总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB速率微板法)
总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB 速率微板法)
简介：
谷胱甘肽(glutathione ，GSH)存在于几乎身体的每一个细胞，参与细胞许多功能活动，是一种氧自由基消除剂。还原型谷胱甘肽(GSH)是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽，由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成，能可逆的转变为氧化型谷胱甘肽(GSSG)，其存在形式会随着细胞内代谢的情况而发生相互转变。
总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB 速率微板法)(T otal Glutathione Assay Kit)是一种简单易行的检测总谷胱甘肽(T-GSH)的试剂盒，其检测原理是谷胱甘肽还原酶把氧化型谷胱甘肽(GSSG)还原成还原型谷胱甘肽(GSH)，由GSSG 还原成的GSH 和样品本身含有的GSH 都与发色底物DTNB 反应，生成黄色的TNB 和GSSG 。该试剂盒可用于检测血浆、血清、组织、细胞等样品中总谷胱甘肽(T-GSH)含量。该试剂盒仅用于科研，不用于临床诊断或其他用途。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 配制GSH 标准储存液：取10mg 还原型谷胱甘肽(GSH)标准加入3.25ml ddH 2O ，溶
解并混匀，即为还原型GSH 标准储存液(10mM)。一部分立即使用，其余适当分装后-20℃保存。
2、 配制50×GSH 还原酶：按GSH 还原酶原液：GSH assay buffer =1:49的比例混合，
即为50×GSH 还原酶。-20℃保存，3个月有效。
3、 配制T-GSH 检测工作液：按下表配制T-GSH 检测工作液。
1个样品 10个样品 50个样品 GSH assay buffer 0.2ml 2ml 10ml DTNB 储存液
2.5μl
25μl
125μl
编号 名称
TO1048 100T Storage
试剂(A): 还原型谷胱甘肽(GSH)标准 10mg 4℃ 避光 试剂(B): GSH assay buffer 100ml RT 试剂(D): 蛋白沉淀剂 0.5g RT 避光 试剂(E): NADPH 10mg -20℃ 避光 试剂(F): DMSO 1.5ml RT 避光 试剂(G): ddH 2O 30ml
RT 避光 使用说明书
1份
50×GSH还原酶 5.4μl 54μl 270μl
4、配制蛋白沉淀工作液：在本试剂盒提供的0.5g蛋白沉淀剂中加入10ml ddH2O，配制
成10ml 5%的水溶液，即为蛋白沉淀工作液，4℃保存。
5、配制标准品：把还原型GSH标准储存液(10mM)用蛋白沉淀工作液稀释成50μM标准
溶液。然后依次稀释成6个点做标准曲线。
6、准备样品：
①红细胞或血浆样品的制备：请尽量使用新鲜的血液进行测定。离心，沉淀为红细胞，上
清为血浆。对于红细胞，用PBS洗涤两次。取约5红细胞沉淀或血浆，加入蛋白沉淀工作液，充分Vortex振匀。4℃或冰浴放置，4℃离心，取上清用于还原型谷胱甘肽(GSH)测定，样品需暂时4℃保存备用。
②组织样品的制备：取组织用液氮速冻，迅速研磨，按每50mg加入150μl蛋白沉淀工
作液，充分Vortex振匀，再加入350μl蛋白沉淀工作液，用匀浆器充分匀浆。4℃孵育，离心，取上清用于还原型谷胱甘肽(GSH)测定。
③细胞样品的制备：PBS洗涤细胞1次，离心收集细胞，吸尽上清。加入细胞沉淀3倍
体积的蛋白沉淀工作液，充分Vortex振匀。(收集细胞前后分别对离心管进行称重，从而就可以计算出细胞沉淀的重量，10mg细胞沉淀的体积可以粗略地看做10ml。)对样品进行快速的冻融后，4℃或冰上孵育5min。离心取上清用于还原型谷胱甘肽(GSH)测定。
7、T-GSH加样操作：取96孔板，按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔，溶液应按照顺
序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的T-GSH浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
加入物(μl) 空白孔标准孔测定孔蛋白沉淀工作液10 ——
系列标准品(2～50μM) —10 —
待测样品——10
T-GSH检测工作液200 200 200
室温或25℃孵育。
NADPH工作液(0.12mg/ml) 50 50 50
9、GSH检测：立即用酶标仪或自动生化分析仪于410nm处每隔2min检测一次，空白孔调零，共检测6min(亦可加入NADPH工作液反应6min后检测，只检测1次)，以检测其反应速率ΔA/min。如果酶标仪不能检测410nm，可测定405～420nm处吸光度。
计算：
①动力学测定法：根据不同时间点测定得到的吸光度值计算出ΔA410/min，以GSH标准
的浓度为横坐标，以ΔA410/min为纵坐标，做出标准曲线。根据待测的ΔA410/min，对照标准曲线就可以计算出测定时样品还原型谷胱甘肽(GSH)和总谷胱甘肽(T-GSH)的含量。
GSSG含量=总谷胱甘肽(T-GSH)的含量-还原型谷胱甘肽(GSH)含量
②终点测定法：即反应6min仅测定1次吸光度。以GSH标准的浓度(50、25、15、10、
5、2μM)为横坐标，以ΔA410/min为纵坐标，做出标准曲线。样品对照标准曲线即可
计算出总谷胱甘肽的含量。终点测定法比动力学法快捷。
GSSG含量=总谷胱甘肽(T-GSH)的含量-还原型谷胱甘肽(GSH)含量
参考区间：
成年全血GSH 1.02～mmol/L
注意事项：
1、请尽量使用新鲜的细胞进行测定，而不要使用冻存的细胞进行测定，避免使酶活性下
降。
2、全血GSH与吸烟和锻炼成正比。
3、测定各孔时，各孔温度均需达到室温或25℃，否则影响结果。
4、轻度溶血样本对GSH测定无影响。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法)
乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法) 简介： 乳酸(Lactic acid ，LD)又称2-羟基丙酸是一种化合物，是一种含有羟基的羧酸，分子式是C 3H 6O 3，参与生物化学很多反应过程。 乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法)其检测原理是在NAD 存在条件下，乳酸脱氢酶(LDH)催化乳酸生成丙酮酸，同时生成NADH 。在碱性条件下显色剂与丙酮酸生成复合物，并使平衡偏向乳酸氧化为丙酮酸的方向，驱动反应完成，生成的NADH 与乳酸为等量摩尔。通过分光光度比色法(酶标仪)测定340nm 处吸光度，据此通过比色分析就可以计算出LD 水平。该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的乳酸含量。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 准备样品： ①_x0001_ 血浆、血清、尿液及其他体液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-20℃冻存。 ②_x0001_ 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于LD 的检测。 ③_x0001_ 高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的LD ，可以使用原有的裂解液或 PBS 等进行稀释，如鸡血清、血浆可稀释5～10倍后检测。 2、 配制标准品工作液：取乳酸标准(20mmol/L) 0.1ml 溶解于0.3ml 乳酸标准稀释液，使 浓度达到5mmol/L ，即为标准品工作液-乳酸标准(5mmol/L)。4℃避光保存2个月有效。 编号 名称 TC0731 110T Storage 试剂(A): 乳酸标准(20mmol/L) 1ml -20℃ 避光 试剂(B): 乳酸标准稀释液 1ml RT 试剂(C): LD 显色液 C1: LD Assay buffer 5ml 4℃ 避光 C2: NAD 2支 -20℃ 避光 C3: LDH solution 15μl -20℃ 避光 试剂(D): LD 终止液 30ml RT 使用说明书 1份
塔板理论
第二章 气相色谱分析gas chromatographic analysis,GC 第二节 色谱理论基础fundamental of chromatograph theory 色谱理论需要解决的问题：色谱分离过程的热力学和动力学问题。影响分离及柱效的因素与提高柱效的途径，柱效与分离度的评价指标及其关系。 组分保留时间为何不同色谱峰为何变宽 组分保留时间：色谱过程的热力学因素控制；（组分和固定液的结构和性质） 色谱峰变宽：色谱过程的动力学因素控制；（两相中的运动阻力，扩散） 两种色谱理论：塔板理论和速率理论； 一、塔板理论-柱分离效能指标 1.塔板理论（plate theory ） 半经验理论； 将色谱分离过程比拟作蒸馏过程，将连续的色谱分离过程分割成多次的平衡过程的重复 （类似于蒸馏塔塔板上的平衡过程）； 塔板理论的假设： (1) 在每一个平衡过程间隔内，平衡可以迅速达到； (2) 将载气看作成脉动（间歇）过程； (3) 试样沿色谱柱方向的扩散可忽略； (4) 每次分配的分配系数相同。 色谱柱长：L ，虚拟的塔板间距离：H ，色谱柱的理论塔板数：n ， 则三者的关系为： n = L / H 理论塔板数与色谱参数之间的关系为： 保留时间包含死时间，在死时间内不参与分配! 2.有效塔板数和有效塔板高度 ?单位柱长的塔板数越多，表明柱效越高。 ?用不同物质计算可得到不同的理论塔板数。 2 22116545)()( ./b R R W t Y t n ==
?组分在t M 时间内不参与柱内分配。需引入有效塔板数和有效塔板高度： 3.塔板理论的特点和不足 （1）当色谱柱长度一定时，塔板数 n 越大(塔板高度 H 越小)，被测组分在柱内被分配的次数越多，柱效能则越高，所得色谱峰越窄。 （2）不同物质在同一色谱柱上的分配系数不同，用有效塔板数和有效塔板高度作为衡量柱效能的指标时，应指明测定物质。 （3）柱效不能表示被分离组分的实际分离效果，当两组分的分配系数K 相同时，无论该色谱柱的塔板数多大，都无法分离。 (4) 塔板理论无法解释同一色谱柱在不同的载气流速下柱效不同的实验结果，也无法指出影响柱效的因素及提高柱效的途径。 二、 速率理论-影响柱效的因素 1. 速率方程（也称范弟姆特方程式） H = A + B /u + C ·u H ：理论塔板高度， u ：载气的线速度(cm/s) 减小A 、B 、C 三项可提高柱效； 存在着最佳流速； A 、 B 、 C 三项各与哪些因素有关 A —涡流扩散项 A = 2λdp dp ：固定相的平均颗粒直径λ：固定相的填充不均匀因子 固定相颗粒越小dp ↓，填充的越均匀，A ↓，H ↓，柱效n ↑。表现在涡流扩散所引起的色谱峰变宽现象减轻，色谱峰较窄。 222/1)(16)(54.5b R R W t Y t n ==理有效 有效有效n L H W t Y t n b R R ===2'22/1')(16)(54.5
简述色谱基础理论中的塔板理论和速率理论
1、简述色谱基础理论中的塔板理论和速率理论（10分） 塔板理论是由以下四个假设构成的：1、在柱内一小段长度H 内，组分可以在两相间迅 速达到平衡。这一小段柱长称为理论塔板高度H 。2、流动相（如载气）进入色谱柱不是连 续进行的，而是脉动式，每次进气为一个塔板体积（ΔVm ）。3、所有组分开始时存在于第0 号塔板上，而且试样沿轴（纵）向扩散可忽略。4、分配系数在所有塔板上是常数，与组分 在某一塔板上的量无关。（3分） 速率理论：是由荷兰学者范弟姆特等提出的。结合塔板理论的概念，把影响塔板高度的 动力学因素结合进去，导出的塔板高度H 与载气线速度u 的关系： Cu u B A H ++= 其中：A 称为涡流扩散项，B 为分子扩散项， C 为传质阻力项 涡流扩散项 A 气体碰到填充物颗粒时，不断地改变流动方向，使试样组分在气相中形成 类似“涡流”的流动，因而引起色谱的扩张。由于 A=2λd p ，表明 A 与填充物的平均颗粒 直径 dp 的大小和填充的不均匀性 λ 有关，而与载气性质、线速度和组分无关，因此使用 适当细粒度和颗粒均匀的担体，并尽量填充均匀，是减少涡流扩散，提高柱效的有效途径。 