核糖体
第十一章核糖体
选择题
1.组成核糖体的核糖核酸为
A.mRNA
B.tRNA
C.rRNA
D.sRNA
2.真核细胞质中核糖体的大小亚基分别为60S和40S，其完整的核糖体颗粒为
A.100S
B.80S
C.70S
D.90S
3.在蛋白质合成的过程中，肽键的形成是在核糖体的哪一部位
A.供体部位
B.受体部位
C.肽基转移酶位
D.GTP酶活性部位
4.影响核糖体大小亚基结合的金属离子为
A.Ca2+
B.Na+
C.K+
D.Mg2+
5.肽基转移酶存在于
A.核糖体的大亚基中
B.核糖体的小亚基中
C.mRNA分子内
D.tRNA分子内
6.遗传密码子是指
A.DNA分子上每3个相邻的碱基
B.rRNA分子上每3个相邻的碱基
C.tRNA分子上每3个相邻的碱基
D.mRNA分子上每3个相邻的碱基
7.一个tRNA上的反密码子是UAC，与其相对应的mRNA密码子是
A.CAC
B.AUG
C.TUG
D.ATG
8.以mRNA为模板合成蛋白质的过程称为
A.转录
B.转化
C.翻译
D.复制
9.在蛋白质合成的过程中，氨酰tRNA进入核糖体的哪一部位
A.供体部位
B.受体部位
C.肽转移酶中心
D.GTP酶部位
10.在蛋白质合成过程中，tRNA的功能是
A.提供合成的场所
B.起合成模板的作用
C.与tRNA的反密码相识别
D.运输氨基酸
11.游离于细胞质中的核糖体，主要合成
A.外输性蛋白质
B.溶酶体内蛋白
C.细胞本身所需的结构蛋白
D.高尔基复合体内蛋白
12.参与蛋白质合成的酶是
A.羧基肽酶
B.谷氨酰氨合成酶
C.肽基转移酶
D.连接酶
13.细胞的蛋白合成时，氨基酸活化所需的能源是
A.ATP
B.ADP
C.GTP
D.cAMP
14.真核细胞核糖体小亚基中所含rRNA的大小为
A.28S
B.18S
C.16S
D.5S
15.在蛋白质合成过程中，mRNA的功能是
A.起串连核糖体作用
B.起合成模板的作用
C.识别反密码
D.起延伸肽链作用
16.肝细胞合成血浆蛋白的结构是
A.滑面内质网
B.粗面内质网
C.高尔基复合体
D.核糖体
17.多聚核糖体是指
A.细胞中有两个以上的核糖体集中成一团
B.一条mRNA串连多个核糖体的结构组合
C.细胞中两个以上核糖体聚集成簇状或菊花状结构
D.附着在内质网上的核糖体
18.核糖体的功能可表述为
A.细胞的动力工厂
B.氨基酸缩合成肽链的装配机
C.细胞内物质的加工和包装车间
D.细胞内物质的运输机
19.组成核糖体的rRNA来自
A.核仁相随染色质
B.异染色质
C.核基质
D.核膜
20.细胞中合成蛋白质的场所是
A.粗面内质网
B.滑面内质网
C.核糖体
D.细胞质
21.mRNA分子中，翻译的起始信号是
A.UAG
B.GAU
C.AUG
D.UGA
22.mRNA分子中，翻译过程的3个终止信号是
A.UAA、UAG、UGA
B.UUA、UUG、UGU
C.AUG、AGU、AGA
D.CAA、CAG、CGA
23.细胞的蛋白质合成过程中，核蛋白体沿mRNA移动时，供能的物质是
A.ADP
B.ATP
C.CTP
D.GTP
24.原核细胞和真核细胞都具有的细胞器是
A.中心体
B.核糖体
C.线粒体
D.内质网
25.合成外输性蛋白质的细胞器是
A.附着核糖体、滑面内质网
B.附着核糖体、粗面内质网
C.线粒体、粗面内质网
D.高尔基复合体、粗面内质网
26.rRNA由核仁形成区
A.复制出来
B.转录出来
C.分离出来
D.翻译出来
27.真核细胞中rDNA编码的rRNA包括
A.5SrRNA、5.8SrRNA、18SrRNA
B.5SrRNA、5.8SrRNA、28SrRNA
C.18SrRNA、5SrRNA、28SrRNA
D.18SrRNA、5.8SrRNA、28SrRNA
28.蛋白质合成过程的3个阶段
A.复制、转录、翻译
B.开始、合成、加工
C.起始、延伸、终止
D.解旋、复制、螺旋化
29.核糖体的组装
A.在细胞核任何位置组装成完整核糖体
B.在核仁中组装成完整的核糖体
C.在核仁中分别组装核糖体亚单位然后在细胞质中组装成完整核糖体
D.有时在细胞核中组装、有时在细胞质中组装
30.5SrRNA的合成
A.在核仁外的常染色质区合成
B.从核仁组织者内DNA转录出来
C.从核仁外的异染色质区转录出来
D.有时在核仁内、有时在核仁外合成
31.原核细胞核糖体的大、小亚基分别为50S和30S，其完整核糖体为
A.70S
B.80S
C.90S
D.100S
32.合成蛋白质的原料是
A.氨基酸
B.ATP
C.核苷酸
D.GTP
33.肽链合成终止时，mRNA分子的终止密码子出现在核糖体的
A.A位
B.P位
C.T位
D.G位
34.真核细胞内蛋白质合成过程中，与起始密码子结合的氨酰tRNA是
A.甲酰蛋氨酰tRNA
B.谷氨酰tRNA
C.蛋氨酰tRNA
D.色氨酰tRNA
填空题
1.核糖体是合成的场所，其上有、、
和等4个功能区。
2.tRNA是合成过程中的，根据mRNA的，携带特定的进入到核糖体，并转运到特定的位置。
3.真核细胞蛋白质合成过程是在细胞质中进行的，但它所需要的物质如、和在细胞核中形成并经过加工之后，必须进入才能发挥作用。
4.在密码子中有一个密码子是的，这就是，它若位于mRNA的起始端，则是肽链合成的信号，称为密码子；若出现在mRNA中间，则是的密码子，因此它具有两种作用。
5.核糖体的主要化学成分是和，在形态结构上它是由
和两个亚基组成的，根据其是否附着于内质网膜上可分为
和两种类型。
6.在合成蛋白质的过程中，mRNA是编码蛋白质合成的，tRNA是按密码子转运氨基酸的，而核糖体则是蛋白质合成的。
7.肽链合成的延长是由进入核糖体的位、
形成和等3个步骤组成的一个循环重复过程。
8.蛋白质合成终止时，多肽链从上释放出来，而后经过一定的，形成具有一定的、有的蛋白质分子。
9.mRNA分子中每3个的碱基决定了合成的中的一种，故称其为。
10.真核细胞核糖体内有4种rRNA：、、
和。
11.原核细胞核糖体的沉降系数为，其大小亚基分别为、；
真核细胞核糖体的沉降系数为，其大小亚基分别为、。名词解释
1.多聚核糖体
2.核糖体
3.A位
4.P位
5.肽基转移酶位
6.GTP酶位
7.游离核糖体8.附着核糖体9.核糖体单体
问答题
1.细胞中核糖体有几种存在形式？所合成的蛋白质在功能上有什么不同？
2.多肽链在核糖体上时怎样延长的？
3.多肽链合成完成后如何才能从核糖体上释放出来？
参考答案
选择题
1~5 CBCDA 6~10 DBCAD 11~15 CCABB
16~20 DBBAC 21~25 CADBB 26~30 BDCCA
31~34 AAAC
填空题
