(完整版)酶学与酶工程总结

a

n

Lecture 1 酶学与酶工程

酶的概念:

酶（enzyme ）是一类由活细胞产生的，具有催化活性和高度专一性的

特殊蛋白质，是一类生物催化剂。

酶的分类(6类)、组成、结构特点？和作用机制？

组成：单体酶、寡聚酶、多酶复合体

酶

天然酶

修饰酶

分子水平上改良的酶

化学修饰的酶固定化酶Note:一个酶蛋白可有多种催化活性，相当于多个酶(关注原核和真核生物的差别)除水解酶和连接酶外，其他酶在反应时都需要特定的辅酶。

金属在酶催化中的作用：稳定酶构象、参与酶的催化作用（如激活底物）、电子传递体

酶作为催化剂的显著特点:

强大的催化能力：加快反应速度可高达1017倍;没有副反应;

高度的专一性：各种酶都有专一性，但专一程度的严格性上有所差别;可调节性;

同工酶的概念:

同一种属中由不同基因或（复）等位基因编码的多肽链所组成的

单体、纯聚体或杂交体，其理化及生物学性质不同而能催化相同反应的酶称同工酶。 同一基因生成的不同mRNA 所翻译出来的酶蛋白也列入同工酶的范畴。

酶蛋白合成后经不同类型的共价修饰（如糖基化等）而造成的多种酶分子形式，严格来说不属于同工酶而称为synzyme ，但也有人称其为次生性同工酶（secondary isozyme ）。

不同种属中催化相同反应的酶称为xenozyme，也不属于同工酶。

酶的活性中心

指必需基团在空间结构上彼此靠近，组成具有特定空间结构的区域，能与底物特异结合并将底物转化为产物

必需基团(essential group):酶分子中氨基酸残基侧链的化学基团中，一些与酶活性密切相关的基团。

活性中心内的必需基团:结合基团（与底物相结合）和催化基团（催化底物转变成产物）

活性中心外的必需基团：维持酶活性中心应有的空间构象所必需；

构成酶活性中心的常见基团：His的咪唑基、Ser的－OH、Cys的－SH、Glu的γ-

COOH。

酶的作用机制

酶活力的调节

酶的应用

食品加工方面：生物技术在食品工业中应用的代表就是酶的应用，目前已经有几十种酶成功用于食品工业。如葡萄糖、饴糖、果葡糖浆的生产、蛋白质制品加工、果蔬加工、食品保鲜以及改善食品品质与风味等。

常用的酶制剂主要有：淀粉酶、糖化酶、蛋白酶、葡萄糖异构酶、果胶酶、脂肪酶、纤维素酶葡萄糖氧化酶等。

酶在轻工业方面的应用：用酶进行原料处理（发酵原料、淀粉原料、纤维素原料、含戊聚糖的植物原料的处理、纺织原料、造纸原料的制浆、生丝的脱胶处理、羊毛的除垢），用酶生产各种产品（L-氨基酸、核苷酸、酱油或豆酱、制革），用酶增强产品的使用效果（加酶洗涤剂；加酶牙膏、牙粉和嗽口水）

酶在医学中的应用：主要的医药用酶、用酶进行疾病的诊断、用酶治疗各种疾病、用酶制造各种药物

酶与食品质量安全

酶制剂作为食品添加剂进入食品的潜在危害

酶催化有毒物质的产生

酶作用导致食品中营养组分的损失

潜在的产毒素性

潜在的致病性

对策：安全菌株，体外基因毒理学测试，酶制剂的安全评价，酶制剂来源安全性的评估标准

Lecture 2 基因工程的酶学基础

核酶（Ribozyme)：概念：具有生物催化功能的RNA。

看课件

基因工程的酶学基础

基因克隆表达的过程

基因克隆常用的酶，有什么应用，注意事项（补充后两者

）

Lecture 3 酶促反应

?酶促反应的特点与机理：极高的效率（降低反应的活化能），特异性和可调节性

特异性：一种酶仅作用于一种或一类化合物，或一定的化学键，催化一定的化学反应并生成一定的产物。酶的这种选择性称为酶的特异性或专一性。

绝对特异性(absolute specificity)：酶只作用于特定结构的底物，进行一种专一的反应，生成一种特定结构的产物

相对特异性(relative specificity)：酶作用于一类化合物或一种化学键。立体结构特异性(stereo specificity)：酶仅作用于立体异构体中的一种。

机理：酶-底物复合物的形成与诱导契合假说（酶与底物相互接近时，其结构相互诱导、相互变形和相互适应，进而相互结合）可调节性：对酶生成与降解量的调节

酶催化效力的调节

通过改变底物浓度对酶进行调节等

?两个假说：锁钥假说，诱导契合假说

?酶促反应动力学：研究各种因素对酶促反应速度的影响①影响酶促反应的因素，Km 值的意义，测定（双倒数作图法）

影响因素包括有：

酶浓度、底物浓度、pH 、温度、抑制剂、激活剂等。（具体见课件）Km 的意义和作用：

1.Km 值等于酶促反应的初速度为Vmax 的一半时所需的底物浓度。

2.Km 值近似等于ES 的解离常数，1/ Km 近似地表示酶对底物亲和力的大小。

3.Km 是酶的特征性常数，在一定程度上代表酶的催化效率。

4.当、温度和离子强度恒定时， Km 只和酶及底物的性质有关，而与酶的浓度无关。

5.一种酶能催化几种底物时就有不同的Km ，其中Km 最小的底物一般认为是该酶的

天然底物或最适底物。

6.当Km 已知时，可求得任何底物浓度下酶活性部位被底物分子饱和的分数（FES ）。

7.分辨同工酶：测定几个同工酶对同一底物的Km ，可估计这组同工酶是原级同工酶

还是次生性同工酶，前者的Km 常有差异，后者的则比较接近或相同。

8.探讨代谢规律：肌肉中的A 型醛缩酶，对果糖-1,6-二磷酸的Km 为3μmol/L ，对3-磷酸甘油醛和磷酸二羟丙酮的Km 分别为1mmol/L 和2 mmol/L ，可知其在体内主要催化糖酵解而难于参与糖异生。

9.有助于寻找代谢的限速步骤：如酶1，2，3分别催化A B C D 三步

连续反应，三个酶的Km 分别为10 mmol/L ， 1 mmol/L ， 0.1 mmol/L ，而细胞内A ，B ，C 的浓度相同，可推知酶1催化的A B 为限速反应。

10.指导生化实验：利用工具酶来测定某一底物的浓度时，可根据米式公式的积分式来

计算工具酶的用量。工具酶的 Km 越大，所需加入的酶量也越大。

鉴别抑制类型

V m 是酶完全被底物饱和时的反应速度，与酶浓度成正比。

②有哪些抑制类型，与Km 之间的关系

不可逆性抑制：抑制剂通常以共价键与酶活性中心的必需基团相结合，使酶失活，不能用透析、超滤等方法予以除去。碘乙酸（ICH2COOH ）是一种烷化剂，可使巯基烷化。有机磷化合物（丝氨酸的-OH 磷酯化）、重金属离子及砷化合物 可逆性抑制：抑制剂以非共价键与酶或酶-底物复合物可逆性结合，使酶的活性降低或丧失；抑制剂可用透析、超滤等方法除去。

竞争性抑制:

抑制剂与底物的结构相似，能与底物竞争酶的活性中心，从而阻碍酶底物复合物的形成，使酶的活性降低。(丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂/磺胺药对细菌FH 2合成酶的抑制).

