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传动系统试验台综述

传动系统试验台综述
传动系统试验台综述

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目录摘要 (2)

摘要 (3)

前言 (4)

第1章车辆传动系简介 (4)

1.1车辆传动系的类型及其特点 (4)

第2章车辆传动系试验台简介 (5)

第3章国内外车辆传动实验台研究现状 (5)

3.1国外车辆传动系实验台研究现状 (6)

3.2国内车辆传动系实验台研究现状 (7)

总结 (10)

参考文献 (11)

摘要

传动系统试验台,是用于测试和研究汽车传动系统总成部件的设备。这些总成部件包括变速器、驱动桥、半轴、差速器、主减速器等。它们是汽车的关键组成部分,直接关系到汽车行驶的动力性、经济性和可靠性。

本文完成的主要工作有:介绍车辆传动系的类型及其特点,介绍车辆传动系统试验台的基本情况,阐述国内外车辆传动实验台的研究现状及研究成果,希望从中找出不足,以期进行进一步的研究。

前言

车辆传动系包括离合器、变速器、万向传动装置、主减速器及差速器等部件,在汽车运行过程中,传动系功能会逐渐下降,出现异响、过热、漏油及乱档等故障。对传动系及时进行检测、诊断、维修,可确保汽车正常运行和安全行驶。在诸多的检测方法中,如路试检测、试验台检测、仪器检测等,试验台检测有开发周期短、检测综合等优点,所以本文主要介绍国内外车辆传动系统试验台的的研究现状。以期找出不足,从而进行下一步的改进。

第1章车辆传动系简介

汽车自19世纪末诞生以来,己经有100多年的发展历史。从卡尔·本茨制造出第一辆三轮汽车到现在的100多年间,汽车的发展速度是惊人的。其传动系统也经历了由单一的机械传动向机械传动、液力传动、电传动、液压传动以及气压传动等多种传动型式发展的过程。

1.1车辆传动系的类型及其特点

传动系用以传递、改变和分配由发动机传至驱动轮的扭矩,使车辆的牵引力和行驶速度在宽广的范围内变化以适应负载的变化。通过传动系的某些部件,还可以将发动机的动力传给动力输出轴以驱动工作装置。

目前,以内燃机为动力的车辆和行走机械的传动方式主要有机械传动、液力机械传动、电传动和液压传动4种,气压传动和其它传动方式应用得很少。

一、机械传动

机械传动系是现代车辆应用最为广泛的传动型式。其优点是传动效率高,外廓尺寸较小。随着新技术、新材料的应用,各部件和总成件的可靠性越来越高,制造和使用成本较低,对维修和驾驶所需技能要求不高。其稳态传动效率高和制造成本低的优势,使得机械传动在调速范围比较小的通用客货汽车和对性能要求苛刻、必须保证犁耕等作业速度恒定的农用拖拉机领域迄今仍然占据着霸主地位。缺点是由于是有级传动,不易充分利用发动机的功率-不能使发动机经常在最大功率点附近工作,振动噪声较大,驾驶员操纵的劳动强度大。

二、液力机械传动系

液力机械传动是在机械传动基础上发展起来的一种新的传动形式,目前在工程车辆上如装载机、叉车等应用广泛。它用变矩器取代了离合器,具有分段无级调速能力。在装有液力变矩器的液力机械传动系中,普遍采用的传动方案有两种,即液力机械式和液力机械分流式。液力机械式其发动机的动力全部经液力变矩器传至机械传动系。而液力机械分流式(又称液力机械变矩器)的发动机动力分成两部分,一部分经变矩器传至机械传动机构,另一部分直接传至机械传动机构,最后在行星排上进行功率汇流。采用这种液力机械分流式传动系既发挥了液力变矩器无级变速和缓冲作用的优点,又利用了齿轮传动的高效率,使整个传动系的总效率较高。

三、电传动系

电传动系统有直流发电-直流驱动,交流发电-直流驱动,交流发电-交流驱动,交流发电-直流变频-交流驱动四种型式,目前采用较多的是前两种型式。由于履带车辆驱动轮的转速较低,转矩较大,电动机在这种情况下不宜直接与驱动轮相连接,需要在这两者之间增加机械减速装置,组成电力-机械传动系。

电传动的优点是具有良好的自动无级变速性能,起动、变速平稳,操纵简单轻便;电机可以反转因而不必设置倒档装置。缺点是效率低(不超过0.8),结构质量和体积大,需大量消耗有色金属。

四、液压传动

液压传动或称容积式传动,是通过流体工作介质所受的压力进行能量传递的动力传递方式。工作液体的压力较高而流速相对较低。它由液压泵、液压马达、液压阀和其它液压元件组成。发动机驱动液压泵,由液压泵输出的压力油驱动液压马达,使驱动轮旋转。

液压传动用于行走机械主传动系统的历史并不长,但发展迅速。由于液压技术的发展,液压元件的标准化生产,特别是近十多年来,液压元件的功能日益完善,压力向高压(16-32MPa)和超高压(>32MPa)方向发展,以及极限负荷调节闭式回路,发动机转速控制的恒压、恒功率组合调节的变量系统开发,给工程车辆行走系统提供了一个广阔的发展前景。

第2章车辆传动系试验台简介

传动系统试验台,是用于测试和研究汽车传动系统总成部件的设备。这些总成部件包括变速器、驱动桥、半轴、差速器、主减速器等。它们是汽车的关键组成部分,直接关系到汽车行驶的动力性、经济性和可靠性。

汽车传动系统试验台要发挥其试验功能,核心部分是试验台的控制系统。对其控制系统进行开发和研究,可以提高整个试验台的控制精度,研究不同工况下的传动部件的加载状况,确保试验台测试的稳定性和安全性。

一般情况下,试验台数据采集系统用来采集试验进行中所需要的各项状态参数,以便监控试验台系统的工作状况,并且采集和实时显示所必需观测的数据量,为试验台的闭环控制创造条件。试验台驱动系统由上位机发送指令,通过变频器控制驱动电机的运行状态,为传动系统部件的测试提供动力来源。阐述了驱动控制的原理,分析了相关性能指标,实现了试验台的驱动控制。传动系统试验台的加载系统,通过变频器控制负载电机的转差率,模拟汽车在不同路面条件和行驶工况下的阻力状况,为传动系统部件的测试施加各种载荷。

被测试部件中,驱动桥,半轴,差速器等部件主要进行的是耐久性试验,因此根据不同的工况对其施加各种载荷即可。对自动变速器,除了对其进行耐久性试验以外,研究其换档规律和检测其故障范围是试验台的一个重要功能。对此必须对自动变速器的各类阀体加以控制,以满足不同测试的需求。

汽车传动系统试验台是一个综合测试平台。规范试验台的硬件和软件操作一方面能有效地保护试验台的硬件设施,使试验台稳定运行,另一方面更能充分发挥试验台在传动系统部件测试中的作用。对试验台的软件构架上添加保护功能,能防止试验中因可能出现的过电流造成的变频器损坏,电机失控现象等危险情况。保证试验设备和试验人员的安全。

第3章国内外车辆传动实验台研究现状

车辆传动系统担负着功率调节、传递扭矩和变速等任务,以适应行驶路况条件的变化。其性能对车辆的动力性、燃油经济性、寿命以及环境的污染等的影响极大。车辆传动系的技术水平与实验技术密切相关,因此建立车辆传动实验台,对车辆传动系的设计和研究有十分重要的指导意义。

3.1国外车辆传动系实验台研究现状

国外很早就开始了车辆传动系测试方面的研究,如美国Gleason公司二十世纪五十年代就设计出用轮系作为加载系统的传动实验台。比较著名的还有美国国家航空航天局(NASA)下属的Lewis研究中心、前苏联中央机械制造与设计研究院、美国通用动力公司、德国RENK 公司、日本明电舍动力公司、日本丰田汽车公司、美国伊利诺斯大学机械工程系、法国Skoda 公司等部门所建立的传动实验台。从实验台方案的设计到最终的样品制造他们都进行了大量的研究工作,形成了系列化的设计模式。

