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胆红素的提取和含量测定

胆红素的提取和含量测定
胆红素的提取和含量测定

实验十八 血清胆红素测定

实验十六血清胆红素测定 (改良J-G法) 【目的】 1.熟悉血清胆红素测定的原理和方法; 2.掌握胆红素测定的正常参考范围及临床意义。 【原理】 血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应,生成偶氮胆红素;未结合胆红素需要在加速剂(咖啡因-苯甲酸钠)作用下,分子内氢键破坏后,才能与重氮试剂反应生成偶氮胆红素。醋酸钠缓冲液保持反应的pH,反应完成后加入终止试剂(叠氮钠)以破坏重氮试剂,最后加入碱性酒石酸钠溶液,使颜色不稳定的紫红色偶氮胆红素在咖啡因存在下转化为稳定的蓝色偶氮胆红素,在600nm波长比色,从标准曲线查找总胆红素和结合胆红素含量。 【器材】 试管及试管架、吸管、恒温水浴箱、分光光度计、秒表。 【试剂】 1.咖啡因试剂 称取无水水醋酸钠41.0g,苯甲酸钠38.0g,乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)0.5g,溶于约500ml去离子水中,再加入咖啡因25.0g,搅拌使溶解(加入咖啡因后不能加热溶解),用去离子水补足至1L,混匀。过滤后置棕色瓶,室温保存。 2.碱性酒石酸钠溶液 称取氢氧化钠75.0g,酒石酸钠(Na2C4H4O6·2H2O)263.0g,用去离子水溶解并补足至1L,混匀。置塑料瓶中,室温保存。 3.5g/L亚硝酸钠溶液 称取亚硝酸钠0.5g,用去离子水溶解并定容至100ml,混匀,置棕色瓶,冰箱保存,稳定期不少于2周。若发现溶液呈淡黄色,应废弃重配。 4.5g/L 对氨基苯磺酸溶液 称取对氨基苯磺酸(NH2C6H4SO3H·H2O)5.0g,溶于800ml去离子水中,加入浓盐酸15ml,用去离子水补足至1L。 5.重氮试剂 临用前取上述亚硝酸钠溶液0.5ml和对氨基苯磺酸溶液20ml,混匀即成。 6.5.g/L叠氮钠溶液 7.胆红素标准液

总结总、直接胆红素的检测方法

血清总胆红素和直接(结合)胆红素测定 目前测定血清胆红素的方法主要有重氮试剂法(包括改良J-G法、二甲亚砜法、二氯苯重氮盐法和2,5二氯苯重氮四氟硼酸盐法等)、胆红素氧化酶法、钒酸盐氧化法、高效液相色谱法、导数分光光度法、经皮胆红素测定法以及直接分光光度法等。 改良咖啡因(J-G)法: 一、实验原理 血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应,生成紫色的偶氮胆红素;在同样条件下,未结合胆红素须有加速剂破坏胆红素氢键后才能与重氮试剂反应。咖啡因、苯甲酸钠作为加速剂,醋酸钠缓冲液可维持反应的PH值同时兼有加速作用。叠氮钠破坏剩余重氮试剂,终止结合胆红素测定管的偶氮反应。最后加入碱性酒石酸钠,在碱性条件下,紫色偶氮胆红素转变为蓝色偶氮胆红素,使最大吸光度由530nm转移到598nm,此时,非胆红素的黄色色素及其它红色与棕色色素产生的吸光度可忽略不计,使测定的灵敏度和特异性增加。最后形成的绿色是由蓝色的碱性偶氮胆红素和咖啡因与对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素混合而成。 二、实验方法 (一)器材 试管,刻度吸管,分光光度计,37℃水浴箱。 (二)试剂 1.咖啡因-苯甲酸钠试剂无水醋酸钠41g,苯甲酸钠37.5g,EDTANa2 0.5g,溶于约500mL 的蒸馏水中,再加入咖啡因25g,搅拌至完全溶解(不可加热),然后加蒸馏水稀释至1000mL,混匀,过滤后放置棕色试剂瓶中,室温保存可稳定6个月。 2. 5g/L 亚硝酸钠溶液:亚硝酸钠5.0g,加蒸馏水溶解并稀释至100mL,若发现溶液呈淡黄色时,应丢弃重配。 3. 5g/L 对氨基苯磺酸溶液:对氨基苯磺酸(NH2C6H4SO3H·H20)5.0g,加于约800mL 蒸馏水中,加浓盐酸15mL,待完全溶解后,加蒸馏水至1000mL。 4. 重氮试剂临用前,取5g/L 亚硝酸钠溶液(试剂2)0.5mL 与5g/L 对氨基苯磺酸溶液(试剂3)20mL 混合。 5. 5g/L 叠氮钠溶液:叠氮钠0.5g,用蒸馏水溶解并稀释至100mL。 6. 碱性酒石酸钠溶液:氢氧化钠75g,酒石酸钠(Na2C4H4O6·2H2O)263g,加蒸馏水溶解并稀释至1000mL,混匀,置塑料瓶中,室温保存可稳定6个月。 7.胆红素标准液可购买,也可按以下方法配制: (1)稀释血清:收集不溶血、无黄疽、清晰的血清过滤作为混合血清稀释剂。取过滤血清1.0ml,加生理盐水24ml,混匀。在分光光度计中,以比色杯光径1cm,波长414nm,用生理盐水调零,读取的吸光度应小于0.100,波长460nm 处读取的吸光度应小于0.040。(2)171umol/L胆红素标准液:称取符合标准的胆红素(MW:584.68)10mg,加入二甲基亚砜1ml,玻棒搅匀,加入0.05mol/LNa2CO3溶液2ml,使胆红素完全溶解。移入100ml 容量瓶,用稀释血清洗涤数次并移入容量瓶中,缓慢加入0.1mol/LHCl溶液2ml(边加边缓慢摇动,切勿产生气泡),最后用稀释血清稀释至100ml。避光,4℃保存,三天内有效,最好当天绘制标准曲线。 (三)步骤 1. 取试管3支,标明总胆红素管、结合胆红素管和空白管,然后按下表操作: 试剂(ml) 总胆红素管结合胆红素管空白管 血清0.2 0.2 0.2

