改良番红O-固绿软骨染色液

改良番红O-固绿软骨染色液

简介：

软骨组织由软骨细胞和软骨基质组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。

改良番红O-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织与骨组织区分开。番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团(硫酸软骨素或硫酸角质素)结合。番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系，间接反映基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨受到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，从而导致番红O淡染或不着色。通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析，固绿与胶原纤维结合，不宜褪色，番红O-固绿染色的分化很关键，分化过度易导致切片不着色，分化不足易导致切片着色过深。

组成：

编号名称DB0082

5×50ml

DB0082

5×100ml

Storage

试剂(A) A1: Weigert A液25ml 50ml RT 避光A2: Weigert B液25ml 50ml RT

取A1、A2等量混合即为Weigert染液，24h后失去染色力，不宜预先配制。

试剂(B): 酸性乙醇分化液50ml 100ml RT

试剂(C): 固绿染色液50ml 100ml RT 避光

试剂(D): Safranin O stain 50ml 100ml RT 避光

使用说明书1份

自备材料：

1、10%福尔马林固定液

2、脱钙液

3、蒸馏水

4、系列乙醇

操作步骤(仅供参考)：

1、标本的处理：福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。

2、常规脱蜡至水。

3、入新鲜配制的Weigert染液染色。

4、酸性乙醇分化液分化。

5、蒸馏水洗。

6、入固绿染色液内浸染，蒸馏水洗。

7、入Safranin O stain内浸染，蒸馏水洗。

8、用乙酸溶液洗涤切片，以便去除残留的固绿，蒸馏水洗1min。

9、分别用乙醇、无水乙醇脱水。

10、二甲苯透明，光学树脂封固。

染色结果：

软骨基质深红色

软骨细胞核蓝色

细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织呈灰绿色

软骨细胞浆红色

细胞核灰黑色

注意事项：

1、需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。

2、Weigert染液不可预先配制后放置，配制好后一般24h后失去染色力。

3、切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。

4、切片分化时间应恰当，以背景呈绿色为宜。

5、Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。

6、95%乙醇脱水时间不宜过长。

7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：12个月有效。

相关：

编号名称

DC0032Masson三色染色液

TE0002碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(PNP微板法)

苏木素-伊红染色液 (混合型)

苏木素-伊红染色液(H-E)说明书 【产品名称】 苏木素-伊红染色液(H-E） 【型号】 混合型 【包装规格】 货号：DH0003 单瓶包装规格分别为：50ml、100ml、250ml、500ml、5000ml。 【预期用途】 主要用于对细胞组织进行染色。 【检验原理】 苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色，本染色液系将苏木素和伊红混合成一种溶液，染色后可不分化即可达到常规HE染色效果。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 苏木素-伊红染色液(H-E）混合型苏木色精伊红 【储存条件及有效期】 5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。 【样本要求】 涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。 【检验方法】 l、石蜡切片于二甲苯I、II中各脱蜡若干分钟； 2、经无水乙醇和95%乙醇各约若干分钟，经80%乙醇若干分钟，自来水冲洗若干分钟； 3、苏木素-伊红染色液(H-E）(混合型)染色若干分钟； 4、自来水冲洗返蓝若干分钟；亦可用碳酸锂水溶液返蓝若干分钟，自来水洗若干分钟； 5、95%乙醇I、II中各调色约若干分钟，时间不宜过长； 6、无水乙醇I、II中各脱水若干分钟，二甲苯I、II中各透明I、II中各透明若干分钟； 7、封片胶封片，镜检。 【检验结果的解释】 细胞核呈蓝紫色，细胞质、间质、各种纤维呈不同程度的红色。 【检验方法的局限性】 仅供细胞和组织形态学观察染色使用。 【产品性能指标】 pH值(25℃±1℃)应为2.4±0.5。 【注意事项】 1、温度较低时染色液不易着色，可适当延长染色时间。

软骨染色液(番红O法)步骤及注意事项

软骨染色液(番红O法)步骤及注意事项 货号：G2540 规格：100ml 有效期：12个月有效 产品简介： 软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。 番红0软骨染色的原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色。番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。 自备材料： 10%福尔马林固定液、脱钙液、蒸馏水、Weigert铁苏木素、系列乙醇等。 操作步骤（仅供参考）： 1.标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。 2.常规脱蜡至水。 3.入新鲜配制的Weigert染液染色3-5min。 4.酸性乙醇分化液分化15s。 5.蒸馏水洗10min。 6.（可选）在固绿染色液内浸染5min，蒸馏水洗1min。 7.入Safranin O stain内浸染1-2min，蒸馏水洗1min。 8.分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。