80年代日本防卫厅第四研究所针对日本小松公司研制的HMST液压机械无级传动装置建立了传动实验台。该传动实验台以直流电动机作为动力元件,加载元件为电涡流测功机,电涡流测功机控制下位机以及传感器。实验台主要用于对HMST液压机械无级传动装置性能进行实验。

90年代末,英国ATP公司开发自动变速器实验台,该实验台能对自动变速器进行动态模拟测试,检测的技术指标包括在不同负荷条件下的油压、输入、输出转速、冷却流量、离合器和制动器是否打滑等指标。该实验台的作用主要体现在两个方面:其一在自动变速器维修前对自动变速器进行诊断、分析,对以后的维修提供数据;其二为维修后出厂的自动变速器作性能检测,以保证维修后的出厂质量。该实验台由自动变速器实验台台架、模拟加载装置、动力供应部分、连接附件、控制台等五个部分组成。ATP-UK-300型采用73kw的调频电机作为动力源,ATP-CN-200型则采用一个排量为4L的发动机作为动力输入装置,采用仪表显示,独立控制,其连接设计了快速连接机构,能对数十种自动变速器进行快速连接;其模拟负载装置采用了风冷的电涡流测功机。

2005年Yuping Cheng, Takeshi Abe 和Brian K. Wilson进行了自动变速器齿轮的振动检测。他们指出在试验台上进行测试时,为了准确了解自动变速器的性能和齿轮的噪声,有必要对自动变速器内部结构及测功机、连接轴系直接的连接机理做一个全面了解。只有了解这些,测试时,才能对不同频率的振动做出正确的分类,比如说振动是来自变速器内部,还是试验台设备或者是传动轴。这些有助于噪声和振动工程师合理地掌握测试过程中噪声的峰值,从而避免测试系统的影响。他们的研究主要是基于自动变速器相应的半消声齿轮噪声仿真结果和测试的噪声数据的联系。

2007年Ashley R. Crowthera,Rajendra Singha,Nong Zhangb和Chris Chapmanb进行了多间隙的自动变速器脉冲响应的制定、仿真和实验研究。他们指出随着自动变速器的应用,人们越来越注重在平均力矩或载荷突然变化的情况下研究齿轮系统脉冲响应。研究成果有,第一:利用矩阵元素制定扭转集中质量的行星轮和差速齿轮的模型。第二:建立了瞬态工况的非线性模型。在对模型求解之前初始条件和负荷曲线必须准确定义。结果表明,在发动机、制动和车辆负载瞬态变化时行星轮或者差动齿轮的影响就会显现。第三,开发了自由振动试验。

2004年Yoshinobu Nozaki,Yoshikazu Tanaka 和Hideo Tomomatsu进行了后轮驱动丰田全新六速自动变速器A761E的研究。他们指出,这种六速自动变速器有更大的齿轮比。增大齿轮比的变化极大地提高了车辆的动力性和燃油经济性。为了进一步提高燃油经济性,他们采用了新的的技术,如低粘度ATF,空挡控制,和减速控制,重置速度等方法。他们还采取了平板状的转矩转换器,小型螺线管等技术。

2008年Quan Zheng, Asif Habeebullah, Woowon Chung 和 Andrew Herman进行了6速自动变速箱动力学模型HIL试验台的研究。他们指出在控制器的生产过程和软件的开发过程中一个很重要的步骤就是对软件和控制器进行检验。一个常用方法是利用HIL(硬件在环)

进行测试。HIL测试的关键部分是动力学模型的建立。HIL测试可以用于发动机(ECM),传动装置(TCM)或动力传动系统控制器(PCM)的测试。他们主要对六速自动变速器的建模方法和控制软件进行了测试,并在HIL测试的应用环境中进行了详细描述。

2003年,Chi-Kuan Kao, Anthony L. Smith 和 Patrick B. Usoro进行了五速起动离合器自动变速器汽车的研究。他们研究成果主要是湿式多片离合器对提高车辆的燃油经济性有很大作用。

3.2国内车辆传动系实验台研究现状

与国外相比,国内对于传动实验台的研究起步相对较晚。研究工作始于二十世纪八十年代初期。国内较早从事这方面研究工作的主要单位有北京理工大学、重庆大学、郑州机械研究所、长春汽车研究所、西安重型机械研究所、西安理工大学、合肥工业大学、四川工业学院、西安减速机厂、西安公路交通大学等单位。他们先后建立起了各种形式的传动实验台。这些实验台的建立从理论上和实践上都取得了很大的进步,积累了丰富的经验,代表着我国机械传动实验设备的发展水平。

1、2004年同济大学机械工程学院建立了基于闭式液压系统的工程车辆传动系实验台。实验台传动系主要由动力系统、变量液压泵、变量液压马达、变速箱、驱动桥及其轮胎组成。加载时,可在变速箱后连接测功机进行加载,或者在驱动桥两侧进行加载。电液比例控制的变量液压泵和电控变量液压马达组成液压闭式传动系统,变量柱塞泵的斜盘角度可由控制器输出的PWM控制信号通过斜盘角度调节杆进行无级调节,从而改变液压泵的排量大小和方向,液压传动与机械传动系统组成工程车辆传动系实验台。液压马达的排量由控制器输出开关信号进行大小两档排量的调节。室内实验台架主要由合理匹配动力系统、液压传动、计算机控制与显示、机械传动等构成,主要应用于研究工程车辆的动力匹配、闭式液压传动系统性能、变量马达和变速箱构成的复合变速系统特性以及计算机控制技术在工程车辆传动系的应用等。实验台测控系统采用Sauer-Danfoss公司生产的MC050型控制器以DSP技术为核心,具有强大的计算能力和丰富的I/O资源。控制器的控制算法的编程和显示器的图形显示均基于其功能强大的PLUS+1专用的图形编程软件。

2、2005年河南科技大学建设了液压机械无级传动实验台,研究履带拖拉机液压机械无级变速器及液压机械无级变速转向系统的性能。动力元件为发动机,加载元件为电涡流测功机,控制模式采用直接数字控制方式,控制系统由上位工控机和发动机控制下位机、HMCVT 控制下位机、电涡流测功机控制下位机以及传感器等组成。确定液压系统传动比与载荷之间的变化规律以及确定液压系统效率对多段液压机械双流无级传动性能的影响,验证并优化变量泵定量马达系统的调速规律;研究传动比变化规律,验证传动比计算方法的正确性;研究工况转换的换档过程及其换档平稳性,确定换档规律对传动性能的影响;优化换档规律,使发动机与变速器匹配具有最佳的动力性和经济性。

3、2006年长安大学研究开发了电动汽车实验台进行电动汽车技术的研究,对电动汽车研发过程中的一些关键技术、参数匹配和控制策略的优化提供一个研究平台。电动汽车实验台由电机及其控制器测量模块、整车惯量模拟模块、行驶阻力模拟模块、能源管理模块、制动能量回收模块和混合动力电动汽车的动力耦合实验模块六大主要模块和变速、传动和连接等装置组成。直流电机、转速转矩传感器、变速器、飞轮组系统、电涡流测功机和直流电力测功机按顺序成“一”字形依次排列固定在实验平台上。相邻组件之间都是通过联轴器连接,动力从直流电机的输入端输入,经过转速转矩传感器、变速器和飞轮组传递给电涡流测功机和直流电力测功机,最终转化为热能消耗掉或者转化为电能回收给蓄电池和电网,该试验台

总体布置方案如图3.1所示

图3.1 长安大学电动汽车试验台总布置方案图

4、2008年中南大学进行了工程车辆传动实验台的研究。进行了工程车辆传动系性能实验;车轮制动力测定实验;车轮附着力(系数)测定实验;滚动阻力测定实验;液压传动系统动态性能实验;发动机-变量泵-马达匹配实验;发动机-变量泵-马达传动系节能技术实验;滑转率测定实验;液压传动系统加速性能实验。

