土壤中有机磷农药的测定

第8章土壤中有机磷农药的测定

8.1概述

长期以来，大面积使用化学农药严重破坏环境和生态，而我国化学农药的使用量是世界平均用量的2.5倍，高毒农药使用量占我国农药使用量的30%[1]。

有机磷农药是上世纪三十年代德国G.Schradev首先发现的，有机磷农药是作为取代有机氯农药而发展起来的新型农药，这种农药较有机氯农药容易降解，对自然环境的污染和生态系统的危害、残留没有有机氯农药普遍和持久。但事实上，有机磷农药并不是理想高效、低毒、低残留农药，其在环境中的残留也不容忽视[2]，并在动物体内富集[3]。

有机磷农药一般为硫代磷酸酯类或磷酸酯类化合物，大多呈结晶状或油状，工业品呈棕色或淡黄色，除敌敌畏和敌百虫之外，大多有蒜臭味。这类农药除敌百虫、磷胺、甲胺磷、乙酰甲胺磷等易溶于水，其它不溶于水，易溶于有机溶剂如苯、丙酮、乙醚、三氯甲烷及油类。有机磷农药分子结构一般具有容易断裂的化学键，在酸性和中性溶液中较稳定，遇碱易分解破坏，对光、热、氧均较稳定，略具挥发性，遇高热可异构化，加热遇碱可以加速分解。

有机磷农药是一种神经毒物，作用机制是抑制生物体内的乙酰胆碱酯酶，引起神经系统紊乱，并造成中毒。另外，有机磷农药迟发性毒性还会对生殖系统造成损害。

印度北部Kanpur市，地表水中马拉硫磷含量达2.618mg/L，地下水含量高达29.835mg/L[4]。

近年来，我国农药工业迅速发展，农药年产量居世界第二位。其中，有机磷农药产量占全世界总量的1/3，占全国农药总量的50%以上[5]。

我国近年来用量最大的农药主要是甲拌磷、特丁硫磷、甲胺膦、氧乐果、丙溴磷、乐果、水胺硫磷、杀螟硫磷、辛硫磷、异稻瘟净、马拉硫磷、乙酰甲胺磷、甲基毒死蜱、毒死蜱、三唑磷、敌百虫、敌敌畏、草甘膦等有机磷农药产品年产量约占我国有机磷类农药总产量的90%以上[6]。

8.2相关环保标准和工作需要

8.2.1 国内相关标准

目前我国的各类环境质量标准和污染物排放标准中，除了危险废物毒性标准中有四种有机磷的排放限值，还没有土壤和沉积物中有机磷的相关质量和排放标准，详见表1。

表1 有机磷相关环境质量或排放标准

环境质量或排放标准标准号排放限值浓度单位

土壤环境质量标准GB15618-1995 无相关排放标准

危险废物毒性标准浸出毒性鉴别GB5085.3-2007

乐

果

对硫

磷

甲基对

硫磷

马拉硫磷浸出液

8 0.3 0.2 5.0 mg/L

生活垃圾填埋污染控

制标准

GB16889-2008 无相关排放标准展览馆用地土壤环境

质量标准

HJ350-2007 无相关排放标准

城镇垃圾农用控制标

准

GB8172-1987 无相关排放标准

10.2.2 国外相关标准

欧盟Council Directive 98/93/EC指令（Council Directive 98/93/EC，1998）设置饮用水中单一农药的限值是0.1μg/L，农药总量限值是0.5μg/L[7~11]。美国EPA对于地下地表水中有机磷农药的标准限值是：二嗪农3μg/L，马拉硫磷2μg/L，乙拌磷1μg/L，克线磷2μg/L等。

四个欧盟法令（Council Directive 76/895/EEC，1976；Council Directive86/362/EEC，1986；Council Directive 86/363/EEC，1896；Council Directive 90/642/EEC，1990）设置了食物中最大农药残留量标准，国际食品法典委员会也设置了食品中农药最大残留量标准[12~16]，相关标准限值如表2所示。

表2 国外食品中有机磷农药残留的标准限值

农药允许的最大残留量（mg/kg)

农药

允许的最大残留量

（mg/kg) EC Codex EC Codex

高灭磷0.05-0.2 0.01-0.5 马拉硫磷0.02-8 0.01-20

谷硫磷0.01-0.5 0.05-10 甲基对硫磷0.02-5 0.05-1

毒死蜱0.05-5 0.01-5 甲拌磷0.02-1 0.05-1

二嗪农0.01-5 0.01-5 亚胺硫磷0.05-10 0.05-0.2

乐果0.02-2 0.05-5 特丁磷0.01 0.05-0.3

8.3分析方法最新进展

有机磷农药的分析方法主要由色谱技术（气相色谱和液相色谱）、电化学、免疫化学、生物传感器等技术组成，其各部分构成比列见图1所示。

图1 有机磷分析方法的各部分组成及比例

8.3.1 色谱分析技术

色谱分析技术是有机磷农药的主要分析技术，其比例占到了整个有机磷分析技术的66%，而且色谱技术是目前应用最广泛也是最成熟的技术。完整的土壤中有机磷色谱分析技术包括前处理和仪器分析两大部分。

8.3.3.1 土壤中有机磷的样品前处理技术

土壤中有机磷的样品前处理技术主要包括提取和净化两个方面，提取技术主要有索式提取、超声萃取、超临界流体萃取、加速溶剂萃取、微波辅助溶剂萃取等方法。净化方法主要采用固相萃取净化和凝胶渗透色谱净化方法两种。

刘成亮等[17]采用超声萃取土壤中有机磷农药（敌敌畏、对硫磷、甲基对硫磷），取5g土壤,加入10g无水硫酸钠，用DCM：ACE（1:1，v/v）混合溶液超声提取3次，每次萃取时间10min。加标回收率范围在91%~96%，7次RSD范围在3.8%~6.4%。

Mohammad Hosein Naeeni等[18]采用超临界流体萃取测定土壤和沉积物中的七种有机磷农药，三乙基膦、硫磷嗪、治螟磷、乙拌磷、甲基对硫磷、对硫磷和胺磺磷。超临界CO2（150bar、60℃）10min静态萃取和30min 动态萃取，萃取液收集在1mL乙腈中。加标回收率范围在44.4%~95.4%，相对标准偏差低于7.5%，检出限范围在0.001~0.009mg/kg。

朱晓兰等[19]采用加速溶剂萃取法测定土壤中有机磷农药残留物。土壤样品与无水硫酸钠（1:2 m/m）混合后，再加适量中性氧化铝和活性碳，用丙酮、甲醇（1:1,V/V）在加速溶剂萃取仪上以10.2Mpa、60℃提取10min,对

土壤中10种有机磷农药的回收率在80.4%~113.7%之间。该法用于土壤中的有机磷农药残留测定，速度快，检出限为0.01~0.06μg/kg。

Edwar Fuentes等[20]采用微波辅助溶剂萃取测定农业土壤中的二嗪农、对硫磷、甲基对硫磷、杀螟松、灭线磷、甲基嘧啶磷。称取1g土壤样品，加入1~3mL萃取溶剂（水-乙腈或水-甲醇混合溶剂，54~77%，v/v）并混匀，然后再加入5mL正己烷。250W微波功率预热2min，300~600W功率保持3~15min，土壤加标回收率高于73%，标准偏差小于11%，检出限范围在0.004~0.012μg/g。

固相萃取小柱净化又称为柱层析净化，根据不同吸附填料可有很多种选择，但主要的萃取小柱净化方法有三种，分别是氧化铝净化、佛罗里硅土净化和硅胶净化。（1）中性氧化铝：中性氧化铝对烷烃的去除不是十分有效，一般不单独使用氧化铝作净化柱，而是用硅胶、氧化铝占一定比例的混合柱。（2）弗罗里硅土柱：又称硅酸镁，重复性较高，但在净化有机磷农药样品时，在上样时会有机磷农药损失，故不适用于有机磷农药的净化；（3）硅胶柱层析：该方法主要用于PAHs 的纯化分离，在有机磷农药的净化中的上样部分没有损失。硅胶柱需先活化，可采用400℃下活化2h，也可以采用在130℃下活化16h，也可使用商品化的小柱。

凝胶渗透色谱是较为理想的土壤有机磷农药萃取液的净化方法，主要对于土壤中的共萃取大分子等物质能较好去除。如Gang Wu等[21]采用是环己烷和乙酸乙酯的混合溶液（1:1，v/v）作为GPC的有机流动相，40gBio-Bead S-X3作为GPC填料,流速是5ml/min，检测波长是254nm，并收集8~20min的流出液。

8.3.3.2 土壤中有机磷农药的色谱分析技术

土壤中有机磷农药的色谱分析技术主要有气相色谱法、气相色谱/质谱联用法、液相色谱法和液相色谱/质谱联用法。

⑴气相色谱法

气相色谱法一般结合电子捕获检测器(ECD)、火焰光度检测器(FPD)和氮磷检测器(NPD)测定有机磷农药，使有机磷农药残留量最小检出量达到纳克级水平，并成为环境样品中有机磷农药的有效分析方法[22]。

ECD对电负性有机物有很高灵敏度，一般有机磷农药多为电负性的磷酸脂类有机物，适合用ECD进行检测，并且ECD选择性也很好好，可以避免烃类等不含电负性基团化合物的干扰，但使用ECD的缺点在于容易过载，因此对样品的净化程度要求很高需要除去或者改用，如wan等[23]采用ECD检测器测定苹果、葡萄和草莓中的三种有机磷农药，检出限范围在4.5~4.8ng/g。

FPD是目前用于分析有机磷农药最广泛的专用检测器，这种检测器对于含磷化合物的选择性好，灵敏度较高，一般10~12g/s，线性范围达103，并且FPD抗干扰能力强，只能对含磷和硫化合物有响应，对水不敏感，所以可以减少样品的前处理步骤，但如果样品中存在硫化物，则往往会对方法产生干扰，需要除去或者改用NPD 检测器。NPD对磷的检测限可达5×10-14g/s，线性范围大于104，灵敏度高，专一性强，适合于分析复杂样品中的有机磷农药。AED(原子发射检测器)是近年发展的多元素检测器，研究表明，GC/AED能够有效地选择性检测有机化合物中的非金属元素，主要应用于测定样品中的残留农药等。如Ahmadi[24]等采用FPD测定水中的13种有机磷农药，检出限范围在0.001~0.005μg/L，相对标准偏差范围在1.1%~8.6%。如刘维屏[25]等用GC/NPD 法测定了环境水样中的的乐果，其最低检测限达0.2μg/L。

