2017年临床检验技师考试生化检验第十四章重要考点
2017年临床检验技师考试生化检验第十四章重要考点
本章考点
1.临床化学常用分析方法
光谱分析、电泳技术、离心技术、层析技术、电化学分析技术的基本原理和应用
2.临床化学方法的建立
(1)方法建立的根据
(2)方法建立的过程
(3)方法的评价
(4)方法建立后的临床观察
第一节临床化学常用分析方法
一、光谱分析(分光光度技术)
定义：
利用物质具有发射、吸收或散射光谱谱系的特征，以此来确定物质性质、结构或含量的技术，称为光谱分析技术。
它具有灵敏、快速、简便等特点，是生物化学分析中最常用的分析技术。
分类：
(一)可见及紫外分光光度法
分光光度法的理论基础是朗伯-比尔定律。
https://www.wendangku.net/doc/6a7427293.html,mber-Beer定律：
A = k·b·c
A为吸光度
k——吸光系数
b——光径，单位：cm。
c——溶液浓度，单位：g/L
在可见-紫外分光光度法中，通常在测定未知样品浓度的同时，与同一个已知浓度的标准物作比较，可以利用以下公式计算而求出其浓度,即比较法。
其中Cx和Ax为标本管浓度和吸光度，Cs和As分别为标准管浓度和吸光度。
2.摩尔吸光系数：在公式“A=k·b·c”中，当c=1 mol/L，b=1cm时，则常数k可用ε表示称摩尔吸光系数。
ε的意义是：当液层厚度为1cm，物质浓度为1mol/L时在特定波长下的吸光度值。
ε是物质的特征性常数。
不同物质的摩尔吸光系数不同
3.比吸光系数：在公式“A=k·b·c”中，当c为百分浓度(w/v)，b为cm时，则常数k 可用E%表示，称为比吸光系数或百分吸光系数。
(二)原子吸收分光光度法
根据待测元素的气态原子能吸收相同原子所发射的特定波长的光，其吸收特性遵循Lambert-Beer定律，即在一定条件下，原子的吸光度同原子蒸气中待测元素基态原子的浓度成正比。
常用的定量方法有：
1.标准曲线法：
将一系列浓度不同的标准溶液按照一定操作过程分别进行测定，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线。在相同条件下处理待测物质并测定其吸光度，即可从标准曲线上找出对应的浓度。由于影响因素较多，每次实验都要重新制作标准曲线。
2.标准加入法：
把待测样本分成体积相同的若干份，分别加入不同量的标准品，然后测定各溶液的吸光度，以吸光度为纵坐标，标准品加入量为横坐标，绘制标准曲线，用直线外推法使工作曲线延长交横轴，找出组分的对应浓度。
本法的优点是能够更好地消除样品基质效应的影响。
3.内标法：
在系列标准品和未知样品中加入一定量样本中不存在的元素(内标元素)，分别进行测定。以标准品与内标元素的比值为纵坐标，标准品浓度为横坐标绘制标准曲线，再根据未知样品与内标元素的比值依曲线计算出未知样品的浓度。
本法要求内标元素应与待测元素有相近的物理和化学性质。只适用于双通道型原子吸收分光光度计。
(三)荧光分析法
有些物质物质受到有较高能量的光(如紫外光)照射时，在吸收了某些波长的光后，会发射出不同波长和不同强度的光(光致发光)，照射停止，发光亦随之消失，这种光称为荧光。
利用荧光强度进行分析的方法，称为荧光法。
在荧光分析中，待测物质分子成为激发态时所吸收的光称为激发光，处于激发态的分子回到基态时所产生的荧光称为发射光。
荧光分析法测定的是受光激发后所发射的荧光强弱。
在一定条件下，荧光物质的浓度愈大，发射的荧光强度也愈强。
(四)火焰光度法(火焰发射光谱法)
是待测元素利用火焰作为激发源，成为激发态原子回降至基态时发射的光谱强度进行含量分析的方法，属于原子发射光谱分析的一种。
样品中待测元素激发态原子的发射光强度I与该元素浓度C呈正比关系，即I=aC，式中a为常数，与样品组成、蒸发和激发过程有关。
火焰光度法通常采用的定量方法有标准曲线法、标准加入法和内标法。
临床工作中，火焰光度法主要用于体液中的钠、钾测定，钠的特征谱线为589nm(黄色)，钾的特征谱线为767nm(深红色)。
(五)透射和散射光谱分析法
主要测定光线通过溶液混悬颗粒后的光吸收或光散射程度，常用法为比浊法，又可称为透射比浊法和散射比浊法。
临床上多用于对抗原或抗体的定量分析。
二、电泳分析
在直流电场中，带电粒子向带符号相反的电极移动的现象称为电泳。
常用的电泳分析方法：
1.醋酸纤维素薄膜电泳：
醋酸纤维素是指纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯，由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。
这种薄膜对蛋白质吸附小，能消除电泳中出现的“托尾”现象。
具有分离速度快、样品用量小的特点。适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。
2.凝胶电泳：
以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)普遍用于分离蛋白质及较小分子核酸。
琼脂糖凝胶电泳适用于分离同工酶及其亚型、大分子核酸等。
3.等电聚焦电泳：
利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术，特别适合于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分，在区带电泳中分辨率最好。
常用的pH梯度支持介质有聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶等。
4.毛细管电泳：
利用电泳和电渗流的电动力学原理，在一种空芯的微小内径的毛细管中进行混合物的高效分离技术。
毛细管电泳可分为：毛细管自由溶液区带电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管等电聚焦电泳及胶束毛细管电动力学色谱。
三、离心技术
(一)离心技术的基本原理
离心技术是根据一组物质的密度和在溶液中的沉降系数、浮力等不同，用不同离心力使其从溶液中分离、浓缩和纯化的方法。
离心技术分为制备离心技术和分析离心技术。
制备离心技术主要用于物质的分离、纯化，而分析离心技术主要用来分析样品的组成。
离心力(Fc) Fc= mω2X
m是质量(g)
ω是旋转角速度(弧度/s)
X是颗粒离开旋转中心的距离(cm)
相对离心力(RCF)： RCF=1.118×1O-5·n·X
n为转子的转数(rpm)
X为离心转子的半径距离(cm)
(二)离心技术种类及在检验中的应用
1. 离心技术在生化检验中的应用主要有两方面：
①对悬浮液中颗粒的分离，如从全血中分离血清、血浆等;
②分离两种密度不同液相，如从有机溶剂和水的混合物中分离出有机相等。
2.种类：
(1)普通离心法：
可用来分离细胞、细胞膜或细胞碎片。
(2)差速离心法(差级离心法)：
原理是交替使用低速或高速离心，也可采用逐渐增加离心速度的办法，通过不断增加相对离心力使一个非均匀混合液内的大小、形状不同的粒子分部沉淀。
由于分辨率不高，常用于定性分离手段之前的粗制品提取。
3.密度梯度离心法：
比差速离心法复杂，但该法具有很高的分辨率，可以同时使样品中的各个组分得到分离。
其做法是将样品放在密度梯度介质中进行离心。可分为：
1)速率区带离心法：
根据分离的粒子在梯度液中沉降速度的不同，使具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内分成一系列区带，达到彼此分离的目的。
离心前在离心管内装入密度梯度介质(如蔗糖、甘油、KBr、CsCl等)，待分离的样品铺在梯度液的顶部、离心管底部或梯度层中间，同梯度液一起离心。
离心后在近旋转轴处的介质密度最小，离旋转轴最远处介质的密度最大。
一般用于分离大小相异而密度相同的物质。
2)等密度区带离心法：
离心前预先配制介质的密度梯度，待分离的样品铺在梯度液顶部或与梯度液混合，当梯度液由于离心力作用逐渐形成低浓度而管顶稀的密度梯度，同时，原来分布均匀的粒子也发生重新分布。
当管底介质的密度大于粒子的密度时，粒子上浮。此法常用于分离大小相似而密度差异较大的物质。
4.分析性超速离心
主要是为了研究生物大分子的沉降特性和结构，如测定大分子的相对分子量、生物大分子的纯度估计、分析生物大分子中的构象变化等。
四、层析技术
(一)原理
层析法是利用待分离物质不同物质理化性质的差异而建立起来的一种分离分析技术。
所有的层析系统都由固定相和流动相组成。
固定相：是固体物质或是固定于固体上的成分。
流动相：由水和各种溶媒组成(液体或气体)。
当待分离的混合物随流动相通过固定相时，由于各组分的理化性质存在差异，与两相发生相互作用(吸附、溶解、结合等)的能力不同，在两相中的分配(含量比)不同，且随流动相向前移动，各组分不断地在两相中进行再分配。
