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布病特异性血清学检测技术应用概述

布鲁氏菌病防治技术规范

布鲁氏菌病防治技术规范布鲁氏菌病（Brucellosis，也称布氏杆菌病，以下简称布病）是由布鲁氏菌属细菌引起的人兽共患的常见传染病。我国将其列为二类动物疫病。为了预防、控制和净化布病，依据《中华人民共和国动物防疫法》及有关的法律法规，制定本规范。 1 适用范围本规范规定了动物布病的诊断、疫情报告、疫情处理、防治措施、控制和净化标准。本规范适用于中华人民共和国境内一切从事饲养、经营动物和生产、经营动物产品，以及从事动物防疫活动的单位和个人。 2 诊断 2.1 流行特点多种动物和人对布鲁氏菌易感。种主要易感动物羊种布鲁氏菌（Brucella melitensis）羊、牛牛种布鲁氏菌（Brucella abortus）牛、羊猪种布鲁氏菌（Brucella suis）猪绵羊附睾种布鲁氏菌（Brucella ovis）绵羊犬种布鲁氏菌（Brucella canis）犬沙林鼠种布鲁氏菌（Brucella 沙林鼠neotomae）

布鲁氏菌是一种细胞内寄生的病原菌，主要侵害动物的淋巴系统和生殖系统。病畜主要通过流产物、精液和乳汁排菌，污染环境。羊、牛、猪的易感性最强。母畜比公畜，成年畜比幼年畜发病多。在母畜中，第一次妊娠母畜发病较多。带菌动物，尤其是病畜的流产胎儿、胎衣是主要传染源。消化道、呼吸道、生殖道是主要的感染途径，也可通过损伤的皮肤、黏膜等感染。常呈地方性流行。人主要通过皮肤、黏膜、消化道和呼吸道感染，尤其以感染羊种布鲁氏菌、牛种布鲁氏菌最为严重。猪种布鲁氏菌感染人较少见，犬种布鲁氏菌感染人罕见，绵羊附睾种布鲁氏菌、沙林鼠种布鲁氏菌基本不感染人。 2.2 临床症状潜伏期一般为14～180天。最显著症状是怀孕母畜发生流产，流产后可能发生胎衣滞留和子宫内膜炎，从阴道流出污秽不洁、恶臭的分泌物。新发病的畜群流产较多；老疫区畜群发生流产的较少，但发生子宫内膜炎、乳房炎、关节炎、胎衣滞留、久配不孕的较多。公畜往往发生睾丸炎、附睾炎或关节炎。 2.3 病理变化主要病变为生殖器官的炎性坏死，脾、淋巴结、肝、肾

布病诊断标准

布鲁氏菌病诊断标准及处理原则 1 主题内容与适用范围本标准规定了人群布鲁氏菌病(简称布病)的诊断和疫区处理原则。本标准适用于各类医疗、卫生防疫机构。 2 术语皮肤过敏试验：受布氏菌感染后，再受到布氏菌过敏原刺激，皮肤出现的迟发型过敏反应。布病疫区： 4 确诊病例：疑似病例加3.4或3.5中任何一种方法阳性者。 4 疫区处理原则 4.1 核实诊断：对确诊的病人应依据流行病学资料，临床表现和实验室检查结果进行核实诊断。 4.2 检疫和淘汰处理疫畜：对疫区内全部羊，牛和猪用血清学方法进行检疫，检疫后1个月再检一次。凡检出的阳性家畜均应立即屠宰(或隔离饲养)。至少在一年内停止向外调运牛、羊、猪。畜产品均应在原地存放和消毒，暂不外运。 4.3 消毒：被病畜的流产物污染的场地、用具、圈舍及尚未食用的奶制品均应进行消毒处理。

4.4 免疫：经两次检疫呈阴性反应的家畜，以及疫区周围村受威害的畜群，应连续3年以畜用菌苗进行免疫，每年免疫覆盖率不应低于90％。 4.5 临床监测及治疗：对疫区内接触家畜及畜产品的人员进行血清学及皮肤过敏试验，查明人群感染情况，凡确诊的病人均应进行系统治疗。 4.6 宣传教育：对疫区的居民及职业人群进行布病的危害、临床表现及防治知识的宣传教育。 4.7 疫区处理效果验证：在疫区处理后的第二年始，连续三年对疫区及疫区周围地区进行验证，验证方法按照农业部和卫生部共同制定的《布病疫区控制考核标准》的要求进行。 3 液中加入1％～3％的高价布鲁氏菌免疫血清，混合后，置37℃温箱2h，高速离心沉淀，取沉淀物0.5mL接种在选择性培基上培养，或注射豚鼠，用生物学法分离布鲁氏菌。 A1.3 其他病原材料培养由乳，脑脊液，关节液和滑囊液分离布鲁氏菌，将液体标本无菌地接种到琼脂斜面上，或培养平板上，涂布于培基表面，参照血培养法观察结果，15天仍无可疑菌生长，定为阴性。 A1.4 生物学分离布鲁氏菌法