直接胆红素测定试剂盒(重氮盐法)产品技术要求zhongshengbeikong

直接胆红素测定试剂盒(重氮盐法) 适用范围:本产品用于体外定量测定人血清中直接胆红素的浓度。 1.1规格 液体双剂型 试剂1(R1):65mL×2,试剂2(R2):8mL×4,试剂2a(R2a):5mL×1,校准品:2mL×1 液体型 试剂1(R1):100mL×2,试剂2(R2):5mL×1,校准品:2mL×1 1.2规格划分说明 根据净含量和复溶体积划分规格。 1.3主要组成成分 1.3.1 液体双剂型D.Bili试剂盒 由试剂1(R1)液体、试剂2(R2)液体、试剂2a(R2a)液体和校准品冻干粉组成。 1.3.1.1 试剂1(R1)液体 EDTA 1.0mmol/L 1.3.1.2 试剂2(R2)液体 对氨基苯磺酸 2.6mmol/L 盐酸 17mmol/L 1.3.1.3 试剂2a(R2a)液体 亚硝酸钠 25mmol/L 1.3.1.4 校准品:磷酸盐缓冲液基质(1个浓度)

二牛磺酸胆红素 校准品定值范围 20.0μmol/L~30.0μmol/L(每批定值) 1.3.2 液体型D.Bili试剂盒 由试剂1(R1)液体、试剂2(R2)液体和校准品冻干粉组成。 1.3. 2.1 试剂1(R1)液体 EDTA 1.0mmol/L 对氨基苯磺酸 2.6mmol/L 盐酸 17mmol/L 1.3. 2.2 试剂2(R2)液体 亚硝酸钠 25mmol/L 1.3. 2.3 校准品:磷酸盐缓冲液基质(1个浓度) 二牛磺酸胆红素 校准品定值范围 20.0μmol/L~30.0μmol/L(每批定值) 2.1 外观 液体双剂型D.Bili试剂盒中各组件的外观应满足: a)试剂1(R1)应为无色透明溶液,无杂质、无絮状物,外包装完整无破损; b)试剂2(R2)应为无色透明溶液,无杂质、无絮状物,外包装完整无破损; c)试剂2a(R2a)应为无色透明溶液,无杂质、无絮状物,外包装完整无破损; d)校准品为浅黄色冻干粉,复溶后应为黄色透明溶液,无混浊、无未溶解物,外包装完整无破损。 液体型D.Bili试剂盒中各组件的外观应满足: a)试剂1(R1)应为无色透明溶液,无杂质、无絮状物,外包装完整无破损;

血清直接胆红素DBIL测定-检验科生化室作业书

血清直接胆红素DBIL测定 1.实验原理 直接胆红素与2,4-二氯苯胺重氮盐形成重氮化合物,在酸性条件下呈红色。 2.标本: 2.1病人准备:无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。 2.2类型:血清、肝素或EDTA血浆,应避光保存。 3.标本存放:15~25℃保存可稳定2天;2~8℃保存可稳定7天;-20℃保存可稳定3个月,如冰冻保存,不可反复冻融!。 4.标本运输:常温条件下避光保存运输。 5.标本拒收标准:标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。 6.实验材料 6.1试剂:申能总胆红素试剂盒:14108271701 试剂+试剂2 6.1.1试剂组成 试剂1:16×64ml EDTA-Na20.07mmol/L 氯化钠6.6g/L 氨基磺酸70mmol/L 试剂2:6×16ml 2,4-二氯苯胺重氮盐0.09mmol/L

盐酸130mmol/L EDTA-Na20.02mmol/L 6.1.2试剂准备:试剂为即用式。 6.1.3试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。 6.1.4变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。 6.1.5注意事项:此试剂为体外诊断用。警告!腐蚀剂!不要入口。避免和眼睛,皮肤或衣服接触。如果接触到,立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服,立即寻找医疗保护。 6.2校准品:使用DiaSys公司提供的TruCalU校准品对自动分析仪进行校准,参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 6.3质控品:参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 7.仪器:奥林巴斯AU1000生化分析仪 8.操作步骤 8.1项目基本参数:参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件 8.2仪器操作步骤:参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件 检验结果的判断与分析 10.质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控

总胆红素测定试剂盒(重氮盐法)产品技术要求艾威德

总胆红素测定试剂盒(重氮盐法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中总胆红素的含量。 1.1 包装规格 a) 试剂1:1×20mL 试剂2:1×5mL b) 试剂1:2×40mL 试剂2:1×20mL c) 试剂1:4×60mL 试剂2:2×30mL d) 试剂1:2×80mL 试剂2:2×20mL 1.2 主要组成成分 1.2.1试剂1主要组分 三羟甲基氨基甲烷缓冲液100 mmol/L 氨基磺酸30 mmol/L 二甲基亚砜10 mmol/L 表面活性剂及稳定剂适量 1.2.2试剂2主要组分 三羟甲基氨基甲烷缓冲液100 mmol/L 亚硝酸钠60 mmol/L 表面活性剂及稳定剂适量 2.1 外观 试剂1应为无色透明液体,试剂2应为无色或淡黄色透明液体。 2.2 试剂装量 应不低于试剂瓶标示装量。

2.3 试剂空白吸光度 在546nm处测定试剂空白吸光度,应≤0.5。 2.4 分析灵敏度 测定TBIL含量为100 μmol/L样本时,其△A应≥0.01。 2.5 线性范围 2.5.1在(0,500)μmol/L范围内,线性回归的确定系数应不低于0.990; 2.5.2测试浓度在(0,50] μmol/L范围内,线性绝对偏差应不超过±5 μmol/L; 测试浓度在(50,500)μmol/L范围内,线性相对偏差应不超过±10%。 2.6 测量精密度 2.6.1重复性:用两个水平质控血清重复测试其变异系数(CV)应不超过5%。 2.6.2批间差:抽取3个不同批号试剂,对同一份样本进行重复测定,相对极差≤10%。 2.7 准确度 在样本中加入一定量的纯品,计算回收率,应在85%~115% 范围内。 2.8 稳定性 取在2℃~8℃条件下贮存达到12个月的试剂进行检测,应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

胆红素

[3] 沈学耕. 胆红素待测标本受实验室光线照射影响测定结果的探讨[J]检验医学与临床, 2012, (03) .