分部收集流出液，可得到样品中所含的各单一组分，从而达到将各组分分离的目的。
(二)层析法分类
而按层析原理还可将层析分为：
1.凝胶层析：
又称分子筛过滤、凝胶过滤或排阻层析等。
固定相是多孔凝胶构成。
根据物质分子大小不同，随流动相通过凝胶时受阻滞的程度(移动速度)不同得以分离。
优点：
所用凝胶属于惰性载体，吸附力弱，不损伤样品;
重复性好，有利于定性;
操作条件温和，不需要有机溶剂，对高分子物质有很好的分离效果。
常用的凝胶有Sephadex G(葡聚糖凝胶)系列。
凝胶层析可用于脱盐、分离提纯、测定高分子物质的分子量、高分子溶液的浓缩等。
液体气体
液体固体
液-液层析
液-固层析
气-液层析
气-固层析
2.离子交换层析：
采用具有离子交换性能的物质作固定相，利用它与流动相中的离子能进行可逆交换的性质来分离离子型化合物的方法。
主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质，也可用于分离核酸、核苷酸及其他带电荷的生物分子。
3.高效液相层析(HPLC)：
在经典液相层析法基础上，引进气相层析的理论而发展起来的一项新颖快速的分离技术。
具有分离能力强、测定灵敏度高、可在室温下进行、应用范围广等优点，对分离蛋白质、核酸、氨基酸、生物碱、类固醇和类脂等尤其有利，根据流动相和固定相相对极性，高效液相色谱分析可分为正相和反相两种。
4.亲和层析：
利用待分离物质和它的特异性配体间具有特异的亲和力，从而达到分离的目的。
将可亲和的一对分子中的一方以共价键形式与不溶性载体相连作为固定相吸附剂，当含混合组分的样品通过此固定相时，只有和固定相分子有特异亲和力的物质，才能被固定相吸附结合，性无关组分随流动相流出。
改变流动相组分，可将结合的亲和物洗脱下来。
亲和层析中所用的载体称为基质，与基质共价连接的化合物称配基。
具有专一亲和力的生物分子对主要有：抗原与抗体，DNA与互补DNA或RNA，酶与底物、激素与受体、维生素与特异结合蛋白、糖蛋白与植物凝集素等。
亲和层析可用于纯化生物大分子、稀释液的浓缩、不稳定蛋白质的贮藏、分离核酸等。
五、电化学分析技术
(一)基本原理
利用物质的电化学性质，测定化学电池的电位、电流或电量的变化进行分析的方法称为电化学分析法。
(二)离子选择性电极分析法
离子选择电极(ISE)能对某特定离子产生响应，在一定范围内，其电位与溶液中特定离子活度的对数呈线性关系，因此可用离子选择电极来定量分析某些离子的活度或浓度，临床上常被用于多种体液(血、尿、唾液、脑脊液等)中Ca2+、K+、Na+、Cl-、F-和碳酸氢盐等离子测定。
使用离子选择性电极电位分析法测定的是离子活度a，而一般分析中要求测定的是离子浓度c，二者关系为：a=f·c，其中f为活度系数，是溶液中离子强度的函数。。
在稀溶液中活度系数f≈1时，a=c，活度可代表浓度。
高浓度测定时，通常在标准溶液和样品溶液中分别加入浓度很大的对待测离子无干扰的电解质，作为总离子强度调节缓冲剂，使标准溶液与待测溶液离子强度达到一致，并有缓冲及消除干扰的作用。
习题：
发射光谱分析法是下列哪类测定法的原理
A.火焰光度法
B.离子选择电极法
C.化学比色法
D.免疫比浊法
E.放射免疫法
『正确答案』A
2.用于分离不同分子大小的蛋白质的方法是( )。
A.琼脂糖凝胶电泳
B.凝胶层析
C.速率免疫比浊法
D.免疫固定电泳
E.普通离心
『正确答案』 B
第二节实验方法的选择
生物化学检验是利用各种检测技术和方法，研究人体组织、体液的各种成分及其含量，为临床疾病预防、疾病诊断、病情监测、疗效评价、预后判断提供准确可靠的信息。
选择准确可靠的实验方法是提供准确可靠信息的重要中心环节之一。
一、实验方法选择的目的
1.各实验室按照方法选择的原则结合自身条件，确定合适的某项目的检测方法。
2.保证拟使用的检测方法在正式应用于临床分析病人标本之前，对方法分析性能及可能引入的误差进行了解，作出初步评估。
二、实验方法的分级
国际临床化学联合会(IFCC)根据分析方法的准确性与精密度的不同，将其分为决定性方法、参考方法和常规方法三级。
(一)决定性方法(definitive method)
决定性方法准确度最高、系统误差最小、几乎无干扰的方法。
其测定结果与“真值”最为接近。主要方法有重量分析法、中子活化法、同位素稀释-质谱分析法(ID-MS)等。
由于技术要求太高，费用昂贵，因而这类方法不直接用于鉴定常规方法的准确性，只用于评价和发展参考方法与一级标准品。
国际上研究这类方法的实验室很少，美国、法国、德国、丹麦等国家有这类实验室。
(二)参考方法(reference method)
参考方法是指准确度与精密度已经被充分证实，且经公认的权威机构(国家主管部门、相关学术团体和国际性组织等)颁布的方法。
这类方法干扰因素少，系统误差很小，有适当的灵敏度、特异度、较宽的分析范围并且线性良好，重复测定中的随机误差可以忽略不计。
参考方法能在条件优越的实验室作常规分析，主要用于鉴定常规方法，评价其误差大小、干扰因素并决定是否可以被接受;
用于鉴定二级标准品和为质控血清定值;用于商品试剂盒的质量评价。
(三)常规方法(routine method)
指性能指标符合临床或其他目的的需要，有足够的精密度、准确度、特异性和适当的分析范围，且经济实用。
其中准确度已经确定即已查明偏差方向和数量的方法称为偏差已知方法，而准确度不明者称为偏离未知方法。
常规方法经有关学术组织认可，可以作为推荐方法，用于常规实验室检测。
三、标准试剂的分级
标准品(参考物)定义：它是一种或几种物理或化学性质已经充分确定，被用于校正仪器或证实某种测定方法的物质。
标准品是进行方法评价、仪器校正、常规分析的质量控制等不可缺少的，在临床化学中将其分为三级。
(一)一级标准品(原级参考物)
它是已经确定的稳定而均一的物质，其数值已由决定性方法确定或由高度准确的若干方法确定，所含杂质已经定量。
一级标准品都有证书，在美国由国家标准局(WBS)颁发证书，并指明其性质和有关数据。
一级标准品用于校正决定性方法，评价和校正参考方法以及为“二级标准品”定值。
(二)二级标准品(次级参考物)
这类标准品可以是纯溶液(水或有机溶剂的溶液)，也可以存在于相似基质中。
可由实验室自己配制或为商品，其中有关物质的量由参考方法定值或用一级标准品比较而确定。
二级标准品主要用于常规方法的标化和控制物的定值。
(三)控制物
控制物用于常规质量控制，以控制病人标本的测定误差。
有定值血清和未定值血清两种。
控制物不能用于标定仪器或方法。
在控制物的制备、定值和使用过程中，应严格按有关规程进行。”
四、实验方法选择的原则
实验方法选择要从实际出发，根据实验室的条件和检测要求确定适当的方法。
条件优越的实验室应建立和选择参考方法，以利于对常规方法的评价和标准品的定值;
一般临床化学实验室应结合仪器设备、技术力量、实验成本等因素，主要选择常规分析方法和使用方便的参考方法。
选择常规分析方法时，尽量选用国内外通用方法或推荐方法，便于方法的规范化和质量控制，要重点考虑实用性和可靠性两方面的性能指标。
(一) 实用性
一般应具备微量快速，方法简便，安全可靠，成本低廉。
1.微量快速便于急诊，适合批量成套分析。快速即检测速度，是指一份标本操作一次所需时间以及在常规条件下单位时间(小时、天)内所能处理的标本数量。
2.方法简便操作人员无需特殊培训;试剂种类少，最好是单一试剂，易于自动化分析。
3.安全可靠试剂无毒，腐蚀性小，无需特殊防护措施。
4.成本低廉无需昂贵试剂和仪器，每件成本费用与一次分析的标本数量有关，应区别单件标本及不同工作量时的费用。
(二) 可靠性
所选方法应具有较高的精密度、准确度和较大的检测范围，保证测定结果的准确性能满足方法允许误差限度的要求。
五、实验方法选择的步骤
(一) 广泛查阅文献
先根据方法选择的要求对已发表的各种检测方法进行比较与检验，确定哪些方法有充分的科学根据及真实的使用价值。
(二)选定候选方法
根据实验室的设备条件、人员业务素质、工作量等具体情况，选择适合于本实验室具体条件的方法(候选方法)。
候选方法确定后，应写出该法的原理、参考文献、所用仪器、试剂来源和纯度、标本收集要求、详细的操作步骤、结果计算和分析、参考范围、注意事项等。
(三)候选方法的初步试验(预试)
对候选方法应作初步评价实验。初步试验包括：
1. 标准曲线和重复性;
2. 质控血清和新鲜标本的重复试验;
3. 分析浓度不同的标本，并与公认的参考方法的结果对比。
通过对候选方法的初步实验使工作者熟悉有关技术，掌握各分析步骤要点，判断能否适合本室条件要求。根据初试所获得的资料确定是否有必要作进一步研究。
第三节实验方法的评价
实验方法评价的过程就是对实验误差的测定。