抑制程度取决于抑制剂与酶的相对亲和力及［S ］；动力学特点：V max 不变，表观K m ↑。可通过增加底物浓度而使整个反应平衡向生成产物的方向移动，因而能削弱或解除这种抑制作用。

非竞争性抑制:

抑制剂与酶活性中心外的必需基团结合，底物与抑制剂之间无竞争关系。

抑制剂并非结合于活性中心的底物结合位点，而是此位点以外的基团，如催化基团等。

抑制剂与活性中心结合后也不引起底物结合的立体障碍。

如别嘌呤醇竞争性抑制黄嘌呤氧化酶，其氧化产物别黄嘌呤非竞争性抑制黄嘌呤氧化酶。

非竞争性抑制的特点

S 和E 或ES 都能结合，两者结合的亲和力相等,I 也能和E 或ES 结合，两者的亲和力相等。

S 和I 与酶的结合既不互相排斥，也不互相促进,抑制程度取决于［I ］；

动力学特点：V max ↓，表观K m 不变。这种抑制作用不能用增加底物浓度的方法来消除。

反竞争性抑制:

抑制剂仅与酶和底物形成的中间产物结合，使ES 的量下降。

抑制剂只与ES 结合;抑制程度取决与［I ］及［S ］；动力学特点：V max ↓，表观

K m ↓。

混合性抑制作用:

S 和E 或EI 都能结合， I 也能和E 或ES 结合，但亲和力都不相等。S 和I 对E 的结合互有影响。相当于纯非竞争性和部分竞争性抑制作用的混合

系统。

③酶的调剂：酶原调节，变构调节，共价调节

酶原 (zymogen):有些酶在细胞内合成或初分泌时只是酶的无活性前体，此前体物质称为酶原。例子：胰蛋白酶原、血液凝固的级联放大作用、胃蛋白酶原、胰凝乳蛋白酶原酶原的激活:在一定条件下，酶原向有活性酶转化的过程。

酶原激活的机理

变构调节：一些代谢物可与某些酶分子活性中心以外的部位可逆地结合，使酶构象改变，从而改变酶的催化活性，此种调节方式称变构调节。

变构酶的特点：1、通常具有四级结构，存在协同效应；2、含有催化亚基和调节亚基（或催化部位和调节部位）。3、[S]-v 关系曲线为S 形。

一个效应物分子与变构酶的结合，对第二个效应物分子的结合产生影响，这种效应为协同效应。别构酶举例：天冬氨酸转氨甲酰酶，简称ATCase

共价修饰:在其他酶的催化下，酶蛋白肽链上的一些基团可与某种化学基团发生可逆

的共价结合，从而改变酶的活性，此过程称为共价修饰。磷酸化与脱磷酸化（最常见）/乙酰化和脱乙酰化/甲基化和脱甲基化/腺苷化和脱腺苷化/－SH与－S－S互变

特点：受共价修饰的酶存在有（高）活性和无（低）活性两种形式；具有瀑布效应（级联效应）；是体内经济、有效的快速调节方式。

Lecture 4 酶的分离纯化

发酵液的预处理

细胞的破碎方法

酶的提取分离方法

酶的浓缩结晶

纯化方案的设计与评价

Lecture 5 固定化酶与固定化细胞

为什么要固定化酶，酶固定化的优缺点

?固定化酶：指在一定空间内呈闭锁状态存在的酶，能连续地进行反应，反应后

的酶可以回收重复使用。

?为什么要固定化酶：

酶的优点和缺点

优点：高催化效率；高专一性。缺点：对环境十分敏感；易失活；不能回收。

固定化生物催化剂的优点

底物产物分开；能回收，可反复使用；易于连续化、自动化

?酶固定化的优缺点

优点：

酶固定化的方法（详见课件）

酶

天然酶

修

饰酶

分子水平上改良的酶

化学修饰的酶

固定化

酶

酶固定化的性质

大多数固定化酶活性下降；提高了稳定性；最适温度也随之提高，不变或下降；pH 和pH-活性曲线常常发生偏移（微环境表面电荷性质的影响）；K m 变化（高级结构变化及载体影响引起酶与底物亲和力变化，又受溶液中离子强度的影响）固定化酶制备物的性质取决于所用的酶及载体材料的性质。 酶：生物化学性质；动力学参数载体：化学特征；机械性质

固定 化酶：固定化方法；稳定性等 细胞的固定化

概念：将细胞约束或限制在一定的空间界限内，但细胞仍保留催化活性并具有能被反复或连续使用的活力。固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动的细胞称为固定化细胞。该细胞能进行正常的生长、繁殖和新陈代谢。

优点：保持了细胞内酶系的原始状态与天然环境，因而更稳定；保持了细胞内原有的多酶系统，适于多步催化的反应；无需辅酶再生；固定化增殖细胞发酵具有显著优越性。

缺点：细胞内有多种酶，可能有副反应；细胞膜等存在扩散限制作用；载体形成的孔隙大小影响高分子底物的通透性。

固定化细胞的分类，制备方法

1. 化学法（共价交联）

2. 包埋法

3. 吸附法

固定化酶与固定化细胞的应用：生物化学与分子生物学基础研究/亲和分离系统/药物控释载体/在食品、制药等轻工、化工领域/生物传感器

生物传感器:又称生物活性物质修饰的传感器

Lecture 6 酶的修饰（1）

酶反应器的概念，类型

以酶或固定化酶作为催化剂进行酶促反应的装置

概念:

酶的稳定性和稳定化

酶（蛋白质）的稳定性是指酶抵抗各种因素的影响，保持其生物活力的能力。要保持其生物活力，必须保持其空间结构。

稳定化指的是熵（Entropy）性质：由于交联即蛋白质中形成二硫键，伸展蛋白质的熵急剧降低

酶的化学修饰：化学酶工程（详见课件从……开始）

改变酶特性有两种主要的方法：

1)通过分子修饰的方法来改变已分离出来的天然酶的活性（化学酶工程）。

2)通过基因工程方法改变编码酶分子的基因而达到改造酶的目的（生物酶工程）。

化学修饰定义：对酶在分子水平上用化学方法进行改造，即在体外将酶分子通过人工方法与一些化学基团，特别是具有生物相容性的大分子进行共价连接，从而改变酶分子的酶学性质的技术。

酶化学修饰的原理、酶化学修饰的基本要求和条件

修饰的类型（最常见大分子修饰剂）

化学修饰分为可溶性大分子修饰酶和小分子修饰酶：可溶性大分子修饰酶：PEG修饰的人血红蛋白

最常用的修饰剂——PEG类修饰剂

聚乙二醇(polyethyleneglycol, PEG)是线性分子具有良好的生物相容性和水溶性，在体内无毒性、无残留。其生物相容性已通过美国食品和药物管理局(FDA)认证。

通常没有免疫原性和毒性,不会破坏生物分子的活性，并可消除酶的抗原性，使其末端活化后可以与酶产生交联，因而，它被广泛用于酶的修饰。

PEG分子量范围很宽，适合用作修饰剂或修饰剂出发原料的PEG的相对分子质量一般为500～20000。

PEG既溶于水，又溶于绝大多数有机溶剂，但不溶于乙醚、脂肪烃。

Lecture 7 酶的修饰（2）

?酶的化学修饰：化学酶工程

修饰的设计（见课件部分）

?酶的分子修饰：生物酶工程

将肽链上的某一个氨基酸换成另一个氨基酸，引起酶蛋白空间构象的改变，从而改变酶的某些特性和功能的方法。

生物酶工程主要包括：

（1）用基因工程技术大量生产酶（克隆酶）；

（2）修饰酶基因产生遗传修饰酶（突变酶）；

（3）从蛋白质或基因水平上设计，合成酶杂合体或自然界不曾有的酶（杂合酶）。

酶分子的改造：

基于序列的合理化设计方案：化学修饰，定点突变。

利用基因的可操作性，模拟自然界的演化过程的非合理化设计方案，如定向进化。

?修饰的过程和原理

?酶的定向进化（方法及原理）

定义：所谓酶的体外定向进化，又称实验分子进化，属于蛋白质的非合理设计，它不需事先了解酶的空间结构和催化机制，通过人为地创造特殊的条件，模拟自然进化机制(随机突变、重组和自然选择)，在体外改造酶基因，并定向选择出所需性质的突变酶。

原理：定向进化的基本规则是“获取你所筛选的突变体”。

定向进化=随机突变+选择。前者是人为引发的，后者虽相当于环境，但只作用于突变后的分子群，起着选择某一方向的进化而排除其他方向突变的作用，整个进化过程完全是在人为控制下进行的

