食品工程：2,4-二硝基苯肼测定食品中Vc含量

2,4-二硝基苯肼法Vc的测定方法

实验原理：

总抗坏血酸包括还原型、脱氧型和二酮古乐糖酸，样品中还原型抗坏血酸经活性氧化为脱氢抗坏血酸，在与2,4-二硝基苯肼作用生成红色脎，其呈色强度与总坏血酸含量呈正比，可进行比色定量。

仪器与试剂：

1.仪器

恒温箱或电热恒温水浴锅，可见光分光光度计，捣碎机。

2.试剂

（1）4.5mol/L硫酸：谨慎地加入250mL硫酸（相对密度1.84）于700mL，水中，冷却后用水稀释至1000mL。

（2）85%硫酸：谨慎地加入900mL硫酸（相对密度1.84）于100mL水中。

（3）2，4-二硝基苯肼溶液（20g/L）：溶解2g 2，4-二硝基苯肼于100mL 4.5mol/l硫酸中，过滤。不用时存于冰箱内，每次用前必须过滤。

（4）草酸溶液（20g/L）：溶解20g草酸于700mL水中，稀释至1000mL。

（5）草酸溶液（10g/L）：取500mL草酸（20g/L）稀释至1000mL。

（6）硫脲溶液（10g/L）：溶解5g硫脲于500mL草酸溶液（10g/L）中

（7）硫脲溶液（20g/L）：溶解10g硫脲于500mL草酸溶液（10g/L）中

（8）1mol/L盐酸：取100mL盐酸，加入水中，并稀释至1200mL。

（9）抗坏血酸标准溶液：称取100mg纯抗坏血酸溶解于100mL 20g/L草酸溶液中，此溶液每毫升相当于1mg抗坏血酸。

（10）活性炭：将100g活性炭加到750mL 1mol/L盐酸中，回流1h～2h，过滤，用水洗数次，至滤液中无铁离子为止，然后置于110℃烘箱中烘干。

检验铁离子方法；利用普鲁士蓝反应。将20g/L亚铁氰化钾与1%盐酸等量混合，将上述洗出滤液滴入，如有铁离子则产生蓝色沉淀。

实验步骤：

1、称2g～5g样品放入乳钵内，加入10g/L 草酸溶液磨成匀浆，倒入100mL容量瓶内，用10g/L草酸溶液稀释至刻度，混匀。将样品液加入10%钨酸钠数滴至底面有沉淀，过滤，离心，备用。

2、氧化处理

取25mL上清滤液，加入2g活性炭，振摇1min过滤，弃去最初数毫升滤液。取10mL此氧化提取液，加入10mL 20g/L硫脲溶液，混匀，此试样为稀释液

3、呈色反应

取三个试管，各加入4mL氧化处理稀释液。一个试管作为空白，在其余每支试管中加入1.0mL 20g/L 2，4-二硝基苯肼溶液，将所有试管放入37℃±0.5℃水浴中，保温3h。

3h后取出，除空白管外，将所有试管放入冰水中。空白管取出后使其冷却到室温，然后加入1.0mL 20g/L 2，4-二硝基苯肼溶液，在室温中放置10min～15min后放入冰水内。其余试管同试样。

4、85%硫酸处理

当试管放入冰水后，向每一试管中加入5mL 85%硫酸，滴加时间至少需要1min，需边加边

摇动试管。将试管自冰水中取出，在室温放置30min 后比色。

5、标准曲线的绘制

加2g 活性炭于50mL 标准溶液中，振荡1min ，过滤。

取10mL 滤液放入500mL 容量瓶中，加5.0g 硫脲，用10g/L 草酸溶液稀释至刻度，抗坏血酸浓度20μg/mL 。

取5，10，20，25，40，50，60mL 稀释液，分别放入7个100mL 容量瓶中，用10g/L 硫脲溶液稀释至刻度，使最后稀释液中抗坏血酸的浓度分别为1，2，4，5，8，10，12μg/mL 。

6、比色

用1cm 比色杯，以空白液调零点，于500nm 波长测吸光值。

7、结果计算

1000

100????=F m V c X

X ——试样中总抗坏血酸含量，单位为毫克每百克（mg/100g ）

c ——由标准曲线查得或回归方程算得“试样氧化液”中总抗坏血酸浓度，单位为微克每毫升（μg/mL ）

V ——试样用10g/L 草酸溶液定容的体积，单位为毫升（mL ）

F ——试样氧化处理中的稀释倍数

m ——试样的质量，单位为克（g ）

计算结果表示到小数点后两位

食品中微生物细菌总数的测定

食品中微生物细菌总数的测定 一、实验目的 1学习并掌握细菌的分离和活菌计数的基本方法和原理； 2了解菌落总数测定在对被样品进行卫生学评价中的意义。 二、实验原理 菌落总数是指食品经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1ml检样中所含细菌菌落总数。菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。 菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。 三、器材 食品检样营养琼脂培养基无菌生理盐水无菌培养皿，无菌移液管酒精灯等。 四、实验步骤 1取样、稀释和培养 1.1以无菌操作取检样25g（或ml），放于225mL灭菌生理盐水的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振要或研磨制成1:10的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后，最好置灭菌均质器中以8000～10000r/min的速度处理1min，制成1:10的均匀稀释液。

1.2用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml 灭菌生理盐水的试管内，振摇试管混合均匀，制成1:100的稀释液。 1.3另取1ml灭菌吸管，按上项操作顺序，制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换用1支10ml吸管。 1.4根据标准要求或对污染情况的估计，选择2～3个适宜稀释度，分别在制作10倍递增稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1ml 稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。 1.5稀释液移入平皿后，将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约 15ml，并转动平皿，混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml 稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。 1.6待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养48±2h，取出计算平板内菌落数目，乘以稀释倍数，即得每克（每毫升）样品所含菌落总数。 2菌落计数方法 作平皿菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平皿的菌落总数后，求出同稀释度的各平皿平均菌落数。到达规定培养时间，应立即计数。如果不能立即计数，应将平板放置于0－4℃，但不要超过24h。 3菌落计数报告方法 3.1平皿菌落数的选择 选取菌落数在30～300之间的平皿作为菌落总数测定标准。每一个稀释度应采用两个平皿平均数，其中一个平皿有较大片状菌落生长

维生素C药片中Vc含量的测定(碘量法)

