动物源性成分

饲料中动物源性成分检测技术研究进展

摘要:

饲料安全与动物生产、环境污染和人类健康密切相关。动物废弃物进入饲料行业曾经弥补了蛋白质饲料不足的缺口,但却带来了新的问题。饲料中动物源性成分的定性或定量检测技术已成为国内外的研究热点，适用于各种样品、基于各种原理的方法和技术被开发出来。本文以组织学特征为基础的显微镜分析方法、以蛋白质和DNA为基础的免疫学和PCR分析方法、高效液相色谱法和近红外光谱法在动物源性饲料组分中的研究应用进展等方面做了综述,并对其发展趋势进行讨论。

饲料安全已与动物生产、环境污染和人类健康

密切相关。动物源性副产品因富含蛋白质、钙、磷等

营养成分而被应用于畜禽饲料中, 但现有的证据表

明, 在动物饲料中添加未经加热处理牛源性饲料或

感染过痒病因子的牛( 羊) 肉/ 肉骨粉( MBM) 后能够

引发和传播疯牛病( BSE)。

我国于1999、2001和2004年先后

下发了关于对动物源性饲料生产和管理的相关条例, 主要对反刍动物源性饲料组分、MBM、肉粉、骨

粉、血粉、动物内脏干粉和动物废弃物等使用做了严

格的规定。目前关于饲料中动物源性成分检测主要

以样品的组织学特性和品种特异性的生物标记物

( 如蛋白质、DNA和其他生物大分子等) 为对象, 其

中PCR技术发展迅速, 已逐步被世界各国采用。但

由于动物源性饲料组成上的复杂性, 单一的PCR技

术仍不能克服耗时、效率低和假阳性等问题。因此,

研究并建立一种( 套) 快速、灵敏、可靠的动物源性饲

料检测技术, 对于提高饲料质量、防止饲料掺假、控

制进口饲料安全和制订相关饲料法规等均具有重要

意义。

本文中动物源性成分

是指动物组织以及蛋和奶，包括肉类及其制品(含动物

脏器)、水生动物产品等，检测技术是指上述成分中蛋

白质和DNA等具有种间特异性物质的物种鉴定和含量分

析技术。该技术已成为保护消费者权益和安全的重要技

术手段。

动物源性成分检测技术通常建立在对样品蛋白质、

DNA、脂肪酸等分子结构、序列或组成特异性分析的

基础上。涉及的技术手段包括酶联免疫、聚合酶链式

反应、电泳、色谱、生物传感分析等。本文根据分

析对象对动物源性成分检测技术进行分类论述，讨论各

方法的优势与局限性及其发展趋势。

1. 1以组织学为基础的检测技术饲料显微镜分

析技术主要以组织学特性为基础, 借助立体显微镜

观察样品粗糙片段的形态学构造, 同时利用光学显

微镜观察细小颗粒的组织学构造, 从而区分不同组

织。显微镜技术以前主要用于产品品质认证( 纯

度) , 能够鉴别产品混合物中植物( 如面粉、香料和饲

料等产品) 或动物源性组分( 如颖苞、糊粉细胞、淀

粉、血块、骨碎片、羽毛碎片、毛发、肌肉纤维等) 。

BSE出现以后, 一些国家和研究机构利用饲料显微

镜技术结合沉淀分析能够检测混合饲料中动物源性

饲料组分, 检测精度可达0. 02%~ 0. 1%。该方法

主要过程如下: 样品粉碎到一定的粒度后, 利用组合

显微镜( 放大倍数可达400) 估计骨碎片与非骨碎

片( 肌肉碎片) 的比例。大部分的骨粉碎片通过沉淀

分析, 粉碎的样品悬浮在四氯乙烯中, 根据溶液的密

度区分颗粒( 闻伟刚等, 2004)（闻伟刚, 赵秀玲, 等. 进口饲料中牛、羊源成分的PCR同时检测

方法. 农业生物技术学报, 2004, 12(2): 167~169.）。沉淀物中, 骨刺部分

利用分级筛收集后称重, 最后计算动物源性组分的

总重量。目前欧盟官方已将饲料显微镜分析技术作

为检测动物源性饲料成分的方法, 并且制定了严格

的操作规程

, 可以区分反刍动物饲料中肉及肉骨粉、喷雾

血粉、家禽废弃物和鱼粉( Ronaldo等, 2004)（Ronaldo L, Sanches, Juarez F, et al. Inhouse validation of a

method for detection of animal meals in ruminant feeds by microscopy. Food Control, 2004, 1~8.）。

低倍镜下沉淀物的一般结构和颜色是鉴别肉骨

粉来源的第一信号。哺乳动物的骨碎片呈白色或淡黄

色, 禽类骨碎片的颜色发暗, 这些骨碎片都是不透明

的, 而鱼类骨碎片要比哺乳动物和禽类的透明。高倍

镜下可以看到哺乳动物的骨碎片呈椭圆形近似圆形,

根据骨碎片的品质与透明度的不同, 用导管有时也能

看到, 有时环行骨板的方向也能看到。与哺乳动物相

比, 禽类的骨碎片更加尖锐, 腺窝更圆, 用导管看不

到。鱼类的骨呈扁平状, 其陷窝为拉长的梭形, 连成网

状, 而且根据鱼的种类不同也呈现一定的多样性。这

些特征是最一般的特征, 在实际的检验中变化较大。

肉骨粉中会出现平滑肌或骨骼肌, 不管是哺乳动物、

禽类还是鱼类, 肌肉组织一般都被破坏成短的纤维,

其宽度依据处理的方法和动物的营养状况而不同。动

物肌纤维一般没有各自的明显特征, 肌纤维的出现与

否是判定饲料中是否出现动物源性成分的重要依据。

饲料中毛发、羽毛、蛋壳、鱼刺、鱼鳃的检出可以进一

步确定饲料中是否出现动物源性成分。欧盟已尝试通

过饲料显微镜学方法来进行定量测定。

饲料显微镜学方法具有样品制备量少、设备便

宜、简单易行的优点, 但该方法费时、费力, 对技术人

员的要求高, 结果与试验员的经验相关性很大。不同

样品中所含有动物源性成分的来源多样, 低倍镜下颜

色的重叠比较大, 高倍镜下骨陷窝的重叠性比较大。

这要求显微镜分析师达到较高的专业水平。因此, 迫切需要建立一套新的、合适的鉴定标准。

1 基于蛋白特异性的检测技术

1.1 蛋白分子立体结构特异性

基于蛋白的鉴别技术大多以蛋白分子立体结构特异

性为基础，应用抗原-抗体特异性结合的原理建立，通

过检测标记信号的有无或强弱来判断目标成分的有无或

多少。该类技术具有操作简单、特异性好、不需要大

型仪器设备的优点，容易操作，可以进行大规模检测，

其核心技术是特异性抗原和抗体的筛选与制备。骨骼肌

中的肌钙蛋白I(troponin I，tnI)具有高特异性和热稳定

性，是理想的抗原之一，Liu等

[1]（LIU Lihua, CHEN Furchi, DORSEY J L, et al. Sensitive monoclonal

antibody-based sandwich ELISA for the detection of porcine skeletal

muscle in meat and feed products[J]. Food Science, 2006, 71(1): M1-M6.）

以猪tnI为抗原制备了

两种单克隆抗体Mab 8F10和Mab 5H9，Mab 8F10能够

和所有的哺乳动物tnI而Mab 8F10只和猪tnI特异性反

应，用该组抗体开发的抗体夹心法能够检出鸡肉和牛肉

中掺杂的猪肉成分(检出限分别为0.05%和0.1%)、检出

大豆蛋白基料饲料中和肉骨粉中的肉成分(检出限分别为

0.05%和1%)，而且样品经过132℃、2h的高温处理后

不影响检测效果。

基于蛋白分子立体结构特异性的检测方法也有局限

性，蛋白抗原决定簇的立体结构会受到多种环境因素影

响而改变，当检测加工过的成分时其特异性和准确性会

大打折扣，此时需要有其他手段辅助检测[6]（van RAAMSDONK L W D, von HOLST C, BAETEN V, et al. New developments in the detection and identification of processed animal

proteins in feeds[J]. Animal Feed Science and Technology, 2007, 133(1): 63-83.）

1.2 蛋白或肽谱特异性

基于蛋白的鉴别技术不仅仅局限于ELISA法为代表

的免疫学方法，应用液相色谱(LC)、高效液相色谱

(HPLC)、毛细管电泳(EC)或二维电泳分析样品蛋白和短

肽组成特点也能实现对样品中动物源性成分种类的识

别。例如，Ashoor等

[7]（ASHOOR S H, MONTE W C, STILES P G. Liquid chromatographic identification of meats[J]. Journal Association of Official Analytical