方法：1、易错PCR技术为代表的无性进化2、DNA改组、基因家族之间的同源重组4、外显子改组5、计算机辅助设计

Lecture 8

?杂合酶

概念：把来自不同酶分子的结构单元（单个功能域、二级结构、三级结构或功能域）或酶分子进行组合或交换，可以产生具有所需性质的优化酶杂合体。由两种以上酶成分构成。

优化酶的结构，提高功能的手段。

构建方法：非合理性设计法：

主要通过构建各种库，再从库中筛选出所需性质的杂合体，实际上就是进化酶。

理性设计法：

要求对操作对象的结构和功能详尽了解，才能实现结构元件从一个蛋白质转移至另一个蛋白质，从而产生性能新奇的杂合体。

?抗体酶例子是哪个？

概念和特点：

–一种具有催化功能的抗体分子，在其可变区赋予了酶的属性。

–它是利用现代生物学与化学的理论与技术交叉研究的成果，是抗体的高度选择性和酶的高效催化能力巧妙结合的产物。

特性：一种对酶促反应过渡态特异的抗体

1、能催化一些天然酶不能催化的反应

2、有更强的专一性和稳定性

?核酶？

?极端酶

概念，特点，设计到的技术方法（详见课件）

Lecture 9 酶的发酵生产

?酶生物合成的调节

?酶的发酵生产

?微生物

常见的产酶微生物

酶发酵动力学定义

酶合成模式的四种类型

?动植物细胞发酵产酶：细胞的特点，获取，培养方式和条件。

?考试内容

?是非题（20题，20分）

?填空题（30空，30分）

?简答题（5题，每题7分，共35分）名词解释一题，简答三题，主观发挥题一题?论述题（1题，15分）实验设计题：涉及基因工程酶学基础，酶的分离纯化，活力鉴定等方面

酶学与酶工程

Lecture1 酶学与酶工程 1、酶的概念，命名、酶的活性中心 1）酶是由活细胞产生的，具有催化活性和高度转移性的特殊蛋白质，是一类生物催化剂。 酶工程：将酶学理论与化工技术相结合，研究酶的产生和应用的一门新的技术性学科，包括了酶制剂的制备、酶的固定化、酶的修饰与改造及酶反应器等方面。 主要:酶的生产、酶的分离纯化、酶的固定化和酶生物反应器。 化学酶工程：用化学手段修饰、改造、模拟天然酶，使其更适合人们的需要，主要包括天然酶、化学修饰酶、固定化酶以及化学人工合成酶的研究与应用。 生物酶工程：用生物学的方法，特别是基因工程、蛋白质工程和组合库筛选法改造天然酶，创造性能优异的新酶，主要是抗体酶、杂合酶、进化酶和核酸酶的研究与应用。 2）命名：系统命名法！！ 催化下列反应酶的命名：ATP+D—葡萄糖→ADP+D—葡萄糖-6-磷酸 该酶的正式系统命名是：ATP：葡萄糖磷酸转移酶，表示该酶催化从ATP中转移一个磷酸到葡萄糖分子上的反应。 它的分类数字是：E.C.2.7.1.1 E.C代表按国际酶学委员会规定的命名 第1个数字(2)代表酶的分类名称(转移酶类) 第2个数字(7)代表亚类(磷酸转移酶类) 第3个数字(1)代表亚亚类(以羟基作为受体的磷酸转移酶类) 第4个数字(1)代表该酶在亚-亚类中的排号(D葡萄糖作为磷酸基的受体） 3）活性中心 必需基团：酶分子中氨基酸残基侧链的化学基团中，一些与酶活性密切相关的基因 酶的活性中心：必需基团在空间结构上彼此靠近，组成具有特定空间结构的区域，能与底物特异结合并将底物转化为产物。 2、酶的分类、组成、结构特点和作用机制 分类：按酶促反应的性质分类（六大类）：氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂解酶类、异构酶类、合成酶类 全酶=酶蛋白+辅因子 辅因子包括：有机辅因子（辅酶非共价结合/辅基非共价结合或共价结合）和金属辅因子（金属酶/金属激活酶） 3、酶作为催化剂的显著特点 强大的催化能力：可以加快至1017倍； 没有副反应，酶在较温和的条件下催化反应的进行； 高度的专一性，各种酶都有专一性但是专一程度的严格性上有所差别； 可调节性，包括了抑制剂和激活剂的调节、反馈抑制调节、共价修饰调节和变构调节等；

《酶工程》复习大纲答案详解

《酶工程》复习大纲 试题题型：名词解释，判断题，选择题，简答题，论述题，实验设计题。 第一章酶工程基础 一、名词解释： 酶：指生物体产生的具有催化活性的生物大分子。 酶工程：由酶学与化学工程技术、基因工程技术、微生物学技术相结合而产生的一门新技术，是工业上有目的地设计一定的反应器和反应条件，利用酶的催化功能，在常温常压下催化化学反应，生产人类所需产品或服务于其它目的地一门应用技术。 转换数：酶使底物每分钟变化的分子数。 催化周期：单位时间内每个酶分子将底物分子转换成产物的最大值，即每摩尔酶单位时间催化底物转化为产物的摩尔数。 酶活力：也称为酶活性，是指酶催化某一化学反应的能力。其大小可用在一定条件下，酶催化某一化学反应的速度来表示，酶催化反应速度愈大，酶活力愈高。 比活力：指在特定条件下，单位质量的蛋白质或RNA所拥有的酶活力单位数。 酶活国际单位IU: 1961年国际酶学会议规定：在特定条件(25℃，其它为最适条件)下，每分钟内能转化1μmol底物或催化1μmol产物形成所需要的酶量为1个酶活力单位，即为国际单位（IU）。 催量kat：每秒钟转化 1 摩尔底物（被反应物）所需的酶活力为1个katal ,简称 kat 二、问答题 1、酶催化的特点有哪些？ 高效性：酶的催化效率比无机催化剂更高,使得反应速率更快； 专一性：一种酶只能催化一种或一类底物,如蛋白酶只能催化蛋白质水解成多肽、二肽酶可催化各种氨基酸脱水缩合形成的二肽； 温和性：是指酶所催化的化学反应一般是在较温和的条件下进行的. 活性可调节性：包括抑制剂和激活剂调节、反馈抑制调节、共价修饰调节和变构调节等. 有些酶的催化性与辅因子有关. 易变性：由于大多数酶是蛋白质,因而会被高温、强酸、强碱等破坏 2、影响酶催化作用的因素有哪些？ ◇1温度：酶促反应在一定温度范围内反应速度随温度的升高而加快；但当温度升高到一定限度时，酶促反应速度不仅不再加快反而随着温度的升高而下降。在一定条件下，每一种酶在某一定温度时活力最大，这个温度称为这种酶的最适温度。 ◇2酸碱度：每一种酶只能在一定限度的pH范围内才表现活性，超过这个范围酶就会失去活性。 ◇3酶浓度：在底物足够，其它条件固定的条件下，反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素时，酶促反应的速度与酶浓度成正比。 ◇4底物浓度：在底物浓度较低时，反应速度随底物浓度增加而加快，反应速度与底物浓度近乎：成正比，在底物浓度较高时，底物浓度增加，反应速度也随之加快，但不显著； 当底物浓度很大且达到一定限度时，反应速度就达到一个最大值，此时即使再增加底物浓度，反应也几乎不再改变。 ◇5抑制剂：能特异性的抑制酶活性,从而抑制酶促反应的物质称为抑制剂。 ◇6激活剂：能使酶从无活性到有活性或使酶活性提高的物质称为酶的激活剂。

人教版高中生物选修一专题四《酶的研究与应用》知识点归纳

专题四酶的研究与应用 探讨加酶洗衣粉的洗剂效果 一、实验原理 1．加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。 2．碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污迹从衣物上脱落。脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质，使洗衣粉具有更好的去污能力。 3．在本课题中，我们主要探究有关加酶洗衣粉的三个问题： 一是普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果有什么不同； 二是在什么温度下使用加酶洗衣粉效果最好。 三是添加不同种类的酶的的洗衣粉，其洗剂效果有哪些区别。 二、实验步骤 1．探究用加酶洗衣粉与普通洗衣粉洗涤的效果的不同 ①在2个编号的烧杯里，分别注入500mL清水。 ②取2块大小相等的白棉布，用滴管在每块白布上分别滴上等量的墨水，分别放入烧杯里，用玻璃棒搅拌。 ③将2个烧杯分别放入同等温度的温水中，保温5分钟。 ④称取5克加酶洗衣粉和5克普通洗衣粉2份，分别放入2个烧杯中，用玻璃棒均匀搅拌。保温10分钟。 ⑤观察并记录2个烧杯中的洗涤效果 2.探究用加酶洗衣粉洗涤的最佳温度条件 ①在3个编号的烧杯里，分别注入500mL清水。 ②取3块大小相等的白棉布，用滴管在每块白布上分别滴上一滴食用油、鸡血、牛奶，分别放入烧杯里，用玻璃棒搅拌。 ③将3个烧杯分别放入50摄氏度的热水、沸水和冰块中，保温5分钟。 ④称取5克加酶洗衣粉3份，分别放入3个烧杯中，用玻璃棒均匀搅拌。保温10分钟。 ⑤观察并记录3个烧杯中的洗涤效果。 3．探究不同种类的加酶洗衣粉洗涤的效果 污染物蛋白酶洗衣粉脂肪酶洗衣粉复合酶洗衣粉普通洗衣粉 油渍 汗渍 血渍 观察并记录四种洗衣粉分别洗涤三种污染的洗涤效果。 三、注意事项 1．变量的分析和控制 影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有水温、水量、水质、洗衣粉的用量，衣物的质料、大小及浸泡时间和洗涤的时间等。在这些因素中，水温是我们要研究的对象，而其他因素应在实验中保持不变。选择什么样的水温进行实验需要实验者根据当地一年中的实际气温变化来确定水温，通常情况下，冬季、春季、秋季和夏季可分别选取5 ℃、15 ℃、25 ℃和35 ℃的水温，因为这4个水温是比较符合实际情况的，对现实也有指导意义。 2．洗涤方式和材料的选择。

酶工程的应用及发展前景.