9.二甲苯透明，光学树脂封固。 染色结果： 软骨基质深红色 软骨细胞核蓝色 软骨细胞浆红色 细胞核灰黑色 注意事项： 1.需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。 2.Weigert苏木素染液不可预先配制后放置，配制好后一般24h失去染色能力。 3.切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。 4.Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。 5.95%乙醇脱水时间不宜过长。 6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

伊红染色液使用说明及注意事项

伊红染色液使用说明及注意事项 货号：G1100 规格：100ml/500ml 保存：本试剂常温保存，复检期为1年。 产品说明： 伊红是一种酸性生物染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。 伊红染色液操作简单，不使用汞、甲醇等有毒试剂，可以用于组织切片或培养细胞的染色，染色后细胞浆呈粉红色或红色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。染色过程需要优化，着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。本产品为工作液，可直接使用。 操作说明： 1、样品处理 a)对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5-10分钟，换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟，无水乙醇5分钟，90%乙醇2分钟，70%乙醇2分钟，蒸馏水2分钟。 b)对于冰冻切片：经固定的切片置蒸馏水2分钟。 c)对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10分钟以上，蒸馏水洗涤2分钟，换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。 2、伊红染色 伊红染色液染色染色2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。 用蒸馏水洗去多余染料，此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。注：如果用于免疫组化等染色后的复染，可以参考上述步骤在其它染色完成后直接进行伊红染色。 3、进行其它染色

如果进行免疫荧光染色，伊红染色液染色后，蒸馏水洗去多余染料，70％乙醇洗涤2次，每次2分钟,再用PBS或生理盐水、TBS、TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟，然后就可以进行免疫荧光染色或其它的染色。 注意事项： 1、染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。样品数量很多时，可使用染色架和染色缸，以便于操作。 2、第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。 3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

伊红染色液(水溶)

仅供科研版本号：170602 伊红染色液(水溶) 【产品组成】 【保存条件】 室温,避光,12个月 【产品概述】 伊红(Eosin)又称曙红，属人工合成染料中的呫吨类染料，为桃红色或粉红色的粉末。分子式为 C20H6O5Br4Na2，分子量为691.86。伊红最适宜不苏木精配合染色以显示正常或病理组织的形态结构。水溶性伊红Y含有一个醌型苯环的发色团和两个形成钠盐的酸性助色团(R-COONa、R-ONa)。这种形成盐类的酸性染料在水中溶解时解离为带负电荷的色酸部分(R-COO-、R-O-)，即染料的有色部分和带正电荷的钠离子部分(Na+)。染色时伊红Y带负电荷的色酸部分不组织内带正电荷的物质以离子键的形式结合而显色。 伊红染色液(Eosin Y Stain)采用特有防腐剂，操作简单，丌使用汞、甲醇等有毒试剂，可以用于组织切片或培养细胞的染色。可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在伊红染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行伊红复染。本染色液可以重复使用，直至认为效果丌佳时再换用新的染色液，染色后细胞浆呈粉红色或红色。 【使用方法】 1、样品处理 a)对于石蜡切片: 二甲苯中脱蜡5~10min。换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5~10min。无水乙醇5min。90%乙醇2min。70%乙醇2min。蒸馏水2min。 b)对于冰冻切片: 蒸馏水2min。 c)对于培养细胞: 用4%多聚甲醛固定10min以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2min。 2、伊红染色 对于上述处理好的样品，伊红染色液染色0.5~2min(根据染色结果和要求调整时间)。如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。 注：如果用于免疫组化等染色后的复染，参考上述步骤在其它染色完成后进行伊红染色。 3、脱水、透明、封片或进行其它染色 a)脱水、透明、封片： 95%乙醇脱水2min。换用新鲜的95%乙醇再脱水2min。二甲苯透明5min。换用新鲜的二甲苯，再透明 5min。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察，细胞浆呈粉红色或红色。 b)进行其它染色： 南京森贝伽生物科技有限公司网址：https://www.wendangku.net/doc/bb6666051.html,/ 第1页