Chemists, 1988, 71(2): 397-403.）

开发了能够定性检测多种肉类

成分和定量检测鸡肉- 火鸡肉混合物成分的LC技术。

1.3 免疫学方法

肉骨粉一般都要经过高温、高压处理, 在这

个过程中许多蛋白质都发生了变性, 失去了抗原性和

水溶性, 这就给检测带来了困难。为了使用免疫学方

法鉴定动物成分的种类, 必须选择合适的动物成分作

为抗原, 其中肌肉组织的蛋白质具有较高的价值。目

前已发现几种热稳定的蛋白质可以作为检测的目的

蛋白, 其中包括肌钙蛋白。免疫测定速度快、操作简单, 不需要对工作人员进行特殊的培训; 并且特异性高, 能特异性地检测动物肌

肉, 而不与其它动物成分发生反应。ELISA 方法由于具

有特异性和灵敏度高的优点, 被广泛应用于食品和饲

料中的肉类品种鉴别; 并且ELISA 不需要大型的科学

设备, 容易操作, 可以进行大规模的检测。

2 基于DNA序列特异性的鉴别技术

因

此，利用DNA分子序列特异性开发定性、定量检测食

品、饲料中动物源性成分的方法和技术定已成为该领域

的研究焦点和主流，也是多数国家检测方法标准中指定

的检测方法。

2.1 DNA杂交技术

Ebbehoj

[16] EBBEHOJ K F, THOMSEN P D. Species differentiation of heated meat products by DNA hybridization[J]. Meat Science, 1991, 30(3): 221-234.

和Thomsen

等应用

32

P-标记探针建立了检测生、熟牛肉中猪肉成分的DNA杂

交技术，同年开发了能够区分近亲物种成分(猴和人、

牛和绵羊或山羊)的条形-斑点杂交技术，检出限根据检

测对象亲缘关系的远近分布在0.01%～10%区间。

2.2 基于PCR的动物源性成分检测技术

2.2.1 PCR-电泳

用物种间高异性引物对样品中的DNA进行PCR扩

增后琼脂糖电泳分离，通过观察是否有特异性条带出现

便可判定样品中是否含有相应的物种成分。该方法灵

敏、便捷、准确，而且成本低廉，大量的具体方法和技术已被建立和开发，实现了对常见动物源性成分

(单一或混合物)的快速检测。

2.2.2 PCR-RFLP

限制性片段长度多态性(restriction fragment length

polymorphism，RFLP)是应用物种间同源基因上特定限

制性内切酶位点特异性来实现对样品中动物源性成分来

源的识别。此方法简单高效，无需设计物种特异性引

物，使用适合的通用引物即可，将扩增产物进行限制

内切酶反应，通过分析电泳图谱特征来判定物种来源，

但该方法适合鉴别单一成分样品，多物种混合物样品由

于电泳图谱较为复杂，分析难度较高，结果可靠性较

低。高琳等

[31] 高琳, 徐幸莲, 周光宏. 应用PCR-RFLP法鉴别肉制品中的猪和牛源性成分[J]. 南京农业大学学报, 2008, 31(2): 135-138.

建立了以动物线粒体DNA中Cytb区段保

守序列为靶序列的PCR-RFLP肉种检测方法，能从猪、

牛、羊、鸡、鸭、兔6 种生肉及高压猪肉、猪肉火

腿肠等7种热加工肉制品中鉴别出猪源性和牛源性成

分。

2.2.3 PCR测序

该方法是将特异性PCR反应得到的扩增产物分离纯

化后进行测序，并到基因组数据库(如http://www.ncbi.

https://www.wendangku.net/doc/8317023818.html,/)进行序列比对来确定待检样品所属的物种类

型，例如，Iijima等

[37] IIJIMA K, SUZUKI K, OZAKI K, et al. DNA analysis for identification

of food-associated foreign substances[J]. Journal of Food Quality, 2006,

29(5): 531-542.

建立了基于18S rRNA基因测

序的食品中动植物源性成分来源分析方法，Girish等

[38] GIRISH P S, ANJANEYULU A S R, VISWAS K N, et al. Sequence

analysis of mitochondrial 12S rRNA gene can identify meat species[J].

Meat Science, 2004, 66(3): 551-556.

建立了基于线粒体12S rRNA基因测序的鉴定方法。

2.2.4 随机引物的扩增

随机引物的扩增法(random amplified polymorphic

DNA-PCR，RAPD)使用非特异性引物，能与模板上多

个位点结合而不是与某一限制性位点特异性结合，经过

PCR扩增反应后可产生多个PCR产物，最有效结合的引

物在扩增过程中相互竞争而产生指纹，经过凝胶电泳可

产生物种特异性的图谱，以此来鉴定样品中的动物源性

成。RAPD的优点在

于无需知道分析对象的全基因组序列，但其局限性也很

突出，如只适合分析单一成分样品，而对分析多成分

混合物会有一定困难。

2.2.5 实时荧光PCR

实时荧光PCR技术(real-time fluorescent polymerase

chain reaction，RT-PCR)是一种在PCR反应体系中加入

荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个反应进程的

PCR技术，并可通过标准曲线对未知模板进行定量分

析。该技术的出现使物种鉴别的灵敏性和准确性都有所

提高，而且该技术无需进行电泳过程，避免了溴化乙

锭等有毒染料的使用，降低了实验对人体的危险系数。

其更大优势在于可通过设立外标物制作标准曲线实现对

样品中特定动物源性成分(DNA)含量的绝对定量，通过

分别加入特异性引物和通用引物实现特定成分的相对定

量，从而实现对肉类食品中掺假成分含量的测定和掺假

行为严重程度的判定。其缺点是检测成本较高，包括

仪器和实验耗材。

2.3 环介导等温扩增技术

环介导等温扩增技术

[56]

(loop-mediated isothermal

amplification，LAMP)是一种崭新的DNA扩增方法，与

普通PCR相比其最大的特点是利用具有链置换活性的

DNA聚合酶(如Bacillus stearothermophilus DNA

polymerase) 在65℃对样品中DNA进行等温扩增，而无

需进行温度变化循环，具有简单、快速、特异性强的

特点。Ahmed等AHMED M U, HASAN Q, HOSSAIN M M, et al. Meat species iden-tification based on the loop mediated isothermal amplification and elec-trochemical DNA sensor[J]. Food Control, 2010, 21(5): 599-605

[57]