结果受日光灯光照射组的总胆红素值明显下降,两组测定结果对比差异有统计学意义(P<0.01)。结论待测标本较多时,为减少胆红素的自发性氧化和光氧化而使胆红素测定结果偏低,标本采集后应立即测定胆红素,待测标本在上机测定前应置2~8℃冰箱中避光保存,防止标本中胆红素的氧化而影响测定结果。 【英文摘要】Objective Due to t he spontaneous o xidation and photo -oxidation effect of bilirubin,placing th e samples in the l ab too long,to inve stigate the influenc e of sun and light exposure on the detection results of total bilirubin.Meth ods A group of sp ecimens were exp osed to sunlight a nd lamplight in the laboratory and an other group of spe cimens were store d avoiding light.2 h later,the two gro ups of samples w ere detected plas ma total bilirubin.T he average deviati on of the detectio n results in the tw

总胆红素测定试剂盒(重氮法)

总胆红素测定试剂盒(重氮法) 一、胆红素的代谢 正常人血中胆红素来源有以下几种 (1)大部分来自于衰老RBC破坏后的Hb衍化而成 (2)小部分来自于非Hb的血红素蛋白质的血红素辅基分解,即分路胆红素 (3)极少部分来自于骨髓无效造血所产生的胆红素 胆红素与ALB结合后为肝细胞摄取并转变为水溶性的结合 胆红素,排至胆汁中,结合胆红素在肠道中被细菌作用还原成尿胆原,在肠道被吸收入门静脉,大部分肠肝循环,另一部分入体循环,经肾排泄入尿。 因此,在胆红素代谢的上述途径中有任一环节受阻,均可导致结合或非结合胆红素升高而产生黄疸。 二、胆红素测定的意义 测定胆红素有助于鉴别溶血性黄疸,肝细胞性黄疸及梗阻性黄疸 联合其它检测项目还可鉴别肝内淤胆和肝外梗阻性黄疸 溶血性黄疸肝细胞性黄疸梗阻性黄疸 血浆总胆红素(mg/dl)<5 1-70 不完全梗阻10~15,完全梗阻20~30

未结合胆红素高度增加增加增加 结合胆红素正常增加高度增加 尿胆素定性阴性阳性强阳性 尿中胆素原增多不定或升高减少或消失 粪中胆素原增多减少减少或消失 三、测定原理 血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应产生偶氮胆红素,所以称为直胆,又称1min胆红素测定,非结合胆红素测定时要以咖啡因、苯甲酸钠为加速剂破坏胆红素氢键再与重氮试剂反应,抗坏血酸破坏剩余重氮试剂,加入碱性酒石酸钠使最大吸光度由530nm转到598nm,非胆红素的黄色色素及其它红色与棕色色素产生的吸光度降至可忽略不计,使灵敏度和特异性升高,最后形成的绿色是由兰色的碱性偶氮胆红素和咖啡因与对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素混合而成。 试剂:(1)咖啡因(2)碱性酒石酸钠液(3)亚硝酸钠液 (4)对氨基苯磺酸溶液(5)重氮试剂(将3、4混合) (6)5g/L NaN3 (7)胆红素标准液 操作: 总胆管结合管对照管

尿胆红素定性测定

尿胆红素定性测定(干法学法) 1. 实验原理 采用偶氮反应法。在强酸介质中,结合胆红素与二氯苯胺重氮盐起偶联反应,生成红色复合物。试剂膜块发生由黄色到红色的颜色变化,颜色的深浅与胆红素的含量成正比。 2. 标本采集 2.1 标本采集前病人准备:以清晨第一次尿为宜,急诊患者可随时留取。 2.2 标本种类:新鲜尿液 2.3 标本要求:采集患者尿液标本时,盛尿液的容器必须清洁干燥,要求留取中段尿。 3. 标本储存:排出到检测应在2小时内完成。如不能及时送检或分析,应置4℃下冷藏保存,但冷藏时间不得超过6小时。 4. 标本运输:室温运输。 5. 标本拒收标准:细菌,经血,白带,精液,粪便污染标本不能作测定。 6. 试剂 6.1 试剂名称MT-R11尿11项分析试纸 6.2 试剂厂家长春瑞克医疗科技有限公司 6.3 包装规格:100Test/kit 6.4 试剂盒组成:试纸条:100条 6.5 试剂储存条件及有效期:试剂盒贮存于2-30℃条件下,可使用至试剂盒所标示有效期。 7. 仪器设备 7.1 仪器名称:迈特尿液分析仪 7.2 仪器厂家:长春迈特医疗仪器有限公司 7.3 仪器型号:MT-300 7.4 仪器校准程序:在主屏幕下按下“MENU”键,选择“质控测试”,按“ENTER”键确认,进入质控测试界面。可选择“校准条测试”和“质控液测试”两个选项。 7.4.1 选择“校准条测试”,将校准条放在仪器工作台面检条区内,按下“ENTER”键,推进器将纸条推至测试区,屏幕显示“系统正在测试校准条…”测试结束后,如果通过校准,测量结果为“Calibration OK”。校准通过,尿

直接胆红素(DBIL)测定试剂盒(化学氧化法)产品技术要求百奥泰康

直接胆红素(DBIL)测定试剂盒(化学氧化法) 适用范围:该试剂盒用于体外定量测定人血清中直接胆红素的浓度。 1.1 产品规格 1.2 组成成分 该试剂盒由试剂1(R1)、试剂2(R2)和校准品(选配)组成。