1.蛋白质、受位（A位）、供位（P位）、肽基转移酶位（T因子）、GTP酶位（G因子）
2.蛋白质、运载工具、密码子、氨基酸
3.mRNA、tRNA、rRNA、细胞质
4.兼职、AUG、起始、起始、蛋氨酸
5.rRNA、蛋白质、大亚基、小亚基、游离核糖体、附着核糖体
6.模板、运载工具、装配机
7.氨酰tRNA、A、肽键、移位
8.核糖体、加工修饰、空间结构、功能
9.相邻、多肽链、氨基酸、密码子
10.5SrRNA、5.8SrRNA、18SrRNA、28SrRNA
11.70S、50S、30S、80S、60S、40S
名词解释
1.多聚核糖体（polyribosome）——在进行蛋白质合成时，单核糖体通常被一条mRNA分
子纤丝串连在一起，成为合成蛋白质的功能团，称为多聚核糖体。
2.核糖体（ribosome）——是由rRNA和蛋白质组成的复合物，由大小亚基构成，为蛋白
质的生物合成提供场所，并作为装配机参与合成。
3.A位（aminoacyl site，A site）——也称氨酰基位或受位，主要在核糖体大亚基上，是在
蛋白质合成过程中接受氨酰基-tRNA的部位。
4.P位（peptidyl site，P site）——也称肽基位或供位，主要在核糖体小亚基上，是肽基-tRNA
移交肽链后，tRNA被释放的部位。
5.肽基转移酶位（peptidyl transferase site）——肽基转移酶简称T因子，位于大亚基上，
其作用是在肽链合成过程中催化氨基酸之间形成肽键。
6.GTP酶位（GTPase site）——GTP酶简称G因子，可水解GTP，为催化肽基-tRNA由A
位移位到P位提供能量。
7.游离核糖体（free ribosome）——游离在细胞质中的核糖体称为游离核糖体，主要负责
合成细胞中的结构性蛋白质。
8.附着核糖体（attached ribosome）——附着核糖体又称膜旁核糖体，为附着在内质网膜表
面、参与粗面内质网构成的核糖体，主要负责合成外输性蛋白质（分泌蛋白）。
9. 核糖体单体——核糖体颗粒单独存在，不具蛋白质合成功能。
核糖体与核酶知识
1. 核糖体(riboso me) 核糖体是细胞内一种核糖核蛋白颗粒(ribonucleoprotein particle), 其惟一功能是按照mRNA的指令将氨基酸合成蛋白质多肽链,所以核糖体是细胞内蛋白质合成的分子机器。 按核糖体存在的部位可分为三种类型:细胞质核糖体、线粒体核糖体、叶绿体核糖体。按存在的生物类型可分为两种类型：真核生物核糖体和原核生物核糖体。原核细胞的核糖体较小, 沉降系数为70S，相对分子质量为2.5x103 kDa,由50S和30S两个亚基组成; 而真核细胞的核糖体体积较大, 沉降系数是80S，相对分子质量为3.9～4.5x103 kDa, 由60S和40S两个亚基组成。 在真核细胞中, 核糖体进行蛋白质合成时，既可以游离在细胞质中, 称为游离核糖体, 也可以附着在内质网的表面, 称为膜旁核糖体或附着核糖体。真核细胞含有较多的核糖体, 每个细胞平均有106～107个, 而原核细胞中核糖体较少每个细胞平均只有15×102～18×103个。 典型的原核生物大肠杆菌核糖体是由50S大亚基和30S小亚基组成的。在完整的核糖体中，rRNA约占2/3, 蛋白质约为1/3。50S大亚基含有34种不同的蛋白质和两种RNA分子，相对分子质量大的rRNA的沉降系数为23S，相对分子质量小的rRNA为5S。30S小亚基含有21种蛋白质和一个16S的rRNA分子。 真核细胞核糖体的沉降系数为80S，大亚基为60S，小亚基为40S。在大亚基中，有大约49种蛋白质，另外有三种rRNA∶28S rRNA、5S rRNA 和5.8S rRNA。小亚基含有大约33种蛋白质，一种18S的rRNA。 2. 基因扩增(gene a mp li fica tion) 细胞内选择性复制DNA, 产生大量的拷贝。如两栖类卵母细胞在发育的早期，rRNA基因的数量扩增到1000多倍。基因扩增是通过形成几千个核进行的，每个核里含有几百拷贝的编码28S、18S和5.8S的rRNA基因，最后卵母细胞中的这些rRNA基因的拷贝数几乎达到50万个，而在相同生物的其它类型细胞中，这些rRNA基因的拷贝数只有几百个。卵母细胞中有如此众多的rRNA基因拷贝，为卵细胞在受精后的发育过程中合成大量核糖体创造了条件。 至于卵母细胞中rRNA基因扩增的机制，有人认为可能是通过从染色体上分离出来的环状DNA分子，这种环状DNA中含有rRNA基因，但是第一个含有rRNA基因的环状DNA是如何形成的尚不清楚。由于环状DNA 能够通过滚环复制(rolling circle replication)的方式进行复制，因而能够产生大量的rRNA基因。 3. 5S rRNA基因(5S rRNAgene)
细胞免疫学论文
【摘要】作为一种具有靶向性的生物大分子，单克隆抗体始终是人们关注 的热点之一，被广泛用于治疗肿瘤、病毒感染和抗移植排斥等。但鼠源单克隆 抗体的临床应用受限于诱导产生人抗鼠抗体、肿瘤渗入量低、亲和力低和半衰 期短等。随着分子生物学技术的发展及其向各学科的渗透，通过基因操作技术 对抗体进行改造，可使其适用于多种疾病的治疗。抗体人源化已经成为治疗性 抗体的发展趋势，同时各种抗体衍生物也不断涌现，它们从不同角度克服了抗 体本身的应用局限，也为治疗人类疾病提供了利器。本文简要介绍上述技术的 基本原理、特点和治疗性抗体的研究进展。 【关键词】人--鼠嵌合抗体生物导弹人源化抗体双特异性抗体 【正文】 一、治疗性抗体技术的研究背景 2000年前，人们将自白喉杆菌培养上清液中分离到的可溶性毒素注入马体内，发现得到的抗血清可以治疗白喉，这是第一个用抗体治疗疾病的例子。随 着免疫学和分子生物学技术的发展，以及抗体基因结构的阐明，DNA 重组技术 开始被用于抗体的改造，人们可以根据需要对以往的鼠抗体进行相应的改造， 以消除抗体应用的不利性状或增加新的生物学功能，还可用新的技术重新制备 各种形式的重组抗体，标志着基因工程抗体时代的来临。自第一个基因工程抗体———人--鼠嵌合抗体于1984 年诞生以来，新型基因工程抗体不断出现，包括人源化抗体、单价小分子抗体（Fab、单链抗体、单域抗体等）、多价小分子 抗体（双链抗体、三链抗体、微型抗体等）、某些特殊类型的抗体（双特异抗体、抗原化抗体、细胞内抗体等）及抗体融合蛋白（免疫毒素、免疫黏连素等）等。用于制备新型抗体的噬菌体抗体库技术成为继杂交瘤技术之后生命科学研究中 又一突破性进展。在噬菌体抗体库的基础上，近年来又发展了核糖体展示抗体 库技术，利用核糖体展示技术筛选抗体的整个过程均在体外进行，不经过大肠 杆菌转化步骤，因此可以构建高容量、高质量的抗体库，更易于筛选高亲和力 抗体和利用体外进行的方法对抗体性状进行改造，核糖体展示抗体库技术代表 了抗体工程的未来发展趋势。 二、各种抗体治疗作用的机理与应用 2.1 抗体的基本组成 抗体的基本单位是由4 条肽链组成的对称结构，包括2 条相同的重链和2 条相同的轻链。重链和轻链分别由可变区和恒定区组成。可变区中的互补决定区与抗体和抗原结合的多样性直接有关，而恒定区的结构与抗体的生物学活性 相关。在少数情况下，抗体与抗原结合后可以对机体直接起保护作用，如用抗 体中和毒素的毒性，但在多数情况下需要通过效应功能灭活或清除外来抗原。