中南大学的研究基于闭式液压传动的工程车辆传动实验台为现代工程车辆提供了一个先进的实验研究平台。实验台的研制显示了其多方面的创新,融合了现代先进的比例控制技术、闭式液压传动系统和先进的控制软件,同时也为工程车辆的动力匹配、闭式液压传动系统性能、节能技术以及计算机控制技术在工程车辆传动系中的应用提供了一个研究、开发、实验平台。

详细介绍了工程车辆传动实验台。行走驱动系统和制动系统的工作原理、液压元件的选用、参数匹配,对闭式系统和制动系统进行了建模仿真,并进行了实验,通过曲线对比验证了数字仿真的正确性。在基于LabVIEW的程序结构模块化的思想上,研究开发出了工程车辆传动系统实验台测控系统软件。

5、国内还有很多学者在仿真控制领域方面进行了不少研究。比如常州机电职业技术学院和东风康明斯发动机有限公司在2011年进行的DCT自动变速器试验台动力性换挡策略研究。研究的主要成果是:根据挡位对选换挡执行机构进行位置定义。不同的选挡传感器和换挡传感器值的组合所对应的不同的选挡执行机构位置[2]。在分析选换挡执行机构工作原理的基础上,建立了选挡执行机构控制子系统和换挡执行机构子系统。利用PID控制算法对离合器执行机构建立了增量式PID控制算法的离合器控制子系统。根据动力性换挡策略.基于Matlab/Simulink软件平台,建立了DCT传动系统的仿真模型。依据仿真模型.对车辆换挡过程的动态性能进行了仿真.得出了准确实现DCT传动系统的控制逻辑,最终得到修正后的动力性换挡规律,为DCT试验台电子控制系统的开发奠定了基础。

北京交通大学和中国北方车辆研究所于2007年进行了传动系统试验台的半实物仿真优化技术的研究。研究成果有:采用Matlab结合力控自动化组态软件,通过Excel的DDE数据传送方式,进行传动系统试验台系统特性的在线模拟辨识,用遗传算法对PID参数优化分析等半实物仿真技术[3]。以力控组态软件为例给出了仿真系统的结构组成,数据及参数相互传递的仿真和应用于传动系统试验台的PID优化控制的实例。

6、也有专门对机械自动变速传动试验台进行研究的。比如重庆大学和沈阳华晨金杯汽车有限公司进行的机械自动变速传动试验台及测控软件开发研究。研究内容有:一、在车辆

传动试验台的基础上搭建了AMT试验台,设计了AMT电子节气门、换档执行机构和离合器执行机构的控制器,试验表明,控制结果令人满意。二、解决了WINDOWS2000下对硬件端口不能读写的问题,实现了对转速扭矩信号的采集[4]。三、通过RS232串口通信,实现上位微机采集数据并向下位单片机发出控制指令。四、开发了WINDOWS2000环境下的试验测控软件,使试验具备了先进的数据采集及控制系统。

7、还有一些部门和学者在机车试验台方面也做了不少研究。比如唐山轨道交通装备有限责任公司进行了机车定置试验台的电气传动系统研究。主要研究有:阐述了使用机车定置试验台的必要性,介绍了机车定置试验台的基本原理,并对机车定置试验台的传动系统的主电路构成及同步调节系统等关键问题进行了分析和论述。北车北京二七轨道交通装备有限责任公司进行了机车定置试验台机械传动系统设计研究。主要研究有:介绍了机车定置试验台机械传动系统的组成及功能,阐述了该机械传动系统的创新技术特点,如机械一电控同步技术、液压顶升滚轮调轴距技术、万向轴加过渡套连接不同轴距的车轴齿轮箱技术、注油压装法改变轨距技术、弹性过渡轨结构、机械锁钩等。

8、还有一些部门和学者在履带车辆试验台方面也做了大量研究。北京交通大学所做的履带车辆传动试验台自动换档机械手的开发与研究。主要研究是:根据传动试验台的实际换档需要,对比气动、液压、机械、交流伺服四种驱动方式,针对换档操作的球面运动特性,采用数字交流伺服的三自由度直角坐标换档机械手方案,巧妙解决了曲线换档、三维转化为二维的运动控制、档位行程标定等难题。采用和利时电机公司的60CB系列伺服电机、GS系列交流伺服驱动器、英国翠欧公司的MC206运动控制器和工控机等构建了位置环伺服运动控制系统。利用ActiveX控件在VB中开发了上位机控制程序,并引入了档位示教、档位标定、定时操作、限位报警等功能,既实现了试验的自动化换档操作,又保证了系统的安全可靠。最后,利用网络控制技术,以综合传动试验台的分散控制系统(DCS)作为网络控制主体平台,通过MODBUS通讯协议之间的中转,将换档机械手控制系统无缝集成到DCS系统中,大大提高了试验效率。.

经过现场的安装、调试和运行,换档机械手的整体设计和控制方案是切实可行的,能够完全代替人手实现换档操作,具有结构紧凑、定位精度高、安全可靠的特点.同时换档执行机构不需要对变速箱体进行结构改造,针对不同的变速箱传动试验,只需要修改控制软件中的坐标和行程就能满足试验要求,具有一定的通用性。

9、还有一些学者对传动系统试验台的直接转矩控制做了研究。北京交通大学机械与电子工程学院的杜秀霞、李平康:以传动系统试验台为研究对象。在研究异步电动机直接转矩控制Direct Torque Control(DTC)的基础上,提出在传动系统试验台上实现电机四象限工作的DTC过程,并用Matlab/Simulink进行了仿真实现。设计出的控制系统根据定子磁链状态矢量进行空间定位。通过对扭矩和磁通的简单继电式方式比较,配合开关选择表策略,成功实现了对异步电动机转矩和转速的直接转矩控制,为将DTC技术应用于传动系统电机智能控制的实际工程奠定了基础。

10、也有不少学者在新型试验台的研究中做了很多研究。车辆传动国家重点实验室的刘云鹏、卜树峰和北京交通大学的李平康、杜秀霞分析了车辆传动系统联调试验台的技术需求与现状,结合建设目标对几种不同的建设方案进行了对比,介绍了某全自动化的传动系统联调试验台的建设方案和应用效果,并重点介绍了试验台仿真能力的创新设计、电功率封闭加载、全自动控制系统的设计以及测试系统实时挡位辨识系统。他们研究的试验台具有以下特点:

(1)低速大转矩加载。交流电力加载设备克服了传统测功机在低速时无法加载的缺点,无须增速设备就可完成从0至最大载荷的加载。

(2)试验台仪表采用了多项国际先进技术、多重保护和隔离设计,抗干扰能力强、可靠

性高。

(3)模块化设计使结构简化,具有很高的可靠性和维护性。

(4)加载范围宽。最大转矩大于2 600N·m,交流加载电机功率为600kW,试验时,可宽范围连续加载,基本可以满足目前国内工程机械的要求。

(5)试验范围广。在铸铁平台上,只需更换固定支架就可搭成不同的结构形式,从而满足不同的试验要求。

(6)超限三级报警。将工业级安全策略应用于试验台,试验台报警、保护、紧急停车等功能,极大地提高了试验台的安全性。

11、还有一些机构是研究铁道牵引交流传动试验台的发展的。中国铁道科学研究院、机车车辆研究所的李伟和张黎在这方面做了大量工作。他们先对传统的交流传动试验台的类型进行了总结,分析了不同试验台的实现原理、控制方法及技术特点。然后对背靠背、交流能量互馈试验台的电气结构、数据采集系统以及试验内容等进行了分析和总结。该试验台可满足交流传动系统及其主要部件的型式试验、例行试验以及研究性试验的要求,具有适用面宽,节能等优点。最后总结了交流传动试验台的主要特点和发展趋势,表明一个技术先进、功能完备、性能优良的交流传动试验台,可以为交流传动系统及其部件的研发、制造、试验以及检验创造良好的条件。

