马松三色染色原理masson.
Masson染色(2010-09-02 14:43:20
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标签:杂谈分类:实验日志
masson 染色原理
Masson三色法
(根据Masson,1929
试剂配制
(一 Weigert氏铁苏木素液(见苦味酸——酸性品红法(二丽春红酸性品红液
丽春红(Ponceau 2R 0.7g
酸性品红(acid fuchsin 0.3g
蒸馏水 99ml
冰醋酸(glacial acetic acid 1ml
(三 1%磷钼酸水溶液
磷钼酸(phosphomolybdic acid 1g
蒸馏水加至 100ml
(四 2%苯胺蓝液
苯胺蓝(aniline blue 2g
冰醋酸(glacial acetic acid 2ml
蒸馏水加至 100ml
(五亮绿液
亮绿(light green 1g
蒸馏水 99ml
冰醋酸(glacial acetic acid 1ml
操作方法
1. 组织固定于Bouin氏液或Zenker氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2. 切片脱蜡至水。
如用Zenker氏液固定者,应进行除汞处理,其步骤如下:
(1 切片脱蜡后于0.5%碘酒精作用10分钟。
(2 稍水洗
(3 5%硫代硫酸钠作用5分钟。
(4 流水冲洗10分钟
3. Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
4. 流水稍洗。
5. 1%盐酸酒精分化。
6. 流水冲洗数分钟。
7. 丽春红酸性品红液染5-10分钟。
8. 蒸馏水稍冲洗。
9. 1%磷钼酸水溶液处理约5分钟。
10.不用水洗,直接用苯胺蓝液或绿液复染5分钟。
11.1%冰醋酸处理1分钟。
12.95%酒精脱水多次。
13.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固
结果:
胶原纤维虽蓝色(用苯胶蓝液复染或绿色(用亮绿复染。胞质、肌纤维和红细胞红色。胞核蓝褐色。
注意事项:
1.组织用Bouin氏液或Zenker氏液固定为佳。如已用10%甲酸液固定,切片可在脱蜡至水后.再放入Bouin氏液作用一晚或置37。C温箱内1-2小时,然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。
2.铁苏木素染核(见苦味酸一酸性品红法。
3.如没有丽春红染料,可把酸性品红加至1克来配制。
4.用1%磷钼酸处理时可在镜下控制.见肌纤维呈红色,胶原纤维呈淡红色即可。
染色原理:
上面介绍的胶原纤维染色如苦味酸-酸性品红法和三色染色法,都是利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用而完成鉴别染色的。Van Gieson氏染色中,为什么胶原纤维呈红色(被酸性品红所染,肌纤维呈黄色(被苦味酸所染.而Masson氏染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所
染,肌纤维呈红色(被酸性品红和丽春红所染,这与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。组织的渗透性(Permeability,取决于组织的结构密度。如果细致地观察,会发现组织和细胞成分都
是多孔的构造。不同的组织和细胞成分,它们的孔隙大小是不同的。孔隙的大小,决定了组织的渗透性。如孔隙小,组织结构致密,渗透性低;孔隙宽,组织结构疏松,渗透性高。如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料先后或混合染色,则可发现红细胞被最小分子的阴离子染料着染.肌纤维与胞质被中等大小的阴离子染料着染,而胶原纤维则被大分子的阴离子染料着染。由此说明了红细胞对阴离子染料的渗透性最小,肌纤维与胞质次之,而胶原纤维具有最大的渗透性。根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来.
染料分子的大小,主要由其分子量来体现。小分子量者易于穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子最者则只能进入结构疏松,渗透性高的组织。一般来说,结构疏松,渗透性高的组织多选择大分子染料,而结构致密,渗透性低的组织多选择小分子染料。常用作胶原纤维染色的几种阴离子染料的分子量由小到大分别是:
苦味酸(黄色,分子量,229.11
橙黄G(橙黄色,分子量452
丽春红(红色,j女子量,480.42
酸性品红(红色,分子量,585.53
苯胺蓝(蓝色,分子量737.72
亮绿(绿色,分子量792.72
甲基蓝(蓝色,分子量,799
因此,在Van Gieson氏法中,苦味酸染红细胞和肌纤维,酸性品红染胶原纤维,而在Masson氏法中,酸性品红或丽春红染肌纤维,而苯胺蓝或亮绿染胶原纤维。染色
反应是一个很复杂的过程,胶原纤维染色除上述两个方面外,不排除电子吸附和排斥作用。在实际染色中,两种阴离子染料的比例也是很重要的。在Van Gieson氏染色,苦味酸与酸性品红浓的比例若不恰当,如苦味酸的浓度太高,小分子量染料苦味酸占优势,则结构致密的胞浆,肌纤维和结构疏松的胶原纤维都会被苦味酸所着染。这点是要注意的。
应用:
胶原纤维和肌纤维的鉴别染色是病理组织制片的一个重要方法,它的染色对病理诊断很有帮助。 1.来源于间胚叶的肿瘤,如纤维瘤、平滑肌瘤、横纹肌瘤、神经纤维瘤甚至它们的肉瘤等都产生一定的纤维,这些纤维在H-E染色中都染成红色而难以区别。通过用上述方法染色,一般可区分出该肿瘤组织是胶原纤维源性,还是肌源性,或者是神经纤维源性。对于后者,有时还需加染磷
钨酸苏木素来协助诊断。
2.在慢性炎症,机化和瘢痕形成中,可随病理过程的发展而出现胶原纤维。在早期,H-E染色切片中的这些纤维往往和纤维蛋白很难鉴别,通过胶原纤维染色则可证实。如慢性肾小球肾炎的肾小球纤维化后,V.G.染色呈红色。大叶性肺炎或血栓发生机化后,原有的纤维蛋白灶内出现胶原纤维,V.G.染色呈红色。风湿性肉芽肿已静止时,阿啸夫氏(Aschoff's。巨细胞消失,病灶内的纤维被胶原纤维取代,V.G.染色也呈红色。胃、十二指肠溃疡愈复时,在渍疡底部出现胶原纤维构成的疤痕,慢性阑尾炎时阑尾壁出现的纤维化,肝硬化时胶原纤维的增生,这些用V.G。染色也都染成红色。
3.血管壁的胶原纤维染色对病理诊断也很重要。良性高血压,小动脉的玻璃样变,V.G.染色阳性。恶性高血压病时,小动脉管壁为纤维素样坏死,V.G.染色阴性而纤维素染色阳性
4.V.G.染色对是高血压性血管疾患还是淀粉性样变血管损害的鉴别也很重要。H-E染色的玻璃样变和淀粉样变有时很难区别,用V.G.染色和淀粉样物质染色则可
作出区别。如高血压性肾固缩其小动脉壁V染色呈红色。而淀粉样物质沉积的小动脉壁V.G.染色呈黄色。
备注
1 Bouin氏液是常用的混合固定液
配方: 苦味酸饱和液(1.22%75ml 福尔马林25ml 冰醋酸5ml 此液一般在临床用时配制,对皮肤及肌腱有软化作用。