高级分子遗传学复习提纲
高级分子遗传学复习题 1、概念解释： PDT 噬菌体展示技术（phage displayed technology，PDT）是将外源蛋白或多肽与噬菌体外壳蛋白融合，展示在噬菌体表面并保持特定的空间构象，利用特异性亲和作用以筛选特异性蛋白或多肽的一项新技术。该技术将基因型与表型、分子结合活性与噬菌体的可扩增性结合在一起，是一种高效的筛选新技术。目前已成功应用于抗原表位分析，单抗筛选，蛋白质功能拮抗多肽或模拟多肽的确定等。 DNA shuffling 将不同品系具有不同突变位点的基因(1～6kb)或同一家族的基因混合，用DNase I酶切构成随机DNA 片段库(Pool)。用此库样品为模板、以小分子引物进行PCR扩增，一些随机模板得到扩增，由于片段间存在同源性，在退火过程中常出现模板转换(switch)，从而有可能出现集多种突变点于一个基因上的DNA分子，可从多种多样的重组分子中筛选出有用基因。 卫星RNA(satellite RNA) 类病毒(viroids)和拟病毒(virusoids)中类病毒是有侵染性并能独立作用的RNA分子，没有任何蛋白质外壳。拟病毒在构成上与类病毒类似，但是被植物病毒包装，与一个病毒基因组包被在一起。拟病毒不能独立复制，需要病毒帮助其复制。有时拟病毒又称为卫星RNA(satellite RNA)。 交换固定(crossover fixation) 指某一基因簇中的突变通过不等交换趋向扩展到整个基因簇的现象。结果突变的基因要么被淘汰，要么占据全部原来相同基因的位置。 分子伴侣(chaperone) 一种能诱导靶蛋白质形成特定构象使其正确组装的蛋白质。 空转反应(idling reaction) 当空载tRNA进入A位点时,核糖体产生pppGpp 和ppGpp, 诱发应急型反应。 AARS：（氨酰-tRNA合成酶） 催化氨基酸和tRNA2‘或3’－OH共价连接的酶。根据氨基酸序列，可将AARS分为I、II型两组。I 型：Arg、Gln、Glu、Ile、Leu、Trp、Tyr、Val、Cys-RS，其余为II型。I 型RS含有HIGH签名序列(His-Ile-Gly-His)和KMSKS(Lys-Met-Ser-Lys-Ser)序列，使AA结合在3'A的2'-OH上，可以在2'、3'之间移动。II型RS无签名序列，而有3个保守基序。 RNAi/RNAq（RNA干扰、RNA压制） 转录后基因沉默广泛存在于各种生物中，在植物中被称为转录后基因沉默(PTGS)，在动物中被称为RNA 干扰(RNA interference, RNAi)，在真菌中则被称为RNA压制(RNA quelling，RNAq)。尽管叫法不同，但都具有相似机制，都启动一种特殊的RNA降解过程。 酸性面条(negative noodle)
核糖体带动抗生素研究
核糖体带动抗生素研究 据新华社北京10月7日电(记者潘治) 瑞典皇家科学院7日宣布，美国科学家文卡特拉曼·拉马克里希南、托马斯·施泰茨和以色列科学家阿达·约纳特3人因“对核糖体结构和功能的研究”而共同获得今年的诺贝尔化学奖。 生命体就像一个极其复杂而又精密的仪器，不同“零件”在不同岗位上各司其职，有条不紊。而这一切，就要归功于仿佛扮演着生命化学工厂中工程师角色的“核糖体”：它翻译出DNA所携带的密码，进而产生不同的蛋白质，分别控制人体内不同的化学过程。 DNA(脱氧核糖核酸)是核酸的一类。生物体中的每一个细胞里，都有DNA 分子。这些DNA分子决定了生命体的外貌及功能。DNA是几乎所有生物的遗传物质基础，它存储了大量的“指令”信息，能引导生物的发育和生命机能的运作。但是在生命体中，DNA所含有的指令就像一张写满密码的图纸，只有经核糖体的翻译，每条指令才能得到明确无误的执行。 具体而言，核糖体的工作，就是将DNA所含有的各种指令翻译出来，之后生成任务不同的蛋白质，例如用于输送氧气的血红蛋白、免疫系统中的抗体、胰岛素等激素或者分解糖的酶等等。 诺贝尔奖评委会介绍，三位科学家都采用了X射线蛋白质晶体学的技术，标识出了构成核糖体的成千上万个原子。这些科学家们不仅让我们知晓了核糖体的“外貌”，而且在原子层面上揭示了核糖体功能的机理。基于核糖体研究的有关成果，可以很容易理解，如果细菌的核糖体功能得到抑制，那么细菌就无法存活。在医学上，人们正是利用抗生素来抑制细菌的核糖体从而治疗疾病的。评委会说，三位科学家构筑了三维模型来显示不同的抗生素是如何抑制核糖体功能的，“这些模型已被用于研发新的抗生素，直接帮助减轻人类的病痛，拯救生命”。
2009年诺贝尔化学奖成果简介
2009年诺贝尔化学奖成果简介 摘要:主要介绍了2009年诺贝尔化学奖得主文卡特拉曼•拉马克里希南、托马斯•施泰茨和阿达•约纳特在有关核糖体结构和功能领域的研究成果,并阐述其现实意义和发展前景。 关键词核糖体晶体结构抗生素生理功能蛋白质 瑞典皇家科学院2009年10月7日宣布,将本年度诺贝尔化学奖授予美国科学家文卡特拉曼•拉马克里希南(Venkatraman Ramakrishnan)、美国科学家托马斯•施泰茨(Thomas A. Steitz)和以色列女科学家阿达•约纳特(Ada E. Yonath),以表彰他们在核糖体结构和功能研究领域作出的突出贡献。他们以较高的分辨率确定了核糖体的结构以及它在原子水平上的功能机理,并通过建立3D模型展示不同抗生素与核糖体的结合。本文主要介绍该项研究成果,并阐述其现实意义和发展前景。 1 核糖体简介 蛋白质生物合成是把储存在DNA分子上的遗传信息“翻译”成有各种生物功能蛋白质的复杂过程。所有有机体中,DNA的转录都是在RNA聚合酶的作用下传递给mRNA,而mRNA的翻译过程则需要在核糖体这个平台的作用下进行【1】。 1.1 核糖体的组成 细菌(70S)核糖体包含了一大一小2个亚基(30S,50S),S表示超离心沉降系数。30S亚基由大约20个不同的蛋白质与16S rRNA(含有1600个核苷酸)组成;50S 大亚基由大约33个不同的蛋白质、23S rRNA(含有2900个核苷酸)和5S rRNA(含有120个核苷酸)组成。尽管真核生物的核糖体比原核生物的更大更复杂,但核糖体的总体结构却相似【2】。对于tRNA,核糖体有3个结合位点:A位点、P位点和E位点(见图1)。而mRNA定位于30S亚基颈部的通道上,在新生肽链的延伸过程中它以梯状排列的方式穿过通道。 1.2 核糖体的功能 核糖体可以看成为一个多肽合成酶体系,而底物便是氨基酰tRNA。核糖体对底物的识别就是氨基酰tRNA与核糖体的结合及解码过程,肽键的形成与肽基移位(peptidyltransfer)就是核糖体的催化过程【3】。 核糖体能够催化与共价键有关的2个化学反应:终止时候肽键的形成和酯键的水解。而在蛋白质延伸和终止的过程中存在一个准确度的问题,就是指在蛋白质的延伸阶段,核糖体必须有效选择与一个氨基酸编码中A位点密码子(有义密码