酶工程的应用及发展前景 生物技术一班 41208220 杨青青

酶工程的应用及发展前景 杨青青 （陕西师范大学生命科学学院生物技术专业1201班） 摘要：酶工程是现代生物技术的重要组成部分，它作为一项高新技术将为各工业的发展起重要推动作用。本文概要介绍了酶工程的概念，酶工程在农产品加工、医药工业、食品工业、污染治理工业、蛋白质高值化加工等方面的应用以及探讨了在各个工业中的发展前景。 关键词：酶工程、应用、发展前景 一、酶工程的概念 酶是由生物体产生的具有催化活性的蛋白质，它能特定的促成某个化学反应而本身却不参加反应，且具有反应率高、反应条件温和、反应产物污染小、能耗低、反应容易控制等特点。这些特点比传统的化学反应具有较大的优越性。酶的应用不仅可以增强产量，提高质量，降低原材料和能源消耗，改善劳动条件，降低成本，而且可以生产出用其他方法难得到的产品，促进新产品、新技术和新工艺迅速发展。随着现代生物技术的兴起，酶工程技术应运而生，并在制药、食品工业和农产品加工显示出强大的生命力。酶工程就是利用酶催化作用，

通过适当的反应器工业化的生产人类所需的产品或是达到某一目的，它是酶学理论与化工技术相结合而形成的一种新技术。酶工程包括自然酶的开发和利用、固定化酶、固定化细胞、多酶反应器（生物反应器）、酶传感器等。 二、酶工程的应用以及发展前景 1、酶工程在农产品加工上的应用与前景 以前，人们认为氨基酸是人体吸收蛋白质的主要途径。随着研究的发现，蛋白质经消化道中的酶水解后，主要以小肽的形式被吸收，比完全游离的氨基酸更易吸收利用。这一发现启发了科研工作者采用酶工程技术用蛋白质生产生物活性肽的新思路。生物活性肽是蛋白质中20种天然氨基酸以不同排列组合方式构成的从二肽到复杂的线性或环形结构的不同肽类的总称，是源于蛋白质的多功能化合物。活性肽具有多种人体代谢和生理调节功能。主要是通过酶法降解蛋白质而制得。 目前已经从大豆蛋白、玉米蛋白、牛奶蛋白、水产蛋白的酶解物中制得一系列功能各异的生物活性肽。因为各类蛋白质存在的差异性，所以在生产活性肽方面有略微的不同。不论哪种方法，都会用到一定的酶类水解蛋白质。比如：文献报道采用中性蛋白酶、木瓜蛋白酶水解大豆蛋白，配合活性炭的吸附处理、超滤、真空浓缩和喷雾干

环境生物技术复习总结

绪论思考题 1我国的环境问题主要体现在哪些方面？ 主要体现在：水土流失严重、荒漠化加剧；包括淡水在内的许多资源短缺；草原退化严重、沙化和碱化面积逐年增加；濒危野生动物、植物物种增多，生物多样性锐减；自然灾害频繁发生，经济损失重大。2什么是环境生物技术？ 广义上讲：凡是涉及环境污染控制的一切与生物技术有关的技术，都可以称为环境生物技术。 严格上讲：环境生物技术指的是直接或间接利用生物或生物体的某些组成部分或某些机能来降低或消除污染物产生的生产工艺或能高效净化环境污染，同时又能生成有用物质的工程技术。 3环境生物技术划分为几个层次？各层次的内容是什么？是否有明显的界限？ 从技术难度和理论深度上环境生物技术一般可划分为三个层次： 第一层次：是指以基因工程为主导的近代污染物防治生物技术。包括构建降解杀虫剂、除草剂、多环芳烃类化合物等高效基因工程学，创造抗污染型转基因植物等。 这个层次是以现代生物技术知识为基础，为寻求快速有效的污染治理与预防途径提供了可能，是解决目前出现的日益严重复杂的环境问题的强有力手段。 第二层次：是以废物的生物处理为主要内容，既包括传统的生物处理技术，如废水的生物处理的活性污泥法、生物膜法等，也包括在新的理论和技术支撑下开发出的废物强化处理技术和工艺，如生物流化床等。这个层次的环境生物技术是当今废物生物处理中应用最广泛的技术，在高新技术不断渗入的过程中，其本身也在不断改进，是目前环境污染治理中的主力军。 第三层次：是指利用天然处理系统进行废物处理的技术，主要包括氧化塘、人工湿地系统和农业生态工程等。这个层次的特点是最大限度地发挥自然界环境中生物生态功能；投资运行费用少，易于操作管理，是一种省力、省费用、省能耗的技术。 在解决实际环境污染问题时，三个层次的技术可能会集于一体，很难有明显的界限。 4环境生物技术主要应用于哪些方面？ 环境生物技术的应用主要包括： 生物工程技术在环境污染防治中的应用；废水生物处理技术； 固体有机废物的生物处理技术；大气污染的生物防治技术； 污染环境的生物修复技术；环境污染预防生物技术；环境生物监测技术等。 5环境生物技术最有应用前景的是在哪个领域？ 环境生物技术最有应用前景的领域是废物高效生物处理技术、污染事故的现场补救、污染环境的现场修复技术、及可降解材料的生物合成技术。 第一章思考题 酶: 酶是动物、植物、微生物等生物体内自身合成的、参与生化反应、并传递电子、原子和化学集团的生物催化剂。 酶工程：是利用酶的催化作用进行物质转化（合成有用物质，分解有害物质）的技术，是将酶学理论与化工技术结合而形成的新技术。 酶工程包括的内容：酶的生成、酶的分离纯化、酶分子的修饰、酶固定化、酶反应动力学、酶反应器、酶的应用等。 酶的固定化： 固定化酶：是指将酶固定在载体上，在一定的空间范围内进行催化反应的酶（其被限制在一定的空间的同时，又不妨碍底物的自由扩散）。 益处：与游离酶相比固定化酶的优势在于： 热稳定性提高；可以重复使用； 不需要在反应后进行催化物质与反应物质的分离； 能够避免外源微生物对酶的污染和降解。

生物酶的相关知识点

生物酶的相关知识点

————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期： ?