牛羊布氏杆菌病血清学诊断

牛羊布氏杆菌病血清学诊断【目的要求】通过布氏杆菌病血清学试管凝集反应和玻板凝集反应及变态反应的操作，掌握牛羊布氏杆菌病的检疫方法。【设备与材料】器材恒温箱、灭菌试管、采血用注射器及针头、皮内注射器及针头、小试管及试管架、各种刻度吸管、平板凝集试验箱、酒精灯、火柴、玻璃板、蜡笔、牙签、洗耳球、工作衣帽、废弃缸。药品来苏儿或新洁尔灭、0.5％石炭酸生理盐水或5%～10%盐水、生理盐水、布氏杆菌试管凝集抗原和玻板凝集抗原、布氏杆菌水解素、布病阳性和阴性血清、70%酒精棉球、5%碘酊棉球等。【方法步骤】一．血清凝集反应试验采血及血清的分离：被检牛、羊颈静脉无菌操作采血10～15mL，于灭菌试管中，倾斜放置10～12h,待血清析出后,用毛细吸管吸取血清于标有畜号的灭菌试管内，封存被检。 1．试管凝集反应（1）操作方法： ①取洁净小试管7支编号后于试管架上，分别按表1-1，加入0.5%石炭酸生理盐水（第1管加1.15 mL，第2～5管加入0. 5 mL,第6、7管不加）。 ②吸取被检血清0.1mL加入第1管中,混匀后吸出0.25mL弃入废弃缸内,再吸入 0.5mL加入第2管中,混匀,吸取0.5mL加入第3管,以此类推至第4管中,混匀后吸出0.5mL弃入废弃缸内,使1～4管均为0.5 mL,而被检血清递减稀释到1:200倍。对照组第5管中不加血清,第6管中加入1:25稀释的布氏杆菌标准阳性血清 0.5mL,第7管中加入1:25稀释的布氏杆菌标准阴性血清0.5mL。 ③每管加入0.5mL1：20稀释抗原（用0.5%石炭酸生理盐水将布氏杆菌试管凝集抗原进行1：20的稀释）。 ④加样完毕，振荡使被检血清和抗原充分混合后，置于37℃恒温箱中12～18h,取出后在室温中静置2～4h。观察并判定结果。（2）结果判定＋＋＋＋:细菌100%凝集，呈伞状沉淀于管底，上层液清亮透明。＋＋＋：细菌75%凝集，凝集现象同上，上层液稍混浊。＋＋：细菌50%凝集，管底有中等量沉淀，上层液半透明。＋：细菌25%凝集，管底有少量沉淀，上层液混浊，不透明。－：无凝集现象，液体完全混浊。但细菌呈圆点状沉于管底，振荡时均匀混浊。表1～1 试管凝集反应表单位:mL

五、布鲁氏菌病防治技术规范

五、布鲁氏菌病防治技术规范布鲁氏菌病（Brucellosis，也称布氏杆菌病，以下简称布病）是由布鲁氏菌属细菌引起的人兽共患的常见传染病。我国将其列为二类动物疫病。为了预防、控制和净化布病，依据《中华人民共和国动物防疫法》及有关的法律法规，制定本规范。 1 适用范围本规范规定了动物布病的诊断、疫情报告、疫情处理、防治措施、控制和净化标准。本规范适用于中华人民共和国境内一切从事饲养、经营动物和生产、经营动物产品，以及从事动物防疫活动的单位和个人。 2 诊断 2.1 流行特点多种动物和人对布鲁氏菌易感。

人间布病诊断方法和判定标准

人间布病诊断方法和判定标准 1．人的布病诊断是综合性的，主要依据：（1）流行病学接触史：密切接触家畜、野生动物（包括观赏动物）、畜产品、布鲁氏菌培养物等或生活在疫区的居民。（2）临床症状和体征应排除其他疑似疾病。（3）实验检查：病原分离、试管凝集试验、补体结合试验、抗人球蛋白试验。（虎红平板凝集试验，皮内变态反应试验仅供初诊用）。凡具备（1）、（2）项和第（3）项中的任何一项检查阳性即可确定为布病病人。对已确诊的慢性布病病人和接种过菌苗的人，应以临床症状为主要依据，血清学试验效价高低，皮内变态反应强弱仅供参考。2．实验检查阳性判定标准（1）病源分离：检出布鲁氏菌（2）试管凝集试验：1：100（＋＋）及以上，即100国际单位／毫升及以上。（3）补体结合试...... ...... 布病诊断标准 (一) 流行病学：发病前病人与家畜或畜产品，布氏菌培养物有密切接触史，或生活在疫区的居民，或与菌苗生产、使用和研究密切联系者。 (二) 临床表现：出现数日乃至数周发热，多汗，肌肉和关节酸痛，乏力兼或肝、脾、淋巴结和睾丸肿大等可疑症状及体征。 (三) 实验室检查：布病玻片或虎红平板凝集反应阳性或可疑，或皮肤过敏试验后24、48小时分别观察一次，皮肤红肿浸润范围有一次在2.0cm×2.0cm及以上（或4.0cm2以上） (四) 分离细菌：从病人血液、骨髓、其他体液及排泄物中分离到布氏菌。 (五) 血清学检查：标准试管凝集试验（SAT）滴度为1：100及以上，对半年内有布氏菌苗接触史者，SAT 滴度虽达1：100及以上，过2～4周后应再检查，滴度升高4倍及以上，或用补体结合试验（CFT）检查，CFT滴度1：10及以上；抗人免疫球蛋白试验（Coomb'S）滴度1：400及以上。诊断疑似病例：具备(一)、（二）、（三）者。诊断确诊病例：疑似病例加（四）或（五）中任何一项者。

布氏杆菌病的检测

牛布氏杆菌病的检测 1 传统的检测方法 1.1 细菌学检测布氏杆菌需在实验室里进行。初步分离时, 须在5%~10%二氧化碳环境中方能生长, 而且标本中必须存在大量活菌才能分离到该菌, 培养细菌的周期长,需要花费大量的时间才能得出结果。因此在布病的检测中已经逐渐被淘汰。 1.2 血清学检测该法同样要在实验室才能操作, 虽然凝集试验(agglutination test)操作简便, 且所需时间短, 但由于IgM 在pH 为中性或弱酸性时凝集最活跃, 所以凝集试验会因为抗体交叉反应而易出现假阳性反应。判断结果有很大的误差, 在2000 年被OIE 取消了其作为布氏杆菌病的检测方法[2]。沉淀试验(Precipitationtests)是可溶性抗原与相应抗体结合, 在适量电解质存在下, 形成肉眼可见的白色沉淀, 由于是人为的观察结果, 因此存在很大的主观性, 有时会因出现交叉反应而误判结果, 且有很大的局限性, 不是一种理想的检测布病的方法。补体结合试验( complement

fixation test,CFT) 主要用于检测牛、绵羊、山羊和猪的布氏杆菌病,在操作过程中对温度和滴加试剂的量有很高的要求,需要很多控制条件, 结果也无法避免假阳性的影响。放射免疫试验是1977 年Parratt[3]建立起来的, 由于在该实验中要用大量的放射性元素会对人体和环境造成很大的威胁, 因此该法一直没有得到广泛运用。 1.3 变态反应检测临床上可用布氏杆菌水解素0.2ml 注射于动物根皱褶处, 24h 及48h 各观察一次, 若注射部位发红肿胀即判为阳性反应。此法对慢性病例检出率较高, 并且注射水解素后无抗体产生, 不妨碍以后的血清学检查。此法主要用于山羊和绵羊检疫, 但山羊的变态反应试验不如绵羊变态反应试验那样易读取结果, 对中、后期病山羊的诊断意义较大, 适用于山羊布氏杆菌病的筛检, 不作个体山羊的诊断依据。 2 酶联免疫吸附试验 ELISA 是免疫技术中应用最广的一种, 在适合的载体上, 酶标记抗体或抗原与相应的抗原或抗体形成酶标记的抗原- 抗体免疫复合物, 在一定的底物参与下, 复合物上的酶催化底物, 使