抗体药物的研究现状和发展趋势
一、研究现状 1．抗体研究发展历程 抗体作为药物用于人类疾病的治疗拥有很长历史。但整个抗体药物的发展却并非一帆风顺，而是在曲折中前进。第一代抗体药物源于动物多价抗血清，主要用于一些细菌感染性疾病的早期被动免疫治疗。虽然具有一定的疗效，但异源性蛋白引起的较强的人体免疫反应限制了这类药物的应用，因而逐渐被抗生素类药物所代替。第二代抗体药物是利用杂交瘤技术制备的单克隆抗体及其衍生物。单克隆抗体由于具有良好的均一性和高度的特异性，因而在实验研究和疾病诊断中得到了广泛应用。 单抗最早被用于疾病治疗是在1982年，美国斯坦福医学中心Levy等人利用制备的抗独特型单抗治疗B细胞淋巴瘤，治疗后患者病情缓解，瘤体消失，这使人们对抗体药物产生了极大的期望。1986年，美国FDA批准了世界上第一个单抗治疗性药物——抗CD3单抗OKT3进入市场，用于器官移植时的抗排斥反应。此时抗体药物的研制和应用达到了顶点。随着使用单抗进行治疗的病例数的增加，鼠单抗用于人体的毒副作用也越来越明显。同时一些抗肿瘤单抗未显示出理想效果。人们的热情开始下降。到20世纪90年代初，抗内毒素单抗用于治疗脓毒败血症失败使得抗体药物的研究进入低谷。由于大多数单抗均为鼠源性，在人体内反复应用会引起人抗鼠抗体（HAMA）反应，从而降低疗效，甚至可引起过敏反应。因此，一方面在给药途径上改进，如使用片段抗体、交联同位素、局部用药等使鼠源性抗体用量减少，也增强了疗效；另一方面，积极发展基因工程抗体和人源抗体。 近年来，随着免疫学和分子生物学技术的发展以及抗体基因结构的阐明，DNA 重组技术开始用于抗体的改造，人们可以根据需要对以往的鼠抗体进行相应的改造以消除抗体应用不利性状或增加新的生物学功能，还可用新的技术重新制备各种形式的重组抗体。抗体药物的研发进入了第三代，即基因工程抗体时代。与第二代单抗相比，基因工程抗体具有如下优点：①通过基因工程技术的改造，可以
抗体药物现状与产业发展前景
抗体药物现状与产业发展前景 陈志南 国家“863”计划生物工程主题专家组 抗体系指机体在抗原性物质的刺激下所产生的一种免疫球蛋白(主要由淋巴细胞所产生)，因其能与细菌、病毒或毒素等异源性物质结合而发挥预防、治疗疾病作用。近年，抗体类药物以其高特异性、有效性和安全性正在发展成为国际药品市场上一大类新型诊断和治疗剂。 1. 抗体药物的发展历程 抗体作为药物用于人类疾病的治疗拥有很长历史。但整个抗体药物的发展却并非一帆风顺，而是在曲折中前进（图1）。第一代抗体药物源于动物多价抗血清，主要用于一些细菌感染性疾病的早期被动免疫治疗。虽然具有一定的疗效，但异源性蛋白引起的较强的人体免疫反应限制了这类药物的应用，因而逐渐被抗生素类药物所代替。 第二代抗体药物是利用杂交瘤技术制备的单克隆抗体及其衍生物。单克隆抗体由于具有良好的均一性和高度的特异性，因而在实验研究和疾病诊断中得到了广泛应用。单抗最早被用于疾病治疗是在1 982年，美国斯坦福医学中心Levy等人利用制备的抗独特型单抗治疗B细胞淋巴瘤，治疗后患者病情缓解，瘤体消失，这使人们对抗体药物产生了极大的期望。1986年，美国FDA批准了世界上第一个单抗治疗性药物——抗CD3单抗OKT3进入市场，用于器官移植时的抗排斥反应。此时抗体药物的研制和应用达到了顶点。随着使用单抗进
行治疗的病例数的增加，鼠单抗用于人体的毒副作用也越来越明显。同时一些抗肿瘤单抗未显示出理想效果。人们的热情开始下降。到2 0世纪90年代初，抗内毒素单抗用于治疗脓毒败血症失败使得抗体药物的研究进入低谷。由于大多数单抗均为鼠源性，在人体内反复应用会引起人抗鼠抗体（HAMA）反应，从而降低疗效，甚至可引起过敏反应。因此，一方面在给药途径上改进，如使用片段抗体、交联同位素、局部用药等使鼠源性抗体用量减少，也增强了疗效；另一方面，积极发展基因工程抗体和人源抗体。 近年来，随着免疫学和分子生物学技术的发展以及抗体基因结构的阐明，DNA重组技术开始用于抗体的改造，人们可以根据需要对以往的鼠抗体进行相应的改造以消除抗体应用不利性状或增加新的生 物学功能，还可用新的技术重新制备各种形式的重组抗体。抗体药物的研发进入了第三代，即基因工程抗体时代。与第二代单抗相比，基因工程抗体具有如下优点：①通过基因工程技术的改造，可以降低甚至消除人体对抗体的排斥反应；②基因工程抗体的分子量较小，可以部分降低抗体的鼠源性，更有利于穿透血管壁，进入病灶的核心部位； ③根据治疗的需要，制备新型抗体；④可以采用原核细胞、真核细胞和植物等多种表达形式，大量表达抗体分子，大大降低了生产成本。 自从1984年第一个基因工程抗体人－鼠嵌合抗体诞生以来，新型基因工程抗体不断出现，如人源化抗体、单价小分子抗体（Fab、单链抗体、单域抗体、超变区多肽等）、多价小分子抗体（双链抗体，三链抗体，微型抗体）、某些特殊类型抗体（双特异抗体、抗原化抗
核糖体的研究综述
核糖体的研究综述 安钰坤 摘要：核糖体是细胞内一种核糖核蛋白颗粒，主要由RNA(rRNA）和蛋白质构成，其惟一功能是按照mRNA的指令将氨基酸合成蛋白质多肽链，核糖体是细胞内蛋白质合成的分子机器。核糖体的研究对生物生存、繁殖、发育和遗传均是十分重要的。对核糖体的研究是近年来生命科学研究的热点,本文综述了核糖体的研究现状。 关键字：核糖体，蛋白质，亚基 1.核糖体的发现与功能 核糖体是由罗马尼亚籍细胞生物学家乔治·埃米尔·帕拉德(George Emil Palade)用电子显微镜于1955年在哺乳类与禽类动物细胞中首次发现的，他将这种新细胞器描述为密集的微粒或颗粒[1]。一年之后，A. J. Hodge等人在多种植物的体细胞中也发现了核糖体，可是当时人们仍无法将微粒体中的核糖体完全区分开来。后来，乔治·帕拉德以及阿尔伯特·克劳德和克里斯汀·德·迪夫因发现核糖体于1974年被授于诺贝尔生理学或医学奖。虽然核糖体作为一种细胞器在20世纪50年代初期已被发现，但对这种细胞器仍没有统一的命名。直到1958年，科学家理查德·B·罗伯茨才推荐人们使用“核糖体”一词。（图1为典型的细胞图解） Figure 1：典型的细胞图解，其中显示了几种主要细胞器及一些重要细胞结构：1.核仁2.细胞核3.核糖体4.囊泡 5.糙面内质网6.高尔基体7.细胞骨架8.光面内质网9.线粒体10.液 泡11.细胞质12.溶酶体13.中心粒 核糖体是细胞内一种核糖核蛋白颗粒(ribonucleoprotein particle），主要由RNA(rRNA）和蛋白质构成，其惟一功能是按照mRNA的指令将氨基酸合成蛋白质多肽链。因此核糖体是细胞不可缺少的基本结构，存在于所有细胞中。核糖体往往并不是单个独立地执行功能，而是由多个核糖体串连在一条mRNA分子上高效地进行肽键的合成。这种具有特殊功能与形态的核糖体与mRNA的聚合