根据评价实验所测得的结果和方法性能判断的标准，决定该方法是否可以被接受。
一、实验误差
实验误差(简称误差)是量值的给出值与其客观真值之差。
给出值包括测量值、标称值等，具有广泛性。
误差就是测量值与真实值之间的差异。
误差不是错误，在测量时误差是不可避免的。
标本中待测物的真实浓度为真值，它是客观存在的，但在有限次的测定中，不可能求得真值;在实际工作中，采用严格的实验条件和最准确精密的方法，多次重复测定所得的测定值的平均值代表相对意义的真值。测量次数越多，平均值就越接近真实值。
(一)实验误差的分类
按照来源性质，实验误差可被分为系统误差、随机误差二类。
1.系统误差(systematic error，SE)
(1)概念：系统误差是指一系列测定值对真值存在同一倾向的偏差。
(2)特点：
由恒定的因素引起在一定条件下多次测定中重复出现。
具有单向性，而没有随机性，常有一定的大小和方向;
找到引起误差的原因，采取一定措施即可纠正。
消除系统误差能提高测定的准确度。
(3)分类：
(4)引起系统误差主要原因有：
①方法误差：
由方法缺陷导致所致，如特异度不高、标本中干扰物的存在等
这是生化检验中最严重、最难避免的误差
②仪器和试剂误差：
常见于仪器波长未校准，量器不准，试剂质量差等。
2.随机误差：(random error，RE)
(1)概念：是指在实际工作中，多次重复测定某一物质时引起的误差。
(2)特点：
误差的大小、方向和正负随机出现，数据呈正态分布;
具有不可预测性，不可避免，但可控制在一定范围内;
分析步骤越多，造成这种误差的机会越多。
增加测定次数误差可降低。
随机误差是由测定仪器、试剂、环境等实验条件的改变以及分析人员操作习惯等因素的变化而引起。
引起随机误差和系统误差的原因是相对的，有时引起系统误差的因素可以引起随机误差，引起随机误差的因素也可引起系统误差，随机误差和系统误差在一定条件下能相互转化。
(二)实验误差的表示方法
因误差性质不同，实验误差采用不同的表示方法，主要有以下几种：
1.平均误差：
平均误差是指一组测定值中，测定值与均值之差的平均值。
2.标准偏差(标准差)：
标准偏差是方差(S2)的平方根值，用S表示。它是表示精密度的较好的指标。
标准差的单位和原始数据相同，测定次数一般要求在10次以上。
3.绝对误差和绝对偏差：
(1)绝对误差指测定值与真值间的差值，即绝对误差=测定值(X)-真值(T)。
绝对误差有正值和负值。
(2)绝对偏差指测定值与测定均值间的差异，即绝对偏差=测定值(X)-测定均值( X)。
绝对误差、绝对偏差表示误差绝对值的大小，无法比较测定误差之间的大小。
4.相对误差和相对偏差：
相对误差为绝对误差与真值的百分比值，相对偏差为绝对偏差与测定均值的百分比值。
5.变异系数(coefficient of variation，CV)：
CV是样本标准差与样本均数的百分比值, 即。
CV值用于比较各组数据间的变异情况，不受单位影响。CV值越大,测定值离散度越大，精密度越差。
二、方法评价的基本内容和步骤
(一)方法评价的基本内容
方法评价的基本内容是通过实验途径，测定并评价方法的精密度和准确度。
在实验中实际测定的是不精密度与不准确度，强调的都是误差，评价实验的过程就是对误差的测定。
方法学评价的各项实验是为检测各种类型的实验误差而设计的。它们间的相互关系见表3-6。
(二)方法评价步骤
根据方法选择的要求确定某方法(候选方法)，在使用前最好经本实验室进行评价实验，方法评价步骤如下：
1.评价前实验：重点研究候选方法的最适条件。最适条件包括试剂浓度、缓冲体系的种类、离子强度和pH值、反应温度和时间、样品体积分数、检测波长、方法线性范围等。对文献报道的条件作必要的验证。
2.初步评价：包括批内和日内重复性试验、回收试验、干扰试验。
3.最后评价：依顺序作日间重复性试验，方法比较试验和总体判断方法是否可接受。
4.评价后实验：如方法可接受，则进行临床相关研究，包括参考值确定和特殊病人标本的测定等。
5.方法应用：建立质控系统，培训操作者，引入常规工作等。
方法评价是一项科学性强、方法严谨、费时耗力的工作，应将实验方法和结果进行科学的整理和总结。
三、方法评价指标
实验方法评价指标包括精密度、准确度、检测能力等。
(一)精密度
精密度(precision)是表示测定结果中随机误差大小程度的指标。
1.概念：表示同一标本在一定条件下多次重复测定所得到的一系列单次测定值的符合程度。
2.表示方法：精密度自身无量度指标，常用标准差(S)或变异系数(CV%)表示。
值得注意的是使用标准差及变异系数时，应说明实验的重复次数及其均值。
3.分类
(1)连续测定的精密度
在相同条件下，对同一标本连续进行n次重复测定结果的符合程度。
在有限次测定情况下，一般用σ(总体标准差)的估计值S(样本标准差)来表达这种精密度。
临床生化检验
Acanthocytosis 棘红细胞增多症 acethylcholine, Ach 乙酰胆碱 acid phosphatase, AP 酸性磷酸酶 acid sphingomyelinase, ASM 酸性鞘磷脂酶 acromegaly 肢端肥大症 actin 肌动蛋白 activation energy 活化能 activator 激活剂 active center 活性中心 activity 活性 acute coronary syndrome, ACS 急性冠状动脉综合征 acute glomerulonephritis, 急性肾小球肾炎 acute myocardial infraction, AMI 急性心肌梗死 acute pancreatitis 急性胰腺炎 acute phase proteins, APPs 急性时相反应蛋白 acute phase reaction, APR 急性时相反应 acute renal failure, ARF 急性肾功能衰竭 acute stress ulcer 急性应激性溃疡 acyl-CoA cholesterol acyltransferase, ACAT 脂酰基CoA胆固醇酰转移酶Addison’s disease 艾迪森病 adducin 内收蛋白 adiponectin 脂联素 adrenocorticotropic hormone, ACTH 促肾上腺皮质激素 adult respiratory distress syndrome, ARDS 成人呼吸窘迫综合征advanced glycation end production, AGE 晚期糖基化终末产物 aging 老化 alanine aminotransferase, ALT 丙氨酸氨基转移酶 albumin, ALB 清蛋白 alcohol dehydrogenase, ADH 乙醇脱氢酶 aldosterone 醛固酮 alimentary pentosuria 饮食性戊糖尿 alkaline phosphatase, ALP 碱性磷酸酶 allosteric protein 变构蛋白 alpha-fetoprotein, AFP 甲胎蛋白 aluminium, Al 铝 Alzheimer’s disease, AD 阿尔茨海默病 amino acid pool 氨基酸池 amino acid, AA 氨基酸 amino black 10 氨基黑10 aminoacidemia 氨基酸血症 aminoaciduria 氨基酸尿症 ammonia intoxication 氨中毒学说 amniotic fluid 羊水 analbuminemia 无清蛋白血症
临床检验基础 血液检验重点整理(理论考试版)
血液标本 全血：用于细胞计数、分类、形态观察; 血浆：全血去除血细胞，用于血栓止血检测; 血清：全血自然凝固后析出的液体，用于生物化学、免疫学检测等。 血液标本采集方法： 一、毛细血管采血法：用于微量检测 部位：耳垂或手指末梢，主要是中指或无名指尖内侧，半岁以下拇指或足部，特殊人员视情况而定 所用器材：采血针、吸管， 简要步骤：1、准备材料；2、选择采血部位；3、按摩皮肤；4、消毒皮肤；5、针刺皮肤；6、拭去第一滴血；7、吸血；8、止血；9、稀释血液。 二、静脉采血法：用于血沉、免疫、生化等检测项目 部位：主要是肘静脉。还可以在：手背部手腕部等部位采血，幼儿可采用颈外静脉采血。采血器材：一次性注射器，检验用真空定量采血装置。 简要步骤：1、准备试管；2、标记试管；3、消毒双手；4、选择静脉；5、检查注射器；6、扎压脉带；7、选择进针部位；8、消毒皮肤；9、穿刺皮肤；10、抽血；11、止血；12、放血 【质量控制】 标本采集时应规范操作，以减少误差；毛细血管采血时应避开伤损部位，避免挤压皮肤，血液应自然流出；静脉采血时压脉带压迫时间不宜太长；动脉采血后应立即与空气隔绝，阻止血气交换；容器要洁净干燥，避免强力振荡引起溶血；血液标本采集后应立即送检；抗凝的标本其比例要准确，必要时需修正；尽量避免输液时采血，因可干扰测试结果 抗凝: 用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，以阻止血液凝固，称为抗凝。 一、草酸盐， 抗凝原理：与血液中钙离子形成沉淀； 使用方法：草酸钠0.1mol/L和血液1:9。 优点：溶解性好，价廉。 缺点：①对凝血因子保护功能差，影响凝血因子；②形成草酸钙沉淀物，影响自动凝血仪器的使用。 使用范围：逐步被淘汰。 二、柠檬酸钠（枸橼酸钠）， 抗凝原理：与钙离子生成可溶性的鳌合物。 使用方法：配成109mmol/L的浓度和血液1:9（用于凝血试验）；106mmol/L的浓度和血液1:4（用于血沉）。 优点：对凝血因子有很好的保护作用。 缺点：血液中溶解度低，抗凝作用较弱。 使用范围：止血学检验、血沉、输血保养液（毒性小）。 三、乙二胺四乙酸（EDTA）盐， 抗凝原理：与钙离子生成可溶性的鳌合物。 使用方法：15g/L EDTA和血液1:10。
