总胆红素检测标准操作规程

总胆红素(tbil)钒酸盐氧化法

项目总胆红素(TBIL)方法钒酸盐氧化法 目录 1. 检测原理 2. 标本采集与处理 2.1 受检者的准备 2.2 静脉采血 2.3 抗凝剂 2.4 标本处理 3. 试剂 3.1 试剂 3.2 校准血清 3.3 试剂与校准血清的稳定性 4. 仪器 5. 操作 6. 计算 7. 操作性能 7.1 精密度 7.2 准确度 7.3 灵敏度 7.4 可报告范围 7.5 特异性 7.6 干扰 8. 参考值 9. 临床意义 附录A: 参数 1. 检测原理

钒酸盐测定钒酸盐作用前后吸光度差异，可求得样品中的直接胆红素的浓度。 胆红素————胆绿素 pH 3.0 2. 标本采集与处理 2.1 受检者的准备： 病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。 2.2 静脉采血： 除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。 2.3 抗凝剂： 血浆多主张用EDTANa2（1mg/mL）抗凝。 2.4 标本处理： 血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。 3．试剂 3.1 试剂： 本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司TBIL试剂盒，为液体双试剂，各组分如下： 组成浓度 R1： 柠檬酸缓冲液100mM 反应促进剂 表面活性剂 R2： 磷酸缓冲液10mM 偏钒酸钠

生化检验操作规程

生化检验操作规程 一. 血脂血糖 1.胆固醇 (1）方法学：胆固醇氧化酶法 (2）实验仪器：上海科华卓越330全自动生化分析仪 (3) 试剂成分：R1-胆固醇酯酶,抗坏血酸氧化酶，过氧化物酶，ESPAS，R2-胆固醇氧化酶，4-氨基安替比林 (4)操作流程：开机->进入主程序->开始->杯空白测定->正常->将待测管放入样品盘检测孔中（如1孔）->进入样品界面->在界面左侧输入相应起始样品号（如1号）以及相应起始杯号（如1杯）->在右侧检测项目界面中选择“胆固醇”->点击下方申请测试->开始测试->加样针吸取样品管内血清3μL于比色盘的1号比色杯中->试剂针吸取胆固醇 R1试剂250μL于1号比色杯中->搅拌器搅拌混匀->37℃恒温5分钟->试剂针再吸取胆固醇 R2试剂125μL于1号比色杯中->搅拌器再次搅拌混匀->37℃恒温5分钟后比色测定->结果数据传至主程序开始菜单内的报告列表界面->检测完毕->在报告列表输入检验报告单相关信息->点击右下方打印报告->签字审核后发单。 (5）注意事项： ①保证比色盘与试剂盘的洁净，定期检查。每日检查试剂剩余量，及时补足。 ②注意主程序界面内的试剂盘的温度变化，一旦持续增高，则考虑冷冻剂问题，予以更换。 ③保证样品的良好待检状态，样本为血清，肝素或EDTA抗凝血浆，若当时不能检测则可2℃～8℃冷藏保存。过度溶血的宜重新取血，若无法重新取血的应在检验报告单上注明，脂血的样本也应在检验报告单上标注，并且稀释后再行检测，黄疸的应先做空白对照，再行检测并将结果减去空白对照后再行出单。 ④每日跟随样品进行质控检测绘出质控图，观察质控值是否在2SD以内，3SD为失控限，以便据此观察机器与试剂的状态是否在控。 ⑤注意试剂的效期问题，定期检查试剂是否变质，保证试剂在有效期内使用。避免接触眼睛、皮肤与衣物，若接触后应用大量清水清洗受害部位或衣服，擦拭干净接触的物品，以免中毒或损坏衣物。 2.甘油三酯 (1）方法学：甘油三酯氧化酶法 (2）实验仪器：上海科华卓越330全自动生化分析仪 (3) 试剂成分：R1-甘油-3-磷酸氧化酶,抗坏血酸氧化酶，甘油激酶，4-氨基安替比林 ，R2-脂蛋白脂肪酶，过氧化物酶，ESPAS (4）操作流程：开机->进入主程序->开始->杯空白测定->正常->将待测管放入样品盘检测孔中（如2孔）->进入样品界面->在界面左侧输入相应起始样品号（如2号）以及相应起始杯号（如2杯）->在右侧检测项目界面中选择“甘油三酯”->点击下方申请测试->开始测试->加样针吸取样品管内血清4μL于比色盘的2号比色杯中->试剂针吸取甘油三酯 R1试剂250μL于2号比色杯中->搅拌器搅拌混匀->37℃恒温5分钟->试剂针再吸取甘油三酯R2试剂125μL于2号比色杯中->搅拌器再次搅拌混匀->37℃恒温5分钟后比色测定->结果数据传至主程序开始菜单内的报告列表界面->检测完毕->在报告列表输入检验报告单相关信息->点击右下方打印报告->签字审核后发单。 (5）注意事项： ①保证比色盘与试剂盘的洁净，定期检查。每日检查试剂剩余量，及时补足。