⑵液相色谱法

高效液相色谱法对高沸点\热不稳定或极性较强以及易于在GC柱上发生吸附和分解的有机磷农药分析具有明显优势。最小检测量达10-9或10-11g，目前应用HPLC/UV或二极管阵列（DAD）检测器检测有机磷农药的报道较多。如Chunxia Wu等[26]采用DAD检测器测定水样中的有机磷农药，检出限范围在0.1~0.3μg/L。

⑶色谱质谱联用技术

气相质谱/质谱联用技术是目前仪器分析联用技术中使用极为广泛的一种。这种技术充分发挥了色谱优良的分离能力和质谱准确的定性和定量特点，通过选择合适的样品预处理方法和定量手段就可以对多种有机磷农药残留同时进行准确地定性、定量分析。如林长青[27]采用气相色谱-负化学离子化质谱法测定土壤中有机磷农药，检出限范围在5.0×10-6~2.0×10-5mg/kg。

高效液相色谱与质谱联用技术结合了HPLC分离热不稳定、强极性和男挥发有机物的优点以及质谱的高灵敏度、高选择性的特点，在不适用于采用GC和GC/MS分析测定的有机磷农药如敌敌畏、敌百虫等方面有很大的优势[28]。

8.3.2 其他分析方法

其他分析方法有电化学法、免疫化学法、生物传感器法等。这些方法有的分析灵敏度不够，有的特异性不强，因此这里不再做详细的描述。

8.4国内外相关标准分析方法

8.4.1国外相关分析方法

美国EPA Method 8141B[29]是将水样在中性PH 条件下，用二氯甲烷进行萃取的方法。可采用方法3510（分液漏斗法）、方法3520（连续液液萃取法）、方法3535（固相萃取），或其它适合的萃取技术。土样用正己烷-丙酮（1:1）或二氯甲烷-丙酮（1:1）进行萃取，可用方法3540（索氏提取法）、方法3541（自动索氏提取法）、方法3545（加压流体萃取）、方法3546（微波萃取）、方法3550（超声萃取），或其它适合的萃取技术。根据基体干扰和目标分析物的性质，净化方法可采用氧化铝法（方法3610）、弗罗里硅土法（方法3620）、硅胶法（方法3630），凝胶渗透色谱（方法3640）和硫净化（方法3660）。

使用有火焰光度检测器(FPD)或氮磷检测器(NPD)的毛细管气相色谱法检测目标化物。此方法使用双柱系统，两个色谱柱连接在同一进样口，并分别和两个不同的检测器相连。在单柱上进行定性的化合物应该在另一根其它柱子，或使用其他定性分析方法进行确认。其它与有机磷分析方法相关的标准有美国EPA Method 8270C、EPA Method 8085、EPAMethod 1657、EPA Method 614 和EPA Method 622 等，见表3。

美国EPA Method 8270C[30]：Semivolatile Organic Compounds By Gas Chromatography/Mass Spectrometry （GC/MS）标准适用于固体废物浸出液、土壤、气体和各类水样中有机磷农药的测定，使用液液萃取-气相色谱质谱检测。

美国EPA Method 8085[31]：Compound-independent elemental quantitation of pesticides by gas chromatography with atomic emission detection (GC/AED)标准适用于液体和固体中有机磷的检测，使用液液萃取-气相色谱-AED 检测器。

美国EPA Method 1657[32]：The Determination of Organo-phosphorus Pesticides in Municipal and Industrial Wastewater 标准适用于城市污水和工业废水中有机磷农药的检测，使用液液萃取加凝胶净化-气相色谱-火焰光度检测器检测。

美国EPA Method 614[33]：The Determination of Organophosphorus Pesticides in Municipal and Industrial Wastewater 标准适用于城市污水和工业废水中有机磷农药的检测，使用液液萃取-气相色谱-火焰光度检测器检测。

美国EPA Method 622[34]：The Determination of Organophosphorus Pesticides in Municipaland Industrial Wastewater 标准适用于城市污水和工业废水中有机磷农药的检测，使用液液萃取-气相色谱-火焰光度检测器检测，方法检出限为0.25μg/L。

美国EPA Method 8141B、EPA Method 8085、EPA Method 1657、EPA Method 614 和EPA Method 622 等均采用气相色谱法测定，检测器常用火焰光度检测器，也可选用氮磷检测器、原子发射检测器。

美国EPAMethod 8270C 采用气相色谱-质谱法测定。上述标准方法使用的提取/萃取溶剂大都为二氯甲烷，也有采用二氯甲烷/丙酮加凝胶色谱净化。

表3 测定有机磷农药的EPA方法

方法名称适用范围仪器萃取方法萃取溶剂色谱柱

EPA8141B 水样、土壤GC-FPD/NPD LLE/索式二氯甲烷石英毛细柱

EPA8270C 固废、土壤、空

气、水样

GC-MS LLE/索式二氯甲烷石英毛细柱

EPA8085 液体、固体GC-AED LLE/索式二氯甲烷石英毛细柱

EPA1657 城市污水和工业

废水

GC-FPD/NPD GPC

二氯甲烷或氯

仿/丙酮连续萃

取

石英毛细柱

EPA614 城市污染和工业

废水

GC-FPD或

thermionic bead

LLE/索式

二氯甲烷/正己

烷为15/85

玻璃填充柱

EPA622 城市污染和工业

废水

GC-FPD或

thermionic bead

LLE

二氯甲烷（最

后转换成正己

烷）

玻璃填充柱

8.4.2国内相关分析方法

《危险废物鉴别标准浸出毒性鉴别》GB 5085.3-2007 附录I[35]，中性条件下，用二氯甲烷分液漏斗萃取，固体样品采用二氯甲烷/丙酮（1：1），使用索氏提取法。本方法不适合检测酸或碱分离处理的样品。适用于固体废物中有机磷化合物的测定。采用FPD 或NPD 气相色谱可检测出：丙硫特普、甲基谷硫磷、乙基谷硫磷、硫丙磷、三硫磷、毒虫畏、毒死蜱、甲基毒死蜱、蝇毒磷、巴毒磷、S-内吸磷、二嗪农、除线磷、敌敌畏、百治磷、乐果、敌杀磷、乙拌磷、苯硫磷、乙硫磷、灭克磷、伐灭磷、杀螟硫磷、丰索磷、大福松、倍硫磷、对溴磷、马拉硫磷、脱叶亚磷、速灭磷、久效磷、二溴磷、乙基对硫磷、甲基对硫磷、甲拌磷、亚胺硫磷、磷胺、皮蝇磷、乐本松、硫特普、特普、地虫磷、硫磷嗪、丙硫磷、三氯磷酸酯、壤虫磷、六甲基磷酰胺、三邻甲苯磷酸酯、阿特拉津、西玛津。水中方法检出限为4.00×10-5~8.00×10-4mg/L，土壤中为2.00×10-3~4.00×10-2mg/kg。

《气相色谱法测定水质有机磷农药》GB 13192-91[36]，采用三氯甲烷萃取，气相色谱FPD测定。色谱柱为硬质玻璃填充柱，外标法定量。适用于地面水、地下水及工业废水中甲基对硫磷、对硫磷、马拉硫磷、乐果、敌敌畏、敌百虫的测定，检出浓度为 5.10×10-5~6.40×10-4mg/L。

《水、土中有机磷农药测定的气相色谱法》GB/T 14552-2003[37]，采用有机溶剂提取，

再经液-液分配和凝结净化步骤去除干扰物，用气相色谱NPD 或FPD 检测，外标法定量。

8.5难点分析

有机磷农药的分析难点在于某些有机磷农药的响应非常低，特别在使用质谱检测器时，比如敌敌畏、乐果等农药的响应就远低于其它有机磷农药而影响分析结果的正确性。因此目前条件下，氮磷检测器仍然是有机磷农药

分析的重要选择。

8.6实例(气相色谱法测定土壤中有机磷农药)

本应用实例来自于文献[38]。

8.6.1适用范围

适用于分析土壤中的有机磷农药：二嗪农、甲拌磷、乙拌磷、异稻瘟净、丙溴磷、毒死蜱、乐果、甲基对硫磷、马拉硫磷、稻丰散、对硫磷、乙硫磷。

8.6.2 规范性引用文件

GB/T 5009.2-1996 食品中有机磷农药残留量的测定方法

NY/T 395农田土壤环境质量监测技术规范

NY/T 396 农田水源环境质量监测技术规范

8.6.3方法原理

采用索式提取，固相萃取方法净化，气相色谱/氮磷检测器（NPD）进行检测，根据色谱的保留时间定性，峰面积定量。

8.6.4试剂和材料

⑴正己烷：色谱纯，经色谱检验无目标化合物检出。

⑵丙酮：色谱纯，经色谱检验无目标化合物检出。

⑶乙酸乙酯：色谱纯，经色谱检验无目标化合物检出。

⑷12种有机氯农药混标：200μg/mL，正己烷溶剂。

⑸无水硫酸钠：400℃烘烤4h，优级纯。

⑹石英砂：400℃烘烤4h，分析纯。

⑺硅胶小柱：1g/6mL。

8.6. 5仪器和设备

8.6.5.1 索式提取仪

8.6.5.2 气相色谱仪

⑴气相色谱：带分流/不分流进样口、色谱工作站（Agilent 7890A），NPD

⑵色谱柱：DB-1701，30m×0.32mm×0.25μm

8.6. 6样品

8.6.6.1样品的采集和保存

按照HJ/T166的相关规定进行土壤样品的采集和保存。按照GB17378.3的相关规定进行沉积物的采集和保存。采集样品的工具应用金属制品，用前应经过净化处理。土壤样品保存在-18℃冷冻箱中备用。