1.2.1试剂组成 试剂1: 酒石酸缓冲液≥100.0mmol/L 表面活性剂≥3.0mL/L 间胆抑制剂≥4.0mmol/L 试剂2: 磷酸盐缓冲液(pH7.00)≥10.0mmol/L 化学氧化剂≥4.0mmol/L 1.2.2 校准品组成 牛血清 直接胆红素目标浓度:100μmol/L 该校准品为牛血清基质冻干品 2.1 外观 a) R1应为无色溶液,无混浊,无未溶解物。 b) R2应为无色溶液,无混浊,无未溶解物。 c) 校准品应为白色至淡黄色固体。 2.2 净含量 液体组分不少于标示值。 2.3 试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度 应不大于0.050。 2.4 分析灵敏度 DBIL试剂盒测定浓度100.0μmol/L的被测物时,吸光度差值(ΔA)应不小于0.050。

2.5 准确度 回收试验:测定回收率,应在85%-115%之间。 2.6 精密度 2.6.1重复性 变异系数应不大于5%。 2.6.2批间差 批间相对极差(R)应不大于10%。 2.6.3校准品批内瓶间差 测试校准品,所得结果的批内瓶间差应不大于5%。 2.7 线性 在(0,427.0]μmol/L范围内,DBIL试剂盒的线性相关系数r应不低于0.9900;在(0,50.0]范围内绝对偏差应不超过7.5μmol/L,在(50.0,427.0]范围内相对偏差应不超过±15%。 2.8校准品溯源性 依据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供直接胆红素校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。校准品溯源至国际参考物质SRM909b。 2.9稳定性 2.9.1 校准品复溶稳定性 校准品复溶后,在2℃~8℃密封保存24小时,测试试剂盒准确度,应符合2.5的要求。 2.9.2 试剂盒稳定性

怎样看尿液常规报告单

怎样看尿液常规报告单 解放军总医院检验科副主任技师马骏龙主任医师丛玉隆 尿液常规分析是我们经常做的一项检查。大多数医院都用尿液分析仪检测,检测项目目前有10项、11项或12项,并且报告的格式不统一,既有“+”(阳性)、“-”(阴性),又有数字,检验项目的单位也不一样。到底该怎么阅读尿检报告呢? 尿常规项目大致可分为四大类:肾病类、糖尿病类、泌尿感染类以及其他疾病类。 肾病类项目 酸碱度(pH)、比重(SG)、隐血或红细胞(BLD、ERY)、蛋白质(PRO)和颜色(COL)。正常参考值分别为:4.6~8.0、1.005~1.030,阳性、阴性,淡黄色至深黄色。这些指标的改变可能提示有肾功能损害。 糖尿病类项目 酸碱度(pH)、蛋白、比重、糖(GLU)和酮体(KET)。这些指标的检测有助于诊断相关并发症和机体一些器官是否受到损害,如是否出现酮血症等。正常情况下,尿糖和酮体为阴性。 泌尿感染类项目 白细胞(WBC)、隐血或红细胞、亚硝酸盐(NIT)、颜色和浊度(TUR)。当泌尿系统受到细菌感染时,尿中往往出现白细胞和红细胞,尿液颜色或浊度也发生改变,亚硝酸盐有时也会为阳性。化学检测尿白细胞和隐血或红细胞只起过筛作用,临床诊断以镜检结果为准。其他疾病类项目 主要是酸碱度、比重、胆红素(BIL)、尿胆原(URO)、颜色及其他指标。胆红素和尿胆原两项指标反映肝脏代谢血红素的能力和数量。正常情况下,尿胆红素为阴性,尿胆原为弱阳性。以上指标增高时,往往提示黄疸,尿液颜色呈黄绿色。 尿液常规分析化验单上一些项目后面出现“+”或“+++”……或数字,表明程度不同,这在医学上叫阳性结果;相反,“-”就称阴性结果。在阅读报告时,要客观地分析报告,因为有许多干扰因素影响到检测结果的准确性,如饮食因素、尿液中的一些干扰物等。当尿常规检查出现异常时,请不要太紧张和太忧虑;同样,当出现和临床表现不一致的检验结果时,也不要盲目乐观。一定要配合临床医生做进一步的检查和分析,以免延误疾病的诊断。 怎样看懂尿常规检查报告单? 尿液常规检查是健康体检的重要项目,它不仅可反映泌尿系统疾病,对糖尿病、黄疸肝炎、胆道梗阻等多种疾病的筛选也有重要意义。 1.尿蛋白(PR0) 正常尿常规检查一般无蛋白,或仅有微量。尿蛋白增多并持续出现多见于肾脏疾病。但发热、剧烈运动、妊娠期也会偶然出现尿蛋白。故尿中有蛋白时需追踪观察明确原因。 2.尿糖(GLU) 尿糖阳性要结合临床分析,可能是糖尿病,也可能是因肾糖阈降低所致的肾性糖尿,应结合

血清直接胆红素测定

血清直接胆红素测定 1. 实验原理 在PH3左右、有表面活性剂和间接反应胆红素抑制剂的条件下,样品中的直接胆红素容易被矾酸盐氧化成胆绿素,而间接胆红素不能。在450nm(胆红素吸收峰)处监测反应。矾酸盐氧化前后吸光度的下降与样品中胆红素的浓度成正比。由此可计算出样品中直接胆红素浓度。 2. 标本: 2.1 病人准备:无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。 2.2 类型:血清、肝素或EDTA血浆,应避光保存。 3. 标本存放:15~25℃保存可稳定2天;2~8℃保存可稳定7天;-20℃保存可稳定3个月,如冰冻保存,不可反复冻融!。 4. 标本运输:常温条件下避光保存运输。 5. 标本拒收标准:标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。 6. 实验材料 6.1 试剂:上海欧泰克直接胆红素试剂盒 6.1.1 试剂组成 酒石酸盐缓冲液 100

mmol/L 表面活化剂I 适量 磷酸盐缓冲液 10 mmol/L 矾酸钠盐 4 mmol/L 6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。 6.1.5 注意事项:此试剂为体外诊断用。警告!腐蚀剂!不要入口。避免和眼睛,皮肤或衣服接触。如果接触到,立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服,立即寻找医疗保护。 6.2 校准品:使用罗氏复合校准品对自动分析仪进行校准,参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 6.3 质控品:参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 7. 仪器:日立7060生化分析仪 8. 操作步骤 8.1 项目基本参数:参见生化检验日立7060生化分析仪项目