2 苦味酸-酸性品红法
一Weigert氏铁苏木素液
甲液苏木素 1g
无水酒精(或 95%酒精 100ml
乙液 29%三氯化铁水溶液 4ml
蒸馏水 95ml (30%三氯化铁溶液则为100ml
盐酸 1ml
临用时,取甲、乙液等量混合即可应用。混合时应将乙液加人甲液内,染液呈紫黑色。铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用,因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀,所以铁作媒染液时,必须与染液分别配制和分别保存,染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素,它将胞核染成黑色。能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用,且不会被光线退色,因此比钾矾苏木素染色较为持久。
二 Van Gieson氏染液
A液:1%酸性品红水溶液
B液:苦味酸饱和水溶液(约1.2%
A、 B两夜分瓶盛放。临用前取A液1份,B液9份混合后使用
操作方法
1 组织固定于10%甲醛液,常规脱水包埋
2 切片脱蜡至水
3 用Weigert氏铁苏木素染液5~10分钟
4 流水稍洗
5 1%盐酸酒精迅速分化
6 流水冲洗数分钟
7 用Van Gieson氏染液染1~2分钟
8 倾去染液,直接用95%酒精分化和脱水(可放入温箱烤干后,直接透明封片
9 无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固
结果:肌纤维,胞质及红细胞黄色,胞核蓝褐色
Masson 三色染色液染色步骤及注意事项
Masson三色染色液染色步骤及注意事项 号：G1340 规格：7×50ml/7×100ml 有效期：12个月有效 产品简介： 结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维（collagen fiber）是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而，淡绿或苯胺蓝的分子量很大，因此Masson染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 Masson试剂盒的特点：◆染色稳定；◆分化时间短，1-2秒；◆色彩清楚鲜艳；◆使用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；◆所染切片保存时间长且不易褪色。 产品组成： 规格 名称 7×50ml7×100ml Storage 试剂(A):Weigert 铁苏木素染色液A1:Weigert染液A25ml50ml RT避光A2:Weigert染液B25ml50ml RT 临用时，取A1、A2等量混合，成为Weigert铁苏木素染色液，不可预先配制后放置。试剂(B):酸性乙醇分化液50ml100ml RT 试剂(C):Masson蓝化液50ml100ml RT 试剂(D):丽春红品红染色液50ml100ml RT避光
试剂(E):弱酸溶液50ml100ml RT 试剂(F):磷钼酸溶液50ml100ml RT避光 试剂(G):苯胺蓝染色液50ml100ml RT避光 使用说明书1份 自备材料： 固定液：选用甲醛升汞或甲醛盐溶液、蒸馏水、系列乙醇、二甲苯、染缸 操作步骤（仅供参考）： 1、切片常规脱蜡至水。 2、用配制好的Weigert铁苏木素染色液染色5min-10min。 3、酸性乙醇分化液分化5-15s，水洗。 4、Masson蓝化液返蓝3-5min，水洗。 5、蒸馏水洗1min。 6、丽春红品红染色液染色5-10min。 7、在上述操作过程中按蒸馏水：弱酸溶液=2:1比例配置弱酸工作液，用弱酸工 作液洗1min。 8、磷钼酸溶液洗1-2min 9、用配置好的弱酸工作液洗1min。 10、直接放入苯胺蓝染色液中染色1-2min。 11、用配置好的弱酸工作液洗1min。 12、95%乙醇快速脱水。 13、无水乙醇脱水3次，每次5-10s。 14、二甲苯透明3次，每次1-2min。
最优考马斯亮蓝染色Protocol
考马斯亮蓝染色 推荐选用前三种染色方法，另有传统考马斯亮蓝染色法和网上经验，染色效果不好，不推荐使用，仅供参考。（见后页比对照片） 操作步骤： 1、取出SDS-PAGE凝胶，经超纯水漂洗；（以下每步操作皆在摇床上进行。） 2、固定：将凝胶放入相应的固定液中，固定1小时； 3、染色：取出凝胶，放入相应的染色液中，过夜染色；（也可依实际情况缩短时间） 4、脱色（胶体法&改良法）：凝胶放入纯水中洗脱，换液数次； 脱色（Neuhoff法）：取出凝胶，用0.1 M Tris-H3PO4缓冲液（pH6.5）漂洗2分钟。再用25%乙醇淋洗＜1 min。然后再用10%乙酸中在室温脱色2小时即可。 试剂的配制： 1、胶体考马斯亮蓝染色法（colloidal Coomassie brilliant blue，cCBB）： 固定液：40%甲醇、10%乙酸 染色液：1.6%磷酸、8%硫酸铵、0.02% CBB-G250、20%乙醇 脱色液：H2O 2、改良考马斯亮蓝染色法（modified Coomassie brilliant blue，mCBB）： 固定液：40%甲醇、10%乙酸 染色液：10%磷酸、10%硫酸铵、0.12% CBBG250、20%乙醇（着色1小时即可）。 脱色液：H2O 3、Neuhoff染色法： 固定液：12%三氯醋酸 染色液：2%磷酸、10%硫酸铵、0.02% CBB-G250、使用前振摇。染色时，取一定体积的染色液，加入1/4体积的甲醇。 脱色所需：0.1 M Tris-磷酸缓冲液（pH6.5）、25%乙醇、10%醋酸
4、传统考马斯亮蓝染色法： 固定液：45.4%甲醇、4.6%乙酸 染色液：45.4%甲醇、4.6%乙酸、0.1% CBB-G250 脱色液：5%甲醇、7.5%乙酸 5、网上方法： 固定液：40%甲醇、10%乙酸 染色液：30%甲醇、10%乙酸、0.125% CBB-G250 脱色液：30％甲醇，10％乙酸 比对照片：每块胶左道是Marker（质量原因，未跑开( ˇ?ˇ )）上样量5μl，右道是BSA（分子量68kDa），上样量为3μg. Neuhoff法 传统法胶体法改良法网上法
马松三色染色液