通过这些研究可以得出:交流传动试验系统已经成为交流传动系统研究、开发和验证的重要平台。随着我国铁路技术引进工作的不断深入,机车车辆交流传动技术也将逐步发展成熟,需要更新和发展交流传动系统试验台,使得试验台的技术水平不断提高,功能更加完善。目前试验台的主要特点和发展趋势是:

(1)能耗型电气负载逐步被淘汰,由能量回馈型所取代,而直流负载电机逐步被交流负载电机所代替,出现了“背靠背”式的交流电机互馈试验系统;

(2)试验功能更加齐全,由单一的例行试验,逐步集成了研发性试验和型式试验的功能,可模拟多种过程,进行多种性能试验,如全速度范围的牵引/再生制动特性试验、机车动态特性试验、列车运行过程模拟、线路状态模拟、不同轮径模拟、通过曲线模拟、轮轨接触状态的模拟、受电弓跳弓模拟等;

(3)适应面越来越宽,提供多种制式电源,能够适应动车组、机车、地铁、轻轨等的试验需要,可试验的部件除了主变压器、网侧变流器、中间电路、电机逆变器、牵引电机外,还可以进行制动电阻、制动斩波器、牵引变流器控制装置、机车控制系统、网络系统等的试验;

(4)自动化程度高,配备数据自动采集和处理系统;

(5)控制及保护功能更加完善;

(6)可测量的技术参数越来越多,如电压、电流,转矩、转速,温度,流量、流速,噪声,场强等;

(7)维护工作量少,运用经济性好。

从国内的现状看多数交流传动试验台属于能耗型和机组反馈式试验台,即使采用交流异步电机互馈方式,其功率等级、控制方法亦难以满足我国铁路快速发展的要求,因此有必要建立一个技术先进、功能完备、性能优良的交流传动试验台,为交流传动系统及其部件的研发、制造、试验以及检验创造良好的条件。

总结

本文主要介绍了车辆传动系的类型及其特点,车辆传动系统试验台的基本情况,阐述国

内外车辆传动实验台的研究现状及研究成果,通过参考大量文献的基础上可以得出,电液综合传动试验台有很好的发展前景,今后可以多进行这方面的研究。

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分子生物学实验指

DNA分离 核酸包括DNA、RNA两种分子在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在。真核生物的染色体DNA为双链线性分子;原核生物的"染色体"、质粒及真核细胞器DNA为双链环状分子;有些噬菌体DNA有时为单链环状分子;RNA分子在大多数生物体内均是单链线性分子;不同类型的RNA分子可具有不同的结构特点,如真核自由RNA分子多数在3'端带有ploy(A)结构。至于病毒的DNA、RNA分子,其存在形式多种多样,有双链环状、单链环状、双链线状和单链线状等。 95%的真核生物DNA主要存在于细胞核内,其它5%为细胞器DNA,如线粒体、叶绿体等。RNA分子主要存在于细胞质中,约占75%,另有10%在细胞核内,15%在细胞器中。RNA以rRNA 的数量最多(80%~85%),tRNA及核内小分子RNA占10%~15%,而mRNA分子只占1%~5%,mRNA分子大小不一,序列各异。总的来说,DNA分子的总长度一般随着生物的进化程度而增大,而mRNA 的分子量与生物进化无明显关系。 分离纯化核酸总的原则:①应保证核酸一级结构的完整性;②排除其它分子的污染。为了保证核酸结构与功能的研究,完整的一级结构是最基本的要求,因为遗传信息全部贮存在一级结构之内。核

酸的一级结构还决定其高级结构的形式以及和其它生物大分子结合的方式。 核酸的纯化应达到的要求:①核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子;②其它生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度;③排除其它核酸分子的污染,如提取DNA分子时,应去除RNA分子,反之亦然。 实验过程中注意事宜: ①尽量简化操作步骤,缩短提取过程,以减少各种有害因素对核酸的破坏;②减少化学因素对核酸的降解,为避免过酸、过碱对核酸链中磷酸二酯键的破坏,操作多在pH4~10条件下进行;③减少物理因素对核酸的降解,物理降解因素主要是机械剪切力,其次是高温。机械剪切力包括强力高速的溶液震荡、搅拌,使溶液快速地通过狭长的孔道;细胞突然置于低渗液中;细胞爆炸式的破裂以及DNA样品的反复冻贮。这些操作细节在实验操作中应备加注意。机械剪切作用的主要危害对象是大分子量的线性DNA分子,如真核细胞的染色体DNA。对分子量小的环状DNA分子,如质粒DNA及RNA分子,威胁相对小一些。高温,如长时间的煮沸,除水沸腾带来的剪切力外,高温本身对核酸分子中的有些化学键也有破坏作用。核酸提取过程中,常规操作温度为0~4℃,此温度环境降低核酸酶的活性与反应速率,减少对核酸的生

分子生物学实验指导(精)

分子生物学实验指导 生物技术教学室编 宁夏大学生命科学学院 2008年8月

实验一分子生物学实验技术多媒体演示 [目的要求] 通过多媒体试验录像进一步掌握分子生物学基本操作技术。 [教学方式] 多媒体光盘演示。 [实验内容] 基本的分子生物学实验操作技术包括核酸凝胶电泳技术;质粒提取;转化;重组体的筛选;PCR技术等。

实验二琼脂糖凝胶电泳检测DNA [目的要求] 通过本实验学习琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术 [实验原理] 琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应,DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极方向移动。不同浓度琼脂糖凝胶可以分离从200bp至50 kb的DNA片段。在琼脂糖溶液中加入低浓度的溴化乙锭(Ethidum bromide ,EB),在紫外光下可以检出 10ng的DNA条带,在电场中,pH8.0条件下,凝胶中带负电荷的DNA向阳极迁移。 琼脂糖凝胶有如下特点: (1) DNA的分子大小在凝胶基质中其迁移速率与碱基对数目的常用对数值成反比,分子越大迁移得越慢。 (2) 琼脂糖浓度一个特定大小的线形DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率(u)的对数与凝胶浓度(t)成线性关系。 (3) 电压低电压时,线状DNA片段迁移速率与所加电压成正比。但是随着电场强度的增加,不同分子量DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长,随着电压的增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段的分辨率达到最大,所加电压不得超过5v/cm。 (4) 电泳温度DNA在琼脂糖凝胶电泳中的电泳行为受电泳时的温度影响不明显,不同大小的DNA片段其相对迁移速率在4℃与30℃之间不发生明显改变,但浓度低于0.5%的凝胶或低熔点凝胶较为脆弱,最好在4℃条件下电泳。 (5) 嵌入染料荧光染料溴化乙锭用于检测琼脂糖凝胶中的DNA,染料嵌入到堆积的碱基对间并拉长线状和带缺口的环状DNA,使其刚性更强,还会使线状迁移率降低15%。 (6) 离子强度电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA电泳迁移率。在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶,电导率最小,DNA几乎不移动,在高离子强度的缓冲液中(如误加10×电泳缓冲液),则电导很高并明显产热,严重时会引起凝胶熔化。

振动测试和分析技术综述分析解析

振动测试和分析技术综述 黄盼 (西华大学,成都四川 610039) 摘要:振动测试和分析对结构和系统动态特性分析及其故障诊断是一种有效的手段。综述了当前振动测试和分析技术,包括振动测试与信号分析的国内外发展概况、振动信号数据采集技术、振动测试技术、以及振动测试与信号分析的工程应用,最后对振动测试与分析技术的未来发展方向进行了展望。 关键词:振动测试; 信号分析; 动态特性; 综述 Summary of Vibration Testing and Analysis HuangPan ( Xihua University,Chengdu 610039,China) Abstract: Vibration testing and analysis is an effective tool in analyzing structure and system dynamic characteristic and detecting the failures of structures,systems and facilities. The present paper reviews the current vibration testing and analysis techniques,including the development of vibration measurement and analysis of domestic and foreign,vibration signal data acquisition,vibration testing technology ,vibration measurement and analysis in engineering application. Finally,the future development in the field of vibration testing and analysis is predicted. Key words: vibration testing; signal analysis; dynamic characteristic;overview