临床医学检验技师职称资格考试真题及答案
临床医学检验技师职称资格考试真题及答案 1.关于血液葡萄糖下列叙述中错误的是 A.毛细血管血葡萄糖浓度低于静脉血葡萄糖浓度 B.血浆是测定葡萄糖的最好样品 C.分析前血液放置一段时间会使结果偏 D.如无特殊原因应空腹抽血测定血糖 E.维生素C可干扰GOD-POD法测定葡萄糖答案：A 2.某病人胸痛6小时后入院，临床检验ECG未见典型急性心梗改变，为进一步明确诊断应选择 A.肌红蛋白 B.CK、LDH C.LDH、α-HBDH D.CK-MB、cTnT E.CK、CK-MB-AST、α-HBDH、LDH 答案：D 3.已糖激酶法是测定血糖的 A.决定性方法 B.参考方法 C.常规方法 D.已经淘汰的方法 E.目前卫生部广泛推荐的方法答案：B 4.下列哪组酶常用于诊断肝脏疾病 A.CK GGT ALP ACP B.ALT AST GGT ALP C.AMY LD α-HBDH LPL D.ACP AST Lipase LD E.AST CK CK-MB LD 答案：B 5.急性肝炎时，人体内转氨酶变化为 A.ALT升高，AST升高，AST/ALT>1.5 B.ALT升高，AST升高，AST/ALT<1.0 C.ALT正常，AST正常，AST/ALT=1.15 D.ALT降低，AST升高，AST/ALT>11.15 E.ALT升高，AST降低，AST/ALT<1.15 答案：B 6.下列哪种酶活性不受急性肝炎的影响 A.CK B.ALT C.AST D.LDH E.ALP 答案：A 7.下列关于ALP的叙述哪项不对
A.ALP是磷酸单酯的水解酶 B.其作用最近pH约为10 C.各年龄组具统一的参考范围 D.在梗阻性黄疸时增高 E.在成骨细胞疾病时增多答案：C 8.检测尿中β2-微球蛋白是监测 A.肾小球蛋白 B.肾小管功能 C.恶性肿瘤 D.良性肿瘤 E.泌尿系统感染 答案：B 9.下列哪项疾病不会引起血尿酸增高 A.痛风 B.肾功能损害 C.白血病 D.恶性肿瘤 E.肝硬化答案：E 10.关于B2微球蛋白叙述错误的是 A.存在于所有有核细胞表面 B.肾移植后如发生排斥反应，尿液B2微球蛋白可出现增高 C.炎症及肿瘤时血浆中浓度可降低 D.尿液B2微球蛋白主要用于监测肾小管功能 E.急性白血病有神经浸润时，脑脊液中B2微球蛋白可增高答案：C 11.用于辅助诊断前列腺癌的酶是 A.酸性磷酸酶 B.胰淀粉酶 C.CK-MB D.胆碱酯酶 E.碱性磷酸酶答案：A 12.用于辅助诊断有机磷中毒的酶是 A.淀粉酶 B.酸性磷酸酶 C.脂蛋白脂肪酶 D.胆碱脂酶 E.碱性磷酸酶答案：D 13.在骨骼疾病的诊断酶学中下列哪项最有价值 A.LDH B.CK C.ALP D.ACP E.ALT 答案：C 14.可用于嗜铬细胞瘤诊断的试验是 A.FSH B.生长激素 C.T3、T4 D.VMA E.血皮质醇答案：D 15.卫氏并殖吸虫主要寄生在宿主的 A.脾 B.肝 C.骨髓 D.肺 E.肌肉答案：D
临床医学检验技术生化重点
生物化学检验常见考点总结 一、临床化学基本概念 临床化学是化学、生物化学和临床医学的结合，有其独特的研究领域、性质和作用，它是一门理论和实践性均较强的，并以化学和医学为主要基础的边缘性应用学科，也是检验医学中一个独立的主干学科。 二、临床化学检验及其在疾病诊断中的应用 1.技术方面：达到了微量、自动化、高精密度。 2.内容方面：能检测人体血液、尿液及体液中的各种成分，包括糖、蛋白质、脂肪、酶、电解质、微量元素、内分泌激素等，也包含肝、肾、心、胰等器官功能的检查内容。为疾病的诊断、病情监测、药物疗效、预后判断和疾病预防等各个方面提供理论和试验依据，也促进了临床医学的发展。 第一章糖代谢检查 一、糖的无氧酵解途径（糖酵解途径） ★概念：在无氧情况下，葡萄糖分解生成乳酸的过程。 1、关键酶：己糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶 2、三步不可逆反应： ①葡萄糖磷酸化成为葡萄糖-6-磷酸，由己糖激酶催化。为不可逆的磷酸化反应，消耗1分子ATP。 ②果糖-6-磷酸磷酸化，转变为1,6-果糖二磷酸，由磷酸果糖激酶催化，消耗1分子ATP。是第二个不可逆的磷酸化反应。 ③磷酸烯醇式丙酮酸经丙酮酸激酶催化将高能磷酸键转移给ADP，生成丙酮酸和ATP，为不可逆反应。
3、两次底物水平磷酸化（产生ATP）： ①1,3-二磷酸甘油酸→3-磷酸甘油酸 ②磷酸烯醇式丙酮酸→丙酮酸 4、1分子的葡萄糖通过无氧酵解可净生成2个分子ATP，糖原可净生成3分子ATP，这一过程全部在胞浆中完成。 5、生理意义： （1）是机体在缺氧/无氧状态获得能量的有效措施。 （2）机体在应激状态下产生能量，满足机体生理需要的重要途径。 （3）糖酵解的某些中间产物是脂类、氨基酸等的合成前体，并与其他代谢途径相联系。 依赖糖酵解获得能量的组织细胞有：红细胞、视网膜、角膜、晶状体、睾丸等。 二、糖的有氧氧化 ★概念：葡萄糖在有氧条件下彻底氧化成水和二氧化碳的过程，是糖氧化的主要方式。 1、四个阶段：①葡萄糖或糖原经糖酵解途径转变为丙酮酸；②丙酮酸从胞浆进入线粒体，氧化脱羧生成乙酰辅酶A；③乙酰辅酶A进入三羧酸循环，共进行四次脱氢氧化产生2分子CO2，脱下的4对氢；④经氧化脱下的氢进入呼吸链，进行氧化磷酸化，生成H2O和ATP。 2、关键酶：柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶、α-酮戊二酸脱氢酶系。 3、1分子葡萄糖彻底氧化为CO2和H2O，可生成36或38个分子的ATP。 4、乙酰辅酶A不可以转变为其他物质，只能通过三羧酸循环氧化分解功能。
临床检验基础尿液检验重点整理加油吧医学生
尿液部分 尿液的采集 指导病人后让其自行留取,取清洁中段尿,适用于尿常规检查、细菌检查与细胞学检查。 要求病人清洗手及外生殖器,一般留取中段尿到适当的未受污染的容器中。女性要防止阴道分泌物污染,婴幼儿要避免粪便污染。 晨尿:指清晨起床后、未进早餐与做运动之前第一次排出的尿液。 第二次晨尿:指采集晨尿后2~4小时内的尿液。(要求从前一天晚上到采集此次尿液标本时,只饮水200ml) 随机尿:指患者无需任何准备、不受时间限制、随时排出的尿液标本。 餐后尿:指午餐后2~4小时内的尿液。 3小时尿:上午6时~9时的尿液称为3小时尿。 12小时尿:从晚上8时开始到次日早晨8时终止的12小时内的全部尿液。 24小时尿:采集的当天,患者排空膀胱并弃去尿液,从此时开始计时并采集尿液,将24小时内的尿液全部采集于容器中;结束采集的次日(24小时后),患者排空膀胱,且将尿液采集于同一容器内。如此采集的尿液称为~。 【小知识点】 尿液检查一般应在收到标本后迅速进行。一般2h内送检,30min内完成检测。 如不能及时送检或分析,必须采取保存措施。常用的方法有冷藏法与化学防腐法。 尿量:指24小时内排出体外的尿液总量。 【参考区间】 成人1~2L/24h,即1ml/(h*kg);儿童按体重计算尿量,大约为成年人的3~4倍。 【相关内容】 一、多尿(polyuria):就是指成人24小时的尿量超过2、5L,儿童24小时尿量超过3L。 在正常情况下多尿常见于饮水过多、精神紧张等。此外,静脉输液过多或应用某些药物(如咖啡因、利尿剂等)也可以导致多尿。 病理性多尿常因肾小管重吸收功能与浓缩功能减退所致,可见于以下几种情况: 糖尿病:因尿中葡萄糖含量增高所致,属于溶质性利尿。 肾脏疾病:多种肾脏疾病,因肾小管破坏致使尿浓缩功能减退,均可导致多尿,其特点为夜尿增多。 内分泌疾病:如尿崩症,该病就是由于下丘脑-垂体受损,抗利尿激素分泌减少或缺乏,或由于
初级临床医学检验技师基础知识-26 (总分48.5,考试时间90分钟) 以下 ...