维生素C 药片中Vc 含量的测定（碘量法） 一、实验目的 1、 掌握直接碘量法测定Vc 的原理及其操作。 2、 掌握碘标准溶液的配制及标定。 3、 掌握维生素C 的测定方法。 二、实验原理 （一）碘量法 碘量法是以I 2的氧化性和I －的还原性为基础的滴定分析方法。在一定条件下，用碘离子来还原，定量的析出碘单质，然后用Na 2S 2O 3 标准溶液来滴定析出的I 2。这种方法叫做间接碘量法。本实验采用间接碘量法测碘的浓度。以淀粉为指示剂，Na 2S 2O 3 标准溶液来滴定析出的I 2，以蓝色消失为终点，即可算出碘的浓度。 维生素C 又称抗坏血酸Vc ，分子式C 6H 8O 6。Vc 具有还原性，可被I 2定量氧化， 因而可用I 2标准溶液直接测定。其滴定反应式： （二）碘溶液的配制与标定 I 2微溶于水而易溶于KI 溶液，但在稀的KI 溶液中溶解得很慢，所以配制I 2溶液时不能过早加水稀释，应先将I 2和KI 混合，用少量水充分研磨，溶解完全后再加水稀释。 I 2 溶液的标定可以用As 2O 3或Na 2S 2O 3标定，因为As 2O 3是剧毒物质，我们用Na 2S 2O 3来标定。 O HO O C H OH CH 2 OH +I 2 O O O O C H OH CH 2OH +2HI

（三）硫代硫酸钠溶液的配制与标定 Na2S2O3一般含有少量杂质，在PH=9-10间稳定，所以在Na2S2O3溶液中加入少量的Na2CO3，Na2S2O3见光易分解可用棕色瓶储于暗处，经一周后，用K2C2O7做基准物间接碘量法标定Na2S2O3溶液的浓度。根据K2C2O7标准溶液的物质的量浓度和滴定消耗的体积，就可计算出溶液中Na2S2O3的浓度。 其过程为：K2C2O7与KI先反应析出I2：析出的I2再用标准的Na2S2O3溶液滴定：从而求得Na2S2O3的浓度。这个标定Na2S2O3的方法为间接碘量法。 碘量法的基本反应式：2S2O32－＋I2=S4O62－＋2I－ 标定Na2S2O3溶液时有： 6I－＋Cr2O72－＋14H＋=2Cr3＋＋3I2＋7H2O 2S2O32－＋I2=S4O62－＋2I－ Na2S2O3标定时有:n(K2C2O7): n(Na2S2O3)=1:6 三、实验药品及仪器 实验药品和试剂： I2分析纯KI溶液100g·L-1Na2S2O3·5H2O溶液0.0170 mol.L-1K2C2O7溶液 淀粉指示剂5 g·L-1 Na2CO3固体HCl溶液6 mol.L-1冰醋酸维生素C药片主要仪器： 分析天平、天平、量筒、烧杯、酸式碱式滴定管、表面皿、容量瓶（250mL）、锥形瓶（250mL）、碘量瓶（250mL）、移液管（25mL）、洗瓶等常规分析仪器 四、实验步骤 （一）、Na2S2O3溶液的配制及标定 1、配制0.10mol/L Na2S2O3溶液500mL 称取13gNa2S2O3·5H2O，溶于500mL

食品中菌落总数的测定

食品中菌落总数的测定 一、实验目的 （1）学习和掌握测定食品中菌落总数的基本方法 （2）学会菌落总数的报告方式 二、实验材料 1、仪器与设备：恒温培养箱、托盘天平、电炉、吸管、三角瓶、平皿、试管、试管架、酒精灯、灭菌刀或剪刀、75%酒精棉球、玻璃蜡笔。 2、培养基和试剂：75%乙醇、0.85%生理盐水、琼脂培养基：胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、 琼脂15.0g、蒸馏水1000mL、pH 7.0±0.2 3、检样：利乐包装鲜牛奶250ml 三、实验方法与步骤 1、检验程序 菌落总数检验程序： 检样→做成几个适当倍数的稀释液→选择2-3个适宜稀释度各以1ml之量分别入灭菌平皿内→每皿内加入46℃15-20ml营养琼脂→置36±1℃恒温箱内培养（48±2）h取出→菌落数→报告 2、检样稀释及培养 （1）以无菌操作，将检样包装打开，用吸管取25ml鲜牛奶，放于含有225ml灭菌生理盐水的500ml灭菌玻璃三角瓶内（瓶内预先置适当数量的玻璃珠），经充分振摇做成1：10的均匀稀释液。 （2）用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液，下同），振摇试管混合均匀，做成1：100的稀释液。 （3）另取1ml的灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1ml灭菌吸管。 （4）根据食品卫生检验标准要求和检样的菌落数量，选择3个连续适宜稀释度即10、10－1、10－2，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。（5）稀释液移入平皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿15ml~20mL，并转动平皿使与稀释检样混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。 （6）等琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃恒温箱内培养（48±2）h取出，计算平板内菌落数目乘以倍数，即得1mL样品所含菌落总数。 四、检样中细菌菌落总数的计算与报告 1、菌落计算方法 （1）菌落计数方法 做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。 （2）菌落计数的报告 ①平板菌落数的选择 选取菌落数在30～300 CFU之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数， ②稀释度的选择 应选择平均菌落数在30～300 CFU之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之。 若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～300之间，按以下公式计算：