188 机械传动多功能试验台(含全套说明书和CAD图纸)解析

摘要 实验设备对于加深学生对理论知识的理解,锻炼学生的实践、创新能力具有十分重要的意义,在教学体系中占有举足轻重的地位。目前,我国大部分高校的实验设备存在陈旧、落后的问题,而实验设备开发与实验教学应用严重脱节,导致实验设备无法满足教学发展的要求。因此,迫切地需要通过新型实验设备的自主设计研制,来改进实验设备现状、提高实验教学水平。 关键词:机械传动,运动学,动力学,实验台,仿真,测试

ABSTRACT The experimental facilities have the very important function for the understanding of the academic knowledge, exercises student's practice, ability of creation. At present, problems of obsolete and backward facilities exist in majority of the universities.Because of the disjoint between the development of the experimental facilities and the experimental teaching application, the experimental facilities can not suit for the development of teaching. Therefore, it is urgent to develop the new experimental facilities, to improve the test installation present situation, the enhancement experiment teaching level. Keyword: Mechanical Transmission , Kinematics, Dynamics, Laboratory Bench, Simulation, Test

分子生物学实验技术考试题库

一、名词解释 1.分配常数:又称分配系数,是指一种分析物在两种不相混合溶剂中的平衡常数。 2.多肽链的末端分析:确定多肽链的两末端可作为整条多肽链一级结构测定的标志,分为氨基端分析和羧基端分析。 3.连接酶:指能将双链DNA中一条单链上相邻两核苷酸连接成一条完整的分子的酶。 4.预杂交:在分子杂交实验之前对杂交膜上非样品区域进行封闭,用以降低探针在膜上的非特异性结合。 5.反转录PCR:是将反转录RNA与PCR结合起来建立的一种PCR技术。首先进行反转录产生cDNA,然后进行常规的PCR反应。 6.稳定表达:外源基因转染真核细胞并整合入基因组后的表达。 7.基因敲除:是指对一个结构已知但功能未知或未完全知道的基因,从分子水平上设计实验,将该基因从动物的原基因组中去除,或用其它无功能的DNA片断取代,然后从整体观察实验动物表型,推测相应基因的功能。 8.物理图谱:人类基因组的物理图是指以已知核苷酸序列的DNA片段为“路标”,以碱基对(bp,kb,Mb)作为基本测量单位(图距)的基因组图。 9.质谱图:不同质荷比的离子经质量分析器分开后,到检测器被检测并记录下来,经计算机处理后所表示出的图形。 10.侧向散射光:激光束照射细胞时,光以90度角散射的讯号,用于检测细胞内部结构属性。

11.离子交换层析:是以离子交换剂为固定相,液体为流动相的系统中进行的层析。 12.Edman降解:从多肽链游离的N末端测定氨基酸残基的序列的过程。 13.又称为限制性核酸内切酶(restriction endonuclease):是能够特异识别双链DNA序列并进行切割的一类酶。 14.电转移:用电泳技术将凝胶中的蛋白质,DNA或RNA条带按原位转移到固体支持物,形成印迹。 15.多重PCR:是在一次反应中加入多对引物,同时扩增一份模板样品中不同序列的PCR 过程。 16.融合表达: 在表达载体的多克隆位点上连有一段融合表达标签(Tag),表达产物为融合蛋白(有分N端或者C端融合表达),方便后继的纯化步骤或者检测。 17.同源重组:发生在DNA同源序列之间,有相同或近似碱基序列的DNA分子之间的遗传交换。 18.遗传图谱又称连锁图谱(linkage map),它是以具有遗传多态性的遗传标记为“路标”,以遗传学距离为图距的基因组图。 19.碎片离子:广义的碎片离子为由分子离子裂解产生的所有离子。 20.前向散射光:激光束照射细胞时,光以相对轴较小角度向前方散射的讯号用于检测细胞等离子的表面属性,信号强弱与细胞体积大小成正比。 21.亲和层析:利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其他分子的一种层析法。(利用分子与其配体间特殊的、可逆性的亲和结合

分子生物学综合实验报告

分子生物学综合试验报告

综合实验Ⅰ.Southern杂交 (质粒DNA提取、PCR技术体外扩增DNA、质粒载体和外源DNA的连接反应、 地高辛标记的Southern杂交) 一.实验目的 1.学习Southern杂交的原理及操作方法。 2.学习碱裂解法提取质粒的原理。 3.学习PCR反应的基本原理和实验技术;了解引物设计的一般要求。 4.掌握DNA体外连接的基本技能,了解连接反应的注意事项。 二.实验原理 利用染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离的目的。在碱变性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋解开而变性,质粒DNA氢键也大部分断裂,双螺旋也有部分解开,但共价闭合环状结构的两条互补链不会完全分离,当pH=的乙酸钠将其pH调到中性时,变性的质粒DNA又恢复到原来的碱裂解法提取质粒的主要原理是:利用染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而构型,而染色体DNA不能复性,形成缠绕的致密网状结构,离心后,由于浮力密度不同,染色体DNA与大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。 聚合酶链反应(PCR)是体外酶促合成DNA片段的一种技术,PCR 进行的基本条件:DNA模板(在RT-PCR中模板是RNA)、引物、dNTP (dATP、dTTP、dGTP、dCTP)、Taq DNA聚合酶、反应缓冲体系。 PCR循环由三个步骤组成:变性、退火、延伸。每一个循环的产物可作为下一个循环的模板,通过30个左右循环后,目的片段的扩增可达106倍。

DNA片段之间的连接是通过DNA连接酶的催化实现的。DNA连接酶催化具有平末端或互补粘性末端的DNA片段间相邻碱基通过3’,5’磷酸二酯键连接起来。最常用的来源于T4噬菌体的T4DNA连接酶。对于平末端或互补的粘性末端可直接进行连接反应。一个片段是平末端,另一片段为粘性末端或两个片段都是粘性末端但不配对,则需要通过各种方式使其可一匹配或通过平末端进行连接。通常采用末端补平、加同聚物尾、加接头等方式是目的片段之间能够匹配。 地高辛随机引物法标记的原理:在随机引物法标记的反应液中,有随机合成的六聚核苷酸作为引物,dATP、dCTP、dGTP、dTTP和D1G-11-dUTP作为合成底物,以单链DNA作为模板,在Klenow酶的作用下,合成插入地高辛的DNA链。以地高辛标记的探针与靶基因DNA链杂交后,再通过免疫反应进行检测。一般通过酶标记地高辛抗体检测,就可以肯定杂交反应的存在。免疫检验一般用碱性磷酸酶系统,BClP/NBT显色,敏感性很高。 三.实验准备 1.实验材料: 含质粒的大肠杆菌DH5α,LB液体培养基, LB平板培养基 2.实验试剂: Taq DNA聚合酶,10×反应缓冲液(含25mmol MgCl2),dNTP,引物(P1、P2),溴乙啶 (EB) ,点样缓冲液Loading buffer(10×):%溴酚蓝,40%甘油,目的基因及载体, 2×ligation 缓冲液,T4 DNA连接酶, L CaCl2,氨苄青霉素(100mg/mL), TBE电泳缓冲液(5×), DIG Random Labeling Mix(高效),Anti-DIG-AP Conjugate, BCIP/NBT Stock Solution,Blocking Reagent。 20×SSC:柠檬酸钠,3M NaCl,2×SSC:柠檬酸钠, NaCl, EDTA,变性液: NaOH, NaCl,中和度: Tris-HCl、、3M NaCl,Standard buffer:5×SSC、%(w/v) N-Lauroylsarcosine, % (w/v) SDS, 1% Blocking Reagent,Standard buffer+50% formamide,Anti-DIG-AP 碱性磷酸酶标记抗地高辛单抗体,BCIP/NBT储备液,冲洗液:0. 1M

