间的严格手性匹配与分子识别来实现的，在人体的药理活性、代谢过程及毒性上均存在着显著差异[2]。 随着对手性分子认识的不断深入，人们对单一手性物质的需求量越来越大，对其纯度的要求也越来越高。单一手性物质的获得方法大致有3种[3]：○1手性源合成法：最常用的方法，但由于天然手性物质的种类有限,要合成多种多样的目的产物会遇到很大困难,而且合成路线步多，也使得产物成本十分高昂。○2不对称合成法：是在催化剂或酶的作用下合成得到过量的单一对映体化合物的方法。不对称化学合成高旋光收率的反应仍然有限，所得产物的旋光纯度对于多数应用仍不够高；生物的不对称合成具有很高的选择性，反应条件温和，但对底物要求高、反应慢、产物的分离困难，因而在应用上也受到一定的限制。○3外消旋体拆分法：是在拆分剂的作用下，将外消旋体拆分成对映体。成本较低，应用广泛。通过不对称合成方法获取单一对映体药物虽然更为合理和诱人，但外消旋体药物或中间体拆分仍是获取单一对映体药物的主要方法。据报道，大约有65％的非天然手性药物是由拆分得到的。 外消旋体的拆分用的最多的是化学拆分法，经典的化学拆分是化学拆分法，利用光学活性的有机酸或碱与对映异构体作用形成非对映异构体衍生物（或盐），通过分步结晶而分离，然后再用无机酸或碱分解，从而获得有光学活性的产物。由于必须使被拆分化合物变为酸或碱，这种方法在被拆分化合物类型上受到了很大的限制。

浅谈色谱技术在手性药物拆分的应用

浅谈色谱技术在手性药物拆分中的应用 XXX （XXXXX大学药学院制药工程，江西南昌330013） 摘要：手性药物拆分对药物研究有重要意义。近年来，色谱法拆分手性药物发展十分迅速，已成为药学研究热点之一。本文就色谱法在手性药物拆分中的应用作一简述。介绍了手性色谱拆分法中的薄层色谱法，气相色谱法，高效液相色谱法，毛细管电泳法，超临界流体色谱法，模拟移动床色谱，及其优缺点。 关键词：色谱法；手性药物；拆分；应用 手性是一种很普遍的自然现象，比如蛋白质、氨基酸、多糖、核酸、酶等生命活动重要基础物质，都是手性的。据统计，在研发的1200种新药中，有820种是手性的，占世界新药开发的68%以上[1]。1992年3月美国食品和药品管理局（FDA）发布了手性药物指导原则，该原则要求含手性因素的化合物，必须明确量化每一对映异构体的药效作用和毒理作用，并且当两种异构体有明显不同作用时，必须以光学纯的药品形式上市。随后欧共体和日本也采取了相应的措施。此项措施大大促进了手性药物拆分技术的发展。当前大多数药物是以外消旋体的形式出现，即药物里含有等量的左右两种对映体。近年来单一对映体药物市场每年以20%以上的速度增长[2]。2010年，在医药工业中，化学药销售超过7000亿美元，具有光学活性的手性药物约占全部化学药，规模约3200亿美元具有十分广阔的市场前景和巨大的经济价值[3]。 广阔的应用前景和巨大的市场需求触发了更多的医药企业和学者探索更新更高效地获得单一手性化合物的方法。本文就色谱法在手性药物拆分中的应用作一简述。 1 薄层色谱法(TLC)[4]-[5] TLC法始于20世纪30年代，现已发展了高效TLC法、离心TLC法及梯度展开等技术。由于高效薄层板的理论塔板数高(可达5000)，加上现代化的检测手段，使得TLC 法拆分对映体成为可能。TLC拆分法可分为手性试剂衍生化法( CDR) 、手性流动相添加剂法( CMPA) 和手性固定相法(CSP)。目前，可用于TLC拆分的CMPA法主要有添加手性离子对试剂、添加CD及其衍生物于展开系统，可用于TLC拆分的CSP有CD、纤维素及其衍生物、手性氨基酸金属配体交换及手性试剂浸渍性固定相。手性药物的TLC拆分法具有操作简便、设备简单、分离效率高、分析速度快、色谱参数易调整等特点，在对映体的分离中具有实用意义，但由于其灵敏度不高，故目前主要用于定性分析手性药物。 2 气相色谱法(GC) GC法始于20世纪60年代，通过选择适当的吸附剂作固定相，使之选择性地吸附在外消旋体中的一种异构体，从而达到快速分离手性药物的目的。GC手性固定相按照拆分机制可分为三类[6]：①基于氢键作用的手性固定相，主要是氨基酸衍生物固定相；②基于配位作用的手性金属配合物固定相；③基于包含作用的环糊精衍生物固定相，这类固定相在GC手性分离研究中发展最快、选择性高，且应用广泛。研究表明，手性固定相与异构体之间的作用有氢键作用、偶极结合作用和三点作用。GC法分离手性药物具有简单快速、灵敏、重复性和精度高的特点，对于可挥发的热稳定手性分子，可表现出明显优势；但同样也存在着一些固有的局限性，如要求被分离的样品具有一定的挥发性和热稳定性，要实现制备比较困难。 3 高效液相色谱法(HPLC)[7] HPLC法是20世纪70年代后期发展起来的，在手性药物拆分中应用最为广泛，是药物质量控制、立体选择性的药理学和毒理