分子扩散项 B/u 由于试样组分被载气带入色谱柱后，是以“塞子”的形式存在于柱的很小一 段空间中，在“塞子”的前后 ( 纵向 ) 存在着浓差而形成浓度梯度，因此使运动着的分子产 生纵向扩散。而 B=2rD g r 是因载体填充在柱内而引起气体扩散路径弯曲的因数 ( 弯曲 因子 ) ， D g 为组分在气相中的扩散系数。分子扩散项与 D g 的大小成正比，而 D g 与 组分及载气的性质有关：相对分子质量大的组分，其 D g 小 , 反比于载气密度的平方根或 载气相对分子质量的平方根，所以采用相对分子质量较大的载气 ( 如氮气 ) ，可使 B 项 降低， D g 随柱温增高而增加，但反比于柱压。弯曲因子 r 为与填充物有关的因素。 传质项系数 Cu C 包括气相传质阻力系数 C g 和液相传质阻力系数 C 1 两项。所谓气相 传质过程是指试样组分从移动到相表面的过程，在这一过程中试样组分将在两相间进行质量 交换，即进行浓度分配。这种过程若进行缓慢，表示气相传质阻力大，就引起色谱峰扩张。 （7分） 2、简述HPLC 仪器的基本构成及常用的一些分离类型。（10分） HPLC 仪器一般可分为梯度淋洗系统，高压输液泵与流量控制系统，进样系统，分离柱 及检测系统等5个主要部分（5分）；液相色谱有多种分离类型，根据使用的固定相不同， 主要有如下分离类型：液-固吸附色谱，液-液分配色谱、离子交换色谱，排阻色谱、亲和色 谱等。（5分） 3、色谱分析法区别于其他分析方法的主要特点是什么？（5分） 1、 分离效率高，可以分离分析复杂混合物、有机同系物、异构体、手性异构体等； 2、灵 敏度高，可以检测出μg/g 级甚至是ng/g 级的物质量；3、分析速度快，一般在几分钟或 几十分钟内可以完成一个试样的分析；4、应用范围广，气相色谱适用物沸点低于400℃ 的各种有机化合物或无机气体的分离分析。液相色谱适用于高沸点、热不稳定及生物试 样的分离分析。离子色谱适用于无机离子及有机酸碱的分离分析。 4、色谱分离过程中的热力学和动力学因素分别由哪两个参数表现出来？两个色 谱峰的保留时间较大就一定能够分离完全吗？（5分） 色谱分离过程中的热力学因数是是保留值之差，而区域宽度是色谱分离过程中的动力学因数， 他们分别是通过分离度和分配系数这两个参数表现出来的。 不一定能分离完全，判断两个峰能否分离完全是用分离度来表现的，当分离度R=1.5时，分
碱性磷酸酶检测试剂盒(PNP微板法)
碱性磷酸酶检测试剂盒(PNP 微板法) 产品简介： 碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase ，简称ALP 或AKP)为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内，其活性所需最适pH 9.2~9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜)，如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮，还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌的细胞膜。 Leagene 碱性磷酸酶检测试剂盒(PNP 微板法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用PNP 比色法，其检测原理是Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)为一种常用的磷酸酶显色底物，在酸性条件下，可在碱性磷酸酶的作用下生成p -nitrophenol 。在碱性条件下p -nitrophenol 转变成醌式结构，呈较深的黄色，产物黄色越深，说明碱性磷酸酶活性越高，反之则酶活性越低，通过分光光度比色法测定处吸光度，据此通过比色分析就可以计算出碱性磷酸酶活性水平。该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的碱性磷酸酶活性。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 产品组成： 自备材料： 1、 水浴锅或恒温箱 2、 96孔板 3、 酶标仪 操作步骤(仅供参考)： 1、 配制显色工作液： 取出1支pNPP ，恢复至室温后溶解于ALP Assay buffer ，混匀， 冰上预冷备用。新配制的显色工作液应在6h 内用完。 2、 配制标准品工作液：取出p -nitrophenol(10mM)恢复至室温后，取10μl 溶解于190μ 编号 名称 TE0002 100T Storage 试剂(A): ALP Assay buffer 15ml 4℃ 试剂(B): pNPP 2支 -20℃ 避光 试剂(C): p -nitrophenol(10mM) 0.1ml -20℃ 避光 使用说明书 1份
填料精馏塔理论塔板数的测定(精)
实验五 填料精馏塔理论塔板数的测定 精馏操作是分离、精制化工产品的重要操作。塔的理论塔板数决定混合物 的分离程度，因此，理论板数的实际测定是极其重要的。在实验室内由精馏装 置测取某些数据，通过计算得到该值。这种方法同样可以用于大型装置的理论 板数校核。目前包括实验室在内使用最多的是填料精馏塔。其理论板数与塔结 构、填料形状及尺寸有关。测定时要在固定结构的塔内以一定组成的混合物进 行。 一． 实验目的 1．了解实验室填料塔的结构，学会安装、测试的操作技术。 2．掌握精馏理论，了解精馏操作的影响因素，学会填料精馏塔理论板 数的测定方法 3．掌握高纯度物质的提纯制备方法。 二． 实验原理 精馏是基于汽液平衡理论的一种分离方法。对于双组分理想溶液，平衡时 气相中易挥发组分浓度要比液相中的高；气相冷凝后再次进行汽液平衡，则气 相中易挥发组分浓度又相对提高，此种操作即是平衡蒸馏。经过多次重复的平 衡蒸馏可以使两种组分分离。平衡蒸馏中每次平衡都被看作是一块理论板。精 馏塔就是由许多块理论板组成的，理论板越多，塔的分离效率就越高。板式塔 的理论板数即为该塔的板数，而填料塔的理论板数用当量高度表示。填料精馏 塔的理论板与实际板数未必一致，其中存在塔效率问题。实验室测定填料精馏 塔的理论板数是采用间歇操作，可在回流或非回流条件下进行测定。最常用的 测定方法是在全回流条件下操作，可免去加回流比、馏出速度及其它变量影响，而且试剂能反复使用。不过要在稳定条件下同时测出塔顶、塔釜组成，再由该 组成通过计算或图解法进行求解。具体方法如下： １．计算法 二元组份在塔内具有n 块理论板的第一块板的汽液平衡关系符合平衡方 程式为： 1 11y y -=w w N m x x -+11α （１） y 1——第一块板的气相组成 x w ——塔釜液的组成 m α——全塔(包括再沸器)α（相对挥发度）的几何平均值m α=w p αα N ——理论板数
丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测试剂盒(赖氏微板法)
丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测试剂盒(赖氏微板法) 简介： Leagene 丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测试剂盒(赖氏微板法)其检测原理是丙氨酸氨基转移酶催化丙氨酸与α-酮戊二酸之间的氨基转移反应，在ALT 催化下，其反应公式如下： L-丙氨酸+α-酮戊二酸→丙酮酸+L-谷氨酸。 二硝基苯肼与α-酮酸反应，生成相应的二硝基苯腙，在碱性条件下，二硝基苯腙的吸收光谱有差异，通过酶标仪检测在500-520nm 处差异最大，以等摩尔浓度计算出丙酮酸的生成量，进而计算酶的活性。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 准备样品： ①_x0001_ 血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的 测定，-20℃保存1个月有效，用于ALT/GPT 的检测。 ②_x0001_ 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃保存 1个月有效，用于ALT/GPT 的检测。 ③_x0001_ (选做)样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便 于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的ALT/GPT 含量。 2、 制作ALT 标准曲线：取适量的丙酮酸标准(100mmol/L)，按丙酮酸标准(100mmol/L)： 丙酮酸标准稀释液=1：49的比例混合，即为丙酮酸标准工作液-丙酮酸标准(2mmol/L)，按下表制备标准曲线。最好设定平行检测管，求平均值。 编号 名称 TE0121 100T Storage 试剂(A): 丙酮酸标准(100mmol/L) 1ml 4℃ 避光 试剂(B): 丙酮酸标准稀释液 2ml RT 试剂(C): 标准对照液 2ml 4℃ 试剂(D): ALT assay buffer 3ml -20℃ 避光 试剂(E): 二硝基苯肼显色液 3ml 4℃ 避光 试剂(F): ALT 显色基液 25ml RT 使用说明书 1份 加入物 0 1 2 3 4 丙酮酸标准(2mmol/L)(μl) 2 4 6 8
《现代气相色谱实践》第四章-速率理论
第四章速率理论 一范·第姆特（Van Deemter）方程 二戈莱（Golay）方程 三范·第姆特（Van Deemter）曲线 四色谱柱和色谱操作参数的调整和统一 ⒈涡流扩散项（A项）中参数的调整和统一 ⒉气相分子扩散项（B项）中参数的调整和统一 ⒊气相传质阻力项（C 项）中参数的调整和统一 g 项）中参数的调整和统一 ⒋液相传质阻力项（C l 五在气相色谱法中样品的分离
第四章速率理论4-1第四章速率理论 在第三章中我们已经宏观地讨论了柱的溶剂效率和塔板理论。在溶剂效率方面，我们讨论了样品组分（以下简称“组分”）在指定固定液上的分配系数K，它决定了组分在色谱柱上的相对保留值α，且组分的分配系数K和相对保留值α均为温度的函数；在塔板理论中，我们利用克莱格二项式分布的多级萃取过程来解释组分在色谱过程中的色带展宽，并由此引出了柱效率的概念，以及可以用理论塔板数或有效理论塔板数来评价柱效率的高低。 根据有效理论塔板数N的计算式可知， 这说明色带的展宽与色谱柱的有效理论塔板数的平方根是成正比的。 在线性分布等温线理想色谱法中，我们基于如下假设： ①色谱柱内的所有各点的分配都相等； ②载气的流速是均匀的； ③在两相内都不存在样品组分分子（以下简称“组分分子”）的轴向分子扩散； ④两相间的平衡在瞬间完成，不存在质量传递阻力。 从宏观上考虑，除由于柱顶端到柱尾部间存在的压差使载气流速不可能在柱中保持一致外，其它的假设似乎都能成立；但是，从微观的方面考虑，以下这些现象都是影响柱分离效率的因素：首先，由于柱管本身的长度、内径以及固定相对载气流动的阻力，整个色谱柱内都存在着压力梯度，即沿柱的方向从柱顶端到柱尾部的载气压力将逐点下降，同时沿此方向的载气流速和载气分子的线速度却在逐点升高（见图4-1示意）。 图4-1色谱柱内的压力梯度对载气流速的影响 此外，在柱管管壁，特别是在毛细管柱的涂有固定液液膜的管壁上，载气分子的线速度将由于摩擦阻力而减速，而沿柱管中心流动的载气分子因较少这种阻力而移动得相对地较快，这种“莱
理论塔板数的计算
首先要得到相平衡方程和精馏段、提馏段方程，再根据逐板计算求得精馏塔的理论塔板数。 源程序： #include
苹果酸脱氢酶检测试剂盒(OAA微板法)
苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA微板法) 简介： 苹果酸脱氢酶(Malate Dehydrogenase, MDH)是合成苹果酸的关键酶之一，催化苹果酸和草酰乙酸(OAA)的相互转化，参与众多生理代谢途径如TCA循环C4循环脂肪酸的氧化呼吸作用氮同化等，因此MDH在植物的生长发育中发挥着重要作用，广泛存在于线粒体、细菌细胞膜上，为三羧酸循环中的一种酶，由于酶的来源不同，其某些性质也不尽相同。MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，细菌中通常只含有NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH 分布于细胞质和线粒体中。 Leagene苹果酸脱氢酶(MDH)检测试剂盒(OAA微板法)检测原理是在弱碱条件下，以草酰乙酸(OAA)作为显色底物，OAA在MDH催化下被NADH还原为苹果酸(Mal)，每催化1分子OAA消耗1分子NADH，通过分光光度比色法(酶标仪)测定处吸光度的变化，计算出NADH的消耗速率进一步推算出苹果酸脱氢酶活性水平。该试剂盒主要用于检测植物样本、血清等中苹果酸脱氢酶活性。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 自备材料： 1、研钵或匀浆器 2、离心管或试管 3、低温离心机 4、96孔板 5、酶标仪 操作步骤(仅供参考)：编号 名称TE0461 100T Storage 试剂(A): MDH Lysis buffer 250ml 4℃避光试剂(B): PMSF 1ml -20℃ 试剂(C): MDH Assay buffer20ml RT 试剂(D): NADH 1支-20℃ 试剂(E): ddH2O 10ml RT 使用说明书1份