单克隆抗体制备技术的最新进展及应用
单克隆抗体制备技术的最新进展及应用 作者姓名：程鹏王彤 指导教师：王国卿 单位名称：生物研究所 专业名称：生物工程 东北大学 2013年6月
单克隆抗体制备技术的最新进展及应用 摘要 单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具，其在基因和蛋白质的结构与功能研究方面有着不可或缺的作用, 在人类和动植物的免疫学诊断方面至今仍有着无可代替的重要作用。本论文综述了单克隆抗体的制备技术，包括嵌合抗体、噬菌体展示技术、核糖体展示技术、基因工程抗体等。这些技术将有效解决单克隆抗体的鼠源性等问题。最后对单克隆抗体在临床医学和疾病的诊断与治疗等领域的广阔应用前景及存在的不足作了概述。 关键词：单克隆抗体；人源抗体；制备技术；应用
目录 单克隆抗体制备技术的最新进展及应用.......................................................................................... I I 摘要 ......................................................................................................................................... I I 第一章引言 .. (1) 第二章单克隆抗体制备技术 (3) 2.1嵌合单克隆抗体抗体 (3) 2.2噬菌体展示技术 (3) 2.3核糖体展示技术 (4) 2.4RNA-多肽融合技术 (4) 2.5转基因小鼠制备全人抗体 (5) 第三章单克隆抗体的应用 (6) 3.1单克隆抗体在预防方面应用 (6) 3.2单克隆抗体在预防方面应用 (6) 3.2.1 作为免疫抑制剂 (6) 3.2.2 作为生物治疗的导向武器即所谓的“生物导弹” (7) 3.3 单克隆抗体在蛋白提纯中的应用 (7) 3.4 单克隆抗体在临床诊断及检测中的应用 (8) 第四章结束语 (10) 第五章展望 (11) 注释 (12) 参考文献 (13)
人源化抗体的研究进展
人源化抗体的研究进展 摘要：单克隆抗体的问世使得人们对于一种新的治疗疾病的药物充满期待，然而鼠源性抗体往往会受到人体免疫系统的排斥，因而抗体的人源化已成为治疗性抗体的发展趋势。用人抗体取代鼠抗体，是克服鼠单抗临床应用障碍的关键。随着分子生物学研究的深入和一些技术的突破，抗体人源化技术日益成熟。大量人源化抗体已经被广泛应用于临床试验和应用。本文主要介绍了目前人源化抗体构建的三种方法：嵌合、重构和表面重塑，并对人源化抗体的未来发展趋势进行了展望。 关键字：基因工程抗体人源化 1 基因工程抗体简介 基因工程抗体(genetically engineered antibod2ies ，GEAb)是按人工设计所重新组装的新型抗体分子，它既保留或增加了天然抗体的特异性和生物学活性，又去除或减少了无关结构，降低或基本消除抗体的免疫原性，使抗体人源化，并改善抗体的药物动力学，具有生产简单，价格低廉，容易获得稀有抗体的优点，具有广阔的临床应用前景。其主要技术原理是：首先从杂交瘤或免疫脾细胞、外周血淋巴细胞等提取mRNA，逆转录成cDNA，再经PCR分别扩增出抗体的重链及轻链基因，按一定的方式将两者连接克隆到表达载体中，并在适当的宿主细胞(如大肠杆菌、CHO细胞、酵母细胞、植物细胞及昆虫细胞等)中表达并折叠成有功能的抗体分子，筛选出高表达细胞株，再用亲和层折等手段纯化抗体片段[1]。 1984年，Morrison等首次报道人鼠嵌合抗体在骨髓瘤成功表达，标志着基因工程抗体的诞生。1986年，Jones等人源化抗体构建和表达成功。1988年，Skerra 等第一次证明抗体的F ab和F v片段可以在大肠杆菌(E。coli)中正确地装配成保持原抗体特异性的小分子抗体。1989年，Huse等用外分泌型载体构建成功小鼠抗体库，利用抗体库技术获得了全人源化的抗体。1994年，德国基因工程抗体研究小组成功地将基因工程抗体在培养细胞中表达，抗体释放到组织培养液中，获得了较高的抗体产量[2]。 抗体药物的最大特征在于它识别抗原的高度专一性。本文主要介绍人源化抗体的发展历程与研究进展。近几年来随着鼠单抗人源化技术越来越成熟大量的人源性单抗被用于临床治疗肿瘤研究，并取得一定进展，由于其具有高效、低毒、病人不易产生抗药性等优点，同时又克服鼠单抗半衰期短、反复应用会引进病人的等缺点，人源性单抗已成为继手术切除、放疗及化疗后又一治疗肿瘤的药物[3]。 2 人源化抗体的发展 早在一个世纪前，Paul Ehrlich就把抗体形容为“魔弹”，1975年杂交瘤技术建立以后，大量制备含有相同抗原决定簇的单克隆抗体成为可能，从而使“魔弹”进入了临床试验阶段[4]。1982年，当Philip Karr将第一株抗独特型单抗(anti-1d)应用于B细胞淋巴瘤的临床治疗并取得成功之后[5]，治疗性抗体的研究很快成为
核糖体习题