牛羊布病的诊断及其防治

羊布病的诊断及其防治牛羊布病存在较高的发病率，而且传染性也较强，在多种传播方式影响之下不仅会使牛羊等牲畜出现病症，还会在一定程度上影响人体健康。在养殖牛羊产业当中，一旦出现牛羊布病其产奶量会大幅度减少，而且牛羊生殖系统还会出现不同程度的发炎以及病变等情况，进而就会加大流产的可能性，这对于养殖产业来说会直接降低经济效益。 1 1.1 流行特点及病理变化牛羊布病主要病原就是布鲁氏菌，而这一病菌游戏对于多种动物体易感，其相比较而言，母畜比畜发病率要高、成年畜比幼年畜发病率要高。体，传染途径则是以呼吸道、消化道为主，此外也有经皮肤以及破损黏膜传染的案例，流行特点则是以地方性流行为主。官炎性坏死，淋巴结、肝、肾、脾等器官形成了布病结节，有的病牛羊还会存在可见关节炎。牛羊布病诊断中牛羊更是易感性较强，羊布病传统然主要是带有细菌的动物羊布病病理变化主要表现为生殖器

1.2 临床诊断牛羊布病需要按照流行病学以及临床表现进行诊断，而要想确诊还要经过血清学诊断才行，所以，实验室诊断是牛羊布病诊断的关键。在实验室诊断时经常会使用布病虎红平板凝集试验来进行初步筛选，之后就会使用试管凝集试验来进行确定，在初步筛选试验的时候，如果表现为阳性而且还存在流行病学史以及临床症状，亦或者是试管凝集试验呈现阳性的话，就可以将其判定为牛羊布病。牛羊布病防治措施 2.1 预防措施 2.1.1做好免疫接种在对牛羊布病进行预防的时候，首先要积极开展免疫接种工作，在免疫接种过程中需要按照地方疫情流行情况来对免疫接种区域进行划分，尤其是对于疾病多发地区更是要加??检疫。此外，在免疫接种的时候，对于牛疫苗可以选择29 号布鲁氏菌苗、粗糙型 M111 菌苗；而羊则可以使用V 号布鲁氏菌苗。最后，在免疫接种完成之后，还需要定期组织效果监测，确保免疫接种的有效性。 2.1.2做好疾病监测在对牛羊布病进行预防的时候，还需要对牛羊做好疾病监测工作，如果牛场数量大于50 头、羊场数量大于70 头，则可以按照10%的比例来进行

布氏杆菌病的检测

牛布氏杆菌病的检测传统的检测方法细菌学检测布氏杆菌需在实验室里进行。初步分离时, 须在二氧化碳环境中方能生长, 而且标本中必须存在大量活菌才能分离到该菌, 培养细菌的周期长,需要花费大量的时间才能得出结果。因此在布病的检测中已经逐渐被淘汰。血清学检测该法同样要在实验室才能操作, 虽然凝集试验( )操作简便, 且所需时间短, 但由于在为中性或弱酸性时凝集最活跃, 所以凝集试验会因为抗体交叉反应而易出现假阳性反应。判断结果有很大的误差, 在年被取消了其作为布氏杆菌病的检测方法[]。沉淀试验()是可溶性抗原与相应抗体结合, 在适量电解质存在下, 形成肉眼可见的白色沉淀, 由于是人为的观察结果, 因此存在很大的主观性, 有时会因出现交叉反应而误判结果, 且有很大的局限性, 不是一种理想的检测布病的方法。补体结合试验( ) 主要用于检测牛、绵羊、山羊和猪的布氏杆菌病,在操作过程中对温度和滴加试剂的量有很高的要求,需要很多控制条件, 结果也无法避免假阳性的影响。放射免疫试验是年[]建立起来的, 由于在该实验中要用大量的放射性元素会对人体和环境造成很大的威胁, 因此该法一直没有得到广泛运用。变态反应检测临床上可用布氏杆菌水解素注射于动物根皱褶处, 及各观察一次, 若注射部位发红肿胀即判为阳性反应。此法对慢性病例检出率较高, 并且注射水解素后无抗体产生, 不妨碍以后的血清学检查。此法主要用于山羊和绵羊检疫, 但山羊的变态反应试验不如绵羊变态反应试验那样易读取结果, 对中、后期病山羊的诊断意义较大, 适用于山羊布氏杆菌病的筛检, 不作个体山羊的诊断依据。酶联免疫吸附试验是免疫技术中应用最广的一种, 在适合的载体上, 酶标记抗体或抗原与相应的抗原或抗体形成酶标记的抗原抗体免疫复合物, 在一定的底物参与下, 复合物上的酶催化底物, 使其水解、氧化或还原成另外一种带色物质。由于在一定条件下, 酶的降解底物和呈现色泽是成正比的, 因此, 可以应用酶测定仪进行测定, 从而计算出参与反应的抗原和抗体的种类和含量。自从年等和等分别报道酶联免疫吸附试验( , ) 以来, 得到了很大的发展, 到目前其类型也很多, 在此对常用的两种介绍如下。间接酶联免疫吸附试验年第一次建立间接( , ) 法检测人布氏杆菌病, 之后在多种动物上用该法检测布氏杆菌病。年等用间接从羊奶中检测布氏杆菌病, 其特异性和敏感性都特别高; 年等人用抗的单克隆酶轭合物间接诊断牛布氏杆菌病, 检测了三组血清, 第一组是没有注射疫苗的阴性血清, 第二组是注射了疫苗的阴性血清,第三组是来自阳性牛的血清。间接检测的特异性前两组分别是和, 间接检测阳性血清的敏感性是; 得出的敏感性和特异性都很高; 年. 等评价了间接在阿根廷奶牛中用奶和血清检测诊断布氏杆菌病的效果, 在来自相同奶牛的奶和血清中间接检测的特异性和敏感性分别为: 奶样敏感性为特异性为; 血清的敏感性为特异性。奶和血清的敏感性相同而奶的特异性比血清的高[]。说明可以在检测奶牛布氏杆菌病的时候可以用奶代替血样, 排除了采血带来的麻烦, 大大地提高了检测效率。赵云玲等人分别通过琥红凝集试验( ) 、试管凝集试验( ) 、和酶联吸附( )试验检测某牛厂送检份血清和份乳清, 所得的实验结果说明乳清完全可以代替血清用于牛布氏杆菌病的血清学检测; 年. []等人比较了在大量奶样中用间接和用乳汁环状试验检测流产性布氏杆菌抗体的差异, 最后得出间接的敏感性( ) 高于乳汁环状试验( ) , 而间接的