常用染色液配方

实验室常用染色液配方 1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液 A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升 B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。 2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升 B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升 将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。将两者混合即成。 3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升 B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升 将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。两液混合即成。 4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。 5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升 6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。 7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。 8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升 9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.0 10、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。 11动物组织石蜡切片染色方法 苏木精-伊红(HE)染色：二甲苯Ⅰ, Ⅱ各10 min，依次进入无水乙醇、950 mL/L, 900 mL/L, 800 mL/L及700 mL/L的酒精各5 min，蒸馏水洗；入苏木精染液10 min，盐酸酒精分色4 s，自来水洗10 min；依次入700 mL/L, 800 mL/L及900 mL/L酒精各5 min，入伊红染液染色 10 min；入950 mL/L及无水乙醇Ⅰ, Ⅱ各5 min, 以二甲苯透明，中性树脂封片. 一、常用染色液的配制 ⒈碘-碘化钾（I2-KI）溶液能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂。 配方：碘化钾2g ；蒸馏水300ml ；碘1g 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL，保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍，这样染色不致过深，效果更佳。 ⒉苏丹Ⅲ（sudanⅢ或Ⅳ）能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色，是著名的脂肪染色剂。 配方：（1）苏丹III或苏丹Ⅳ干粉0.1g ；95％酒精10ml ；过滤后再加入10ml甘油（2）先将0.1g苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。 （3）苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。 ⒊1％醋酸洋红（aceto carmine）酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红色，细胞质成浅红色。

伊红染色液溶液的配制方法

伊红染色液配制方法 溶液的配制方法如下： 华越洋伊红染色液：100ml 伊红染料配方较多在常规配方中，有的染色效果好，但操作较繁琐，且消耗较多试剂。有的操作简单，但染色时间长，染液有效期短，常需加入冰醋酸，但加入剂量不易掌握，量少达不到促染作用，加入过多染液易沉淀，且引起色调不正，特别是容易褪色，染色结果不能长期保存。为此，对伊红Y染色液配制进行了改进。改进后的方法具有操作简便、经济、染色性质稳定、着色力强且持久颜色鲜艳等优点； 制备方法：伊红Y1G，蒸馏水90ML，苦味酸饱和水溶液10ML。将蒸馏水加入伊红，待其全部溶解后，加入苦味酸饱和水溶液。 染色结果观察：染色时间0.5-1分钟。伊红所着的颜色鲜艳，层次分明，与蓝色的细胞核对比突出。 伊红Y（四嗅荧光素二钠盐，分子式：C20-H6O5Br4NO2）是一种酸性红色胞浆性染料，室温下，在水中的溶解度度远大于在酒精中的溶解度。它在溶液反应中，由于钠离子的存在而呈碱性状态。苦味酸[分子式：（NO2）3C6HOH]是一种较强的酸性染料，它的颜色是由硝基发色团所致，染色性能是由羟基助色团产生的。苦味酸具有三种作用：1本身是一种胞浆染料，具有染色作用。2又是一种酸，加入伊红Y染色液中，使染色造成比胞浆等电点略为酸性的环境，抑制了部分氨基酸中羟基官能团，从而使氨基酸中氨基官能团和酸性染料结合，增加了染液与组织间的亲和力，起到促染作用。3苦味酸又是一种氧化剂，在染色体中经过氧化物作用后，使染色剂与组织成份结合的更牢固。组织着色鲜艳，染色后不易褪色，因而切片可长期保存。 华越洋伊红染色液操作简单，不使用汞、甲醇等有毒试剂，可以用于组织切片或培养细胞的染色。 本伊红染色液染色后细胞浆呈粉红色或红色。 本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本伊红染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行伊红复染。 本染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。