细胞代谢 物质跨膜运输与酶和ＡTP 核心考点整合 考点整合一：物质跨膜运输 １．物质运输方式的比较 离子和小分子物质大分子和颗粒物质 自由 扩散 协助 扩散 主动 运输 胞吞 （内吞） 胞吐 （外排）运输 方向 高浓度→ 低浓度 高浓度→ 低浓度 低浓度→ 高浓度 细胞外 →内 细胞内 →外 运输 动力 浓度差浓度差能量 (ＡTP） 能量 （ATP) 能量 (ATP) 载体不需要需要需要不需要不需要 实例水、ＣO ２ 、O 2 、甘油、 乙醇 红细胞吸 收葡萄糖 K + 、Ca 2+ 、Ｍg ２+ ，小肠吸收 氨基酸、葡萄 糖 白细胞吞噬 病菌、变形虫 吞食食物颗 粒 胰腺细胞分 泌胰岛素2.影响物质运输速率的因素?(１)物质浓度(在一定浓度范围内) （2）O2浓度

特别提示：①乙图中，当物质浓度达到一定程度时,受运载物质载体数量的限制,细胞运输物质的速率不再增加。?②丁图中，当O２浓度为0时，细胞通过无氧呼吸供能，细胞也可吸收物质。 （3）温度 温度可影响生物膜的流动性和有关酶的活性，因而影响物质运输速率。低温会使物质跨膜运输速率下降。 【例1】（20１０·广东卷，１）下图是植物根从土壤中吸收某矿质离子示意图。据图判断,该离子跨膜进入根毛细胞的方式为 Ａ．自由扩散 B．协助扩散 C．主动运输 D.被动运输 （２010·成都质检)在水池中沉水生活的丽藻，其细胞里的K+浓度比池水里的Ｋ+浓度高1065倍。据此判断下列说法正确的是?Ａ．随着池水中富营养化程度的提高，K+进入丽藻加快

酶工程的知识点总结.pdf

酶工程的知识点总结 课题3 探讨加酶洗衣粉的洗剂效果 一、实验原理 1．加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。b5E2RGbCAP 2．碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽， 使污迹从衣物上脱落。脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质，使洗衣粉具有更好的去污能力。p1EanqFDPw 3．在本课题中，我们主要探究有关加酶洗衣粉的三个问题：一是普通洗衣粉和加酶洗衣粉 对衣物污渍的洗涤效果有什么不同；二是在什么温度下使用加酶洗衣粉效果最好，三是添加不同种类的酶的的洗衣粉，其洗剂效果有哪些区别。DXDiTa9E3d 二、实验步骤 1探究用加酶洗衣粉与普通洗衣粉洗涤的效果的不同 ①在2个编号的烧杯里，分别注入500mL清水。②取2块大小相等的白棉布，用滴管在每 块白布上分别滴上等量的墨水，分别放入烧杯里，用玻璃棒搅拌。③将2个烧杯分别放入同等温度的温水中，保温5分钟。④称取5克加酶洗衣粉和5克普通洗衣粉2份，分别放入2个烧杯中，用玻璃棒均匀搅拌。保温10分钟。⑤观察并记录2个烧杯中的洗涤效果RTCrpUDGiT 2探究用加酶洗衣粉洗涤的最佳温度条件 ①在3个编号的烧杯里，分别注入500mL清水。②取3块大小相等的白棉布，用滴管在每 块白布上分别滴上一滴食用油、鸡血、牛奶，分别放入烧杯里，用玻璃棒搅拌。③将3个烧杯分别放入50摄氏度的热水、沸水和冰块中，保温5分钟。④称取5克加酶洗衣粉3份，分别放入3个烧杯中，用玻璃棒均匀搅拌。保温10分钟。⑤观察并记录3个烧杯中的洗涤效果。3探究不同种类的加酶洗衣粉洗涤的效果5PCzVD7HxA 污染物蛋白酶洗衣粉脂肪酶洗衣粉复合酶洗衣粉普通洗衣粉 油渍 汗渍 血渍 观察并记录四种洗衣粉分别洗涤三种污染的洗涤效果。三、注意事项 1．变量的分析和控制 影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有水温、水量、水质、洗衣粉的用量，衣物的质料、大 小及浸泡时间和洗涤的时间等。在这些因素中，水温是我们要研究的对象，而其他因素应在实验中保持不变。选择什么样的水温进行实验需要实验者根据当地一年中的实际气温变化来 确定水温，通常情况下，冬季、春季、秋季和夏季可分别选取 5 ℃、15 ℃、25 ℃和35 ℃的水温，因为这4个水温是比较符合实际情况的，对现实也有指导意义。jLBHrnAILg 2．洗涤方式和材料的选择。 在洗涤方式中有机洗和手洗两种方式，应考虑其中哪一种比较科学？哪一种更有利于控 制变量？再有，洗衣机又可以分为半自动和全自动两种，相比之下，采用全自动洗衣机比较好，并且应该尽量使用同一型号小容量的洗衣机，其机械搅拌作用相同。关于洗涤材料的选择也有一些讲究。用衣物作实验材料并不理想，这是因为作为实验材料的衣物，其大小、颜 色、洁净程度等应该完全一致，而这并不容易做到；此外，人为地在衣物上增加污物，如血 渍、油渍等，也令人难以接受。因此，选用布料作为实验材料比较可行。在作对照实验时，

酶知识

β-内酰胺酶是指能催化水解6-氨基青霉烷酸(6-APA)和7-氨基头孢烷酸(7-ACA)及其 N-酰基衍生物分子中β-内酰胺环酰胺键的灭活酶。细菌产生β-内酰胺酶是细菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制。β-内酰胺酶是由多种酶组成的酶家族，通过水解或非水解方式破坏进入菌体内的β-内酰胺环，导致β-内酰胺类抗生素失活，这些酶的基因主要存在于细菌的染色体或质粒中。β-内酰胺酶分为染色体介导酶和耐药质粒介导酶二大类，以其水解对象可分为青霉素酶、头孢菌素酶、广谱酶和超广谱酶四种。 β－内酰胺酶可能添加的食品：乳制品，特别是“无抗奶”。β-内酰胺酶类物质被用作牛奶中抗生素的分解剂。 β-内酰胺类抗生素是在牛乳生产中应用最广泛的抗生素，用于治疗牛乳腺炎和其他细菌感染性疾病。按照国家规定，使用抗生素药物后一定时间内的乳汁，不得作为供人食用的原料。同时国家在《生鲜牛乳收购标准》中规定，生鲜乳中不得检出抗生素。然而就中国奶牛饲养环境而言，牛奶的绝对“无抗”较难达到，针对这种情况，市场上出现了“抗生素分解剂”，该分解剂可选择性分解牛奶中残留的β-内酰胺抗生素，其成分就是β-内酰胺酶。 β-内酰胺酶可能添加到乳与乳制品中，起到掩蔽抗生素的作用，但是由于该制剂的安全性风险未知，因此所有乳制品生产企业严禁在产品中添加此类物质。 醋酸甲羟孕酮作用同黄体酮相似，但较黄体酮强20-30倍。 黄体酮progesterone是天然存在的孕激素,又称孕酮,具有维持妊娠和正常月经的功能,用于纠正与此有关的疾患,由于容易发生代谢口服活性很低,，黄体酮口服效果很差的一般采用注射。 醋酸甲羟孕酮medroxyprogesterone acetate是黄体酮的一种衍生物,在黄体酮的17α位上引入羟基,然后将羟基乙酰化.在6位上引入甲基.是一种口服孕激素,只有低雌素活性,一般与雌激性作为避孕药。安宫黄体酮是醋酸甲羟孕酮的商品名.

