厌氧性细菌及检验(教案)

怀化医专《微生物学检验》教案编号：

厌氧性细菌及检验

(anaerobic bacteria)

第一节概述

厌氧性细菌指一群必须在无氧条件下才能生长繁殖的细菌。

一、厌氧菌的分类

分为两类：（P285表）

一类为有芽胞厌氧菌，只有一个属，即梭菌属，共有130个种。以芽胞形式存于体外。

另一类为无芽胞厌氧菌，包括40多个属，300多个菌种和亚种；多为体内正常菌群，存在于皮肤、口腔、上呼吸道、肠道和泌尿生殖道。易引起这些部位的内源性感染，而不易诊断。

二、厌氧菌感染（占临床感染的60%）

（一）厌氧菌在正常人体的分布

厌氧菌与需氧菌一起组成了人体的正常菌群。人体许多部位厌氧菌在种类和数量上远多于需氧菌，如在结肠中99%的细菌都是厌氧菌。

临床厌氧菌感染中，由正常菌群的无芽胞厌氧菌的感染最为多见。

（二）厌氧菌感染的原因

1. 局部组织的氧化还原电势降低如血管损伤、烧伤、动脉硬化、肿瘤压迫、组织坏死等，可造成局部组织的缺血、缺氧，使Eｈ降低；此外，大面积外伤伴有需氧菌感染消耗了氧，为厌氧菌感染提供了条件。

2 . 机体免疫功能下降如接受免疫抑制剂、放疗或化疗的患者；糖尿病、慢性肝、肾疾病病人及老人、婴幼儿、早产儿等，因免疫力下降易併发厌氧菌感染。

3. 机体局部屏障破坏，使厌氧菌进入周围组织和血液引起感染。

（三）厌氧菌感染的临床及细菌学指征

1.局部有气体产生为重要指征之一

2.发生在粘膜附近的感染

3.深部外伤

4.有特殊的分泌物如有恶臭，暗红血色或在紫外光下发出红色荧光。如分泌物或脓汁中有硫磺颗粒即为放线菌感染。

5.某些抗生素治疗无效的感染。

6.细菌形态培养有特征性变化如革兰染色着色不均、形态奇特、呈明显多形性；或镜检查见细菌而需氧培养为阴性者。

第二节厌氧菌的微生物学检验

一、标本的采集与运送

（一）标本采集

标本种类：血液、关节液、心包液、腹腔液、膀胱穿刺液等体液；深部脓肿渗出液、肺部渗出液、其他组织穿刺液。厌氧菌培养最好的标本是组织标本，厌氧菌在其中更易生长。

采集注意事项：避免正常菌群污染，尽量避免接触空气。有些标本如鼻咽拭子、痰液、流出的脓液、阴道分泌物、粪便等因含大量的正常菌群，故不宜作厌氧菌培养。

采集方法：采取深部的组织标本：需经碘酒消毒皮肤后，用注射器插入病变部位深部，抽取数毫升后，弃去一滴于酒精棉球上。（不同标本采集见P291表）（二）标本的运送与处理

注意尽快送检，避免干燥，避免接触空气

1. 针筒运送法适宜液体标本。标本抽取后排尽空气，并将针头插入无菌橡皮塞中即可送检。

2. 无氧小瓶运送法常用于少量脓液标本的运送。用无菌青霉素小瓶，瓶内装入0.5ｍｌ的心脑浸液(含有0.0003%的刃天青---氧化还原指示剂),加橡皮塞后,铝盖密封，真空泵抽出瓶中空气，充入N2，连续充抽3次，最后充以CO2，高压灭菌备用。

如有氧渗入小瓶，培养基则显粉红色，应弃去。运送时挑选无色小瓶，将标本用无菌注射器注入瓶中即可。

3. 标本充盈法送检适宜于大量液体标本运送。将液体标本装满标本瓶，加盖密封，可驱除瓶中空气。

4. 组织块运送法将组织块放在密封的厌氧罐中运送。罐内放入经酸化硫酸铜浸泡过的钢丝绒，其表面即有金属铜，具强还原性，能迅速吸氧，造成厌氧罐中无氧状态。

5. 厌氧袋运送法

6. 棉拭运送法（略）

应在20~30min内处理完毕，最迟不超过2h，防止标本中兼性厌氧菌过度生长，抑制厌氧菌的生长。如不能及时接种，应将标本保存于室温（因冷藏对厌氧菌有害）。

二、检验程序

三、检验方法

（一）肉眼观察

应观察标本的性状，如是否为脓性、带血，有无黑色坏死组织或黑色分泌物，有无硫磺样颗粒或恶臭气味等。这些有助于厌氧菌的鉴定和培养基的选择。（二）直接镜检

在接种前除血液外，各种临床标本均需直接涂片染色、镜检，以了解标本中细菌的数量、形态及染色性，便于选择合适的培养基和培养方法，还可验证培养结果的成功与失败。

（三）分离培养

1、初代培养

（1）培养基的选择：

1）非选择培养基以牛心脑浸液及布氏肉汤为基础，补充0.5%酵母浸出液，5μg/ml氯化血红素、10 μg/ml维生素K1及5%－10%的脱纤维血的强化血平板。2）选择培养基常用的有:

七叶苷胆汁平板（BBE，用于脆脆弱类杆菌）

卡那万古冻溶血平板（KVLB，可抑制大多数兼性厌氧菌，使产黑色素普雷沃菌早期产生黑色素）FS培养基（梭杆菌选择培养基）

VS培养基（韦荣球菌选择培养基）

CCFA培养基（艰难梭菌）

上述培养基使用注意：①尽量使用新鲜培养基，2~ 4ｈ内用完；②使用前放入无氧环境，预还原处理24~ 48ｈ；③也可采用预还原灭菌法制备的培养基；④液体培养基应煮沸10min，驱除溶解氧，并迅速冷却，立即接种。

（2）标本接种

初代培养应同时接种固体和液体两种培养基，且每份标本应同时接种3个平板，分别置有氧、无氧和含5~10%CO2环境培养。

如只要求厌氧培养，只需种一个厌氧血平板，并将其分为三个区，在第一、二区交界处贴放一枚灭滴灵，如纸片周围出现抑菌圈，表明有厌氧菌存在。（3）培养方法

原理是通过物理、化学或生物学等方法，创造一种无氧的环境。

1）厌氧罐培养法：即利用物理或化学的方法在一个密闭的罐子里造成无氧的环境。有抽气换气法和冷触媒法。

抽气换气法：将种好的培养基放于罐内，放入经烘烤的催化剂（钯粒）盘，盖子拧紧。通过罐盖上的三通管，用真空泵抽尽罐内空气，再用N2反复充气与抽气3次，最后充入含80%N2、10%H2、10% CO2的混合气体。

钯粒用过既失活，再次使用前需将其加热至灼红。如此反复使用：

2H2+O2 → 2H2O

冷触媒法：利用化学方法产生H2和CO2，产生的H2在触媒的作用下，与罐内的氧结合生成水，将氧消耗掉，造成无氧环境。使用时同抽气换气法将钯粒和接种好的平板放于厌氧罐内，然后将配套的气体发生袋剪去一角，加入10ml 水，立即放于罐内，密封厌氧罐即可。

2) 厌氧气袋法：原理与冷触媒法相同，只是用无毒的塑料薄膜制成的特殊气袋取代厌氧罐。

优点：简便易行，携带方便，尤适宜于床边接种，和基层医院使用。

3）厌氧手套箱：为国际公认的厌氧菌培养的最佳设备。为一个密闭的大型金属箱，由手套操作箱和传递箱两个部分组成，操作箱内还附有小型恒温培养箱，通过自动化装置自动抽气、换气，保持箱内的厌氧状态。

优点：因接种、培养和鉴定等都是在无氧状态下进行，提高了检验的阳性率；

缺点：设备昂贵，耗气。

4)疱肉培养法：肉渣加适量液体培养基，表面盖以凡士林。肉渣含不饱和脂肪酸，可吸收氧，并含谷光甘肽，可降低培养基的氧化还原电势。

适用于所有厌氧菌的培养和菌种保存

(4)结果观察

厌氧菌的初代培养生长较慢，故应在48ｈ后才能初步观察，如疑为放线菌则应延长至72－96ｈ。

观察时应注意：①厌氧菌在对数生长期对氧非常敏感，故在培养的48ｈ不应使细菌暴露于空气中；②标本镜检阳性，但培养48ｈ却无菌生长，应继续培养5－7ｄ。

2. 次代培养和厌氧菌的确定

初代厌氧培养有细菌生长时，需做耐氧试验，确定是否为厌氧菌。

方法是：从每个平板上挑取4－5个不同性状的菌落，每个菌落分别接种3个平板（每个平板分4－6个区，可同时做4－6个菌落的次代培养）。分别放有氧、无氧和含5%－10%CO2环境中培养48ｈ，如只在厌氧环境中生长的细菌，即为厌氧菌。