实验八 甘蔗汁中总糖及蔗糖含量的测定

实验八甘蔗汁中总糖及蔗糖含量的测定（费林法） 一、原理 蔗糖的测定常以还原糖的测定为基础，样品经前处理后，加入稀盐酸，在加热条件下使蔗糖水解转化为还原糖，再以斐林试剂法测定试样水解后的总还原糖量（即食品中的总糖）及水解前的还原糖量（食品原有的还原糖），两者之差再乘以校正系数0.95即为蔗糖量。 二、操作步骤： 1、样品处理 准确吸取10.00mL甘蔗汁移入100m L容量瓶中。缓慢加入5mL乙酸锌溶液及5mL10.6%亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，静置后过滤，弃去初滤液，收集滤液，即样品处理液。 2、标定碱性酒石酸铜溶液（费林试剂）： （1）准确吸取5.00mL碱性酒石酸铜甲液及5.00mL乙液，置于150mL锥形瓶中。 （2）加水10mL，加入玻璃珠数粒。 （3）从滴定管滴加约9mL葡萄糖（转化糖）标准溶液，2min内加热至沸，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去，记录消耗葡萄糖标准溶的总体积。 （4）同时平行操作三份，取其平均值。 3、水解前样品中还原糖含量的测定： 取样品处理液，按还原糖法测定水解前的还原糖含量。（同实验七） 4、样品总糖量的测定： （1）吸取10.00mL样品处理液置于100mL容量瓶中。 （2）加入6mol/L 盐酸5mL，在68～70℃水浴加热15min。 （3）迅速冷却后加2滴指示剂，用20% NaOH中和（甲基红指示剂：溶液颜色由红变黄；酚酞指示剂：由无色变浅粉红色），加水至刻度，混匀，按还原糖法测定水解后的总还原糖含量。（同实验七）

三、实验记录及处理： 碱性酒石酸铜溶液的标定 10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖(转化糖)的质量mg。 葡萄糖标准溶液蔗糖标准溶液（转化糖） 标准溶液浓度 ρ,mg／ml 标定所耗标液的 体积V，ml 1 2 3 平均 1 2 3 平均 10mL碱性酒石酸 铜相当于葡萄糖 （转化糖）的质 量F，mg 公式:F1= ρ1× V1公式:F2 = ρ2× V2/0.95 食品中还原糖含量测定 水解前（试样原有还原糖）水解后(总糖) 试样量，ml 稀释过程 试样定容总体 积V，ml 样液预测总消 耗量V0，ml 样液正式滴定 总消耗量V1 ，ml 1 2 3 平均值 1 2 3 平均值 测得还原糖含 量，% 公式： 样品中还原糖 含量R1，% 总糖含量R2,% （以转化糖计） 蔗糖的含量，% 公式：蔗糖% = (R2-R1)×0.95 100 1000 V V m F % 计） 还原糖（以葡萄糖 1 ? ? ? = 或转化糖

苹果中维生素C含量的测定

创新性实验 ---苹果中维C含量的测定

前言： 苹果，又名柰、频婆、天然子，苹果为蔷薇科苹果属植物的果实。苹果酸甜可口，营养丰富，是老幼皆宜的水果之一。它的营养价值和医疗价值都很高。每100g鲜苹果肉中含糖类15g，蛋白质0.2g，脂肪0.1g，粗纤维0.1g，钾110mg，钙0.11mg，磷11mg，铁0.3mg，胡萝卜素0.08mg，维生素B1为0.01mg，维生素B2为0.01mg，尼克酸0.1mg，还含有锌及山梨醇、香橙素、维生素C等营养物质。中医认为苹果有生津、润肺；除烦解暑、开胃醒酒、止泻的功效。现代医学认为对高血压的防治有一定的作用。欧洲人说：“一天吃一个苹果，医生远离你”。加拿大人研究表明，在试管中苹果汁有强大的杀灭传染性病毒的作用，吃较多苹果的人远比不吃或少吃的人得感冒的机会要低。所以，有的科学家和医师把苹果称为“全方位的健康水果”或“全科医生”。 维生素是是我们经常听到的一个词语，我们每天都要通过食物摄入各种各样的维生素，维生素同我们的健康是密切相关的，维生素C 是心血管的保护神、心脏病患者的健康元素。维生素C（又称抗坏血酸）普遍存在于水果和蔬菜中，也是一种对人类而言至关重要的物质：人体缺乏维生素C 将导致坏血病，维生素C还能防止传染性疾病，甚至癌症。所以，食品饮料医药、医疗等行业都要测定食品、饮料、药品以及血液中的维生素C的含量。

苹果中含有Vc，不过含量比较低，每100克苹果中Vc的平均含量为4毫克。 维生素C含量的测定方法很多。一般方法有碘量法，2，6-二氯靛酚滴定法;2，4-二硝基苯肼比色法;荧光分光光度法;电化学法和高效液相色谱法。 维生素C广泛存在于植物组织中,新鲜的水果、蔬菜中含量较多。若采用2，6-二氯靛酚滴定法由于果汁具有一定的色泽,滴定终点不易辨认。二甲苯-二氯靛酚比色法虽然适用于测定深色样品还原型抗坏血酸,但由于萃取液二甲苯为有机溶剂,有很强的毒性,既不利于操作人员的健康,也不利于环境保护,故不推荐此测试方法。 而碘滴定法仅需常规滴定设备,条件易于满足。因此,在满足测定范围和测定精度要求的前提下,应尽可能选择不需要昂贵仪器设备条件、简单易行的方法。pH控制在3-5比较适合。 本次实验用的是直接碘量法测定维生素C。 在本次实验中，通过查找资料、设计实验、操作实施，等过程，预期达到如下目的： 1、掌握直接碘量法测定维生素C的原理和方法。 2、掌握维生素C的提取方法。 3、实践各种溶液的配制及其标定操作。 4、通过计算，了解同类但不同品种水果在微量物质的含量上 是否存在显著差异。

食品中淀粉含量的测定

GB 5009.9-85 食品中淀粉的测定方法 本标准适用于各类食品中淀粉含量的测定。 第一法酶水解法 1 原理 样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖 水解成单糖,最后按还原糖测定，并折算成淀粉。 2 试剂 2.1 0.5%淀粉酶溶液: 称取淀粉酶0.5g，加100mL水溶解,加入数滴甲苯或三氯甲烷, 防止长霉，贮于冰箱中。 2.2 碘溶液:称取 3.6g碘化钾溶于20mL水中,加入1.3g碘,溶解后加水稀释至100mL。 2.3 乙醚。 2.4 85%乙醇。 其余试剂同GB 5009.8—85《食品中蔗糖的测定方法》第2章。 3 操作方法 3.1 样品处理 称取2～5g样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用50mL乙醚分5次洗除脂肪，再用 约100mL 85％乙醇洗去可溶性糖类,将残留物移入250mL烧杯内，并用50mL 水洗滤纸及 漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15min，使淀粉糊化,放冷至60℃以下，加 20mL淀粉酶溶液,在55～60℃保温1h，并时时搅拌。然后取1滴此液加1滴碘溶液,应不显现 蓝色,若显蓝色,再加热糊化并加20mL淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显蓝色为止。 加热至沸,冷后移入250mL容量瓶中，并加水至刻度,混匀,过滤,弃去初滤液。取50mL滤 液,置于250mL锥形瓶中,加5mL6N盐酸,装上回流冷凝器,在沸水浴中回流1h,冷后加2滴甲 基红指示液,用20%氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100mL容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液 并入100mL容量瓶中,加水至刻度，混匀备用。 3.2 测定 按GB 5009.7-85《食品中还原糖的测定方法》4.2操作。同时量取50mL水及与样品 处理时相同量的淀粉酶溶液，按同一方法做试剂空白试验。 4 计算