酶工程

酶的定义：酶是具有生物催化功能的生物大分子，按分子中起催化作用的主要任务不同，自然界中天然存在的酶可以分为蛋白类酶和核酸类酶。 模拟酶：又称人工酶，酶模型，是在分子水平上模拟酶活性部分的形状、大小及微环境等特征以及酶的作用机理和立体化学等特征的一门科学。 生物印迹：一种通过酶与配体间的相互作用、诱导，从而改变酶的构象的方法。 酶：活细胞产生的、能在细胞内外起作用（催化）的生理活性物质。 酶工程：酶的生产性与与应用的技术过程。 酶工程的主要任务：经过预先设计，通过人工操作获得人们所需要的酶，并通过各种方法使酶的催化特性得以改进充分发挥其催化的功能。 酶的活性中心：酶分子中能同底物结合并催化反应的空间部位。 提起分离法：采用微生物细胞、植物细胞或动物细胞的生命活动而获得人们所需酶的技术过程同步合成型：酶的生物合成在细胞的生长阶段开始，而在细胞生长进入平衡期后，酶的生物合成也随之停止。 滞后合成型：酶在细胞生长一段时间或者进入平衡期以后才开始其生物合成并大量积累，又称为非生长偶联型。 固定化酶：固定在一定水不溶性载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶。 固定化细胞：固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动（生长、繁殖、新陈代谢）的细胞、也称为固定化活细胞或固定化增殖细胞。 定向进化：是模拟自然进化的过程、进行人工随机突变，并子啊特定的环境条件下进行选择，使进化朝着人们所以需方向发展的技术过程。 酶反应器：用于酶进行催化反应的容器机器附属设备。 共价调节酶：由于其他酶对其结构进行了共价修饰，使其能在非活性与活性形式之间相互转变的酶，也是调节酶的一种类型。 分子印迹：合成对其某种特异选择性结合的高分子聚合物技术。 酶原的激活：酶原在一定条件下经过适当的切割肽键，可以转变为有活性的酶。 酶活力：又称为酶活性，是指酶催化某一化学反应的能力，可在一定条件下，酶催化某一化学反应的反应速率表示。 酶反应动力学;是研究反应速度及各种因素对酶反应速度影响的学科。 诱导型操纵子：在无诱导物的情况下，其基因的表达水平很低或不表达，只有在诱导物存在的条件下，才能转录生成mRNA，进而合成酶。 阻遏型操纵子：在无阻遏的情况下，其基因正常表达，当有阻遏物存在时，转录受到阻遏二次生长现象（葡萄糖效应）：细菌在含有葡萄糖和乳糖的培养基上生长，优先利用葡萄糖，待葡萄糖耗尽后才开始利用乳糖，产生了两个对数生长期中间隔开一个生长延滞期。酶原：有些酶在细胞内合成时是无活性的，这种无活性的酶是有活性的前体，叫做酶原 别构酶：又称变构酶，是调节物酶的一种类型，这种酶分子上除有与底物结合的活性中心以外还有一个与调节物结合的别构中心。 同工酶：催化同一种化学反应而酶蛋白本身的分子结构和组成都有所不同的一组酶。 诱导酶：细胞中一般情况下不存在或含量很小，而在加入特定诱导物产生的酶。 抗体酶：它是抗体的高度选择性和酶的高效催化能力巧妙结合的产物，本质上是一类具有催化活性的免疫球蛋白，在其可变区赋予了没的属性。 酶生物合成的反馈阻遏作用：指在酶催化反应的产物或代谢途径的末端产物使酶的生物合成受 到阻遏的现象。 酶生物合成的诱导作用：加入某些物质使酶的生物合成开始或加速进行的现象，检测诱导作用。酶活力单位：在特定条件下，每1min催化1umol的底物转化为产物的酶量国际单位是IU 另一个酶活力单位：卡特（kat）。

高中生物 酶 ATP 知识点总结

酶 一概念 1.细胞代谢：细胞中每时每刻都进行着的许多化学反应，统称为细胞代谢。 2.活化能：分子从常态转变为容易发生化学反应的活跃状态所需要的能量。（加热是直接给分子提供能量） 3.酶的催化作用机理：降低化学反应的活化能。（反应前后酶的性质和数量没有变化！酶不会被分解）不需要能量。 4.意义：正是由于酶的催化作用，细胞代谢才能在温和条件下快速进行。 二.酶在细胞代谢中的作用（实验：比较过氧化氢在不同条件下的分解） 一）实验材料过程： 肝脏研磨液：过氧化氢是细胞的一个代谢废物，活细胞中存在过氧化氢酶可以分解它。 要求用新鲜的肝脏，因为新鲜的肝脏中H2O2酶的含量及活性较高； 要经过研磨，这样能使肝脏细胞破裂，酶分子充分释放出来； 二）实验结论：1／2 加热能加快H2O2分解 1／3，1／4，Fe3+和H2O2酶具有催化作用 3／4，H2O2酶比Fe3+的催化效率高得多。 ——酶具有催化作用，并且催化效率要比无机催化剂Fe3+高得多， 三）控制变量法： 1.变量：实验过程中可以变化的因素称为变量。 自变量：人为改变的变量称做自变量。 因变量：随着自变量的变化而变化的变量称做因变量。 无关变量：除自变量外，实验过程中可能还会存在一些其它变量，对实验结果造成影响，这些变量称为无关变量。 （外界因素，自身因素） 2.对照实验：除一个因素外，其余因素都保持不变的实验称为对照实验。 对照实验一般要设置对照组和实验组对照组：不经自变量处理 实验组：经过自变量处理。（施加或减除） 对照又分为三种空白对照（1.2） 相互对照（3.4） 自身对照（前后对照，质壁分离，复原）

三.酶的本质 1.关于酶本质的探索 2.酶的本质：酶是活细胞产生的具有催化作用的有机物，其中绝大多数酶是蛋白质（核糖体产生）。少数是RNA(核内产生) 蛋白酶分为 胞内酶 胞外酶（eg 消化酶） RNA 酶 3.酶化学本质的验证试验 ①证明某种酶是蛋白质： 实验组：待测酶液+双缩脲试剂→是否出现紫色反应 对照组：已知蛋白液+双缩脲试剂→出现紫色反应 ②证明某种酶是RNA ： 实验组：待测酶液+吡罗红染液→是否呈现红色 对照组：已知RNA 溶液 +吡罗红染液→出现红色 四.酶的特性 ①酶具有高效性：催化效率很高，使反应速度很快 ②酶具有专一性：每一种酶只能催化一种或一类化学反应。 ③酶的作用条件比较温和。（温度和pH 值）（发高烧，不想吃东西） 酶的最适温度：动物 35℃—40℃ 植物 40℃—50℃ 细菌和真菌 70℃ 最适PH 值：植物 4.5—6.5 动物 6.5—8.0 胃蛋白酶最适PH 值为1.5 （口服胰蛋白酶可在小肠中发挥作用，不会在胃中发挥作用，ph 不符） 注：过酸、过碱或温度过高，会使酶的空间结构遭到破坏，使酶永久失活。0℃左右，酶的活性很低，但酶的空间结构稳定，在适宜的温度下酶的活性可以升高。低温0℃—4℃下保存酶 五.影响酶促反应的因素 底物浓度 酶浓度 PH 值：过酸、过碱使酶失活 温度：高温使酶失活。低温降低酶的活性，在适宜温度下酶活性可以恢复。

蛋白质与酶工程复习资料

第一章 1、蛋白质工程的产生： 1，最早的蛋白工程是福什特（Forsht）等在1982-1985年间对酪氨酰-t-RNA合成酶的分子改造工作。2，佩里（Perry）1984年通过将溶菌酶中Ile(3)改成Cys(3)，并进一步氧化生成Cys(3)-Cys（97）二硫键，使酶热稳定性提高，显著改进了这种食品工业用酶的应用价值。3，1987年福什特通过将枯草杆菌蛋白酶分子表面的Asp（99）和Glu（156）改成Lys，而导致了活性中心His（64）质子pKa从7下降到6，使酶在pH＝6时的活力提高10倍。 二，蛋白质工程的内容 1、定义：广义上来说，蛋白质工程是通过物理、化学、生物和基因重组等技术改造蛋白质或设计合成具有特定功能的新蛋白质。 2、内容：确定蛋白质的化学组成、空间结构与生物功能之间的关系。根据需要合成具有特定氨基酸序列和空间结构的蛋白质 三，蛋白质工程的程序 蛋白质分子设计基因改造方案基因成或突变 分离纯化蛋白质结构蛋白质分子基因克隆与表达 目的基因和功能测定 改造的蛋白质分子 四，酶工程的应用范围 （1）对生物宝库中存在天然酶的开发和生产； （2）自然酶的分离纯化及鉴定技术； （3）酶的固定化技术（酶和细胞固定化）； （4）酶反应器的研制和应用； （5）与其他生物技术领域的交叉和渗透。 其中固定化酶技术是酶工程的核心。实际上有了酶的固定化技术，酶在工业生产中的利用价值才真正得以体现。 五，医用药物酶应用的问题：1）异体蛋白引起免疫反应；2）酶不纯，引起各种副作 3）酶在体内降解，时间短； 4）药物无法定向分布。 解决办法： 1) 制成微胶囊； 2) 制成衍生物；3) 制成脂质体包埋与免疫系统隔开(酶蛋白)；4) 酶上引入一定基团，起导向作用。 五，分子酶学与酶工程 1、酶——由活细胞产生的具有催化功能的蛋白质（或其它类型的生物大分子），是生物体进行代谢、维持生命活动的必需物质，没有酶就没有生命，因此研究酶的结构与功能、性质与作用机理，对于阐明生命现象的本质具有重要意义。