牛羊布氏杆菌病的防治

牛羊布氏杆菌病的防治布氏杆菌病简称布病，是由布鲁氏菌属细菌引起的急性或慢性的人兽共患传染病。动物发病的特征是流产，不育，睾丸炎及各种组织的局部病灶。 [病因病机] 由于易感牛、羊直接或间接接触本病疫邪，病从口人或通过皮肤、粘膜和交配进入体内潜伏，当机体遇到不良刺激而正气虚弱时，疫邪乘虚大量繁殖进入易感脏器引起发病。本病主要侵害生殖系统故见妊娠母畜流产和公畜睾丸发炎。 [主证] 1、牛：潜状期2周至6个月。缺乏明显的全身症状，母牛最明显的症状是流产，通常发生于妊娠后的5～7个月。流产前阴道粘膜潮红肿胀，有粟粒大红色的结节，阴唇及乳房肿胀，不久即发生流产。流产胎儿多为死胎，有时产下弱犊，往往存活不久。大多数母牛流产后伴发胎衣停滞和子宫内膜炎，从阴道内流出污秽不洁的红褐色恶臭的分泌物，可持续2～3周，有的病例长期不愈，不能妊娠。非妊娠牛，常常发生关节炎和局部肿胀，多见于膝关节。病公牛往往发生睾丸炎或附睾肿胀、关节炎及局部肿胀，配种能力降低。牛布鲁氏菌病的病程为慢性经过，可延续数年之久。在明显症状消失后，如不伴发慢性子宫炎，常可以自愈。否则长期不妊而淘汰。病种公牛，一般均应淘汰。 2、羊：妊娠病母羊的主要临床症状是流产，多发于妊娠后的3～4个月，流产前的症状一般不明显；部分病羊在流产前2～3天，呈现胃肠弛缓，精神沉郁。常喜伏卧，食欲减退，饮欲增加，体温升高，阴道流出粘液性或粘性血样分泌物。其他症状可能还有乳房炎、关节炎、滑膜炎及支气管炎。病公羊经常发生睾丸炎、附睾炎及多发性关节炎。绵羊布鲁氏菌可引起绵羊附睾炎和不育。 [治疗] 治则本病尚无特效疗法，可试用下法治疗。 1、胎儿尚活，仅有流产先兆，但还没有发生明显的流产症状的可试行保胎法。 ⑴、孕酮牛50～100mg，羊10～30mg，一次肌肉注射。⑵、炒白术30g，当归30g，砂仁20g，川芎20g，白芍20g，熟地20g，炒阿胶25g，党参20g，陈皮25g，苏叶25g，黄芩25g，甘草10g，生姜15g为引。共为末，开水冲调，候温一次灌服(为牛的用量，羊酌减)，每天一剂。 2、胎儿已死或已发生明显的流产症状，应让其将胎儿产出，必要时可用药物催产坠胎。 ⑴、催产素牛25～100单位，羊30～50单位，一次肌肉注射。⑵、桃仁25g，红花20g，当归60g，川芎20g，白芍20g，熟地30g，益母草45g，炙甘草15g，党参30g，牛膝25g。共为末开水冲调，候温一次灌服(为牛的用量，羊酌减)。 3、已流产母畜应采取活血祛瘀，解毒治疗。益母草50g，黄芩30g，川芎、当归、熟地、白术、双花、连翘、白芍各25g。共为细末开水冲服，一天一剂，连用3～5天。

布氏杆菌症状及防治措施

布氏杆菌病防控措施布氏杆菌病广泛地分布于世界各地，能侵害多种家畜、野生动物和人类。布氏杆菌病是由布氏杆菌引起的人、畜共患的慢性传染病，主要侵害生殖系统。家畜临床表现不明显。牲畜感染后，以母畜发生流产或死胎，公畜发生睾丸炎为特征。母畜流产所排出的羊水、胎盘、分泌物中含大量布氏杆菌，特别有传染力。而其皮毛，尿粪，奶液中均有此菌。排菌可长达三个月以上。人通过与家畜的接触，服用了污染的奶及畜肉，吸入了含菌的尘土或菌进入眼结合膜等途径，皆可遭受感染。该菌自损伤的皮肤及粘膜或消化道，呼吸道进入人体后，首先被吞噬细胞吞噬，进入淋巴结，有时可在其中存活并生长繁殖形成感染灶，约2～3周后可进入血液循环产生菌血症。继之在网状内皮系统如肝，脾，骨髓内生长形成新的感染病灶，并可多次反复冲破细胞进入血循中，则再一次引起菌血症和临床急性症状，突出表现为寒战，发热，多汗，热型多为弛张热，表现为平均2～3周的发烧期，每间隔约3天至两周，发烧又反复，产生波浪状的热型。同时，布氏杆菌含有内毒素及菌体本身皆可引起人体的过敏，出现各种的变态反应性病变。骨关节病变，多发生在半年左右，少数病例更早些。布氏杆菌骨髓炎是血源性布氏杆菌感染在骨关节的局部表现。任何骨均可受累，但以脊椎炎最为多见。关节的病变常侵犯大关节，以髋关节炎最为常见。此外还会引起淋巴结及肝脾肿大，淋巴结肿大主要见于颈