食品微生物检验菌落总数测定方法的效果

食品微生物检验菌落总数测定方法的效果 发表时间：2019-05-14T11:09:08.123Z 来源：《健康世界》2019年3期作者：赵丽萍[导读] 食品卫生安全关乎国人的健康生活，采用快速、准确的微生物检验方法、制定安全、可靠的食品检验标准是保障饮食安全的重要手段和基本措施。 逊克县疾病预防控制中心 164499 摘要：目的研究分析测试片法（test piece method，TP）、计数琼脂平板法（counting Agar plate method，CAP）及琼脂倾注TTC平板法（2，3，5- chloride three phenyl tetrazole，TTC）对食品微生物菌落总数的测定效果。方法此次研究的对象是选取70例需进行菌落总数测定的食品样本，分别应用测试片法、计数琼脂平板法及琼脂平板法进行测定，对比三种方法的菌落总数超标样品检出率。结果 TTC 法菌落总数超标检出率为24.3%，显著高于测试片法（7.1%）及计数琼脂平板法（11.4%），P<0.05。结论与TP及CAP相比，TTC法对于菌落总数超标样品的检出率更高、灵敏度更好。 关键词：微生物检验；测试片法；计数琼脂平板法；琼脂平板法 [abstract] Objective To study the effects of test piece method（TP），counting Agar plate method（CAP）and agar pouring TTC plate method（2，3，5-chloride three phenyl tetrazole，TTC）on the total number of food microbial colonies. Methods 70 food samples which need to be tested for the total number of colonies were selected for this study. The detection rates of the above three methods were compared by using the test sheet method，the counting agar plate method and the agar plate method respectively. Results The detection rate of TTC method was 24.3%，significantly higher than that of test tablet method（7.1%）and Counting Agar plate method （11.4%），P < 0.05. Conclusion Compared with TP and CAP，TTC method has higher detection rate and better sensitivity for samples whose total number of bacteria exceeds the standard. [keywords] microbiological test；test tablet method；Counting Agar plate method；agar plate method 食品卫生安全关乎国人的健康生活，采用快速、准确的微生物检验方法、制定安全、可靠的食品检验标准是保障饮食安全的重要手段和基本措施。总菌落数可反映加工食品的整体卫生情况，且检验快速、准确性高，可作为食品卫生检验的独立性指标，为了比较TP、CAP、TTC 3种总菌落数计数方法的检验效果，特进行该研究。 1 资料与方法 1.1 一般资料 （1）试验时间：2017年1—9月。（2）试验材料：测试纸片（符合中国SN/T 1897-2007标准、美国AOAC OMA标准：986.33、989.10、990.12）、计数用琼脂培养基PCA（250 g）、TTC培养琼脂（在PCA中添加TTC，培养基中TTC终浓度为0.005%），上述材料、试剂均在效期内使用。（3）检验样本：所有样品由5个食品厂企业提供。 1.2 方法 （1）CAP：测定前对试验所用吸管、容器、耗材进行消毒处理，保证无菌，制作琼脂培养基，取待测样本加入无菌磷酸缓冲液充分混匀后梯度稀释为10倍、100倍、1000倍、10000倍样本均液，选择适于计数的2～3个稀释浓度样本液，接种至无菌琼脂培养皿中恒温培养，并取磷酸缓冲液作对照接种，在（36±1）℃条件培养（48±2）h后，参照GB4789.1-2010规定进行菌落计数、换算。TP：取上述稀释后样本2～3个，将滴加在测试纸片中央，静置5 min后显微镜观察、计数。注意保证操作无菌性、操作台面水平、控制薄膜按压力度。（3）TTC：稀释、培养、计数过程同CAP，区别是向琼脂培养加入TTC观察显色反应并计数。 1.3 观察指标 检出总菌落数：严格按照TP、CAP及TTC 3种菌落计数操作方法对70例样本中的总菌落数（CFU，个/g）进行计数，纳入计数的菌落种类包括艾希大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、霉菌等病原菌（详见GB4789.1-2010[1]中的要求）。（2）样本总菌落数超标率：将3种计数方法测定的总菌落数与国标GB4789.1-2010[1]中对于总菌落数超标标准进行对照，以样本检验总菌落数>1500个/g作为超标判断标准。 1.4 统计方法 采用SPSS17.0软件对3种菌落计数方法的总菌落数超标样品检出率作配对χ2检验，若P<0.05，说明二者差异有统计学意义。 2 结果 在样本平均检出总菌落数（CFU）结果中，TP法检出（326±5）个/g，不合格品检出率为7.1%（5/70）；ACP法检出（334±6）个/g，不合格品检出率为11.4%（8/70）；TTC法检出（368±8）个/g，不合格品检出率为24.3%（17/70）。TP、ACP二者的不合格品检出率差异无统计学意义（χ2=0.763，P=0.382），而TTC对于不合格品的检出率则显著高于TP（χ2=7.766，P=0.005）以及ACP （χ2=3.944，P=0.047）。 3 讨论 近年来，食品安全问题频发、备受社会关注。加工食品中的病原菌如大肠杆菌、沙门氏菌等可引发传染性疾病，危害生命健康，因此对加工食品进行微生物检验，对于保障食品安全必不可少[2]。 总菌落数是评价食品质量的重要指标[3]。TP及CAP属常见总菌落数计数方法[4]，两种计数法的计数结果差异无统计学意义[5]。然而，在样本因素（如颗粒物、固体残渣）[6]、计数精度（如不适于平皿菌落数>200个/g的情况）[7]等影响下，TP、CAP的检出灵敏度及准确度均受到了一定的限制。相对而言，TTC作为灵敏性较高的指示剂，能特异性地对细菌进行染色，而检验人员则能对视野中的染色菌落数直观、准确地统计，并能排除杂质的干扰，因此TTC具有更高的检出灵敏度，更适用于菌落总数较多的样本的计数[8]。而该文的研究结果也显示，TTC法菌落总数超标检出率显著高于TP、CAP法，这也说明在上述3种方法中，TTC法对于总菌落数的计数结果更加精确、受到样品因素的影响也更小，值得在食品检验中加以推广和应用。 综上，与TP及CAP相比，TTC法对于菌落总数超标样品的检出率更高、灵敏度更好。

2,4-二硝基苯肼化学品安全技术说明书.