开发出了基于环介导基因恒温扩增

(LAMP)和电化学芯片技术联用的动物源性成分生物传感

鉴定技术，分别能检出混合样品中20.33ng/μL的

猪肉成分，20.33ng/μL的鸡肉成分，以及78.68pg/μL

的牛肉成分。该技术为肉种鉴别技术小型化、便携化

合自动化开辟了新的途径。LAMP法也有局限性，由于

是链置换合成，不适合进行长链DNA的扩增，在产物回

收鉴定、克隆、单链分离方面的表现也不如传统PCR。

2.4 DNA指纹分析法

DNA指纹分析法也被用于动物成分分析。动物基因组中

存在大量的分散重复序列(

Interspersed Repeat Sequence

,

IRS), 并且是种间高度特异的。Buntijer 通过用哺乳动物中广

泛存在的分散重复序列的特异引物进行PCR扩增, 建立了从

牛到鸵鸟的30多种哺乳动物的DNA指纹

[ 8] Buntijer J. B. ,

et al.J.Ind. Microbiol. Biotechnol. 1998,21: 121～127

, 这种分析产生

20～60个条带的图谱。实验结果表明: 用这种方法对120℃加

热处理20min的动物肉类DNA样品进行检测所得到的指纹

结果, 与对同种动物完整DNA样品进行检测得到的指纹结果

相一致。

4近红外光谱方法

近红外光谱分析技术( Ne a r infra re d re fle c ta nc e

spe c trosc opy, NIRS) 是饲料界最广泛应用的技术之一,

可以用于饲料中动物源性成分的检测。NIRS 的原理

是饲料中的分子物质可以吸收不同波长的光线。其优

点是检测快速、不用有害的试剂、所需样品量少、非破坏

性检测、经济重复性好以及具有可以开发为商业化仪

器的潜力; 主要缺点是这项技术是间接的检测, 因此

需要大量样品的参考值来形成一个校正和参考模型。

现有饲料中动物源性成分检测方法有显微镜检

测、近红外漫反射光谱法等

DardenneP. Startfeed-strategies andmethods to detect and quantify mammalian tissues in feeding stuffs [M]. Namur:

EuropeanCommunities, 2005: 1~ 14.。由于动物源性成

分组成复杂, 单一的检测方法虽然各具特点但也存

在不同程度的局限性。鉴于此, 在不断完善各类单

一检测技术的同时, 开展不同检测仪器结合技术研

究, 以突破单一检测技术的局限, 一直是国内外学者

研究的热点和重要方向

[ 5] 卜登攀,王加启, 贺云霞,等. 动物源性成分检测技术研究进展[ J]. 中国畜牧兽医, 2008, 35( 2): 55~60.

。显微近红外( near-infraredmicroscopy, 简称NIRM)光谱分析技术是现

代分析仪器发展的重要突破, 它是将传统傅里叶变

换近红外光谱技术与光学显微镜检测技术有机结合

的产物, 基于变尺度的点模式获取不同样品单个颗

粒微区的近红外光谱进行分析, 从而检测精度得以

大幅度提高。应用显微近红外光谱分析技术检测饲

料中的动物源性成分, 在简化制样方法的同时避免

了单纯光学显微镜检测需人眼直接观测判断, 相比

近红外漫反射光谱法, 基于微区分析可获取饲料中单一组分的光谱, 使不同组分吸收峰差异更加显著,

有利于定性检测不同种属饲料成分, 同时有利于检

测精度的提高。

因此在选择动物源性成分的检测方法

时, 应考虑实验室的条件和检测需要, 选择合适

的方法。

总之，动物源性成分鉴定技术为保证食品安全、

保障消费者权益和保护野生动物提供了可靠的技术手段，该领域也将继续成为研究热点受到持续关注。

动物源性食品安全控制对策和措施(正式)

编订：__________________ 单位：__________________ 时间：__________________ 动物源性食品安全控制对策和措施(正式) Deploy The Objectives, Requirements And Methods To Make The Personnel In The Organization Operate According To The Established Standards And Reach The Expected Level. Word格式 / 完整 / 可编辑

文件编号：KG-AO-2917-26 动物源性食品安全控制对策和措施 (正式) 使用备注：本文档可用在日常工作场景，通过对目的、要求、方式、方法、进度等进行具体、周密的部署，从而使得组织内人员按照既定标准、规范的要求进行操作，使日常工作或活动达到预期的水平。下载后就可自由编辑。 一、广泛宣传，提高对畜产品安全重要性的认识 各级应加强宣传教育，全面提高全社会对畜产品安全的重要性认识，增强广大畜牧兽医工作者、兽药饲料生产者、养殖者和畜禽屠宰加工销售者的责任感和使命感。只有全民的认识提高了，才能自觉执行国家的法律法规，依法生产经营和使用，只有广大群众的共同参与，才能筑牢畜产品质量安全屏障。 二、健全法制，完善畜产品安全法律法规体系 解决畜产品安全的根本措施是健全和完善立法，严格执法。要针对当前畜产品安全方面法律法规少的实际，加快立法步伐。参考欧盟、美国等发达国家和地区的标准，尽快形成具有中国特色的畜产品安全法律体系，覆盖生产、加工、流通和消费各个领域，规

食品中多种动物源性成分检测实时荧光PCR法(BJS 201904)

附件4 食品中多种动物源性成分检测实时荧光PCR法 BJS 201904 1 范围 本方法规定了肉及肉制品中猪、驴、山羊、绵羊、牦牛、鼠源性成分检测的实时荧光PCR方法。 本方法适用于肉及肉制品中猪（Sus scrofa）、驴（Equus asinus）、山羊（Capra hircus）、绵羊（Ovis aries）、牦牛（Bos grunniens）、鼠源性成分的一种或多种成分同时定性检测。 注：本方法中鼠源性成分包括海狸鼠（Myocastor coypus）、小鼠（Mus musculus）、大鼠（Rattus norvegicus）、豚鼠（Cavia porcellus）和竹鼠（Rhizomy spruinosus）源性成分。 2原理 提取样品DNA，通过特异性引物探针进行动物源性成分的实时荧光PCR扩增，根据PCR 扩增反应中产物荧光信号及扩增曲线判定，实现对样品动物源性成分的定性分析。 3试剂和材料 除另有规定外，本方法所用试剂为分析纯或生化试剂，实验用水应符合GB/T 6682的要求。所有试剂均用无DNA酶污染的容器分装。 3.1检测用引物和探针 (a) 猪cytb基因检测用引物探针序列为： 5’端引物：5’-GCACTTTATCCTGCCATTCATCATT-3’ 3’端引物：5’-GTACAAGGATTAGTAGGATTAGT-3’ 探针：5’-FAM-CGCCCTCGCAGCCGTACATCTCCTA-BHQ1-3’ (b) 驴nad5基因检测用引物探针序列为： 5’端引物：5’-GCTAGCCTCATTATCAGTAT-3’ 3’端引物：5’-GTGATGAGGATACGTGCT-3’ 探针：5’-FAM-TCATATCATCAATCCTCAACACCCACA-BHQ1-3’ (c) 山羊cytb基因检测用引物探针序列为： 5’端引物：5’-CTTTATCCTCCCATTCATCATCA-3’ 3’端引物：5’-GAATTCCTGTGGGGTTGTTC-3’ 探针：5’-FAM-GCTCTCGCCATAGTCCACCTGCTTTTC-BHQ1-3’ (d) 绵羊cytb基因检测用引物探针序列为： 5’端引物：5’-CTCATGCTACTAGTACTATTTACG-3’