四、鉴定试验

初步鉴定：菌体形态、染色反应、菌落性状、对某些抗生素的敏感性；

最后鉴定：依据生化反应和终末代谢产物。

1. 形态与染色：对其鉴定较为重要。

2. 菌落性状：包括其形态、大小、色素、荧光及溶血等。

（1）色素：

产黑色素普雷沃菌、不解糖紫单胞菌2~10天——黑色素

龋齿放线菌3~4天——粉红色色素

奈氏放线菌—培养时间延长——黄褐色

（2）溶血：

产气荚膜芽胞梭菌血平板）—形成双溶血环

（3）荧光：

产黑色素普雷沃菌、不解糖紫单胞菌某些株——在紫外线照射下—红色荧光梭杆菌—黄绿色荧光；

艰难梭菌—绿色荧光

3. 抗生素敏感鉴定试验

常用抗生素：卡那霉素、万古霉素、多黏菌素；一般抑菌环直径＜10mm为耐药。

分梭杆菌属对卡那霉素（敏感）—类杆菌（多数不敏感）

革兰阳性厌氧菌对万古霉素（敏感），对黏菌素耐药。

4. 聚茴香脑磺酸钠（SPS）敏感试验

用于鉴定厌氧消化链球菌（特别敏感）。

5. 生化试验糖发酵、吲哚试验、硝酸盐还原试验、触媒试验等。可用自动微生物鉴定系统如：VITEK-ANT\ Microscan-ANI等；

胞外酶快速鉴定试验：利用厌氧菌产生的酶，与少量的生化基质反应，不需培养，只需浓菌液即可，4小时可观察结果。

6. 气液相色谱技术

第三节厌氧芽胞梭菌属

（Clostridium）

简称梭菌属，又称厌氧芽胞杆菌，革兰氏染色阳性，都能产生芽胞，芽胞直径大多比菌体宽，使菌体膨大成梭形，故得名。芽胞的形状和位置在鉴别上有意义。除产气荚膜梭菌外，均无荚膜。大多数为严格厌氧；能产生多种外毒素和侵袭性酶，致病性强。

本属细菌主要包括破伤风杆菌、产气荚膜杆菌、肉毒杆菌等。

一、破伤风梭菌

（Clostridium tetani）

是引起破伤风的病原菌，大量存在于人和动物肠道中，由粪便污染土壤，经伤口感染引起疾病。

（一）生物学性状

1、形态：菌体细长，有周身鞭毛，芽胞呈圆形，位于菌体顶端，比菌体宽大，

似鼓槌状，是本菌形态上的特征。繁殖体为革兰氏阳性，带上芽胞的

菌体易转为革兰氏阴性。

2、培养特性：

为专性厌氧菌，营养要求不高。

血平板：呈移行生长，菌落：d2~4mm，扁平，半透明，灰白色，边缘不齐，周边呈羽毛状，有β溶血。

在普通琼脂平板上培养24～48小时后，可形成直径1mm 以上不规则的菌落，中心紧密，周边疏松，似羽毛状菌落，易在培养基表面迁徒扩散。

在疱肉培养基中培养，肉汤浑浊，肉渣部分被消化，微变黑，产生气体，生成甲基硫醇（有腐败臭味）及硫化氢。

3、生化反应：

一般不发酵糖类，能液化明胶，产生硫化氢，形成吲哚，不能还原硝酸盐为亚硝酸盐。对蛋白质有微弱消化作用。

4、抵抗力：

本菌繁殖体抵抗力与其他细菌相似，但芽胞抵抗力强大。在土壤中可存活数十年，能耐煮沸40～50分钟。对青霉素敏感，磺胺类有抑菌作用。

（二）致病性

1、致病条件：

由伤口侵入人体，一般伤口中不能生长，伤口的厌氧环境是破伤风梭菌感染的重要条件。

①窄而深的伤口（如剌伤），②有泥土或异物污染，或大面积创伤、烧伤、坏死组织多，局部组织缺血或③同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染，均易造成厌氧环境，局部氧化还原电势降低。有利于破伤风杆菌生长。

2、致病因素：

产生强烈的外毒素，即破伤风痉挛毒素（Tetanospasmin）或称神经毒素(Neurotoxin)。为蛋白质，不耐热，可被肠道蛋白酶破坏，故口服毒素不起作用。毒性非常强烈，仅次于肉毒毒素。

毒素能与神经组织中的神经节苷脂结合，封闭了脊髓抑制性突触末端，阻止释放抑制冲动的传递介质甘氨酸和γ氨基丁酸，从而破坏上下神经原之间的正常抑制性冲动的传递，导致超反射反应（兴奋性异常增高）和横纹肌痉挛。

3、症状：

破伤风潜伏期不定，平均7～14天。潜伏期越短，病死率越高。发病早期有发热、头痛、不适、肌肉酸痛等前驱症状，局部肌肉抽搐，出现张口困难，咀嚼肌痉挛，患者牙关紧闭，呈苦笑面容。继而颈部、躯干和四肢肌肉发生强直收缩，身体呈角弓反张，面部紫钳、呼吸困难，最后可因窒息而死。病死率约50%，新生儿和老年人尤高。新生儿破伤风（俗称脐风）尤为常见。

（三）微生物学检查

破伤风梭菌分布广泛，如果病人无临床症状，即使伤口找到破伤风梭菌也不能作为诊断的依据。故破伤风的诊断主要根据有无创伤病史和临床症状，一般不需要作微生物检验，仅在必要时才进行检验。

（四）特异防治

破伤风一旦发病，治疗困难，应以预防为主。

1．人工自动免疫对战士、建筑工人等接种吸附精制破伤风类毒素全程基础免疫，以刺激机体自动产生抗毒素。儿童则注射白喉、破伤风类毒素混合制剂。当受伤后有可能感染时，应加强免疫一次吸附精制破伤风类毒素。

2．人工被动免疫

（1）紧急预防如遇严重污染创伤或受伤前未经全程基础免疫者，除用类毒素加强免疫外，可再注射破伤风抗毒素（Tetanus antitoxin,TAT）。即在一臂注射抗毒素，另一臂注射类毒素，6～12周后再注射一针类毒素。实践证明，同时注射抗毒素和类毒素，预防效果好，（2）特异治疗一旦发现病人，应立即注射破伤风抗毒素，要早期足量，每次可肌肉或静脉注射6～10万单位，注射前必须作皮肤试验，防止马抗毒素血清过敏性休克的发生。

大剂量的青毒素（或四环毒）能有效地抑制破伤风梭菌在局部病灶中繁殖，并且对混合感染的其他细菌也有作用，故亦可用于治疗。

二、产气荚膜梭菌

（Cl.perfringens）

是气性坏疽的主要病原菌。与破伤风梭菌不同，除具有外毒素外，还有多种侵袭性酶及荚膜构成强大的侵袭力，因此入侵创口后造成严重局部感染及全身中毒因局部组织出现坏死、水肿、产气，临床称为气性坏疽。气性坏疽是战时多见的一种严重的创伤感染，以局部水肿、产气、肌肉坏死及全身中毒为特征。病原菌约有6～9种之多，常为混合感染。以产气荚膜梭菌为最多见（约占60～90%），其次是水肿梭菌和败毒梭菌，其他还有产芽胞梭菌、溶组织梭菌和双酶酸菌等。（一）生物学性状

1、形态染色：

G+大杆菌，芽胞卵圆形，位于菌体次极端，不大于菌体宽度。有荚膜。无鞭毛

2、培养特性：

专性厌氧。

血平板：菌落较大、灰白色、不透明，边缘呈锯齿状，多数菌株有双层溶血环。内环是θ毒素的作用，而外环不完全溶血是a毒素所致。

疱肉培养基：不消化肉渣，有时呈肉红色。

牛乳培养基：分解乳糖可使酪蛋白凝固，同时产生大量气体，冲破凝固的酪蛋白，可将覆盖在培养基上层的凡士林冲至试管顶部，甚至冲开管口棉塞，气势汹猛，称为“汹涌发酵”。

３、生化反应

能分解多种糖类，如葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和乳糖，产酸产气，不发酵甘露糖或水杨苷，能液化明胶，产生硫化氢，不能消化已凝固的蛋白质和血清。（二）致病性

1、致病物质

致病条件与破风梭菌相似。既能产生强烈的外毒素，又有多种侵袭性酶，并有荚膜，构成其强大的侵袭力。毒素种类多，外毒素有α、β、γ、δ、ε、η、θ、ι、κ、λ、μ、ν等12种，具多种毒性酶，如卵磷脂酶、纤维蛋白酶、透明质酸酶、胶原酶和DNA酶等，构成强大的侵袭力。

在各种毒素和酶中，以α毒素最为重要，α毒素是一种卵磷脂酶，能分解卵磷脂，人和动物的细胞膜是磷脂和蛋白质的复合物，可被卵磷脂酶所破坏，故α毒素能损伤多种细胞的细胞膜，引起溶血、组织坏死，血管内皮细胞损伤，使血管通透性增高，造成水肿。此外，θ毒素有溶血和破坏白血球的作用，胶原酶能分解肌肉和皮下的胶原组织，使组织崩解，透明质酸酶能分解细胞间质透明质酸，

有利于病变扩散。

2、临床表现

（1）气性坏疽以局部剧痛、水肿、胀气、组织迅速坏死、分泌物恶臭，以伴有全身毒血症为特征的急性感染。潜伏期较短，一般只有8～48小时。由于本菌分解组织中的肌糖，产生大量气体充塞组织间隙，造成气肿，挤压软组织，阻碍血液循环，进一步促使肌肉坏死。同时毒素还可引起血管壁通透性增高，浆液渗出，形成扩散性水肿，以手触压肿胀组织可发生“捻发音”。疼痛剧烈，蔓延迅速，最后形成大块组织坏死。细菌一般不侵入血流，局部细菌繁殖产生的各种毒素以及组织坏死产生的毒性物质被吸收入血，引起毒血症而死。