高效液相色谱速率理论
高效液相色谱速率理论 1956年荷兰学者van Deemter 等在研究气液色谱时，提出了色谱过程动力学理论— 速率理论。 他们吸收了塔板理论中板高的概念，并充分考虑了组分在两相间的扩散和传质过程，从而在动力学基础上较好地解释了影响板高的各种因素。该理论模型对气相、液相色谱都适用。 式中：u 为流动相的线速度； A ， B ， C 为常数，分别代表涡流扩散项、分子扩散系数、传质阻力系数。 该式从动力学角度很好地解释了影响板高（柱效）的各种因素！ 任何减少方程右边三项数值的方法，都可降低 H ，从而提高柱效。 1、涡流扩散项A 在填充色谱柱中，当组分随流动相向柱出口迁移时，流动相由于受到固定相颗粒障碍，不断改变流动方向，使组分分子在前进中形成紊乱的类似“ 涡 流” 的 流动，故称涡流扩散。 Cu u B A H ++=
从图中可见，因填充物颗粒大小及填充的不均匀性，同一组分运行路线长短不同，流出时间不同，峰形展宽。 A ＝2 λdp dp：填充物平均颗粒的直径 ; λ：填充不均匀性因子 展宽程度以A表示 固定相颗粒越小 ( dp↓) ，填充的越均匀，A↓，H↓，柱效n↑。则由涡流扩散所引起的色谱峰变宽现象减轻，色谱峰较窄。对于空心毛细管柱，无涡流扩散，即A=0。 2、分子扩散项B /u（纵向扩散项） 纵向扩散是由浓度梯度造成的。
组分从柱口加入，其浓度分布的构型呈“塞子”状，如图所示。它随着流动相向前推进，由于存在浓度梯度，“塞子”必然自发地向前和向后扩散，造成谱带展宽。 分子扩散项系数为： B=2γD g B：分子扩散项系数 γ：阻碍因子（扩散阻止系数） , 因载体填充在柱内而引起气体扩散路径弯曲的因素 - 弯曲因子 D ：组分在流动相中扩散系数 3、传质阻力项C u 由于气相色谱以气体为流动相，液相色谱以液体为流动相，它们的传质过程不完全相同，现分别讨论之。 （l）对于气液色谱，传质阻力系数C包括气相传质阻力系数Cg和液相传质阻力系数Cl两项，即： C＝Cg＋Cl 气相传质过程是指试样组分从气相移动到固定相表面的过程。这一过程中试样组分将在两相间进行质量交换，即进行浓度分配。有的分子还来不及进入两相界面，就被气相带走；有的则进人两相界面又来不及返回气相。这样，使得试样在两相界面上
单胺氧化酶(MAO)检测试剂盒(醛苯腙微板法)
单胺氧化酶(MAO)检测试剂盒(醛苯腙比色法) 简介： 单胺氧化酶(Monoamine Oxidase ，MAO)是一组催化多种单胺类化合物氧化脱氨的酶，属于细胞外酶，含有铜离子，分布于肝脏、肾脏等组织的线粒体内，其含量分布为肝脏＞心脏＞肾脏＞脑＞肺＞骨骼肌。血小板、胎盘中也含有MAO 。线粒体中的MAO 与膜紧密结合，仅少量为可溶性的，存在于细胞质中，血液和结缔组织中的MAO 为水溶性。 Leagene 单胺氧化酶(MAO)检测试剂盒(醛苯腙比色法)其检测原理是待测样品在MAO 作用下，氧化底物苄胺生成苄醛，后者经催化反应生成醛苯腙，呈棕红色，通过酶标仪检测吸光度，根据标准曲线即可测出MAO 活力。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 自备材料： 1、 蒸馏水 2、 离心管或小试管 3、 比色杯 4、 分光光度计 操作步骤(仅供参考)： 1、 准备样品： ①血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，冻存，用于MAO 的检测。 ②细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，冻存，用于MAO 的检测。 高活性样品：如果样品中含有较高活性的MAO ，可以使用MAO Assay buffer 稀释。 编号 名称 TE0251 100T Storage 试剂(A): 苄醛标准(5mmol/L) 1ml 4℃ 避光 试剂(B): MAO Assay buffer 50ml RT 试剂(C): 苄胺缓冲液 5ml 4℃ 避光 试剂(D): 苄醛显色液 2.5ml 4℃ 避光 试剂(E): 苄醛显色缓冲液 5ml RT 使用说明书 1份
5-核苷酸酶检测试剂盒(钼蓝微板法)
简介： 5′-核苷酸酶(5′-NT 或NTP)广泛分布于肝脏、胆道及其他各种组织中，该酶活性变化常与ALP 活性相平行。但在骨骼系统的疾病中，如肿瘤骨转移、畸形性骨炎、甲亢、佝偻病等，ALP 活力增高，但是5′-NT 活力正常。 Leagene 5′-核苷酸酶(5′-NT)检测试剂盒(钼蓝微板法)先检测ALP 和5′-NT 总的活性，利用镍离子能选择性的抑制5′-NT 的特性，用总活性减去ALP 活性即获得5′-NT 活性。通过酶标仪检测680nm 处吸光度。该酶的检测对于研究自由基代谢平衡，抗衰老和肿瘤发病机制具有一定的价值。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 准备样品： ① 血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的 测定，尿液通常也可以直接用于测定，-70℃冻存，用于5′-NT 的检测。 ② 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行裂解，可以采用Leagene Western 及IP 细胞裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-70℃冻存，用于5′-NT 的检测。 ③ 高活性样品：如果样品中含有较高活性的5′-NT ，可以使用AMP 酸性缓冲液稀释。 ④ (选做)样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的5′-NT 含量。 2、 配制对照NT Assay 工作液：取适量的NT Assay buffer Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，配制对照NT Assay 工作液，4℃保存备用。 3、 配制测定NT Assay 工作液：取适量的NT Assay buffer Ⅰ、Ⅱ，配制测定NT Assay 工 作液，4℃保存备用。 编号 名称 TE0261 100T Storage 试剂(A): NT Assay buffer Ⅰ 15ml RT 试剂(B): NT Assay buffer Ⅱ 2ml RT 试剂(C): NT Assay buffer Ⅲ 1ml RT 避光 试剂(D): 5′-AMP buffer 2ml 4℃ 试剂(F): 磷标准(6mmol/L) 1ml 4℃ 试剂(H): 定磷还原液 3ml 4℃ 避光 使用说明书 1份