行业标准出口动物源性食品中动物种类的定性检测T-RFLP方法编制

行业标准《出口动物源性食品中动物种类的定性检测T-RFLP方法》 编制说明 一、任务来源 根据国家认证认可监督管理委员会2009年《关于下达2009年度出入境检验检疫行业标准制（修）订计划的通知》下达的编写任务通知（计划编号2009B134），由北京出入境检验检疫局负责《出口动物源性食品中动物种类的定性检测T-RFLP方法》的起草工作。 本标准是按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构与编写规则》的要求进行编写的。 二、标准编制的目的和意义 随着人们生活水平的提高和生活节奏的加快，人们对禽、肉、鱼等食品及其加工食品（如香肠、罐头等）的需求也在不断增加。对于一些凭肉眼难以辨认其来源的动物源性食品（尤其是经过加工的食品），某些商家在经济利益的驱使下，常常用比较廉价的动物品种替代比较昂贵的动物品种。现存比较常见的商业欺诈行为之一就是乱贴标签，标签上标明的原料成分与实际使用的原料成分不符。这种行为不仅损害了消费者的经济利益和健康，而且还有可能打乱正常的市场竞争秩序。 为了更好地保护消费者的身体健康，维护消费者的经济利益，也考虑到宗教信仰问题，世界各国都对食品标签的内容做了严格的规定。例如，在新加坡市场上，食品标签必须包括食品的品名（或对食品真实性的描述用语）和食品的成分，当食品由两种或多种成分构成时，对每一种成分应按它们的重量或所占比例给予恰当说明，其顺序应按照他们占有的重量百分比递减标示。我国的《预包装食品标签通则》（GB7718-2004）也对食品标签的具体内容作了明确规定。国家质检总局于早在2000年就颁布了《中华人民共和国进出口食品标签管理办法》。该办法第二章标签审核的第十一条明确规定“进出口食品标签审核的内容包括：标签的格式、版面以及标注的与质量有关的内容是否真实、准确”。对于乱贴标签现象，世界各国也在相关法规中作出明确规定。如瑞士《食品条例》(Food Ordinance)的第十九章中要求食品标签不允许欺骗消费者。我国的《预包装食品标签通则》（GB7718-2004）中也明确规定“食品标签的所有内容，不得以错误的、引起误解的或欺骗性的方式描述或介绍食品”。 法规已经明确规定食品必须加贴标签，而且食品标签不允许欺骗消费者。贯彻执行这类法规的条件之一就是食品监管机构必须具有判断食品标签是否存在欺诈行为的能力。对于动物源性食品而言，一个重要的判断依据就是检测其标签上标明的动物种类是否与实际使用的动物种类相符，即进行动物种类鉴定。因此，开展动物源性食品中动物种类鉴定方法的研究对于更好地保障我国进出口食品的质量和安全、加强对国内动物源性食品市场和生产企业的监管，从而保护消费者的切身利益具有重要意义。 目前，我国已颁布的与动物种类鉴定有关的国家标准和行业标准有： 1）GB/T 20190-2006 饲料中牛羊源性成分的定性检测定性聚合酶链式反应（PCR）法2）GB/T 21101-2007 动物源性饲料中猪源性成分定性检测方法PCR方法 3）GB/T 21102-2007 动物源性饲料中兔源性成分定性检测方法实时荧光PCR法 4）GB/T 21103-2007动物源性饲料中哺乳动物源性成分定性检测方法实时荧光PCR

动物源性医疗器械注册技术审查指导原则(2017年修订版)

. 附件 动物源性医疗器械注册技术审查指导原则 （2017年修订版） 本指导原则旨在指导注册申请人对动物源性医疗器械的注册申报资料进行准备。某些医疗器械可能含有动物来源的材料，这些材料是多种多样的，可以构成该器械的主要部件（例如牛/猪源心脏瓣膜、羊肠缝合线、止血材料等）、涂层或者浸渗剂（例如肝素、明胶、胶原等），也可成为生产过程中所用的辅助材料（例如牛脂等）。动物组织及其衍生物的使用可能会比非生物来源的材料（例如金属、塑料以及织物等）使医疗器械具有更好的性能，但是在另一方面，它们应用到人体则又会增加病毒传播和免疫原性等方面的安全风险，且存在材料表征上的困难，因此对于动物源性医疗器械安全性的评价，需要考虑比常规医疗器械更多方面的内容。如果注册申请人在准备医疗器械注册申报资料时有上述考虑，将有助于更加充分、科学地评价医疗器械产品的风险受益比。 本指导原则是在注册申报资料中有关的技术性文件（研究资料、风险分析资料、产品技术要求及产品说明书）满足一般性要求的基础上，针对动物源性医疗器械产品的特点提出的需特别关注和增加论述的内容要求。此外，注册申请人还应按照《医疗器械注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令第4号）、《医疗器械说明书和标签管理规定》（国家食品药品监督管理总局令第6号）、《关于公布医疗器械注册申报资料要求和批准证明文件

格式的公告》（国家食品药品监督管理总局公告2014年第43号）以及总局发布的其他相关文件要求并参考YY/T 0771/ISO 22442系列标准等技术性文件提交注册申报资料。注册申请人应当依据具体产品的特性确定其中的具体内容是否适用。若不适用，应详细阐述其理由及相应的科学依据。注册申请人还应依据具体产品的特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。 本指导原则是对注册申请人和医疗器械相关管理部门技术审评人员的指导性文件，不限制相关管理部门对该类产品的技术审评以及注册申请人对注册申报资料的准备工作。本指导原则不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行。如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但是应提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制订的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将进行适时的调整。 本指导原则为2009年发布的《动物源性医疗器械产品注册申报资料指导原则》的修订版。主要修订内容包括：根据《医疗器械监督管理条例》及配套规章调整了指导原则的结构、各级标题和相关内容；增加了动物源性医疗器械免疫原性研究、评价与控制的原则；细化了动物源性医疗器械病毒灭活/去除有效性验证的原则并将之由正文调整至附录；调整了病毒灭活/去除工艺有效性判断的标准等。 一、适用范围 本指导原则适用于全部或部分采用动物组织制成的或取材

动物源性食品安全控制对策和措施正式样本

文件编号：TP-AR-L3031 In Terms Of Organization Management, It Is Necessary To Form A Certain Guiding And Planning Executable Plan, So As To Help Decision-Makers To Carry Out Better Production And Management From Multiple Perspectives. （示范文本） 编制：_______________ 审核：_______________ 单位：_______________ 动物源性食品安全控制 对策和措施正式样本

动物源性食品安全控制对策和措施 正式样本 使用注意：该解决方案资料可用在组织/机构/单位管理上，形成一定的具有指导性，规划性的可执行计划，从而实现多角度地帮助决策人员进行更好的生产与管理。材料内容可根据实际情况作相应修改，请在使用时认真阅读。 一、广泛宣传，提高对畜产品安全重要性的认识 各级应加强宣传教育，全面提高全社会对畜产品 安全的重要性认识，增强广大畜牧兽医工作者、兽药 饲料生产者、养殖者和畜禽屠宰加工销售者的责任感 和使命感。只有全民的认识提高了，才能自觉执行国 家的法律法规，依法生产经营和使用，只有广大群众 的共同参与，才能筑牢畜产品质量安全屏障。 二、健全法制，完善畜产品安全法律法规体系 解决畜产品安全的根本措施是健全和完善立法， 严格执法。要针对当前畜产品安全方面法律法规少

的实际，加快立法步伐。参考欧盟、美国等发达国家和地区的标准，尽快形成具有中国特色的畜产品安全法律体系，覆盖生产、加工、流通和消费各个领域，规范动物食品质量安全管理行为。 三、完善机制，加强畜产品安全体系标准化建设积极吸收国际先进的畜产品安全管理经验，结合我国实际，在饲料生产、经营企业大力推广建设以HACCP为核心的IS09001安全管理体系。兽药生产企业大力推行GMP标准，兽药经营实行GSP连锁经营模式。同时应加强无公害畜产品基地建设及认证工作，积极推行畜禽标准化养殖，保障生产无公害动物源性食品。 四、严格管理，加强对动物源性食品安全 加强对动物源性食品安全的监督检测加强对畜产品生产过程及畜产品市场的监督管理，建立动物源性

【CN109868321A】鉴别动物源性成分的多重荧光PCR方法及试剂盒【专利】

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910257118.5 (22)申请日 2019.04.01 (71)申请人 陕西科技大学 地址 710021 陕西省西安市未央区大学园1 号 (72)发明人 徐秦峰　澹台玮　马西亚　 (74)专利代理机构 西安通大专利代理有限责任 公司 61200 代理人 范巍 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12Q 1/686(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 鉴别动物源性成分的多重荧光PCR方法及试 剂盒 (57)摘要 本发明公开了一种鉴别动物源性成分的多 重荧光PCR方法及试剂盒：提取样品中的DNA作为 模板，利用设计的多对物种特异性引物，进行多 重PCR扩增，对多重PCR扩增的产物进行高分辨熔 解曲线分析，根据扩增产物熔解峰的位置判别样 品中所含的动物源性成分。本发明操作简单、检 测周期短、特异性强、检测结果可靠，可以避免开 管造成污染问题以及实现大规模样品的检测。 权利要求书2页 说明书6页序列表2页 附图2页CN 109868321 A 2019.06.11 C N 109868321 A