8.6.6.2试样的制备

实验室内取出样品瓶，恢复至室温后，称取10g样品，再加入无水硫酸钠除去水分。

8.6.6.3含水率的测定

土壤样品含水率的测定按照HJ613执行，沉积物样品含水率的测定按照GB17378.5执行。

8.6.6.4 空白样品

取不含目标化合物空白土壤混合相同重量的无水硫酸钠待测。

8.6.7 样品前处理及色谱分析

⑴索式提取：取样10g，以正己烷和丙酮的混合物溶剂（9：1，v/v）提取18h。

⑵浓缩：采用氮吹浓缩萃取液至1mL。

⑶净化：依次用5mL乙酸乙酯和15mL正己烷活化固相萃取小柱，将1mL浓缩液转移至小柱上，再用4mL 正己烷淋洗，15mL乙酸乙酯洗脱，并收集洗脱液，再将洗脱液氮吹浓缩至1mL待测。

⑷色谱分析

进样口温度：240℃；

载气：氮气（纯度：99.999％），1.2mL/min；

柱温：初始温度60℃，不保持，以60℃/min的升温速率升至180℃，不保持，以10℃/min的速度升至200℃，保持15min，以10℃/min至250℃，保持5min。

进样模式：全不分流进样；

H2流量：3 mL/min；

Air流量：60 mL/min；

8.6.8结果计算与表示

按照外标计算方法进行计算，建立的线性校准曲线的相关系数大于0.995。

8.6.9精密度和准确度

以空白砂为基质，加入有机磷标准溶液使其浓度分别为2.5、10.0、25.0μg/kg，重复测定六次计算其精密度。

甲拌磷8.36%~13.4%；二嗪农 5.24%~9.30%；乙拌磷 6.27%~14.7%；异稻瘟净 5.03%~11.0%；乐果6.32%~9.63%；毒死蜱4.70%~10.5%；甲基对硫磷5.75%~12.8%；马拉硫磷4.41%~8.96%；对硫磷4.16%~13.2%；稻丰散7.01%~8.97%；丙溴磷3.39%~10.9%；乙硫磷6.19%~12.6%；

在空白砂中加入有机磷标准使其浓度为10.0μg/kg，重复测定六次计算其准确度（回收率均值）。

甲拌磷92.97%；二嗪农95.20%；乙拌磷90.71%；异稻瘟净97.18%；乐果109.8%；毒死蜱93.88%；甲基对硫磷90.33%；马拉硫磷96.85%；对硫磷90.09%；稻丰散106.7%；丙溴磷102.4%；乙硫磷97.96%；

8.6.10质量保证和质量控制

8.6.10.1 定性

使用相对保留时间定性时，样品中目标化合物RRT与校准曲线中该目标物RRT的差值应在0.06以内。

8.6.10.2 校准

线性校准曲线相关系数大于0.995，否则重新绘制校准曲线。将校准曲线最低点的响应值带入曲线计算，目标物的计算结果应在实际值的70%~130%。

8.6.10.3 样品

⑴空白试验分析结果的目标物浓度小于方法检出限；

⑵目标物浓度小于相关环保标准限值的5%；

8.6.10.4 平行和加标

每一批样品（20）应选择一个样品进行平行分析或加标分析。所有样品中，目标化合物的加标回收率范围应在60%~130%之间，若回收率不合格，说明样品存在基体效应。此时应分析一个空白加标样品，其中的目标物回收率应在70%~120%。

8.6.11废物处理

实验产生的废物应集中保管，委托有资质的相关单位进行处理。

8.6.12注意事项

8.6.12.1 注意交叉污染

采样工具、标准配制时应注意交叉污染，包括使用的水和试剂、标准等。

8.6.12.2 采样运输保存

某些有机磷农药极易分解，在样品的保存和运输过程中，避免沾污，样品应放在密闭、避光的冷藏箱中。

8.6.13附录（方法性能参数）

采用DB-1701柱分离12中有机磷农药，采用正己烷丙酮的混合溶剂（9:1，v/v）进行索式提取，并用硅胶小柱进行净化，洗脱液是15mL乙酸乙酯。当取样量为10g时，12种有机磷农药的检出限为0.304~1.469μg/kg。参考文献：

[1] 夏家淇．土壤环境质量标准详解[M]．北京：中国环境科学出版社，1996，53-65．

[2] 周明耀．环境有机污染物与致癌物质[M]．成都：四川大学出版社，1992，94-99．

[3] (苏)麦尔尼科夫等．农药与环境[M]．北京：化学工业出版社，1985．

[4] Nalini Sankararamakrishnan, Ajit Kumar Sharma, Rashmi Sanghi．

Organochlorine and organophosphorous pesticide residues in groundwater and surface waters of Kanpur，Uttar Pradesh，India[J]．Environment International，2005，31(1)：113-120．

[5] 束放、邵振润. 2003年我国农药械市场概况及2004年农药械市场需求分析与展望[J]．农药科学与管理，2004，25(2)：34~36.

[6] 有机磷酸酯类农药工业污染物排放标准编制说明

[7] 国家环境保护局.土壤环境质量标准(GB15618-1995)[S],1996,7:1~3.

[8] 国家环境保护总局.危险废物毒性标准浸出毒性鉴别(GB5085.3-2007)[S],2007,10 :5~6.

[9] 环境保护部.生活垃圾填埋污染控制标准(GB16889-2008)[S] ,2008,7:1~14.

[10] 国家环境保护总局.展览馆用地土壤环境质量标准(HJ350-2007)[S] ,2007,8:5

[11] 国家环境保护局.城镇垃圾农用控制标准（GB8172-1987）[S] ,1987,10:1~2.

[12] Council Directive 76/895/EEC (23 November 1976)[s]. Official Journal of the European

Communities, 09.12.1976, L340

[13] Council Directive 86/362/EEC (24 July 1986)[s]. Official Journal of the European Communities,07.08.1986, L221

[14] Council Directive 86/363/EEC (24 July 1986)[s]. Official Journal of the European Communities,03.07.1986, L164

[15] Council Directive 90/642/EEC (27 November 1990) [s]. Official Journal of the European

Communities, 14.12.1990, L350

[16] Codex pesticides residues in food online database, Codex Alimentarius Commission, 22nd Session, June 1997,https://www.wendangku.net/doc/723814999.html,/mrls/pestdes/jsp/pest_q-

e.jsp (accessed on 09.01.2011)

[17] 贲铁砚，刘成亮. 超声波萃取GC-MS测定土壤中有机磷农药的方法讨论[J].黑龙江环境通报，2007，31(2):27-28.

[18] Mohammad Hosein Naeeni, Yadollah Yamini, Mohammad Rezaee.

Combination of supercritical fluid extraction with dispersive liquid–liquid microextraction for extraction of organophosphorus pesticides from soil and marine sediment samples[J]. The Journal of Supercritical Fluids,2011,57(3):219-226

[19] 朱晓兰,蔡继宝,杨俊, 苏庆德. 加速溶剂萃取!气相色谱法测定土壤中的有机磷农药残留[J]. 分析化学,2005,33(6):821-824.

[20] Edwar Fuentes, María E. Báez,Ronnie Labra. Parameters affecting microwave-assisted extraction oforganophosphorus pesticides from agricultural soil[J]. Journal of Chromatography A,2007,1169(1-2):40-46

[21] Gang Wu, Xiaoxia Bao, Shanhong Zhao, Jianjian Wu, Ailiang Han, Qingfu Ye.

Analysis of multi-pesticide residues in the foods of animal origin by GC-MS coupled with accelerated solvent extraction and gel permeation chromatography cleanup[J].food chemistry,2011,126(2):646-654.

[22] 杨敏娜，孙成，塔娜. 环境介质中有机磷农药残留分析方法[J].环境科学与技术，2006，29（6）：46~48.

[23] Wan Aini Wan Ibrahim, Hadijah Farhani, Mohd. Marsin Sanagi, Hassan Y. Aboul-Enein.

Solid phase microextration using new sol-gel hybrid polydimethylsiloxane-2-hydroxymethyl

-18-crown-6-coated fiber fordetermination of organophosphorous pesticides[J].

Journal of Chromatography A,2010,1217(30):4890-4897.

[24] F. Ahmadi, Y. Assadi, S.M.R. Milani Hosseini, M. Rezaee.

Determination of organophosphorus pesticides in water samples by single drop microextraction and gas chromatography-flame photometric detector[J]. Journal of Chromatography A,2006,1101(1-2):307-312.

[25] 刘维平, 卢建杭. 毛细管气相色谱法测定环境水样中乐果残留量[J]. 分析化学,l995,23 (l0):l229.

[26] Chunxia Wu, Ning Liu, Qiuhua Wu, Chun Wang, Zhi Wang.

Application of ultrasound-assisted surfactant-enhanced emulsification microextraction for the determination of some organophosphorus pesticides in water samples. Analytica Chimica Acta[J],2010,679(1-2):56~62.

[27] 林长青，张纯淳，李钟瑜，高鹏. 加速溶剂萃取气相色谱负化学离子化质谱法测定土壤中有机磷农药[J].中国环境监测，2004，30（1）：154-158.

[28] 潘元海,金军,蒋可. 高效液相色谱/大气压化学电离质谱快速分析水中痕量有机磷农药[J]. 分析化学,2000,28(6):666-671.

[29] EPA method 8141B,organophosphorus compounds by gas chromatography[S].2007,2:1~44.

[30] EPA method 8270C, semivolatile organic compounds by gas chromatography/mass spectrometry(GC/MS) [S].1996,3:1~50..

[31] EPA method 8085,compound-independent elemental quantitation of pesticides by gas chromatography with atomic emission detection(GC/AED).2007,2:1~50.

[32] EPA method 1657,the determination of organo-phosphpus pesticides in municipal and industrial

wastewater[S].2007,3:1~39.

[33] EPA method 614.the determination of organophosphous pesticides in municipal and industrial

wastewater[S].2006,1:1-17.

[34] EPA method 622.the determination of organophosphorus pesticides in municipal and industrial

wastewater[S].2006,3:1~22.