(完整版)酶学与酶工程总结

?Lecture 1 酶学与酶工程 ?酶的概念:酶（enzyme）是一类由活细胞产生的，具有催化活性和高度专一性的特殊蛋白质，是一类生物催化剂。 ? ?酶的分类(6类)、组成、结构特点？和作用机制？ 组成：单体酶、寡聚酶、多酶复合体 Note:一个酶蛋白可有多种催化活性，相当于多个酶(关注原核和真核生物的差别) 除水解酶和连接酶外，其他酶在反应时都需要特定的辅酶。 金属在酶催化中的作用：稳定酶构象、参与酶的催化作用（如激活底物）、电子传递体 ?酶作为催化剂的显著特点: 强大的催化能力：加快反应速度可高达1017倍; 没有副反应; 高度的专一性：各种酶都有专一性，但专一程度的严格性上有所差别; 可调节性; ?同工酶的概念:同一种属中由不同基因或（复）等位基因编码的多肽链所组成的单体、纯聚体或杂交体，其理化及生物学性质不同而能催化相同反应的酶称同工酶。 同一基因生成的不同mRNA所翻译出来的酶蛋白也列入同工酶的范畴。 酶蛋白合成后经不同类型的共价修饰（如糖基化等）而造成的多种酶分子形式，严格来说不属于同工酶而称为synzyme，但也有人称其为次生性同工酶（secondary isozyme）。 不同种属中催化相同反应的酶称为xenozyme，也不属于同工酶。

?酶的活性中心 指必需基团在空间结构上彼此靠近，组成具有特定空间结构的区域，能与底物特异结合并将底物转化为产物 必需基团(essential group):酶分子中氨基酸残基侧链的化学基团中，一些与酶活性密切相关的基团。 活性中心内的必需基团:结合基团（与底物相结合）和催化基团（催化底物转变成产物） 活性中心外的必需基团：维持酶活性中心应有的空间构象所必需； 构成酶活性中心的常见基团：His的咪唑基、Ser的－OH、Cys的－SH、Glu的γ-COOH。 ?酶的作用机制 ?酶活力的调节 ?酶的应用 食品加工方面：生物技术在食品工业中应用的代表就是酶的应用，目前已经有几十种酶成功用于食品工业。如葡萄糖、饴糖、果葡糖浆的生产、蛋白质制品加工、果蔬加工、食品保鲜以及改善食品品质与风味等。 常用的酶制剂主要有：淀粉酶、糖化酶、蛋白酶、葡萄糖异构酶、果胶酶、脂肪酶、纤维素酶葡萄糖氧化酶等。 酶在轻工业方面的应用：用酶进行原料处理（发酵原料、淀粉原料、纤维素原料、含戊聚糖的植物原料的处理、纺织原料、造纸原料的制浆、生丝的脱胶处理、羊毛的除垢），用酶生产各种产品（L-氨基酸、核苷酸、酱油或豆酱、制革），用酶增强产品的使用效果（加酶洗涤剂；加酶牙膏、牙粉和嗽口水） 酶在医学中的应用：主要的医药用酶、用酶进行疾病的诊断、用酶治疗各种疾病、用酶制造各种药物 ?酶与食品质量安全 酶制剂作为食品添加剂进入食品的潜在危害 酶催化有毒物质的产生 酶作用导致食品中营养组分的损失 潜在的产毒素性 潜在的致病性 对策：安全菌株，体外基因毒理学测试，酶制剂的安全评价，酶制剂来源安全性的评估标准 ?Lecture 2 基因工程的酶学基础 ?核酶（Ribozyme)：概念：具有生物催化功能的RNA。 看课件 ?基因工程的酶学基础 ?基因克隆表达的过程 基因克隆常用的酶，有什么应用，注意事项（补充后两者）

酶专题知识归纳与透析资料

酶 1．酶的概念的理解及实验验证设计思路 ⑴酶的概念：由活细胞产生的具有催化作用的有机物，其中绝大多数是蛋白质，少数是RNA。 ⑵酶的化学本质和生理作用及其实验验证 ①酶是有机物：绝大多数的酶是蛋白质，少数的酶是RNA 设计思路：通过对照，实验组若出现紫色，则证明待测酶溶液是蛋白质，否则不是蛋白质。同理，也可用吡咯红来鉴定酶是RNA的实验。 对照组：标准蛋白质溶液+双缩脲溶液检测→出现紫色反应； 实验组：待测酶溶液+双缩脲溶液检测→是否出现紫色。 ②酶的催化作用：酶能降低化学反应的活化能，具有催化作用。 设计思路： 对照组：反应物+清水检测→反应物不被分解； 实验组：反应物+等量的相应酶溶液检测→反应物被分解。 2．酶的特性及实验验证设计思路 ⑴酶的专一性：每一种酶只能催化一种或一类化学反应，对其他的化学反应无催化效应。 实验设计：用同一种酶催化不同反应物的或用不同酶催化同一反应物，观察相应的反应物是否被分解。设计思路一:用同一种酶催化不同的反应物。 实验组：反应物+相应酶溶液检测→反应物被分解； 对照组：另一反应物+等量相同酶溶液检测→反应物不被分解。 设计思路二：换酶不换反应物。 实验组：反应物+相应酶溶液检测→反应物被分解； 对照组：相同反应物+等量另一种酶溶液检测→反应物不被分解。 此实验过程中要注意：①选择好检测反应物的试剂。如反应物选择淀粉和蔗糖，酶溶液为淀粉酶，验证酶的专一性，检测反应物是否被分解的试剂宜选用婓林试剂，不能选用碘液，因为碘液无法检测蔗糖是否被水解。②要保证蔗糖的纯度和新鲜程度是做好实验的关键。 ⑵酶的高效性：酶的催化效率很高，是普通无机催化剂的107-13倍。 设计思路：通过比较酶与无机催化剂的催化速度，证明酶的高效性 对照组：反应物+无机催化剂检测→反应物分解速度； 实验组：反应物+等量酶溶液检测→反应物分解速度。 实验中自变量是无机催化剂和酶，因变量是底物分解速度。 ⑶酶的作用条件温和： ①适宜的温度：通过比较酶在不同的温度下的催化效率， 设计思路：反应物+ t1 +酶溶液，反应物 + t2 +酶溶液，反应物+ t3 +酶溶液，……， 反应物+ t n +酶溶液检测→反应物分解的速度或存在的量 在实验步骤中要注意：a.在酶溶液和反应物混合之前，需要把两者先分别放在各自所需温度下保温一 段时间。b.若选择淀粉和淀粉酶探究酶的最适温度，检测反应物被分解的试剂 宜选用碘液，不应该选用婓林试剂，因婓林试剂需水浴加热，而该实验中需严 格控制温度。 ②适宜的pH ： 设计思路：反应物+ pH1 +酶溶液，反应物+ pH 2 +酶溶液，反应物+ pH 3 +酶溶液，…… 反应物+ pH n +酶溶液检测→反应物分解的速度或存在的量 3.与酶有关的图表、曲线解读 ⑴表示酶的高效性的曲线

酶工程名词解释

名词解释 第一章酶学与酶工程 酶：生物体内进行新陈代谢不可缺少的受多种因素调节控制的具有催化能力的生物催化剂。 酶工程：是酶学和工程学相互渗透结合形成的一门新的技术科学。从应用目的出发研究酶，在一定的生物反应装置中利用酶的催化性质，将相应原料转化成有用的物质。 单体酶（monomeric enzyme）：由一条多肽链组成，如溶菌酶；由多条肽链组成，肽链间二硫键相连构成一整体。 寡聚酶（oligomeric enzyme）：由两个或两个以上的亚基组成的酶。 多酶复合体（multienzyme complex）：由几种酶非共价键彼此嵌合而成。 催化转换数：每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数。 酶活力(酶活性)：指酶催化一定化学反应的能力。 酶活力的大小：一定条件下所催化的某一化学反应的反应速度， 酶反应速度：单位时间内底物的减少量或产物的增加量。 酶的活力单位（U，activity unit）：酶活力的大小及酶含量的多少。 酶单位：在一定条件下，一定时间内将一定量的底物转化为产物所需要的酶量。这样酶的含量可以用每克酶制剂或每毫升酶制剂含有多少酶单位来表示（U/g或U/ml）。 Katal（Kat）单位：一个katal单位是指在最适反应条件下，1秒钟催化1moL底物转化为产物所需要的酶量。 酶的比活力（specific activity）：代表酶的纯度，比活力用每mg蛋白质所含有的酶活力单位数表示。对同一种酶比活力愈大，纯度愈高。 酶的转换数：以一定条件下每秒钟每个酶分子转换底物的分子数来表示酶的催化效率。 酶动力学：是研究酶促反应的速度以及影响此速度的各种因素的科学。 抑制剂:任何分子直接作用于酶使他的催化速度降低即称为~。 不可逆抑制作用：抑制剂与酶的必需基团以共价键结合而引起酶活性丧失，不能用透析，超滤或凝胶过滤等物理方法去除抑制剂而使酶复活。 可逆抑制作用：抑制剂与酶以非共价键结合而引起酶活性的降低或丧失，能用物理的方法除去抑制剂而使酶复活。 第二章酶的发酵生产 酶的生物合成：生物体在一定的条件下都能产生多种多样的酶。酶在生物体内产生的过程，称为~。 酶的发酵生产：经过预先设计，通过人工操作控制，利用细胞的生命活动，产生人们所需要的酶的过程，称为酶的发酵生产——是现在酶生产的主要方法。 固体发酵法（麸曲培养法）：以麸皮和米糠为主要原料，添加谷糠、豆饼，无机盐和适量水分，制成固体或半固体状态，经灭菌、冷却后，供微生物生长和产酶用。 液体表面发酵法：将已灭菌的液体培养基接种后，装入可密闭的发酵箱内的浅盘中，液体厚约1~2cm，然后向盘架间通入无菌空气，维持一定的温度进行发酵。 液体深层发酵法：采用液体培养基，置于发酵罐中，经灭菌、冷却后接入产酶细胞，在一定条件下进行发酵。 保藏：性能优良的产酶细胞选育出来后，必须尽可能保持其生长和产酶特性不变异，不死亡，不被杂菌污染等。 细胞活化：保藏细胞在使用前必须接种于新鲜的斜面培养基上，在一定的条件下进行培养，以恢复细胞的生命活动能力，这叫做~。

