沼泽红假单胞菌培养条件的初步研究
鸡枞菌种植技术是什么
鸡枞菌种植技术是什么 一、菇棚的建造 二、母种的扩繁 1、母种培养基的制作，配制一千毫升母种培养基需要去皮土豆200克，麸皮100克，葡萄糖20克，琼脂20克，硫酸镁0.5克， 磷酸二氢钾2克，蛋白胨5克，清水一千毫升。首先选择质量较好 的土豆将皮削掉，称取200克，切成块状，加入锅中，在加入一千 毫升的清水，在称取100克麦麸，在放之前为了防止麦麸散乱在锅里，要先用纱布把麦麸包起来，文火煮沸，沸腾后小火保持30分钟。待土豆煮成浆状用1000目的纱布过滤煮好的土豆液，如果不够一千 毫升可以加入50摄氏度的温水补足。然后在将过滤好的土豆液继续 放在锅中煮3分钟左右，这时候将称量好的葡萄糖、琼脂、蛋白胨、磷酸二氢钾和硫酸镁放入锅中文火煮20分钟。为了防止锅底烧焦， 要边煮边搅拌。直到琼脂等原料完全溶化，在将煮好的溶液倒入量 水杯中，母种培养液就做好了。 2、分装，因为母种培养基的温度降到45度以下时会凝固，所以制备好的培养基要尽快乘热分装入试管。试管规格为直径20毫米， 长200毫米。分装时使每支试管的分装量相当于试管长度的四分之 一左右，分装好后还要进行封口，可以用未经脱脂的原棉，塞入的 松紧度以用手抓棉塞不脱落为标准。 4、接种。接种要在无菌室中的操作台上进行，接种前首先要准 备好以下工具，酒精灯，酒精棉，接种铲和接种耙。 接种时接种人员的手和接种针要用75%的酒精棉球擦洗，之后点 燃酒精灯，使火焰周围空间形成无菌区。接着一手拿着接种铲在火 焰上进行灼烧灭菌，一手拿着培养基试管和母种试管，试管口也要 在火焰上稍微烤一下以杀来管口上的杂菌。把试管上的棉塞取下， 用接种铲取一块体积大约为1立方厘米的母种，迅速放入母种培养
假单胞菌的风险评估
假单胞菌属的生物危害评估报告 一、细菌的传播与致病 假单胞菌科的1属。常见于医源性感染，以本属中的1、铜绿假单胞菌（俗称绿脓杆菌）最多见和致病力最强，是医院内感染最主要的病原菌之一。2．荧光假单胞菌和恶臭假单胞菌：可见于水和土壤中，都可作为咽部的正常菌群存在，是人类少见的条件致病菌，毒性较低，其中荧光假单胞菌能在4℃生长，是血制品的常见污染菌。3．洋葱伯克霍尔德菌作为条件致病菌出现，可引起心内膜炎、败血症、肺炎、伤口感染、脓肿等多种感染，在慢性肉芽肿和肺囊性纤维化的患者中常引起高死亡率和肺功能的全面下降。4．嗜麦芽窄食单胞菌分布广泛，可引起条件感染，是目前医院获得性感染的常见病原菌之一，可致多种疾病，包括肺炎、菌血症、心内膜炎、胆管炎、脑膜炎、尿路感染和严重的伤口感染等。 二、细菌的生物学特性 专性需氧的革兰氏染色阴性无芽胞杆菌，呈杆状或略弯。菌体大小(0.5～1)×(1.5～4)微米。具端鞭毛，能运动。有些株产生荧光色素或(和)红、蓝、黄、绿等水溶性色素，不发酵糖类。大多数菌的适温为30℃。DNA中的G+C
克分子含量为58～70％。存在于土壤、淡水、海水中。目前已确认有29种，其中至少有3种对动物或人类致病。 三、细菌的实验室检查及其它检查 标本采集根据感染部位不同分别采集痰液、分泌物、尿液以及医院环境用品等。 检验方法非发酵菌鉴定较为复杂，应先进行初步分群（属），然后再进行种的鉴定。初步分群的常用实验为葡萄糖氧化发酵试验（O/F试验）、氧化酶试验、动力观察。再进一步作生化试验进行菌种鉴定。 四、细菌的防治 按美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐，经美国FDA通过的假单胞菌抗生素体外药物敏感试验选择的抗生素分为4组：A组首选药物及常规试验报告的药物为头孢他咤、庆大霉素、美洛西林、替卡西林、哌拉西林；B组与A组平行做药敏试验，但应选择性报告的药为头孢吡肟、头孢哌酮、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星、妥布霉素、环丙沙星。C组补充选择报告的抗生素为头孢噻肟或头孢曲松，氯霉素。D组或U组，作为补充，或仅用于尿路感染的抗生素为羧苄西林、头孢唑肟、四环素、诺氟沙星或氧氟沙星、磺胺甲恶唑（新诺明）。值得注意的是：
沼泽红假单胞菌的分类鉴定和生理特性
沼泽红假单胞菌的分类鉴定和生理特性 摘要采用改良的Hungate厌氧培养技术一滚管法,从淀粉厂的污泥中,分离得到一株革兰氏阴性,弯曲杆状,出芽繁殖,既能在光照厌氧,也能在黑暗好氧条件下生活的光能异养型Y6菌株.经形态观察、生理特性的测定,确证Y6菌株为沼泽红假单胞菌(Rhodopseudpmonaspalustris). 关键词:紫色非硫光合细菌,沼泽红假单胞菌,厌氧培养技术 利用光合细菌净化高浓度有机废水,己是废水生物处理法中的一个重要方法.它具有 有机负荷高,占地面积小,投资费用少,动力消耗低,除氮效果好和耐盐能力强等优点. 同时,产生的菌体污泥是优质的饲料和肥料,可加以综合利用.因此,近几年来用光合细 菌法(PSB)净化废水正受到人们的广泛重视. 目前,用于有机废水净化的光合细菌,主要是紫色非硫细菌红螺菌科 (Rhodo‘Pi({llaceac)的一些菌株·这些菌一般均为兼性光合细菌·应用于有机废水净化的菌株,要求对有机质有较强的代谢能力和较高的耐受性,对不良环境因素,如温度、pH 和盐度等有较强的适应性. 为了进一步开展紫色非硫细菌在净化有机废水中的应用研究,我们从淀粉厂污泥中分 离到一株光能异养型Y6菌株.经初步测试,表明具有利用基质广泛、生长速度快、耐受 有机质浓度较高等特点.经鉴定确认,Y‘菌株为沼泽红假单胞菌 (Rhodo脾udomonas尸alustr哟.现将分离鉴定结果和某些生理特性报导如下. 材料和方法 . 1菌株来源 Y6菌株从济南市槐荫区淀粉厂污水排放沟污泥中分离获得. . 2培养基 vanNiel培养基〔‘〕 Molisch琼脂培养基〔2〕 YP琼脂培养基〔,〕 RCVBN培养基〔3〕 , 3菌种分离和纯化 *收稿口期:1990一l!一16第3期于温旭等:紫色非硫光合细菌的研究·345· 取污泥样品在VanNiel培养基中富集培养,30℃,Zo00Lx光照厌氧培养3一4天 后,培养基呈绛红色.再经4次连续转接培养,使光合细菌的生长在富集液中占绝对优 势,然后采用改良Hungat。厌氧培养技术一注滚管法闭进行分离纯化.待长出单个红色 菌落后挑取菌落穿刺接人Molish琼脂杜内保存,或再用YP培养基平板反复划线分离, 取得纯培养物. 1.4碳源和电子供体、氨基酸利用试验 在每支装有sml琼脂基础培养基试管中分别加人0.2%浓度的各种碳源和电子供 体:或在每支装有sml不含氮源的基础培养基试管中,分别加人0.01%浓度的各类氨基 酸.试验均采用穿刺法,并置于28℃,1000Lx厌氧光照培养3天. 1.5完整菌体和离体光合色素吸收光谱的检测 活细胞吸收光谱测定,用60%蔗糖溶液制成菌体悬液:离体光合色素吸收光谱测