权　利　要　求　书1/2页CN 109868321 A 1.一种鉴别动物源性成分的多重荧光PCR方法，其特征在于：包括以下步骤： 1)根据样品中的不同动物源性成分的可能掺入情况，确定需要鉴别的各动物源性成分所对应的动物种类，根据确定的动物种类，设计用于扩增对应动物种类的基因组中某段特异性序列的扩增引物； 2)对步骤1)设计的针对不同动物种类的扩增引物进行多重PCR扩增及扩增产物熔解的特异性检验； 3)以提取自所述样品中的DNA为模板，利用经过检验确定的针对不同动物种类的特异性扩增引物进行多重PCR扩增，对扩增得到的产物进行高分辨熔解并获取高分辨熔解曲线，将该高分辨熔解曲线与以各动物种类基因组DNA为模板并采用所述特异性扩增引物扩增得到的对应产物的高分辨熔解曲线进行比对，根据比对匹配的熔解峰位置确定所述样品中动物源性成分的构成情况。 2.根据权利要求1所述一种鉴别动物源性成分的多重荧光PCR方法，其特征在于：所述步骤1)中，扩增引物扩增的目的片段在200bp以下，扩增的目的片段位于对应动物种类基因组的特异性保守区域，不同动物种类对应的扩增产物在长度和/或GC比值上存在区别。 3.根据权利要求1所述一种鉴别动物源性成分的多重荧光PCR方法，其特征在于：所述步骤3)中，经过检验确定的特异性扩增引物选自针对山羊的引物对P1、针对绵羊的引物对P2、针对牛的引物对P3、针对水牛的引物对P4中的两对以上引物；其中，引物对P1的序列为：上游引物：5'-GCGGGCAGGGCGGCGGGGGCGGGGCCCACCAAAATTCAACACAATAC CACAT-3' 下游引物：5'-GCGGGCGCCGCCCTGCCCGCAGCGTTATCTTTGTAATAGGTTTTGT-3'引物对P2的序列为： 上游引物：5'-CGTAGATGTAGTATGACTTTTCCT-3' 下游引物：5'-GTGAAGTTAGTTAGGAGAGTAATTATA-3' 引物对P3的序列为： 上游引物：5'-GTTAACAGCTAAACACCCTAGCT-3' 下游引物：5'-AGGTTTGACTCCTCTTTTTACCAA-3' 引物对P4的序列为： 上游引物：5'-CCAAAATTTAACACAATCCCGCAA-3' 下游引物：5'-CATTGGTCGTGGTTGAATTCCA-3'。 4.根据权利要求3所述一种鉴别动物源性成分的多重荧光PCR方法，其特征在于：所述多重PCR扩增的反应体系包括DNA模板、引物对P1、P2、P3和P4、PCR反应试剂、双蒸水以及荧光染料。 5.根据权利要求1所述一种鉴别动物源性成分的多重荧光PCR方法，其特征在于：所述高分辨熔解的程序为：将多重PCR扩增的产物在闭管条件下从65℃开始逐渐升温至95℃，同时连续检测荧光强度。 6.根据权利要求1所述一种鉴别动物源性成分的多重荧光PCR方法，其特征在于：所述样品采集自乳制品或生乳。 7.一种鉴别动物源性成分的多重荧光PCR试剂盒，其特征在于：包括针对不同动物种类的特异性扩增引物、PCR反应试剂、荧光染料、双蒸水以及对照品对应的高分辨熔解曲线。 8.根据权利要求7所述一种鉴别动物源性成分的多重荧光PCR试剂盒，其特征在于：所 2

动物源性食品安全知识

动物源性食品安全知识 食用私屠滥宰肉有什么危害？ 私宰肉未经过检验检疫，很可能带有细菌、病毒等病原体，若是毒死、死因不明畜禽被私宰，食用后可能造成感染人需共患病、引起中毒等危害。 如何鉴别生鲜猪肉、牛肉好坏？ 新鲜猪肉宰杀口外翻，切面粗糙，周围有血液浸润，表面有一层微干或微湿润的外膜，触摸时不粘手，肌肉呈现均匀的红色、有光泽，切断面稍湿。脂肪洁白，肌肉富有弹性，指压后凹陷能立即恢复，无异味。 生鲜牛肉有光泽，红色均匀，脂肪洁白或呈淡黄色；外表微干或风干的膜，不粘手，手指按压后的凹陷能立即恢复。 如何鉴别变质肉？ 变质肉的脂肪失去光泽，色泽黄甚至变绿，肌肉暗红，表面沾手，切面潮湿，指压后凹陷不能恢复。 如何鉴别注水肉？ 注水肉肉色淡红，有光泽，手摸瘦肉不粘手。新切面湿，指压有水渗出，切割刀口内可见渗水。 如何识别老母猪肉？ 老母猪肉分层明显，手触有粗糙感。肉色暗红，肌纤维粗，纹路乱，水分少，按压无弹性、无沾性。脂肪松弛，呈灰白色，手摸时手指沾的油脂少。 如何辨别病死猪肉？ 病死猪肉具备以下一种或多种特种：皮肤大片或全身紫红、有红色斑块或多处红点；脂肪黄染，肉中有异物，或外观显著异常；病死猪肉的宰杀口切线平整，切面光滑，无血液浸润；刀口不外翻，平整，周围组织稍有血液浸润。 如何选购安全的畜产品？ 到正规的超市或冷鲜肉店购买；（2）购买有明确生产单位或生产日期的畜产品；（3）购买有《动物检疫合格证明（产品A/B）》和胴体背部有检验检疫印章的畜产品。 8、食用畜禽产品时有哪些注意事项？ （1）清洗：制作前要清洗，以保证产品的卫生；（2）休整：修去淋巴、淤血、异常色斑等；（3）煮熟：食用时要熟透，不食用未熟透的畜产品；（4）分开：生熟要分开，避免交叉感染；（5）保存：未食用完的畜产品应立即冷藏保存；（6）加热：再次食用时应完全加热；（7）放置：放置半年以上的冷冻畜产品应慎用；（8）肉制品：应加热后食用，不宜冷用。 社会事务局

DB12T 653-2016 鲜冻畜、禽肉中动物源性成分的定量检测 实时荧光PCR法

ICS 67.050 B 45 DB12 鲜冻畜、禽肉中动物源性成分的定量检测 实时荧光PCR 法 Quantitative PCR method for animal derived materials in meat and meat products 天津市市场和质量监督管理委员会发布

前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由天津市农村工作委员会提出。 本标准起草单位：天津市农业质量标准与检测技术研究所、天津市东丽区产品质量监督检验所。本标准主要起草人：赵新、易萌、刘娜、兰青阔、刘雪岩、陈锐、朱珠、王成、徐石勇。 本标准2016年9月首次发布。

鲜冻畜、禽肉中动物源性成分的定量检测 实时荧光PCR法 1 范围 本标准规定了鲜冻畜、禽肉中动物源性成分（包括牛、羊、猪、鸡、鸭等）的定量PCR检测方法的术语和定义、检测方法、结果计算。 本标准适用于生鲜、冷冻畜禽肉中动物源性成分的定量PCR检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 实时荧光PCR real time PCR 实时荧光PCR是指PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时检测整个PCR过程，对未知模板进行定性或定量分析。 3.2 Ct值cycle time 每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。 3.3 内参基因reference gene 能够同时检测出多种动物源性成分的基因（包括牛、羊、猪、鸡、鸭等）。 3.4 牛源性成分bovine-derived materials 牛种属特异性DNA片段。 3.5 羊源性成分ovine-derived materials 羊种属特异性DNA片段。 3.6 猪源性成分porcine-derived materials 猪种属特异性DNA片段。 3.7 鸡源性成分chicken-derived materials 鸡种属特异性DNA片段。 3.8 鸭源性成分duck-derived materials 鸭种属特异性DNA片段。