（2）食物中毒

（3）急性坏死性肠炎

（三）微生物学检验

发病急剧，后果严重，及早诊断甚为重要。由于本菌分布广泛，所以单凭创口发现此菌还不足以诊断。尚需结合临床表现，才能确诊。

1．直接涂片镜检从伤口深部取材涂片，革兰氏染色镜检，可见革兰氏阳性大杆菌，并有荚膜，常伴有其他杂菌，白细胞甚少，形态不规则，这是气性坏疽标本涂片的特点。

2．分离培养与鉴定取坏死组织制成悬液，接种于血平板上或疱肉培养基中，厌氧培养，观察生长情况。取细菌培养物涂片镜检，并进一步用生化反应鉴定。3．动物实验

取培养液0.5～1ml给小鼠或家兔静脉内注射，10分钟后杀死动物，置37℃5～8小时。如动物躯体膨胀，即行解剖，可见脏器和肌肉内有大量气泡，尤以肝脏最为明显，称“泡沫肝”。取内脏或心血涂片镜检或分离培养，可发现有革兰氏阳性大杆菌，并有明显荚膜。

（四）防治原则

预防的办法主要是早期扩创，清洁伤口，局部用双氧水冲洗，以破坏厌氧环境。

除早期应用多价抗毒素外，应配合手术、抗生素及支持疗法等。

三、肉毒梭菌

（一）生物学性状

1、形态染色：

具有周鞭毛，无荚膜。芽胞椭圆形，位于菌体次极端，大于菌体宽度呈网球

拍状。

2、培养特性：严格厌氧。

普通平板上：直径3～5mm不规则的菌落。

血平板上有β溶血。

疱肉培养基中能消化肉渣，使之变黑，有腐败恶臭。

分解葡萄糖、麦芽糖及果糖，产酸产气。液化明胶，产生H2S，不形成吲哚。

3、抵抗力：

肉毒梭菌芽胞抵抗力很强，经高压蒸气121℃30分钟杀死

肉毒毒素对酸的抵抗力比破伤风毒素强，故可以被胃肠吸收。

4、致病性：

引起食物中毒。

肉毒毒素是一种嗜神经毒素，经肠道吸收后进入血液，作用于脑神经核、神经接头处以及植物神经末梢，阻止乙酰胆碱的释放。妨碍神经冲动的传导而引起肌肉松驰性麻痹表现为全身无力、视力模糊不清、吞咽及呼吸困难，严重者可因呼吸衰竭或心力衰竭而死亡。因毒素不直接刺激肠粘膜，故无明显的消化道症状。

主要因豆类、肉类、腊肠及罐头食品等被肉毒梭菌或芽胞污染，在厌氧条件下繁殖产生外毒素，被人食入所引起。

课后小结

有芽胞厌氧菌只有一个属，即梭菌属，以芽胞形式存于体外，常引起外源性感染。无芽胞厌氧菌包括40多个属，多为体内正常菌群，引起内源性感染。了解厌氧菌感染的细菌学指针对于其微生物学检验具有一定的指导意义。厌氧菌感染占临床细菌感染的50-60%，在进行普通的细菌培养时往往容易漏检，因此应特别注意其标本的采集与运送、检验方法中均应尽量避免接触空气，以提高检出率。

临床细菌学检验的质量控制流程

临床细菌学检验的质量控制流程 1、质量的概念和质量保证 影响检验结果质量的因素很多,实验过程中,仪器、试剂和操作等均会引起试验结果的误差,衡量检验结果的质量常用准确度和精确度,或特异性和灵敏度。具体采用哪一种指标应根据实验的性质决定,目前临床细菌学检验的工作内容大致有3类,衡量起质量的技术指标不完全相同。 第一类是检出细菌的实验,包括标本直接涂片检查和细菌分离培养。现代的细菌感染,混合菌较常见,一份标本中,会有2种以上细菌存在。无论标本直接涂片还是分离培养,检验结果必须如实反映感染病灶中细菌的真实情况。这类实验的质量,应该用细菌检出率或细菌分离率来衡量。 第二类是鉴定细菌的实验。通过一系列生理生化及形态学、血清学的手段来鉴定病原菌。对分离到的病原菌都做出准确的鉴定,是反映细菌事工作质量的一个重要方面。 第三类是药敏实验。有稀释法和纸片法,前者是半定量的实验,可以用准确度和精密度来衡量,后者以敏感或耐药的形

式报告,属于定性的实验,但实验过程中测量抑菌环是定量的指标。也应以准确度和精确度衡量。 所以实验室人员必须清楚认识到以上这一点,在实验室的设计和管理方面就应该主动设置误差检测系统,实验中一旦出现误差及时发出警报,查明原因及时纠正。 2、室内质量控制 2.1在职人员 2.1.1须受过细菌学检验的专门基础教育以及相关的生物交全防护知识,并以细菌检验为专业,及时终结并积累工作经验。 2.1.2作人员必须具有严谨的工作态度,技术操作须完全遵守操作规程,并直接参与质量控制工作。 2.1.3工作人员应不断加强自身的业务学习,及时了解本领域的新进展,将所掌握的新知识应用到实际工作中。 2.1.4实验室管理人员应注意利用一切机会培养技术人员,积极参加国际、国内学术会议、专业培训班,获取新信息。因为细菌学检验,投资人员培训远比投资与仪器设备更重要。 2.2操作手册及参考书

细菌学检查

细菌学检查 非发酵菌 鼻疽假单胞菌 鼻疽假单胞菌（P.Mallei）是鼻疽病的病原菌。可从患者血液、脓液、痰中分离到。 【临床意义】 对马、骡、驴的传染性很强，犬、猫、羊等都可被感染。可通过擦伤皮肤、直接接触 和吸入本菌而感染。人类感染较少见，但经常与病畜接触的人也可患鼻疽病。实验室感染 也可发生。 产碱假单胞菌 【临床意义】 为条件致病菌，可引起脓胸、眼部感染、脓肿等 恶臭假单胞菌 恶臭假单胞菌(P.Putida)为鱼类的一种病原菌，常可从腐败的鱼类中检出，偶尔可从 尿路感染患者的尿中及血库存血中分离出来。 非发酵菌 非发酵菌（Nonfermenters）大多是条件致病菌。包括十几个菌属的数十个种别，如 假单胞菌属、不动杆菌属、黄杆菌属、产碱杆菌属、莫拉氏菌属等。 由于非发酵菌有很多菌属，每个菌属又有多个种，因此对其必须先进行初步分群，即 先进行科、属的鉴别，然后再进行种间鉴别。 腐败假单胞菌 腐败假单胞菌（P.Putrefaciens）为腐物寄生菌，分布非常广泛，河水、污水、土壤、牛奶、鸡蛋等均有存在。可引起奶油、鱼、肉变质并产生H2S。 【临床意义】 本菌为条件致病菌。可引起人类中耳炎、创伤后溃疡、败血症、呼吸道感染，以及糖 尿病或体弱患者的皮肤化脓性溃疡。 假单胞菌属

假单胞菌属（Rseudomonas）分布很广，水、污水、土壤和空气中均存在。本属有几 十个菌种，临床较常见的有十种左右。代谢菌种为铜绿色假单胞菌。人类感染的非发酵菌，假单胞菌占70%～80%。主要是铜绿色假单胞菌（占55%～65%）。 类鼻疽假单胞菌 类鼻疽假单胞菌（P.Pseudomallei）可引起类疽病。 【临床意义】 为条件致病菌。人类接触污染的污水、土壤或通过直接接触（划破皮肤或擦伤）而进 入人体，也可从呼吸道、消化道进入人体而感染。但罕见人与人之间相互传染。 本菌可潜伏体内几年不发病，在多发地区这种隐性感染是很高的。败血性类鼻疽病如 不及时治疗进展迅速，且死亡率很高。 类产碱假单胞菌 类产碱假单胞菌（P.Pseudoalcaligenes）与产碱假单胞菌很相似，属于假单胞菌中 的产碱群。 【临床意义】 可引起肺炎、术后膝关节感染、脑膜炎和败血症。 嗜麦芽假单胞菌 嗜麦芽假单胞菌（P.Maltophilia）在自然界分布很广，自来水、河水、污水、牛奶 和冻鱼中均可存在，在正常人的咽喉、痰和粪便中可检出。 【临床意义】 本菌为条件致病菌，可引起大叶性肺炎、支气管肺炎、吸入性肺炎、心内膜炎、结膜炎、脑膜炎、伤口感染和败血症等。 斯氏假单胞菌 斯氏假单胞菌（P.Stutzeri）在水中及土壤中到处可见，在粪便、肥料、人类的呼吸道、泌尿道均可发现。 【临床意义】 本菌为条件致病菌。可引起呼吸道感染、中耳炎、关节炎、尿路感染及败血症。 铜绿假单胞菌

细菌学检验试题

细菌学检验一、名词解释 Imvic实验 Sop 基因突变 Sos显色实验 探针 芽孢 二、选择题 【A型题】 1．证明细菌具有鞭毛结构的常用方法是：E A．革兰染色法 B．抗酸染色法 C．普通琼脂培养法 D．液体培养法 E．半固体培养法 2．革兰染色法在临床上常用于： B A．鉴别细菌的血清型别 B．协助临床选择用药 C．诊断疾病 D．解释发病机制 E．判定细菌的免疫性