理论塔板简捷计算方法
6.4.6 理论塔板简捷计算方法 目标：了解简捷计算法及使用条件 （1）最少理论板数 a.全回流操作 一精馏塔在操作过程中，将塔顶蒸气全部冷凝，其凝液全部返回塔顶作为回流，称此操作为全回流，回流比R为无穷大（R=∞）。此时通常不进料，塔顶、塔底不采出。故精馏塔内气、液两相流量相等，L=V，两操作线效率均为1，并与对角线重合，如图6.4.15所示。塔内无精馏段和提馏段之分，其操作线方程可表示为： （6.4.8） 图 6.4.15全回流操作的最小理论塔板 由于全回流操作时，使每块理论板分离能力达到最大，完成相同的分离要求，所需理论板数最少，并称其为最小理论板数。 最少理论板数由以下芬斯克方程求得： 对双组分精馏，A，B两组分相对挥发度表示为 j=1，2… N (6.4.9) 由塔内操作线方程式（6.4.8）可得 或（6.4.10） 将各级相平衡关系相乘：
运用式（6.4.10）化简，在各板上的相对挥发度近似取为常数，则通过简化和整理获得Fenske方程： 该方程也可用于多组分精馏，其区别是以轻、重关键组分的分离代替双组分的精馏。 芬斯克方程推导 6.4.6 理论塔板简捷计算方法（续） （2）简捷计算法 将许多不同精馏塔的回流比、最小回流比、理论板数及最小理论板数即R、Rmin、N、Nmin四个参数进行定量的关联。常见的这种关联如图所示，称为吉利兰图（Gillilad）图，如图6.4.16所示。 图 6.4.16 吉利兰图
·计算 ·由图6.4.16或式（6.4.11）求解Y值，代入下式。 ·解得理论板数 N及Nmin均含再沸器理论板。 采用简捷法也可估算精馏塔精馏段及提馏段理论塔板数或进料位置。如果计 算精馏段理论塔板数，则求精馏段最少理论板数，由进料组成代替，为精馏段平均相对挥发度，按以上步骤求得精馏段理论板数。同 理，求得提馏段理论板数。 例6.4.2 6.4.7 几种蒸馏操作方式的讨论 目标：介绍几种不同操作的精馏过程 在精馏过程中，常常有加热、进料方式不同，根据要求，其采出方式也有所区别，对此，分别讨论如下： （1）直接蒸气加热 一般精馏是间接加热，主要是为避免对物料污染。如果物料含有水，精馏过程中允许水存在，于是，可将加热蒸气直接通入塔釜内，直接加热。这样加热蒸气将热量、质量均带入塔内，同时参与塔的热量、质量的传递。该过程提高了传热效率，可使用温度相对低的加热蒸气，同时，又省一台再沸器。 如图6.4.17所示，由物料衡算可知精馏段物料衡算与常规塔完全一致，仅提馏段有所不同，即： （6.4.12） （6.4.13） 式中S－塔釜蒸气用量。
甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP单试剂微板法)
甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 单试剂微板法) 简介： 甘油三酯(Triglyceride ，TG ）又称三酰甘油，是3分子长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，是人体内含量最多的脂类，大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量，同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成。 Leagene 甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 单试剂微板法)又称磷酸甘油氧化酶法或磷酸甘油氧化酶-过氧化物酶偶联法等，甘油三脂被LPL 水解为甘油和脂肪酸，再经过氧化物酶(POD)催化，使4-氨基安替比林与酚(三者合称PAP)反应，生成红色苯醌亚胺(Trinder 反应)。酶标仪在500~520nm 处进行比色测定。本试剂盒用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的甘油三脂含量定量测定。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 样本处理： ①血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围，用生理盐水稀释后检测。 ②细胞样本： a 、取适量的细胞(一般推荐>106以上)，弃上清，留取沉淀。 b 、用PBS 或生理盐水清洗1~2次，弃上清，留取沉淀。 c 、加入200~300μl 的PBS 或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率300W ，每次3~5s ，间隔30s ，重复3~5次。亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不可离心，待用。 d 、③组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)：生理盐水或PBS(ml)=1：9的比例， 编号 名称 TC1241100T Storage 试剂(A): GPO-PAP 工作液 Tris-HCl buffer 30ml -20℃ 避光 LPL 、GK 4-氨基安替比林 对氯酚 试剂(B): Glycerol 标准(1.7mmol/L) 1ml RT 试剂(C): ddH 2O 1ml RT 使用说明书 1份
理论塔板数