第十章核糖体 本章目标 1.掌握核糖体的种类，形态结构及生理功能。 2.掌握蛋白质合成的基本过程。 3. 一、选择题 （一）A型题 1．细胞中合成蛋白质的场所是 A．溶酶体B．滑面内质网C．细胞核D．核糖体E．细胞质 2．游离于细胞质中的核糖体，主要合成 A．外输性蛋白质B．溶酶体内蛋白C．细胞本身所需的结构蛋白 D．膜骨架蛋白E．细胞外基质的蛋白质 3．组成核糖体的核糖核酸为 A．mRNA B．tRNA C．rRNA D．sRNA E．以上都不是 4．真核细胞质中核糖体的大小亚基分别为60S和40S，其完整的核糖体颗粒为A．100S B．80S C．70S D．120S E．90S 5．下列哪一结构中不含核糖体 A．细菌B．线粒体C．精子D．癌细胞E．神经细胞 6．在蛋白质合成的过程中，肽键的形成是在核糖体的哪一部位 A．供体部位B．受体部位C．肽基转移酶位D．GTP酶活性部位 E．小亚基 7．肽基转移酶存在于 A．核糖体的大亚基中B．核糖体的小亚基中C．mRNA分子内 D．tRNA分子内E．细胞质中 8．核糖体小亚基结合到mRNA上时，所需要的起始因子是 A．IF l B．IF2C．IF3D．Tu E．Ts 9．在蛋白质合成的过程中，氨酰tRNA进入核糖体的哪一部位 A．供体部位B．受体部位C．肽转移酶中心D．GTP酶部位 E．以上都不是 10．在蛋白质合成过程中，tRNA的功能是 A．提供合成的场所B．起合成模板的作用C．提供能量来源 D．与tRNA的反密码相识别E．运输氨基酸 11．真核细胞核糖体小亚基中所含rRNA的大小为 A．28S B．23S C．18S D．16S E．5S 12．在蛋白质合成过程中，mRNA的功能是 A．起串连核糖体作用B．起合成模板的作用C．起激活因子作用D．识别反密码E．起延伸肽链作用 13．肝细胞合成血浆蛋白的结构是 A．线粒体B．粗面内质网C．高尔基复合体D．核糖体E．扁平囊泡
答案-- 9.核糖体
第九章核糖体 一、填空题 1. 真核生物有三种RNA聚合酶，其中聚合酶Ⅲ转录。 tRNA 2. 原核和真核生物的mRNA至少有三种差别：①； ②；③。 真核生物mRNA有5‘帽子结构;3’有poly（A）结构；原核的mRNA是多顺反子3. 组成真核生物核糖体大亚基的rRNA有三种，分别是、、。 18S 5.8S 28S 4. 原核生物和真核生物的核糖体分别是70S和80S，而叶绿体的核糖体是，线粒体的核糖体则是。 70S 55S 5. 在蛋白质合成过程中，mRNA是蛋白质合成的，tRNA 是按密码子转运氨基酸的，而核糖体则是蛋白质合成的。 模板运载工具装配场所 6．真核生物有三种RNA聚合酶，分别转录不同的基因，如RNA聚合酶Ⅰ转录。 rRNA 7．核糖体是一种可以进行自我组装的细胞器。真核生物的核糖体是在细胞核内装配的。编码三种rRNA的基因在染色体上属于同一个，并在核仁中转录成的前体。离体实验表明：原核生物核糖体30S小亚基上的21种蛋白质中，有种是初级结合蛋白，是直接与的rRNA结合的；剩下的次级结合蛋白并不直接与rRNA结合，但它们是维持核糖体功能所必需的。 18S、5.8S、28S 转录单位45S的rRNA 14 16S 二、判断题 1．原核生物和真核生物的核糖体都是在胞质溶胶中装配的。 错。真核生物的核糖体是在核仁中装配的。 2．原核生物和真核生物核糖体的亚基虽然不同，但两者形成的杂交核糖体仍能进行蛋白质合成。 对。 3．细胞内一种蛋白质总量是否处于稳定状态，取决于其合成速率、催化活性以及降解速率。 错。蛋白质的含量取决于合成和降解的比率，而与催化活性无关。4．mRNA的合成是从DNA模板链的3，末端向5‘末端方向移动进行，而翻译过程则是从mRNA模板的5’末端想3‘末端进行。 对。 5．氯霉素是一种蛋白质合成抑制剂，可抑制细胞质核糖体上的蛋白质合成。 错。它只能抑制70S核糖体进行蛋白质合成，而不能抑制80S核糖体进行蛋白质合成。 6．单个核糖体的大小亚基总是结合在一起，核糖体之间从不交换亚基。 错。在每一轮翻译后，核糖体的亚基之间会进行互换。当核糖体从一条mRNA 链上释放下来后，它的两个亚基解体，进入一个含游离大亚基和小亚基的库，并
3.2细胞内物质的合成
课题第二节细胞内物质的合成 教学重点1.核糖体和内质网的形态、分类和功能 2.物质在细胞内的合成 教学难点物质在细胞内的合成 教学目标知识目标 1.知道核糖体和内质网形态结构、分类、组成成分、分布特点尤其是分类与功 能 2.简述物质在细胞内的合成过程 能力目标 1.学会应用构建生物模型的方法加强对抽象结构和概念的理解 2.培养学生的观察能力、思维能力. 情感目标 1.通过结构与功能相适应的生物学思想,加强对唯物主义、辨证观的树立和培养 2. 通过核糖体和内质网及高尔基体对蛋白质合成的协作,加强同学们对团队的 认识,加强集体意识和合作精神 法制渗透 教学方法讲授法、直观教具法课时安排 1 教学内容教学过程个人教学札记 一、核糖体与内质网的结构导入：植物细胞中的叶绿体能够利用太阳光能，把水和二氧化碳等无机小分子合成淀粉等有机物。同样，细胞还能将从外界吸收来的其他小分子物质，如氨基酸、胆固醇等合成“建造”细胞及生物体的蛋白质、脂质等生物大分子。那么，细胞内的哪些结构能担任此重任呢？生物大分子在细胞内又是怎样合成的呢？今天我们就来学习生物大分子蛋白质和脂质等的合成及运输过程。（出题）第二节细胞内物质的合成 引导学生看细胞结构图片，充分利用教材这个最重要的教学资源和学生的经验，关键要给学生解释清楚很大部分物质是生物细胞合成的！ 1.线粒体是细胞进行有氧呼吸的主要场所。又称＂动力车间＂。细胞生命活动所需的能量，大约95%来自线粒体。 2. 中心体与低等植物细胞、动物细胞有丝分裂有关。 3.核糖体是“生产蛋白质的机器”，有的依附在内质网上称为附着核糖体，有的游离分布在细胞质中称为游离核糖体。 4.内质网是由膜连接而成的网状结构，是细胞内蛋白质的合成和加工，以及脂质合成的“车间”。 5.高尔基体对来自内质网的蛋白质加工，分类和包装的“车间”及“发送站”。 6.溶酶体分解衰老，损伤的细胞器，吞噬并杀死入侵的病毒或细菌。 7.液泡是调节细胞内的环境，使植物细胞保持坚挺的细胞器。含
细胞生物学核糖体的结构及功能
第十一章核糖体 一、核糖体的结构及功能 核糖体是体积较小的无膜包围的细胞器，在光镜下看不到。1958年才把这种含有大量RNA的能合成蛋白质的关键装置定名为核糖核蛋白体ribosome，简称为核糖体。 (一)核糖体的一般性质 1、存在与分布 核糖体存在一切生物的细胞中，包括真核细胞和原核细胞。这是有别于其它细胞器的特点。在真核细胞中，有些核糖体是游离分布在细胞质基质中，也有许多是附着在rER膜及核膜外表。此外，还有核糖体是分布在线粒体和叶绿体的基质中。在原核细胞内，大量核糖体游离在细胞质中，也有的附着在质膜内侧面。细菌的核糖体占总重量的25—30%。 2、形态和大小 一般直径为25—30nm，由大、小两亚单位构成，通常是以大亚单位附在内质网膜或核膜外表。当进行蛋白质合成时，小亚单位先接触mRNA才与大亚单位结合，而合成完毕后又自行解离分开。另外，多个核糖体还可由mRNA串联成多聚核糖体，每个多聚核糖体往往由5-6个核糖体串成，但也有多至50个以上的(例如肌细胞中合成肌球蛋白的多聚核糖体是由60—80个串联而成)。 3.数量和分类 细胞中的核糖体数量多少不一。一般来说，增殖速度快的细胞中偏多，分泌蛋白质的分泌细胞中也较多。例如分泌胆汁的肝细胞中为6×106个，大肠杆菌中为1500—15000个。在不同类型生物细胞之中，核糖体大小及组分都有一定差