2014年反刍动物饲料中牛羊源性成分

附件3：2014年反刍动物饲料中牛羊源性成 分 例行监测计划 为打击在反刍动物饲料中添加牛羊源性成分的违法行为，切断“疯牛病”通过饲料的传播途径，确保反刍动物生产安全，根据农业部的统一安排，2014年我省继续组织对牛羊养殖和反刍动物饲料生产比较集中的饲料生产、经营企业和牛羊养殖场（户）进行牛羊源性成分例行监测。 一、监测范围 全省各市、县（市、区）。 二、监测对象 生产、经营、使用反刍动物饲料和动物源性饲料的企业以及牛羊养殖场（户）。 三、监测的产品种类和检查内容 ⒈反刍动物饲料产品：包括商品预混合饲料、精料补充料、浓缩饲料和养殖场（户）自配饲料。 ⒉动物源性饲料产品：包括进口和国产鱼粉、猪肉粉、禽肉粉、羽毛粉和虾粉。 ⒊对饲料生产、经营企业和牛羊养殖场（户）储存、销售、使用的商品反刍动物饲料和动物源性饲料产品的标签进行检查。

四、监测项目 标签、牛源性成分、羊源性成分。 五、标签检查 承担下半年监测任务的大同市、忻州市、阳泉市、长治市、吕梁市，除提供与样品一致的标签外，每个市须采集2个（每个企业只限抽1个标签）饲料生产企业的产品标签及对应的标准复印件（产品标准采用国家标准和行业标准的不用提供）。 六、抽检依据 ⒈抽样要求 按照《饲料采样》（GB/T14699.1-2005）执行。有证据证明在牛羊饲料中添加使用了乳及乳制品的，不予抽样。 ⒉检测方法 由质检机构根据农业部的规定执行。 七、判定依据和原则 由质检机构根据农业部的规定办理。 八、监测任务分配（见表3） 表3：反刍动物饲料中牛羊源成分例行监测任务分配表

注：1、该样品可从生产、经营、使用反刍动物饲料和动物源性饲料的企业及牛羊养殖场（户）抽样。 2、反刍动物饲料产品包括商品预混合饲料、精料补充料、浓缩饲料、和养殖场（户）自配料。 3、动物源性饲料产品包括进口和国产鱼粉、猪肉粉、禽肉粉、羽毛粉、虾粉。

动物源性成分

饲料中动物源性成分检测技术研究进展 摘要: 饲料安全与动物生产、环境污染和人类健康密切相关。动物废弃物进入饲料行业曾经弥补了蛋白质饲料不足的缺口,但却带来了新的问题。饲料中动物源性成分的定性或定量检测技术已成为国内外的研究热点，适用于各种样品、基于各种原理的方法和技术被开发出来。本文以组织学特征为基础的显微镜分析方法、以蛋白质和DNA为基础的免疫学和PCR分析方法、高效液相色谱法和近红外光谱法在动物源性饲料组分中的研究应用进展等方面做了综述,并对其发展趋势进行讨论。 饲料安全已与动物生产、环境污染和人类健康 密切相关。动物源性副产品因富含蛋白质、钙、磷等 营养成分而被应用于畜禽饲料中, 但现有的证据表 明, 在动物饲料中添加未经加热处理牛源性饲料或 感染过痒病因子的牛( 羊) 肉/ 肉骨粉( MBM) 后能够 引发和传播疯牛病( BSE)。 我国于1999、2001和2004年先后 下发了关于对动物源性饲料生产和管理的相关条例, 主要对反刍动物源性饲料组分、MBM、肉粉、骨 粉、血粉、动物内脏干粉和动物废弃物等使用做了严 格的规定。目前关于饲料中动物源性成分检测主要 以样品的组织学特性和品种特异性的生物标记物 ( 如蛋白质、DNA和其他生物大分子等) 为对象, 其 中PCR技术发展迅速, 已逐步被世界各国采用。但 由于动物源性饲料组成上的复杂性, 单一的PCR技 术仍不能克服耗时、效率低和假阳性等问题。因此, 研究并建立一种( 套) 快速、灵敏、可靠的动物源性饲 料检测技术, 对于提高饲料质量、防止饲料掺假、控 制进口饲料安全和制订相关饲料法规等均具有重要 意义。 本文中动物源性成分 是指动物组织以及蛋和奶，包括肉类及其制品(含动物 脏器)、水生动物产品等，检测技术是指上述成分中蛋 白质和DNA等具有种间特异性物质的物种鉴定和含量分 析技术。该技术已成为保护消费者权益和安全的重要技 术手段。 动物源性成分检测技术通常建立在对样品蛋白质、 DNA、脂肪酸等分子结构、序列或组成特异性分析的 基础上。涉及的技术手段包括酶联免疫、聚合酶链式

DB21T 2742-2017 饲料中动物源性成分—貂源性组织成分定性检测方法PCR 方法

ICS65.120 B 46 DB21 辽宁省地方标准 DB21/T 2742—2017 饲料中动物源性成分—貂源性组织成分定 性检测方法PCR方法 Animal derived ingredients in Feed - qualitative detection of mink tissue derived ingredients with PCR method 2017-02-23发布2017-03-23实施

前言 本标准按照GB/T 1.1-2009和GB/T 20001.4-2015给出的规则起草。 本标准由辽宁省兽药饲料畜产品质量安全检测中心提出。 本标准由辽宁省质量技术监督局归口。 本标准起草单位：辽宁省兽药饲料畜产品质量安全检测中心。 本标准主要起草人：李欣南、韩镌竹、许彬、李洪伟、高红倩、韩春晓、高铎、武凤娇、董娜。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

饲料中动物源性成分—貂源性组织成分定性检测方法PCR方法 1 范围 本标准规定了检测饲料中貂源组织成分的聚合酶链式反应检测方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料中貂源性成分的检测。 本方法的貂源性成分检测限为0.5 %（w/w）。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1 饲料 采样 GB/T19495转基因产品检测 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 SN/T1193基因检验实验室技术要求 3 原理 利用氯仿抽提法或使用等效的基因组DNA提取试剂盒提取DNA，以提取的DNA为模板进行PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物；PCR产物用限制性内切酶酶切后电泳和测序进行确证。 4 试剂和材料 除另有规定外，试剂为分析纯或生化试剂；实验用水为灭菌双重蒸馏水；所有实验室使用的试剂等级应为不含DNA和DNA酶的分析纯试剂，试剂的选购、验收、储存应符合规定。 4.1 引物 根据Primer 6软件设计，貂源性成分扩增产物为622bp，检测用引物（对）序列为： F：5’- TTAGTAGCTCATAACGCCTTG -3’ R：5’- CGTGAGTATGTTCTTGGTTAG -3’ 根据合成引物的标示浓度，用双重蒸馏水配制成10μM。 4.2 BstXⅠ限制性内切酶。 4.3 PCR Master mix（或DNA聚合酶、dNTP等PCR用试剂）。 4.4 基因组DNA提取试剂盒或其他替代试剂。 4.5 裂解缓冲液：250mmol/L SDS，使用前加入蛋白酶K至100mg/mL。

动物源性食品进出口检验检疫有关要求

进境检疫审批 申请单位资质： ①具有独立法人资格，拟作为该批进口产品的直接对外签订贸易合同或者协议的单位，并已列入总局主管部门公布的进口肉类收货人备案名单。 ②诚信经营，自觉遵守国家法律法规及检验检疫的有关规定。 ③能按实际进口需求如实申办检疫许可证。 三、申请时间 进口肉类产品、需要申请许可的水产品应当在贸易合同签订前办理审批手续，取得进境动植物检疫许可证。 四、申请要求 1、同一申请单位、同一品种、同一输出国家（地区）、拟从同一结关地入境的，一次只能办理一份检疫许可证。 2、申请单位能按规定逐份使用许可证，即：在同一结关地的同一品种、