马松三色染色液 【产品名称】 Masson三色染色液 【包装规格】 货号：DC0032 套组包装规格：8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒 【预期用途】 主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。 【检验原理】 马松染色又称，Masson三色染色，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法，所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织，苯胺蓝的分子量很大，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、Weigert铁苏木素A液苏木素 2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁 3、酸性乙醇分化液乙醇 4、蓝化液碳酸盐 5、丽春红品红染色液丽春红、品红 6、乙酸溶液乙酸 7、磷钼酸溶液磷钼酸 8、苯胺蓝染色液苯胺蓝 【储存条件及有效期】 5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为l8个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。 【样本要求】 组织片充分固定和脱蜡。 【检验方法】 1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等，流水冲洗，常规脱水包埋； 2、切片常规脱蜡至水； 3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液，用Weigert铁苏木素染色液染色，流水稍洗； 4、酸性乙醇分化液分化数秒，流水冲洗数分钟； 5、蓝化液返蓝数秒，流水冲洗数分钟； 6、丽春红品红染色液染色，流水稍冲洗； 7、按蒸馏水和乙酸溶液按比例配制乙酸工作液，用乙酸工作液洗切片； 8、磷钼酸溶液处理，倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗)； 9、苯胺蓝染色液复染，倾去玻片上染色液(不用水洗)； 10、用乙酸工作液处理切片，至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制)； 11、95%乙醇迅速脱水，无水乙醇脱水3次，二甲苯透明，中性树胶封固。
考马斯亮蓝染色套装使用说明
考马斯亮蓝染色套装使用说明 货号：P1305 保存：室温保存，至少一年有效。 规格：100ml+500ml 产品简介： 本考马斯亮蓝染色套装(Commassie Blue Staining Kit)采用了最经典的 考马斯亮蓝染色和脱色方法，以考马斯亮蓝G-250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色，或Western 转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。 产品内容： 考马斯亮蓝染色液100ml 考马斯亮蓝脱色液500ml 说明书1份 使用方法： 1、电泳结束后，取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中(至少5倍胶体积)，确保染色液可以充分覆盖凝胶。 2、将凝胶置于摇床上缓慢摇动，室温染色至少2小时，低丰度蛋白染 色需4小时以上。 3、染色结束后移除染色液，染色液通常可重复利用2-3次，但染色效
果会略有影响。 4、将凝胶浸泡于和染色液等量体积的脱色液中，摇床上脱色4-8小时，期间更换3-5次脱色液。 注意事项： 1.染色时间4小时以上效果最佳。 2.脱色可根据目的蛋白丰度和脱色效果随时终止，或延长脱色时间。 3.脱色越彻底，检测的蛋白量越低，脱色24小时一般可以检测出0.1ug蛋白量。 4.脱色后，将凝胶保存在水中，拍照或扫描保存图像。或制成干胶保存。 相关试剂： P1300-500考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液 PC0020BCA蛋白浓度测定试剂盒 PR1400低分子量蛋白MARKER PR1700预染次高分子量蛋白MARKER I1020IPTG溶液(50mg/ml) A101030%丙烯酰胺(29:1) T10705×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 P1300SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
masson三色染色法
Masson三色染色液说明书 【产品名称】 Masson三色染色液 【包装规格】 货号：DC0032 套组包装规格：8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒 【预期用途】 主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。 【检验原理】 Masson三色染色又称马松染色，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法，所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织，苯胺蓝的分子量很大，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、Weigert铁苏木素A液苏木素 2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁 3、酸性乙醇分化液乙醇 4、蓝化液碳酸盐 5、丽春红品红染色液丽春红、品红 6、乙酸溶液乙酸 7、磷钼酸溶液磷钼酸 8、苯胺蓝染色液苯胺蓝 【储存条件及有效期】 5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为l8个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。 【样本要求】 组织片充分固定和脱蜡。 【检验方法】 1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等，流水冲洗，常规脱水包埋； 2、切片常规脱蜡至水； 3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液，用Weigert铁苏木素染色液染色，流水稍洗； 4、酸性乙醇分化液分化数秒，流水冲洗数分钟； 5、蓝化液返蓝数秒，流水冲洗数分钟； 6、丽春红品红染色液染色数分钟，流水稍冲洗； 7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液，用乙酸工作液洗切片； 8、磷钼酸溶液处理后，倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗)； 9、苯胺蓝染色液复染，倾去玻片上染色液(不用水洗)； 10、用乙酸工作液处理切片，至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制)； 11、95%乙醇迅速脱水，无水乙醇脱水数次后，二甲苯透明，中性树胶封固。 【检验结果的解释】
Masson三色染色试剂盒说明书