3．测量细菌的常用单位是：B A．mm B．μm C．nm D．pm E． 4．不属于细菌的基本结构的是：D A．细胞壁 B．细胞膜 C．细胞浆 D．细胞器 E．核质 5．细菌细胞壁的最主要成分是： B A．脂类 B．蛋白质 C．糖类 D．脂蛋白 E．***聚糖 6．不属于细胞基本结构的是： A A．鞭毛 B．中介体 C．细胞膜 D．核糖体 E．核质

7．青霉素抗菌作用的机理是： A A．干扰菌细胞壁的合成 B．破坏菌细胞壁上的磷壁酸 C．干扰菌细胞蛋白质的合成 D．破坏菌细胞膜的通透性 E．破坏菌细胞壁的多糖骨架 8．溶菌酶的杀菌机理是：E A．干扰菌细胞壁交联桥的合成 B．干扰二氨基庚二酸的活性 C．破坏聚糖骨架上四***侧链的连接D．干扰菌细胞核质的活性 E．破坏菌壁多糖骨架β-1、4键的连接9．关于L型细菌叙述错误的是：C A．由于细胞壁缺陷常呈多形态 B．染色体不易着色 C．无致病力 D．常规细菌学检查多呈阴性 E．除去诱导因素可回复成原来的细菌10．质粒是细胞的：A A．染色体以外DNA B．核质RNA C．储存高能的胞浆颗粒 D．胞浆中rRNA E．中介体

11．关于菌毛叙述错误的是：A A．是细菌的运动器官 B．分为普通菌毛和性菌毛 C．成分是蛋白质 D．普通菌毛与细菌的致病性有关 E．普通光学显微镜下不能看见 12．细菌的革兰染色性不同主要是因为：D A．形态不同 B．营养需要不同 C．生理功能不同 D．细菌细胞壁结构不同 E．致病性不同 13．细菌学形态学检查中最常用染色方法是： E A．抗酸性染色法 B．特殊染色法 C．暗视野墨汁染色法 D．美兰单染色法 E．革兰染色法 14．细菌的繁殖形式是：D A．接合 B．裂殖 C．胞子 D．二分裂 E．复制

临床检验主管技师 微生物检验 第十七章 厌氧性细菌及检验

第十七章厌氧性细菌及检验 本章内容 一、概述 厌氧菌的分类 厌氧菌的临床意义 厌氧菌感染 厌氧菌标本的采集与送检 厌氧菌的分离与鉴定 厌氧环境的指示 二、常见厌氧菌 破伤风杆菌 产气荚膜梭菌 肉毒梭菌 艰难梭菌 厌氧球菌 无芽胞厌氧菌 厌氧菌概述 一大群专性厌氧，必须在无氧环境中才能生长的细菌。 G+有芽胞的梭菌：有芽胞，抵抗力强，广泛存在，可出芽繁殖，产生多种外毒素，引起严重疾病。 G+/G-无芽胞的球菌与杆菌：人体正常菌群，可存在于口腔、肠道、上呼吸道、泌尿生殖道等。致病性属条件致病性的内源性感染。 厌氧菌概述——分类 《伯杰系统细菌学手册》分类标准： 无芽胞厌氧菌有40多个菌属，300多个菌种和亚种；而有芽胞的厌氧菌只有梭菌属，包括130个种。 据耐氧性分类

（1）专性厌氧菌：是指在降低氧分压的条件下才能生长的细菌。又分为极度厌氧菌（氧分压＜0.5%，空气中暴露10min致死，如丁酸弧菌）和中度厌氧菌（氧分压为2%～8%，空气中暴露60～90min能生存，如大多数人类致病厌氧菌）。 （2）微需氧菌：能在含5%～10%CO2空气中的固体培养基表面生长的细菌，如弯曲菌属。 （3）耐氧菌：其耐氧程度刚好能在新鲜配制的固体培养基表面生长。一旦生长，暴露数小时仍不死亡，如第三梭菌、溶组织梭菌。 厌氧菌概述——临床意义及感染 感染类型 外源性感染：梭状芽胞杆菌属引起的感染。 内源性感染：无芽胞厌氧菌大多数是人体正常菌群，属于条件致病菌，在一定条件下可引起感染，一般不在人群中传播。 感染的危险因素： 组织缺氧缺血； 机体免疫功能下降； 某些手术及创伤易发生厌氧菌感染； 长期应用某些抗菌药物； 深部需氧菌感染。 感染的临床指征： 感染局部产生大量气体； 多发生在黏膜附近； 深部外伤后继发感染； 分泌物有恶臭或为暗红色； 常见于长期应用氨基糖苷类抗生素治疗无效的病例； 镜检有细菌，常规培养阴性。 厌氧菌概述——标本的采集与送检 重要原则：标本绝对不能被正常菌群所污染；应尽量避免接触空气。 适宜标 本 血液、骨髓、脑脊液、关节液、心包液、胸腔积液、腹腔液、胆汁、由活检或尸体解剖 获得的组织标本、深部脓肿抽取物、经环甲膜以下或肺穿刺抽取的肺渗出物、后穹窿穿 刺抽取的盆腔渗出液及无菌套管抽取的宫腔内容物、膀胱穿刺液及其它组织穿刺液等不宜标 本 鼻咽拭子、齿龈拭子、直肠拭子、喀出的痰液、自然排出的尿液和导出的尿液、流出的 脓液、接近皮肤或黏膜的分泌物、阴道分泌物、胃和小肠内容物、粪便（艰难梭菌除外） 等 厌氧菌概述——标本的采集与送检 采集 多采用针筒抽取、穿刺等，应严格无菌操作，严禁接触空气。 厌氧培养最理想的检查材料是组织标本，因厌氧菌在组织中比在渗出物中更易生长。

《细菌学检验》教学大纲

《细菌学检验》教学大纲 （供卫生检验专业使用） 一、课程性质、目的和任务 细菌学检验是卫生检验专业重要的专业课程之一，是卫生检验课程体系的重要组成部分，也是卫生检验专业学生必修的考试课程。通过学习，使学生掌握细菌学检验的基本技术和常见重要致病细菌及分子生物学技术。本课程通过课堂讲授、讨论、实验实习、自学等方式进行教学。要求学生掌握细菌的分离培养方法、血清学实验及分子生物学技术在细菌学检验中的应用；掌握常见重要致病细菌的生物学性状、检验方法和预防医学意义。为学生今后从事疾病预防控制、卫生监督、科学研究等方面的工作奠定必要的基础。 二、课程基本要求 本课程分为掌握、熟悉、了解三种层次要求；“掌握”的内容要求理解透彻，能在本学科和相关学科的学习工作中熟练、灵活运用其基本理论和基本技能；“熟悉”的内容要求能熟知其相关内容的概念及有关理论，并能适当应用；“了解”的内容要求对其中的概念和相关内容有所了解。 通过本课程的学习，使学生掌握细菌的分离培养方法、血清学实验及分子生物学技术在细菌学检验中的应用；掌握常见重要致病细菌的生物学性状、检验方法和预防医学意义。 考试内容中“掌握”的内容约70%，“熟悉、了解”的内容约25%，有5%左右的大纲外内容。 本大纲的配套使用教材是卫生部规划教材《细菌学检验》（张朝武主编，北京：人民卫生出版社，2006年）。 三、课程基本内容及学时分配 细菌学检验教学总时数为63学时，其中理论为27学时，实验为36学时。细菌学检验共分十七章，大体分为基本理论、基本技能和各论两个部分。第一部分从第一章到七章，主要内容为细菌学实验的基本要求、细菌学检验基本技术、细菌的分子生物学检测、细菌的分型及其检测技术、细菌的分类与命名、化学物质致突变性的微生物检测方法、消毒学试验技术；第二部分从八章到十七章，主要内容为革兰氏阳性球菌、革兰氏阴性球菌、肠杆菌科、弧菌属、革兰氏阳性杆菌、与医学有关的其他细菌、螺旋体属、立克次体、衣原体和支原体等。 第一章细菌学实验的基本要求（2学时） 【掌握】 1．实验室生物安全级别； 2．实验室生物安全设备； 3．实验室内的质量控制。 【熟悉】 1．实验室生物安全管理；