部及腋下。男性可有睾丸炎或附睾炎，女性可患卵巢炎等。常见症状还有疲乏，出汗，头痛，低热，抑郁，烦躁，肌肉及关节酸痛。其主要预防措施有： 1.加强家畜的管理，做好经常性的家畜卫生处理和检疫；病畜应隔离饲养、治疗，病畜分泌物、排泄物等应做无害化处理或消毒深埋；病死的牲畜要深埋或烧毁。被污染的畜舍、运动场、饲槽、水槽等用10％石灰乳或5％热火碱水严格消毒。 2.不食用未经过煮沸或灭菌的奶和奶制品。能感染人类布氏菌病的主要奶制品是新鲜乳酪，特别是由山羊的奶制作的乳酪，但是，在干的或发酵过的乳酪中，布氏菌一般不能继续存活。 3.不食用患布氏病动物的肉及肉食品。患布氏病动物的肉及肉食品特别是处于菌血症时期的肉类对人有很大的危险性。冻肉和腌肉、未煮熟和未烤熟的肉类都具有传染性。牛羊肉烹调熟透后食用；生熟肉案板一定要分开使用，案板和操作容器一定要清洗并用热水烫洗，必要时消毒。 4.不使用感病动物毛、皮。有布氏病流行的地区出产的毛、皮也是一种传播因子，毛和皮特别容易被动物的尿、粪便及阴道分泌物污染而带有布氏病菌，凡接触未经卫生处理的毛、皮均有被感染的危险。 5.发现疫情的养殖户的圈舍要进行卫生消毒。 6.对于有职业史的相关人员，一旦出现类似某症状的患者要提高警惕，最好到当地疾病预防控制机构去咨询。兽医、病畜管理人员、接

布氏杆菌病怎样检查布病患者必做的三项检查

布氏杆菌病怎样检查布病患者必做的三项检查杆菌病怎样检查布病患者必做的三项检查布氏杆菌病对人体的健康损害是特别大的，因此我们在出现布氏杆菌病的症状后一定要及时就医检查，切莫道听途说的乱用治疗药物，而因此耽误治疗让身体健康遭受更严重的伤害。那么布氏杆菌病的确诊需要做怎样的检查呢？其实只需要做血象检查、细菌学检查、免疫学检查这三种检查就可以了。一般布氏杆菌病在通过血象、细菌学检查以及免疫学检查之后就可以对此病进行准确的确诊了，而具体检查方法介绍如下： ★1、血象检查，有百分之六十患有布氏杆菌患者在进行这

项检查之后就可以发现白细胞有轻度减少的现象，而淋巴细胞却有相对增多的现象发生，并且在这种现象发生的同时大多数的患者血沉还会有增速的现象，而病程比较久的患者还会有轻度和重度贫血的症状发生。 ★2、细菌学检查，一般采用血液、鬼祟。乳汁以及子宫分泌物都可以进行细菌培养，但由于要求严格的环境，因此在采集标本的时候最好是采用两份，一份用于含肝浸液的肉汤做培基之后在CO2孵箱中培养;而另外一份则放在一般的环境中进行孵育，一般培养的时间要超过两周才可以有比较准确的结果出现。 ★3、免疫学检查，这项检查主要包括的有血清凝集试验、补体结合试验、抗人球蛋白试验、酶联免疫吸附试验和皮肤试验等，一般在通过这几项检查所得出的具体表现，就可以基本对此病进行确诊了。上述就是针对确诊布氏杆菌病检查方法所作的介绍，上述内容可以供给大家参考，如果有人怀疑自己感染了布氏杆菌，就该及时的去正规的医院进行诊断，这样在确诊了疾病之后才可以作

出针对性的治疗，从而给才可以避免疾病加重之后会有危及生命的危害发生。

国家布鲁氏菌病防治计划

国家布鲁氏菌病防治计划（2016—2020年）为贯彻落实《国家中长期动物疫病防治规划（2012—2020年）》（以下简称《规划》），进一步做好全国布鲁氏菌病（以下简称布病）防治工作，有效控制和净化布病，根据《中华人民共和国动物防疫法》（以下简称《动物防疫法》）、《中华人民共和国传染病防治法》等有关法律法规，制定本计划。一、防治现状布病是由布鲁氏菌属细菌引起牛、羊、猪、鹿、犬等哺乳动物和人类共患的一种传染病。我国将其列为二类动物疫病。世界上170多个国家和地区曾报告发生人畜布病疫情。上世纪50年代布病曾在我国广泛流行，疫情严重地区人畜感染率达50%。20世纪80—90年代，由于加大防控力度，疫情降至历史最低水平。近年来，随着我国家畜饲养量不断增加，动物及其产品流通频繁，部分地区布病等人畜共患病呈持续上升势头，不仅严重影响畜牧业生产，也严重危及人民身体健康和公共卫生安全。自2012年《规划》颁布以来，各级畜牧兽医、卫生计生等有关部门在当地党委政府领导下，进一步加大工作力度，密切合作，认真落实监测、检疫、消毒、扑杀和无害化处理等综合防治措施，大力推广布病防治试点经验，防治工作取得积极成效，对迅速遏制疫情上升态势起到了积极作用。但是受我国布病疫源广泛存在、防治经费投入不足以及基层防疫体系薄弱等因素的影响，人畜间布病疫情仍较严重，防治任务依然艰巨，防治工作面临严峻挑战。2015年，全国报告人间布病病例56989例，人间病例仍处于历史高位；畜间布病流行严重地区的15个省份，监测阳性率同比上升0.38%。据对布病重点地区22个县248个定点场群的监测与流行病学调查结果，牛羊的个体阳性率分别达到3.1%和3.3%，群体阳性率分别达到29%和34%。二、防治原则、目标和策略（一）防治原则坚持预防为主的方针，坚持依法防治、科学防治，建立和完善“政府领导、部门协作、全社会共同参与”的防治机制，采取因地制宜、分区防控、人畜同步、区域联防、统筹推进的防治策略，逐步控制和净化布病。（二）防治目标 1.总体目标