Masson三色染色试剂盒说明书 Masson 三色染色试剂盒说明书（南京森贝伽生物科技有限公司） 【产品介绍】 Masson 染液是显示组织中纤维染色的主要方法之一，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关。分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。淡绿分子量最大。因此Masson 染色肌纤维红色，胶原纤维绿色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 【用途】主要用于胶原纤维染色。 【产品特点】 ①染色稳定；②分化时间短，1～2 分钟；③色彩清晰鲜艳；④适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；⑤所染切片保存时间长且不易褪色。 固定：甲醛升汞或甲醛盐溶液。 切片：所有类型。 【产品组成】 编号名 SBJ0126 （7×50ml）SBJ0126 （7×100ml） SBJ0126 （7×500ml） Storage 试剂（A） A1：苏木素染色液25ml 100ml 500ml RT A2：三氯化铁水溶液25ml 100ml 500ml RT 临用时取A1、A2 等量混合，成为试剂（A），不可预先配制后放置，因染色液的色素根与铁 会化合，形成不容性沉淀，等量混合后，一般24h 后失去染色力。 试剂（B）: 盐酸乙醇分化液50ml 100ml 500ml RT 试剂（C）: 氨水水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（D）: 丽春红酸性品红染色液50ml 100ml 500ml RT 试剂（E）: 乙酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（F）: 磷钼酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（G）: 苯胺蓝染色液50ml 100ml 500ml RT 【参考操作步骤】 1、切片脱蜡至水。 2、试剂（A）染色5min～10min。 3、试剂（B）分化、水洗，试剂（C）返蓝、水洗。 4、蒸馏水或者去离子水洗1min。 5、试剂（D）染色5～10min。 6、试剂（E）洗1min。 7、试剂（F）洗1～2min。 8、试剂（E）洗1min。
考马斯亮蓝染色法
蛋白质浓度的测定──考马斯亮蓝染色法 目的要求 学习考马斯亮蓝（Coomassie Brilliant Blue）法测定蛋白质浓度的原理和方法。 实验原理 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度，是利用蛋白质―染料结合的原理，定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。 考马斯亮蓝G―250存在着两种不同的颜色形式，红色和蓝色。它和蛋白质通过范德华力结合，在一定蛋白质浓度范围内，蛋白质和染料结合符合比尔定律（Beer’s law）。此染料与蛋白质结合后颜色有红色形式和蓝色形式，最大光吸收由465nm变成595nm，通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。 蛋白质和染料结合是一个很快的过程，约2min即可反应完全，呈现最大光吸收，并可稳定1h，之后，蛋白质―染料复合物发生聚合并沉淀出来。蛋白质―染料复合物具有很高的消光系数，使得在测定蛋白质浓度时灵敏度很高，在测定溶液中含蛋白质5μL/ml时就有0.275光吸收值的变化，比Lowry法灵敏4倍，测定范围为10－100μg蛋白质，微量测定法测定范围是1－10μg蛋白质。此反应重复性好，精确度高，线性关系好。标准曲线在蛋白质浓度较大时稍有弯曲，这是由于染料本身的两种颜色形式光谱有重叠，试剂背景值随更多染料与蛋白质结合而不断降低，但直线弯曲程度很轻，不影响测定。 此方法干扰物少，研究表明：NaCl，KCl，MgCl2，乙醇，（NH4）2SO4无干扰。强碱缓冲液在测定中有一些颜色干扰，这可以用适当的缓冲液对照扣除其影响。Tris，乙酸，2―巯基乙醇，蔗糖，甘油，EDTA及微量的去污剂如Triton X―100，SDS，玻璃去污剂有少量颜色干扰，用适当的缓冲液对照很容易除掉。但是，大量去污剂的存在对颜色影响太大而不易消除。 试剂与器材 一、试剂 考马斯亮蓝试剂： 考马斯亮蓝G―250 100mg溶于50ml95%乙醇中，加入100ml85%磷酸，用蒸馏水稀释至1000ml，滤纸过滤。最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G―250，4.7%(W/V)乙醇。 二、标准和待测蛋白质溶液 1．标准蛋白质溶液 结晶牛血清蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，根据其纯度用0.15mol/LNaCl配制成1mg/ml，0.1mg/ml蛋白溶液。 2．未知蛋白质溶液。 三、器材 试管及试管架，移液管（0.1ml及5ml），UV－2000型分光光度计。 操作方法
改良Masson 三色染色液使用说明
改良Masson三色染色液使用说明 货号：G1345 规格：8×50ml/8×100ml 有效期：12个月有效 产品简介： 结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维（collagen fiber）是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而，淡绿或苯胺蓝的分子量很大，因此Masson染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 改良Masson染色胶原纤维呈蓝色，肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞呈红色，胞核呈蓝褐色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 改良Masson三色染色与常规Masson三色染色的区别在于采用天青石蓝苏木素淡染细胞核。其特点在于：分化时间短(1～2分钟)；色彩清晰鲜艳；适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；所染切片保存时间长且不易褪色。改良Masson染色胶原纤维呈蓝色，肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞呈红色，细胞核呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 产品组成： 规格 8×50ml8×100ml Storage 名称 试剂(A):Bouin液50ml100ml RT 试剂(B):天青石蓝染色液50ml100ml4℃避光 试剂(C):Mayer苏木素染色液50ml100ml4℃避光
常规考马斯亮蓝染色液