异。一般可分为两大类：80S型和70S型。 大亚单位60S 真核生物核糖体80S 小亚单位40S 大亚单位50S 原核生物核糖体70S 小亚单位30S （“S”是沉降系数的衡量单位。大、小亚单位组成核糖体，并非由其两者的S值直接相加，这是因为S值变化其实是与颗粒的体积及形状相关的。） 叶绿体中的核糖体与原核生物的相似，而线粒体中的核糖体则较小且多变，例如哺乳动物的线粒体核糖体是55S，但一般仍将它们都划分到原核生物的70S型。 (二)核糖体的化学组成 主要组分是r蛋白和rRNA，极少或无脂类。70S型核糖体之中，r蛋白: rRNA约1 : 2 ；而在80S型核糖体之中，r蛋白: rRNA约1 : 1 。 核糖 体来源核糖体 大亚 单位 小亚 单位 rRNA r蛋白数量 大亚单位 小亚 单位 大亚 单位 小亚 单位 真核细 胞原核细胞线粒体80S 70S 55S 60S 50S 35S 40S 30S 25S 28S+5S+5.8S 23S+5S 21S+5S 18S 16S 12S 49 31 - 33 21 - 70S和80S型核糖体都含有5S rRNA，其结构大小十分接近，都由120或121个核苷酸组成。这表明古核生物、原核生物和真核生物在进化上的亲缘关系，它是残存在生物体
生物专业英语第三版课文翻译lesson1,4,5
Lesson 1 4 5 Lesson 1 1.细胞质：动态移动工厂 与我们生命相关的大多数性质是细胞质的性质。细胞质大部分由半流体物质组成，并以外部的质膜为界。细胞器悬浮在其中，由丝状的细胞骨架支撑。细胞质中溶解了大量的营养物质，离子，可溶性蛋白以及维持细胞功能的其它物质。 2.细胞核：信息中心 真核细胞的细胞核是最大的细胞器，在染色体上储存着遗传物质（DNA）。（原核细胞的遗传物质存在于拟核中。）细胞核含有一或两个核仁，核仁促进细胞分裂。被穿孔的囊称为核膜，它将细胞核及其内容物从细胞质中分离出来。小分子可以穿过核膜，但较大的分子如mRNA 和核糖体必须通过核孔进入和排出。 3.细胞器：专用的功能单位 所有的真核细胞都含有多种细胞器，每个细胞器在细胞中都有其特定功能。本节介绍的细胞器包括核糖体，内质网，高尔基体，液泡，溶酶体，线粒体和植物细胞中的质体（叶绿体）。 一个细胞中核糖体的数量可能从几百到上千不等，这一数量反映了核糖体是氨基酸被组装成蛋白质以供输出或用于细胞过程的场所这个事实。一个完整的核糖体由一个较大的亚基和一个较小的亚基组成。在蛋白质合成过程中，两个亚基沿着一条mRNA链移动，“读取”编码在其中的基因序列，并将该序列翻译成脯氨酸。多个核糖体可能附着在单个mRNA链上，这种组合被称为多聚体。大多数细胞蛋白质是在细胞质中的核糖体上制造的。可输出的蛋白质和膜蛋白通常在内质网的帮助下产生。 内质网，是一些不规则排列的膜囊，小管，和液泡组成的，可能有光滑和粗糙的区别。两种类型都与蛋白质的合成和运输有关。粗糙内质网上分布着许多核糖体，也可能细胞分裂后核膜的来源。 光滑的内质网上没有核糖体，主要作用是脂肪和类固醇的合成以及细胞内有毒物质的氧化。两种类型的内质网都充当细胞内的隔室，其中特定的产物可以被分离并随后分流到细胞内或细胞外的特定区域。 运输小泡能够将可运输分子从内质网运输到另一个膜质细胞器上。在高尔基复合体内，蛋白质分子被修饰和包装，以输出细胞或运送到细胞质中的其他地方。 细胞中的液泡似乎是中空的，但实际上充满了流体和可溶性分子。最典型的液泡出现在植物细胞中，用作贮水场所和糖以及其他分子的贮存地点。动物细胞中的液泡进行吞噬作用（颗粒物质的摄入）和胞饮作用（空泡饮酒vacuolar drinking）。 液泡的一个亚单位是被称为溶酶体的细胞器，它含有消化酶（包装在高尔基复合体中的溶酶体），可以分解大部分生物大分子。它们起到消化食物颗粒和降解受损细胞部分的作用。 线粒体是所有细胞中产生能量的化学反应的场所。此外，植物细胞含有质体，它们利用光能在光合作用过程中制造碳水化合物。在线粒体内嵴上提供了很大的表面积分布着ATP酶。
抗体药物地研究现状和发展趋势
抗体药物的研究现状和发展趋势 一、研究现状 1．抗体研究发展历程 抗体作为药物用于人类疾病的治疗拥有很长历史。但整个抗体药物的发展却并非一帆风顺，而是在曲折中前进。第一代抗体药物源于动物多价抗血清，主要用于一些细菌感染性疾病的早期被动免疫治疗。虽然具有一定的疗效，但异源性蛋白引起的较强的人体免疫反应限制了这类药物的应用，因而逐渐被抗生素类药物所代替。第二代抗体药物是利用杂交瘤技术制备的单克隆抗体及其衍生物。单克隆抗体由于具有良好的均一性和高度的特异性，因而在实验研究和疾病诊断中得到了广泛应用。 单抗最早被用于疾病治疗是在1982年，美国斯坦福医学中心Levy等人利用制备的抗独特型单抗治疗B细胞淋巴瘤，治疗后患者病情缓解，瘤体消失，这使人们对抗体药物产生了极大的期望。1986年，美国FDA批准了世界上第一个单抗治疗性药物——抗CD3单抗OKT3进入市场，用于器官移植时的抗排斥反应。此时抗体药物的研制和应用达到了顶点。随着使用单抗进行治疗的病例数的增加，鼠单抗用于人体的毒副作用也越来越明显。同时一些抗肿瘤单抗未显示出理想效果。人们的热情开始下降。到20世纪90年代初，抗毒素单抗用于治疗脓毒败血症失败使得抗体药物的研究进入低谷。由于大多数单抗均为鼠源性，在人体反复应用会引起人抗鼠抗体（HAMA）反应，从而降低疗效，甚至可引起过敏反应。因此，一方面在给药途径上改进，如使用片段抗体、交联同位素、局部用药等使鼠源性抗体用量减少，也增强了疗效；另一方面，积极发展基因工程抗体和人源抗体。 近年来，随着免疫学和分子生物学技术的发展以及抗体基因结构的阐明，DNA 重组技术开始用于抗体的改造，人们可以根据需要对以往的鼠抗体进行相应的改造以消除抗体应用不利性状或增加新的生物学功能，还可用新的技术重新制备各种形式的重组抗体。抗体药物的研发进入了第三代，即基因工程抗体时代。与第二代单抗相比，基因工程抗体具有如下优点：①通过基因工程技术的改造，可以降低甚至消除人体对抗体的排斥反应；②基因工程抗体的分子量较小，可以部分
核糖体