水工模型试验测量技术综述

水工模型试验测量技术综述 摘要:水工模型试验是解决工程实际问题,为理论研究和工程设计提供依据的重要手段。基础数据的准确度与精确度直接关系到试验成果的质量,因此试验中的测量技术非常关键。流速、流量、水位、压力、地形、泥沙含量等是模型试验中测量的主要数据,本文主要介绍了模型试验中这些数据的测量技术及存在的问题。 关键字:水工模型试验测量方法发展现状问题分析 引言 水工模型试验是根据相似原理,按照一定的相似比将需要研究的对象,如河流、水工建筑物等按一定比例缩小后,在缩小的模型中复演与原型相似的水流,进行水工建筑物各种水力学问题研究的实验技术,旨在定性或定量的揭示其运动规律或水力学特性,为理论研究和工程设计等提供依据。 自1870年弗劳德(Froude)首先按水流相似准则进行了船舶模型试验以来,随着水利事业的发展,水工模型试验水平在很大程度上有了提高,在理论设计、模型制作、试验测量、数据处理等方面都有了创新突破和发展。 模型试验中的数据测量对试验结果的质量起着至关重要的作用,数据的精确度和准确度直接关系到科研成果的质量。在水工模型试验中主要需要控制和测量的参数有流速、流量、水位、压力、地形、泥沙等,测量仪器的精度、范围、性能等决定着测量结果的准确性,因而优良的测量技术是模型试验的前提和保障。近年来随着激光技术、超声波技术、计算机技术及数字图像处理技术等先进技术的发展,模型试验测量技术有了较快的发展,但尚存在一些问题有待进一步研究,本文主要论述模型试验测量技术的发展及现在存在的一些问题。1.发展现状 1.1流速测量技术 流体的流速是流场最基本的物理量之一,对流体流动特性的认识很大程度上取决于流场的获得,而大多数描述流场的物理量都直接或间接与流速有关,如环量、涡量、流函数、流速势函数等等。在模型试验中流速的测量非常重要,随着技术的创新突破,流速的测量技术取得了较快的发展,从单点流速测量发展到多点测量,从单向到多向、从稳态向瞬态发展,从毕托管、旋浆流速仪、热线/热膜流速仪、电磁流速仪、超声波多普勒流速仪(ADV)、激

装配后车辆性能检测与转毂试验台

装配后车辆性能检测与转毂试验台 汽车的出厂检测项目很多,如何在生产中采用高效精确的检测设备是汽车厂家面临的难题。通过制定合理的测试工艺流程,将转毂试验台用于装配后车辆性能的检测是一个不错的选择。 转毂试验台的结构和工作原理 转毂试验台主要由4对转毂组成,每对转毂与一个矢量调节的三相交流电机相连(见图1)。通过变频器个别受到电机驱动(“驱动”)或电机制动(“制动”)。“驱动”与“制动”电机通过直流中间电路进行能源交流,多余能源反馈回试验台。不同的行驶状况可通过与转毂组连接马达来实现,操作者与试验台控制之间的通信通过不同的显示器及操作元件来实现。 转毂与制动力的计算 静态(近匀速状态)测量是通过变频器测量出交流电机的电流。借助扭矩测量轴可以比较电机电流与扭矩之间的关系。这个过程是通过分段式的增加力(电机电流的数值)来实现的。这个扭矩会被换算成转毂表面的切向力(F切)。通过这个测量出的切向力及事先给出的标称力并借助最小二乘法计算出“最贴近的模拟曲线”。考虑到发动机转数和转毂转数之间的对应关系和已知的转毂直径,我们就可以根据以下算式计算转毂表面上切向力与电机电流之间的关系:? F切= -Imot×kc×km×i/rrolle 式中? Imot——发动机转数和转毂转数之间的对应关系; kc——在X-road这里可以使用扭矩测量轴获得;

km——电机生产商给出的系数; i——电机标称扭矩/电机标称电流; rrolle——转毂半径。 动态测量的测量原理是:通过变频器,转毂的延迟和加速都借助于石英控制的实时系统测量。借助于降低转毂对的质量可以计算出转毂质量的反力(F反)。 F反=mred×a 式中mred——转毂降低的质量(使用x-cal 获得); a——转毂的加速度/延迟。 各车轮损耗力F1、净拖力Fd和净制动力F2的计算如下: Fd=拖力-F1=(I/R)×Ad- F1 式中? I——转毂转动惯量; R——转毂直径; I/R——转毂因子; Ad——车轮拖动时的转毂角减速度。 F2=制动力-Fd-F1=(I/R)×Af-(I/R)×Ad 式中? Af——车轮制动时的转毂角减速度。 转毂试验台测试工艺

Q-FDA 010-2016汽车转向横拉杆总成性能要求及台架试验方法(最终版本)修订20160121——A汇总

ICS 点击此处添加中国标准文献分类号Q/FD 北京福田戴姆勒汽车有限公司企业标准 Q/FD XXXXX—XXXX 汽车转向桥系统横拉杆总成结构、 性能要求及台架试验方法 点击此处添加标准英文译名 点击此处添加与国际标准一致性程度的标识 文稿版次选择 2016-XX-XX发布2016-XX-XX实施

目录 前言............................................................................... III 汽车转向桥系统横拉杆总成结构、性能要求及台架试验方法 (1) 1 范围 (1) 2 规范性引用文件 (1) 3 术语和定义 (1) 4 横拉杆零部件尺寸及结构要求 (3) 4.1 球接头总成尺寸及螺纹 (3) 4.2 横拉杆与球接头总成螺纹连接精度 (3) 4.3 横拉杆总成紧固装置结构技术要求 (3) 4.4 转向横拉杆卡箍螺栓螺母技术要求 (4) 5 转向横拉杆总成装配技术要求 (4) 5.1 装配技术要求 (4) 5.2 横拉杆球头防尘罩装配密封要求 (4) 5.3 横拉杆总成润滑介质要求 (4) 5.4 外观及防护要求 (4) 6 台架试验项目 (5) 7 台架试验设备及条件 (6) 8 台架试验方法 (6) 8.1 球接头相关试验 (6) 8.1.1 球接头总成最大摆角测定 (6) 8.1.2 球接头总成摆动力矩T1测定 (6) 8.1.3 球接头总成旋转力矩T2测定 (7) 8.1.4 最大轴向位移量δ1测定 (8) 8.1.5 最大径向位移量δ2测定 (8) 8.1.6 球销锥面配合面积检测 (9) 8.1.7 球接头总成球销拔出力 (9) 8.1.8 球接头总成球销压出力 (9) 8.1.9 球接头总成常温耐久性试验 (10) 8.1.10 球接头总成高温耐久性试验 (10) 8.1.11 球接头总成低温耐久性试验 (11) 8.1.12 球接头总成泥水环境耐久性试验 (11) 8.1.13 球接头防尘罩泥水环境耐久性试验 (12) 8.1.14 球接头防尘罩臭氧环境耐久性试验 (13) 8.1.15 球接头总成球销弯曲疲劳 (14) 8.1.16 球接头总成盐雾试验 (14) 8.2 转向直拉杆臂与转向横拉杆臂疲劳试验 (14) 8.2.1 转向直拉杆臂疲劳试验 (14) 8.2.2 转向横拉杆臂疲劳试验 (15)