酵母富硒培养条件研究进展
酵母富硒培养条件研究进展 作者：周洋枝苏蒙蒙路栋时杰高玉荣 来源：《农产品加工·上》2019年第01期 摘要：在功能性食品开发生产方面，富硒酵母可以作为硒营养添加剂的替代品，其生物活性和食用安全性优于亚硒酸钠，具有很高的医用价值。对富硒酵母类型及筛选、酵母富硒发酵培养基成分和影响酵母富硒条件的因素进行了综述，以期为富硒酵母产品和合理利用提供参考。 关键词：富硒酵母;亚硒酸钠;有机硒;培养;研究 中图分类号：S816.7; ; ; 文献标志码：A; ; doi：10.16693/https://www.wendangku.net/doc/7b4388302.html,ki.1671-9646 （X）.2019.01.021 Research Progress on the Culture Conditions of Se-enriched Yeast ZHOU Yangzhi，SU Mengmeng，LU Dong，SHI Jie，GAO Yurong （College of Chemistry and Materials Engineering，Chaohu University，Hefei，Anhui 238000，China） Abstract：In the development and production of functional food，Se-enriched yeast can be used as a substitute for selenium nutrition additiveit has high medicinal value. Because its high biological activity and edible safety are superior to sodium selenite. This paper summarized the types and screening of Se-enriched yeast，the composition of yeast Se-enriched fermentation medium and the factors affecting the condition of Se-enriched yeast. In order to provide a reference for the production and rational utilization of Se-enriched yeast products. Key words：Se-enriched yeast;sodium selenite;organic selenium;culture;reseavch 硒作為一种抗氧化剂，参与阻断体内自由基反应，避免胰岛β细胞被氧化破坏，维持其正常功能运行，可降低尿糖和血糖，促进人体内糖分代谢[1]。研究发现，癌症发生与血硒水平的高低有着密不可分的关系，硒可调节人体对维生素吸收和相关酶的合成，可抑制致癌物。现如今研究主要集中在通过生物体内转化有机硒，用于开发功能性富硒食品和临床预防及治疗相关疾病，而酵母是有机硒富集最佳载体，富硒酵母可食用安全性和生理活性高，且生产周期相对较短，对人体或动物体内的血硒水平有改善作用，若能实现产业化，可以改善我国食品缺硒现状，带来巨大经济效益和社会效益。 1; ;用于富硒的微生物类型
沼泽红假单胞菌培养基的优化及降氨氮作用的研究
第12卷第3期集美大学学报(自然科学版)V o.l12N o.3 2007年7月Journa l o f Ji m e iU n i ve rsity(N atura l Sc i ence)Ju.l2007 [文章编号]1007-7405(2007)03-0198-06 沼泽红假单胞菌培养基的优化及降氨氮作用的研究 蔡慧农1,2,倪辉1,2,苏文金1,2 (1.集美大学生物工程学院,福建厦门361021;2.厦门市食品生物工程技术研究中心,福建厦门361021) [摘要]对沼泽红假单胞菌的培养基进行了优化,并对其降氨氮效果进行了研究.结果表明:沼泽红假单胞菌可以利用多种碳源和氮源,乳酸和草酸铵是实验室培养沼泽红假单胞菌的最适碳源和氮源,乳酸 根的质量浓度及碳氮比对沼泽红假单胞菌生长具有显著影响,而磷酸根浓度对沼泽红假单胞菌生长没有显 著影响;用正交试验获得最适于培养沼泽红假单胞菌的乳酸质量浓度为1%,碳氮比为115,磷酸二氢钾 的质量浓度为115g/L;在自然光照、30e条件下,沼泽红假单胞菌的延滞期为2d,对数生长期为2~10d, 稳定期为10~20d;沼泽红假单胞菌具有很强的综合降氨氮作用,但其降氨氮效果受水质的影响而不稳定. [关键词]沼泽红假单胞菌;培养基优化;降氨氮 [中图分类号]S154139[文献标识码]A 0引言 光合细菌是自然界广泛存在的一类具有光能合成体系的原核生物,它不仅能进行光合作用,还能固定、同化和降解有机物及某些有毒物质[1-2].在养殖水域中添加光合细菌不仅可提高区域生态的生产力水平[1],还可降低COD、BOD、氨氮量,增加溶氧[3-4],降低硫化氢[5],改善水质.随着养殖业的快速发展及绿色养殖、健康养殖的推广,光合细菌作为一种养殖益生菌受到了越来越多的关注[5-8]. 沼泽红假单胞菌(Rhod op seudo m ona s palu stris)属非硫红螺菌科、红假单胞菌属,是近年水质净化领域应用和研究中常用的光合细菌[9-10].集美大学生物工程学院微生物与发酵研究室分离获得了一株沼泽红假单胞菌,为了开发该菌株在水产养殖中的应用技术,需要对该菌的培养及净化水质效果进行深入研究.前人对影响沼泽红假单胞菌生长的环境因子进行了全面的研究[11-12],但关于营养成分对沼泽红假单胞菌生长影响方面的研究报道却很少.因此,本文对沼泽红假单胞菌的碳源、氮源、培养基主要成分配比及降氨氮作用进行了研究,为该菌株的大规模培养及运用营养生态学的基本原理调节光合细菌的生长、提高其净化水质的效果提供了理论基础. 1材料与方法 111实验材料 11111菌种 沼泽红假单胞菌PSB-J030323:由集美大学生物工程学院微生物与发酵研究室从厦门集美附近的虾池中分离获得. [收稿日期]2006-03-31 [作者简介]蔡慧农(1957-),男,教授,主要从事生物工程方面的研究.通讯作者:苏文金(1956-),男,教授,博士生导师,从事海洋微生物生物活性物质研究.