常规考马斯亮蓝染色液 简介： 考马斯亮蓝染色液(Commassie Blue Staining Solution)是以考马斯亮蓝R250为染料可用于SDS-PAGE 或非变性PAGE 等蛋白电泳胶的常规染色或Western 转膜后PAGE 胶上残余蛋白的检测。采用常规染色方法需至少1h ，采用快速染色方法一般数分钟即可。本染色液经过改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性气味的乙酸。 组成： 操作步骤(仅供参考)： (一)常规染色脱色方法 1、PAGE 电泳结束后取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，确保染色液可以充分覆盖凝胶。 2、置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色1小时或更长时间。具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚，温度较低，则染色时间宜适当延长。凝胶较薄，温度较高，则染色时间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近，在染色液中几乎看不清凝胶时，可以认为已染色充分。染色小时或更长时间不会对最终的染色效果产生负面影响。 3、倒出染色液。染色液可以回收重复使用次。 4、加入适量脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶。Leagene 推荐脱色液的配方是：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸馏水。 5、置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色。期间更换脱色液2～4次，直至蓝色背景基本上全部被脱去，并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1～2h 后即可出现。 6、完成脱色后把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨，可以把胶保存在含20%甘油水溶液中，长期保存可以制备干胶。 (二)快速染色脱色方法 1、PAGE 电泳结束后取胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾，立即停止加热。 2、随后在染色液温度较高的情况下，在室温摇床上摇动。 3、倒出染色液。染色液可以回收重复使用2～3次。 编号 名称 PT0018 PT0018 Storage Commassie Blue Staining Solution 100ml 500ml RT 使用说明书 1份
masson染色结果分析教程文件
精品文档 精品文档Masson三色染色液说明书 【产品名称】 Masson三色染色液 【包装规格】 货号：DC0032 套组包装规格：8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒 【预期用途】 主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。 【检验原理】 Masson三色染色又称马松染色，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法，所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织，苯胺蓝的分子量很大，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、Weigert铁苏木素A液苏木素 2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁 3、酸性乙醇分化液乙醇 4、蓝化液 碳酸盐 5、丽春红品红染色液丽春红、品红 6、乙酸溶液乙酸 7、磷钼酸溶液磷钼酸 8、苯胺蓝染色液 苯胺蓝 【储存条件及有效期】 5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为l8个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。 【样本要求】 组织片充分固定和脱蜡。 【检验方法】 1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等，流水冲洗，常规脱水包埋； 2、切片常规脱蜡至水； 3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液，用Weigert铁苏木素染色液染色，流水稍洗； 4、酸性乙醇分化液分化数秒，流水冲洗数分钟； 5、蓝化液返蓝数秒，流水冲洗数分钟； 6、丽春红品红染色液染色数分钟，流水稍冲洗； 7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液，用乙酸工作液洗切片； 8、磷钼酸溶液处理后，倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗)；
最优考马斯亮蓝染色Protocol
最优考马斯亮蓝染色 P r o t o c o l Company number：【WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998】
考马斯亮蓝染色 推荐选用前三种染色方法，另有传统考马斯亮蓝染色法和网上经验，染色效果不好，不推荐使用，仅供参考。（见后页比对照片） 操作步骤： 1、取出SDS-PAGE凝胶，经超纯水漂洗；（以下每步操作皆在摇床上进行。） 2、固定：将凝胶放入相应的固定液中，固定1小时； 3、染色：取出凝胶，放入相应的染色液中，过夜染色；（也可依实际情况缩短时间） 4、脱色（胶体法&改良法）：凝胶放入纯水中洗脱，换液数次； 脱色（Neuhoff法）：取出凝胶，用 M Tris-H3PO4缓冲液（）漂洗2分钟。再用25%乙醇淋洗＜1 min。然后再用10%乙酸中在室温脱色2小时即可。 试剂的配制： 1、胶体考马斯亮蓝染色法（colloidal Coomassie brilliant blue，cCBB）： 固定液：40%甲醇、10%乙酸 染色液：%磷酸、8%硫酸铵、% CBB-G250、20%乙醇 脱色液：H2O 2、改良考马斯亮蓝染色法（modified Coomassie brilliant blue，mCBB）： 固定液：40%甲醇、10%乙酸 染色液：10%磷酸、10%硫酸铵、% CBBG250、20%乙醇（着色1小时即可）。 脱色液：H2O 3、Neuhoff染色法： 固定液：12%三氯醋酸
染色液：2%磷酸、10%硫酸铵、% CBB-G250、使用前振摇。染色时，取一定体积的染色液，加入1/4体积的甲醇。 脱色所需： M Tris-磷酸缓冲液（）、25%乙醇、10%醋酸 4、传统考马斯亮蓝染色法： 固定液：%甲醇、%乙酸 染色液：%甲醇、%乙酸、% CBB-G250 脱色液：5%甲醇、%乙酸 5、网上方法： 固定液：40%甲醇、10%乙酸 染色液：30%甲醇、10%乙酸、% CBB-G250 脱色液：30％甲醇，10％乙酸 比对照片：每块胶左道是Marker（质量原因，未跑开( ˇˇ )）上样量5μl，右道是BSA（分子量68kDa），上样量为3μg.