初级临床医学检验技师基础知识-26 (总分48.5,考试时间90分钟) 以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案。 1. 下列哪种方法不能用于蛋白质的分子量测定____ A. 沉降分析法 B. 凝胶过滤 C. 凝胶电泳 D. 质谱法 E. 盐析法 2. 影响蛋白质等电点(pI)值最主要的因素是____ A. 溶液的pH值 B. 溶液的离子强度 C. 氨基酸组成 D. 光学性质 E. 溶解度 3. 凝胶过滤分离蛋白质的原理所利用的是____ A. 在某个体系内该蛋白质的含量的多少 B. 蛋白质所含酸性氨基酸的多少 C. 蛋白质是清蛋白还是球蛋白 D. 蛋白质所带电荷的多少 E. 蛋白质的分子大小 4. 下列蛋白质通过凝胶层析柱时最先被洗脱的是____ A. 纤维蛋白原(分子量340000) B. 血清清蛋白(分子量68500) C. 肌红蛋白(分子量16900) D. 牛胰岛素(分子量5700) E. 牛β乳球蛋白(分子量35000) 5. 可用于贫血的鉴别诊断的蛋白质是____ A. 前清蛋白 B. 转铁蛋白 C. 清蛋白 D. 免疫球蛋白 E. C-反应蛋白 6. 急性炎症性疾病时血浆蛋白浓度出现低下的是____ A. 铜蓝蛋白 B. C-反应蛋白 C. 前清蛋白 D. α1-酸性糖蛋白 E. α1-抗胰蛋白酶 7. 在醋酸纤维薄膜电泳通常位于α2-区带位置的蛋白质是____ A. 免疫球蛋白 B. 清蛋白 C. 铜蓝蛋白 D. 甲胎蛋白 E. 纤维蛋白原 8. 目前一般认为蛋白质的含氮量为____ A. 16% B. 30%
C. 40% D. 50% E. 80% 9. 多发性骨髓瘤诊断依据之一是血清蛋白电泳图谱出现____ A. α1-球蛋白↑ B. γ和β区带或γ和β之间有—条密集，染色深的区带 C. γ-球蛋白↑ D. β球蛋白↑ E. α2-球蛋白↑ 10. 痛风病的发生与下列何者有关____ A. 氨基酸代谢紊乱 B. 蛋白质代谢紊乱 C. 核酸代谢紊乱 D. 脂类代谢紊乱 E. 糖代谢紊乱 11. 干扰素受体属于____ A. 免疫球蛋白基因超家族 B. 趋化细胞因子受体 C. Ⅰ型细胞因子受体家族 D. Ⅱ型细胞因子受体家族 E. Ⅲ型细胞因子受体家族 12. 人类HLA-Ⅰ类抗原β链编码基因的染色体定位是____ A. 第15号染色体短臂 B. 第6号染色体长臂 C. 第9号染色体长臂 D. 第2号染色体短臂 E. 第6号染色体短臂 13. T细胞中参与非特异性免疫应答的亚群是____A.TH细胞 B.Tc细胞 C.TCRαβ+细胞 D.TCRγδ+细胞 E.TDTH 14. 巨噬细胞可提呈____ A. TI-抗原 B. 细菌抗原 C. 病毒抗原 D. 肿瘤抗原 E. LPS 15. 下列哪种标志不出现于B细胞表面____ A. MHC-Ⅰ类分子 B. MHC-Ⅱ C. PWM-R D. C3b受体 E. CD2分子 16. T、B细胞表面共有的标志是____ A. CD3 B. PWM-R C. 绵羊红细胞受体 D. 补体受体 E. CD80分子 17. 出生后，人类的造血干细胞的主要来源是____ A. 胸腺 B. 淋巴结 C. 骨髓 D. 肝脏 E. 卵黄囊 18. 诱导髓样干细胞向红细胞分化的主要细胞因子是____ A. IL-3 B. GM-CSF C. IL-7 D. G-CSF E. EPO
常规生化检验项目各项指标参考范围及临床意义
常规生化检验项目各项指标参考范围及临床意义(1) ?注：以下各项所述临床意义，仅是表明患某些疾病的可能性，并不表示一定患有某病。请勿随便对号入座！如有疑问请至医院由专业医生结合体格检查等后确诊！！！ ?检验项目???谷丙转氨酶 ?英文缩写??? ALT 正常参考值? 0-40IU/L 临床意义?增高：常见于急慢性肝炎，药物性肝损伤，脂肪肝，肝硬化，心梗，胆道疾病等。检验项目???谷草转氨酶 英文缩写??? AST 正常参考值? 0-40I/L 临床意义???增高：常见于心梗，急慢性肝炎，中毒性肝炎，心功能不全，皮肌炎等。 检验项目???转肽酶 英文缩写??? GGT 正常参考值? 0-40IU/L 临床意义???增高：常见于原发性或转移性肝癌，急性肝炎，慢性肝炎活动期，肝硬化，急性胰腺炎及心力衰竭等。 检验项目???碱性磷酸酶 英文缩写??? ALP
正常参考值? 30-115IU/L 临床意义???增高：常见于肝癌，肝硬化，阻塞性黄疸，急慢性黄疸型肝炎，骨细胞瘤，骨折及少年儿童。 检验项目???乳酸脱氢酶 英文缩写??? LDH 正常参考值? 90-245U/L 临床意义???增高：急性心肌梗塞发作后12-48小时开始升高，2-4天可达高峰，8-9天恢复正常。另外，肝脏疾病恶性肿瘤可引起LDH增高 检验项目??总胆红素 英文缩写?? TBIL 正常参考值? 4.00-17.39umol/L 临床意义???增高：原发生胆汁性肝硬化急性黄疸型肝炎，慢性活动期肝炎，病毒性肝炎。肝硬化，溶血性黄疸，新生儿黄疸，胆石症等 检验项目???直接胆红素 英文缩写??? DBIL 正常参考值? 0.00-6.00umol/L 临床意义???增高：常见于阻塞性黄疸，肝癌，胰头癌，胆石症等。 检验项目? ??游离胆红素 英文缩写??? IBIL 正常参考值? 0.00-17.39umol/L
临床检验基础重点整理
教材：人民卫生出版社《临床检验基础（第5版）》 血液部分 红细胞计数（RBC）：测定单位体积血液中红细胞的数量。 【计数方法】显微镜计数法： 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数（一般200倍）后，滴入血细胞计数盘，然后于显微镜下，计数一定范围内的红细胞数，经过换算即可求得每升血液中的红细胞数。 计算：红细胞数/L=5个中方格内红细胞×5 ×10 ×200 ×10^6/L
【参考值】 成年男性：（4. 0~5. 5）×10^12/L，成年女性：（3. 5~5. 0）×10^12/L；新生儿：（6. 0~7. 0）×10^12/L 低于3.5×10^12/L可诊断为贫血，低于1.5×10^12/L应考虑输血。 【临床意义】 1、病理性增多 相对性增多：血浆水分丢失，有形成分相对增加，绝对值没有发生变化 绝对性增多：继发性（心、肺疾病、异常血红蛋白病、某些肿瘤等）；原发性（真性红细胞增多症） 2、病理性减少 骨髓造血功能低下（再障）；造血原料缺乏（缺铁贫、巨幼贫）；红细胞破坏增加（溶贫）；红细胞丢失过多 红细胞比积（HCT/PCV）：指红细胞在全血中所占体积百分比。 【参考值】（温氏法） ①成年：男性0．40～0. 50，女性0．37～0. 48；②新生儿0.47~0.67；③儿童：0.33~0.42。【临床意义】 增高：1. 血液浓缩；2. 红细胞增多症；3. 新生儿。降低：1. 贫血；2. 其他原因的稀血症 应用：1. 疗效观察；2. 计算红细胞指数 血红蛋白(Hb)：是在人体有核红细胞及网织红细胞内合成的一种含色素辅基的结合蛋白质，是红细胞内的运输蛋白。 【检测原理】 血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SHb外各种血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白（Hi），Hi与氰化钾的氰根（CN-）生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白（HiCN），HiCN在540nm有吸收峰。在特定的实验条件下，可测得吸光度并计算Hb（G/L）。但在实际工作中，一般实验室的分光光度计达不到WHO规定的标准条件，所以利用Hb参考液制备标准曲线，换算出Hb（G/L）。 【参考值】 成年男性：120-160 g/L，成年女性：110-150 g/L；新生儿：170-200 g/L
临床生化检验名解