分子生物学实验报告

分子生物学实验 院系:生命科学与技术学院 专业:生物科学(基地) 班级: 201101班 学号: 姓名: 分子生物学基础实验 分子生物学实验技术已成为生物化学及分子生物学以及相关学科院系教学科研不可缺少的一部分。为提高学生在分子生物学技术方面的动手能力,生物技术综合实验室主要开设常用而基本的分子生物学实验技术。它的内容包括质粒DNA的制备;DNA的重组;PCR基因扩增等等。 实验一质粒DNA的小量制备 一、实验原理 要把一个有用的外源基因通过基因工程手段,送进细胞中去进行繁殖和表达,需要运载工具,携带外源基因进入受体细胞的这种工具就叫载体(vector)。载体的设计和应用是DNA体外重组的重要条件。作为基因工程的载体必须具备下列条件:(1)是一个复制子,载体有复制点才能使与它结合的外源基因复制繁殖;(2)载体在受体细胞中能大量增殖,只有高复制率才能使外源基因在受体细胞中大量扩增;(3)载体DNA链上有1到几个限制性内切酶的单一识别与切割位点,便于外源基因的插入;(4)载体具有选择性的遗传标记,如有抗四环素基因(Tc r),抗新霉素基因(Ne r)等,以此知道它是否已进入受体细胞,也可根据这个标记将受体细胞从其他细胞中分离筛选出来。细菌质粒具备上述条件,它是基因工程中常用的载体之一。 质粒(plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小在1~120kb之间,具

有双链闭合环状结构的DNA分子,主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中。质粒具有自主复制和转录能力,能使子代细胞保持它们恒定的拷贝数,可表达它携带的遗传信息。它可独立游离在细胞质内,也可以整合到细菌染色体中,它离开宿主的细胞就不能存活,而它控制的许多生物学功能也是对宿主细胞的补偿。 质粒在细胞内的复制,一般分为两种类型:严密控制型(stringent control)和松弛控制型(relaxed control)。前者只在细胞周期的一定阶段进行复制,染色体不复制时,它也不复制。每个细胞内只含有1个或几个质粒分子。后者的质粒在整个细胞周期中随时复制,在细胞里,它有许多拷贝,一般在20个以上。通常大的质粒如F因子等,拷贝数较少,复制受到严格控制。小的质粒,如ColE Ⅰ质粒(含有产生大肠杆菌素E1基因),拷贝数较多,复制不受严格控制。在使用蛋白质合成抑制剂-氯霉素时,染色体DNA复制受阻,而松弛型ColEⅠ质粒继续复制12-16h,由原来20多个拷贝可扩增至1000-3000个拷贝,此时质粒DNA占总DNA的含量由原来的2%增加到40%-50%。本实验分离提纯化的质粒pBR322、pUC19就是由ColE Ⅰ衍生的质粒。 所有分离质粒DNA的方法都包括三个基本步骤:培养细菌使质粒扩增;收集和裂解细菌;分离和纯化质粒DNA。采用溶菌酶可破坏菌体细胞壁,十二烷基硫酸钠(SDS)可使细胞壁解,经溶菌酶和阴离子去污剂(SDS)处理后,细菌染色体DNA 缠绕附着在细胞壁碎片上,离心时易被沉淀出来,而质粒DNA则留在清液中。用乙醇沉淀、洗涤,可得到质粒DNA。 质粒DNA的相对分子量一般在106-107范围内,如质粒pBR322的相对分子质量为2.8×106,质粒pUC19的相对分子质量为1.7×106。在细胞内,共价闭环DNA(covalently closed circular DNA,简称cccDNA)常以超螺旋形式存在。如果两条链中有一条链发生一处或多处断裂,分子就能旋转而消除链的张力,这种松弛型的分子叫做开环DNA(open circular DNA,简称ocDNA)。在电泳时,同一质粒如以cccDNA形式存在,它比其开环和线状DNA的泳动速度快,因此在本实验中,自制质粒DNA在电泳凝胶中呈现3条区带。 二、实验目的 1.掌握最常用的提取质粒DNA的方法和检测方法。 2.了解制备原理及各种试剂的作用。 三、实验材料和试剂

分子生物学实验项目三

分子生物学实验项目三

实验三植物基因组DNA的提取 实验目的 通过本实验学习从植物组织中提取DNA的方法。 实验原理 利用液氮对植物组织进行研磨,从而破碎细胞。细胞提取液中含有SDS溶解膜蛋白而破坏细胞膜,使蛋白质变性而沉淀下来。EDTA抑制DNA酶的活性。再用酚、氯仿抽提的方法去除蛋白,得到的DNA溶液经乙醇沉淀。 仪器、材料与试剂 (一)仪器 1低温离心机 2 恒温水浴锅 3 台式离心机 4 琼脂糖凝胶电泳系统 5 微量加样器 (二)材料与试剂 1 三羟甲基氨基甲烷(Tris) 2 乙二胺四乙酸(EDTA) 3 氯化钠(Nacl) 4 β-巯基乙醇 5 氯化钾(KCl) 6 异丙醇

7 乙醇 8 琼脂糖 9 十二烷基硫酸钠(SDS) 10 50mL离心管 11陶瓷研钵 12 吸头、小指管 13 细胞提取液 100mmol/L Tris.HCl(PH 8.0) 5 mmol/L EDTA(PH 8.0) 500 mmol/L Nacl 1.25% SDS 1 mmol/L β-巯基乙醇 14 5 mol/L KCl 15 TE缓冲液 10 mmol/L Tris.HCl(PH 8.0) 1 mmol/L EDTA(PH 8.0) 16 哥伦比亚野生型拟南芥(Arabidopsis Columbia)三周幼叶。 17 TIANGEN基因组DNA提取试剂盒(Plant Genomic DNA Kit)(离心柱型)。 实验步骤 一、自配试剂提取步骤

1 取4g新鲜叶片,在液氮中充分研磨成粉末状(越细越好)。 2 将研磨好的粉末转移至50mL的离心管中,加入16mL细胞提取液,充分混匀,65℃水浴保温20min。 3 从水浴中取出离心管,加入5mL5mol/L的KCl溶液,混匀,冰浴20min。 4 4000r/min离心20min。 5 降上清液转移到另一50mL的离心管中。 6 加等体积的酚/氯仿混匀,12000 r/min离心5min,取上清。 7 加等体积氯仿,混匀,12000r/min离心5min,取上清。 8 加入0.6-1倍体积的异丙醇(沉淀DNA),混匀。 9 离心获得沉淀,加70%乙醇洗涤3次,风干沉淀。 10加入500μLTE缓冲液,溶解DNA。 11取3 mL上清液,琼脂糖凝胶电泳检测DNA的浓度和质量。 二植物基因组DNA提取试剂盒提取步骤 1、拟南芥基因组DNA的提取 以野生型拟南芥(Arabidopsis Columbia)2周幼叶为材料(称取叶片约100毫克),用TIANGEN基因组DNA提取试剂盒(Plant Genomic DNA Kit)(离心柱型)按以下步骤提取基因组DNA: 1) 取干净幼叶100mg,加入液氮充分研磨。 2) 将研磨好的粉末迅速转移到预先装有700μL65℃预热缓冲液GP1的离心管中(实验前在预热的GP1加入巯基乙醇,使其终浓度为0.1%),迅速颠倒混匀后,将离心管放在65℃水浴中20分钟,水浴过程中颠倒离心管以混合样品数