微生物学检验题库及答案

微生物学检验题库及答案

《微生物学与检验》题库及答案 一.名词解释 1.医院感染 2.肥达反应 3.内基小体 4. 噬菌体： 5.血浆凝固酶 6.败血症 7.灭菌 8.药物敏感试验 9.外 - 斐氏试验 10.L 型细菌 11.菌群失调： 12.微生物 13.细菌 14.最小抑菌浓度 15.菌落 16.汹涌发酵 17.无菌操作 18.流感杆菌“卫星现象” 19.培养基 20.包涵体 21.正常菌群 22. 内毒素 23. 干扰现象： 24.菌血症 25菌丝： 二.填空题 1 L 型细菌是指（）。 2 杀灭物体上所有微生物的方法称为（）。 3 细菌 H-O 变异是指（）。 4 药敏试验所用标准培养基是，所用菌液相当于（）个细菌／ ml ，细菌接种采用（）划线接种法。 5 细菌致病因素包括（）、（）和（）。 6 细菌引起的全身感染包括（）、（）、（）和（）四种类型。 7 不染色标本检查主要用于观察细菌的（）。 8 影响革兰染色结果的关键步骤是（）。 9 有动力细菌在半固体培养基中的生长现象是穿刺接种线（），无动力细菌穿刺接种线（）。 10 糖发酵试验用于观察细菌分解糖是否产（）和（）。 11 靛基质试验的原理为，细菌产生的色氨酸酶分解蛋白胨中的色氨酸而生成（），此代谢产物与加入的试剂反应，生成（）。 12 链球菌根据溶血现象分为（）、（）和（）三种类型。 13 葡萄球菌触酶试验结果为（）性，链球菌触酶试验结果为（）性。 14 呈现脐窝状菌落的球菌是（）。 15 抗 O 试验是测定病人血清中（）抗体效价的试验，用于风湿热等疾病的辅助诊断。 16 血平板上呈现草绿色溶血环的病原性球菌是（）和（）。 17 IMViC 试验包括（）、（）、（）和（）四项试验。 18 分解乳糖的细菌在肠道选择平板上呈现（）菌落，不分解乳糖则为（）菌落。 19 KIA 斜面红色表明，底层黄色、有气泡表明（）、（），有黑色沉淀表明（）试验阳性 20 霍乱弧菌生物型包括（）和（）。 21 AIDS 的传染源是（）和（），传播途径主要有（），（）和（）。 22 真菌菌落有（）、（）和（）三种。 23 病毒培养方法有（）、（）和（）。 24 病毒的基本结构由（）和（）组成，有些病毒还具有（）。 25 流感病毒根据抗原结构不同分（）、（）、（）三型，其中容易引起流感大流行的是其中的（）型。

细菌学检查

非发酵菌 鼻疽假单胞菌 鼻疽假单胞菌（P.Mallei）是鼻疽病的病原菌。可从患者血液、脓液、痰中分离到。 【临床意义】 对马、骡、驴的传染性很强，犬、猫、羊等都可被感染。可通过擦伤皮肤、直接接触和吸入本菌而感染。人类感染较少见，但经常与病畜接触的人也可患鼻疽病。实验室感染也可发生。 产碱假单胞菌 【临床意义】 为条件致病菌，可引起脓胸、眼部感染、脓肿等 恶臭假单胞菌 恶臭假单胞菌(P.Putida)为鱼类的一种病原菌，常可从腐败的鱼类中检出，偶尔可从尿路感染患者的尿中及血库存血中分离出来。 非发酵菌 非发酵菌（Nonfermenters）大多是条件致病菌。包括十几个菌属的数十个种别，如假单胞菌属、不动杆菌属、黄杆菌属、产碱杆菌属、莫拉氏菌属等。 由于非发酵菌有很多菌属，每个菌属又有多个种，因此对其必须先进行初步分群，即先进行科、属的鉴别，然后再进行种间鉴别。 腐败假单胞菌 腐败假单胞菌（P.Putrefaciens）为腐物寄生菌，分布非常广泛，河水、污水、土壤、牛奶、鸡蛋等均有存在。可引起奶油、鱼、肉变质并产生H2S。

【临床意义】 本菌为条件致病菌。可引起人类中耳炎、创伤后溃疡、败血症、呼吸道感染，以及糖尿病或体弱患者的皮肤化脓性溃疡。 假单胞菌属 假单胞菌属（Rseudomonas）分布很广，水、污水、土壤和空气中均存在。本属有几十个菌种，临床较常见的有十种左右。代谢菌种为铜绿色假单胞菌。人类感染的非发酵菌，假单胞菌占70%～80%。主要是铜绿色假单胞菌（占55%～65%）。 类鼻疽假单胞菌 类鼻疽假单胞菌（P.Pseudomallei）可引起类疽病。 【临床意义】 为条件致病菌。人类接触污染的污水、土壤或通过直接接触（划破皮肤或擦伤）而进入人体，也可从呼吸道、消化道进入人体而感染。但罕见人与人之间相互传染。 本菌可潜伏体内几年不发病，在多发地区这种隐性感染是很高的。败血性类鼻疽病如不及时治疗进展迅速，且死亡率很高。 类产碱假单胞菌 类产碱假单胞菌（P.Pseudoalcaligenes）与产碱假单胞菌很相似，属于假单胞菌中的产碱群。 【临床意义】 可引起肺炎、术后膝关节感染、脑膜炎和败血症。

临床检验技师-微生物检验(2019)练习第十七章_厌氧性细菌及检验

2019 第十七章 厌氧性细菌及检验 一、 A1 1、破伤风杆菌血平板 37℃培养 48h A 、凸起、灰白、半透明、边缘不整齐 B 、凸起、灰白、不透明、边缘不整齐 C 、扁平、金黄色、半透明、边缘不整齐 D 、扁平、灰白、半透明、边缘不整齐 E 、扁平、灰白、半透明、边缘整齐 2、破伤风杆菌形态与染色叙述正确的是 A 、细长、周鞭毛（ +）、荚膜（ - ） B 、汤匙状、周鞭毛（ +）、荚膜（ - ） C 、细长、周鞭毛（ - ）、荚膜（ - ） D 、细长、周鞭毛（ +）、荚膜（ +） E 、细长、周鞭毛（ - ）、荚膜（ +） 3、对于厌氧菌叙述正确的是 A 、人体正常菌群的组成部分，主要聚居肠道，达到 1012 个粪便 B 、人体致病菌，主要集聚肠道，达到 1012 个粪便 C 、人体体表菌群的主要部分，达到 1012 个粪便 D 、人体体表菌群的主要组成部分，达到 1042 个粪便 E 、人体正常菌群的组成部分，主要聚居肠道，达到 1042 个粪便 4、厌氧菌中耐氧菌 A 、在新鲜固体培养基表面不生长、暴露数小时仍不死亡 B 、在新鲜固体培养基表面生长、暴露 1h 后死亡 C 、在新鲜固体培养基表面生长、暴露 2h 后不死亡 D 、在新鲜固体培养基表面生长、暴露数小时仍不死亡 E 、在新鲜固体培养基表面生长、暴露 3h 后不死亡 5、专性厌氧菌中极度厌氧菌 A 、氧分压＜ 5%，空气暴露 10min 死亡 B 、氧分压＜ 0.5%，空气暴露 10min 死亡 C 、氧分压＜ 3%，空气暴露 10min 死亡 D 、氧分压＜ 0.5%，空气暴露 1min 死亡 E 、氧分压＜ 5%，空气暴露 30min 死亡 6、可做厌氧菌培养的标本为 A 、气管抽取物 B 、前列腺分泌物 C 、阴道分泌物 D 、胸腔积液 E 、中段尿

检验师生化检验(初级)知识点集锦

1、糖酵解：指从葡萄糖至乳糖的无氧分解过程，可生成2分子ATP。是体内糖代谢最主要途径。最终产物：乳酸。依赖糖酵解获得能量：红细胞。 2、糖氧化——乙酰CoA。有氧氧化是糖氧化供能的主要方式。1分子葡萄糖彻底氧化为CO2和H2O，可生成36或38个分子的ATP。 3、糖异生：非糖物质转为葡萄糖。是体内单糖生物合成的唯一途径。肝脏是糖异生的主要器官。防止乳酸中毒。 4、血糖受神经，激素，器官调节。 5、升高血糖激素：胰高血糖素（A细胞分泌），糖皮质激素和生长激素（糖异生）,肾上腺素（促进糖原分解）。 降低血糖激素：胰岛素（B细胞分泌）（唯一） 6、糖尿病分型： Ⅰ型：内生胰岛素或C肽缺，易出酮症酸中毒，高钾血症，多发于青年人。 Ⅱ型：多肥胖，具有较大遗传性，病因有胰岛素生物活性低，胰岛素抵抗，胰岛素分泌功能异常。 特殊型及妊娠期糖尿病。 7、糖尿病的诊断标准：有糖尿病症状加随意血糖≥11.1 mmol/L；空腹血糖（FVPG）≥7.0 mmol/L；（OGTT）2h血糖≥11.1 mmol/L。初诊需复查后确证。 8、慢性糖尿病人可有：白内障（晶体混浊变形），并发血管病变以心脑肾最重。 9、糖尿病急性代谢并发症有：酮症酸中毒（DKA，高血糖，尿糖强阳性，尿酮体阳性，高酮血症，代谢性酸中毒，多＜40岁，年轻人），高渗性糖尿病昏迷（NHHDC，血糖极高，＞33.6mmol/L，肾功能损害，脑血组织供血不足，多＞40岁，老年人），乳酸酸中毒（LA）。