理论塔板数 定义 理论塔板数（theoretical plate number），N色谱的柱效参数之一,用于定量表示色谱柱的分离效率（简称柱效）。N取决于固定相的种类、性质（粒度、粒径分布等）、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。如果峰形对称并符合正态分布，N可近似表示为： 理论塔板数=5.54(保留时间/半高峰宽)2 (2是平方) 柱效率用理论塔板数定量地表示：N=16*（t/w ）2。其中，t是溶质从进样到最大洗脱峰出现的时间，w为该溶质的洗脱峰在基线处的宽度。在一色谱柱中用相同的洗脱条件时候，不同化合物的滞留时间与其洗脱峰宽度之比接近常数。因此理论塔板数大的色谱柱效率高。当然，N的大小和柱子长度有密切关系：理论塔板高度H=柱长/N，用H可以衡量单位长度的色谱柱的效率，H越小，则色谱柱效率越高。。。 N为常量时，W随tR成正比例变化。在一张多组分色谱图上，如果各组份含量相当，则后洗脱的峰比前面的峰要逐渐加宽，峰高则逐渐降低。 用半峰宽计算理论塔板数比用峰宽计算更为方便和常用，因为半峰宽更容易准确测定，尤其是对稍有拖尾的峰。 N与柱长成正比，柱越长，N越大。用N表示柱效时应注明柱长，，如果未注明，则表示柱长为1米时的理论塔板数。（一般HPLC柱的N在1000以上。）若用调整保留时间（tR’）计算理论塔板数，所得值称为有效理论塔板数（N有效或Neff）=16(tR’/W)2 处理方法 理论塔板数下降后可以考虑色谱柱再生 1.反相柱
分别用甲醇:水=90:10,纯甲醇（HPLC级）,异丙醇（HPLC级）,二氯甲烷（HPL C级）等溶剂作为流动相,依次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积.然后再以相反的次序冲洗. 2.正相柱 分别用正己烷（HPLC级）,异丙醇（HPLC级）,二氯甲烷（HPLC级）,甲醇（H PLC级）等溶剂做流动相,顺次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的柱体积(异丙醇粘度大,可降低流速,避免压力过高).注意使用溶剂的次序不要颠倒,用甲醇冲洗完后,再以相反的次序冲洗至正己烷.所有的流动相必须严格脱水. 3.离子交换柱 长时间在缓冲溶液中使用和进样,将导致色谱柱离子交换能力下降,.用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生,反之,用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生. 另外,还可以选择能溶解柱内污染物的溶剂为流动相做正方向和反方向冲洗.但再生后的色谱柱柱效是不可能恢复到新柱的水平的. 如果柱子装反了,可以调回来,但可能会造成柱内担体塌陷.在不得已的情况下尽量不要反装色谱柱. 梯度洗脱 科技名词定义 中文名称： 梯度洗脱 英文名称： gradient elution 定义： 梯度性地改变洗脱液的组分(成分、离子强度等)或pH，以期将层析柱上不同的组分洗脱出来的方法。 所属学科： 生物化学与分子生物学(一级学科) ；方法与技术(二级学科) 本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布 梯度洗脱（gradient elution）又称为梯度淋洗或程序洗提。 在气相色谱中，为了改善对宽沸程样品的分离和缩分析间周期，广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中，按一定程
ABO血型全自动微板检测法
本站最近研究开发了ABO血型全自动微板检测法，并对2857名献血者进行ABO血型鉴定，一次判读准确率达到99.83%。该法的应用大大地降低了实验者的工作强度，避免了人为因素导致的错判血型，确保了临床输血的安全。笔者着重对该方法的可靠性和干扰因素进行 研究，结果报告如下。 1 材料和方法 1.1 材料2857份献血者血液标本（ 2.5mgEDTANa 2/ml抗凝全血）；Genesis RSP-100型全自动样本处理系统，SLT自动扫描酶标仪及随机购置的支持软件Soft2000(瑞士TECAN 公司产品)；T.S温控孵育振荡仪（奥地利Anthos公司）；KUBOTA Ks-5000平板式离心机（日本久保田公司）；9 6孔硬质U型板（丹麦）；单克隆抗-A、抗-B血清（长春生物制品研究所）；5% 3 人份以上混合试剂红细胞（自制）；A2亚型红细胞（Ortho公司产品）， 经盐水洗涤2次配成5 %的盐水悬液。 1.2 全自动微板检测法（简称微板法）用96孔U型微量反应板，通过全自动加样器处理样本和试剂。正定型中，分别加入标准抗血清30μl和5%样本红细胞30μl，反定型中，分别加入样本血浆50μl和5%标准红细胞30μl。经孵育、离心、悬浮和静止，再用自动酶标仪取 620nm波长对反应板进行扫描、判读，随后在电脑中进行正反定型结果配对比较，确认无误后，将最终正确结果经站电脑网络与相应献血者资料存放在一起。经多次正交试验检测和各参数指标间的对比试验，优化得出ABO正反定型检测最终试验条件为，孵育：3min，500r/min，2level；离心：400g，90s；悬浮：3min，900r/min，3 level；静止：正定型1～2min，反定型5～6min；判读：620nm波长，40点扫描，Tc＞15%为凝集反应，Tc＜10为非凝集反应，10≤Tc≤15为可疑，需手工法重新鉴定。依据Soft20 00支持软件结构，微凝板经扫描后每孔都可获得一最小透光率（minimum transmission, Tn）和最大透光率(maximum transmission,Tm)，非凝集孔Tm与Tn的差值（contrast transmission,Tc）较小，凝集孔Tc值较大；当Tc值超过一特定值时，提示细胞凝集，结果判为阳性；反之，Tc值较小时表明细胞不凝集，结果判为阴性。根据ABO正反定型原则 ［3］，确定其血型。 1.3 试管法，平板法见文献［3］方法。 2 结果 2.1 方法的可靠性 2.1.1 可重复性取8份样本，连续进行20次反定型，每次得阳性Tc 值9个，阴性Tc值7个，分别算出它们的平均Tc值，然后对20份阳性和阴性的平均Tc值分别进行数理统计，依次得标准差(s)为2.091、0.295和变异系数(cv)为2.91%、8.03%，均＜10%， 说明该试验具有良好的可重复性。 2.1.2 稳定性取48份标本，连续进行3次正反定型，每次间隔11 d,显示：正定型凝集试验中均为4+，无任何变化;而对反定型凝集试验中的Tc值按配对资料的两两比较进行数理统计，无显著性差别、(t＝0.387，n=62，经查表，t0.05 =2.000,故P＞0.05)。 2.1.3 准确率通过2857份献血者样品的正反定型，得出正反定型试验1次判读准确率为99.83%，证明该试验方法完全可靠。异常结果主要出现在反定型中，其中3份样本 为严重脂血，2份为血型抗体极弱。 2.1.4 敏感性将单克隆-抗A血型试剂倍比稀释，每种稀释度加样30 μl，再分别加入5%A型和A2亚型红细胞悬液30μl，按上述3种方法进行操作，分别测得其结果（表1）。用B型血浆代替上述单克隆抗-A，加样量改为50μl，其余不变，分别测得其结果 （表2）。 表1 A和A2亚型红细胞在3种方法中测得单克隆抗-A效价