鸡枞菌之栽培简介
鸡枞菌之栽培简介 This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020
鸡枞菌栽培介绍 一、介绍 鸡枞菌隶属担子菌亚门，层菌纲，蘑菇目，鹅膏科，蚁巢伞属，是着名的野生食用菌之一。其肉质鲜嫩、香味浓郁，味道鲜美，具有益胃、清神、治痔、治疗风湿病等功效，颇受国内外消费者青睬，具有极大的开发价值。由於鸡枞菌需与土栖性白蚁共生的特殊生活条件，人工驯化历尽艰辛。然而在大陆，鸡肉丝菇人工栽培已初获成功。 [学名] Termitomyces eurrhizus(Berk.) Heim [别名]鸡肉丝菇、桐菇、鸡菌。鸡菌、鸡枞、伞把菇、三坛菌。日本人称为姬白蚁菌。 [习性]约在5-8月间，气温於26℃以上时可於黑翅土白蚁(Odontotermes formosanus)的旧蚁巢上发现。 [分布] 江苏、浙江、福建、江西、湖北、湖南、广东、广西、海南、四川、贵州、云南、台湾、西藏等地。 (一)形态特徵 鸡枞菌多数群生，3～10～100支不等，子实体初期菌盖呈圆锥状至钟形，後伸展，有时边缘翻起，中央具有一乳突笠状至宽圆锥形，直径3～33厘米，浅土黄色或灰褐色，边缘近白色，表面光滑，老熟後辐射状开裂。菌肉厚，白色； 菌褶稠密，不等长，白色，老後变成微黄色，宽5～15毫米，与菌柄弯生或近离生：菌柄近圆柱形，长7～19厘米，粗1～2厘米，白色，肉实，基部膨大具有褐色细长假根，一般长11～27厘米，最长假根可达70～80厘米。 图1. 鸡枞菌之形态 图2. 鸡肉丝菇与白蚁巢 (二)鸡枞菌与白蚁的关系： 鸡枞菌是与白蚁共生的真菌，其共生关系主要可从两方面探讨： 1.白蚁筑巢、管理真菌花园以抑制鸡肉丝菇之外的其它真菌过度生长。另外， 白蚁粪便含有大量氨基酸和蛋白酶，可为菌丝体生长和子实体生成提供氮源 和营养。 2.白蚁取食活菌丝体，并在白蚁体内体内分泌出多种酶，有助於白蚁将吞食的 植物残体进行消化、排泄；又白蚁的活动和繁殖可将鸡枞菌之担孢子得以传 播。 图3. 鸡枞菌与环境互动示意图 图4. A、长在野地的鸡枞菌子实体。B、由黑翅土白蚁的地下巢穴中取出约13 公分宽 的真菌花园。C、用显微镜放大真菌花园的一小部份可见到晶莹剔透的小菌球 (fungal nodules)。D、在更高倍的显微镜下可见到小菌球内混合着圆球形细胞与透 明、长椭圆形的分生孢子。 (三)用途 1.食用：菌肉细嫩，气味香浓，味道鲜美。鸡肉丝菇营养丰富，尤其蛋白质的 含量较高，蛋白质中含有20多种氨基酸，其中人体必需的8种胺基酸种类 齐全。100g干鸡枞中，含蛋白质、碳水化合物、热量286千卡、灰分、钙 23mg、磷750 mg、核黄素、尼古酸。100克鲜鸡枞中含维生素C 2.药用：据《本草纲目》记载有益胃、清神、治痔的功效。 3.其他：菌丝可以深层发酵制造各种调味品和保健食品。
虫草的一种培养条件的研究
毕业设计（论文） 题目：虫草的一种培养条件的研究TITLE； a culture conditions of Cordyceps 学生姓名： 学号： 专业：生物技术 指导教师： 二零一二年六月
Design graduates (Papers) TITLE； a culture conditions of Cordyceps Name ： Number ： Major ： Instructor： June 2012
摘要 为研究蛹虫草菌丝生长最适生长等人工栽培过程中所必须的适宜氮源、碳源、温度、PH、矿质元素，比较观察了常见的氮源、碳源、温度、PH、矿质元素对菌种质量、菌丝生长状况、发菌情况的影响。结果表明，各种氮源、碳源、不同PH、不同矿质元素、在不同的温和温度下蛹虫草菌丝体都能生长，在蛋白胨、葡萄糖、24℃、PH6.7、磷酸二氢钾加硫酸镁组合下生长最佳。 关键词：蛹虫草；人工栽培；氮源；碳源；温度；PH；矿质元素
ABSTRACT Cordyceps militaris growth optimum growth must be in the artificial cultivation of the process of suitable nitrogen source, carbon source, temperature, PH, mineral element comparative observation ofcommon elements of nitrogen, carbon source, temperature, PH,mineralstrain the quality of mycelial growth conditions, made thesituation in bacteria. The results showed that the nitrogen source,carbon source, different the PH, the different mineral elements in themoderate temperature mycelial can grow, pepton e, glucose, 24 ° C,PH6.7, potassium dihydrogen phosphate and grown undermagnesium sulfate combination. Keywords: Cordyceps militaris; artificial cultivation; nitrogen; carbon source; temperature; the PH; mineral elements