10、血糖测定：葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联法（GOD-POD法）。己糖激酶法（HK）：参考方法 （＞7.0mmol/L称为高血糖症。＜2.8mmol/L称为低血糖症。） 11、空腹低血糖反复出现，最常见的原因是胰岛β细胞瘤（胰岛素瘤）。胰岛B细胞瘤临床特点：空腹或餐后4—5h发作，脑缺糖比交感神经兴奋明显，有嗜睡或昏迷，30%自身进食可缓解故多肥胖。 12、血浆渗透压=2（Na+K）+血糖浓度。 13、静脉血糖〈毛细血管血糖〈动脉血糖。 14、血糖检测应立即分离出血浆（血清），尽量早检测，不能立即检查应加含氟化钠的抗凝剂。 15、肾糖阈：8.9—10.0mmol/L。 16、糖耐量试验：禁食10—16h，5分钟内饮完250毫升含有75g无水葡萄糖的糖水，每30分钟取血一次，监测到2h，共测量血糖5次（包括空腹一次）。 17、糖化血红蛋白：可分为HbAIa，HbAIb，HbAIc（能与葡萄糖结合，占绝大部分），测定时主要测HbAI组份或HbAIc（4%--6%），反映前6~8周血糖水平，主要用于评定血糖控制程度和判断预后。 18、糖化血清蛋白：类似果糖胺，反映前2—3周血糖水平。 19、C肽的测定可以更好地反映B细胞生成和分泌胰岛素的能力。 20、乳酸测定：NADH被氧化为NAD+，可在340nm处连续监测吸光度下降速度。（NADH和NADPH在340nm有特征性光吸收） 21、血脂蛋白电泳图（自阴极起）：乳糜微粒，B-脂蛋白，前B脂蛋白，A-脂蛋白。

生物化学检验考试重点知识总结教学提纲

生物化学检验考试重点知识总结

临床生物化学与检验 第一章 临床生物化学的概念：临床生物化学与是在人体正常的生物化学代谢基础上，研究疾病状态下生物化学病理性变化的基础理论和相关代谢物的质与量的改变，从而为疾病的临床实验诊断，治疗监测、药物疗效和预后判断、疾病预防等方面提供信息和决策依据的一门学科。（选择题） 第二章 1.血浆蛋白质电泳区带顺序：前清蛋白、清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β1-球蛋白、β2-球蛋白、γ-球蛋白 2.急性时相反应：当人体因感染、自身免疫性等组织损伤（如创伤、手术、心肌梗死、肿瘤等）侵害，诱导炎症，使单核细胞和巨噬细胞等细胞释放紧急反应性因子，再经血液循环，刺激肝脏细胞产生Hp、Cp、CRP等，使其血浆中浓度显著升高，而血浆前清蛋白、清蛋白、转铁蛋白浓度则出现相应下降，此炎症反应过程，称之为急性时相反应(APR),该过程出现的蛋白质统称为急性时相反应蛋白（APP）。各APP升高的速度和幅度有所不同，C-反应蛋白首先升高，在12小时内α1-酸性糖蛋白也升高，尔后α1-抗胰蛋白酶、触珠蛋白、C4和纤维蛋白原升高，最后是C3

和铜蓝蛋白升高，通常在2至5天内这些APP达到最高值。 3.M蛋白→多发性骨髓瘤 4.清蛋白（Alb）的生理功能：①保持血浆胶体渗透压：以维持血管内外体液的平衡。②重要的营养蛋白：用于组织蛋白的补充和修复③血浆中主要的载体蛋白：许多水溶性差的物质，可以通过与Alb的结合而运输④具有缓冲酸碱的能力：蛋白质是两性电解质 5.CRP的临床意义： CRP是第一个被认识的APP。CRP是非特异性指标，主要用于结合临床检测疾病：①筛查微生物感染；②评估炎症性疾病的活动度；③检测系统性红斑狼疮、白血病和外科手术后并发的感染（血清中浓度再次升高）④新生儿败血症和脑膜炎的监测；⑤监测肾移植后的排斥反应等（简答题） 6.体液总蛋白测定的方法：凯氏定氮法是经典的蛋白质测定方法（参考方法）；双缩脲法是常规方法。 7.清蛋白可与阴离子染料溴甲酚绿（BCG）或溴甲酚紫（BCP）结合，而球蛋白基本不结合这些染料。 8.前清蛋白（PA）：在正常血清蛋白电泳（SPE）中显示在清蛋白前方故而得名，生理功能：PA为运载蛋白和组织修

第十四章 厌氧性细菌

第十四章厌氧性细菌 厌氧性细菌(Anaerobic bacteria)是一大群种类繁多、专性厌氧，必须在无氧环境中才能生长的细菌。 厌氧菌广泛分布于自然界和人及动物的体内。无芽胞厌氧菌主要存在于人体及动物体内，特别是肠道、口腔、止呼吸道和泌尿道等处，与需氧菌和兼性厌氧菌共同构成机体的正常菌群。在正常菌群中厌氧菌通常占有绝对的优势。正常情况下，菌群保护相对平衡，如长期应用广谱抗生素、激素、免疫抑制剂等，发生菌群失调，或机体抵抗力减退，则可导致内源性厌氧菌感染。 目前已知的重要厌氧菌见表。 表14-1 重要的厌氧菌 一、芽胞菌 梭状芽胞菌属（Clostridium） 二、无芽胞菌 （一）革兰氏阳性球菌 1 消化球菌属（Peptococcus） 2 消化链球菌属（Peptostreptococcus） （二）革兰氏阴性球菌 韦荣氏球菌属（Veillonella） （三）革兰氏阴性无芽胞杆菌 1 类杆菌属（Bacteroides） 2 梭形杆菌属（Fusobacterium） （四）革兰氏阳性无芽胞杆菌 1 双歧杆菌属（Bifidobacterium） 2 乳杆菌属（Lactobacillus） 3 真杆菌属（Eubacteriun） 4 丙酸杆菌属（Propionibacterium）

第一节厌氧芽胞杆菌 厌氧芽胞杆菌只有一个属，称梭状芽胞杆菌属（Clostridium），简称梭菌属，革兰氏染色阳性，都能产生芽胞，芽胞直径大多比菌体宽，使菌体膨大成梭形，故得名。芽胞的形状和位置在鉴别上有意义。 大多数须在严格厌氧条件下才能生长，少数可在微氧环境中繁殖。 一、破伤风梭菌 破伤风梭菌（Clostridium tetani）是引导起破伤风的病原菌，大量存在于人和动物肠道中，由粪便污染土壤，经伤口感染引起疾病。 （一）生物学性状 破伤风梭菌菌体细长，长4～8um ，宽0.3～ 0.5um ，周身鞭毛，芽胞呈圆形，位于菌体顶端，直径比菌体宽大，似鼓槌状，是本菌形态上的特征。繁殖体为革兰氏阳性，带上芽胞的菌体易转为革兰氏阴性。破伤风梭菌为专性厌氧菌，最适生长温度为37℃pH7.0～7.5，营养要求不高，在普通琼脂平板上培养24～48小时后，可形成直径1mm 以上不规则的菌落，中心紧密，周边疏松，似羽毛状菌落，易在培养基表面迁徒扩散。在血液琼脂平板上有明显溶血环，在疱肉培养基中培养，肉汤浑浊，肉渣部分被消化，微变黑，产生气体，生成甲基硫醇（有腐败臭味）及硫化氢。一般不发酵糖类，能液化明胶，产生硫化氢，形成吲哚，不能还原硝酸盐为亚硝酸盐。对蛋白质有微弱消化作用。本菌繁殖体抵抗力与其他细菌相似，但芽胞抵抗力强大。在土壤中可存活数十年，能耐煮沸40～50分钟。对青霉素敏感，磺胺类有抑菌作用。 （二）致病性 破伤风梭菌芽胞广泛分布于自然界中可由伤口侵入人体，发芽繁殖而致病，但破伤风梭菌是厌氧菌，在一般伤口中不能生长，伤口的厌氧环境是破伤风梭菌感染的重要条件。窄而深的伤口（如剌伤），有泥土或异物污染，或大面积创伤、烧伤、坏死组织多，局部组织缺血或同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染，均易造成厌氧环境，局部氧化还原电势降低。有利于破伤风杆菌生长。破伤风梭菌能产生强烈的外毒素，即破伤风痉挛毒素（Tetanospasmin）或称神经毒素(Neurotoxin)。破伤风毒痉挛毒素是一种神经毒素，为蛋白质，由十余种氨基酸组成不耐热，可被肠道蛋白酶破坏，故口服毒素不起作用。在菌体内的痉挛毒素是单一和一条多肽链，分子量15万。破伤风毒素的毒性非常强烈，仅次于肉毒毒素。破伤风梭菌没有侵袭力，只在污染的局部组织中生长繁殖，一般不入血流。当局部产生破伤风痉挛毒素后，引起全身横纹肌痉挛。毒素在局部产生后，通过运动终板吸收，沿神经纤维间隙至脊髓前角神经细胞，上达脑干，也可经淋巴吸收，通过血流到达中枢神经。毒素能与神经组织中的神经节工苷脂结合，封闭了脊髓抑制性突触末端，阻止释放抑制冲动的传递介质甘氨酸和γ氨基丁酸，从而破坏上下神经原之间的正常抑制性冲动的传递，导致超反射反应（兴奋性异常增高）和横纹肌痉挛（图14-1）。