生物翻译
人类脂肪肝疾病：老问题的和新见解（老师 要求斜体了么？） 最好加上题目和正文中间的那段，如果有时 间和精力的话 早在真核生物的进化过程中，甘油三酯（TG）便成为首选的储存养分的物质，并且当所需能量和需求出现波动时（能量的需求和获得出现波动时），它可以起到缓冲作用。甘油三酯这一物质的普遍地被选择的（扮演的这种角色普遍存在）原因是基于（归因于）它的两大理化性质：1.甘油三酯比碳水化合物（4.5大卡/克）或蛋白质（4大卡/克）热量密度更高的（9大卡/克）（删）。2.甘油三酯不溶于水，所以他们可以积累很高水平的能量并且不存在胶体渗透压（这个专有名词的翻译你确定对么？）对细胞不良的影响。在高等生物中，甘油三酯是储存在脂肪细胞中的，并且只有在特殊的情况下才积聚在其它类型的细胞中。例如，候鸟存在肝脏中储村大量的甘油三酯作为能量来源以应对长期季节性的飞行，人们已经习惯于品尝用候鸟的肝脏烹饪美味的鹅肝酱。（烹调美味鹅肝）人类也是一样的，当人们摄入过多的能量时，多余的能量会以脂肪的形式储存在肝脏中。然而人类显然是不能够适应脂肪肝的，临床上，脂肪肝可导致严重的后果。 非酒精性脂肪性肝病（脂肪肝）是用来描述一系列相关疾病总称（的涵盖性术语）（图1）。这种疾病的（删）最早的阶段是脂肪肝，这一阶段的判定是根据细胞的细胞质中以脂滴形式沉积下来的甘油
三酯的量。对于偏瘦的人，正常体重的人当肝脏中的甘油三酯含量超过正常的95%（即每克肝甘油三酯含量>55毫克）或细胞质中存在甘油三酯液滴的细胞超过肝细胞总数的5%时可认定为第一阶段（这个我不确定对不对），或（删）（图1 b）（1）。第一阶段的脂肪肝通常是会得到机体的调控的，但它也可以进展到非酒精性脂肪性肝炎。非酒精性脂肪性肝炎是通过肝细胞损伤、发炎、胶原沉积（纤维化）程度（肝细胞膨胀和细胞死亡）区别于单一的脂肪肝的。（调整顺序：通过肝细胞损伤、发炎、胶原沉积（纤维化）程度（肝细胞膨胀和细胞死亡）区别非酒精性脂肪性肝炎和单一的脂肪肝）目前还不清楚是否（放到后面）脂肪（+变性）总是发生于非酒精性脂肪性肝炎之前或是脂肪（+变性）和非酒精性脂肪性肝炎是不同的机体功能紊乱（图1）。然而非酒精性脂肪性肝炎可发展成为肝硬化：患有非酒精性脂肪性肝炎的人中有10%至29%与非酒精性脂肪性肝炎在10年内发展为肝硬化（2）。在（对于）肝硬化，肝细胞被主要由1型胶原蛋白组成的疤痕组织所取代。胶原是由专门的细胞—星状细胞产生的，这种细胞因肝损伤而被激活，在肝脏的再生过程中发挥着关键作用。肝硬化最终可以发展为肝癌（图1）；4%至27%的患有由非酒精性脂肪性肝炎诱发的肝硬化的病人与发展为肝癌（3）。肝脏甘油三酯含量可以通过无创成像方式检测，但肝活检则需要确定非酒精性脂肪肝的阶段。
Masson三色染色液G1006
Masson 三色染色液30ml+20ml*5 RT 产品简介： 由Mallory 三色染色改造，利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色，与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。根据组织不同的渗透性能，选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色，便可把不同组织成分显示出来。包装内容：产品货号 产品名称规格G1006-1 重铬酸钾媒染剂30ml G1006-2 Weigert 铁苏木素A 液20ml G1006-3 Weigert 铁苏木素B 液20ml G1006-4 丽春红酸性品红染液20ml G1006-5 磷钼酸溶液20ml G1006-6苯胺蓝染液20ml 保存条件：室温保存，有效期1年。 操作说明： 1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min ，自来水洗。 2、重铬酸钾染色：切片入重铬酸钾浸泡过夜，自来水洗。 3、铁苏木素染色：铁苏木素A 液与B 液等比混合成铁苏木素染液，切片入铁苏木素3min ，自来水洗，盐酸酒精溶液分化，自来水冲洗。 4、丽春红酸性品红染色：切片入丽春红酸性品红浸染5-10min ，自来水漂洗。 5、磷钼酸染色：磷钼酸水溶液浸染1-3min 。 6、苯胺蓝染色：磷钼酸之后不用水洗，直接入苯胺蓝染液染3-6min 。 7、分化：切片用1%冰醋酸分化，两缸无水乙醇脱水。 8、透明封片：切片放入第三缸无水乙醇5min ，二甲苯5min 透明，中性树胶封片。9、显微镜镜检，图像采集分析。 染色结果： 胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色。弹力纤维呈棕色。肌纤维、纤维素和红细胞染红色。细胞核染蓝黑色。 G 1006
一种简便的考马斯亮蓝G250蛋白质染色方法_江南
经验交流 一种简便的考马斯亮蓝G250蛋白质染色方法* 江南1)吴开力黄强潘苏华 (中山医科大学中山眼科中心,广州510060) 摘要介绍一种快速、简便、几乎无背景的考马斯亮蓝G250(CBB G250)染色方法.该方法所用试剂仅为稀盐酸和CBB G250,CBB G250的工作浓度为010015%,灵敏度达0102L g/带,染色2h达70%,4h以上或染色过夜即可充分染色.与以往的考马斯亮蓝染色方法相比,该方法有经济方便、灵敏度高、几乎无背景等优点,便于推广应用. 关键词电泳,染色方法,考马斯亮蓝G250 学科分类号Q5-33 蛋白质电泳后染色方法有多种:氨基黑染色、考马斯亮蓝染色和银染色等.其中考马斯亮蓝染色克服了氨基黑染色灵敏度较低,和银染法操作复杂、假阳性率高的缺点,是最常用的染色方法.但它仍然存在一些问题,如考马斯亮蓝R250 (CBB R250)背景深、耗时长;CBB G250灵敏度不高;二者所耗试剂均较多.近几年,人们对考马斯亮蓝染色法作了许多改进,不同程度地改善了某些方面的问题,但仍未尽善.本文介绍一种经济快速,灵敏度高,几乎无背景的CBB G250染色方法. 1材料和方法 111材料 11111蛋白质样品:牛血清白蛋白(BSA)购自Bio-Rad公司;小牛晶状体的alpha晶体蛋白由Sephadex G200sf两次柱层析(100cm@116cm和40cm@116cm)分离获得. 11112染色液配制:1mol/L盐酸溶液(A), 1g/L CBB G250溶液(B);应用时用1ml A液和15ml B液混合加水至1L,搅拌混匀. 11113仪器:Bio-Rad Model1000/500电泳仪; Bio-Rad(M in-i Proteanò)电泳槽.DY-1500A型高压电泳仪;Pharmacia Biotech(M ultiphorò)电泳槽. 112方法 11211电泳:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、常规聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、等电聚焦(IEF)参照郭尧君等[1]方法操作. 11212染色程序:a1电泳完毕,取出凝胶浸于5mmol/L盐酸溶液中,振荡1h;b1弃去盐酸溶液,重复步骤a;c1将胶置于染色液中,染色2~ 16h,连续振荡;d1弃去染色液,将胶置于1mmol/L盐酸溶液中脱色数小时(换液3~5次).