同一输出国家（地区）的前一份许可证核销完毕后，才核销使用下一份证。 3、凡许可证未核销使用且已超过有效期的（因输出国家或者地区突发疫情废止的除外），不再受理该企业当年提交的同一输出国家（地区），同一肉类品种的申请。 进出境肉类产品 一、136号令 1、本办法所称肉类产品是指动物屠体的任何可供人类食用部分，包括胴体、脏器、副产品以及以上述产品为原料的制品，不包括罐头产品。 2、进出口肉类产品生产加工企业（以下简称生产企业）、收货人、发货人根据监管需要实施信用管理及分类管理制度。 3、进出口肉类产品生产企业应当依照法律、行政法规和有关标准从事生产经营活动，对社会和公众负责，保证肉类产品质量安全，接受社会监督，承担社会责任。 （一）由国家质检总局实施制度或管理措施： 1、国家质检总局对向中国境内出口肉类产品的出口商或者代理商实施备案管理， 2、国家质检总局对进口肉类产品实行检疫审批制度。 3、国家质检总局指定的进口肉类产品口岸。进口口岸的检验检疫机构应当具备进口肉类产品现场查验和实验室检验检疫的设备设施和相应的专业技术人员。 进口肉类产品应当存储在检验检疫机构认可并报国家质检总局备案的存储冷库或者其他场所。肉类产品进口口岸应当具备与进口肉类产品数量相适应的存储冷库。存储冷库应当符合进口肉类产品存储冷库检验检疫要求。 4、国家质检总局对进出口肉类产品实行安全监控制度，依据风险分析和检验检疫实际情况制定重点监控计划。 (二）由地方检验检疫机构实施制度或管理措施 1、建立信用分类管理和“黑名单”制度 2、检验检疫机构对进口肉类产品收货人实施备案管理 3、出口肉类产品加工用动物应当来自经检验检疫机构备案的饲养场。

动物源性细菌

第十九章动物源性细菌 一、名词解释 1、人畜共患菌 2、有菌免疫 3、波浪热 4、鼠毒素 5、F1抗原 6、水肿因子 7、串珠试验 二、填空题 1、布氏杆菌是一类革兰染色——的短小杆菌，我国流行的主要是——布氏杆菌。 2、布氏杆菌感染动物主要引起——，感染人类引起——。 3、布氏杆菌是专性需氧菌，初次分离还需——气体。培养基内加入——浸液可促其生长。 4、布氏杆菌的侵袭力主要与——酶和——的抗吞噬作用有关。 5、布氏菌为——菌，所致布菌病较难根治，易转为——且——。 6、鼠疫杆菌属于——菌属，引起的鼠疫是——烈性传染病。 7、鼠疫杆菌的抗原种类较多，与其毒力有关的主要有——、——和——。 8、鼠疫杆菌革兰染色——，菌体两端浓染称为——，在陈旧培养物中形态常呈——。 9、鼠疫杆菌在肉汤培养液中生长48h后可形成——，稍加摇动可出现——状下沉。 10、鼠疫杆菌的荚膜抗原又称为——；与毒力有关，可制备类毒素的抗原是——。 1l、鼠疫杆菌的典型菌落是——型，其S型菌株的毒性——。 12、鼠疫杆菌产生的毒素有——和——。 13、杀死炭疽杆菌的芽胞除高压灭菌法外，还可采用1：2500 ——浸泡或干烤——℃，3h。 14、Ascoli沉淀反应检测的抗原是——杆菌的——抗原。 15、炭疽杆菌主要的致病物质是——和——。 16、人类炭疽因侵入途径的不同分为——、——和——三种临床类型。 17、对炭疽疫区的牧民、屠宰工、兽医等人员应接种——，其免疫力维持时间为——左右。 18、炭疽杆菌的抗原有——、——、——三种。 三、最佳选择题 l、感染动物后引起母畜流产的病原是( ) A．布氏杆菌B．炭疽杆菌C．鼠疫杆菌D．钩端螺旋体E．空肠弯曲菌 2、布氏杆菌的致病物质是( ) A．芽胞B．荚膜C．鞭毛D．血浆凝固酶E．链激酶 3、食人未经消毒的羊奶，最有可能患的病是( ) A．波浪热B．结核C．伤寒D．破伤风E．肉毒中毒 4、慢性波浪热患者分离布氏杆菌阳性率最高的标本是( ) A．血液B．粪便C．尿液D．痰E．骨髓 5、培养布氏杆菌应接种于( ) A．血平板B．巧克力平板C．罗氏培养基D．肝浸液培养基E．吕氏血清斜面 6、可以寄生在巨噬细胞内的细菌是( ) A．布氏杆菌B．金黄色葡萄球菌C．肺炎链球菌D．破伤风梭菌E．炭疽杆菌 7、布氏杆菌与结核分枝杆菌的区别是( ) A．可以在巨噬细胞内生长B．致病性与超敏反应有关

动物源性食品安全控制对策和措施(通用版)

( 安全管理 ) 单位：_________________________ 姓名：_________________________ 日期：_________________________ 精品文档 / Word文档 / 文字可改 动物源性食品安全控制对策和 措施(通用版) Safety management is an important part of production management. Safety and production are in the implementation process

动物源性食品安全控制对策和措施(通用 版) 一、广泛宣传，提高对畜产品安全重要性的认识 各级应加强宣传教育，全面提高全社会对畜产品安全的重要性认识，增强广大畜牧兽医工作者、兽药饲料生产者、养殖者和畜禽屠宰加工销售者的责任感和使命感。只有全民的认识提高了，才能自觉执行国家的法律法规，依法生产经营和使用，只有广大群众的共同参与，才能筑牢畜产品质量安全屏障。 二、健全法制，完善畜产品安全法律法规体系 解决畜产品安全的根本措施是健全和完善立法，严格执法。要针对当前畜产品安全方面法律法规少的实际，加快立法步伐。参考欧盟、美国等发达国家和地区的标准，尽快形成具有中国特色的畜产品安全法律体系，覆盖生产、加工、流通和消费各个领域，规范

动物食品质量安全管理行为。 三、完善机制，加强畜产品安全体系标准化建设积极吸收国际先进的畜产品安全管理经验，结合我国实际，在饲料生产、经营企业大力推广建设以HACCP为核心的IS09001安全管理体系。兽药生产企业大力推行GMP标准，兽药经营实行GSP连锁经营模式。同时应加强无公害畜产品基地建设及认证工作，积极推行畜禽标准化养殖，保障生产无公害动物源性食品。 四、严格管理，加强对动物源性食品安全 加强对动物源性食品安全的监督检测加强对畜产品生产过程及畜产品市场的监督管理，建立动物源性食品从养殖到餐桌的全程监控制度，即对饲料、兽药、环境、水源和肉品等动物食品各环节进行控制。相关部门应完善市场管理办法，严格实行生产许可证制度和市场准入制度，建立畜产品监控检测网络体系。为了保证网络体系的有效运行，国家主管部门应该保证专项资金供给及技术人员的配备，并不断完善手段，加强基础设施建设，建立健全动物疫病化验室，并逐步建立药物、重金属等有毒有害物质残留检测室，对畜