手性拆分剂及其手性药物色谱拆分技术的应用进展梁娴

手性拆分剂及其手性药物色谱拆分技术的应用进展 梁娴，王慧文 (安徽省蚌埠市食品药品检验所，安徽蚌埠233000) 关键词：手性拆分；手性拆分剂；色谱拆分法 近三十年上市的新药中，手性药物占有很大比例，手性药物拆分技术应用广泛，发展也日趋完善。手性拆分（Chiral Resolution）也称作光学拆分（Optical Resolution），亦或称作外消旋体拆分，为立体化学上，用以分离外消旋化合物成为两个不同的镜像异构物的方法［1］。例如反应停事件中：药物沙利度胺（反应停）是以对映体的混合物用作缓解妊娠反应药物，造成许多服用过此药的孕妇产下畸婴，经研究发现（R）-沙利度胺具有镇静和缓解妊娠反应作用，而（S）-沙利度胺可酶促水解成邻苯二甲酰谷氨酸并渗透到胎盘，干扰叶酸的合成，产生强致畸作用。如果能在药物沙利度胺投放市场前就发现R、S构型手性异构体的性质差别并经分离提纯后用药，就可以避免这样的事故。 对手性化合物的识别、拆分或合成。需要有能够对被研究的手性化合物（客体分子）进行选择性识别或结合的手性化合物（主体分子），这样的主体分子被称为手性选择剂（手性拆分剂），手性拆分剂是具有多重识别位点的手性化合物。1手性拆分剂（手性选择剂） 根据化学结构不同可以分为：天然多糖及其衍生物（包括环糊精、纤维素、淀粉等多糖衍生物制备的手性固定相）、大环抗生素（主要有利福霉素B、利托菌素A、万古霉素及其衍生物和氨基糖苷类等等）、人工合成的手性大环配体（以N、P、S、Se等杂原子作为给电子原子的聚醚类冠状大环化合物、含氮的大环多胺）、配体交换复合物、手性表面活性剂（包括天然的和合成的两类。天然的包括胆酸盐、毛地黄皂苷、皂角苷等；人工合成的包括十二烷酰氨基酸钠等）、亲和手性选择剂（包括多肽、蛋白质、糖蛋白和相应的生物聚合物）等［2］。如黄碧云等［3］以羟乙基-β-环糊精为手性选择剂，确立了苯磺酸氨氯地平对映体的手性拆分方法。马桂娟等［4］以L-异亮氨酸聚合物手性配体交换固定相对DL-氨基酸进行了有效拆分。 根据作用机制不同还可以分为手性流动相添加剂（Chiral Mobile Phase Additives，CMPA）、手性固定相（Chiral Stationary Phase，CSP）、手性衍生化试剂（Chiral Derivatization Reagents，CDR）三类。CDR属于间接法使用手性选择剂，以共价键和手性物质结合，在分子内构建手性环境，对手性试剂的纯度要求很高，产物往往不可逆生成；CMPA和CSP属于直接法使用手性选择剂，在分子间构建手性环境，与手性物质基于分子间作用力（氢键、范德华力、π-π或偶极作用）、包结作用构成非对映异构体，所形成的非对映异构体具有可逆性脱去手性选择剂的性质。 CMPA是在流动相中加入手性试剂，利用手性试剂与各对映体结合的稳定常数的不同以及药物与结合物在固定相上分配系数的不同来进行分离的方法。常用的有：环糊精及其衍生物、冠醚、配位基手性选择剂、手性离子对添加剂、蛋白质、大分子抗生素等［5］。如贾绍栋等［6］建立了以手性冠醚为手性选择剂，分离吉米沙星对映体的方法。 CSP是先将高纯度的手性试剂化学键合到固定相上，键合后的固定相与药物对映体形成复合物，再根据复合物的稳定常数不同而获得分离的拆分方法，分离的效率和洗脱顺序取决于复合物的相对强度。根据化学结构类型的不同可以将手性固定相分为：（1）纤维素类固定相；（2）“刷型”手性固定相或称Pirkle型手性固定相；（3）环糊精类手性固定相；（4）蛋白质型手性固定相；（5）大环抗生素型手性固定相；（6）配体交换型手性固定相；（7）冠醚类手性固定相等；也可以根据手性固定相与被拆分的对映异构体间的作用机制进行分类：（1）基于氢键、π-π或偶极吸引等相互作用形成配合物进行 ［11］Jhaveri KS，Wong F，Ghai S，et al．