光合细菌分离及培养条件研究报告
光合细菌M-01的分离及培养条件研究 [摘要]从湛江市霞山区海滩表层污泥中富集分离出红假单胞菌属光合细菌M-01,对其培养条件进行了初 步探讨,结果表明:菌株生长温度为30e时,最适培养光照度为3 000 lx。培养基正交实验结果表明其最优 培养基配方为:氯化铵2 g,磷酸氢二钾0.2 g,乙酸钠4 g,碳酸氢钠2 g,氯化钠1 g,酵母膏0.15 g,硫酸镁 0.2 g,T.M储液少量,蒸馏水1 000 mL。其中乙酸钠为最大影响因子。 [关键词]光合细菌(PSB>。分离。培养。正交实验 光合细菌(Photosynthetic bacteria>是一类光合自养型古老细菌,具有较强的分解有机物特性,光合 细菌作为水质净化剂广泛应用于水产动物如一些经济鱼类、虾蟹、贝类的养殖和育苗中[1~4]。在生产上有 意义的红螺菌科包括红螺菌属、红假单胞菌属和红微菌属[4]。现已有学者对红假单胞菌的分离、鉴定、培 养特性及保藏做了研究[5~7],但还没有关于其营养条件优化的报道。笔者从海洋环境中分离到了光合细 菌M-01,采用正交实验方法进行了培养条件优化的研究。现将结果报告如下。 1 材料与方法 1.1 材料 (1>待分离材料取广东省湛江市霞山区海滩表层污泥。 (2>培养基使用红螺菌科富集培养基作为富集分离基础培养基[8]。 1.2 方法 (1>菌株的分离筛选方法取污泥10 g,装入500 mL细口无色玻璃瓶中,加入富集培养液至满,盖上 瓶盖,隔绝空气,于30e, 3 000 lx光照下进行富集培养3~4 d,培养液呈绛红色后,取富集培养菌液1 mL,转接入培养液中,重复以上操作2次,然后采用改良的Hungate厌氧培养技术>>>柱滚管法[9]进行 分离纯化,用分离培养基的琼脂柱穿刺培养后保存。 (2>细胞色素光谱吸收峰值测定方法培养物离心后洗涤,将细胞悬浮于60%的蔗糖溶液中,采用 722S分光光度计扫描,波长范围为340~1 000 nm。 (3>生长量的测定为比较不同培养条件下(光照、接种量、营养条件>培养物生长量的差别,采用 722S分光光度计检测培养物D660 nm值。 (4>光照度对菌株生长影响的测定将已接种的光合细菌培养液于温度30e,光照度分别为 2 000、 3 000、 4 000、 5 000、 6 000 lx下培养3 d,每组3管,用722S分光光度计测定培养物菌液光密度D660 nm(用
鸡纵菌栽培技术要点
鸡枞菌栽培技术要点 鸡枞，又名鸡菌、鸡肉丝菇、伞把菇、三坛菌等，日本人称为姬白蚁菌。鸡枞菌隶属担子菌亚门，层菌纲，蘑菇目，鹅膏科，蚁巢伞属，是我国云、贵、川等省区最著名的野生食用菌之一。其肉质鲜嫩、香味浓郁，味道鲜美，具有益胃、清神、治痔、治疗风湿病等功效，颇受国内外消费者青睬，具有极大的开发价值。由于鸡枞菌需与土栖性白蚁共生的特殊生活条件，人工驯化历尽艰辛。通过我国广大食用菌科研工作者的多年努力，鸡枞菌人工栽培已初获成功。现将鸡枞菌的生物学特性及栽培技术要点介绍如下： 一、形态特征 鸡枞菌多数群生，3～10～100支不等，子实体初期菌盖呈圆锥状至钟形，后伸展，有时边缘翻起，中央具有一乳突笠状至宽圆锥形，直径3～33厘米，浅土黄色或灰褐色，边缘近白色，表面光滑，老熟后辐射状开裂。菌肉厚，白色；菌褶稠密，不等长，白色，老后变成微黄色，宽5～15毫米，与菌柄弯生或近离生：菌柄近圆柱形，长7～19厘米，粗1～2厘米，白色，肉实，基部膨大具有褐色细长假根，一般长11～27厘米，最长假根可达70～80厘米。 二、生物学特性 1．温度与湿度菌丝生长、原基分化适温为12～24℃，最适温为20℃；培养料含水量65%左右。子实体形成温度为25～35℃，最适温25～30℃；子实体生长发育期空气相对湿度85％～95%。 2．光照与空气菌丝生长阶段不需要光线；子实体的形成和发生均对光照和空气要求不严，且能抗高浓度二氧化碳。子实体开伞是则需要一定的散射光和充足的氧气。 3．酸碱度鸡枞菌适宜偏酸性生态环境。要求培养料及覆土材料PH值在4～5，最适PH值为4.5。 4．鸡枞菌与白蚁的关系鸡枞菌是与白蚁共生的真菌。一方面，白蚁建筑蚁巢、为鸡枞菌生长提供营养，为子实体的形成和发生创造条件；另一方面，白蚁取食鸡枞菌的活菌丝体，两者互助互利，同栖于一个生活环境，白蚁取食的鸡枞菌的活菌丝，在白蚁体内体内分泌出多种酶，有助于白蚁将吞食的植物残体进行消化，并排出大量的粪便。其粪便含有大量氨基酸和蛋白酶，为鸡枞菌的菌丝体生长和子实体生成提供氮源和营养。白蚁的活动和繁殖又将鸡枞菌担孢子得以传播。人工栽培可取白蚁巢土。 三、菌种生产 1．母种制作培养基配方：去皮马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂20克、白蚁巢浸出液1000毫升（白蚁巢土250克于1200毫升水中煮沸5分钟或浸泡48小时，取滤液1000毫升）。制作方法按常规。 2．原种和栽培种制作培养基配方：①木屑78%，麸皮20%，白糖和石膏各1%。②阔叶树落叶40%，木屑35%，米糠22%，过磷酸钙、白糖、石膏各1%。③棉籽壳45%，木屑30%，麦麸22%，白糖1.5%，碳酸钙1%，硫酸镁0.5%。各配方加蚁巢滤液120%～140%（含水量65%左右）。制作方法按常规。 四、栽培要点 1．栽培季节安排当气温稳定在12～24℃之间时，可安排制袋，经40～60天培养菌丝长满袋后植入土中。此时气温巳回升至25℃以上，为最佳催蕾出菇季节。 2．培养基的制备①堵养基配方：木屑75%，麸皮20%，石膏1.5%，白糖1%，白蚁巢土3%，水140%。②配制方法：将配料分别称量后翻拌均匀、堆闷2小时后检查，含水量约65%左右，即用手抓培养料紧握指缝间有水珠形成却不下滴为度。③装袋接种：用17×