TBIL项目操作手册

SOP 标准操作程序 TBIL 总胆红素（货号：OSR6112，OSR6212） 一、 目的：规范总胆红素测定的操作程序，确保总胆红素测定的结果准确 二、 适用范围： 在Beckman Coulter AU 分析仪上定量测定人血清中的总胆红素（TBIL ） 三、 临床意义 每天产生的胆红素中，80 – 85% 来自红细胞破裂释放的血红蛋白，其余 15 – 20% 源于含血红素蛋白（例如肌红蛋白、细胞色素、过氧化氢酶）的分解和骨髓的无效红细胞生成。许多疾病会影响涉及胆红素产生、摄取、储藏、代谢和排泄的一个或多个步骤。高胆红素血症主要由非结合胆红素或结合胆红素或这两者失调而引起。高胆红素血症可分类如下： 肝前性黄疸：伴有显著高非结合胆红素血症的肝前性疾病，包括红细胞溶血性贫血（例如地中海贫血和镰刀形红细胞贫血）；细胞外溶血性贫血（例如 ABO 和 Rh 血型不合引起的输血反应）；新生儿黄疸和新生儿的溶血性疾病。 肝性黄疸：伴有显著的高结合胆红素血症的肝源性疾病包括急性和慢性病毒性肝炎、肝硬化和肝细胞肝癌。 肝后性黄疸：伴有显著的高结合胆红素血症的肝后性疾病包括肝外梗阻和肝移植排斥。 慢性先天性高胆红素血症包括高非结合胆红素血症（Crigler-Najjar 综合征和 Gilbert 综合征）与高结合胆红素血症（Dubin-Johnson 综合征和Rotor 综合征）。通过测定胆红素各部分和检测正常的肝酶活性，可区分慢性先天性高胆红素血症和获得性胆红素血症。。 四、 方法原理 稳定的重氮盐 3,5-对甲苯磺酸四氟硼酸重氮盐 (DPD) 直接与结合胆红素起反应，在有促进剂存在的情况下，与非结合胆红素发生反应，形成偶氮胆红素。540 nm 下的吸光率与总胆红素的浓度成正比。对单独的空白样本进行测定，以减少内源性血清的干扰。 反应原理： 分析参数： R1 Color R1 Blank 五、 标本的采集与处理 5.1. 受检者的准备：空腹，采集前静坐5min ，如有输液，应在停止输液3min 后在另一侧肢体静脉采 集。 5.2. 静脉采血：除非是卧床病人，一般取坐位从肘部静脉采血，使用止血带的时间不超过1min ，穿