人教版高中生物选修三1[知识点整理及重点题型梳理]酶的研究与应用

人教版高中生物必修三 知识点梳理 重点题型（常考知识点）巩固练习 酶的研究和应用 【学习目标】 1、了解果胶酶的组成和作用。 2、理解检测酶活性的原理。（重点） 3、简述探究温度和PH对果胶酶活性的影响及其最适值的实验。（重、难点） 4、说出加酶洗衣粉的洗涤原理。 5、说明固定化细胞和固定化酶的作用和原理。（重点） 6、掌握制备固定化酵母细胞和利用其进行酒精发酵的方法。（重、难点） 【要点梳理】 要点一、果胶酶在果汁生产中的应用 【酶的研究和应用417460课题1：基础知识】 1、实验原理 （1）果胶是植物细胞壁以及胞间层中的主要成分，也是植物汁液中的主要成分。果胶可结合大量的水分，将植物细胞粘合在一起，降低植物组织的分散性。若去掉果胶，细胞壁被瓦解，就会使果泥中的植物组织块变得松散，产生更多的果汁，增加出汁率 （2）果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，使浑浊的果汁澄清 （3）果胶酶催化果胶分解需要适宜的温度和pH （4）果胶不溶于酒精，因而可用于初步鉴定果胶被分解多少 要点诠释： 果胶酶和纤维素酶的比较： 果胶酶的组成是多聚半乳糖醛酸酶，果胶分解酶和果胶酯酶，其化学本质是蛋白质，作用是催化果胶成为可溶性半乳糖醛酸；纤维素酶的组成是C1酶，C X酶和葡萄糖苷酶，其化学本质也是蛋白质，作用是催化纤维素成为纤维二糖，然后再成为葡萄糖。果胶酶和纤维素酶都是复合酶，并不特指某一种酶，而是一类酶的总称。 2、酶的活性与影响酶活性的因素 （1）酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力。酶活性的高低可以用在一定条件下，酶所催化的某一化学反应的反应速度来表示。 在科学研究与工业生产中，酶反应速度用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。 （2）影响酶活性的因素 ①温度：温度对酶活性的影响是通过影响酶（蛋白质）的稳定性和分子（离子等）运动速率的综合作用的结果。低温使酶的活性降低，高温能使酶失活。酶都有一个最适温度。 ②pH：酶分子上有许多酸性、碱性氨基酸的侧链基团，这些基团随着pH的变化可处于不同的解离状态，从而影响底物与酶的结合和进一步反应，或影响酶的空间结构，进而影响酶的活性。过酸或过碱能使酶不可逆地失活。酶促反应都有一个最适酸碱度。 ③酶的抑制剂：某些物质虽然不能引起酶变性，但能使酶分子上某些必需基团（主要是酶活性中心上的一些

酶工程期末复习

酶工程 名词解释、填空（3*10）、简答、论述（12*2或20*1） 第一章绪论 3、生物工程：发酵工程（微生物工程）、酶工程、基因工程和细胞工程。 4、运用基因工程技术和发酵工程技术可改善原有酶的性能、提高酶的产率、增加酶的稳定性，使其在后提取工艺和应用过程中更容易操作。 5、酶工程分为2类： ①化学酶工程：又称初级酶工程，是指天然酶、化学修饰酶、固定化酶以及人工模拟酶的研究和应用。 ②生物酶工程：又称高级酶工程，是酶学和以DNA重组技术为主的现代分子生物学技术相结合的产物。主要内容包括：用基因工程技术大量生产酶（克隆酶）；对酶基因进行修饰，产生遗传修饰酶（突变酶）；设计新酶基因，合成自然界不曾有过的新酶。 第二章酶学基础 4、影响酶促反应的因素： ①底物浓度：酶浓度不变，当底物浓度较低时，反应速率对底物浓度的关系呈正比关系，表现为一级反应。随着底物浓度的增加，反应速率不再按正比升高，反应表现为混合级反应。当底物浓度达到相当高时，底物浓度对反应速率影响变小几乎无关，反应达最大速率，为零及反应。 ②酶浓度：酶活力的大小可以用一定条件下所催化的某一化学反应的反应速度来表示，两者呈线性关系。 ③温度：温度对酶反应速率的影响表现在两个方面，一方面是当温度升高时，反应速率加快。另一方面由于酶是蛋白质，随着温度升高，使酶蛋白逐渐变性而失活，引起酶反应速率下降。 在较低的温度范围内，酶反应速率随温度升高而增大，但超过一定温度后，反应速率反而下降，因此只有在某一温度下，反应速率达到最大值，这个温度就称为酶反应的最适温度。 ④pH：在一定pH下，酶表现最大活力，高于或低于此pH，酶活力降低，通常把表现出酶最大活力的pH称为该酶的最适pH。酶的最适pH不是一个常数，受许多因素影响。 ⑤抑制剂：不可逆抑制剂：（1）非专一性不可逆抑制剂，（2）专一性不可逆抑制剂 可逆抑制剂：最重要和最常见的是竞争性抑制剂。 ⑥激活剂：凡是能提高酶活性的物质都称为激活剂，其中大部分是无机离子或简单的有机化合物。激活剂对酶的作用具有一定的选择性，即一种激活剂对某种酶起激活作用，而对另一种酶可能起抑制作用；有时离子之间有拮抗作用；有时金属离子间也可互相替代。 ⑦其它： 5、可逆抑制作用分为3类型： （1）竞争性抑制：抑制剂和底物竞争酶的结合部位，从而影响了底物与酶的正常结合。 （2）非竞争性抑制：底物与抑制剂同时和酶结合，两者没有竞争作用。 （3）反竞争性抑制：酶只有与底物结合后，才能与抑制剂结合。 第三章酶的生物合成和发酵生产 2、发酵条件控制剂对产酶的影响： 温度：影响微生物生长和合成酶、影响酶合成后的稳定性。 pH值：影响微生物体内各种酶活性，从而导致微生物代谢途径发生变化；影响微生物形态和细胞膜通的透性，从而影响微生物对培养基中营养成分的吸收以及代谢产物的分泌；影响培养基中某些营养物质的分解或中间产物的解离，从而影响微生物对这些营养物质的利用。 溶解氧：通气量越大、氧分压越高、气液接触时间越长、气液接触面积越大，则溶氧速率越大。此外，培养液的性质，主要是粘度、气泡以及温度等对溶氧速率有明显的影响，可通过以上方面调节溶氧速率。 3、固定化微生物细胞产酶的工艺条件及其控制应注意事项 需要对固定化微生物细胞进行预培养； 增加溶宜解氧的供给； 发酵温度的控制； 培养基组分的特殊要求：1）培养基浓度不过高；2）培养基组分不能影响固定化细胞的结构稳定性，或影响很小。