[35] 国家环境保护总局.危险废物鉴别标准浸出毒性鉴别(GB 5085.3-2007) 附录I[S].2007：58~75.

[36] 国家环境保护总局.气相色谱法测定水质有机磷农药.GB 13192-91[S].1991,8:470~476.

[37] 国家环境保护总局.水、土中有机磷农药测定的气相色谱法.GB/T 14552-2003[S].2003,11:1-12.

[38] 陈蓓蓓，刘鸣，吴诗剑. 气相色谱法测定土壤和沉积物中12种有机磷农药[J].中国环境监测，2013，

29(6)：134~138.

土壤全磷测定法

土壤全磷测定法GB 9837—88 1 主题内容与适用范围本标准对土壤全磷测定的原理、仪器、设备、样品制备、操作步骤等做了说明和规定。 本标准适用于测定各类土壤全磷含量。 2 测定原理土壤样品与氢氧化钠熔融，使土壤中含磷矿物及有机磷化合物全部转化为可溶性的正磷酸盐，用水和稀硫酸溶解熔块，在规定条件下样品溶液与钼锑抗显色剂反应，生成磷钼蓝，用分光光度法定量测定。 3 仪器、设备 3.1 土壤样品粉碎机； 3.2 土壤筛：孔径1mm 和0.149mm； 3.3 分析天平：感量为0.0001g； 3.4镍（或银）坩埚：容量＞30mL 3.5高温电炉：温度可调（0?1000C）; 3.6分光光度计：要求包括700nm波长； 3.7 容量瓶：50、100、1000mL； 3.8 移液管：5、10、15、20mL； 3.9 漏斗：直径7cm； 3.10 烧杯：150、1000mL； 3.11 玛瑙研钵。 4 试剂所有试剂，除注明者外，皆为分析纯，水均指蒸馏水或去离子水。 4.1 氢氧化钠（GB 629）； 4.2 无水乙醇（GB 678）； 4.3 10% （M/V）碳酸钠溶液：10g无水碳酸钠（GB 639）溶于水后，稀释至 100mL, 摇匀； 4.4 5%（V/V）硫酸溶液：吸取5mL浓硫酸（GB 625, 9 5.0?98.0%，比重1.84）缓缓加入90mL 水中，冷却后加水至100mL；

4.5 3mol/L 硫酸溶液：量取168mL 浓硫酸缓缓加入到盛有800mL 左右水的大烧杯中，不断搅拌，冷却后，再加水至1000mL； 4.6 二硝基酚指示剂：称取0.2g 2，6-二硝基酚溶于100mL 水中； 4.7 0.5%酒石酸锑钾溶液：称取化学纯酒石酸锑钾0.5g溶于100mL水中； 4.8硫酸钼锑贮备液：量取126mL浓硫酸，缓缓加入到400mL水中，不断搅拌，冷却。另称取经磨细的钼酸铵（GB 657）10g溶于温度约60°C300mL水中，冷却。 然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中。再加入0.5%酒石酸锑钾溶液（ 4.7）100mL，冷却后，加水稀释至1000mL，摇匀，贮于棕色试剂瓶中，此贮备液含钼酸铵1%，硫酸 2.25mol/L ； 4.9钼锑抗显色剂：称取1.5g抗坏血酸（左旋，旋光度+21?22°溶于100mL 钼锑贮备液中。此溶液有效期不长，宜用时现配； 4.10磷标准贮备液：准确称取经105C下烘干2h的磷酸二氢钾（GB 1274，优级纯）0.4390g,用水溶解后，加入5mL浓硫酸，然后加水定容至1000mL。该溶液含磷100mg/L，放入冰箱可供长期使用； 4.11 5mg/L磷标准溶液：吸取5mL磷贮备液（4.10），放入100mL容量瓶中，加 水定容。该溶液用时现配； 4.12 无磷定性滤纸。 5 土壤样品制备 取通过1mm孔径筛的风干土样在牛皮纸上铺成薄层，划分成许多小方格。 用小勺在每个方格中提取出等量土样（总量不少于20g）于玛瑙研钵中进一步研磨，使其全部通过0.149mm孔径筛。混匀后装入磨口瓶中备用。 6 操作步骤 6.1 熔样 准确称取风干样品0.25g,精确到0.0001g,小心放入镍（或银）坩埚（3.4）底部，切勿粘在壁上。加入无水乙醇（ 4.2）3?4 滴，润湿样品，在样品上平铺2g 氢氧化钠（ 4.1）。将坩埚（处理大批样品时，暂放入大干燥器中以防吸潮）放入高温电炉（3.5），升温。当温度升至400C左右时，切断电源，暂停15min。然后继续升温至720C，并保持15min,取出冷却。加入约80C的水10mL，待熔块溶解后，将溶液无损失地转入100mL 容量瓶（ 3.7）内，同时用3mol/L 硫酸溶液

土壤中有机磷的测定学习资料

土壤中有机磷的测定 ——实验方案设计 土壤中磷知识总结 Ⅰ、土壤中磷的来源及分布：土壤中的磷素来源于成土矿物、有机物质和含磷化学肥料。土壤全磷量不能作为当季作物的土壤供磷的水平指标，但可作为表示土壤潜在肥力的一项指标。土壤磷素分为无机形态和有机形态。无机形态的磷约占全磷的50％～90％，主要包括磷酸钙类化合物（Ca-P）、磷酸铁类化合物（Fe-P）、磷酸铝类化合物（Al-P）和表面为氧化铁胶膜所封闭的闭蓄态磷（O-P）。风化程度较高的土壤，如红壤以O-P和Fe-P为主，风化程度较低的土壤以Ca-P 和Al-P为主。有机形态的磷约占全磷10％～50％，主要以磷脂、植素、核酸和核蛋白形式存在。土壤有机磷含量与土壤有机质含量密切相关。土壤有效磷是指当季作物所能吸收的磷。土壤中磷移动性很小。作物吸收的磷主要是土壤溶液中的H2PO- 4和HPO2 4-。 Ⅱ、磷的营养功能：1、磷是植物体内重要化合物的组成元素；2、磷能加强光合作用和碳水化合物的合成与运转；3、促进氮素代谢；4、磷能促进脂肪代谢；5、提高作物对外界环境的适应性 Ⅲ、作物磷素营养失调的症状 缺磷时，各种代谢过程受到抑制，植株生长迟缓、矮小、瘦弱、直立、根系不发达，成熟延迟、籽实细小、植株叶小、叶色暗绿或灰绿、缺乏光泽，主要是细胞发育不良致使叶绿素密度相对提高，同时，Fe的吸收间接地促进叶绿素合成，使叶色暗，严重缺磷时，在不少作物茎叶上明显地呈现紫红色的条纹或斑点（花青苷）甚至叶片枯死脱落，症状一般从基部老叶开始。逐渐向上部发展。 缺磷造成玉米果穗秃顶，油菜脱荚，棉花和果树落蕾、落花，甘薯及马铃薯薯块变小，耐贮性变差。磷素过剩，谷类无效分蘖，秕粒增加，叶肥厚而密，植株早衰。由于磷过多，而引起的病症，通常以缺Zn、Fe、Mg等的失绿症表现出来。 Ⅳ土壤中磷的测定方法:测定土壤速效磷的方法选择，酸性土壤一般采用盐酸氟化铵或氢氧化钠一草酸钠法来提取，石灰性土壤或中性土壤采用碳酸氢钠来提取。用NaHCO 3 溶液(pH8.5) 提取土壤速效磷，在石灰性土壤中提取液中的HCO 3 - 可和土壤溶液中的Ca 2+形成CaCO 3沉淀，从而降低了Ca 2+ 的活度而使某些活性较大的Ca—p 被提取出来。在酸性土壤中因pH 提高而使 Fe-p ，A1-P 水解而部分被提取。

有机磷农药的测定---- 气相色谱法

有机磷农药的测定----气相色谱法 1范围 1.1 本法规定了用气相色谱分析法测定供水水中的敌百虫、敌敌畏、乐果、对硫磷和甲基对硫磷。 1.2 本法适用于城市供水和水源水中的敌百虫、敌敌畏、乐果、对硫磷和甲基对硫磷的测定。 1.3 本法最低检测质量浓度：若取样100mL浓缩至1.0mL，进样量2μL，敌百虫为0.14μg/L、敌敌畏为0.43μg/L、乐果为0.29μg/L、对硫磷为0.10μg/L、甲基对硫磷为0.24μg/L、。 2 原理 本法采用固相萃取技术吸附水中微量有机磷农药，然后用具有一定有机溶剂洗脱，经浓缩至一定体积，样品用火焰光度检测器气相色谱仪进行测定。 火焰光度检测器机理：有机磷化合物氧化燃烧生成磷的氧化物，然后在富氢焰的条件下被氢还原成HPO，被火焰高温激发的磷裂片发射一系列特征波长的光，其最大波长为526nm。通过526nm干涉滤光片，测量其发射光强度而检测磷，其光强度与HPO浓度成正比。 3 试剂 3.1 载气和辅助气体 3.1.1 载气：氮气，99.999%，用5A分子筛净化管净化。 3.1.2 燃烧气：氢气，99.9%，用5A分子筛净化管净化。 3.1.3 助燃气：空气，用5A分子筛净化管净化，干燥。 3.2 标准混合样品：敌百虫、敌敌畏、乐果、对硫磷和甲基对硫磷的混合标准样。 3.2.1 敌百虫：200mg/L。 3.2.2 敌敌畏：200mg/L。 3.2.3 乐果：200mg/L。 3.2.4 对硫磷：100mg/L。 3.2.5 甲基对硫磷：100mg/L。 3.3 试剂 3.3.1 丙酮：经重蒸馏后使用。 3.3.2 甲醇：经重蒸馏后使用。