2,4-二硝基苯肼化学品安全技术说明书 说明书目录 第一部分化学品名称第九部分理化特性 第二部分成分/组成信息第十部分稳定性和反应活性 第三部分危险性概述第十一部分毒理学资料 第四部分急救措施第十二部分生态学资料 第五部分消防措施第十三部分废弃处置 第六部分泄漏应急处理第十四部分运输信息 第七部分操作处置与储存第十五部分法规信息 第八部分接触控制/个体防护第十六部分其他信息 第一部分：化学品名称 化学品中文名称：2,4-二硝基苯肼 化学品英文名称：2,4-dinitrophenylhydrazine 中文名称2： 英文名称2： 技术说明书编码：468 CAS No.: 119-26-6 分子式：C6H6N4O4 分子量：198.14 第二部分:成分/组成信息 有害物成分含量CAS No. 2,4-二硝基苯肼119-26-6

第三部分：危险性概述 危险性类别: 侵入途径: 健康危害：对眼和皮肤有刺激性。对皮肤有致敏性。本品吸收进入体内，可引起高铁血红蛋白血症，岀现紫绢。 环境危害: 燃爆危险：本品易燃，具爆炸性，具刺激性，具致敏性。 第四部分：急救措施 皮肤接触：脱去污染的衣着，用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤。 眼睛接触：提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗。就医。 吸入： 迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难，给输氧。如呼吸停止，立即进行人工呼吸。就医。 食入：饮足量温水，催吐。就医。 第五部分：消防措施 危险特性： 遇明火极易燃烧爆炸。干燥时经震动、撞击会引起爆炸。燃烧时放出有毒的刺激性烟雾。与氧化剂混合能形成爆炸性混合物。有害燃烧产物：一氧化碳、二氧化碳、氮氧化物。 灭火方法： 尽可能将容器从火场移至空旷处。喷水保持火场容器冷却，直至灭火结束。灭火剂：二氧化碳、泡沫、干粉、砂土。 第六部分：泄漏应急处理 应急处理： 隔离泄漏污染区，限制出入。切断火源。建议应急处理人员戴防尘面具（全面罩），穿防毒服。小量泄漏： 避免扬尘，小心扫起，置于袋中转移至安全场所。大量泄漏：用塑料布、帆布覆盖。使用无火花工具收集回收或运至废物处理 场所处置。 第七部分：操作处置与储存 操作注意事项：密闭操作，局部排风。操作人员必须经过专门培训，严格遵守操作规程。建议操作人员佩戴自吸过滤式防尘

果汁中总糖的测定

吉林化工学院 食品分析实验报告 实验名称果汁中总糖的测定 指导教师陈萍 班级食品0901 学号 09340136 姓名黄锡红 日期 2012.10.17

实验十七果汁中总糖的测定 一、目的与要求： 1、掌握食品中总糖的测定方法． 二、原理： 将一定量的碱性酒石酸甲、乙液等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀很快与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。在加热条件下，以次钾基蓝作为指示剂，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀，待二价铜全部还原后，少过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色，即为滴定终点。根据样液消耗量可计算出还原糖含量。 三、试剂 1、碱性酒石酸铜甲液：称取15克硫酸铜(CuSO4.5H20)及0.05克次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000毫升。 2、碱性酒石酸铜乙液：称取50克酒石酸钾钠及75克氢氧化钠，溶于水中，再加入4克亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000毫升，贮于橡胶塞玻璃瓶内。 3、盐酸 4、葡萄糖标准溶液：精密称取1.000克经过98-100℃干燥至恒重的纯葡萄糖，加水溶解后，加5毫升盐酸，并以水稀释至1000毫升，此溶液每毫升相当于lmg 葡萄糖。 5、6N盐酸：量取50毫升盐酗口水稀释至100毫升。 6、甲基红指示液：0.1％乙醇溶液。 7、20％氢氧化钠溶液。 四、操作方法： 1、样品处理：吸取样品10毫升，加水40毫升，在水浴上加热煮沸10分钟后，移入100毫升容量瓶中加水至刻度，混匀后备用。

取以上样液20毫升和30水毫升于l00毫升容量瓶中，加人5毫升6N盐酸，在68-70℃水浴中加热15分钟，冷却后，加2滴甲基红指示液，用20％氢氧化钠溶液中和至红色褪去，加水至刻度混匀。 2、标定碱性酒石酸铜溶液；吸取碱性酒石酸铜甲、乙液各5.0毫升，置于150毫升锥形瓶中，加水20毫升，加入玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9毫升葡萄糖标准溶液，控制在2分钟内加热至沸,趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液兰色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积，同时平行操作三份，取其平均值，计算每：9毫升(甲乙液各5毫升)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg)． 3、样品溶液预测：吸取碱性酒石酸铜甲、乙液各5.0毫升，置于160毫升锥形瓶中，加水20毫升，玻璃珠两粒，控制在2分钟内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，等溶液颜色变浅时，以每两秒1滴的速度滴定，直至溶液兰色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积。 4、样品溶液测定：吸取碱性酒石酸铜甲、乙液各5.0毫升于150毫升锥形瓶中，加水20毫升，玻璃珠两粒，从滴定管滴加比预测体积少1毫升的样品溶液，使在2分钟内加热至沸，趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定直至溶液兰色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积，同法平行测定三份，得出平均值消耗体积。 五、实验数据处理 1.原始数据如下表所示： 2. 消耗葡萄糖标准溶液的平均体积为 V=(12.32+11.91+11.90)÷3=12.04 mL，即相当于m=12.04mg， 又测定待测样品溶液的平均体积为V2=（4.93+5.21）÷2=5.07mL， 因为样品总量为100毫升，所以以100代替原公式的250，经推导m值不变，代入公式得：