治疗布氏杆菌病需要做哪些化验检查

治疗布氏杆菌病需要做哪些化验检查又称波浪热，由布氏杆菌引起，临床上以长期低热、关节酸痛、肝脾肿大和慢性化为特征的传染病。 (1)白细胞(WBC)计数及分类(DC)检查:WBC正常或减少，其中淋巴细胞(L)或单核细胞增多。 (2)血清学检查:用凝集试验、ELISA等法，特异性抗体测定可为阳性。 (3)皮内试验:以布氏杆菌做皮内试验，如阳性，表示曾感染或正在感染本病。 (4)布氏杆菌脱氧核糖核酸(DNA)测定:如为阳性，有确定诊断意义。 (5)病原学检查:血、骨髓、淋巴组织、脓性物或脑膜炎患者的脑脊液培养，均可为阳性，其中以骨髓培养阳性率最高。布氏杆菌病检查项: 1、白细胞(WBC或LEU) 2、白细胞分类(DC) 3、脑脊液涂片检查及细菌培养 4、T淋巴细胞 5、外斐反应(变形杆菌凝集试验,WFR) 6、布氏杆菌凝集试验(BAT) 7、腺病毒酶联免疫吸附试验(ELISA) 8、呼吸道合胞病毒酶联免疫吸附试验(ELISA) 白细胞(WBC或LEU)(正常值及其临床意义) 【单位】个/升(个/L) 【正常值】成人白细胞数为(4.0～10.0)×109/升。儿童随年龄而异，新生儿为(15.0～20.0)×109/升;6个月～2岁为(11.0～12.0)×109/升;4～14岁为8.0×109/升左右。【临床意义】 (1)增多:常见于急性细菌性感染、严重组织损伤、大出血、中毒和白血病等。 (2)减少:常见于某些病毒感染、血液病、物理及化学损伤、自身免疫性疾病和脾功能亢进等。白细胞分类(DC)(正常值及其临床意义)

【单位】百分比(常用1.0表示100%) 【正常值】 (1)嗜中性粒细胞(N):成人0.40～0.75(40%～75％)，儿童0.30～0.65(30%～65%)。 (2)嗜酸性粒细胞(E):0.005～0.05(0.5%～5%)。 (3)嗜碱性粒细胞(B):0～0.01(0～1%)。 (4)淋巴细胞(L):成人0.20～0.45(20%～45%)，儿童0.3～0.56(30%～56%)。 (5)单核细胞(M):成人0.02～0.06(2%～6%)，儿童0.02～0.08(2%～8%)。【临床意义】 (1)嗜中性粒细胞(N):增多或减少，同白细胞(WBC)。 (2)嗜酸性粒细胞(E):①增多。常见于过敏性疾病，寄生蚓病，某些皮肤病(如湿疹、牛皮癣等)，慢性粒细胞性白血病，淋巴肉瘤，鼻咽癌，肺癌等。②减少。常见于伤寒、副伤寒早期、大手术、烧伤等应激状态及长期应用肾上腺糖皮质激素后。 (3)嗜碱性粒细胞(B):①增多。常见于白血病、某些转移癌、骨髓纤维化、脾切除后及铅、锌中毒等。②减少。无临床意义。 (4)淋巴细胞(L):①增多。见于某些病毒或细菌所致的传染病、急慢性血液病、药物反应、变态反应、溶血性贫血等。②减少。见于淋巴细胞破坏过多(如x线照射、化疗、应用肾上腺糖皮质激j素或淋巴细胞毒素等)，免疫缺陷病，霍奇金病及尿毒症等。 (5)单核细胞(M):①增高。常见于感染、血液病、胶原性疾病等。②减少。无临床意义。脑脊液涂片检查及细菌培养(正常值及其临床意义) 【正常值】阴性，但有时可见到一些污染菌，如枯草杆菌、葡萄球菌和类白喉杆菌等。【临床意义】如从脑脊液中查出细菌，而又非污染或误入，均应视为病原菌，对神经系统的细菌或真菌感染有诊断意义，而对中枢神经系统的病毒性疾患无诊断意义。病理性脑脊液标本中可能出现的细菌如下:革兰阳性菌有肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、消化链球菌、四联球菌、结核分枝杆菌、炭疽杆菌和单核细胞增多性李氏杆菌；革兰阴性菌有脑膜炎奈瑟菌、卡他布兰汉菌、流感杆菌、沙门菌、大肠杆菌、产气肠杆菌。其他还有新生(型)隐球菌、白色念珠菌和钩端螺旋体。 T淋巴细胞(正常值及其临床意义)

布鲁氏菌病防治技术规范

布鲁氏菌病防治技术规范布鲁氏菌病（Brucellosis，也称布氏杆菌病，以下简称布病）是由布鲁氏菌属细菌引起的人兽共患的常见传染病。我国将其列为二类动物疫病。为了预防、控制和净化布病，依据《中华人民共和国动物防疫法》及有关的法律法规，制定本规范。 1 适用范围本规范规定了动物布病的诊断、疫情报告、疫情处理、防治措施、控制和净化标准。本规范适用于中华人民共和国境内一切从事饲养、经营动物和生产、经营动物产品，以及从事动物防疫活动的单位和个人。 2 诊断 2.1 流行特点多种动物和人对布鲁氏菌易感。布鲁氏菌属的6个种和主要易感动物见下表：