医学分子生物学实验报告

医学分子生物学实验报告

日期:2012-04-14 医学分子生物学实验报告 一、实验名称: 1、质粒的提取 2、质粒DNA的限制性内切酶酶切 3、DNA琼脂糖凝胶电泳 二、实验目的: 1、掌握碱裂解法分离质粒DNA的基本原理和操作要点 2、了解限制性内切酶作用的原理、特点和酶切质粒DNA的试验方法 3、学习琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术 三、实验原理: 质粒是一种染色体外能够稳定遗传的因子,具有双链共价闭环结构的DNA分子。是染色体外小型(1-200kb)的共价、闭合、环状的双链DNA分子(cccDNA),能自主复制并能稳定遗传的遗传因子。 碱裂解法利用宿主菌巨大线状染色体DNA与相对较小的闭环双链质粒DNA的结构的差异来提取质粒DNA。碱变性DNA时,线状基因组DNA变性充分而质粒DNA处于拓扑缠绕的自然状态而不能彼此分开。当去除变性条件时(酸中和),质粒DNA迅速准确配置重新形成完全天然超螺旋状分子,而难于复性的长链线状的基因组DNA则与破裂的细胞壁、细菌蛋白相互缠绕成大型复合物,被SDS包盖,当K+取代Na+时这些复合物会从溶液中沉淀下来,附在细胞碎片上一起被离心除去。 质粒检测:(1)电泳检测:质粒电泳一般有三条带,分别为质粒的超螺旋、开环、线型三种构型;(2)吸光值检测:采用分光光度计检测260nm、280nm波长吸光值,若吸光值260nm/280nm的比值介于1.7-1.9之间,说明质粒质量较好,1.8为最佳,低于1.8说明有蛋白质污染,大于1.8说明有RNA污染。 Ⅱ型酶识别的DNA序列一般含有4~6个核苷酸。有的在识别顺序的对称轴上对双链DNA 同时切割产生平末端;有的在识别顺序的双侧末端DNA双链产生粘性末端。Ⅱ型限制性内切酶需要Mg2+激活,大部分Ⅱ型酶所识别的序列具有反向对称的结构,或称为回文结构。质粒DNA通常都具有一个或多个限制性内切酶酶切识别序列,可被相应限制性内切酶切出相应数量的切口,从而产生相应数量的酶切片断。本实验采用的EcoRⅠ和Hind的识别序列和酶切位点分别为 GAATTC 和AAGCTT CTTAAG TTCGAA DNA在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 核酸为两性分子,在pH3.5时,整个分子带正电; pH8左右时,整个分子带负电。 在碱性环境下,核酸分子之糖-磷酸骨架中的磷酸基团,是呈离子化状态的,把这些核酸分

制冷系统性能测试试验台设计

本科毕业设计(论文) 题目制冷循环性能测试试验台 学生XXXX 专业班级04热能与动力工程2班 学号XXXXXXXXXX 院别XX学院 指导老师(职称)XXXXXX 教授 完成时间2XXX-6-6

摘要 近20年来,制冷和空调技术得到了飞速的发展和广泛应用。从人们的日常生活到国民经济的各部门,从传统产业到高新技术产业,从国防科技到航空航天,到处都离不开制冷技术及其设备。 本文简单介绍单级蒸汽压缩式制冷循环性能测试实验台的设计中的几个问题:新型绿色制冷剂的使用,热力循环的计算,蒸发器和冷凝器的设计计算,制冷循环附件的选型,各种热工测量仪器的选型及安装使用要求,以及制冷技术的发展和展望。 本实验台选用最有前途的绿色制冷剂R134a,广东美芝制冷设备有限公司的全封闭压缩机,及各种性能优良的控制设备和热工测量仪器 制冷循环性能测试实验台的作用,顾名思义是用实验的方法去测试各种实际因素对循环的影响,以便更好的分析研究实际循环的各种不完善因素和应作出的改进。用本实验台能研究高压液体过冷、是否有回热、压缩机吸气过热(有用及无用过热)等因素对循环的影响 关键词制冷循环/实验台/新型制冷剂/测试技术/环保

ABSTRACT This article simply introduced the in design several questions: New green refrigerant use,the calculation of the thermodynamic energy circulation, evaporator and condenser computation,air-conditioner appendix choice, as well as heat pump room air-conditioner development and forecast. The air conditioning is as the name suggests carries on the adjustment to the air parameter, in order to cause the environment to suit our request. With development of our country national economy and the improvement of the people's lives level,people's living conditions condition request also in gradually enhancement. Therefore the air conditioning holds the very important position in the daily life. Also causes the air conditioning technology in the unceasing enhancement, achieves the people to the environment request. The heat pump room air-conditioner both can make cold and heat, can satisfy the requests of the winter and summer, so it gets a fast development. The air-conditioner is facing the miniaturization, the energy conservation, the intellectualization, is artistic, the health direction develops. In recent years, along with the housing condition change, some users stemming from saved spatial the consideration, started to purchase "one-drivers-two"air-conditioners, the promotion pulls as soon as tows two air-conditioners the development and the improvement. KEY WORDS The heat pump , One-drivers-two air-conditioner, New green refrigerant,

分子生物学实验报告(模板)

分子生物学 实验报告 200X级生物XX专业XX班 实验X组 组长: XX 22200731724XX 组员: XX 222007317242XX XX 222007317242XX XX 222007317242XX XX 222007317242XX XXX年X月

从基因组中获得甘薯ADK基因 XX,XX,XX,XX,XX (西南大学,生命科学学院,重庆400715) 摘要:从甘薯的新品种渝苏303中提取基因组DNA。先以此DNA片段为模板使用 PCR技术在体外扩增扩增获得 adk 基因核心片段,再扩增目的基因片段通过琼 脂糖凝胶电泳并回收,在16℃与T载体连接30min以上用于转化DH5α感受态。 -----------。 关键词:甘薯;PCR技术;基因克隆;转化 To Obtained the ADK gene from the genome of sweet potato Xiong Chun-Qing, Zhang Li, Huang Jia, Jiang Yue, Li Wen (College of Life Sciences,Southwest University,Chongqing 400715) Abstract: The new varieties of sweet potato, 303 Yusu extracted genomic DNA. Adenylate kinase gene of potato extract (ADK) and antisense expression vector construct. To make use of this DNA fragment amplified by PCR, in vitro, and then the initial or the target gene fragment was amplified by low-melting-point agarose recovery in more than 16 ℃ for 30min to connect feelings into DH5α state. State will be felt into DH5α E. coli DH5α competence, plasmid DNA in a large number of receptor cells and then choose to copy the positive transformation of body, to carry out gene extraction. Bioinformatics analysis showed that the highest level of starch synthesis in the plants, adenylate kinase and the molecular evolution of the highest genetic similarity. Access to the engineering bacteria strain can be used for genetic transformation of potato, sweet potato and cassava starch and other important crops, for the realization of starch laid the foundation for metabolic engineering. Key words: sweet potato; PCR technologies; gene cloning; transformation 1 综述: 甘薯学名:Ipomoea batatas Lam. 英文名:Sweet Morningglory旋花科 (Convolvulaceae) 属一年生或多年生蔓生草本,又名山芋、红芋、番薯、红薯、

web测试技术综述

Web测试技术综述 姓名:李建华 2011-5-29

Web测试技术综述 摘要:随着全社会对信息技术(IT)与网络通信技术(ICT)的依赖程度不断深化,测试对于保障信息技术产品质量安全的重要性日益凸现。Web服务技术的迅速普及与市场化应用为测试技术带来了新挑战。为引导基于Web服务的电子服务产业规范化发展,必须在传统软件测试的基础上,建设完善的Web服务标准化测试体系。基于Web的系统测试与传统的软件测试不同,它不但需要检查和验证是否按照设计的要求运行,而且还要测试系统在不同用户的浏览器端的显示是否合适。重要的是,还要从用户的角度进行安全性和可用性测试。然而,Internet和Web媒体的不可预见性使测试基于Web的系统变得困难。因此,我们必须为测试和评估复杂的基于Web的系统研究新的方法和技术。本文介绍了Web测试技术,探讨Web服务测试发展的重点方向。 关键字:Web测试 ,兼容性,安全性,可用性

Review of Web Testing Technology Abstract: As IT and ICT are becoming increasingly important in modern society, IT products and services are rapidly growing. Sound testing process, as well as specifications and techniques, is vital to assure proper IT product quality, and getting more complex. While Web Service is coming of age, business based-on Web Service also brings news challenge and urge needs on Web Service Testing. It is necessary to construct a standardized Web Service Testing system, referencing traditional testing, for e-service industry development. Web-based system testing is different from traditional software testing. It not only needs to check and verify operation in accordance with design requirements, but also to test the appropriation of systems on different users’browser displays. The security and usability testing of the end-user is more important.However, the unpredictability of Internet and Web media makes the testing of Web-based system more difficult. Therefore, we must research new methods and technologies to test and evaluation of complex Web-based system. This paper describes the Web testing technology and the development of Web service testing key direction. Keywords: Web testing, compatibility, security, availability

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