Vc含量测定

方法一、 2.6－二氯酚靛酚滴定法 二、原理 Vc又称抗坏血酸，还原型抗坏血酸能还原染料 2.6－二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。在酸性溶液中， 2.6－二氯酚靛酚钠离子呈红色，被还原后变为无色。 三、实验器材 锥形瓶、 微量滴定管、 研钵、 容量瓶、 吸量管等。 四、实验试剂 2% 草酸溶液：取2g草酸溶于100ml蒸馏水中。 1% 草酸溶液：取1g草酸溶于100ml蒸馏水中。 标准抗坏血酸溶液（ 0.1mg/ml ）：精确称取10mg抗坏血酸，以1%草酸溶解并定容到100ml。储存到棕色玻璃瓶中，最好临用前配制。 0.001N 2.6－二氯酚靛酚钠溶液：将50mg2.6－二氯酚靛酚钠溶解于约 的热蒸馏水中，冷却后定容到250ml，储存在棕200ml含有52mg NaHCO 3 色瓶中，保存在低温下。2.6－二氯酚靛酚钠不稳定，必须在一周内用完。 用前必须标定到1ml2.6－二氯酚靛酚钠相当于0.088mg抗坏血酸。 五、操作 1、植物样品Vc提取液的制备： 用电子天平准确地称取辣椒 0.5 g ，样品必须预先用温水洗去泥土，并在空气中风干，加25ml 2%草酸溶液匀浆，并将匀浆液转入50ml离心管中；用少量2%草酸溶液冲洗匀浆杯，一起转入离心管中进行离心（ 5min,4500rp ），将上清液移入 50ml 容量瓶，用少量2%草酸冲洗沉淀并离心保留上清，如此反复抽提 3 次，最后用 2% 草酸定容到50ml。 2、测定：

每次量取 5ml提取液放入小锥形瓶内进行滴定。用微量滴定管以 2.6－二氯酚靛酚钠溶液滴定到提取液呈现淡粉红色，并在 15～30 秒内不褪色，滴定过程必须迅速，不要超过 2 分钟。 另取 5ml 2%草酸作空白对照进行滴定。 平行进行 2-3 次，计算样品中Vc含量。 M=[(V A -V B ) × C × 0.088 × 100]/ （ D × W ） M ： 100g 样品中含抗坏血酸的质量 mg V A ：滴定样品管时所用去染料体积数 ml VB ：滴定空白管时所用去染料体积数ml C ：提取液总体积ml D ：滴定时所取的样品的提取液毫升数 W ：被检样品的重量 0.088 ： 0.001N2.6－二氯酚靛酚钠溶液 1ml 相当于 0.088mgVc 方法二、紫外快速测定法 （张波老师说用这个方法做实验） 一、原理： Vc的2.6—二氯酚靛酚容量法，操作步骤较繁琐，而且受其它还原性物质、样品色素颜色和测定时间的影响。紫外快速测定法，是根据Vc具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于243nm处测定样品液与碱处理样品液两者消光值之差，通过查标准曲线，即可计算样品中Vc的含量。 二、实验器材： 紫外分光光度计、 离心机、 分析天平、 容量瓶（10ml, 25ml）、 移液管（0.5ml，1.0ml）、 吸管、 研钵。

实验 总维生素C的测定—二硝基苯肼比色法

实验总维生素C的测定 —二硝基苯肼比色法 The following text is amended on 12 November 2020.

实验：总维生素C的测定—2，4-二硝基苯肼比色法 一、实验目的 1.了解天然维生素C 的结构功能以及天然存在形式。 2.掌握测定总维生素C 的原理与方法。 二、实验原理 总抗坏血酸包括还原型Vc、脱氢型Vc 和二酮古龙糖酸。样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4 -二硝基苯肼作用生成红色脎。脎在硫酸溶液中的含量与总抗坏血酸含量成正比，由此通过比色可对样品中总坏血酸进行定量。 三、仪器和试剂 仪器：恒温水浴锅（37±0.5℃）、紫外-可见分光光度计、组织捣碎机。 试剂：本实验用水均为蒸馏水，试剂纯度均为分析纯。 1、4.5mol/L 硫酸：小心将250mL 硫酸(比重1.84)加入到700mL 水中，冷却后用水稀释至1000mL。 2、(9+1)硫酸：小心将900mL 硫酸(比重1.84)加入到100mL 水中，搅拌均匀。 3、2% 2，4-二硝基苯肼溶液(20g/L2，4 -二硝基苯肼溶液)：溶解2g 2，4 - 二硝基苯肼于100mL 4.5mol/L 硫酸内，过滤使用（不用时存于冰箱内，每次用前过

滤）。 4、2%草酸溶液(20g/L 草酸溶液)：溶解20g 草酸(422O C H )于700mL 水中，再加水 稀释至1000mL 。 5、1%草酸溶液(10g/L 草酸溶液)：稀释500mL 2%草酸溶液到1000mL 。 6、1%硫脲溶液(10g/L 硫脲溶液)：溶解5g 硫脲于500mL 1%草酸溶液中。 7、2%硫脲溶液(20g/L 硫脲溶液)：溶解10g 硫脲于500mL 1%草酸溶液中。 8、1mol/L 盐酸：取100mL 盐酸，加入水中，并稀释至1200mL 。 9、抗坏血酸标准溶液(1mg/mL)：溶解100mg 纯抗坏血酸于100mL 1%草酸中。 10、活性炭：将100g 活性炭加到750mL 1mol/L 盐酸中，水浴回流1-2h ，过滤，用水洗数次，至滤液中无铁离子（ 3e F ）为止，然后置于110℃烘箱中烘干。 检验铁离子方法：利用普鲁士蓝反应。将2%亚铁氰化钾（20g/L 亚铁氰化钾）与1%盐酸等量混合，将上述洗出滤液滴入，如有铁离子则产生蓝色沉淀。 四、操作步骤 （全部实验过程应避光） (一)样品的测定 1.浸提： 鲜样的制备：称100g 鲜样和100g 2%草酸溶液(20g/L 草酸溶液)，倒入捣碎机中