影响动物源性食品安全的因素及预防措施

影响动物源性食品安全的因素及预防措施 近些年来，食品安全事件频发，给人民健康带来严重危害和潜在威胁，国内相继发生的“瘦肉精”,“三聚氰胺”,兽药残留等问题日益受到关注,对畜产品的生产和销售产生了很大的负面影响.人类不应以牺牲自身健康为代价，换取畜产品量的增加，生产安全动物源性食品是保障人民健康的需要。 在全球经济一体化的今天，如不能保障动物源性食品质量安全，就无法参与国际市场的竞争，连国内市场也将失去立足之地。美国从1998年1月开始，实施危害分析关键控制点（HACCP），明确规定了食品中的有害物质（包括细菌，药物等）的临界值，超标的一律不准上市，在动物源性食品中残留量的检出，已成为世界肉类贸易中重要的技术指标和技术壁垒之一，目前已成为制约我国动物产品出口的瓶颈。我国仅2000年上半年就有634批出口食品因药残，食品卫生问题被美国FOA扣留；近几年，我国出口到俄罗斯，日本等国的鸡肉中常有被检出违禁药物超标事件；2002年初，欧盟从中国进口的虾、对虾中发现强力抗生素的药物残留，其后不久，欧盟委员会有关机构通过了全面禁止进口中国动物源食品的决议。该决议称：近期欧盟食品兽医局所做的调查显示，中国对药物残留的控制体系存在严重缺陷，问题出在兽医使用了受禁的药物。因此，只有生产安全动物源性食品，才能提高我国畜禽产品的国际竞争力，保障我国畜牧业长期持续发展。 畜产品安全生产隐患主要来自于动物疫病传播微生物污染、滥用抗生素、饲料添加剂、兽药残留、化学物质污染和残留等，同时还包括如营养、食品质量、安全教育等问题。涉及畜禽养殖环节，畜禽运输，流通环节以及畜产品的加工环节。本文仅就畜产品生产阶段不安全动物源性食品产生的原因及对策加以探讨。 1畜产品生产过程中的不安全因素 1.1饲草、饲料的污染饲草、饲料安全是畜产品安全的前提和保证。它包括饲料的金属毒物污染，饲料的霉菌毒素污染和农药污染。污染饲料的金属毒物有汞、镉、铅、砷等，上述有毒的污染源主要来自地区土壤，饲料原料和饮水中某些有毒元素含量过高以及工业三废污染；饲料的霉菌毒素污染危害最重的当属黄曲霉毒素污染，感染霉菌后饲喂动物，可使动物中毒；我国每年有数万吨有机氯和有机杀虫剂撒在地上，直接导致饲料的农药污染。长期食用被污染的饲料，不仅诱发各种疾病，而且严重影响畜禽肉品质的质量。 1.2疾病多年来，一些严重的畜禽疾病，特别是畜禽传染病在严重危害畜牧业生产的同时，也给人们的身体健康造成了严重威胁。

动物源性医疗器械注册技术审查指导原则(2017年修订版)

动物源性医疗器械注册技术审查指导原则(2017年修订版)

附件 动物源性医疗器械注册技术审查指导原则 （2017年修订版） 本指导原则旨在指导注册申请人对动物源性医疗器械的注册申报资料进行准备。某些医疗器械可能含有动物来源的材料，这些材料是多种多样的，可以构成该器械的主要部件（例如牛/猪源心脏瓣膜、羊肠缝合线、止血材料等）、涂层或者浸渗剂（例如肝素、明胶、胶原等），也可成为生产过程中所用的辅助材料（例如牛脂等）。动物组织及其衍生物的使用可能会比非生物来源的材料（例如金属、塑料以及织物等）使医疗器械具有更好的性能，但是在另一方面，它们应用到人体则又会增加病毒传播和免疫原性等方面的安全风险，且存在材料表征上的困难，因此对于动物源性医疗器械安全性的评价，需要考虑比常规医疗器械更多方面的内容。如果注册申请人在准备医疗器械注册申报资料时有上述考虑，将有助于更加充分、科学地评价医疗器械产品的风险受益比。 本指导原则是在注册申报资料中有关的技术性文件（研究资料、风险分析资料、产品技术要求及产品说明书）满足一般性要求的基础上，针对动物源性医疗器械产品的特点提出的需特别关注和增加论述的内容要求。此外，注册申请人还应按照《医疗器械注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令第4号）、《医疗器械说明书和标签管理规定》（国家食品药品监督管理总局令第6号）、《关于公布医疗器械注册申报资料要求和批准证明文件

格式的公告》（国家食品药品监督管理总局公告2014年第43号）以及总局发布的其他相关文件要求并参考YY/T 0771/ISO 22442系列标准等技术性文件提交注册申报资料。注册申请人应当依据具体产品的特性确定其中的具体内容是否适用。若不适用，应详细阐述其理由及相应的科学依据。注册申请人还应依据具体产品的特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。 本指导原则是对注册申请人和医疗器械相关管理部门技术审评人员的指导性文件，不限制相关管理部门对该类产品的技术审评以及注册申请人对注册申报资料的准备工作。本指导原则不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行。如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但是应提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制订的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将进行适时的调整。 本指导原则为2009年发布的《动物源性医疗器械产品注册申报资料指导原则》的修订版。主要修订内容包括：根据《医疗器械监督管理条例》及配套规章调整了指导原则的结构、各级标题和相关内容；增加了动物源性医疗器械免疫原性研究、评价与控制的原则；细化了动物源性医疗器械病毒灭活/去除有效性验证的原则并将之由正文调整至附录；调整了病毒灭活/去除工艺有效性判断的标准等。 一、适用范围 本指导原则适用于全部或部分采用动物组织制成的或取材

动物源性食品安全控制对策和措施

动物源性食品安全控制 对策和措施 集团公司文件内部编码：（TTT-UUTT-MMYB-URTTY-ITTLTY-

动物源性食品安全控制对策和措施一、广泛宣传，提高对畜产品安全重要性的认识 各级应加强宣传教育，全面提高全社会对畜产品安全的重要性认识，增强广大畜牧兽医工作者、兽药饲料生产者、养殖者和畜禽屠宰加工销售者的责任感和使命感。只有全民的认识提高了，才能自觉执行国家的法律法规，依法生产经营和使用，只有广大群众的共同参与，才能筑牢畜产品质量安全屏障。 二、健全法制，完善畜产品安全法律法规体系 解决畜产品安全的根本措施是健全和完善立法，严格执法。要针对当前畜产品安全方面法律法规少的实际，加快立法步伐。参考欧盟、美国等发达国家和地区的标准，尽快形成具有中国特色的畜产品安全法律体系，覆盖生产、加工、流通和消费各个领域，规范动物食品质量安全管理行为。 三、完善机制，加强畜产品安全体系标准化建设积极吸收国际先进的畜产品安全管理经验，结合我国实际，在饲料生产、经营企业大力推广建设以HACCP为核心的IS09001安全管理体系。兽药生产企业大力推行GMP 标准，兽药经营实行GSP连锁经营模式。同时应加强无公害畜产品基地

建设及认证工作，积极推行畜禽标准化养殖，保障生产无公害动物源性食品。 四、严格管理，加强对动物源性食品安全 加强对动物源性食品安全的监督检测加强对畜产品生产过程及畜产品市场的监督管理，建立动物源性食品从养殖到餐桌的全程监控制度，即对饲料、兽药、环境、水源和肉品等动物食品各环节进行控制。相关部门应完善市场管理办法，严格实行生产许可证制度和市场准入制度，建立畜产品监控检测网络体系。为了保证网络体系的有效运行，国家主管部门应该保证专项资金供给及技术人员的配备，并不断完善手段，加强基础设施建设，建立健全动物疫病化验室，并逐步建立药物、重金属等有毒有害物质残留检测室，对畜禽及其产品定期或不定期地开展检测工作，对重金属、药物、饲料添加剂超过规定标准的生产、经营企业及个体经销户进行严厉打击。 五、加强监控，切实搞好动物养殖环节的疫病防治工作 根据《畜牧法》、《动物防疫法》、《动物免疫标识追溯制管理办法》及相关法律法规规定，一要坚持“预防为主”，抓实动物基础免疫。重点抓好禽流感、口蹄疫等重大疫病的强制免疫工作，完善防控重大动物疫病及人畜共患病的长效机制，从根本上预防和控制疫病的发生和流