高胆红素血症

高胆红素血症 胆红素是临床上判定黄疸的重要依据,亦是肝功能的重要指标。正常血清总胆红素浓度为1.7~17.1μmol/L,其中一分钟胆红素低于3.4μmol/L。当总胆红素在34μmol/L时,临床上即可发现黄疸;如血清总胆红素超过正常范围而肉眼看不出黄疸,则称为隐性黄疸,黄疸最常见于肝胆疾病,但其他系统疾病也可出现。 目录简介高胆红素血症(黄疸)的分类各种黄疸发生机理及临床特征先天性非溶血性黄疸高胆红素血症(黄疸)的鉴别诊断婴儿高胆红素血症分流性高胆红素血症综合征展开 简介正常胆红素代谢过程,如下: 一、胆红素来源正常红细胞的平均寿命为120天,衰老红细胞所释放的血红蛋白为胆红素的主要来源,占80%~85%,约10%~15%胆红素来自骨髓中未成熟红细胞的血红蛋白,另1%~5%来自肝的游离血红素及含血红素的蛋白质。血红素经微粒体血红素加氧酶催化变为胆绿素,胆绿素由胆绿素还原酶还原为胆红素。 二、胆红素的运输上述胆红素是游离胆红素,因未经肝细胞摄取,未与葡萄糖醛酸结合,故称为非结合胆红素。游离胆红素于血循环中附着于白蛋白上,形成胆红素-白蛋白复合物,运载到肝。 三、胆红素的摄取在肝窦内,胆红素被肝细胞微突所摄取,并将白蛋白与胆红素分离。胆红素进入肝细胞后,由胞浆载体蛋白Y和Z所携带,并转运到光面内质网内的微粒体部分。 四、胆红素的结合游离胆红素在微粒体内经葡萄糖醛酸转移

酶催化,与葡萄糖醛酸基相结合,形成结合胆红素。主要为胆红素葡萄糖醛酸酯,约占结合胆红素总量的75%,其余部分与葡萄糖、木糖、双糖和甘氨酸结合。 五、胆红素的排泄结合胆红素形成后从肝细胞排出的机制,至今仍不甚清楚,可能经高尔基器运输到毛细胆管微突、细胆管、胆管而排入肠道,但无疑是主动转运、限速和耗能过程,其间并有胆汁酸盐、钠离子的参与。结合胆红素进入肠腔后,由肠道细菌脱氢的作用还原为尿胆原,大部分(每日总量约68~473μmol)随粪便排出,称为粪胆原;小部分(10%~20%)经回肠下段或结肠重吸收,通过门静脉血回到肝,转变为胆红素,或未经转变再随胆汁排入肠内,这一过程称为胆红素的“肠肝循环”,从肠道重吸收的尿胆原,有很少部分(每日不超过6.8μmol)进入体循环,经肾排出。 高胆红素血症(黄疸)的分类 一、病因发病学分类 (1)溶血性黄疸;(2)肝细胞性黄疸;(3)胆汁郁积性黄疸;(4)先天性非溶血性黄疸。 二、按胆红素的性质分类 (一)以非结合胆红素增高为主的黄疸 1. 胆红素生成过多 2. 胆红素摄取障碍3. 胆红素结合障碍 (二)以结合胆红素增高为主的黄疸可由于胆红素在肝细胞内转运、排泄障碍或同时有胆红素摄取、结合和排泄障碍引起。 无论哪种分类方法,黄疸的发生归根到底都源于胆红素的某一个或几个代谢环节障碍。

直接胆红素测定试剂盒 (胆红素氧化酶法)产品技术要求豪迈

直接胆红素测定试剂盒(胆红素氧化酶法) 适用范围:本试剂用于体外定量测定人血清中直接胆红素[DBIL]的浓度。 1.1包装规格 1.2主要组成成分 本试剂由试剂1(R1)和试剂2(R2)组成 试剂1(R1): 邻苯二甲酸盐缓冲液 120mmol/L NaF(氟化钠) 2.5mmol/L NAC (N-乙酰半胱氨酸) 2.5mmol/L 对甲苯磺酸钠 50mmol/L EDTA 2g/L 叠氮钠 0.5g/L 试剂2(R2): Tris缓冲液 100mmol/L 胆红素氧化酶 3KU/L 酶稳定剂k-80 4g/L

叠氮钠0.5g/L 2.1 外观 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏;外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰;R1试剂应为无色澄清液体,R2试剂应为无色或淡黄色澄清液体。液体试剂不得有沉淀和絮状物。 2.2 净含量 用通用量具测量,液体试剂的净含量应不少于标示值。 2.3 试剂空白 在450nm处测定试剂空白吸光度,应≤0.050A。 2.4 分析灵敏度 测试50umol/L的被测物时,吸光度变化(ΔA)应不低于0.005A。 2.5 准确性 在样品中加入一定体积的纯品,计算回收率,应介于90%~110%之间。 2.6 重复性 用两个水平的样本检测,检测结果批内变异系数(CV)应不超过5%。 2.7 线性 2.7.1在[0.2,342]umol/L范围内,线性相关系数r应不低于0.990; 2.7.2 在[0.2,34.2)umol/L范围内绝对偏差不超过± 3.4umol/L; [34.2,342]umol/L范围内相对偏差不超过±10%。 2.8 批间差 对同一份样品进行重复测定,相对极差≤10%。 2.9 稳定性 该产品在2℃~8℃条件下贮存有效期为12个月,取到效期后的产品进行检测,应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7的要求。