总胆红素测定试剂盒(钒酸盐氧化法)标准化操作规程TB-v-SOP

总胆红素测定试剂盒（钒酸盐氧化法）标准化操作规程 1 目的 规实验室操作，保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。 2 授权操作人经培训且考核通过的实验室检验人员。 3 适用围本试剂适用于体外定量检测人血清或血浆中的总胆红素的浓度。 4 检验方法 本试剂盒采用钒酸盐氧化法测定总胆红素的浓度。 5 检验原理 pH值接近3时，在钒酸盐、加速剂和表面活性剂的作用下，总胆红素被氧化成胆绿素，胆红素在450nm处的特异性吸光度下降。通过测定钒酸盐氧化前后吸光度的变化，即可计算出样品中总胆红素的含量。 6 检验标本要求 6.1标本类型: 使用新鲜血清样本，不要使用溶血及乳糜血样本。 6.2标准运输:室温条件下运输。 7 试剂及配套品 7.1试剂来源 迪瑞医疗科技股份总胆红素试剂盒（钒酸盐氧化法） 7.3试剂的稳定性与贮存： 7.3.1试剂在2?C ～8?C条件下，干燥、避光、密封贮存，有效期12个月。 7.3.2后在2～8℃可稳定30天。 8 实验仪器及性能指标 8.1 实验仪器 迪瑞CS系列全自动生化分析仪 8.2试剂性能指标 8.2.1试剂空白：试剂空白吸光度A≤0.050 8.2.2分析灵敏度：测试1μmol/L被测物时，吸光度变化△A＜-0.0002。

8.2.3线性围： 0～684.0μmol/L，线性相关系数r值≥0.9900；线性围在0～187.0μmol/L时，绝对偏差应不超过±28.05μmol/L；线性围在187.0～684.0μmol/L时，相对偏差应不超过±15%。 8.2.4准确度：相对偏差应在±10％。 8.2.5精密度： 重复性： CV≤5.0% 批间差： R≤6.0% 9 校准 9.1校准品来源 迪瑞医疗科技股份生产的临床化学校准血清 9.2校准品的组成：人血清 9.4校准品使用注意事项 9.4.1 若该复溶血清受细菌污染，将会降低许多成分的稳定性。 9.4.2 不同批号的校准血清不能交叉使用，因为批号于批号之间的赋值不同。9.4.3 请勿用嘴直接吸取试剂，避免接触皮肤、眼睛及粘膜，一旦接触，应立即用大量水冲洗。 9.4.4 胆红素对光敏感，因此应将校准血清置于避光冷藏处。复溶的校准血清中的胆红素在2～8℃下至少可以稳定8小时；勿置于15～25℃的温度下保存，勿冷冻。 9.5 校准程序： 使用迪瑞公司的临床化学校准血清，按仪器使用说明书进行校准。 10 质量控制 10.1质控品来源 迪瑞医疗科技股份生产的临床化学质控血清(水平I和水平II) 10.2质控品组成：人血清 10.3质控品存贮 未复溶的校准血清在避光条件下，2～8℃可稳定至标签失效期。 复溶后校准血清在避光条件下，2～8℃可稳定7天；15～25℃可稳定1天；-20℃可稳定30天。 10.4质控品使用注意事项 10.4.1若该复溶血清受细菌污染，将会降低许多成分的稳定性。 10.4.2请勿用嘴直接吸取试剂，避免接触皮肤、眼睛及粘膜，一旦接触，应立即用大量水冲洗。 10.4.3 因批与批之间的质控血清赋值不同，所以不同批号的质控血清不能当做

临床生化项目操作规程

总胆红素(T-Bil)标准操作程序（SOP） 【目的】 保证总胆红素检测结果准确，可靠。 【该SOP变动程序】 本SOP的改动，可有任一使用本SOP的工作人员提出，并经下述人员批准签字：专业主管，科室主任。 【本SOP适用范围】 BT-815A半自动生化仪总胆红素重氮法测定。 【试剂来源】 上海荣盛生物技术有限公司。 【标本类型】血清、血浆 【实验原理】 对氨基苯磺酸＋亚硝酸钠 ??→ ?盐酸重氮苯磺酸盐 胆红素＋重氮苯磺酸盐酸盐 ? ? ?→ ?二甲亚砜重氮复合物（红紫色） 【实验仪器】BT-815A半自动生化仪 【操作步骤】 1、一份R1于一份R2等比例混合。 2、每个病人600微升温浴10分钟备用。 3、取离心后标本30微升加入600微升试剂温浴10分钟，后检测。 【参考值】血清：<5.17mmol/L。 【临床意义】总胆红素的测定对于急性性肝炎，慢性肝炎，肝硬化，胆管炎，胆石症，急性胆囊炎等肝胆疾病和溶血性贫血的诊断具有重要意义。 【注意事项】 1、标本为血清或肝素血浆。标本采集后应避光保存。