[杆菌,牛布氏]牛布氏杆菌病的诊断与防治

[摘要] 在牛养殖过程中，会出现很多种疾病，其中牛布鲁士杆菌疾病的发生将会给养殖户造成巨大的经济损失，同时，还会严重影响到人体的生命健康安全。牛布鲁士杆菌疾病又称为布病，是一种人畜共患的疾病，其主要会危害到牛的生殖系统，母牛感染该种疾病之后会，在妊娠期会出现流产现象，即使犊牛能够正常的生产下来，其体质虚弱，多半会在半途夭折，公牛感染该种疾病之后，会引发出现睾丸炎、附睾炎等生殖系统疾病。最近几年，随着牛养殖产业不断发展，布病的发病呈现高发的趋势，因此，在牛养殖过程中，做好牛布病的诊断和防治工作就显得十分重要了。本文主要就牛布鲁士杆菌的疾病的临床症状和诊断方法进行了分析和研究，并提出了相应的防治对策，希望通过本次研对更好的促进该种疾病的预防和治疗有一定的帮助。 [关键词] 牛养殖产业布鲁士杆菌病诊断方法防治对策牛的布鲁士杆菌疾病是由布鲁士杆菌引起的一种人畜共患的疾病，其主要会对牛的生殖器产生严重危害，会造成母牛出现不孕或者流产和公牛睾丸炎和附睾炎的发生。该种疾病的分布十分广泛，其中对性成熟的公牛和母牛的危害最为严重。因此，在日常饲养过程中，应该切实做好该种疾病的预防和诊断工作，及时发现及时治疗，杜绝传染源，切断疾病的传播途径。 1 病原学分析布鲁士杆菌为形态不规则的革兰氏阴性微小杆菌，其呈现无鞭毛，且不成形的芽孢和加膜。该种细菌对外界的抵抗能力较强，在被污染的水源和土壤中，能够存活20天以上，这就为疾病预防工作带来的严重的阻碍，但是该种病菌对一般的消毒剂和抗生素具有较强的敏感性，可以利用其这一个特性对该种疾病进行预防。 2 流行特点病牛和带病菌的牛是布鲁氏杆菌病的主要传染源，患病的母牛在妊娠流产和生产过程中，会将大量的布鲁氏杆菌排出体外，其中在母牛的生殖器分泌物和母乳中含量最高。该种疾病传播的主要途径是消化道，同时，也可以借助皮肤、粘膜和吸血的昆虫的叮咬进行传播。其中牛对布鲁氏杆菌病的易感性是随着性器官的逐渐成熟而逐渐升高，犊牛对该种疾病表现为一定的抵抗力。 3 临床症状分析牛的布鲁氏杆菌病的潜伏期一般为2～6周左右，在潜伏期内缺少明显的全身症状，妊娠母牛最为显著的临床症状就是流产，其可以发生在母牛妊娠的各个时期，通常情况下会发生在妊娠期的6～8个月之间。母牛流产前可以见到在阴道处出现大量的红色结节，同时流出灰白色的粘液，大多数母牛流产后，会从阴道中持续排除污秽物，颜色呈现棕红色或者灰色，持续时间较长，并伴有恶臭气味。布鲁氏杆菌病会严重影响到母牛再次受孕，公牛常见的临床症状为关节肿胀，出现睾丸炎和附睾炎。

34.国家布鲁氏菌病防治计划(2016—2020年)

国家布鲁氏菌病防治计划（2016—2020年）为贯彻落实《国家中长期动物疫病防治规划（2012—2020年）》（以下简称《规划》），进一步做好全国布鲁氏菌病（以下简称布病）防治工作，有效控制和净化布病，根据《中华人民共和国动物防疫法》（以下简称《动物防疫法》）、《中华人民共和国传染病防治法》等有关法律法规，制定本计划。一、防治现状布病是由布鲁氏菌属细菌引起牛、羊、猪、鹿、犬等哺乳动物和人类共患的一种传染病。我国将其列为二类动物疫病。世界上170多个国家和地区曾报告发生人畜布病疫情。上世纪50年代布病曾在我国广泛流行，疫情严重地区人畜感染率达50% 。20世纪80—90年代，由于加大防控力度，疫情降至历史最低水平。近年来，随着我国家畜饲养量不断增加，动物及其产品流通频繁，部分地区布病等人畜共患病呈持续上升势头，不仅严重影响畜牧业生产，也严重危及人民身体健康和公共卫生安全。自2012年《规划》颁布以来，各级畜牧兽医、卫生计生等有关部门在当地党委政府领导下，进一步加大工作力度，密切合作，认真落实监测、检疫、消毒、扑杀和无害化处理等综合防治措施，大力推广布病防治试点经验，防治工作取得积极成效，对迅速遏制疫情上升态势起到了积极作用。但是受我国布病疫源广泛存在、防治经费投入不足以及基层防疫体系薄弱等因素的影响，人畜间布病疫情仍较严重，防治任务依然艰巨，防治工作面临严峻挑战。2015年，全国报告人间布病病例56989例，人间病例仍处于历史高位；畜间布病流行严重地区的15个省份，监测阳性率同比上升0.38% 。据对布病重点地区22个县248个定点场群的监测与流行病学调查结果，牛羊的个体阳性率分别达到3.1% 和3.3% ，群体阳性率分别达到29% 和34% 。

布氏杆菌病与乳制品生产

布氏杆菌属（Brucella）是一类革兰氏阴性的短小杆菌，牛、羊、猪等动物最易感染，引起母畜传染性流产。人类接触带菌动物或食用病畜及其乳制品，均可被感染。布氏杆菌病广泛分布世界各地。我国部分地区曾有流行，现已基本控制。布氏杆菌也是帝国主义者列为失能性生物战剂之一。布氏杆菌属分为羊、牛、猪、鼠、绵羊及犬布氏杆菌6个种，20个生物型。中国流行的主要是羊（Br.melitensis）、牛(Br.Bovis)、猪(Br.suis)三种布氏杆菌，其中以羊布氏杆菌病最为多见。病理布氏杆菌感染布氏杆菌首先感染家畜。家畜临床表现不明显。但怀孕的母畜则极易引起流产或死胎，所排出的羊水、胎盘、分泌物中含大量布氏杆菌，特别有传染力。而其皮毛，尿粪，奶液中均有此菌。排菌可长达三个月以上。人通过与家畜的接触，服用了污染的奶及畜肉，吸入了含菌的尘土或菌进入眼结合膜等途径，皆可遭受感染。发病年龄大多在30岁以上。该菌自损伤的皮肤及粘膜或消化道，呼吸道进入人体后，首先被吞噬细胞吞噬，进入淋巴结，有时可在其中存活并生长繁殖形成感染灶，约2～3周后可进入血液循环产生菌血症。继之在网状内皮系统如肝，脾，骨髓内生长形成新的感染病灶，并可多次反复冲破细胞进入血循中，则再一次引起菌血症和临床急性症状，表现为平均2～3周的发烧期，每间隔约3天至两周，发烧又反复，产生波浪状的热型，故称为波浪热。同时，布氏杆菌含有内毒素及菌体本身皆可引起人体的过敏，出现各种的变态反应性病变。骨关节病变，多发生在半年左右，少数病例更早些。布氏杆菌骨髓炎是血源性布氏杆菌感染在骨关节的局部表现。任何骨均可受累，但以脊椎炎最为