速率理论与塔板理论精华版
一、塔板理论 塔板理论的假设： (1) 在每一个平衡过程间隔内，平衡可以迅速达到； (2) 将载气看作成脉动（间歇）过程 (3) 试样沿色谱柱方向的扩散可忽略； (4) 每次分配的分配系数相同。 1.塔板理论（plate theory）半经验理论； 将色谱分离过程比拟作蒸馏过程，将连续的色谱分离过程分割成多次的平衡过程的重复（类似于蒸馏塔塔板上的平衡过程）； 色谱柱长：L， 虚拟的塔板间距离：H 色谱柱的理论塔板数：n 则三者的关系为： n = L / H理论塔板数与色谱参数之间的关系为：保留时间包含死时间，在死时间内不参与分配 ! 2.有效塔板数和有效塔板高度 2 2 2 1 16 54 5) ( ) ( . /b R R W t Y t n= =
? 单位柱长的塔板数越多，表明柱效越高。 ? 用不同物质计算可得到不同的理论塔板数。 ? 组分在t M 时间内不参与柱内分配。需引入有效塔板数和有效塔 板高度： 3.塔板理论的特点和不足 (1)当色谱柱长度一定时，塔板数n 越大(塔板高度H 越小)，被测组分在柱内被分配的次数越多，柱效能则越高，所得色谱峰越窄。 (2)不同物质在同一色谱柱上的分配系数不同，用有效塔板数和有效塔板高度作为衡量柱效能的指标时，应指明测定物质。 (3)柱效不能表示被分离组分的实际分离效果，当两组分的分配系数K 相同时，无论该色谱柱的塔板数多大，都无法分离。 (4) 塔板理论无法解释同一色谱柱在不同的载气流速下柱效不同的实验结果，也无法指出影响柱效的因素及提高柱效的途径。 二 速率理论 1956年 荷兰学者v an Deemter 等 在研究气液色谱时，提出了色谱过程动力学理论— — 速率理论。 222/1)(16)(54.5b R R W t Y t n ==理有效 有效有效n L H W t Y t n b R R ===2'22/1')(16)(54.5
碱性磷酸酶检测试剂盒(磷酸苯二钠微板法)
碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(磷酸苯二钠微板法) 简介： 碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase ，简称ALP 或AKP)为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内，其活性所需最适pH 9.2~9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜)，如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮，还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌的细胞膜。 碱性磷酸酶检测试剂盒(磷酸苯二钠微板法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用磷酸苯二钠比色法，其检测原理是磷酸苯二钠在碱性条件下，可在碱性磷酸酶的作用下生成游离酚和磷酸。在碱性条件下酚与氨基安替比林结合，并经氧化生成红色醌式结构物，呈深浅不一的红色，产物红色越深，说明碱性磷酸酶活性越高，反之则酶活性越低，通过酶标仪测定吸光度，据此通过比色分析就可以计算出碱性磷酸酶活性水平。该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的碱性磷酸酯酶活性。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 自备材料： 1、 96孔板 2、 水浴锅或恒温箱 3、 酶标仪 操作步骤(仅供参考)： 1、 配制标准品工作液：取出Phenol 标准(1mg/ml)恢复至室温后，取溶解于ddH 2O ，使 浓度达到，即为标准品工作液-Phenol(0.05mg/ml)。按照下表稀释系列标准品溶液。 编号 名称 TE0005 50T TE0005 100T Storage 试剂(A): ALP Assay buffer 2.5ml 5ml 4℃ 避光 试剂(B): ALP 显色液 2.5ml 5ml -20℃ 避光 试剂(C): 显色基液 7.5ml 15ml -20℃ 避光 试剂(D): Phenol 标准(1mg/ml) 1ml 1ml RT 试剂(E): ddH 2O 1ml 1ml RT 使用说明书 1份 1 2 3 4 5
- 苹果酸脱氢酶检测试剂盒(OAA微板法)
- 植物类黄酮检测试剂盒(微板法)
- 苯丙氨酸解氨酶(PAL)检测试剂盒(苯丙氨酸微板法)
- 微板法ABO血型定型试验
- 胆碱酯酶(ChE)检测试剂盒(羟胺氯化铁微板法)
- 乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法)
- 乙醇脱氢酶检测试剂盒(乙醛微板法)
- 5-核苷酸酶检测试剂盒(钼蓝微板法)
- 总胆固醇检测试剂盒(COD-PAP单试剂微板法)
- 类胡萝卜素检测试剂盒(微板法)
- 总胆汁酸检测试剂盒(酶微板法)
- 硝态氮检测试剂盒(磺胺微板法)
- 葡萄糖检测试剂盒(邻甲苯胺微板法)
- 碱性磷酸酶检测试剂盒(磷酸苯二钠微板法)
- 总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP双试剂微板法)
- 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA微板法)
- 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD微板法)
- 单胺氧化酶(MAO)检测试剂盒(醛苯腙微板法)
- 总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB速率微板法)
- 还原型谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒(DTNB速率微板法)