丙氨酸氨基转移酶(ALT)标准操作程序（SOP） 【目的】 保证丙氨酸氨基转移酶检测结果准确，可靠。 【该SOP变动程序】 本SOP的改动，可有任一使用本SOP的工作人员提出，并经下述人员批准签字：专业主管，科室主任。 【本SOP适用范围】 BT-815A半自动生化仪丙氨酸氨基转移酶测定。 【试剂来源】 上海荣盛生物技术有限公司 【标本类型】血清、血浆 【实验原理】一步法或者两步法、速率法 L-丙氨酸+α-酮戊二酸→丙酮酸+ L-谷氨酸（ALT催化） 丙酮酸+NADH+H+→L-乳酸+NAD++H2O(LDH催化) 【实验仪器】BT-815A半自动生化仪 【操作步骤】 1.取标本与试剂30/600的比例混匀。 2.上机检测。 【参考值】血清：<40umol/L。 【临床意义】血清ALT活力的检测对中毒性肝炎,病毒性肝炎,肝癌,肝硬化活动期,脂肪肝,阻塞性黄疸,胆管炎,胆囊炎,心血管疾病,心肌梗塞,心肌炎,骨骼肌疾病,内脏和肌肉炎症性坏死等病症的诊断具有重要的价值。 【注意事项】 1、试剂空白吸收光度小于1.000时,勿用。 2、当样本的ALT活力大于1000U/L时,应将样本用生理盐水稀释后再分析,结果乘以稀释倍数。标佳 试剂使用原装试剂参数，具有自动稀释功能。

血清总胆红素测定标准操作规程

血清总胆红素测定标准操作规程 1.检测目的 用于定量测定人体血清或血浆中总胆红素的含量 2.检测原理 钒酸氧化法：在PH3.0左右的缓冲液中，钒酸钠氧化总胆红素为胆绿素，使反应液的黄色减少。测定胆红素氧化前后吸光度的差，可以计算出样品中总胆红素的浓度。 3．适用范围 血清，或用肝素抗凝的血浆 4．试剂及仪器 1.试剂品： 迈瑞公司生产的TBiL试剂盒，各组分如下： 2.校准品 由迈瑞公司提供的校准液，在更换试剂批号或出现质控漂移；仪器进行保养；仪器重要零件更换后进行校准。 3.仪器

迈瑞BS-800型号仪器 5．操作 装载试剂—→进行校准—→进行质控—→输入标本检测项目—→加载标本—→标本测定—→结果复核—→报告 6．注意事项 1. 不能测试严重溶血、脂浊、黄疸的标本, 血浆标本可用肝素抗凝,待测样品室 温不超过24小时，可于2℃-8℃保存72小时，胸腹水经抗凝取上清液。 2. 不能使用过期的试剂，2℃-8℃保存。 3. 定标液应冰冻保存。 7. 结果计算 c ＝ΧC O 式中：c ——测定总胆红素浓度，umol/L ； A 测定——标本管吸光度； A 标准——标准管吸光度； C O ——校准血清总胆红素浓度，umol/L ； 8. 操作性能 1 精密度： 批内CV ≤ 5.0%，批间CV ≤ 6.0%。 2 准确度： 以参考方法定值的血清作为校准品时，本法测定结果与参考方法基本一致。 3 线性范围：2~68 4 umol/L 9. 参考值 5.1~19 umol /L(0.3~1.1mg/dL) 10. 临床意义 胆红素是老化的血红细胞中血红蛋白的代谢产物,血液中总胆红素和直接胆红素的含量测定有利于肝病和黄疸疾病的诊断。总胆红素增高主要见于各类黄疸肝炎，胆道堵塞，新生儿黄疸。总胆红素减低见

检验科生化总胆红素测定的标准操作规程

总胆红素测定的标准操作规程 【目的】 体外检测血清总胆红素(DBIL)的含量。 【职责】 1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。 2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签 字：室负责人、科主任。 【标本类型及实验前准备】 1.受检者的准备 病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。 2.静脉采血 除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。 【仪器设备】 东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机 一、检测原理 钒酸盐 胆红素胆绿素 PH3.0 测定钒酸盐作用前后吸光度差异，可求得标本中总胆红素的浓度。 二、试剂 1.试剂 本科使用北京利德曼生化股份有限公司TBiL试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