铜绿假单胞菌1
1．简述 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa），习称绿脓杆菌，为假单胞菌属菌种，广泛分布在土壤，水及空气中，故可通过环境和生产的各个环节污染药品，本菌是常见的化脓性感染菌，由于本菌对许多抗菌药物具有天然的耐药性，国内外药典均将铜绿假单胞菌列为检查项目之一。 铜绿假单胞菌按增菌，分离、纯培养、革兰染色、镜检及生化试验等步骤进行检验。 2. 仪器、设备和用具（见大肠埃希菌2） 3. 试液、指示液 3.1 0.9%无菌氯化钠溶液或磷酸盐缓冲液。 3.2 pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液。 3.3 1%盐酸二甲基对苯二胺试液。 3.4盐酸试液 3.5 氯仿（三氯甲烷） 4.培养基 4.1营养肉汤培养基。 4.2胆盐乳糖(BL)培养基。 4.3营养琼脂培养基。 4.4溴代十六烷基三甲胺。 4.5绿脓菌素测定用培养基(PDP琼脂)。 4.6明胶培养基。 4.7硝酸盐胨水培养基。 5.对照用菌液 铜绿假单胞菌[CMCC（B）10104]营养琼脂斜面培养物少许，接种至5ml营养肉汤培养基内，于36℃±1℃培养18~24h后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至1:106，使对照菌加入量含10~100cfu/0.1ml，菌数测定在做阳性对照实验的同时用营养琼脂浇碟或平板涂布经培养后计数确定。 6.操作方法
6.1供试品的取样量（见细菌、霉菌和酵母菌计数5.3）。 6.2供试液的制备：（见细菌、霉菌和酵母菌计数7）；（大肠埃希菌6.2）。 6.3增菌培养 取胆盐乳糖培养基2份，每份100 ml，1份加入1：10供试液10ml（相当于供试品1g或1ml）。另1份加入与供试液等量的稀释剂作阴性对照。于36℃±1℃培养18~24h（必要时可延至48 h）。阴性对照菌应无菌生长。 6.4分离培养 轻轻摇动上述增菌培养液，以接种环沾取1~2环培养液（如有菌膜应挑取之），划线接种于溴代十六烷基三甲胺琼脂平板，于36℃±1℃培养18~24h。铜绿假单胞菌在该培养基平板上的典型菌落为扁平、圆形或无定形、边缘不齐，光滑湿润，呈灰白色，周边略呈扩散现象，在菌落相邻处常有融合现象。菌落周围常有水溶性蓝绿色素扩散，使培养基显蓝绿色，但亦有不产色素的菌株。菌落还有粗糙型和粘液型等，应注意挑选。 6.5纯培养 供试品分离平板生长6.4所述典型菌落或呈疑似菌落时，以接种针轻轻接触单个菌落的表面中心，沾取培养物，应挑取2~3个疑似菌落，分别接种营养琼脂斜面，培养，作以下检查。 6.6革兰染色镜检(见SOP-UIS 08 00) 6.6.1革兰染色。 6.6.2镜检结果。 铜绿假单胞菌为革半阴性、无芽孢杆菌，单个，成对或成短链排列。 6.7生化试验 用铜绿假单胞菌[CMCC（B）10104]做生化试验的阳性对照株。 6.7.1 氧化酶试验 取一小块白色洁净的滤纸置平皿内，以无菌玻璃棒挑取营养琼脂斜面培养物少许，涂在滤纸上，随即滴加1滴新配制的1%二盐酸二甲基对苯二胺试液，在30s内，纸片上的培养物出现粉红色，逐渐变为紫红色，即为氧化酶试验阳性反应。若培养物不变色或仅显粉色为阴性反应。 6.7.2 绿脓菌素试验 取营养琼脂斜面培养物接种于绿脓菌素测定用培养基（PDP）斜面上，36℃±1℃培养24h后，观察斜面有无色素，如有色素，在试管内加氯仿3~5ml，以无菌玻棒搅碎培养基并充分振摇。使培养物中的色素完全萃取在氯仿液内。静置片刻，待氯仿分层，用吸管将氯仿移至另一试管中，加入盐酸试液（1mol/L）约1ml，振摇后静置片刻，如在盐酸液层内出现粉红色、即为阳性反应，无粉红色出现为阴性反应。本试验可用未接种的PDP琼脂培养基斜面作阴性对
沼泽红假单胞菌