急性时相反应（APR:对炎症和组织损伤的非特异性反应，血浆蛋白质（如a 1-抗胰蛋白酶、a 1-酸性糖蛋白、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、C4、C3纤维蛋白原和C-反应蛋白等）浓 度显着升高，而血浆前清蛋白、清蛋白、转铁蛋白浓度则出现相应下降，此炎症反应过程称为急性时相反应。该过程中出现的蛋白质统称为急性时相反应蛋白（APRP。增加的蛋白 质称为正相APP减少的蛋白质称为负相APR M蛋白：为浆细胞病患者异常浆细胞克隆增殖，而产生的大量单一的免疫球蛋白或其轻链或重链片段，病人血清或尿液中的M蛋白在蛋白电泳时呈现一条色泽深染的窄区带。 C反应蛋白在急性炎症病人血清中出现的可以结合肺炎球菌细胞壁C-多糖的蛋白质，是急 性时相反应时极灵敏的指标，升高早且程度高。 血浆运载蛋白在血浆中能结合其他物质并对之起运输载体作用的蛋白质，如ALB、PA、HDL、LDL、TRF等。 前清蛋白由肝细胞合成、分子量比清蛋白小，电泳位置在清蛋白之前的蛋白质，主要起运输载体和营养蛋白作用。 痛风（gout ）由于遗传性和（或）获得性的尿酸排泄减少和（或）嘌呤代谢障碍，导致高尿酸血症，当出现尿酸盐结晶形成和沉积，并引起特征性急性关节炎、痛风石、间质性肾炎、尿酸性尿路结石时，即为痛风，严重者有关节畸形及功能障碍。痛风是一组疾病，高尿酸血症中10%?20%发生痛风。 氨基酸血症：氨基酸或其中间代谢物或其旁路代谢物在血液中增高称为氨基酸血症 空腹血糖FPG：是指8 小时内不摄入含热量的食物后，所测得的静脉血浆葡萄糖浓度。FPG 为糖尿病最常用检测项目，若空腹血糖浓度不止一次高于7.0mmol/L 即可诊断为糖尿病。糖尿病是一组由于胰岛素分泌不足或（和）胰岛素作用低下而引起的代谢性疾病，高血糖是其特征。长期高血糖将导致多种器官的损害、功能紊乱和衰竭，尤其是眼肾神经、心脏和血管系统。两种病理过程参与糖尿病的发病机制： 胰岛B细胞的自身免疫性损伤及机体对胰 岛素的作用产生抵抗。妊娠期糖尿病指在妊娠期间任何程度的糖耐量减退或糖尿病发作。 低血糖症指血糖浓度低于空腹参考水平下限。低血糖由多种原因引起，其症状主要是由交感神经兴奋和脑缺血所致，临床分为空腹性低血糖和反应性低血糖。其诊断主要依据多次连续测定空腹血浆葡萄糖浓度或在发作时测定血糖和OGTT胰岛素和C肽等其他相关指标。 反应性低血糖一种临床疾病，病人在日常生活中有餐后症状，毛细血管血或动脉血浆葡萄糖浓度低于2.5 ?2.8mmol/L 。 OGTT指口服葡萄糖耐量试验。口服一定量葡萄糖后，2小时内做系列血浆葡萄糖浓度测定， 以评价不同个体对血糖的调节能力的一种标准方法，并对确定健康和疾病个体也有价值。 OGTH匕空腹血糖更灵敏，但重复性差。 糖尿病前期（pre-diabetes）（1 ）空腹血糖受损（IFG）: 反映了基础状态下糖代谢稳态的轻度异常。（2）糖耐量减退（IGT）: 反映负荷状态下机体对葡萄糖处理能力的减退。（3）糖调节受损（IGR）:作为糖尿病的前期阶段，将IFG和IGT统称为IGR。它们可单独或合并存在。 胰岛素抵抗IR :是指单位浓度的胰岛素细胞效应减弱，即机体对正常浓度胰岛素的生物反应性降低的现象，是2型糖尿病的肥胖等多种疾病发生的主要诱因之一。 糖化血红蛋白GHb是血红蛋白与血糖进行非酶促反应结合的产物，他们的糖基化位点是血红蛋白B链N末端的缬氨酸残基，其生成是一个缓慢的不可逆过程，生成量与血糖的浓度和高血糖存在的时间相关。反映过去 6~8 周的平均血糖浓度，为评估血糖的控制情况提供可靠的实验室指标。 高脂蛋白血症：是指血浆中CM VLDL LDL、HDL等脂蛋白有一种或几种浓度过高的现象。 血脂血浆脂类简称血脂，包括游离胆固醇、胆固醇酯、磷脂、甘油三酯、糖酯、游离脂肪酸等，无论是外源性或内源性脂类均以脂蛋白复合体形式在血液循环中运输。 载脂蛋白脂蛋白中的蛋白部分称为载脂蛋白。它构成并稳定脂蛋白的结构，修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的活性，还可以作为脂蛋白受体的配体，参与脂蛋白与细胞表面脂蛋白受体的结合及其代谢过程。 LDL受体途径LDL或其他含ApoBlOO E的脂蛋白如VLDL 3 -VLDL均可与LDL受体结合，内吞入细胞使其获得脂类，主要是胆固醇，这种代谢过程称为LDL受体途径。该途径依赖于LDL受体介导的细胞膜吞饮作用完成。 SRCR清道夫受体富含半胱氨酸域。是I型清道夫受体C-端侧特异域肽段，该段富含半胱氨酸。清道夫受体的8个半胱氨酸有6个在此范围，半胱氨酸的二硫键交联而成的区域非常紧密、牢固，形成球状，足以经受细胞外环境的影响，属于细胞外区域。 胆固醇的逆转运周围组织细胞膜的游离胆固醇与HDL结合后，被LCAT酯化成胆固醇酯，移
临床检验基础 重点
Hi ，Hi 与氰离子反应生成棕红色HiCN ，在540nm 处有最大吸收峰，且其吸光度与溶液浓度成正比而检出Hb 浓度。 / 注意：分光光度计必须符合WHO 标准，否则：1HiCN 参考液制作标准曲线或者计算K 值 2带标准直接计算 测定Hb 的方法学评价 1. HiCN 法：ICSH 和WHO 推荐参考方法 操作简便，结果稳定可靠，可测多种Hb （SHb 除外），可直接定值 /缺点：剧毒，不能测SHb ，对HbCO 转化慢，脂血、高球蛋白、高白蛋白、血小板增多可导致Hb 假性增高 2.SDS 法：临床首选/优点：试剂无毒,缺点：ε未定，需依赖HiCN 法间接得出结果， SDS 会破坏WBC ，不能用于WBC 计数 RBC 、Hb 测定的临床意义 1.RBC 、Hb 降低（低于参考值下限指示贫血） 1)生理性减少（生理性贫血）1、6个月-2岁婴幼儿（造血原料不足）2、妊娠中、晚期（血液稀释）3、老年人（造血功能减退） 2）病理性减少：RBC 生成少、破坏多、丢失多 2．RBC 、Hb 升高1）生理性增多：新生儿、高原生活、剧烈运动（缺氧）；成年男性比女性高（雄性激素水平较高） 2）病理性增多 1、相对性增多：血液浓缩：如剧烈呕吐、严重腹泻、 大面积烧伤患者2、绝对性增多：慢性心肺疾病、真红，RBC 可达（7-10）×1012 /L 贫血病因分类：1、骨髓造血功能低下：如再障、白血病、恶性肿瘤骨髓转移等 2、造血原料缺乏：如缺铁性贫血、巨幼贫 3、红细胞破坏增加：各种溶血性贫血 4、红细胞丢失过多：急、慢性失血 Hct 的方法及意义方法主要为离心法：温氏法和微量法 / 意义：略高：1血液浓缩：如大量出汗、呕吐、腹泻、大面积烧伤；2红细胞增多症：如真红，有时可高达80%3新生儿, 降低：各种贫血，但减少程度不一定与RBC 一致. 可用作真红、输血及输液疗效观察指标。 用作计算MCV 和MCHC 血液流变学指标之一，增加表明血↑；缺铁贫和巨幼贫正常或轻度↑2）减少：骨髓造血功能低下：绝对值<15×109 /L ：再障 2、作为贫血治疗的疗效观察指标 1）缺铁贫和巨幼贫治疗后，先Ret ↑，后RBC 和Hb 逐渐↑ 2）溶血和失血性贫血治疗后：Ret 逐渐降低，已得到控制；持续高值，未控制或加重。 3、网织红细胞成熟指数（RMI ）骨髓造血的早期标志 4、未成熟网织红细胞比值（IRF ） 5、RPI ESR 影响因素+意义 1）血浆因素 增快：纤维蛋白原、球蛋白、胆固醇、甘油三酯 减慢：清蛋白、糖蛋白及卵磷脂 2）红细胞因素 红细胞的数量和形态 3）其他因素 血沉管的位置，温度 / 临床意义：1、生理性血沉增快:老年人,妇女月经期,妊娠三个月以上血沉逐渐增快可达30mm/h 2、病理性血沉增快1）各种炎症：急性细菌性炎症、风湿热、结核活动期2）组织损伤及坏死：心肌梗死增快，心绞痛正常（鉴别）3）良、恶性肿瘤的鉴别：恶性肿瘤多增快，良性肿瘤多正常4）高球蛋白血症：SLE 、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等5）贫血：越重越快6）高胆固醇血症：动脉粥硬化、糖尿病等 3、减慢：真性红细胞增多、脱水、DIC WBC ：中性粒数量变化：多数情况一致，也可以不一致 1）中性粒生理性增多1、年龄2、日间变化：下午较高3、剧烈运动、激动、严寒、暴热等4、妊娠、分娩 2）中性粒病理性增多 1、急性感染：化脓性球菌最常见 2、严重的组织损伤及大量血细胞破坏；严重的烧伤、大手术后、心肌梗死、急性溶血 3、急性大出血：内脏破裂、宫外孕破裂4、急性中毒：化学药物、代谢性中度 5、恶性肿瘤 6、白血病 3）中性粒减少 1、某些感染：伤寒、副伤寒、流感 2、某些血液病：再障 3、慢性理化损伤：X 射线、氯霉素 4、自身免疫性疾病：SLE 5、脾功能亢进 淋巴细胞的临床意义1）淋巴细胞增多 1、绝对增多：某些病毒或细菌所致的传染病；某些传染病恢复期；肾移植排异反应前期；急淋、慢淋；某些慢性感染 2、相对增多：再障、粒缺2）淋巴细胞减少 ：放射线、肾上腺皮质激素；N ↑可导致L ↓（相对） 单核临床意义 增多： 1、某些感染：亚急性感染性心内膜炎、急性感染的恢复期、肺结核 2、某些血液病：单核细胞性白血病、恶性组织细胞病、淋巴瘤及MDS 嗜酸粒 1、增多 超敏反应；寄生虫病；某些皮肤病；血液病：如慢粒 2、减少 伤寒、副伤寒、大手术后；长期使用肾上腺皮质激素 嗜碱粒 增多：慢粒、嗜碱性粒细胞性白血病 嗜酸性粒细胞直接计数原理+意义：采用嗜酸性粒细胞稀释液讲血液稀释一定倍数，红细胞和大部分其他白细胞被破坏，E 着色，充池计数经换算得每升血液中E 数 / 意义 1、生理变化 1）劳动、寒冷、饥饿、神经刺激，E ↓（肾上腺皮质激素组织骨髓释放E ，并促使血中E 向组织浸润） 2）日间变化：白天较低，夜间较高；上午波动较大，下午比较恒定。 