土壤全磷测定

土壤全磷测定 氢氧化钠熔融——钼锑抗比色法 1 方法提要 土壤样品与氢氧化钠熔融，使土壤中含磷矿物及有机磷化合物全部转化为可溶性的正磷酸盐，用水和稀硫酸溶解熔块，在规定条件下样品溶液中的磷酸根与钼锑抗显色剂反应，生成磷钼蓝，其颜色的深浅与磷的含量成正比，通过分光光度法定量测定。 2 适用范围 本方法适用于各类土壤全磷含量的测定。 3 主要仪器设备 3.1 分光光度计或紫外－可见分光光度计； 3.2 高温电炉：可升温至1200℃，温度可调； 3.3 镍（或银）坩埚：容量≥30mL ； 3.4 具塞三角瓶：50mL 。 4 试剂 4.1 氢氧化钠； 4.2 无水乙醇； 4.3 碳酸钠[ρ（Na 2CO 3）=100g ·L -1]溶液：称取10.0g 无水碳酸钠溶于水，稀释至100mL ； 4.4 5％硫酸溶液：吸取5mL 浓硫酸缓缓加入90mL 水中，冷却后加水至100mL ； 4.5 硫酸溶液[c (2 1H 2SO 4)=3mol ·L -1]：量取168mL 浓硫酸缓缓加入到盛有约800mL 水的大烧杯中，不断搅拌，冷却后，稀释至1L ； 4.6 二硝基酚指示剂：称取0.2g 2，6-二硝基酚溶于100mL 水中； 4.7酒石酸锑钾溶液[ρ（K(SbO)C 4H 4O 6·2 1H 2O ）=5g ·L -1]：称取酒石酸锑钾0.5g 溶于100mL 水中； 4.8 硫酸钼锑贮备液：量取153mL 浓硫酸，缓缓加入到400mL 水中，不断搅拌，冷却。另称取钼酸铵［(NH 4)6Mo 7O 24·4H 2O ］10.0g 溶于温度约60℃的300mL 水中，冷却。然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中。再加入5g ·L -1酒石酸锑钾溶液100mL ，冷却后，加水稀释至1L ，摇匀，贮于棕色瓶中；

土壤中有机磷分组

文献综述 内容摘要 通过翻看这些文献和参考材料，了解土壤中有机磷分组测定的方法和目前研究达到程度。找出自己实验研究的方向和如何能弥补目前研究的不足。生物炭作为土壤改良剂，会增加土壤的吸收能力和生产能力，但是对土壤中有机磷的的分组的影响在各个地区是不一样的，本次实验主要是对沈阳和阜新的土壤进行实验，了解生物炭这种新型的土壤改良剂加入不同量时对不同土壤中总磷，无机磷和有机磷组分的影响，通过对空白组的对照，找出其中的规律，结合其他的微量元素的研究，更好的改良土壤情况，已达到增产增收的目的。 关键字：生物炭；有机磷；总磷；褐土；棕壤 1 选题依据 磷是植物生长发育必须的大量元素，植物体需要的磷主要是从土壤磷库中获得。作为土壤磷库的重要组部分，土壤有机磷对土壤肥力和植物营养有着重要的影响；其对植物的作用愈来愈受到关注。土壤有机磷经过矿化分解而转化为有效态磷，然后供给植物吸收利用。在无机磷含量较低的土壤上，有机磷的矿化更成为植物吸收磷素的重要来源。因此，对土壤有机磷进行研究，其重要性可想而知。随着有机农业和生态学的发展，近年来土壤有机磷在植物营养中的作用日益受到重视。人们对土壤有机磷的种类、数量和转化也随着研究方法的改善在不断地深入，并有了不少进展。在土壤中，磷元素主要源于母质的特殊性，不像碳、氢、氧、氮等大部分来自大气，因此在成土过程中，随着土壤有机质的积累，土壤有机磷也随之形成。土壤中的磷包括无机磷和有机磷两大部分，而有机磷在土壤磷库中占相当大的比例。从世界范围的土壤看，有机磷在土壤中的比重大约占15%～80%。我国大部分土壤有机磷占土壤全磷的20%～40%，且有逐年增加的趋势。天然植被下土壤有机磷含量时常可占总磷量的一半以上，而黑土中的含量更高。耕地土壤有机磷因为开垦的缘故，其含量时常比同类的自然土壤低一般来说，土壤表层有机磷含量较高，随着深度的增加，有机磷含量逐渐下降。土壤有机磷含量因土壤母质、土壤类型、土壤特性、土壤质地、植被类型、气候季节变化及土地管理措施而不同。一般认为，母质全磷量高，其土壤有机磷含量就高；母质全磷量低，其土壤有机磷含量就低。从土壤类型来看，有机土和有机质土有机磷含量最高，软土和变性土有机磷含量居中，氧化土和某些灰化土有机磷含量最低。土壤特性（包括土壤有机质量、全氮量和土壤pH等）对有机磷含量的影响比较复杂。研究表明，土壤有机磷含量和土壤有机质（有机碳）及全氮量具有良好的相关性；酸性土壤含有较多的植酸铁、铝盐，易使有机磷形成沉淀，故酸性土壤比碱性土壤容易积累有机磷。从土壤质地来看，粘粒、粉砂能够吸附有机磷，泥炭、腐泥的有机磷含量最高，壤质砂土、砂和细砂的有机磷含量最低。一般来说，森林土壤和草地土壤由于腐殖质积累较多，因此有机磷含量较高。季节和气候变化对有机磷的影响为：随着气温升高、雨量增加，土壤有机磷的含量上升；土壤

有效磷的测定(Olsen法)

土壤有效磷的测定（Olsen法） （pH 8.5 0.5molL-1NaHCO3浸提—钼锑抗比色法） 一、实验目的及说明 土壤中有效磷的含量，随土壤类型、气候、施肥水平、灌溉、耕作栽培措施等条件的不同而异。通过土壤有效磷的测定，有助于了解近期内土壤供应磷的情况，为合理施用磷肥及提高磷肥利用率提供依据。 土壤速效磷的测定中，浸提剂的选择主要是根据土壤的类型和性质测定。浸提剂是否适用，必须通过田间试验来验证。浸提剂的种类很多，近20年各国渐趋于使用少数几种浸提剂，以利于测定结果的比较和交流。我国目前使用最广学的浸提剂是0.5molL-1NaHCO3溶液（Olsen法），测定结果与作物反应有良好的相关性[1]，适用于石灰性土壤、中性土壤及酸性水稻土。此外还使用0.03molL-1NH4F-0.025molL-1HCl溶液（Black法）为浸提剂，适用于酸性土壤和中性土壤。 同一土壤用不同的方法测得的有效磷含量可以有很大差异，即使用同一浸提剂，而浸提时的土液比、温度、时间、振荡方式和强度等条件的变化，对测定结果也会产生很大的影响。所以有效磷含量只是一个相对的指标。只有用同一方法，在严格控制的相同条件下，测得的结果才有相对比较的意义。在报告有效磷测定的结果时，必须同时说明所使用的测定方法。 二、方法原理 石灰性土壤中磷主要以Ca-P（磷酸钙盐）的形态存在。中性土壤Ca-P、Al-P（磷酸铝盐）、Fe-P（磷酸铁盐）都占有一定的比例。0.5molL-1NaHCO3（pH8.5）可以抑制Ca2+的活性，使某些活性更大的与Ca结合的P浸提出来；同时，也可使比较活性的Fe-P和Al-P起水解作用而被浸出。浸出液中磷的浓度很低，须用灵敏的钼蓝比色法测定，其原理详见土壤全磷的测定章节。 当土样含有机质较多时，会使浸出液颜色变深而影响吸光度，或在显色出现浑浊而干扰测定，此时可在浸提排荡后过滤前，向土壤悬液中加入活性碳脱色，或在分光光度计800nm 波长处测定以消除干扰。 三、实验仪器 研钵、20目筛子、电子天平（0.0001）、振荡器、722分光光度计、振荡器、勺子、小烧杯、容量瓶 四、试剂配制 （1）0.5mol·L-1NaHCO3(pH8.5)浸提剂42.0gNaHCO3（0.5mol 化学纯）溶于约800ml 水中，稀释至1L，用浓NaOH调节至pH8.5（用pH计测定），贮于聚乙稀瓶或玻璃瓶中，用塞塞紧。该溶液久置因失去CO2而使pH升高，所以如贮存期超过20天，在使用前必须检查并校准pH值。 （2）无磷的活性碳粉和滤纸须做空白试验，证明无磷存在。如含磷较多，须先用2mol·L-1HCl浸泡过液，用水冲洗多次后再用0.5mol·L-1NaHCO3浸泡过液，在布氏漏斗上抽滤，用水冲洗几次，最后用蒸馏水淋洗三次，烘干备用。如含磷较少，则直接用0.5mol·L-1 NaHCO3处理。 （3）钼锑抗试剂（6.5mol·L-1[H+]）20.0g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]（分析纯）溶于300ml约60℃的水中，冷却。另取180ml浓H2SO4（分析纯）慢慢注入约400ml水中，