最后对凝胶进行观察和照相,并将凝胶保存于1mmol/L盐酸溶液中. 11213凝胶染色图象分析:在染色和漂洗过程中应用Alphaimag e2000Documentation&Analysis System对凝胶照相(同一照相条件及参数)并作蛋白质条带染色强度分析;观察染色的强度变化时,以同一参照点分别测定蛋白质条带和凝胶背景的染色强度;测定漂洗时染色强度变化则以蛋白质条带的强度减去背景强度后作为该蛋白质条带的染色强度;染色强度和加样量的相关性分析采用Video DensitometeròSystem(USA Biomed Instrument.Inc),扫描每条蛋白质条带的染色强度并计算其与加样量的依存关系;染色的灵敏度通过加样不同浓度(\10ng)的BSA,染色后以肉眼能观察到的最低浓度的条带为标准. *广东省自然科学基金项目(970084)部分工作. 1)通讯联系人. Tel:(020)87330395,E-mail:yunj uyan@https://www.wendangku.net/doc/6a18265403.html, 收稿日期:1999-08-15,修回日期:2000-01-04 # 560 #生物化学与生物物理进展Prog.Biochem.Biophys.2000;27(5)
改良Masson三色染色液
仅供科研版本号：170410 改良Masson三色染色液 【产品组成】 【保存条件】 4℃,避光,12个月 【产品概述】 结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维，而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而，淡绿或苯胺蓝的分子量都很大，因此Masson染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色(淡绿)或蓝色(苯胺蓝)，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 改良Masson三色染色与常规Masson三色染色的区别在于采用天青石蓝苏木素淡染细胞核。其特点在于分化时间短(1～2min)；色彩清晰鲜艳；适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；所染切片保存时间长且不易褪色。胶原纤维呈蓝色，肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞呈红色，胞核呈蓝褐色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 【使用方法】 1、组织固定于10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。切片厚4μm，常规脱蜡至水。 2、切片入Bouin液，室温作用一晚或置入37℃温箱内2h进行媒染，然后流水冲洗至切片上的黄色消失。 3、天青石蓝染色液滴染2~3min，稍水洗。 4、Mayer苏木素染色液滴染2~3min，稍水洗。 5、酸性乙醇分化液分化数秒，流水冲洗10min。 6、丽春红品红染色液滴染10min，蒸馏水稍冲洗。 7、磷钼酸溶液处理约10min。 南京森贝伽生物科技有限公司网址：https://www.wendangku.net/doc/6a18265403.html,/ 第1页
masson染色步骤(临床医学研究中心总结)
试剂名：改良 Masson 三色染色液货号：G1345 品牌：索莱宝 1、石蜡切片65℃烘烤1h（使组织更贴合玻片，并溶解石蜡。如果是刚切好的切片，则烘烤2-3h），立即放入脱蜡剂中脱蜡； 2、脱蜡：脱蜡剂Ⅰ（15min）、脱蜡剂Ⅱ（15min） 水化：无水乙醇I（5min）、无水乙醇 II（5min）、95%乙醇I（5min）、95%乙醇II （5min）、85%乙醇（5min）、75%乙醇（5min）脱蜡处理，蒸馏水3min 3、将 Bouin 液滴在组织上，于室温作用一晚或置入 37℃的温箱内 2h 进行媒染，然后流水冲洗至切片组织上的黄色消失。 4、天青石蓝染色液滴染3min，稍水洗玻片上无染料即可。 5、Mayer 苏木素染色液滴染3min，稍水洗玻片上无染料即可。（显微镜下观察，细胞核呈现深蓝色，细胞质有蓝色） 6、酸性乙醇分化液分化3-5s，流水冲洗 10min返蓝。（细胞核呈现灰蓝色，细胞质应相对透明无色） 7、丽春红品红染色液染 2-5min，稍水洗玻片上无染料即可。（容易造成深红或紫红色，基本看不清细胞核。建议先染色30s-1min，显微镜下观察，适当增加时间） 8、磷钼酸溶液浸泡10min，倾去上液，切片不用水洗，直接滴入苯胺蓝染色液染 5- 10min。（如果丽春红染色过深，苯胺蓝也应该适当染久一些，最终应该是红蓝色分明，能明显分辨出胶原显微） 9、弱酸溶液处理 2min。 10、透明：切片直接依次放入无水乙醇 I（5min）-无水乙醇 II（5min）- 脱蜡剂Ⅰ（5min）- 脱蜡剂Ⅱ（5min）。然后用纸巾擦干玻片上残余脱蜡剂，或直接铺平玻片在通风橱内，干燥脱蜡剂。使用中性树脂封片。 注：masson染色不像HE可以把颜色洗脱再重复步骤，建议使用同一批切片，先摸索染色时间。
Masson三色染色
Masson 三色染色 一、实验原理 结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维（collagen fiber）是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson 三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而，淡绿或苯胺蓝的分子量很大，因此 Masson 染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 二、实验材料 Masson 试剂盒厂家货号：索莱宝 G1340 产品组成： 试剂(A):Weigert 铁苏木素染色液 A1:Weigert 染液A 25ml RT避光 A2:Weigert 染液B 25ml RT 临用时，取 A1、A2 等量混合，成为 Weigert 铁苏木素染色液，不可预配制后放置。 试剂(B): 酸性乙醇分化液 50ml RT 试剂(C): Masson 蓝化液 50ml RT 试剂(D): 丽春红品红染色液 50ml RT 避光 试剂(E): 弱酸溶液 50ml RT 试剂(F): 磷钼酸溶液 50ml RT 避光 试剂(G): 苯胺蓝染色液 50ml RT 避光 自备材料：固定液：选用甲醛升汞或甲醛盐溶液 系列乙醇 二甲苯 操作步骤（仅供参考）： 1、切片常规脱蜡至水。 2、用配制好的 Weigert 铁苏木素染色液染色 5min-10min。 3、酸性乙醇分化液分化 5-15s，水洗。 4、 Masson 蓝化液返蓝 3-5min，水洗。 5、蒸馏水洗 1min。 6、丽春红品红染色液染色 5-10min。 7、在上述操作过程中按蒸馏水：弱酸溶液=2:1 比例 配置弱酸工作液，用弱酸工作液洗 1min。 8、磷钼酸溶液洗 1-2min