沼泽红假单胞菌 沼泽红假单胞菌，是地球上最古老的具有光能合成体系的原核生物，沼泽红假单胞菌是广泛自然界的微生物，是一类易广能为能源，利用自然界中的有机物、硫化物等为营养体，并能进行光合作用的生物。在生物学分类中属于真细菌纲、红螺菌目红螺菌科、红假单细胞菌属 。当前广泛应用于以下几个方面，○1高浓度工业有机废水的处理及资源化；○2水质净化剂，水产养殖的调控及促进健康生长；○3高营养饲料添加剂；○4农业生产中的高效活性菌肥。 沼泽红假单胞菌，别名：红假菌，是研究和应用较为广泛地一种光合细菌，属于外硫红螺菌科红假单细胞菌属，年幼单个的细胞呈杆状到卵形偶见稍弯，细胞直径0.6-0.9um,极生鞭毛运动或不运动，生长有极性，不对称出芽分裂。革兰氏染色阴性。厌氧液体培养物最初呈淡红色，后来变成红至褐红色，老培养物为暗棕红色。好氧培养物无色到粉红色。光能异氧菌，兼性好氧。可以在光下营厌氧生活，或在黑暗下好养生长。大多数菌种能长在洋菜平板或斜面上，虽然最初分离时，许多菌株表现对氧敏感，能在有简单的有机底物和碳酸氢钠及以对-氨基苯甲酸盐为生长素的无机盐培养基上生长。有的菌株还需要加入生物素。酵母膏有明显刺激生长的作用。PH范围，5.5-8.5；脂肪酸在PH7.0以下会抑制生长。最是生长范围30-37℃。作为碳源或光合作用的电子供体的底物，乙醇，脂肪酸，C4二羧酸，氨基酸，苯甲酸盐，环己烷羧酸，甲酸盐，分子氢和硫代硫酸盐只能在少量酵母膏时才能利用。不利用单糖类和糖醇类，硫化物。光合色素为叶绿素a、h和胡萝卜素。最佳生长方式是利用各种有机化合物作碳源和电子供体进行光照厌氧。厌氧条件下以氢、硫代硫酸硫酸钠、硫化氢等做电子供体可光自养生长。G+Cmol%为64.8-66.4.并具有适应性强，能耐受高浓度的有机废水和较强的分解转化能力，对酚、氰等毒物也有一定的耐受和分解能力等特点可用于水质净化、污水处理、饲料级微生物添加剂等。在琼脂培养基上培养，菌落形态为草帽性或圆形，表面光滑，少隆起，边缘整齐，棕红色显微镜下观察形态为短杆状或卵圆形，款0.5um-0.9um，长1.2um-2.0um，无芽孢无荚膜，单极鞭毛，可运动。革兰氏染色阴性。 一、实验目的 应用沼泽红假单胞菌的生理生化和生态学的特点，从自然环境中分离沼泽红假单胞菌，并掌握微生物分离纯化的基本方法。 二、实验原理 将待分离的菌落接种于培养基，然后进行反复的纯化，最后观察菌落的形态，按照细菌鉴定手册鉴定；按所需碳源、氮源、磷酸盐、酵母膏等因素进进行正交设计，优化出最佳的培养基配方，分离与纯化得到一株红红螺茵科沼泽红假单胞菌 三、实验器材和用品
一株沼泽红假单胞菌对氮磷的同化能力
一株沼泽红假单胞菌对氮磷的同化能力 摘要:采用单因素和正交试验研究了不同营养成分对一株沼泽红假单胞菌氮磷同化能力的影响?结果表明,KH2PO4对沼泽红假单胞菌同化氮磷的能力有显著的影响?在同等发酵生物量的情况下,当NH4Cl为0.05 g/L?KH2PO4为1.40 g/L?酵母抽提物为1.00 g/L时,可使沼泽红假单胞菌的氮磷同化率分别由原来的32.51%和5.98%提高到48.02%和7.76%? 关键词:沼泽红假单胞菌;浓度梯度;生物量;氮磷同化 The Nitrogen and Phosphate Assimilating Capacity of a Rhodopseudomonas palustris Strain Abstract: The effect of different nutriednt types on assimilative capacity to nitrogen and phosphate of a Rhodopseudomonas palustris strain was studied through single element and orthogonal experiments. The results showed that KH2PO4 was a notable factor affecting the assimilative capacity of this bacterium to nitrogen and phosphate. In condition of same fermented biomass, the assimilation efficiency of R. palustris for nitrogen and phosphate could raise up to 48.02% and 7.76% instead of 32.51% and 5.98% respectively, when the content of NH4Cl was 0.05 g/L, KH2PO4 was 1.40 g/L and yeast extracts was 1.00 g/L. Key words: Rhodopseudomonas palustris; concentration gradient; biomass; assimilation of nitrogen and phosphate 目前,沼泽红假单胞菌被广泛应用于海水?淡水鱼类?虾类及贝类等的养殖和育苗,它能将水体中的有机质和氮磷等物质同化为菌体成分存在于水中,同时消解硫化物[1],减少水体污染物,减少有毒分解产物[2,3]?沼泽红假单胞菌还能与异养微生物共同作用,高效率地降解废水中的有机物,同时还能调节水体的pH在适宜的范围内,增加水体中的溶解氧含量[4]?有学者曾对沼泽红假单胞菌的氮磷代谢生理特性进行了研究,相关文献报道沼泽红假单胞菌具有降氮除磷的能力[3,5],固定化的沼泽红假单胞菌对废水中氮磷的去除率可以分别达到61.9%和73.0%[6]?但对于沼泽红假单胞菌同化氮磷适宜条件的研究相关报道较少,而且也不是很全面?为此,对保藏的一株沼泽红假单胞菌的氮磷同化能力在实验室条件下进行了初步研究? 1 材料与方法 1.1 试验材料 1.1.1 菌种沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)由华中农业大学生命科学技术学院发酵工程室保藏?