细菌学检验考试复习重点 名词 简单

一、名词解释1．毒性噬菌体能在宿主细胞内复制、增值，产生许多子代噬菌体，最终裂解宿主细菌。2．温和噬菌体与宿主菌的染色体整合，随细菌DNA 的复制而复制，随细菌的分裂而传代，不产生子代噬菌体。3．前噬菌体（百度百科）整合在宿主基因组上的温和噬菌体的核酸称之为前噬菌体。整合在细菌基因组中的噬菌体基因组。4．溶原性细菌带有前噬菌体的细菌称为溶源性细菌。5．噬菌斑在固体培养基上，噬菌体对宿主菌细胞的裂解作用可使菌落溶解，导致在带菌琼脂平板上产生空斑，易于观察。6．L-型细菌是一种细菌通过变异而产生的细胞壁缺陷型。7．MIC 最低抑菌浓度稀释法所得到的某抗菌药物的抑制待测菌生长的最低浓度。8．链激酶试验9．血浆凝固酶试验金黄色葡萄球菌可产生凝固酶，使血浆中的纤维蛋白原转变成为纤维蛋白，附着于细菌表面，产生凝固。10．肥达反应用已知伤寒沙门菌的O、H 抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌的H 抗原作为诊断菌液，与受检血清作试管或微孔板凝集试验，检测受试血清中有无相应的抗体及其效价的一种半定量试验。11．内毒素内毒素是革兰阴性菌细胞壁中的脂多糖（LPS）组分，只有当细菌死亡破裂或用人工方法裂解菌体后才释放。12 . 鲎试验鲎是一种海洋节肢动物，其血液中含有一种独特的有核变形红细胞。这种变形细胞的裂解物可与微量的细菌内毒素发生凝胶反应。因此，可用此反应定量和半定量检测细菌内毒素。13 . RTD 能产生次于融合性裂解的最高稀释度，既是该噬菌体的RTD。14 . 串珠试验将带测菌接种于含0.05~0.1IU/ml 青霉素的普通营养琼脂培养基37℃、6h 后，炭疽杆菌可发生形态变化，在高倍显微镜下检查，同时用不含青霉素的琼脂片培养物对照，阳性菌体膨隆相连似串珠，而类炭疽杆菌则无此现象。15 . 卡介苗BCG 将牛分枝杆菌经过13 年230 次传代培养而获得的减毒活疫菌株。16 . 外斐反应变形杆菌属的某些菌株（X19,X2.Xk）的菌体（O）抗原与斑疹伤寒立克次体（和恙虫病立克次体）有共同抗原，故可用这些变形杆菌抗原（OX19，OX2，Oxk）代替立克次体作为抗原与相应患者血清进行交叉凝集反应，此称外斐试验，辅助诊断立克次体病。17 . S9 哺乳动物微粒酶系统，是体外致突变试验的代谢活化系统。18 . SOS 显色试验是一种利用微生物“SOS”修复能力检测致突变物、致癌物的方法。19 . Ascoli 热沉淀反应在病兽腐败脏器或包皮虽经长时间煮沸仍可与相应免疫血清发生环状沉淀反应。20 . 反应素人感染梅毒螺旋体后，除产生特异性抗体外，还产生一种反应素（脂质抗体）。21 . 非螺旋体抗原试验用于初筛梅毒螺旋体。22 . 支原体是一类无细胞壁、形态上呈高度多形性，可通过除菌滤器，在无生命的培养基中能生长繁殖的最小原核细胞型微生物。23 . 衣原体是一类具有独特生长发育周期、专性细胞内寄生、能通过细菌滤过器的原核细胞性微生物。 24 . 立克次体是一类微小杆状或球杆状、革兰阴性、除少数外仅能在宿主细胞内繁殖的原核细胞性微生物。25 . 病毒仅由核酸（DNA 或RNA）和蛋白质外壳构成的专营细胞内生存的寄生物。二、重点复习：1、简述食品卫生细菌学样品采样的原则、种类及特点。 21 样品采集原则：①具有代表性②防止样本受到外源性污染③防止细菌生长④食物中毒时应及时采集可疑食物样本采样种类：分大样、中样和小样。大样：一整批样本；中样：混合样本，200g；小样：分析用，检样，25g。2、简述药敏试验的目的及方法。K-B 法药敏试验的影响因素有哪些？73 目的：测定抗菌药物抑制或杀死细菌的能力。方法：纸片扩散法、稀释法、E-试验法、联合药敏试验、自动化检测法、分子生物学方法。目前常用的方法是纸片扩散法、稀释法，多用于需氧菌和碱性厌氧菌。因素：①培养基②琼脂浓度与厚度③PH 值④药物纸片的质量⑤操作因素⑥菌液浓度3、菌种保存的方法、特点及菌种保管的规章制度。防止菌种退化的主要措施有哪些？87— 90 保藏方法：一培养基保藏法：1 琼脂斜面保藏法二载体干燥保藏法三真空冷冻干燥保藏法四低温及超低温保藏法2 半固体穿刺法3 石蜡封存法防止菌种退化措施：①控制传代次数②用典型菌株和菌落传代③通过易感动物传代使菌种恢复原有特性④定期检查菌种性状4、细菌

临床医学检验技术(中级)-微生物和微生物学检验(B1型题)_0

临床医学检验技术（中级)-微生物和微生物学检验 (B1型题) 1、不会通过母婴途径传播的RNA病毒是 A.HAV B.HSV C.HCMV D.HIV E.HPV 2、通过性接触传播的RNA病毒是 A.HAV B.HSV C.HCMV D.HIV E.HPV 3、接种左旋多巴-枸橼酸铁和咖啡酸培养基，新型隐球菌呈棕黑色菌落的是 A.芽管形成试验 B.厚壁孢子形成试验 C.酚氧化酶试验

D.尿素酶试验 E.毛发穿孔试验 4、假丝酵母菌属中仅白假丝酵母菌阳性的试验是 A.芽管形成试验 B.厚壁孢子形成试验 C.酚氧化酶试验 D.尿素酶试验 E.毛发穿孔试验 5、医院感染最重要的感染源为 A.患者 B.医院工作人员 C.探视者 D.陪同人员 E.未彻底消毒灭菌的血液制品 6、可作为共同传播媒介物引起医院感染的为 A.患者 B.医院工作人员 C.探视者 D.陪同人员

E.未彻底消毒灭菌的血液制品 7、不属于钝化酶的是 A.乙酰转移酶 B.核苷转移酶 C.磷酸转移酶 D.红霉素酶 E.CTX-M型酶 8、细菌对氯霉素的耐药机制为 A.乙酰转移酶 B.核苷转移酶 C.磷酸转移酶 D.红霉素酶 E.CTX-M型酶 9、具有高度变异性的肝炎病毒是 A.HAV B.HBV C.HCV D.HDV E.HEV

10、可形成包涵体的肝炎病毒是 A.HAV B.HBV C.HCV D.HDV E.HEV 11、耐碱不耐酸的细菌是 A.结核分枝杆菌 B.痢疾志贺菌 C.伤寒沙门菌 D.霍乱弧菌 E.脑膜炎奈瑟菌 12、细胞壁含脂类最高的细菌是 A.结核分枝杆菌 B.痢疾志贺菌 C.伤寒沙门菌 D.霍乱弧菌 E.脑膜炎奈瑟菌

医学检验-微生物-厌氧性细菌测试题

第11章厌氧性细菌测试题 一.名词解释 1.汹涌发酵:产气荚膜梭菌在牛乳培养基中生长时发酵乳糖产酸,使酪蛋白凝固,同时产生大量气体将凝固的酪蛋白冲碎,并将封闭的凡士林冲至试管口的现象. 2.破伤风抗毒素（TAT）:可中和破伤风痉挛毒素的抗血清.主要用于破伤风感染的治疗和紧急预防. 3.厌氧性细菌:是一类必须在无氧或氧化还原电势低的环境中才能生长的细菌. 主要包括:G+芽孢梭菌、G+无芽孢杆菌、G-无芽孢杆菌、G+球菌、G-球菌。 二.填空 1.破伤风杆菌是机体正常菌群中的一个组成部分，主要寄生在人体的 部位。 2.破伤风杆菌的芽胞位于菌体的 部位，使菌体呈状。3.破伤风类毒素是破伤风外毒素经 处理后，消失而 完整的人工主动免疫制剂。 4.破伤风的治疗应给予注射 中和游离的毒素以及大剂量 杀伤繁殖体的破伤风杆菌。 5.破伤风痉挛毒素作用部位 是，作用机理 是。 6.破伤风杆菌可产生 和两种毒素。 7.注射破伤风类毒素进行预防接种，主要对象是儿童、 和。 8.DPT三联疫苗是由、和三种成分组成。9.肉毒杆菌主要通过感染，引起以为主要症状的肉毒中毒。 10.肉毒杆菌的芽胞位于菌体的 部位，使菌体形成状。 11.产气荚膜杆菌在血平板上形成 溶血环，在牛乳培养基中出现 现象。 12.产气荚膜杆菌的芽胞位于菌体的部位，比菌体。1.肠道。 2.顶端，鼓槌。 3.3%甲醛，毒性，抗原性。 4. 破伤风抗毒素，青霉素。 5.脊髓前角，封闭抑制性神经介质释放。 6.α溶血素，破伤风痉挛毒素。 7.军人和极易受外伤人员。 8.白喉类毒素、百日咳死疫苗和破伤风类毒素。 9.消化道，肌肉麻痹。 10.次极端，网球拍。 11.双，汹涌发酵。 12.次极端，小。