食品总糖的测定

总糖的测定 试剂的配制 1、0.3g/ml氢氧化钠溶液：称取30.0g氢氧化钠溶解后定容100ml。 2、0.01g/ml 甲基红指示剂：称取1.0g甲基红溶解后定容100ml. 3、葡糖糖标准滴定液：称取0.2000g葡萄糖（经100°C干燥至恒重），加蒸馏水溶解后，加入5.0ml盐酸后定容250ml。 4、斐林氏试剂 （1）甲液：称取7.5g硫酸铜及0.025g次甲基蓝于烧杯中用蒸馏水溶解后，移入容量瓶中，定容500ml。 （2）乙液：称取25.0g酒石酸钾，37.5 g氢氧化钠及2.0g亚铁氰化钾后于烧杯中用蒸馏水溶解后，移入容量瓶，定容500ml。斐林氏溶液的标定：分别吸取斐林氏甲液和乙液各5.00ml于三角瓶中，加入蒸馏水10ml，玻璃珠数粒。从滴定管滴加约10ml 葡萄糖标准溶液后2分钟内加热至沸，趁沸以每2秒每滴的速度滴加葡萄糖标准溶液。滴定至蓝色退尽为终点。平衡测定3份。计算每10ml斐林氏试剂混合液相当于葡萄糖的质量(A)。 计算：葡糖糖的重量g*滴定数(ml) A(g)== —————————————— 250 化验操作： （1）称取10.000 g样品，加入约100ml蒸馏水浸泡1---2小时后捣碎后定容250ml。过滤备用。 （2）吸取10.00ml滤液于三角瓶中，加入30ml蒸馏水及浓盐酸5.0ml，置于68—70°C水浴上10分钟，后取出冷却 至室温后加入甲基红指示剂两滴，再用0.3g/ml氢氧化钠 溶液调至中性，后用蒸馏水定容250ml，注入滴管中备 用。 （3）预备试验：吸取甲乙液各5.00ml于三角瓶中，在电炉上加热至沸，从滴管中滴入转化液至蓝色变为浅黄色为终 点。 正式试验：吸取甲乙液各5.00ml于三角瓶中，从滴管中 滴入转化液（较预备试验少1ml）后在电炉上加热沸腾1 分钟，再以30滴/分钟的速度滴定至浅黄色为终点。同 时平衡操作2份。计算结果： A*6250 试样中总糖含量%==——————————————*100 试样的重量g*滴定数（ml）

2,4-二硝基苯肼

化学品安全技术说明书 化学品中文名：2,4-二硝基苯肼 化学品英文名：2,4-dinitrophenylhydrazine 企业名称： 生产企业地址： 邮编: 传真: 企业应急电话： 电子邮件地址： 技术说明书编码: √纯品混合物 有害物成分浓度CAS No. 2,4-二硝基苯肼119-26-6 危险性类别：第4.1类易燃固体 侵入途径：吸入、食入、经皮吸收 健康危害：对眼和皮肤有刺激性。对皮肤有致敏性。本品吸收进入体内，可引起高铁血红蛋白血症，出现紫绀。 环境危害：对环境有害。 燃爆危险：易燃。受撞击、磨擦，遇明火或其它点火源极易爆炸。 皮肤接触：脱去污染的衣着，用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤。如有不适感，就医。眼睛接触：提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗。如有不适感，就医。 吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难，给输氧。呼吸、心跳停止，立即进行心肺复苏术。就医。 食入：用水漱口，就医。 危险特性：遇明火极易燃烧爆炸。干燥时经震动、撞击会引起爆炸。燃烧时放出有毒的刺激性烟雾。与氧化剂混合能形成爆炸性混合物。

有害燃烧产物：一氧化碳、氮氧化物。 灭火方法：用二氧化碳、泡沫、干粉、砂土灭火。 灭火注意事项及措施：消防人员须戴好防毒面具，在安全距离以外，在上风向灭火。 尽可能将容器从火场移至空旷处。喷水保持火场容器冷却，直至灭火结 束。 应急行动：隔离泄漏污染区，限制出入。消除所有点火源。建议应急处理人员戴防尘口罩，穿防毒、防静电服。禁止接触或跨越泄漏物。小量泄漏：用洁净 的铲子收集泄漏物，置于干净、干燥、盖子较松的容器中，将容器移离 泄漏区。大量泄漏：用水润湿，并筑堤收容。防止泄漏物进入水体、下 水道、地下室或密闭性空间。 操作注意事项：密闭操作，局部排风。操作人员必须经过专门培训，严格遵守操作规程。建议操作人员佩戴自吸过滤式防尘口罩，戴化学安全防护眼镜，穿 防毒物渗透工作服，戴防毒物渗透手套。远离火种、热源，工作场所严 禁吸烟。使用防爆型的通风系统和设备。避免产生粉尘。避免与氧化剂 接触。搬运时要轻装轻卸，防止包装及容器损坏。禁止震动、撞击和摩 擦。配备相应品种和数量的消防器材及泄漏应急处理设备。倒空的容器 可能残留有害物。 储存注意事项：为安全起见，储存时常以不少于25％的水润湿、钝化。储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。库温不宜超过35℃。包装密封。应与氧 化剂分开存放，切忌混储。采用防爆型照明、通风设施。禁止使用易产 生火花的机械设备和工具。储区应备有合适的材料收容泄漏物。 接触限值： MAC(mg/m3): 未制定标准PC-TWA（mg/m3）: 未制定标准 PC-STEL（mg/m3）: 未制定标准TLV-C(mg/m3): 未制定标准 TLV-TWA(mg/m3): TLV-STEL(mg/m3): 监测方法：无资料。 工程控制：密闭操作，局部排风。 呼吸系统防护：可能接触其粉尘时，必须佩戴过滤式防尘呼吸器。 眼睛防护：戴化学安全防护眼镜。 身体防护：穿防毒物渗透工作服。 手防护：戴防毒物渗透手套。 其他防护：工作现场禁止吸烟、进食和饮水。工作完毕，淋浴更衣。注意个人清洁卫生。