生物饵料培养学
绪论 1.生物饵料特指经过人工筛选的、可进行人工培养的、适合养殖对象食用的优质的饵料生物。生物饵料可分为植物性生物饵料（光合细菌及单细胞藻类）和动物性生物饵料（轮虫、卤虫、枝角类等）两类。 2.饵料生物是指生活在海洋、江河、湖泊等水域中，可供水产动物食用的各种水生微生物、动、植物，如：细菌、酵母、单细胞藻类，轮虫，卤虫、等。 3.生物饵料培养学是主要研究生物饵料的筛选、培养及其营养价值评价的一门应用学科。 4.生物饵料培养学的主要内容和任务：生物饵料的筛选；生物饵料规模化或大量培养技术研究；生物饵料的营养价值评价。 5.优良生物饵料所应具备的条件：①生物饵料的个体大小必须适合养殖对象的摄食；②生物饵料在水中的运动速度与在水层中的分布情况，应便于养殖动物的摄食；③生物饵料的营养价值高，容易被养殖对象消化吸收；④生物饵料及其代谢产物无毒或毒性小，不危及养殖对象的健康；⑤生物饵料的生命周期短，生长繁殖迅速；⑥生物饵料对环境的适应能力强，易于大量培养。 6.生物饵料的优点：①对养殖水体的水质影响较小，且有改善水质的作用；②营养丰富，含未知的生物活性物质，能满足水产动物的营养需求；③规格多样，满足养殖对象不同生长阶段的具体需求； ④容易被消化，自身含消化酶，可弥补幼体消化能力的不足；⑤可获得性佳。 7. 什么是清水育苗和绿水育苗，为什么绿水育苗得到广泛认可？ 第二章光合细菌的培养 1. 光合细菌是一大类在厌氧条件下进行不放氧光合作用的细菌的总称。其最本质的特点是能在厌氧和光照条件下进行不产氧的光合作用。 2. 水产上使用的光合细菌多为红螺菌科的菌种。水产上应用价值大的红螺菌科的红假单胞菌属 3. 光合细菌的色素主要有菌绿素a，b，c，d，e及类胡萝卜素。菌绿素是光合细菌进行光合磷酸化，将光能转变成化学能的媒介，而类胡萝卜素的主要作用是捕获光能（天线色素）及起光氧化的保护剂作用（防止菌绿素受光氧化损伤）。 4. 光合细菌的色素主要存在细胞内的载色体或绿色包囊中，载色体或绿色包囊是光合细菌进行光合磷酸化的部位（细胞器）。 5. 载色体存于与红螺菌科和着色菌科，由细胞膜陷入细胞质内而形成，并与细胞膜相连。绿色包囊存在于绿杆菌科和绿色丝状菌科，分散附着于细胞膜下面，是一个独立的球形细胞器。 6. 光合细菌菌种的分离的步骤：（1）采样。根据光合细菌生长所需的条件，有选择的采集含光合细菌的水样和土样。一般在有机物污染严重，缺氧的环境中采样；（2）富集培养。光合细菌分离成功的关键，在于选择适宜的富集和分离的培养基，提供符合光合细菌生长需要的厌氧环境，适宜的温度（25--35℃），一定的光照（5000—10000lx）。一般采用液体富集培养基，重复多次富集培养；（3）分离纯种。将富集后的菌液进行固体培养基涂布或划线培养，挑取单菌落，重复多次分离，可得纯培养。
微藻培养条件研究
微藻培养条件浅析 摘要:微藻利用光和CO 合成蛋白质、糖类、脂类以及色素等大分子物质并放出O2，在人 2 类食品、保健、医药、环保和生物炼制领域具有广阔的应用前景。本文针对目前微藻培养中存在的生产成本高、产率低的问题，主要从营养盐方面入手,浅析了碳、氮、磷等营养元素对微藻生长的影响，并在此基础上，概述了开放式及封闭式两种微藻培养系统。 关键词：微藻；营养盐；培养系统 1引言 藻类是地球上最早进行光合作用的生物体，具有太阳能利用效率高、适应环境能力强等特点。微藻细胞富含蛋白质、多糖、脂类以及色素等，在食品、饲料、医药、精细化工及染料领域己得到广泛的应用。目前，由于培养技术不成熟导致的生产成本高、效率低是限制微藻产业化培养的主要因素。高效、低成本、规模化的微藻培养技术，是实现微藻产业化培养的关键。降低微藻生产成本主要有两种途径:一是降低培养原材料成本，二是提高产量。营养盐成本占微藻培养原料成本比重很大，是影响微藻生长及产物积累的重要因素。在微藻培养中，通过优化营养盐的种类，监控培养中营养盐的水平，能够提高藻细胞或目标产物的产量，同时提高营养盐的利用率，是高效、低成本、规模化微藻培养的基础。 2微藻概述 微藻是指一些微观的单细胞群体，是最低等的、自养的水生生物。微藻能够利用阳光和CO2进行光合作用，合成有机物质并释放出O2，是自然界中光合效率最高、生长最为迅速的原始生物种类之一，其种类繁多，分布广泛。微藻富含蛋白质、氨基酸、多糖、维生素、不饱和脂肪酸和色素等多种高附加值的生物物质，可以概括为以下四类:蛋白质、糖类、脂类、核酸及各种矿物质[1]。不同种类的微藻，各种组分的含量不同。 3营养盐对微藻生长的影响 碳、氮、磷等营养元素是微藻细胞合成的基础。微藻光合作用的底物为CO2和水，产物除了糖类之外，还合成蛋白质、核酸及脂类等一系列生物活性物质，因此，需要氮、磷等元素的参与。碳源、氮源、磷源以及一些微量元素的种类和供应水平，在一定程度上影响着微藻光合作用的能力和水平，从而直接影响微藻的生长。营养盐的形态会影响微藻的生长。Chu 等[2]分别在BBM培养基中添加0.1%的乙酸钠、柠檬酸钠、碳酸氢钠作为碳源培养卷曲纤维藻（Ankistrodesmus convolutus），发现添加乙酸钠作为碳源有利于藻细胞的生长，而添加柠檬酸钠和碳酸氢钠作为碳源对藻细胞的生长没有促进作用。Berman等[3]采用N03-N，NH3-N 以及次黄嘿吟、尿素、赖氨酸等有机氮源培养微藻，发现当使用尿素作为氮源时，蓝藻的生长最快且氮源得率系数最高。 许多研究表明，培养基中碳源、氮源、磷源的水平是影响微藻营养组成的主要因素。微藻对碳源的需求量很大，碳源主要影响藻细胞生长和脂类、糖类等物质的积累。Tang等[4]研究了不同CO2浓度对斜生栅藻(Scenedesmyus obliquus)和蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)总脂含量的影响，发现高CO2水平(30%～50%)有利于总脂和不饱和脂肪酸的积累。然而，Chen等[5]研究异养小球藻(Chorella sorokiniana )在不同的碳氮比(C/N )下细胞内总脂含量和脂肪酸组成时发现:碳源限制或者氮源限制均能促进细胞内油脂合成，且前者更为