一种用于有机磷农药检测的微流控传感器_郭红斌

传感器与微系统（Transducer and Microsystem Technologies）2011年第30卷第6期 一种用于有机磷农药检测的微流控传感器* 郭红斌1，陈国平1，兰文升2，陆冰睿1，刘冉1 （1．复旦大学微电子系专用集成电路与系统国家重点实验室，上海200433； 2．深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心，广东深圳518045） 摘要：成功制作出一种用于检测有机磷农药的聚二甲基硅氧烷（PDMS）微流控传感器，该传感器集成 了光纤和用于固定有机磷水解酶的SU—8圆柱。检测原理基于反应产物对光的吸收，不同浓度有机磷农药 的实验结果显示：该传感器的线性相关系数为0．9934。实验结果展示了一种将酶固定在微流沟道的简单 方法。简单的制备工艺和便携式的器件为集成化的有机磷农药检测装置提供了低成本和大批量生产的选 择途径。 关键词：聚二甲基硅氧烷；微流控；SU—8；有机磷农药 中图分类号：TP212文献标识码：A文章编号：1000—9787（2011）06—0084—03 A microfluidic sensor for detection of organophosphorus compounds* GUO Hong-bin1，CHEN Guo-ping1，LAN Wen-sheng2，LU Bing-rui1，LIU Ran1 （1．State Key Lab of ASIC and Device，Department of Microelectronics，Fudan University，Shanghai200433，China； 2．The Technical Center of Animal and Plant Inspection and Quarantine，Shenzhen Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau，Shenzhen518045，China） Abstract：A polydimethylsiloxane（PDMS）microfluidic sensor with SU—8pillars for immobilizing the enzyme and optical fibers has been successfully fabricated for detecting the organophosphorus compound．The principle of the detection is based on the absorbance to light the enzymatic product and the experimental results of different concentrations organophosphorus with absorbance show a good linear response range and the correlation coefficient is0．9934．The experimental result shows a simple way to bind the enzymes to the microfluidic．The simple process and portable device offers an option of a low cost mass production for integrated organophosphorus compounds． Key words：PDMS，microfluidic，SU—8，organophosphorus compounds 0引言 近年来，有机磷化合物，如甲基对硫磷，因毒性高、环境中持久性低等特点替代了有机氯在农业生产中作为农药广泛使用。有机磷农药的使用范围从杀虫剂扩展到杀菌剂、杀软体动物剂、除草剂、杀鼠剂等各种用途，使用量也成倍增长，造成了环境中地下水、地表水等水资源和土壤的污染［1］，并且其在食物中的残留严重威胁到人类健康［2］。因此，研制出检测有机磷农药快速、可靠、灵敏和实用的分析方法，对人类健康和生态平衡都有至关重要的作用。 有机磷农药传统的检测方法有气相色谱法（GC）、高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱—质谱联用（GC—MS），液相色谱—质谱联用（LC—MS）等［3］，这些方法既能定性又能定量，灵敏度高，已成为实验室常用的分析方法。但这些方法需要对样品进行繁琐的预处理，成本高，所需的仪器昂贵且笨重，并需要专业人员维护，不适合于现场检测。为了简化有机磷农药的检测过程，提高检测效率，新的检测方法也有基于乙酰胆碱酯酶和基于有机磷水解酶的传感器［4 7］，这些检测方法快速方便，但是器件集成度仍不够高。 聚二甲基硅氧烷（PDMS）微流控器件由于其低的制备成本和短的制备周期，广泛应用于各种生物化学量的检测，常用来实现片上实验室（lab-on-a-chip）［8 10］。本文提出一种简单的方法来制备PDMS微流控有机磷农药检测传感器。该传感器集成了用于固定有机磷水解酶的SU—8圆柱和用于传输入射光与出射光的光纤。通过检测反应产物的光吸收可以测出待测有机磷农药的浓度。 收稿日期：2011—04—26 基金项目：高等学校科技创新工程重大项目培育基金资助项目；上海市重点学科建设项目（B112）48

HZ-HJ-SZ-0084 水和土壤质量 有机磷农药的测定 ...

HZHJSZ0084 水和土壤质量有机磷农药的测定气相色谱法 HZ-HJ-SZ-0084 水和土壤质量气相色谱法 1 范围 本方法适用于地面水土壤中速灭磷(Mevinphos)二嗪磷(Diazinon)甲基对硫磷(Parathion-methyl)溴硫磷(Bromophos)稻丰散(Phenthoate) 本方法采用丙酮加水提取凝结法净化 本法的最低检测浓度为0.0001~0.0029mg/kg μa??经去氧管过滤　 ２．１．２　燃烧气 2.1.3 助燃气 2.2 配制标准样品和试样预处理的试剂和材料 使用的试剂一般系分析纯浓缩20倍用气相色谱仪测定无干扰峰 速灭磷二嗪磷甲基对硫磷溴硫磷稻丰散含量95%~99% 2.2.3 三氯甲烷(CHCl3) 2.2.5 石油醚沸程 　 ２．２．７　磷酸(H3PO4) 2.2.8 氯化胺(NH4Cl) 2.2.10 无水硫酸钠(Na2SO4)烘4h备用 2.2.11 助滤剂Celite 545 2.2.12 凝结液溶于400mL蒸馏水 2.3 制备色谱柱时使用的试剂和材料 2.3.1 色谱柱(3.6)和填充物(3.6.5) 3 仪器 3.1 主要仪器 3.2 控制氮气 3.3 进样器 3.4 记录器 3.5 检测器 氮磷检测器 氮磷检测器的铷珠对氮和磷具有很好的选择性和灵敏度 3.6.1 色谱柱数量

3.6.2 色谱柱的特性 硬质玻璃 长1~1.5m 3.6.3 色谱柱的类型 3.6.4 色谱柱的预处理在玻璃柱管内注满热洗液(60~70浸泡4h ?ùó???áó??3??′??6%~10%的二氯二甲基硅烷甲醇液注满玻璃柱管然后用甲醇清洗至中性 3.6.5 填充物 Chrom Q 3.6.5.2 固定液１７（苯基甲基硅酮) 涂渍固定液的方法溶在三氯甲烷中 再向其中加入三氯甲烷至液面高出1~2cm然后在红外灯下将溶剂挥发干或在旋转蒸发器上慢速蒸发干烘箱中 3.6.5.3 色谱柱的充填方法接真空泵 开动真空泵后并轻轻拍打色谱柱 至固定相不再抽入柱内为止用硅烷化玻璃棉塞住色谱柱另一端 将填充好的色谱柱进口按正常接在汽化室上先用较低载气流速和略高于实际使用温度而不超过固定液的使用温度下处理几小时(4~6h) à??ˉ24~48h?óé??ì2a?÷oó 3.6.6 柱效能和分离度 色谱柱总的分离效能要求大于0.8 3.7.1 样品瓶 3.7.2 蒸发浓缩器 3.7.4 真空泵 500mL分液漏斗500mL抽滤瓶 250mL 平底烧瓶 3.7.7 微量注射器１０Ｌ 4 试样制备 4.1 样品性质 4.1.1 样品名称土 液体 4.1.3 样品的稳定性易分散 取具代表性的地表水及地下水装水样之前 4.2.1.2 土样充分混匀装入样品瓶(3.7.1) 4.2.2 样品的保存 4.2.2.1 水样如不能及时分析冷藏箱中保存1~3天 采集后能在-18

土壤中全磷的测定-样本

土壤中全磷的测定 本文拟采用磷钼蓝分光光度法测定土壤中的全磷。（或本文拟比较A 法，B法对C的测定） 测定原理 土壤样品与氢氧化钠熔融，使土壤中含磷矿物及有机磷化合物全部转化为可溶性的正磷酸盐，用水和稀硫酸溶解熔块，在规定条件下样品溶液与钼锑抗显色剂反应，生成磷钼蓝，用分光光度法定量测定。仪器、设备 1.筛：孔径1mm和0.149mm；（一套） 2. 分析天平：感量为0.0001g；（一台） 3. 镍（或银）坩埚：容量≥30mL；（两个） 4.马弗炉：温度可调（0～1000℃）；（一台） 5.分光光度计：要求包括700nm波长；（一台） 6 容量瓶：50mL（8个）、100mL（3个） 7 移液管：1、5mL；(各2支) 8 漏斗：直径7cm；(一个)

9 烧杯：100mL(两个)、250mL (两个) 500mL(一个)； 10细口试剂瓶：100mL (5)个, 200mL(1个) 11.棕色试剂瓶：500 mL 一个 12 玛瑙研钵。(一套) 试剂 所有试剂，除注明者外，皆为分析纯，水均指蒸馏水或去离子水。 1. 氢氧化钠；4克 2. 无水乙醇；10mL 3. 10％（M/V）碳酸钠溶液：10g无水碳酸钠溶于水后，稀释至100mL，摇匀； 4. 5％（V/V）硫酸溶液：吸取5mL浓硫酸缓缓加入90mL水中，冷却后加水至100mL； 5. 3mol/L硫酸溶液：量取34mL浓硫酸缓缓加入到盛有160mL左右水的大烧杯中，不断搅拌，冷却后使用，再加水至200mL； 6. 二硝基酚指示剂：称取0.2g 2，6-二硝基酚溶于100mL水中； 7. 0.5％酒石酸锑钾溶液：称取化学纯酒石酸锑钾0.5g溶于100mL 水中；

土壤有效磷测定(精)

土壤速效磷的测定(0.5M碳酸氢钠法) （一）方法原理： 用PH8.5的0.5M碳酸氢钠溶液，于温度25℃左右提取分离土壤速效磷。取一定量的提取液,控制显色中的硫酸的浓度为0.4N，钼酸铵的浓度为0.1%，以氯化亚锡为还原剂，使形成“磷钼兰”溶液。用比色计测定其兰色强度，然后于标准曲线上查找其相应的浓度，从而计算土壤中的速效磷的含量。 （二）试剂配制： （1）0.5MNaHCO3：称取化学纯NaHCO3 420.0克放入血清瓶中。加8000ml水溶解后，定容10000ml，摇匀，一般情况下，这样配制的溶液可得PH8.5。应用酚酞指示剂检查：取溶解后的溶液2ml于试管中，加入1滴酚酞应为微红色，否则用0.5N NaOH逐滴加入，边加边摇动血清瓶。调节至PH8.5，在定容10000ml，摇匀。 （2）硫酸—钼酸铵试剂： a.贮存液：称化学纯钼酸铵50.0克于800ml水中，微热溶解。另取化学纯浓硫酸（比重1.84）903ml，分次徐徐加入盛有2000ml水的3000ml三角瓶，并不断用玻棒搅拌，冷却后备用。 将钼酸铵溶液徐徐加入硫酸溶液中，并不断搅拌，稀至5000ml（用容量瓶稀释多次定容），摇匀，此溶液贮于紧塞的细口瓶中，放在暗处保存，其钼酸铵浓度为1%，硫酸浓度为6.5N。 b.使用液：使用时视其用量，将贮存液准确稀释5倍（即1份体积贮存液加4 份体积水），摇匀，即可使用。 （3）10%HCL溶液：取分析纯浓盐酸（比重1.19）239ml，加入500ml水中，以水稀释定容至1000ml，摇勺。 （4）氯化亚锡溶液：称取1.00克氯化亚锡（二级）溶于40ml10%HCL中。此试剂每天新鲜配制。 （5）标准磷溶液：准确称取经45℃烘干6小时分析纯KH2PO4 4.3936克于小烧杯中，用少量水溶解后，将溶液毫无损失地溶解洗入1000ml量瓶中，加入2ml 浓硫酸，稀释至刻度，摇匀，即为1000PPm/ml标准磷溶液。再准确吸取此液25.00ml于500ml量瓶中，用0.5M NaHCO3稀释至刻度，摇匀，即为50PPm磷的标准溶液。将50PPm磷的标准溶液用0.5M NaHCO3溶液准确稀释至50倍，即为1PPm磷的工作曲线标准磷溶液。每次使用前必需摇匀（不要长期保存）。 （三）操作步骤： 1.制备待测液:称取过20目筛的风干土样 2.50克于200ml左右塑料瓶中，用快速自动加液管加0.5M NaHCO3 50.00ml，盖紧瓶塞，放在25℃±1℃恒温室或保温箱内，保温振荡30分钟，立即用干燥过滤器保温过滤，滤液承接于60ml塑料杯内。 2.显色：分别用快速移液管吸取滤液5.00ml于20×180mm试管中，再加硫酸—钼酸铵使用液5.00ml，轻轻摇动，以驱除CO2（防止试液溅出），最后充分摇匀，加氯化亚锡溶液1滴，再摇匀，当室温在20℃左右显色10—15分钟，否则应延长至20—25分钟。 3.比色：取一对经检查消光值相等的直径1cm比色皿，一制装蒸馏水做空白，另一支在测定时先倒入显色液冲洗后，装入显色液，于光电比色计上，用红色（或680nm波长）滤光板测定其消光值（E）。根据E值在标准工作曲线上查出其相