尿液试带法各项测试注意事项大全

尿液试带法各项测试注意事项 尿液分析是尿液和分析二词的组合,中华检验医学大辞典对尿液分析明确定义:“用目测、理学、化学(应强调定性、定量)、显微镜及其化仪器(各种尿分析仪、渗透压计等),对液标本进行分析”。 尿液分析是诊断泌尿系统疾病的重要指标之一,通过尿液物理学和化学检查,可观察尿液物理性状和化学成分的变化,在尿液沉渣镜检中能够看到的有形成分为红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、巨噬细胞、肿瘤细胞、细菌、精子以及由尿液中沉析出来的各种结晶(包括药物结晶)等。这些检查资料,对肾和尿路疾患的诊断和鉴别诊断、疾病严重程度和预后的判断,都有极重要的意义。尿液分析的准确程度直接影响到临床诊断,提高尿液分析检查的质量保证是关系到临床检查的重要环节。质量控制的目的是确保对病人的优质服务,为临床医生提供客观、可靠信息去诊疗病人。随着基础医学的发展,各种先进检测技术,特别是电子技术及计算机的应用,不断提高尿液检查的自动化水平。各种尿液分析仪的开发经验,尿沉渣全自动化分析仪成相继问世,较好地解决了尿沉渣镜检自动化。今天重点讲讲尿液试带法各项测试的注意事项。 一、PH 原理:干化学法尿PH检查的原理是采用酸碱指示剂法,其测试膜块区含有甲基红(PH4.6—6.2)和溴麝香草酚蓝(PH6.0—7.6),两种酸碱指示剂适量配合可反映尿PH4.5—9.0的变异范围。 注意事项: 1 标本必须新鲜,放置过久细菌分解尿液成分可导致PH改变,如大肠杆菌等,分解尿素产生氨,可使尿液呈碱性。(少数情况下,细菌也分解尿液产生酸性物质,使尿液PH偏低)。 2 当肾脏分泌的尿液含有过多的碳酸氢盐和碳酸缓冲对时,如果尿液放置时间过久,尿液中的二氧化碳会自然扩散到空气中,使尿PH增高。 3 尿液PH主要反映肾脏在维持血浆和细胞外液正常氢离子浓度方面的能力,而干化学法测定是一个半定量的实验结果。因此在临床观察结果时,不要单从尿PH测定值分析,要结合临床其他资料和实验数据,综合分析才能得出正确的判断。 二、比重:(SG)

血清直接胆红素测定实验设计

血清直接胆红素的测定 病人准备:要求病人处于安静状态,生活状态处于日常状态,避免过度空腹、饮食、饮酒吸烟 标本采集,处理,保存和要求:收集无溶血,无黄疸,无脂浊的新鲜血清或肝素血清,避光保存。混合,必要时可用过滤器过滤。 实验原理:血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应,生成偶氮胆红素。醋酸钠缓冲液保持反应的pH,反应完全后加入终止试剂(叠氮钠)以破坏重氮试剂,最后加入碱性酒石酸钠溶液,使颜色不稳定的紫红色偶氮胆红素在咖啡因存在下转化为稳定的黄色偶氮胆红素,在600nm波长比色,从标准曲线找直接胆红素含量。 实验仪器设备及试剂:咖啡因试剂碱性酒石酸钠溶液5g/L亚硝酸钠溶液5g/L 对氨基苯磺酸溶液5g/L叠氮钠溶液胆红素标准溶液加样枪分光光度计(或半自动生化仪) 实验操作: 一。取两支试管,按表1操作 表1 改良J—G发测定血清直接胆红素操作表 加入物 (ml) 直接胆红素空白管 血清0.2 0.2 咖啡因苯甲酸钠试剂— 1.6 对甲基苯磺酸—0.4 重氮试剂0.4 — 混匀,准确1分钟 重氮钠0.05 — 咖啡因甲苯酸钠试剂 1.55 — 室温10分钟 碱性酒石酸钠 1.2 1.2 混匀,600nm波长比色,以空白管调0,读取各管吸光度。从标准曲线上查出直接胆红素浓度。 二.标准曲线的制作 表2 胆红素标准曲线的制作表 加入物 (ml) 对照管 1 2 3 4 5 胆红素标准贮存液— 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 稀释血清 2.0 1.6 1.2 0.8 0.4 — 相当于胆红素浓度 0 34.2 68.4 103 137 171 (u mol/L) 混匀(不可产生气泡),按直接胆红素的测定方法操作。每一浓度做2个平行管,用对照管调零,读取各管吸光度,以各管吸光度的均值为纵坐标,以相应胆红素浓度为横坐标,绘制标准曲线。