鸡枞
山野菜鸡枞的开发利用 【综述】鸡枞又名鸡宗、鸡松、鸡脚菇、蚁枞等，是一种美味山珍，称之为菌中之王，其肉肥硕壮实，质细丝白，味鲜甜脆嫩，清香可口，可与鸡肉媲美，故名鸡枞。它含有钙、磷、铁、蛋白质等多种营养成份。鸡枞吃法很多，生熟炒煮作煲汤皆宜，滋味均极鲜美。其安全、营养、无公害,是出自最佳生态坏境无污染的食品。从生态坏境到原料的生产、加工、包装、储运等都经过卫生监督、环境监测等机构的严格监测。 （一）鸡枞简介 【学名】Collybia albuminosa （Berk.）Petch 【分类】真菌类担子菌纲伞菌目伞菌科 【别名】鸡枞蕈、鸡菌、鸡堫、鸡宗、鸡肉丝菇、伞把菌、鸡枞菌、鸡脚麟菇、蚁枞、伞把菇等。 【科属】真菌植物门真菌鸡的子实体 【形态特征】根据鸡枞的颜色和形态特点，分为黑皮、白皮、黄皮、花皮等许多类型。味道以黑皮（青皮）鸡枞最好。此外，还有鸡枞花等真菌的子实体，味道同鸡枞一样鲜美。田雯在《黔书》中写道："鸡枞菌，秋七月生浅草中，初奋地则如笠，渐如盖，移晷纷披如鸡羽，故名鸡，以其从土出，故名枞。"鸡枞是一种野生菌的名称。知道这个的，多半是云贵两省的人。7、8月份雨天过后，鸡枞就出来了，在黔西南及黔西南周边的地区是最多的，这个季节的兴义，菜市场里一定有山民用南瓜叶子托着一包一包的新鲜鸡枞叫卖，或是在产鸡枞的地方，省道国道边都会看到当地的山民将从山里采到得鸡枞摆在路边叫卖，一束一束地，有粗有细，形如鸡腿，颜色一般为棕灰，菌脚还糊着泥，这主要是为了保鲜。黔西南的鸡枞又分独鸡枞和窝鸡枞，独鸡枞就是生长出来只有单独的一朵的那种，而窝鸡枞生长则是成片的，故当地人管这种鸡枞叫窝鸡枞。独鸡枞不但难以寻觅而且数量稀少，又独鸡枞要比窝鸡枞香，所以独鸡枞比窝鸡枞价格更高，但是无论独鸡枞还是窝鸡枞煮成了汤以后，那一口鲜甜没什么能比，哪怕是真正的鸡汤。古人赵翼曾说鸡枞：“无骨乃有皮，无血乃有肉，鲜于锦雉膏，腴于锦雀腹”这个形容一点也不夸张。独鸡枞最好的还是伞盖开繁以后带有一种叫做鸡枞虫的那种，这时候的鸡枞老远就能闻到一种特殊的香味，这种鸡枞若是拿来煲汤的话，那就是极品中的极品了，但由于此种独鸡枞的保鲜时间极短，所以少有人能够品尝得到。无论独鸡枞还是窝鸡枞都不易保鲜，一旦被摘下来，味道就迅速坏了。如果当年杨贵妃喜欢吃的是鸡枞，那一定不会有“一骑红尘妃子笑”之说，鸡枞比荔枝更不容易保鲜，她哪里笑得起来！
胶质芽孢杆菌的培养条件研究
科技创新基金项目申报表项目名称：胶质芽孢杆菌培养条件的研究
一、项目基本情况 项目名称胶质芽孢杆菌培养条件的研究 项目类别自然科学类学术论文 研究期限5个月申请经费500元 项目简介 胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)是一种能分解硅酸盐矿物的细菌，也称为硅酸盐细菌。本项目通过从硅酸盐菌肥中分离获得试验菌株，通过形态鉴定，筛选获得胶质芽孢杆菌；利用单因子实验探讨培养碳源和氮源、温度、pH、装液量、不同接种量等条件对胶质芽抱杆菌培养的影响；分析比较得到胶质芽孢杆菌的最佳培养条件。为胶质芽孢杆菌菌肥的生产提供科学参考。
二、立论依据（项目的意义、现状分析、参考文献等） 项目的研究意义 胶质芽孢杆菌能够分解含钾硅酸盐矿物，因此以此菌剂为主要活性成分的生物钾肥在国内外被广泛地应用[1-4]。研究表明胶质芽孢杆菌能够分解土壤中的硅酸盐矿物，释放被矿物晶格包裹着的K离子和SiO2[5]。而且，土壤矿物K 一般占土壤全K的90 % -98 %[6]，实验也证明胶质芽孢杆菌对棉花等植物有明显的增产效果[7]。因此开发以胶质芽孢杆菌为主要成份的生物K肥具有很大的应用前景。作为微生物肥料，其在根际的定殖及在作物生长周期保持较多数量的成活，这是人工接种菌剂能否有效提高作物产量的重要因素。此课题通过对胶质芽孢杆菌的培养条件的研究，筛选出最适于胶质芽孢杆菌生长的条件。 通过对胶质芽孢杆菌发酵培养基的优化试验，我们可以找出最佳的适合于胶质芽孢杆菌生长的液体培养环境，提高原料的利用率，增加效益。对胶质芽孢杆菌生长条件改善之后，还能够为我们对于它的进一步研究提供很好的条件，如对矿物质的分解作用，处理活性淤泥[8]，处理污水，净化水质，多糖、有机酸和蛋白质等代谢产物的研究[9]等。 国内外现状分析 由于胶质芽孢杆菌在生产中的广泛应用，因此为降低成本，提高产量，许多人在菌体发酵方面进行了研究。李华的研究表明，在分别以葡萄糖、甘露糖、淀粉、蔗糖四种为碳源的培养液中细菌在葡萄糖中生长最快；在以鼓皮汁、豆饼粉汁、酵母膏、牛肉膏四种为氮源的培养液中，鼓皮汁为最佳氮源。另外他还认为金属离子、培养温度、pH、气液比也对菌株的生长有一定影响[10]。俄国学者Glukhova通过硅酸盐细菌在液体培养液中发酵实验发现，在以蔗糖为碳源，以铵盐为氮源时，代时最短，生物量最高[11]。Erygin则在接种前用磁场处理培养基，发现此处理后，经对照在生长速率、生物量方面均有较大增加[12]。Krinarii则发现芽孢杆菌核糖核酸酶的加入，会明显地促进营养细胞的生长和芽孢的萌发[13]。殷永娴的研究表明该菌为好氧细菌，摇床培养比静置培养的菌量多；在有氮培养基中的菌量明显多于无氮培养基，故生产菌肥应采用有氮培养基，而在淀粉培养基中可形成较多的芽孢，适于制干菌粉[14]。以上研究只涉及对培养基的碳、氮源的探究，未能从整个培养基的营养配比上进行探讨。本文通过从硅酸盐菌肥中分离筛选得到一株细菌，并通过单因子实验对其