1.真核生物有三种RNA聚合酶，其中聚合酶Ⅲ转录。 2.原核和真核生物的mRNA至少有三种差别：①＿；②；③ 3.组成真核生物核糖体大亚基的rRNA有三种，分别是：、、。 4.原核生物和真核生物的核糖体分别是70S和80S，而叶绿体的核糖体是，线粒体的核糖体则是。 5.在蛋白质合成过程中，rRNA是蛋白质合成的，tRNA是按密码子转运氨基酸 的，而核糖体则是蛋白质合成的。 6.细胞核内不能合成蛋白质，因此，构成细胞核的蛋白质（包括酶）主要由合成，并通过引导进入细胞核。 7.RNA编辑是指在的引导下，在水平上改变 8.原核生物线粒体核糖体的两个亚基的沉降系数分别是和。 9.核糖体两个亚基的聚合和解离与Mg2＋浓度有很大的关系，当Mg2＋浓度小于时， 70S 的核糖体要解离；当Mg2＋浓度大于时，两个核糖体聚合成 100S的二聚体。 10.70S核糖体中具有催化活性的RNA是。 11.在蛋白质的合成过程中mRNA起到的作用，即根据mRNA中密码子的指令将合成多肽链中氨基酸按相应顺序连接起来，密码子决定了多肽链合成的起始 位置和其上的氨基酸顺序。然而mRNA的密码子不能直接识别氨基酸，所以氨基酸必须先与相应的tRNA结合形成，才能运到核糖体上。tRNA以其 识别mRNA密码子，将相应的氨基酸转运到核糖体上进行蛋白质合成。因此，通过密码子才能翻译出mRNA上的遗传信息，翻译过程中需要既能携带氨基酸又能识别密码子的tRNA作为连接器，将氨基酸转运到相应密码子的位置，完成蛋白质合成。 12.蛋白酶体既存在于细胞核中，又存在于胞质溶胶中，是溶酶体外的，由10～20个不同的亚基组成结构，显示多种肽酶的活性，能够从碱性、酸性和中性氨基酸的端水解多种与连接的蛋白质底物。蛋白酶体对蛋白质的降解是与环境隔离的。主要降解两种类型的蛋白质：一类是，另一类就是。蛋白酶体对蛋白质的降解通过介导。是由76个氨基酸残基组成的小肽，它的作用主要是识别要被降解的蛋白质，然后将这种蛋白质送入蛋白酶体的圆桶中进行降解。蛋白酶体对蛋白质的降解作用分为两个过程：①对被降解的蛋白质进行标记，由完成；②蛋白酶解作用，由催化。蛋白酶体存在于所有细胞中，其活性受素的调节。
核糖体
第十一章核糖体 选择题 1.组成核糖体的核糖核酸为 A.mRNA B.tRNA C.rRNA D.sRNA 2.真核细胞质中核糖体的大小亚基分别为60S和40S，其完整的核糖体颗粒为 A.100S B.80S C.70S D.90S 3.在蛋白质合成的过程中，肽键的形成是在核糖体的哪一部位 A.供体部位 B.受体部位 C.肽基转移酶位 D.GTP酶活性部位 4.影响核糖体大小亚基结合的金属离子为 A.Ca2+ B.Na+ C.K+ D.Mg2+ 5.肽基转移酶存在于 A.核糖体的大亚基中 B.核糖体的小亚基中 C.mRNA分子内 D.tRNA分子内 6.遗传密码子是指 A.DNA分子上每3个相邻的碱基 B.rRNA分子上每3个相邻的碱基 C.tRNA分子上每3个相邻的碱基 D.mRNA分子上每3个相邻的碱基 7.一个tRNA上的反密码子是UAC，与其相对应的mRNA密码子是 A.CAC B.AUG C.TUG D.ATG 8.以mRNA为模板合成蛋白质的过程称为 A.转录 B.转化 C.翻译 D.复制 9.在蛋白质合成的过程中，氨酰tRNA进入核糖体的哪一部位 A.供体部位 B.受体部位 C.肽转移酶中心 D.GTP酶部位 10.在蛋白质合成过程中，tRNA的功能是 A.提供合成的场所 B.起合成模板的作用 C.与tRNA的反密码相识别 D.运输氨基酸 11.游离于细胞质中的核糖体，主要合成 A.外输性蛋白质 B.溶酶体内蛋白 C.细胞本身所需的结构蛋白 D.高尔基复合体内蛋白 12.参与蛋白质合成的酶是 A.羧基肽酶 B.谷氨酰氨合成酶 C.肽基转移酶 D.连接酶 13.细胞的蛋白合成时，氨基酸活化所需的能源是 A.ATP B.ADP C.GTP D.cAMP 14.真核细胞核糖体小亚基中所含rRNA的大小为
抗体制备方法的研究进展
4 Guy J Hallman,Paisan Loaharanu.Generic Ionizing Rad-i ation Quarantine Treatments Agai nst Fruit Fli es(Diptera: T ephritidae)Proposed.Journal of Economic Entomoloy, 2002,95(5):893~901 5 Peter A Follett and Suzanne S Sanxter.Hot Water Immer-sion to Ens ure Quarantine Securi ty for Cryptophle bia spp. (L epidoptera:Tortricidae)in Lychee and Longan Export-ed from Hawaii.Stored-Product and Uarantine Entomolo-gy,S tord-Product And Uarantine Entomology,2001,94 (5):1292~1295 抗体制备方法的研究进展 邵碧英 (福建出入境检验检疫局 福州 350001) 由于抗体的反应特异性,抗体的应用广泛,不仅是细菌、病毒、外源蛋白等的诊断和检测试剂,而且还是人和动物某些疾病的诊断试剂和有效治疗药物。抗体制备方法经历了常规血清技术、杂交瘤技术、基因工程抗体技术及抗体库技术,本文将分别阐述。 1 常规血清技术 常规的抗体制备包括抗原的制备、免疫动物、抗血清制备及特异抗体纯化等步骤。获得的抗体是针对多个不同抗原决定簇的抗体混合物,因此称之为多克隆抗体,简称多抗。制备抗体,关键是获得高产量、高纯度的抗原。抗原的获得方法有以下几种。 1 1 抗原提取剂 若抗原易获得,或易提纯,则可采用抗原提取剂制备抗体。以制备病原体的抗体为例,若以整个病原体作为抗原,只需对其进行分离、纯化,而以其某部分如菌丝可溶性蛋白、病毒的外壳蛋白等作为抗原,则要采用相应的提取方法。低分子量物质需与大的载体偶联后才可形成完全抗原。陈京等[1]将提纯的番茄环斑病毒、烟草环斑病毒和南芥菜花叶病毒分别免疫兔子,制备的抗血清用于3种病毒的检测。陈松等[2]将从苏云金杆菌菌体中提取的Bt蛋白作为抗原,制备的抗血清用于检测转基因棉花中的Bt蛋白。氯霉素(GAP)是小分子物质,石德时等[3]将GAP 和牛血清白蛋白偶联作为抗原制备了抗血清,用于检测动物性食品中的GAP残留。 1 2 人工合成的多肽 若目的蛋白的氨基酸序列已经清楚或可从相应的核苷酸序列推导,则可合成短肽,与载体蛋白偶联后作为抗原。许家喜等[4]在计算机辅助下根据外源基因cDNA序列预测出蛋白抗原位点肽,人工合成后制成复合抗原,免疫家兔后获得特异性抗体,用于测定转基因植物中外源基因的表达产物。 1 3 基因工程抗原 若病原体难培养或抗原不易提取,则可采用基因工程抗原,制备的一般程序是:克隆抗原基因,构建表达载体,转化受体,使抗原基因得到表达,表达产物经适当纯化即可作为抗原。制备基因工程抗原,关键是选择适当的表达系统。表达系统有以下几种。 1 3 1 原核细胞表达系统:原核细胞表达系统有大肠杆菌、枯草杆菌、链霉菌、蓝细菌等,既可表达原核基因,又可表达真核基因。其中,大肠杆菌最常用,具有经济、易操作、研究和生产周期较短等优点。 1 3 2 真核微生物表达系统:真核微生物表 292 收稿日期:2003-02-20