总胆红素偏高的防治汇萃

总胆红素偏高的防治 总胆红素 总胆红素total bilirubin,英文缩写TBIL或STB。参考值:3.42~20μmol/L。总胆红素是直接胆红素和间接胆红素二者的总和。总胆红素升高就是人们常说的黄疸。 总胆红素主要用来诊断是否有肝脏疾病或胆道是否发生异常,总胆红素正常值在1.7-20.5μmol/L之间,17.1-34.2μmol/L可视为隐性黄疸;34.2-170μmol/L之间为轻度黄疸;170-340μmol/L为中度黄疸;大于340μmol/L则为重度黄疸。 检查要求 空腹[1]12小时取静脉血。 详细解释 胆红素 胆红素 血清中的[2-4]胆红素大部分来源于衰老红细胞被破坏后产生出来的血红蛋白衍化而成,在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做直接胆红素,未在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做间接胆红素,二者的和就是总胆红素。 临床意义:临床上主要用于诊断肝脏疾病和胆道梗阻,当血清总胆红素有很大增高时,人的皮肤、眼睛巩膜、尿液和血清呈现黄色,故称黄疸。当肝脏发生炎症、坏死、中毒等损害时均可以引起黄疸,胆道疾病及溶血性疾病也可以引起黄疸。以直接胆红素升高为主常见于原发性胆汁型肝硬化、胆道梗阻等。以间接胆红素升高为主常见于溶血性疾病、新生儿黄疸或者输血错误等。肝炎与肝硬化病人的直接胆红素与间接胆红素都可以升高。总胆红素增高,见于中毒性或病毒性肝炎、溶血性黄疸、恶性贫血、阵发性血红蛋白尿症。红细胞增多症、新生儿黄疸、内出血、输血后溶血性黄疸、急性黄色肝萎缩。先天性胆红素代谢异常(Crigler-Najjar综合征、Gilbert综合征、Dubin-Johnson综合征)、果糖不耐受等,以及摄入水杨酸类、红霉素、利福平、孕激素、安乃近等药物。 临床意义 胆红素增高见于: (1)肝脏疾患:急性黄疸型肝炎、急性黄色肝坏死、慢性活动性肝炎、肝硬化等。 总胆红素测定试剂盒 (2)肝外的疾病:溶血型黄疸、血型不合的输血反应、新生儿黄疸、胆石症、肝癌、胰头癌等。 总胆红素偏低的原因:

胆红素(BIL)、尿胆原(UBG)检测的临床意义

胆红素(BIL)、尿胆原(UBG)检测的临床意义 1.参考值 胆红素定性:阴性 尿胆原定性:阴性或弱阳性(1:20稀释后阴性) 定量: 男:0.30~3.55 μmol/L(微摩尔/升) 女:0.00~2.64 μmol/L(微摩尔/升) 儿童:0.13~2.30 μmol/L(微摩尔/升) 2.临床意义:利用尿胆红素、尿胆原和血胆红素等检查可协助鉴别黄疸病因: (1)溶血性黄疸:当体内有大量红细胞破坏时未结合胆红素增加,使血中含量增高,由于未结合胆红素不能通过肾,故尿胆红素试验阴性。未结合红素增加,导致肝细胞代偿性产生更多的结合胆红素。当将其排入肠道后转变为粪胆原的量亦增多,因而肠道吸收粪胆原及由尿中排出尿胆原的量均亦相应增加,尿胆原试验呈明显阳性。溶血性黄疸可见于各种溶血性疾病、大面积烧伤等。 (2)肝细胞性黄疸:肝细胞损伤时其对胆红素的摄取、结合、排除功能均可能受损。由于肝细胞摄取血浆中未结合胆红素能力下降使其在血中的浓度升高,所产生的结合胆红素又可能由于肝细胞肿胀、毛细胆管受压,而在肿胀与坏死的肝细胞间弥散经血窦进入血循环,导致血中结合胆红素亦升高,因其可溶于水并经肾排出,使尿胆红素试验呈阳性。此外经肠道吸收的粪胆原也因肝细胞受损不能将其转变为胆红素,而以尿胆原形成由尿中排出,故肝细胞黄疸时尿胆红素与尿胆原均呈明显阳性。在急性病毒性肝炎时,尿胆红素阳性可早于临床黄疸。其它原因引起的肝细胞黄疸,如药物、毒物引起的中毒性肝炎也可出现类似的结果。 (3)阻塞性黄疸:胆汁淤积使肝胆管内压增高,导致毛细胆管破裂,结合胆红素不能排入肠道而逆流入血由尿中排出,故尿胆素检查阳性。由于胆汁排入肠道受阻,故尿胆原亦减少。可见于各种原因引起的肝内、外完全或不完全梗阻,如胆石症、胆管癌、胰头癌、原发性胆汁性肝硬化等,三种类型黄疸鉴别见下表。 正常人及不同类型黄疸的实验室鉴别

总胆红素(TBIL)测定试剂盒(化学氧化法)产品技术要求百奥泰康

总胆红素(TBIL)测定试剂盒(化学氧化法) 适用范围:该试剂盒用于体外定量测定人血清中总胆红素的浓度。 1.1 产品规格 1.2 组成成分

该试剂盒由试剂1(R1)、试剂2(R2)和校准品(选配)组成。 1.2.1试剂组成 试剂1: 磷酸盐缓冲液≥100.0mmol/L 表面活性剂≥1.0mL/L 试剂2: 磷酸盐缓冲液(pH7.00)≥10.0mmol/L 化学氧化剂≥10.0mmol/L 1.2.2 校准品组成 牛血清 总胆红素目标浓度:200μmol/L 该校准品为牛血清基质冻干品 2.1 外观 a) R1应为无色溶液,无混浊,无未溶解物。 b) R2应为无色溶液,无混浊,无未溶解物。 c) 校准品应为白色至淡黄色固体 2.2 净含量 液体组分不少于标示值。 2.3 试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度 应不大于0.050。 2.4 分析灵敏度

TBIL试剂盒测定浓度100.0μmol/的被测物时,吸光度差值(ΔA)应不小于0.050。 2.5 准确度 测试参考物质,测定结果的相对偏差应不超过±10%。 2.6 精密度 2.6.1重复性 变异系数应不大于5%。 2.6.2批间差 批间相对极差(R)应不大于10%。 2.6.3校准品批内瓶间差 测试校准品,所得结果的批内瓶间差应不大于5%。 2.7 线性 在(0,684.0]μmol/L范围内,TBIL试剂盒的线性相关系数r应不低于0.9900;在(0,50.0]范围内绝对偏差应不超过5.0μmol/L,在(50.0,684.0]范围内相对偏差应不超过±10%。 2.8校准品溯源性 依据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供总胆红素校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。校准品溯源至国家参考物质GBW(E)090002。 2.9稳定性 2.9.1校准品复溶稳定性

