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16SrDNA序列分析在嗜尸性蝇类鉴定中的应用

JournalofForensicMedicine,February2006,Vol.22,No.1

线粒体DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)广泛存在于真核细胞中,与核DNA相比,具有分子小、结构简单、进化速度快以及母系遗传等特点。因而,研究

mtDNA序列,比研究核DNA更容易区别边缘种群[1]。

尤其是对于利用mtDNA上细胞色素氧化酶辅酶Ⅰ和

Ⅱ(COⅠ和COⅡ)基因序列分析进行嗜尸性苍蝇种类

鉴定,可以解决依据形态学方法难以进行苍蝇卵、幼虫种类鉴定的难题,可作为法医学鉴别嗜尸性苍蝇及其幼虫、卵种类的可靠依据。然而,就亲缘关系非常接近

的铜绿蝇和丝光绿蝇而言,由于二者的种内、种间进化分歧非常接近,运用上述两个片段则很难区别。本文通过对嗜尸性蝇类mtDNA上16SrDNA的551bp基因序列分析探讨通过该方法鉴别丝光绿蝇和铜绿蝇的可行性。

1材料与方法

1.1样本

随机采集成都地区和呼和浩特地区放置于室外草地家兔尸体上的9只丝光绿蝇、11只铜绿蝇。

1.2DNA的提取

将选中的苍蝇去除头、腹、翅膀和四肢后,清洗、捣碎,用酚-氯仿法提取其胸肌DNA,并溶解于TE

[作者简介]孙晓明(1980),男,山东烟台人,博士,主要从事法

医物证学研究,(电子信箱)lupusstar@163.com。

[通讯作者]侯一平,rechtsme@weums.edn.cn。

16SrDNA序列分析在嗜尸性蝇类鉴定中的应用

孙晓明,蔡继峰,应斌武,方月琴,云利兵,袁万安,高山,侯一平(四川大学华西基础医学与法医学院,四川成都610041)

[摘要]目的通过mtDNA上16SrDNA中551bp基因序列分析,解决依据COI和COII上278bp和635bp

基因序列难以鉴别丝光绿蝇、铜绿蝇种类的难题,为法医学嗜尸性苍蝇种类的鉴别提供依据。方法

机采集放置在呼和浩特及成都地区室外草地家兔尸体上的铜绿蝇和丝光绿蝇,对其mtDNA上16SrDNA中551bp基因序列进行分析、比对,构建系统发育树。结果通过对嗜尸性蝇类mtDNA上16SrDNA的

551bp基因序列分析可以对丝光绿蝇和铜绿蝇进行鉴别。结论16SrDNA上551bp基因序列分析是对嗜尸性蝇类(尤其是铜绿蝇和丝光绿蝇)进行种类鉴定的有效方法,是对依据COⅠ和COⅡ序列分析方法鉴别嗜尸性苍蝇种类的重要补充。

[关键词]嗜尸性蝇类;种类鉴定;线粒体;16SrDNA;法医学[中图分类号]DF795.2

[文献标识码]A

[文章编号]1004-5619(2006)01-0036-04

IdentificationofSarcosaphagousFliesbyAnalysestheSequenceof16SrDNA

SUNXiao-ming,CAIJi-feng,YINGBin-wu,FANGYue-qin,YUNLi-bing,YUANWan-an,GAOShan,HOUYi-ping

(InstituteofForensicMedicine,SichuanUniversity,Chengdu

610041,China)

Abstract:ObjectiveTosolvethedifficultiesofidentificationofSarcosaphagousfliessuchasLucilia

sericata(Meigen)andLuciliacuprina(Wiedemann)whichcouldnotbeidentifiedbyanalyzingthe278bpand635bpregionsofthegeneencodingforcytochromeoxidasesubunitⅠandⅡ(COⅠandCOⅡ)in

mtDNA.MethodsSpecimenswerecollectedfromthecorpsesofrabbitsonthegrasslandinHuhhotand

Chengdu,

thesequencesof551bpregionof16SrDNAoftheirmtDNAwereanalyzed,

themultiple-

alignmentprogramDNAMAN(version4.0)andMEGA2.1sofewarewereemployedforsequencealignmentsneighbour-joiningtreeconstruction.ResultsLuciliasericata(Meigen)andLuciliacuprina(Wiedemann)weredistinguishedsuccessfullybysequenceanalysisofThe551bpregionofthegeneof16SrDNA.ConclusionThe551bpregionofthegeneof16SrDNAofsarcosaphagousfliescanbeusedforidentifyingthemonspeciesleveleffectively.

Itislikelytobeasuccessfulcomplimenttoidentifythe

sarcosaphagousfliesbysequenceanalysisofCOⅠandCOⅡinmtDNA.

Keywords:Sarcosaphagousflies;speciesidentification;mitochondria;16SrDNA;forensic36??