1.校准要求 使用去离子水与校准品两点定标，详见说明书；正常情况下，应每两周对测定进行一次校准。 三、操作 1.测定（试剂准备液体试剂，直接使用，无需配制。） 四、计算 TBIL=校准液浓度（△A=A2-A1）X CA标准/AA校准） 五、质控程序 1.建议采用朗道水平2（正常范围质控）和水平3 （病理范围质控）两个水平的血清进行室内质控。 2.可接受性判断质控物的检测值应在给定质控范围，或可以通过参加卫生部室间质评对实验室的运作情况进行系统评估。 3.质控操作每日进行样本检测之前首先应进行质控操作，以考察系统的在控情况。如果检测结果符合质控要求则进行样本操作；如果不符合质控要求，则应重复质控操

直胆红素(DBIL) 重氮盐法

目录 1. 检测原理 2. 标本采集与处理 2.1 受检者的准备 2.2 静脉采血 2.3 抗凝剂 2.4 标本处理 3. 试剂 3.1 试剂 3.2 校准血清 3.3 试剂与校准血清的稳定性 4. 仪器 5. 操作 6. 计算 7. 操作性能 7.1 精密度 7.2 准确度 7.3 灵敏度 7.4 可报告范围 7.5 特异性 7.6 干扰 8. 参考值 9. 临床意义 附录A: 参数 1. 检测原理 对氨基苯磺酸+ HCl + NaNO2 --------- 氯化重氮苯磺酸+ NaCl 胆红素+ 氯化重氮苯磺酸-------偶氮胆红素

2. 标本采集与处理 2.1 受检者的准备： 病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。 2.2 静脉采血： 除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。 2.3 抗凝剂： 血浆多主张用EDTANa2（1mg/mL）抗凝。 2.4 标本处理： 血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。 3．试剂 3.1 试剂： 本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司DBIL试剂盒，为液体双试剂，各组分如下： 标准液：64.5umol/L (3.75mg/dL) 3.2 校准血清： 使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。 校准频次： 空白定标：每日需做试剂空白定标。 全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

肝功能检测操作流程及评分标准

肝功能检测操作流程及评分标准肝功能检测是一种常见的医学检验，在临床诊断和治疗中具有重要 的作用。本文将介绍肝功能检测的操作流程以及相应的评分标准，以 便读者对该检测过程有更清晰的了解。 一、肝功能检测操作流程 1. 患者准备：在进行肝功能检测前，患者应提前空腹4-8小时，停 用一切药物，并遵循医生的具体指示，如有需要还可以进行肝脏超声 或CT检查，以确定肝脏情况。 2. 抽血采样：肝功能检测一般通过抽取患者的静脉血样进行。在抽 血前，医生会先为患者消毒，然后使用无菌注射器穿刺患者的静脉， 采集一定量的血液样本放入试管中。 3. 送样检测：采集完毕后，将血液样本送往化验室进行检测。不同 的检测项目需要使用不同的方法和仪器。 4. 数据分析：检测结果会通过仪器产生，通过专业人员进行数据解 读和分析。根据不同项目的临床参考值和正常范围，对结果进行评估。 5. 结果报告：医生或者医学技术人员会将肝功能检测的结果通知患者，并解释其意义。根据检测结果，医生会决定下一步的治疗计划或 者建议。 二、肝功能检测评分标准 肝功能检测项目包括了很多指标，下面将介绍常见的几个评分标准：

1. 肝酶指标：肝酶指标包括谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和碱性磷酸酶（ALP）等。正常情况下，酶的活性较低。评估肝酶水平的高低可以发现肝功能的异常，并评估肝细胞损伤的程度。 2. 肝功能检测：常见的肝功能检测项目包括血清总胆红素、直接胆 红素、总蛋白、白蛋白和球蛋白等。这些指标可以评估肝细胞合成和 胆小管排泄功能的正常与否。 3. 凝血功能检测：肝脏是体内主要的凝血物质合成器官之一，因此 凝血功能检测也是评估肝功能的重要指标之一。常见的凝血功能指标 有凝血酶原时间（PT）和凝血酶时间（APTT）等。 4. 肝脏血流灌注检测：评估肝脏血液循环情况的指标，包括门静脉 压力和肝血流速度等。这些指标对于评估肝脏疾病的严重性和治疗效 果都有重要意义。 5. 免疫功能检测：肝功能异常与免疫功能的紊乱密切相关，因此免 疫功能指标也是评估肝功能的重要内容之一。例如，C反应蛋白（CRP）和白细胞计数等。 通过以上指标的综合评估，可以对肝功能的正常与否进行判定。医 生会根据具体的检测结果，结合患者的临床症状，制定个体化的治疗 方案。 总结： 肝功能检测是评估肝脏健康状况的重要手段，可以为临床诊断和治 疗提供可靠的依据。本文简单介绍了肝功能检测的操作流程，并解释