菌落总数的测定

实验九菌落总数的测定 一、目的要求 学习掌握菌落总数测定的基本原理和方法，了解食品上微生物的分布和繁殖动态。 二、实验说明 菌落总数是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1ml检样中所含细菌菌落的总数。 菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。 每种细菌都有它一定的生理特性，培养时应用不同的营养条件及其他生理条件（如温度、培养时间、pH、需氧性质等）去满足其要求才能将各种细菌都培养出来。但在实际工作中，一般都只用一种常用的方法去作。细菌菌落总数的测定，所得结果，只包括一君能在营养琼脂上发育的嗜中温性需氧菌的菌落总数。 三、实验材料 （1）培养箱 36±1℃ （2）恒温水浴 46±1℃ （3）天平。 （4）可调式电炉。 （5）吸管 1.0ml、10.0ml,标有0.1ml单位刻度。 （6）广口瓶 500ml，有盖。 （7）玻璃珠直径5mm。

（8）平皿皿底直径9.0cm。 （9）试管 18×200mm。 （10）酒精灯。 （11）试管架。 （12）研钵。 （13）灭菌刀和剪刀。 （14）灭菌镊子。 （15）酒精棉球。 （16）玻璃蜡笔。 （17）营养琼脂培养基。 （18）灭菌生理盐水、分装于试管中，每管9.0ml。 （19）食品检样。 四、检验程序（图9-1） 五、方法步骤 （一）检验稀释和培养 1、以无菌操作，将检样25g（或25ml）剪碎放于含有225ml灭菌生理盐水的广口瓶内（瓶内置有适量玻璃珠）或灭菌研钵内，经充分振摇或研磨用成1：10的均匀稀释液。 2、用1.0ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1.0ml，沿管壁徐徐注入含有9.0ml灭菌生理盐水的试管内（注意吸管尖端不要触及管内液面），振摇试管混合均匀，作成1：100的稀释液。 3、另取1.0ml灭菌吸管，按上述操作作10倍稀释，如此每递增

硝基苯肼

一、 理化特性： 二、 危险性概述： 1、 危险性类别：对眼和皮肤有刺激性。对皮肤有致敏性。本品吸收 进入体内，可引起高铁血红蛋白血症，出现紫绀。 2、 GHS-分类：易燃固体 (类别1)；急性毒性, 经口 (类别4)；严 重眼睛损伤/眼睛刺激性 (类别2B)。 3、 图标或危害标志： 信号词：危险 4、 危险信息：本品易燃，吞咽有害，造成眼刺激。 5、 预防措施：

远离热源/火花/明火。禁止吸烟。容器和装载设备接地/等势联 接。使用防爆的电气/通风/照明设备。作业后彻底清洗皮肤。使 用本产品时不要进食、饮水或吸烟。戴防护手套/戴防护眼罩/戴 防护面具。 三、急救措施 1、皮肤接触：脱去污染的衣着，用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤。 2、眼睛接触：提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗。就医。 3、吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难，给输氧。如呼吸停止，立即进行人工呼吸。就医。 4、食入：禁止催吐。切勿给失去知觉者喂食任何东西。用水漱口。请教医生。 四、消防措施 1、危险特性：遇明火极易燃烧爆炸。干燥时经震动、撞击会引起爆炸。燃烧时放出有毒的刺激性烟雾。与氧化剂混合能形成爆炸性混合物。 2、灭火方法与灭火剂：尽可能将容器从火场移至空旷处。喷水保持火场容器冷却，直至灭火结束。灭火剂：二氧化碳、泡沫、干粉、砂土。 3、灭火注意事项及措施：隔离泄漏污染区，限制出入。切断火源。建议应急处理人员戴防尘面具（全面罩），穿防毒服。小量泄漏：避免扬尘，小心扫起，置于袋中转移至安全场所。大量泄漏：用塑料布、帆布覆盖。使用无火花工具收集回收或运至废物处理场所处置。 五、泄漏应急措施 1、作业人员防护措施：使用个人防护装备。避免粉尘生成避免吸入蒸气、

食品中菌落总数的测定实验

食品中菌落总数的测定实验 一、实验目的： 了解稀释平板计数的原理，掌握涂抹平板培养法和混合平板培养法，认识细菌、放射菌、霉菌、的菌落特征。 二、原理 平板菌落计数法是将等测样品经适当稀释后，其中的微生物充分分散为单个细胞，取一定量的稀释液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。但是，由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞，所以，长成的一个单菌落也可能来自样品中的多个细胞。因此平板菌落计数的结果往往偏低。为了清楚地阐述平板菌落计数的结果，现在已倾向使用菌落形成单位(colony-forming units，cfu)而不以绝对菌落数来表示样品的活菌含量。 该计数法的缺点是操作较繁，结果需要培养一段时间才能取得，而且测定结果易受多种因素的影响，但是这种计数方法最大的优点是可以获得活菌的信息，所以被广泛用于生物制品检验，以及食品、饮料和水等含菌指数或污染度的检测 三、试剂和材料 1.仪器 恒温培养箱：（36 ℃±1 ℃，30 ℃±1 ℃。） 均质器或振荡器

无菌吸管：1 ml（0.01 ml 刻度）、10 ml（0.1 ml 刻度）或微量 移液器及吸头 无菌锥形瓶：容量250 ml、500 ml、 无菌培养皿：直径90 mm 菌落计数器 2.样品 1）平板计数琼脂（plate count agar，PCA）培养基：蛋白胨 5.0 g 、酵母浸膏2.5 g 、葡萄糖1.0 g 、琼脂15.0 g、蒸馏水1 000 ml、pH 7.0±0.2。 将所有成分加于蒸馏水中，煮沸溶解，调节pH。分装试管或锥形瓶，121 ℃高压灭菌15 min。 注：用平板计数琼脂，称取23.5 g于1 000 ml蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，121 ℃高 压灭菌20min，冷却至45~47℃左右备用。 2）无菌生理盐水：氯化钠（NaCl）5.875g 蒸馏水(纯净水) 500ml 称取5.875ｇNaCl溶于500ml蒸馏水中，121 ℃高压灭菌20min。 3.器材 100ml无菌水、9ml无菌水、无菌平皿、天平、称样瓶、 记号笔、酒精灯等。 四、操作及实验步骤 1.样品的稀释：25 g(ml)样品+225 ml 稀释液，均质。 10倍系列稀释。每递增稀释一次，换用 1 次1 ml 无菌吸管或吸头。 （注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面）选择2个～3个适宜稀释度 的样品匀液，各取1 ml分别加入无菌培养皿内。吸取 1 ml 空白稀释 液作空白对照。每皿中加入15 ml～20 ml 平板计数琼脂培养基，并 转动平皿使其混合均匀。