有机磷农药残留检测技术

龙源期刊网 https://www.wendangku.net/doc/723814999.html, 有机磷农药残留检测技术 作者：张甜甜孙正阳 来源：《中国科技博览》2017年第19期 [摘要]在农作物病虫害的防治中，人们广泛的应用一种具有高效性的杀虫剂，这种杀虫剂就是会对人和动物产生巨大的危害的有机磷农药。由于有机磷农药对人和动物的危害很大，所以建立起有效、高效并且灵敏的有机磷农药残留在农作物上的检测技术刻不容缓。本文就有机磷农药残留检测技术所包含的技术进行论述，并详细叙述了这一技术的发展趋势和未来。 [关键词]有机磷农药；残留检测；检测技术 中图分类号：O657. 文献标识码：B 文章编号：1009-914X（2017）19-0261-01 有机磷农药在我国的应用范围最广，因为它所发挥的作用是非常巨大的。有机磷农药具有药效高、杀虫效果好并且易降解的特点，这些特点使有机磷农药成为我国使用最频繁的农药品种，而且也是当今世界上使用最多的农药，并且生产这种农药的数量也较其他农药品种多得多。尽管有机磷农药有易降解的特点，但是长期使用也会对环境和人类造成危害。由于农药都是化学制成品，有机磷农药在降解后很有可能会与环境中的一些有机成分结合发生化学反应，生成一种新的对环境有害的化学污染物。残留在瓜果蔬菜上的有机磷农药会对使用他们的人和动物造成很重要的危害。为了环境的保护和人们生命的健康，对其残留的检测技术是有重大意义的。 1 色谱法检测 色谱法又称“色谱分析”、“色谱分析法”、“层析法”，是一种对物质分离和分析的方法，将物质的固定相和流动相进行分离，色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配，以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动，最终达到分离的效果。利用色谱法对有机磷农药进行检测，把有机磷农药的浓度转换成可以记录下来的电信号，并且使用电信号记录仪记录下来对有机磷农药的监测结果。 1.1 气相色谱法 经过实践证明，气相色谱法是适合测定有机磷农药在果树上的残留的检测技术，同时，气相色谱法是还检测有机磷的国家标准方法，具有相对较高的准确性。这种方法可以对多种农药进行有效快速的分离，具有较高的分离能力，而且还具有较高的灵敏度和对检测物质的准确性。气相色谱法对有机磷的检测检出限可以达到1ng，准确度已经很高了，然而在一些检测器的问世以后，这种准确度也在进一步的被加强。气相色谱法现在最常用的一种检测器是火焰光度检测器，这种检测器使检测的结果更准确，它的检出限可以达到0.00～0.008mg/kg，这种方

土壤全磷测定1.0

实验报告 课程名称： 土壤学实验 指导老师： 廖敏 成绩：__________________ 实验名称： 土壤全磷测定 同组学生姓名： 张逸涵 一、实验目的和要求 二、实验内容和原理 三、实验材料与试剂 四、实验器材与仪器 五、操作方法和实验步骤 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析 八、讨论、心得 一、 实验目的和要求 1. 掌握土壤全磷的测定方法及其原理； 2. 了解土壤磷在作物生长中的作用，对土壤磷肥力营养状况评价及合理施肥。 二、 实验内容和原理 1. 土壤全磷（P ） 是指土壤中各种形态磷素的总和。土壤全磷含量的高低，受土壤母质、成土作用和耕作施肥的影响[1]。土壤中的磷可以分为无机磷和有机磷：无机磷以吸附态和钙、铁、铝等的磷酸盐为主，有机磷组成和结构较为复杂，尚不可知，但大多数以高分子形态存在。 2. 土壤样品的分解（HClO 4—H 2SO 4消煮法） 利用HClO 4分解样品，其为强酸和强氧化剂，能氧化有机质，分解矿物质。利用H 2SO 4提高反应温度，防止消化过程中溶液蒸干。 本法用于一般土壤样品分解率达97%～98%，但对红壤性土壤样品分解率只有95%左右。 3. 溶液中磷的测定（钼锑抗-硫酸比色法） 1） 原理 采用钼锑抗-硫酸体系测定。一定酸度下，正磷酸与钼酸盐络合形成磷钼酸多杂物，反

应式如下： H 3PO 4+12H 2MoO 4→H 3[PMo 12O 40]+12H 2O 此体系试剂成分为H 2SO 4为5.5mol·L -1（H +），钼酸铵为10 g·L -1，酒石酸氧锑钾为0.5 g·L -1，抗坏血酸为1.5 g·L -1。在磷较少的情况下，一般都用更灵敏的钼蓝法，即在适宜试剂浓度下，加入适当的还原剂，使磷钼酸中的一部分Mo 6+离子被还原为Mo 5+，生成钼蓝，这是钼蓝比色法的基础。蓝色产生的速度、强度、稳定性等与还原剂的种类、试剂的适宜浓度特别是酸度以及干扰离子等有关。 抗坏血酸之所以作为还原剂，是因其能与Fe 3络合，保持溶液的氧化还原势。添加的催化剂酒石酸氧锑钾能在常温下加速显色，提高反应灵敏度，简化操作手续，使该方法有利于大批量样品分析。 2）配置 A 溶液（5 g·L -1酒石酸氧锑钾溶液）：取酒石酸氧锑钾[K(SbO)C 4H 4O 6]0.5g ，溶解于100mL 水中。 B 溶液（钼酸铵—硫酸溶液）：取钼酸铵[(NH 4)6Mo 7O 24·4H 2O]10g ，溶于450mL 水中，缓慢加入153mL 浓H 2SO 4，边加边搅。再将上述A 溶液加入到B 溶液中，最后加水至1L 。充分摇匀，贮于棕色瓶中，此为钼锑混合液。临用前（当天），称取抗坏血酸（ C 6H 8O 5，化学纯）1.5g ，溶于100mL 钼锑混合液中，混匀，此即钼锑抗试剂。 4. 土壤全磷计算公式 土壤全磷（P ）（g·kg -1）= 31 2 10-??? V V m V ρ 式中：ρ——待测液中磷的质量浓度（g·kg -1）； V ——样品制备溶液的mL 数； m ——烘干土质量（g ）；

土壤总磷有机磷无机磷含量测定试剂盒说明书

货号：MS2905 规格：100管/96样土壤总磷/有机磷/无机磷含量测定试剂盒说明书 微量法 注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义： 土壤总磷包括有机磷和无机磷，其中无机磷能够直接被植物利用。土壤有机磷经过矿化分解而转化为无机磷。同时测定土壤总磷、有机磷和无机磷，可以全面反映土壤磷营养状况。 测定原理： 利用钼蓝法定磷。取一份土样，通过浸提法测定土壤无机磷含量；另外取一份土样，经高温灼烧后，土壤有机磷转化为无机磷，测得土壤总磷含量；总磷含量减去无机磷含量，即可计算出有机磷含量。 自备实验用品及仪器： 可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、可调式水浴锅，分析天平、可调式移液器、550℃高温电炉、蒸馏水、100目筛子（可更小）。 试剂组成和配制： 试剂一：液体×1瓶，4℃保存。临用前用蒸馏水稀释10倍后再用。 试剂二：液体×1瓶，4℃保存。 试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前配制，加入8mL蒸馏水，充分溶解后加入4mL 试剂二，混匀。 标准品：液体×1支，20 μmol/L无机磷标准品，4℃保存。 土壤不同形态磷提取： 1.无机磷：称取通过100目筛子的风干土样0.01g，转移到1mL离心管，加入1mL试剂一，震荡混匀，然后置于45℃水浴1h，8000g，25℃离心10min，取上清液一，用于无机磷含量测定。 2.总磷提取：取通过100目筛子的风干土样，550℃灼烧1h，冷却后称取约0.01g，转移到1 mL 离心管，加入1mL试剂一，震荡混匀，然后置于45℃水浴1h，8000g，25℃离心10min，取上清液二，用于总磷含量测定。 测定步骤： 1. 分光光度计/酶标仪预热30 min，调节波长到660 nm，蒸馏水调零。 2.打开水浴锅，调节温度到40℃。 3. 空白管：取EP管，依次加入100μL蒸馏水，100μL试剂三，混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度，记为A空白管。 4. 标准管：取EP管，依次加入10μL标准液，90μL蒸馏水，100μL试剂三，混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度，记为A标准管。 5. 测定管：取EP管，依次加入10μL上清液一或者上清液二，90μL蒸馏水，100μL试剂三，混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度，记为A测定管。注意：空白管和标准管只需测定一次。 土壤磷含量计算： a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下 第1页，共2页