总胆红素重氮法检测操作规程

总胆红素重氮法检测操作规程 产品注册号：国食药监械（准）字2004第3400400号 产品执行标准：YZB/国2221-2003 原理： 总胆红素在二甲亚砜等加速剂作用下，在酸性溶液中与重氮苯磺酸作用生成紫色的偶氮胆红素，与经过同样处理的校准液比较，即可计算出样品中总胆红素的含量。 样品准备： 样品为新鲜空腹无溶血的血清或血浆。样品应在低温条件下运输保存，样品中总胆红素2-8℃密闭避光保存可稳定3天，冰冻保存可稳定3个月。 测定步骤： 1.基本参数： 方法：终点法 波长：560nm 反应温度：37℃ 光径：10mm 反应时间：5min 2.操作： 根据测定所需试剂量，取R1和R2按50：1比例混合，即为工作液。根据以上参数按下表操 计算： 1. 因素法：用本试剂盒操作，测得偶氮胆红素参考摩尔吸光系数为74290（波长=560nm，光径=10mm，样品/试剂=1/15），其相应的F值为215.经严格检定标化的仪器，可按以下公式计算结果： 样品Tbil含量（umol/L）=(Au-AuB)×215 例：Au=0.080 AuB=0.040 则 样品Tbil含量（umol/L）=（0.080-0.040）×215=8.6 2. 比例终点法： 样品Tbil含量（umol/L）=Au-AuB/Ac-AcB×Cc 例：Au=0.040 Ac=1.095 AcB=0.030 Cc=230umol/L则 样品Tbil含量（umol/L）=【（0.090-0.040）÷（1.095-0.030）】×230=10.8 校准及质控： 1.建议使用本公司的胆红素校准血清进行校准。 2.推荐使用本公司的生化质控血清进行室内质控。 性能指标： 1.线性范围：0.4～34 2.0umol/L,r≥0.99

血清总胆红素测定标准操作规程

血清总胆红素测定标准操作规程 1检验原理：（钒酸盐法）pH 值接近3时，在钒酸盐和表面活性剂的作用下，胆红素被氧化成胆绿素。此时，胆红素特有的黄色减少，在波长450nm 处通过测定钒酸作用前后的吸光度的差可以求得样品中总胆红素的浓度。 胆红素−−−−−→−表面活性剂钒酸盐 /胆绿素 2.试剂主要组成成分 3.样本要求 新鲜无溶血血清、勿使用肝素抗凝血浆。22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！ 4.检验方法：仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程） 5.参考范围： 6检验结果的解释 6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V ）的氯化钠溶液稀释样本。通常稀释2倍，当样本浓度较大时提高稀释倍数。 6.2单位换算：mg/dL=umol/L ×0.0585 7检验方法的局限性 7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。 7.2若试剂浑浊或以水空白在450nm 处吸光度大于0.500时不能使用。 8.产品性能指标 8.1线性范围：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，本世纪线性范围可达0-300umol/L 。 8.2试剂空白吸光度：在450nm 处，光径1cm 时，空白吸光度A ≤0.500，△A 空白/分钟≤0.002. 8.3准确度：相对偏差≤10%。

8.4精密度 8.4.1批内精密度CV≤3% 8.4.2批间精密度：R≤10% 8.5分析灵敏度：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，1umol/L的总胆红素对应的△A不低于1.5×3 10 8.6干扰试验 无明显干扰：添加干扰物后的测定值与初始测定值的相对偏差处于±10%以内。 8.7方法比较：本试剂盒与商品化试剂盒测定40个样本测定结果相关性如下：y=0.997x＋1.051；r=0.997。 9.临床意义： 胆红素是红细胞正常或非正常降解后在内皮系统形成的有机复合物，检测胆红素有利于监测肝脏疾病以及发现溶血性贫血以及评估黄疸的程度。