考马斯亮蓝染色
考马斯亮蓝染色 一产品简介： 本考马斯亮蓝染色试剂盒(Commassie Blue Staining Kit)采用了最经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法，以考马斯亮蓝R250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。 使用本试剂盒，采用常规染色脱色方法累计时间达到2-3小时后可以观察到蛋白条带；采用快速染色脱色方法20分钟左右即可观察到蛋白条带。观察到最清晰的蛋白条带则需染色脱色更长时间。 本试剂盒中的染色液和脱色液经过改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性气味的乙酸。二保存条件：室温保存，至少一年有效。 注意事项： 可以使用枪头盒或适当大小的培养皿作为染色和脱色的容器。 本染色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 三使用说明： 1. 常规染色脱色方法： a. 电泳结束后，取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，确保染色液可以充分覆盖凝胶。 b. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色1小时或更长时间。 注：具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚，温度较低，则染色时间宜适当延长。凝胶较薄，温度较高，则染色时间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近，在染色液中几乎看不清凝胶时，可以认为已染色充分。染色2-4个小时或更长时间不会对最终的染色效果产生负面影响。 c. 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。 d. 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶。 e. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色4-24小时。期间更换脱色液2-4次，直至蓝色背景基本上全部被脱去，并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1-2小时后即可出现。 注：脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸，可以使部分染料吸附在吸水纸上，加快脱色。脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。 f．完成脱色后，可以把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨，可以把胶保 存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。 2. 快速染色脱色方法： a. 电泳结束后，取胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾，立即停止加热。通常对于胶浓度大于10％的胶比较坚韧，在发生煮沸时不易破损；对于胶浓度小于10%的胶，宜尽量避免煮沸，以免出现胶碎裂的情况。 b. 随后在染色液温度较高的情况下，在室温摇床上摇动5-10分钟。 c. 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。 d. 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液，确保染色液可以充分覆盖凝胶。 e. 微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾，立即停止加热。 f. 随后在脱色液温度较高的情况下，在摇床上摇动5-10分钟。此时通常可以观察到比较清楚的蛋白条带。 g. 更换新鲜的脱色液，重复步骤e和步骤f，直至蓝色背景基本上全部被脱去，蛋白条带染色效果达到预期。
Pollak三色染色液
Pollak三色染色液 产品简介： Masson三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。Pollak三色染色是在Masson三色染色法基础上改良而来的结缔组织多色染色法，采用媒染剂和促染剂同时染色，可使结缔组织中的多种成分着色。 产品组成： 自备材料： 1、10%中性福尔马林固定液 2、系列乙醇 3、蒸馏水 操作步骤(仅供参考)： 1、切片常规脱蜡至水。 2、用配制好的Weigert铁苏木素染色。 3、充分水洗，镜下观察。如果染色过深，可用酸性乙醇分化液分化数秒。 4、水洗返蓝，蒸馏水洗2～4次。 5、乙醇快速脱水。 6、无水乙醇脱水3次，每次5～10s。 7、二甲苯透明3次，每次1～2min。
8、中性树胶封固。 染色结果： 胶原纤维、黏液、软骨、神经纤维蓝色 肌肉、弹力纤维红色 纤维素 紫红色 红细胞 橘红色 细胞核 蓝黑色 注意事项： 1、切片脱蜡应尽量干净。 2、 组织固定起着非常重要的作用，使用不同的固定液可延或缩短染色时间。 3、Pollak染色液的染色时间应严格控制：染色时间过短，导致红色加深；染色时间过长， 导致绿色或蓝色加深。 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期：6个月有效。 相关产品： 产品编号 产品名称 DA0093 迪夫快速染色液(Diff-Quik Stain) DC0021 网状纤维染色液(改良Gomori氨银法) DC0032 Masson三色染色液 DC0041 天狼星红染色液 DC0059 Verh?eff弹力纤维染色液 DC0080 Russell改良Movat五色套染染色液 DF0111 中性福尔马林固定液(10%) DG0005 糖原PAS染色液 DH0006 苏木素伊红(HE)染色液 DJ0001 普鲁士蓝染色液(核固红法)