土壤全磷测定

1、测定意义： 磷的贮量及供给状况反映土壤肥力，指导施肥；为磷在土壤中的吸附、固定、转化提供定量数据；磷作为生态环境重要因素，其迁移、富集过程是以土壤为介质，可以为研究磷的面源污染提供基础。 全磷大部分呈无机矿物态，而有机磷在短时间内是相对无效的，只有少量无机矿物态磷对作物有效 不同地区全磷含量 我国土壤中一般含量为： -1.0g 南方酸性低于： 0.56g.kg-1 黄土母质： -0.7g 新疆栗钙土高于： 2.0g.kg-1 酸性黄、红壤： 0.4g.kg-1 2、方法及原理 方法：硫酸、高氯酸酸溶-钼锑抗比色法 原理：在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与H2SO4 、HClO4 强氧化剂作用下，使之完全分解，全部转化为正磷酸盐而进入溶液，然后用钼锑抗比色法测定。 高氯酸作用，氧化有机质，分解矿物质，有助于胶状硅脱水，络合三价铁离子，抑制硅铁干扰。 主要仪器 紫外可见分光光度计、消煮炉、万分之一天平、百分之一天平 试剂

（1） H2SO4：硫酸（ H2SO4，密度1.84g/ml，分析纯） （2） HClO4：高氯酸（HClO4，60~70%，分析纯） （3） 4 mol L-1NaOH溶液：氢氧化钠溶于蒸馏水中，用水定容至100ml。（4） L-1 H2SO4溶液：吸取浓硫酸，缓缓注入水中，并用水定容至1l。 （5） 2，4-二硝基酚指示剂：2,4-二硝基酚0.2g于100 mL 水中。 此指示剂的变色点约为PH3，酸性时无色，碱性时呈黄色。（6）钼锑抗试剂： A 5 g?L-1酒石酸氧锑钾: 取酒石酸氧锑钾 0.5g 溶于100mL水中 B钼酸铵-硫酸溶液：称取钼酸铵10 g, 溶于 450 mL水中，缓慢加入153mL浓H2SO4，边加边搅。 C将A 加入到B 溶液中，最后加水至1L,充分摇匀，贮于棕色瓶中，此为钼锑混和液。 （7）钼锑显色剂： 临用前（当天），称取1.5克抗坏血酸（C6H8O5, 分析纯），溶于100ml 钼锑抗混合液中，混匀，此即为钼锑抗试剂。有效期24小时，如藏于冰箱中则有效期较长。此试剂中H2SO4为l，钼酸铵为10g/l，酒石酸锑钾为0.5g/l，抗坏血酸15g/l。（此液应现用现配） （8）5ug/ml磷（p）标准液 磷标准溶液：准确称取在105℃烘箱中烘干的KH2PO4（分析纯）g，溶解在400mL水中，加浓H2SO45 mL（加H2SO4防长霉菌，可使溶液长期保存），转入1 L容量瓶中，加水至刻度。此溶液为50 μg·mL-1P

土壤有效磷测定教案资料

土壤有效磷测定

土壤中有效磷的测定 -NY/T 1121.7-2014 A 碳酸氢钠提取——钼锑抗比色法 适用于石灰性、中性土壤 PH≥6.5 方法提要 由于浸提液(0.5MNaHCO3)提高了CO32-离子的活性，使其与Ca2+形成CaCO3沉淀，从而降低了Ca2+的活性, 使一定量活性较大的Ca-P被浸出，同时也可使比较活性的Fe—P 和AI-P通过水解作用而浸出(由于碳酸盐的碱溶液，也降低了铝和铁离子的活性，有利于磷酸铝和磷酸铁的提取。此外，NaHCO3碱溶液中存在着OH-、HCO3-、CO32-等阴离子均能置换吸附态的磷酸盐H2PO4-。) ，从而增加了碳酸氢钠提取中性和石灰性土壤速效磷的能力。由于浸出液中Ca、Fe、Al浓度较低，不会产生磷的再沉淀；浸出液中的磷可用钼锑抗比色法定量测定。 主要仪器设备 1 千分之一电子天平； 2 恒温水浴振荡器； 3 150ml塑料瓶和50ml塑料小烧杯； 4 锥形瓶(或比色管)：50mL或25mL比色管； 5 紫外分光光度计； 试剂 1 氢氧化钠：10%(m/V)溶液；(调节浸提剂pH至8.5) 2 碳酸氢钠浸提剂［c(NaHCO3)=0.50mol·L-1，pH=8.5］称取42.0gNaHCO3溶于950mL水中，用10%氢氧化钠溶液调节pH至8.5(用酸度计测定)，用水稀释至1L。贮存于塑料瓶中备用。如贮存期超过20d，使用时须重新校正pH。

3 酒石酸锑钾［K(SbO)C4H4O6·1/2H2O］：0.30%(m/V)溶液；(提供三价锑离子,作用是生成的三元杂多酸比磷钼酸铵具有更强的吸光作用;同时,加快抗坏血酸的还原反应.) 4 抗坏血酸(C6H8O6左旋，比旋光度+21-22°,分析纯)(还原剂, 抗坏血酸主要优点是生成的颜色稳定，干扰离子的影响较小，适用范围较广，但显色慢，需要加温。如果溶液中有一定的三价锑存在时，则大大加快了抗坏血酸的还原反应，在室温下也能显色。 5 钼锑贮备液：称取10.0g钼酸铵［(NH4)6Mo7O24·4H2O］溶于300mL约60℃水中，冷却。另取181mL浓硫酸，缓缓注入800mL水中，搅匀，冷却。然后将稀硫酸注入钼酸铵溶液中，搅匀，冷却。再加入100mL0.3%酒石酸涕钾溶液，最后用水稀释至2L，盛于棕色瓶中备用。(提供一定酸度和三价锑离子) 6 显色剂：称取0.5g抗坏血酸溶于100mL钼锑贮备液中。此溶液有效期不长，建议现用现配。 7 磷标准贮备溶液［c(P)=100μg ·mL-1］：称取105℃烘干 2h的磷酸二氢钾(优级纯)0.4390g，用水溶解后，加入5mL浓硫酸 (防长霉菌,可使溶液长期保存)，转入1L容量瓶中，用水定容。此贮备溶液在冰箱中可长期保存。 8 磷标准工作溶液［c(P)=5μg ·mL-1］：吸取5.00mL磷标准贮备液于100mL容量瓶中，加水定容。此工作溶液不宜久存。 分析步骤 1. 有效磷的浸提:

气相色谱在食品中有机磷农药残留的检测应用

摘要：为探讨气相色谱(gc)在食品(菠菜)中有机磷农药残留的检测应用。用体积比1∶1的环己烷和乙酸乙酯提取样品中的有机磷农药，固相萃取柱净化，采用气相色谱fpd检测器进行检测，得出结果：10种有机磷农药在20 min内分离良好，在5～100 μg/l范围内线性良好，相关系数为0.999 2～0.999 8。结果表明：气相色谱法定量准确、操作简便、灵敏度高，可以应用于食品产品的检测中。 关键词：气相色谱;有机磷;农药残留 有机磷是食品安全中需要控制的农药残留，有机磷种类比较多，其中使用比较多得是敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、二嗪磷、乐果、毒死蜱、倍硫磷、马拉硫磷和对硫磷等[1]，在食品上的残留量需要控制在一定范围内才不会对人体健康造成伤害。 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 agilent 7890a气相色谱(安捷伦公司)，甲醇、乙睛和正己烷均为色谱纯。标准品：敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、二嗪磷、乐果、毒死蜱、倍硫磷、马拉硫磷和对硫磷，纯度≥96.0%，sigma公司产品。样品为菠菜(购于某超市)。 1.2 方法 1.2.1 提取方法 称取25.0 g样品于150 ml烧杯中，用体积比1∶1的环己烷和乙酸乙酯提取，用匀质机匀浆2 min，过滤于100 ml具塞量筒中，加入5～7 g nacl，剧烈震荡1 min后静置约30 min，使其分层，而后吸取10 ml上清液于固相萃取柱净化，收集净化液，利用氮气在70 ℃水浴下将其吹至近干后，用5 ml正己烷分次溶解提取物，经有机滤膜过滤后，用于气相色谱分析[2]。 1.2.2 色谱条件 色谱柱：hp-5毛细柱，30 m×320 μm×0.25 μm;升温程序：80 ℃保持1 min，以25 ℃/min升至200 ℃，保持8 min，再以30 ℃/min升至260 ℃，保持10 min;进样口温度240 ℃，检测器温度240 ℃，进样量为1 μl，不分流进样[3]。 1.2.3 有机磷标准系列溶液 分别量取1 μg/ml有机磷混合标准储备5、10、20、40、80 μl和100 μl到1 ml容量瓶中，用正己烷溶液定容，得到浓度为5、10、20、40、80 ng/ml和100 ng/ml的有机磷标准工作液，以含量为横坐标、峰面积为纵坐标绘制工作曲线[4]。 2 结果 2.1 磺胺类药物标准曲线及线性相关系数 按照1.2.3进行配制，并按照1.2.2色谱条件进行分析，10种有机磷在5～100 μg/l 时具有良好的线性关系，相关系数(r)为0.999 2～0.999 8。其中敌敌畏：y=370.64x+63.48，r=0.999 4;甲胺磷：y=90.21x+121.25，r=0.999 6;乙酰甲胺磷：y=132.31x+245.71，r=0.999 3;甲拌磷：y=106.27x+66.25，r=0.999 8;二嗪磷：y=79.647x+40.60，r=0.999 8;乐果：y=29.41x+38.02，r=0.999 2;毒死蜱：y=21.14x+28.76，r=0.999 5;倍硫磷：y=66.99x+13.83， r=0.999 7;马拉硫磷：y=44.49x+10.43，r=0.999 2;对硫磷：y=89.48x+10.88，r=0.999 5。 2.2 牛奶中磺胺类药物的含量 依据1.2.1样品处理过程对样品进行处理，经0.22 μm滤膜过滤，上机测试。样品得到的10种敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、二嗪磷、乐果、毒死蜱、倍硫磷、马拉硫磷和对硫磷有机磷均没有检测到。 3 结论