总胆红素钒酸盐氧化法

1. 检测原理 2. 标木采集与处理 2.1受检者的准备 2.2静脉采血 2.3抗凝剂 2.4标木处理 3. 试剂 3.1试剂 3.2校准血清 3.3试剂与校准血清的稳定性 4. 仪器 5. 操作 6. 计算 7. 操作性能 7.1精密度 7.2准确度 7.3灵敏度 7.4可报告范用 7.5特异性 7.6干扰 8. 参考值 9 •临床总义 附录A：参数

1. 检测原理 帆酸盐测定锐酸盐作用前后吸光度差界，可求得样品中的直接胆红素的浓度。 胆红素--------- 胆绿素 pH 3.0 2. 标本采集与处理 2.1受检者的准备： 橋人空腹12h・不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注总有无应用影响测试项目的药物C此外，对于体检者.采血的季节都应做相关记录，因为样木中各项目的含量有季节性变动，为J'前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。 2.2静脉釆血： 除非是卧床的病人.一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会彩响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血.使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带C 2.3抗凝剂： 血浆多主张用EDTAN32（1mg/mL）抗凝° 2.4标本处理： 血标木室温放宜30min〜45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕：如两小时内不能检测完毕.将离心分离血清或血浆迓洁净试管加盖28C保存。 3. 试剂 3.1试剂： 木科使用湖南永和阳光科技有限责任公司TBIL试剂盒，为液体双试剂.各组分如下：

3.2校准血淸： 使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。 校准频次： 空白定标：每日需做试剂空白定标。 全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范碉，需要全点定标。 3.3试剂与校准血清的稳定性： 原包装试剂储存在2-8 C至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。 试剂储存在18-22 C稳定28天.试剂应避免污染。试剂R仁R2颜色为无色.、勺试剂变色.按照试剂失效处理。 女项校准血清在2・8°C储存至标签所示失效日期.复溶后-20 C保存，可稳定一个丿J.只可冻融一次. 避免反复冻融。参见校准血淸说明书。 4. 仪器 KONELAB 30型号仪器。 性能：波长450nm,仪器测定吸光度的灵敬度应达到0.001ABS以上。 5. 操作 样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。木法为终点法。参数见后附，附录A, 试剂参数设迓、定标操作以及样木检测常规操作，见仪器操作规程。 6. 计算 △A気崔 C = ------------- x Co