2、嗜酸性粒细胞增多 1）过敏性疾患：支气管哮喘、血管神经性水肿、食物过敏 2）寄生虫：钩虫、蛔虫等 3）某些传染病：猩红热4）慢粒白血病5）某些恶性肿瘤：淋巴系统恶性疾病（如霍奇金）、肺癌 3、嗜酸性粒细胞减少 伤寒、副伤寒、大手术后严重组织损伤以及应用肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素后。 4 、嗜酸性粒细胞计数的其他应用1）观察急性传染病的预后：2）观察手术和烧伤病人的预后3）测定肾上腺皮质功能 白细胞分类原理 三分类：电阻抗法,五分类：多项技术联合检测 1电阻抗法：溶血处理后白细胞体积，区别小细胞群（L ），中间细胞群（M 、E 、B ）和大细胞群（N ） 2光散射与细胞化学计数联合白细胞分类计数过氧化物酶染色：活性E 、N 、M 依次降低，L 、B 无活性 3容量、电导、光散射（VCS ）白细胞分类法,电阻抗法测量体积V ,高频电磁针测量细胞内部结构电导C ,光散射S 区别细胞颗粒的结构和颗粒的质量 4阻抗与射频技术联合白细胞分类法DC 通过四个不同的检测系统:嗜酸粒检测系统；嗜碱粒检测系统；淋巴、单核、粒细胞检测系统；幼稚细胞检测系统 5多角度偏振光散射白细胞分类技术 0°前角光散射测细胞大小 10°狭角光散射测细胞结构 90°垂直光散射测细胞的内部颗粒和细胞成分 90°消偏振光散射将E 从其他白细胞中分离出来 血细胞分析仪的检测参数及意义(1)RDW 红细胞体积分布宽度：参考<14.9% / 1、用于贫血的形态学分类（RDW/MCV ） 2、诊断缺铁贫。95%以上缺铁贫RDW 异常。小细胞低色素贫血、RDW 正常则缺铁贫可能不大。 3、缺铁贫与轻型地贫的鉴别。前者RDW 增高，后者正常。 (2)MPV 平均血小板体积：参考 7.6-13.2fl / 结合PLT 的变化，MPV 越大，新生血小板越多1、增大：血小板破坏增多，骨髓纤维化、血栓性疾病、脾切除、慢粒等 2、减少：骨髓造血功能损伤致血小板减少 常用筛选实验 BT 、PLT 、APTT 、PT 、D-D 临床应用 BT ：延长：血管壁异常；血小板异常；血管性血友病等 ,缩短：心梗、脑血管病变及DIC 等 PLT ： 生理变化：早晨较低，午后较高；剧烈运动后较高；月经、妊娠有改变；静脉血比毛细血管血高。 / 病 理变化：1）血小板减少（PLT<100×109 /L ）血小板生成障碍：再障、放射性损伤、急性白血病,血小板破坏或消 耗增多：ITP 、DIC , 血小板分布异常：脾肿大、血液被稀释 2）血小板增多（PLT>400×109 /L ） 原发性增多：慢粒、真红 反应性增多：急性化脓性感染、急性大出血等 APTT ： 1推荐应用的内凝筛选实验 2延长 1）Ⅷ、Ⅸ和Ⅺ减低，能检出Ⅷ：C 小于25%的轻型血友病 2）Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ严重缺乏，如肝病，维生素K 缺乏 3）抗凝物质：口服抗凝剂、血循环中存在病理性抗凝物质等 4）纤溶活性增强 3缩短 1）高凝状态，如DIC 的高凝期2）血栓性疾病，如心、脑血管病变，深静脉血栓等 4检测肝素治疗的首选指标 PT 1延长1）先天性凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏2）获得性凝血因子缺乏，如严重肝病、维生素K 缺乏、纤溶亢进、DIC 晚期3）血中抗凝物质增加，口服抗凝剂、肝素等 2缩短: DIC 早起，心梗、脑血栓行测好难过,3INR 是用于监测口服抗凝药的首选指标 D-D 增高：继发性纤溶（鉴别原发）。血栓性疾病、肿瘤,溶栓治疗的监测：D-D 显著升高 尿液检验目的？1.泌尿系统疾病诊断及疗效判断 2.其他系统疾病的诊断及鉴别诊断 3.安全用药监测 4.重金属中毒检查（职业病防护） 5.健康体检 尿液标本采集有哪些种类、方法和临床应用？ １.晨尿 : ①首次晨尿:肾脏浓缩功能评价,有形成分、化学成份(HCG). ②二次晨尿:细菌培养、有形成分计数. ２.随机尿 适于门诊、急诊。 ３.计时尿 ①3h 尿: 6-9am. 尿有形成分排泄率;②餐后2h 尿 ：病理性尿胆原、糖尿、蛋白尿等③12h 尿：晚上8点-次晨8点, :Addis 计数、蛋白排泄率等。 ④24h 尿：大容器(＞4L),防腐,收集完全,测尿总量,混匀,适量送检(50ml)；尿中化学成分、T.B 排出量,电解质等。 4.特殊尿标本①尿三杯试验②无菌尿液：细菌培养、药敏等。 尿液标本采集质量保证 1.尿液采集标准操作规程（SOP ） 2.检验项目选择与申请 3.患者准备:告知、控制 4.标本采集：器材、运送 5.人员职责 尿液标本保存有哪些方法 1.低温冷藏:2℃～8 ℃，6h 内，有形成分保存。 2.冰冻 －20℃～－70℃，离心，除去有形成分，冰冻上清液(化学成分)。 3.化学防腐 ①甲醛:有形成分形态固定。 ②甲苯 尿化学成分定性或定量。 ③麝香草酚:有形成分镜检、尿浓缩T.B 、化学成分。 ④浓盐酸 化学成分定量。 ⑤其他：冰乙酸:戊二醛:碳酸钠 尿液理学检查有项目及临床意义①尿量：1.少尿：<400ml/24h 或<17ml/h ，无尿: <100ml/24h 。肾前性少尿：休克、心衰、脱水。肾性少尿：急性肾炎、肾衰。肾后性少尿：尿路梗阻 2.多尿>2.5L/24h 肾性多尿：慢性肾炎、慢性肾衰早期等。内分泌性多尿：尿崩症、甲亢。代谢性多尿: 糖尿病 ②尿色及透明度: 1.血尿:泌尿生殖系统疾病：炎症、结石等/全身性疾病：血友病等/邻近器官疾病/药物不良反应。 2.血红蛋白尿:血管内溶血，如蚕豆病、输血反应等 3.肌红蛋白尿:肌肉组织广泛损伤、变性，如急性心梗等。 4.胆红素尿:见于阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸。 5.乳糜尿:寄生虫（丝虫）或非寄生虫（结核、肿瘤、创伤、手术等）。 6.脓尿/菌尿:泌尿生殖系统感染。 7.结晶尿:正常尿、结石、痛风、药物等 ③尿比密 方法+评价：1.比重计法：需校正;操作繁、标本量大、影响（温度,蛋白,葡萄糖等）2.折射仪法：标准 3试带法: 简便，但干扰多，测定范围窄，精密 度差，过筛试验 临床意义：1. SG ↓：低比密尿SG ＜1.015见于尿崩症、慢性肾炎等。/ 比密低而固定：SG 固定于1.010±0.003, 呈等渗尿，表示肾实质严重损害。 2. SG ↑ 见于： 急性肾小球肾炎.糖尿病.肾前性少尿疾病如高热、脱 水等 2.鉴别肾前性或肾性少尿:肾前性少尿：Uosm ＞450mOsm/kg. H2O,肾性少尿：Uosm ＜350m 3.利用渗透清除率计算自由水清除率 尿蛋白定性试验+原理+评价+注意事项 ①试带法:（筛查。） ②加热醋酸法：加热加酸→蛋白沉淀 / 准确,A 、 G 均敏感；灵敏度较低, 操作较繁。 ③磺基水杨酸法(SSA):蛋白质NH 4+ ＋磺酸根－→蛋白盐沉淀 / 简便，灵敏度高，多种蛋白均反应；推荐确诊实验。 尿蛋白定量试验+评价 ①磺基水杨酸-硫酸钠比浊法：线性范围窄,影响多，欠准确。 ②双缩脲比色法：对A/G 均敏感；灵敏度较低，操作繁。 ③丽春红S 染料结合法：灵敏度很高，对A/G 均敏感，线性范围宽，干扰少；但操作繁。 ④其他：免疫法、尿蛋白电泳 / 灵敏、特异，前景好。 蛋白尿临床意义１.肾小球性蛋白尿：原发性肾小球损害性疾病、肾病综合征和某些继发性肾小球损害性疾病如糖尿病等。分为：选择性蛋白尿，非选择性蛋白尿 2.肾小管性蛋白尿 ：肾盂肾炎、间质性肾炎,中毒 3.混合性蛋白尿 . 4.溢出性蛋白尿：本周氏蛋白尿，血红蛋白尿、肌红蛋白尿。5.组织性蛋白尿：肾小管炎症、中毒等 6.假性(或偶然性)蛋白尿：膀胱炎、尿道炎等或阴道分泌物混入。 7. 生理性蛋白尿:功能性蛋白尿，体位性蛋白尿 （各种特点见名解） 尿糖定性试验 ①班氏糖定性（Benedict test ）:利用葡萄糖还原性将硫酸铜还原; / 简便，灵敏,特异性差，有假+（VitC 等）。 ②试带法 ③薄层层析法 尿糖定量试验 ①葡萄糖氧化酶(GOD)法:同血糖测定, 先以班氏法定性,再稀释至3g/L 以下。/ 灵敏、特异，抗VitC 等干扰；用于治疗监测及用药调整。 ②薄层层析法 临床意义 ①血糖增高性糖尿：摄入性,应激性(颅脑外伤、急性心梗),代谢性:糖尿病,内分泌性(血糖↑— 胰高糖素、甲状腺激素、生长激素、（去甲）肾上腺素、糖皮质激素,血糖↓— 胰岛素) ②血糖正常性糖尿：肾性糖尿,肾糖阈降低。 ③其它: 乳糖尿等。 尿胆红素检查方法：①重氮法:强酸介质中,Bil 与重氮盐偶联反应,产生红色偶氮化合物.(试带法)。/ 灵敏度较低，简便、快速，多假+/-，筛检。 ②氧化法:1.Harrison 法: 以钡盐吸附胆红素并浓缩，酸性三氯化铁氧化胆红素为胆绿素呈现绿色；/ 灵敏、准确，为确证试验；但操作较繁，假+(水杨酸等)。 2.Smith 碘环法:碘氧化胆红素呈绿色环。简单,灵敏度低。 尿胆原检查 ①改良Ehrlich 法:②试带法 尿酮体检测方法：①亚硝基铁氢化钠法:乙酰乙酸、 丙酮与亚硝基铁氢化钠反 ,灵敏度和特异性不同；试带法:筛检法,敏感、方便、快速；②Gerhardt 法 临床意义 ①糖尿病酮症酸中毒(Diabetic ketoacidosis)：早期β-羟丁酸为主，缓解后乙酰乙酸↑。 ②非糖尿病酮症：剧烈运动、禁食、发热、严重呕吐腹泻等。 直接涂片法 优点：简便，不影响有形成分形态 / 缺点：易漏诊 / 应用：血尿、脓尿者 离心涂片法 优点：敏感,阳性率高 / 缺点：操作不易规范，报告不统一，离心可破坏形态，使形态区分困难或漏检。 / 应用：有形成分较少的标本，多用于试带法后确诊。 尿有形成分包括哪些内容? 细胞（红，白），管型，结晶，其他成分。 管型形成条件：①白蛋白或T-H 蛋白→基质，首要条件 ②浓缩和酸化沉淀→蛋白质 ③可供交替使用的肾单位→足够的时间形成 ④尿流缓慢，有局部性尿液淤积 化学法检测尿隐血原理？Hb 亚铁血红素→催化过氧化氢作为电子受体使色原氧化呈色。 尿试带法测定各项目的原理如何? 1.蛋白质PRO ：指示剂蛋白误差法（溴酚蓝）, 2.葡萄糖GLU ：葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD)法 3.亚硝酸盐NIT ：亚硝酸盐还原法 4.尿比密SG ：多聚电解质离子解离法。 5.酸碱度pH ：酸碱指示剂法 6.酮体KET ：亚硝基铁氰化钠法 7.胆红素BIL ：重氮反应原理 8.尿胆原URO ：醛化反应或偶氮法。 9.红细胞/血红蛋白/隐血(ERY/Hb/OB)：血红蛋白类过氧化物酶法。 10.白细胞LEU ：白细胞酯酶法 11.维生素CVitC ：还原法 尿液干化学分析质量控制㈠分析前质量保证 1.试带: 批号、避光、干燥 2.标本: 接受时间（2h 内检测）3.容器: 塑料、标记 4.饮食、用药 ㈡分析中质量保证 1.严格按规定要求操作 2.用质控人工尿液进行室内质控 3.质量控制标准 ㈢分析后质量保证 1.判断影响因素 2.检验报告的审核,签发①正确分析干化学与镜检结果相关性，②确证实验或参考方法 脑脊液检查适应性禁忌症 适应症:有脑膜刺激征(颈强直、布氏征、克氏征),疑有脑出血,原因不明的剧烈头疼，昏迷、抽搐或瘫痪 / 禁忌症：颅内压明显↑病情危重,局部皮肤感染 潘氏实验原理+评价+蛋白质增加意义CSF 中球蛋白与苯酚相结合形成不溶性蛋白质沉淀。/ 评价：优点：操作简便，快速，所需标本少，灵敏度高。缺点：假阳性率偏高。/ 蛋白质增加的意义：1.中枢神经 系统感染：病脑+ 结脑++ 化脑+++ 2.蛛 网膜下隙或脑室陈旧性出血 3.脑肿瘤 4.脑神经根病变 5.椎管内梗阻 脑脊液显微镜检查意义 1.中枢神经系统WBC+++（分叶为主） 2.脑寄生虫病：嗜酸性粒细胞增高 3.蛛网膜下隙或脑室出血：RBC 升高。 一、对涂片的满意程度：满意、不满意； 二、细胞学诊断：1.未见癌细胞和癌前病变细胞；2.病原体 3.反应性细胞改变①炎症有关②萎缩（有或无炎症）③宫内节育器④与放疗有关； 4.上皮细胞异常：鳞状上皮细胞异常（不典型鳞状上皮细胞、鳞状上皮内病变、鳞状细胞癌）腺上皮异（不典型腺体细胞性质未定、非典型颈管腺细胞倾向瘤变、颈管原位腺癌和腺癌） 测定临床意义1.早期妊娠的诊断 2.协助 3.流产诊断及保胎监护 4.绒 5.肿瘤 特异性阴道炎：清洁度异常，同时 / 非特异性 1.线索细胞 2.PH 大 4.5 3.胺试验阳性（加10%KOH ，因产氨而释放出鱼腥味臭味 4.阴道分泌物呈稀薄，乳白色奶油状。（线索细胞加 任意两项便可诊断） -- 精索静脉曲张：无力型精子症 3.死精子＞50%—死精子症 精子计数意义（1）少精子症，精子计数＜20×109/L ① 睾丸病变精索静脉曲张、睾丸炎、睾丸肿瘤。 ②输精管疾病输精管精道阻塞、输精管精道先天性缺如和免疫性不育。 ③其它逆行射精、有害金属或放射性损害、环境因素，老年人，药物（长期用棉酚）。 （2）无精子症：严重的睾丸 和输精管疾病。 精子尾部低渗肿胀试验HOS 概念及意义 精子在低渗溶液中，由于渗透压的变化，水分子通过精子膜进入精子以达到渗透压平衡，使精子体积增大而出现尾部不同程度的肿胀现象，相差显微镜或普通高倍镜观察，计数200个精子中出现各种肿胀精子数，计算平均百分比。 / 意义：体外精子膜功能及完整性的评估指标，预测精子潜在的受精能力，不育症的精子尾部肿胀率明显降低，活的不动精子提示精子鞭毛结构异常，因此也可用HOS 测定精子存活率 核异质（dyskaryosis ）：即上皮细胞的核异常，主要表现为核增大、形态异常、染色质增多、分布不均、核膜增厚、核染色较深，但胞质尚正常。根据不典型增生程度分为轻、中、重度不典型增生。 轻度核异质：不典型细胞占上皮细胞层下1/3，细胞边缘清楚，核轻度增大，有轻度至中度畸形，染色质轻度增多，染色稍加深，核胞质比多在正常范围内 中度核异质：不典型细胞占上皮细胞层下1/3 ～2/3，细胞边缘较清楚，核明显增大，畸形明显，染色质浓密不均，深染，核与胞质比轻度增大。 重度核异质：不典型细胞超过上皮细胞层2/3，细胞边界不清，极性紊乱，核明显增大，比正常大1～2倍，畸形更明显，染色质增多、核与胞质比增大。不典型增生几乎达到或超过全层，可诊断原位癌。 背景成分：指涂片中非上皮细胞成分。意义：①红细胞：与取材有关；②中性粒细胞：可大量出现，常呈裸核，组织炎症③淋巴细胞：慢性炎症时较多见④浆细胞：慢性炎症⑥细菌团、真菌团、植物细胞、棉花纤维、粘液和染料沉渣等 复鳞上皮细胞变化规律 1) 胞体：由小到大 2)胞核：由大到小至消失 3）核染色：质由细致、疏松、均匀到粗糙、紧密、固缩；4）胞质量：少到多，核胞质比大到小；5）胞质染色：暗红到浅红。 恶性肿瘤细胞主要形态特征 核的改变：1.核增大1～4倍（核染色质增生↑） 2.核畸形 3.核深染 DNA ↑，腺癌深染不及鳞癌 4.核膜增厚（染色质呈粗颗粒状，分布不均常堆积于核膜下）5.核胞质比增大 6.核仁增大、数目增多，形态异常（分化程度越低，核仁异常越明显）7.核分裂增多（有丝分裂细胞↑）8.裸核 ( 癌细胞增生过快，营养供给不足，细胞退化.腺癌和未分化癌多见) / 细胞质的改变： 高、低分化鳞癌主要特征 高分化鳞癌：以表层细胞为主 细胞多形性，体积大，胞浆丰富，常染深红色，核大、畸形、深染、常分散存。 / 低分化鳞癌：中层或底层细胞为主。不规则形或圆形，散在分布或成团。 高低分化腺癌主要特征 高分化腺癌：胞体较大，可单个脱落也可成排成团脱落，胞质丰富，含有空泡，有时大空泡将核挤于一侧，形成印戒样癌细胞为特征性细胞。特征性细胞有：①纤维形癌细胞②蝌蚪形癌细胞③癌珠。 / 低分化腺癌：胞体较小，多成团互相重叠，极性紊乱，易融合成团呈花边样或桑椹样。 小细胞未分化癌主要特征：癌细胞小，比淋巴细胞略大 异性明显，三角形燕麦形核胞浆少，往往是裸核 核畸形显著，染色呈墨水滴状 成片镶嵌状 脱落细胞 图片制作固定方法 染色方法 1.带湿固定：涂片尚未干燥固定，适用较粘稠的标本（痰液、宫颈刮片及食管刷片等） 2.干燥固定：自然干燥后，固定。适用较稀薄的标本（尿液、浆膜腔积液等）一般15～30min 。含粘液较多标本适当延长。 染色方法： H-E 染色：优点：染色效果好。操作简易，试剂易配染色透明度好，细胞质呈淡玫瑰红色，细胞核显紫蓝色，红细胞呈朱红色。缺点：不能用于观察阴道涂片对雌激素水平测定 / 巴氏染色优点：色彩多样且鲜艳。染色效果好，能观察女性雌激素水平；缺点：染色程序较复杂 / 瑞－吉氏染色 适用于血片、淋巴穿刺液和胸腹水涂片 脱落细胞报告方式:三级分类法：Ⅰ级阴性正常细胞或炎症变性细胞 Ⅱ级可疑发现核异质细胞 Ⅲ级阳性 / 四级分类法：Ⅰ级阴性 Ⅱ级少量轻度核异质细胞，多由炎症变性所致。Ⅲ级可疑。有重度核异质细胞，符合癌细胞标准。但由于数量过少，或形态不典型，不能排除癌前病变的可能。Ⅳ级阳性。涂片中可见典型的癌细胞。 / 直接法：①未找到癌细胞②标本质量差③找到不典型细胞④找到可疑癌细胞⑥找到癌细