总胆红素检测试剂盒

◆许可证号:浙食药监械生产许20090029号 ◆产品注册号: ◆产品标准号: -2009 3.4~21.7μmol/L (参照《全国临床检验操作规程》,建议各实验室建立自己的参考范围) 检验结果的解释 本法的检测范围为0~400μmol/L ,当样品测定值超过上限,应将样品用生理盐水进行稀释,重新测定,结果乘以稀释倍数。 检验结果的局限性 1、当样品中抗坏血酸浓度≥1704μmol/L ,血红蛋白浓度≥4.0g/L ,甘油三酯浓度≥20mmol/L 时对测定结果又干扰。 2、血清中TBIL 的测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一,临床医师还要根据患者的体症、病史以及其他诊断项目、诊断手段进行综合判断。 产品性能指标 1、线性范围:0~400μmol/L (相关系数r ≥0.99) 2、重复性:测量精密度CV ≤4%、批间差≤8% 3、准确度:相对偏差<10% 注意事项 1、试剂盒样品用量可因仪器要求不同,按比例增减,计算公式不变。 2、本试剂仅供体外诊断用,试剂产生的废液及使用后难以降解的包装材料应集中收集后交当地废物处理站处理。 3、试剂使用后立即盖紧瓶盖,避免污染。 4、不同方法学试剂的质量控制结果之间会存在差异,使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。 5、不同批号的试剂不建议混用,如混用应重新校准。 参考文献 1、叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[M],3版.南京:东南大学出版社.,2006:452-457. 2、德田邦明,古本和仁:临床化学22(2),116-122(1993)。 总胆红素检测试剂盒说明书 (氧化法) 企业名称:温州市维日康生物科技有限公司 生产地址:温州市瓯海区娄桥工业园园一路 邮政编码:325000 电话:0577- 86585999 86585666 传真:0577- 86581858 网址:https://www.wendangku.net/doc/7810339918.html, 邮箱:weirikan@https://www.wendangku.net/doc/7810339918.html, 感谢您使用我们的产品,使用前请仔细阅读此说明书

总胆红素测定试剂盒(重氮盐法)产品技术要求lepu

总胆红素测定试剂盒(重氮盐法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中总胆红素的浓度。 1.1 规格 试剂1:1×60 mL,试剂2:1×20 mL; 试剂1:1×60 mL,试剂2:1×15 mL; 试剂1:1×60 mL,试剂2:1×12 mL; 试剂1:4×60 mL,试剂2:4×15 mL; 试剂1:2×40 mL,试剂2:2×10 mL; 试剂1:3×28 mL,试剂2:3×7 mL; 试剂1:1×4L,试剂2:1×1L; 试剂1:2×4L,试剂2:1×2L。 1.2主要组成成分 试剂1主要组分: 试剂2主要组分: 2.1 净含量 应不低于试剂瓶标示装量。 2.2 外观 试剂1为无色或浅色澄清液体,试剂2为无色或浅色澄清液体。外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。

2.3 试剂空白 在546nm处测定试剂空白吸光度,应≤1.0。 4.4 分析灵敏度 测试100umol/L的被测物时,吸光度变化(ΔA)应不低于0.01。 2.5 准确度 在样品中加入一定体积的纯品,计算回收率,应介于90%-110%之间。 2.6 重复性 批内变异系数(CV)应不超过7%。 2.7 线性 2.7.1在[1,400]umol/L区间内,线性相关系数r应不低于0.990; 2.7.2 [1,28)umol/L区间内绝对偏差不超过±1.96umol/L;[28,400]umol/L 区间内相对偏差不超过±7%。 2.8 批间差 对同一份样品进行重复测定,相对极差不大于7%。 2.9 稳定性 取在2℃~8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测,应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。

胆红素

胆红素 胆红素百科内容来自于: 血红素在体内分解产生胆色素(bile pigment)。胆色素包括胆红素、胆绿素、胆素原和胆素等多种化合物,其中以胆红素为主。胆红素对身体而言是废弃物,但若是血清中胆红素过高时,却透露出肝脏病变或胆管阻塞等异常讯息,血清胆红素的数值的高低代表着异常的严重程度。 概述 胆红素 胆红素(Bilirubin)是血液中红血球的血红素代谢后的废弃物。当红血球衰老(红血球生命周期120天)时,会经过脾脏加以破坏处理而产生胆红素,胆红素会透够肝脏作用并由胆管被排至十二指肠中,最后大部分随着粪便而排出体外。胆红素对身体而言是废弃物,但若是血清中胆红素过高时,却透露出肝脏病变或胆管阻塞等异常讯息,血清胆红素的数值的高低代表着异常的严重程度。一般而言,直接胆红素(Bilirubin DirECT)在0.5mg/dl以下、总胆红素(Bilirubin Total)在1.3mg/dl 以下属正常范围。 [总胆红素]3.4~17.1mol/L、 [直接胆红素]0~6.8mol/L以下、 [间接胆红素]1.7~10.2umol/L 以下 生成和转运 人红细胞的平均寿命为120天,红细胞衰老后在机体的肝、脾、骨髓等单核吞噬细胞系统中被吞噬破坏,释放出的血红蛋白分解为珠蛋白和与血红素。珠蛋白可降解为氨基酸,供机体再利用。血红素则在单核吞噬细胞内血红素加氧酶催化下,释放出CO和铁,并生成胆绿素。这一过程在细胞的微粒体内进行,需要O2和NADPH参与。生成的胆绿素在胞液中胆绿素还原酶(辅酶也是NADPH)的催化下迅速被还原为胆红素。胆红素为橙黄色,脂溶性极强,极易透过生物膜。如果血浆中胆红素增多,就会透过血脑屏障,在脑内积蓄形成核黄疸,不仅干扰脑的正常功能,而且有致命的危险。胆红素生成后进入血液,主要与血浆清蛋白结合成胆红素-清蛋白而运输。这种结合既增加了胆红素的水溶性,有利于血液运输,又限制了其透过生物膜,防止对组织细胞产生毒性作用。

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