总结总、直接胆红素的检测方法

血清总胆红素和直接（结合）胆红素测定 目前测定血清胆红素的方法主要有重氮试剂法（包括改良J-G法、二甲亚砜法、二氯苯重氮盐法和2，5二氯苯重氮四氟硼酸盐法等）、胆红素氧化酶法、钒酸盐氧化法、高效液相色谱法、导数分光光度法、经皮胆红素测定法以及直接分光光度法等。 改良咖啡因（J-G）法： 一、实验原理 血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应，生成紫色的偶氮胆红素；在同样条件下，未结合胆红素须有加速剂破坏胆红素氢键后才能与重氮试剂反应。咖啡因、苯甲酸钠作为加速剂，醋酸钠缓冲液可维持反应的PH值同时兼有加速作用。叠氮钠破坏剩余重氮试剂，终止结合胆红素测定管的偶氮反应。最后加入碱性酒石酸钠，在碱性条件下，紫色偶氮胆红素转变为蓝色偶氮胆红素，使最大吸光度由530nm转移到598nm，此时，非胆红素的黄色色素及其它红色与棕色色素产生的吸光度可忽略不计，使测定的灵敏度和特异性增加。最后形成的绿色是由蓝色的碱性偶氮胆红素和咖啡因与对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素混合而成。 二、实验方法 （一）器材 试管，刻度吸管，分光光度计，37℃水浴箱。 （二）试剂 1．咖啡因-苯甲酸钠试剂无水醋酸钠41g，苯甲酸钠37.5g，乙二胺四乙酸二钠EDTANa2 0.5g，溶于约500mL 的蒸馏水中，再加入咖啡因25g，搅拌至完全溶解(不可加热)，然后加蒸馏水稀释至1000mL，混匀，过滤后放置棕色试剂瓶中，室温保存可稳定6个月。 2. 5g/L 亚硝酸钠溶液：亚硝酸钠5.0g，加蒸馏水溶解并稀释至100mL，若发现溶液呈淡黄色时，应丢弃重配。 3. 5g/L 对氨基苯磺酸溶液：对氨基苯磺酸（NH2C6H4SO3H·H20）5.0g，加于约800mL 蒸馏水中，加浓盐酸15mL，待完全溶解后，加蒸馏水至1000mL。 4. 重氮试剂临用前，取5g/L 亚硝酸钠溶液（试剂2）0.5mL 与5g/L 对氨基苯磺酸溶液（试剂3）20mL 混合。 5. 5g/L 叠氮钠溶液：叠氮钠0.5g，用蒸馏水溶解并稀释至100mL。 6. 碱性酒石酸钠溶液：氢氧化钠75g，酒石酸钠(Na2C4H4O6·2H2O)263g，加蒸馏水溶解并稀释至1000mL，混匀，置塑料瓶中，室温保存可稳定6个月。 7.胆红素标准液可购买，也可按以下方法配制： （1）稀释血清：收集不溶血、无黄疽、清晰的血清过滤作为混合血清稀释剂。取过滤血清1.0ml，加生理盐水24ml，混匀。在分光光度计中，以比色杯光径1cm，波长414nm，用生理盐水调零，读取的吸光度应小于0.100，波长460nm 处读取的吸光度应小于0.040。（2）171umol/L胆红素标准液：称取符合标准的胆红素（MW:584.68）10mg，加入二甲基亚砜1ml，玻棒搅匀，加入0.05mol/LNa2CO3溶液2ml，使胆红素完全溶解。移入100ml 容量瓶，用稀释血清洗涤数次并移入容量瓶中，缓慢加入0.1mol/LHCl溶液2ml（边加边缓慢摇动，切勿产生气泡），最后用稀释血清稀释至100ml。避光，4℃保存，三天内有效，最好当天绘制标准曲线。 （三）步骤 1. 取试管3支，标明总胆红素管、结合胆红素管和空白管，然后按下表操作： 试剂(ml) 总胆红素管结合胆红素管空白管 血清0.2 0.2 0.2

01总胆红素(TBIL)_钒酸盐氧化法SOP

总胆红素(TBIL)检测（钒酸氧化法） 1.原理 钒酸盐测定钒酸盐作用前后吸光度差异，可求得样品中的胆红素的浓度。 胆红素钒酸胆绿素 2. 标本采集和准备 2.1 受检者的准备： 病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。 2.2 静脉采血： 血清：未抗凝试管（红色试管） 血浆：肝素抗凝（绿色试管） 除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。 2.3 标本处理： 血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。 3.标本储存：2-8℃可稳定保存12小时，避光-20℃可稳定3个月。 4.标本运输：密封，室温运输。 5.标本拒收标准：污染、溶血、标本量不足标本不宜作此项检测。 6.实验材料： 6.1试剂及组成：本科使用南昌百特生物高新技术股份有限责任公司TBIL试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

6.2试剂准备：试剂为即用式。 6.3试剂稳定性与贮存 原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在2-8℃可保存15天。 6.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。 6.5 校准品：使用英国廊道公司校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 6.6质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 7.仪器设备：迪瑞CS-600B 8.操作步骤： 见CS-600B常规样本测定程序 总胆红素检测试剂盒自动生化分析仪CS-600B主要参数见附录1 9.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。 10. 计算方法： △Au 总胆红素(μmol/L) = ×校准液浓度 △As 11. 操作性能 11.1 精密度： 批内CV<4.5%，批间CV<5％。 11.2 准确度： 检测结果的相对不准确度≤7%。 11.3线性范围： 0---513μmol /L。 11.4方法局限性： 内源性干扰物溶血、脂血、黄疸对测试结果无明显影响。血红蛋白>4g/L,会影响检测结果准确性。12. 超出范围结果处理：本法线性上限为513μmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。