多见。关节的病变常侵犯大关节，以髋关节炎最为常见。生物学性状本菌属初次分离培养时多呈小球杆状，毒力菌株有菲薄的微荚膜，经传代培养渐呈杆状，革兰氏染色阴性。本菌为严格需氧菌。牛布氏杆菌在初次分离时，需在5～10%CO2环境中才能生长，最适温度37℃，最适的pH6.6～7.1,营养要求高，生长时需硫胺素，烟草酸和生物素，泛酸钙等，实验室常用肝浸液培养基或改良厚氏培养基。此菌生缓慢，培养48小时后才出现透明的小菌落，鸡胚培养也能生长。在自然界中抵抗力较强，在病畜的脏器和分泌物中，一般能存活4个月左右，在食品中约能生存2个月。对低温的抵抗力也强，对热和消毒剂抵抗力弱。对链霉素、氯霉素和四环素等均敏感。布氏杆菌具有二种抗原成份：A（牛布氏杆菌主要抗原成份）和M（羊布氏杆菌主要抗原成份）。二种抗原在各种菌中含量不同，牛布氏杆菌（Am）含a 抗原多，含M抗原少。羊布氏杆菌(aM)含M抗原多，而含A抗原少。可利用凝集吸收试验制备出单因子血清～～单价A或M血清，供菌种鉴定之用。牛布氏杆菌病一、临床症状潜伏期2周至6个月。母牛流产是本病的主要症状，常发生于怀孕第5～8个月，产出死胎或软弱犊牛。流产时除表现分娩征象外，常有生殖道发炎症状，阴道粘膜发生粟粒大小的红色结节，流出灰白色粘性分泌物。胎衣往往滞留，流产后持续排出恶露，呈污灰色或棕红色，可持续2～3周。常发生子宫内膜炎、乳房炎。大多数母牛只流产1次。公牛常发生睾丸炎或关节炎、滑膜囊炎，有时可见阴茎红肿，睾丸和附睾肿大。二、病理变化常见的病变是妊娠母牛的子宫与胎膜病变变化较突出。子宫绒毛膜间隙有污灰色或黄色无气味的胶样渗出物。绒毛膜因充血呈紫红色，表面覆以黄色坏死物或污灰色脓液。胎膜因水肿而肥厚，呈胶样浸润，表面覆以纤维素和浓汁。流产胎儿主要呈败血症变化，脾与淋巴结肿大，肝脏中有坏死灶，肺常见支气管肺炎，胃肠膀胱的浆膜下可见有点状或线状出血。公牛主要发生化脓坏死性睾丸炎或附睾炎。睾丸显著肿大，被膜与浆膜层粘连，切面可见到坏死灶或化浓灶。阴茎红肿，其粘膜上有时可见小而硬的结节。三、实验室检验用平板凝集试验和试管凝集试验相结合的方法检验。虎红平板凝集试验的方法：将被检血清与布鲁氏菌虎红平板抗原各0.03毫升滴于玻璃板上混匀，在室温下4～10分钟呈现结果，出现凝集现象为阳性反应，完全不凝集的为阴性。受检血

布病试管凝集试验

布病试管凝集试验一、实验前准备 1、试管的准备 ①把试管浸泡于带有洗涤剂的温水中30分钟，浸泡后用试管刷将其刷干净。先用自来水冲洗10遍，再用去离子水冲洗1遍。 ②试管冲洗干净后倒置于篮子中，等水沥干后置干燥箱中，160℃干燥3个小时（整个干燥过程需要5~6个小时）。 ③实验前要配置0.5%的石炭酸生理盐水配置方法：称取0.5克石炭酸，加入100ml的生理盐水中，配置后置高压锅中121℃高压30分钟。 2、试剂的准备 ①标准抗原:按照说明书使用。使用时充分摇匀，用稀释液作1，20(工作浓度)稀释。 ②标准阳性血清冻干品，使用前用蒸馏水溶解至规定容积。 ③标准阴性血清:冻干品，使用前用蒸馏水溶解至规定容积。 3、被检血清 ①按常规方法采血分离血清血清必须新鲜，无明显蛋白絮凝物、无溶血和无腐败气味。 ②运送和保存血清样品防止血清冻结和受热，以免影响凝集价。若3d内不能送到实验室，可用冷藏方法运送血清。二、试验操作过程 1、确定被检血清的稀释度牛、马、骆驼稀释用1:50,1：100,1：200,1：400(4个稀释度);猪、山羊、绵羊和狗用1：25,1:50,1:100,1:200(4个稀释度)。大规模检疫时也可用2个稀释度，即牛、马、骆驼用1：50,1：100，猪、山羊、绵羊和狗用1:25,1:50,为测定强阳性血清效价，稀释度可以增加。 2、稀释被检血清--猪、山羊、绵羊和狗血清的稀释 ①每份被检血清用4支试管，标记检验编号后第I管加1.15 mL稀释液，第2-4管各加人0.5 m L稀释液。 ②取被检血清0.1 mL，加人第1管，充分混匀后吸弃0.25 mL。 ③从第1管中吸取0.5mL加人到第2管，混合均匀后，再从第2管吸取0.5 m L至第3管，如此倍比稀释至第4管，从第4管弃去0.5 mL，稀释完毕。 ④从第1至第4管的血清稀释度分别为1：12.5,1：25,1：50,1：100。 3、加抗原将0. 5 m L抗原(1:20)加入已稀释好的各血清管中，并振摇均匀，猪、羊或狗的血清稀释则依次变为1 : 25,1 : 50,1 : 100,1：200，牛、马和骆驼的血清稀释度则依次变为1：50,1：100,1：200,1:400。各反应管反应总量为1 mL。 4、设立对照--每次试验都应设立下列对照。