生物化学检验考试重点知识总结

临床生物化学与检验 第一章 临床生物化学的概念：临床生物化学与是在人体正常的生物化学代谢基础上，研究疾病状态下生物化学病理性变化的基础理论和相关代谢物的质与量的改变，从而为疾病的临床实验诊断，治疗监测、药物疗效和预后判断、疾病预防等方面提供信息和决策依据的一门学科。（选择题） 第二章 1.血浆蛋白质电泳区带顺序：前清蛋白、清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β1-球蛋白、β2-球蛋白、γ-球蛋白 2.急性时相反应：当人体因感染、自身免疫性等组织损伤（如创伤、手术、心肌梗死、肿瘤等）侵害，诱导炎症，使单核细胞和巨噬细胞等细胞释放紧急反应性因子，再经血液循环，刺激肝脏细胞产生Hp、Cp、CRP等，使其血浆中浓度显著升高，而血浆前清蛋白、清蛋白、转铁蛋白浓度则出现相应下降，此炎症反应过程，称之为急性时相反应(APR),该过程出现的蛋白质统称为急性时相反应蛋白（APP）。各APP升高的速度和幅度有所不同，C-反应蛋白首先升高，在12小时内α1-酸性糖蛋白也升高，尔后α1-抗胰蛋白酶、触珠蛋白、C4和纤维蛋白原升高，最后是C3和铜蓝蛋白升高，通常在2至5天内这些APP达到最高值。

3.M蛋白→多发性骨髓瘤 4.清蛋白（Alb）的生理功能：①保持血浆胶体渗透压：以维持血管内外体液的平衡。②重要的营养蛋白：用于组织蛋白的补充和修复③血浆中主要的载体蛋白：许多水溶性差的物质，可以通过与Alb的结合而运输④具有缓冲酸碱的能力：蛋白质是两性电解质 5.CRP的临床意义： CRP是第一个被认识的APP。CRP是非特异性指标，主要用于结合临床检测疾病：①筛查微生物感染；②评估炎症性疾病的活动度；③检测系统性红斑狼疮、白血病和外科手术后并发的感染（血清中浓度再次升高）④新生儿败血症和脑膜炎的监测；⑤监测肾移植后的排斥反应等（简答题） 6.体液总蛋白测定的方法：凯氏定氮法是经典的蛋白质测定方法（参考方法）；双缩脲法是常规方法。 7.清蛋白可与阴离子染料溴甲酚绿（BCG）或溴甲酚紫（BCP）结合，而球蛋白基本不结合这些染料。 8.前清蛋白（PA）：在正常血清蛋白电泳（SPE）中显示在清蛋白前方故而得名，生理功能：PA为运载蛋白和组织修补材料。临床意义：①属负性APP；②作为营养不良的指标；③作为肝功能不全的指标。 9.触珠蛋白（Hp）又称为结合珠蛋白，在SPE中位于α2区带，为α2β2四聚体。生理功能：主要能与红细胞中释放出

临床细菌学检验的质量控制

临床细菌学检验的质量控制 目的研究临床细菌学检验质量控制措施。方法本组抽取我院于2012年8月～2013年8月从各科室采集的4500例细菌标本进行临床实验。分析检验结果的准确性。结果经临床病理证实，临床细菌学检验质量优良为2412例，合格为1778例，不合格为310例，合格率为93.11%。结论规范管理程序，保证标本质量采集的质量，对提高临床细菌学检验的质量具有重要意义。 标签：样本采集；检验质量；细菌学 随着医疗技术的快速发展，细菌学检验逐渐成为临床医学中重要的组成部分。通过对入院患者进行标本采集、研究等，可为临床治疗提供依据。由于临床细菌学检验内容非常复杂，包括标本采集、运送、保存、药物过敏检验等多方面的内容，任一环节出错，都会对检查质量造成影响，因此我们必须格外注意各环节的操作标准。现对我院采集的4500例细菌标本的检验过程进行综合分析，得出如下结论。 1资料与方法 1.1一般资料本组抽取我院于2012年8月～2013年8月从各科室采集的细菌标本4500例，其中559例血液标本，678例粪便标本，894例尿液标本，686例脓液标本，759例生殖道分泌物，924例痰液标本。 1.2方法将采集的标本进行分类处理，对不同的标本进行临床细菌学检验，记录检验结果。 1.3临床评价标准参照医学微生物检验规范对本组实验进行综合评价。根据检验结果的准确性进行综合评价，以优良、合格、不合格作为评价等级。对不合格标本进行研究，分析其影响因素。 2结果 本组4500例标本，其中优良为2412例，合格为1778例，不合格为310例，合格率为93.11%。其中，以粪便标本和血液标本的检查合格率最高，见表1。本组310例不合格，不合格率为6.89%，其具体影响因素见表2。 3结论 随着医疗技术的进步，细菌学开始广泛的应用于临床诊断中，为临床治疗提供准确的依据。临床细菌学检验的过程主要包括细菌采集、运送、管理、检验等，在这一系列的过程中，往往会受到其他因素的干扰，影响检验质量。 3.1影响临床细菌学检验质量的因素

实验十二 厌氧性细菌(1稿)

实验十二厌氧性细菌（厌氧培养方法） 厌氧性细菌（Anaerobicbacteria）是一大群必须在无氧或低氧环境中才能生长繁殖的细菌；一般情况下，这类细菌在无氧条件下比在有氧环境中生长好，不能在空气（氧气浓度大于18%）和（或）二氧化碳浓度小于10%以下的固体培养基表面生长。这类细菌缺乏完整的代谢酶体系，其能量代谢多以无氧发酵的方式进行。它能引起人体不同部位的感染，包括阑尾炎、胆囊炎、中耳炎、口腔感染、心内膜炎、子宫内膜炎、脑脓肿、心肌坏死、骨髓炎、腹膜炎、脓胸、输卵管炎、脓毒性关节炎、肝脓肿、鼻窦炎、肠道手术或创伤后伤口感染、盆腔炎以及菌血症等。（一）无芽胞厌氧菌主要种类及生物学性状 无芽胞厌氧菌共有23个属，与人类疾病相关的主要有10个属。 1.革兰阴性厌氧杆菌有8个属，类杆菌属中的脆弱类杆菌最为重要。形态呈多形性，有荚膜。除类杆菌在培养基上生长迅速外，其余均生长缓慢。 2.革兰阴性厌氧菌有3个属，其中以韦荣菌属最重要。为咽喉部主要厌氧菌，但在临床厌氧菌分离标本中，分离率小于1%，且为混合感染菌之一。其他革兰阴性球菌极少分离到。 3.革兰阳性厌氧菌有5个属，其中有临床意义的是消化链球菌属，主要寄居在阴道。本菌属细菌生长缓慢，培养需5～7天。 4.革兰阳性厌氧杆菌有7个属，其中以下列3个属为主： （1）丙酸杆菌属：小杆菌，无鞭毛，能在普通培养基上生长，需要2～5天，与人类有关的有3个种，以痤疮丙酸杆菌最为常见。 （2）双歧杆菌：呈多形性，有分枝，无动力，严格厌氧，耐酸。29个种中有10个种与人类有关，其中只有齿双歧杆菌与龋齿和牙周炎有关。其他种极少从临床标本中分离到。 （3）优杆菌属：单一形态或多形态，动力不定，严格厌氧，生化反应活泼，生长缓慢，常需培养7天，最常见的是迟钝优杆菌。 （二）微生物学检查 要从感染灶深部采取标本。最好是切取感染灶组织或活检标本，立即送检医.学教育网搜集整理。 1.直接涂片镜检：将采集的标本直接涂片染色镜检，观察细菌形态、染色及菌量，为进一步培养以及初步诊断提供依据。 2.分离培养与鉴定：分离培养是鉴定无芽胞厌氧菌感染的关键步骤。标本应立即接种相应的培养基，最常用的培养基是以牛心脑浸液为基础的血平板。置37℃厌氧培养2～3天，如无菌生长，继续培养1周。如有菌生长则进一步利用有氧和无氧环境分别传代培养，证实为专性厌氧菌后，再经生化反应进行鉴定。 厌氧菌广泛分布于自然界以及人和动物的体内，具有以下特点： 1、种类繁多，分类方法多。 （1）按照形态厌氧性细菌分为芽胞厌氧菌和无芽胞厌氧菌两大类。芽胞厌氧菌只有一个菌属，即梭状芽胞杆菌属，共有100多个种；无芽胞厌氧菌有40多个菌属，300多个种和亚种。 （2）根据对O?的耐受程度，可将厌氧菌分为3大类：（1）对氧极端敏感的厌氧菌：代表菌种为月形单胞菌。这类细菌对厌氧条件要求很高，在空气中暴露10min即死亡，临床上很难分离出；（2）中度厌氧菌：代表菌种为脆弱拟杆菌、产气荚膜梭菌等临床分离常见的厌氧菌。它们在空气中暴露60～90min或在脓汁抽出72h后仍然能分离出来；（3）耐氧厌氧菌：代表菌种为溶组织梭菌。这类细菌不能利用氧，在无氧条件下生长好，而在有氧条件下生长不佳。也有按照其对氧的耐受的程度不同，可分为专性厌氧菌和兼性厌氧菌等。专性厌氧菌（Obligate anaerobe），是指在无氧的环境中才能生长繁殖的细菌。此类细菌缺乏完善的呼吸酶系统，只能进行无氧发酵，不但不能利用分子氧，而且游离氧对其还有毒性作用。如破伤风杆菌、肉毒杆菌、产生荚膜杆菌等。只能在没有游离氧存在的环境中生存的微生物。甲烷菌即属此类细菌。人们利用甲烷菌等产生沼气，利用厌氧菌处理各种有机废物和废水。