Comparison of CT histogramanaly-sis and chemical shift MRI in the characterization of indeterminate adrenal nodules［J］．AJR，2006，187（5）：1303－1308． ［12］Ho LM，Paulson EK，Brady MJ，et al．Lipid-pooradenomas on unen-hanced CT：does histogram analysis increase sensitivity compared with a mean attenuation threshold［J］．AJR，2008，191（1）：234－238．［13］Halefoglu AM，Bas N，Yasar A，et al．Differentiation of adrenal ade-nomas from nonadenomas using CT histogram analysis method：a pro-spective study［J］．Eur J Radiol，2010，73（3）：643－651． ［14］Park BK，Kim CK，Kim B，et al．Comparison of delayed enhanced CT and chemical shift MR for evaluating hyperattenuating incidental ad-renal masses［J］．Radiology，2007，243（2）：760－765． ［15］Blake MA，Kalra MK，Sweeney AT，et al．Distinguishing benign from malignant adrenal masses：multi-detector row CT protocol with10-minute delay［J］．Radiology，2006，238（2）：578－585． ［16］Lin XZ，Miao F，Li JY，et al．High definition CT gemstone spectral imaging of the brain：initial results of selecting optimal monochromat-ic image for beam-harding artifacts and image noise reduction［J］．J Comput Assist Tomogr，2011，35（2）：294－297．［17］惠萍，王新江，崔志鹏，等．CT能谱成像在消除金属移植物伪影中的应用价值［J］．中华放射学杂志，2011，45（8）：740－742．［18］吴华伟，程杰军，李剑颖，等．CT能谱成像定量碘基物质图对肺栓塞的诊断价值［J］．中华放射学杂志，2011，45（8）：727－730．［19］叶晓华，周诚，吴国庚，等．CT能谱单能量成像对不同肝脏肿瘤检出影响的初步探讨［J］．中华放射学杂志，2011，45（8）：718－722．［20］李铭，郑向鹏，李剑颖，等．甲状腺结节的能谱CT研究［J］．中华放射学杂志，2011，45（8）：780－781． ［21］刘金刚，刘亚，李丽新，等．CT能谱成像在诊断肿瘤淋巴结转移和肿瘤性质中的作用［J］．中华放射学杂志，2011，45（8）：731－735．［22］张晓鹏．探索的精神与乐趣———CT能谱成像临床应用研究中的思考［J］．中华放射学杂志，2011，45（8）：709－712． ［23］刘婧，王鹤，王霄英，等．双能CT成像鉴别肾上腺良恶性病变的初步研究［J］．放射学实践，2012，27（3）：242－245． ［24］林晓珠，陈克敏，吴志远，等．CT能谱成像在鉴别胰腺寡囊型浆液性囊腺瘤与粘液性囊性肿瘤中的价值［J］．中华放射学杂志，2011，45（8）：713－717． （收稿日期：2012－05－20，修回日期：2012－10－16） · 241 ·安徽医药Anhui Medical and Pharmaceutical Journal2013Jan;17(1)