番红固绿切片染色快速法不使用石蜡

番红固绿染色简化法 ----------仅限观察植物苗期主根部导管1目的要求： 由于专业的番红固绿需要使用超薄切片机，其功能繁琐，并十分耗时，其主要包括染色，包埋，切片，脱蜡，复染等多个步骤，这里不再赘述。若没有切片机，我们往往要四处奔走求人并支付高昂的费用。经本人亲自实验和总结，采用传统常规染色法，在不使用切片机和钞票的条件下，整理如下流程。若只作为一般实验的验证，样品的容量不大并不需要长期保存的情况下，不需要超薄切片机，只需使用双层刮胡刀片，显微镜可以观察1毫米左右的切片。直径最好大于1mm，肉眼可分辨，一般只用于观察主根。为切片方便，可稍微将根晾干，再进行横切或纵切。 根据对刊用插图(照片)总的要求得出，文稿插图(含照片)的应用以少而精为原则。凡是能用文字说明的,应尽量不用插图,能用线条图表示的,就不用照片图;能用单色图表示的,就不用彩色图。即使是线条图也尽量避免搞成大幅的插页图,以便于编排和印刷。插图的线条必须准确,主次分明,清晰可辨,便于读者理解文字的内容。若切片够均匀，线条够清晰，也可作为论文插图。 2实验步骤： 2.1实验准备： 2.2材料：目的植物新鲜根部，刮胡刀刀片两片，越锋利越好，但注意安全。常规染色用品。 2.3试剂：无水酒精，95%酒精，蒸馏水，预先备制的苯胺番红试剂和苯胺固绿试剂（最好放置一段时间，可提前一月配置，效果更好，但不必要），二甲苯和50%体积无水乙醇和50%体积二甲苯混合液。 3实验步骤： 3.1切片： 按照前文介绍方法切片，若视力好，手法稳，可用单个刀片细细切下，要求，横切厚度在1mm左右，并呈透明圆形，确保中心完好。 3.2染色： 1）滴1-2滴无水酒精； 2）吸去无水酒精用95%酒精冲洗，使其平铺于玻片，酒精分散均匀； 3）第1滴蒸馏水与材料上，是材料包裹于水滴中； 4）滴1-2滴苯胺番红试剂，染色1-3min； 5）使用95%酒精冲去浮色并脱水，处理至透明状态，韧皮部分由于富集细胞壁，颜色可以偏红，其余部分为粉色透明状； 6）少量（一小滴）苯胺固绿复染，并迅速吸去，并滴入无水酒精，操作在2s内完成； 7）继续用无水乙醇洗脱至半透明状，以为无集中色斑为佳； 8）各50%体积的无水酒精和二甲苯混合物，1-2滴； 9）滴1-2滴二甲苯透明； 10）擦去材料以外药剂，使玻片清洁，可不使用盖玻片，一定不能使材料山的二甲苯干掉； 11）镜检。

HE(苏木素-伊红)染色试剂盒使用说明书

HE（苏木素-伊红）染色试剂盒使用说明书 货号：L9406 规格：10ml/100ml 保存：本试剂盒常温保存，复检期至少1年。 注意：环境温度低时，分化液可能会结晶析出，将分化液37℃水浴融化后即可，不影响使用。 产品说明： 苏木精-伊红染色法( Hematoxylin-Eosin staining )，简称HE染色法，切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。 染色过程需要优化，着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。例如，很多 细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在 老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。 本产品所包含试剂均为工作液，可直接使用。 操作说明： 石蜡组织切片的HE染色（以下步骤仅供参考）。 1．取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，切片。 2．切片用二甲苯脱蜡，经各级乙醇至水洗：二甲苯（I）5min→二甲苯（Ⅱ）5min→100％乙醇2min→95％乙 醇1min→80％乙醇1min→75％乙醇1min→蒸馏水洗2min。 3．苏木素染液染色5-20min(可以根据染色结果和要求调整时间)，自来水冲洗。 4．分化液分化30s。 5．自来水浸泡15min或温水（约50℃）5min。 6．置伊红染液2min。 7．自来水冲洗。 8．常规脱水，透明，封片：95％乙醇（I）1min→95％乙醇（Ⅱ）1min→100％乙醇（I）1min→100％乙醇（Ⅱ）1min→二甲苯石碳酸（3：1）1min→二甲苯（I）1min→二甲苯（Ⅱ）1min →中性树脂封固，镜下观察。 冰冻切片不用脱蜡，可固定后直接染色，其方法与石蜡切片相同。

常用染色液的配制

常用染色液的配制 1.吕氏（Loefflev）美蓝染色液 A液：2%美蓝（Methylene blue）95%酒精溶液 B液：10%KOH溶液 取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。 2.石炭酸复红染色液 A液：4%碱性复红（basic fuchsin）95%酒精溶液 将碱性复红在研钵中研磨后，逐渐加入95%酒精，继续研磨使其溶解、 配成A液。 B液：5%石炭酸溶液 取A液10ml、B液90ml混合即可。一般可将此溶液稀释5-10倍使用。 但稀释液易变质失效，一次不宜多配。 3.革兰氏（gram）染色液 （1）草酸铵结晶紫染液： A液：1%结晶紫（Crystal violet）95%酒精溶液 B液：1%草酸铵（Ammonium oxalate）溶液 取A液20mlB液80ml，静置48/小时后使用。 （2）路哥氏（Lugol）碘液： 碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml 先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液另，待碘全部 溶解后，加够水即成。 （3）95%酒精溶液 （4）蕃红（沙黄）复染液： 2.5%蕃红（Safranlne O）95%酒精溶液。 取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。 4.芽孢染色液 （1）5%孔雀绿(Malachite green)溶液。 （2）0.5%蕃红溶液。 （3）苯酚品红溶液 称取11g碱性品红溶于100ml无水酒精中。 再取上述溶液10ml与100ml 5%的苯酚溶液混合，过滤备用。 （4）黑色素(nigrosin)溶液 10%黑色素溶液，置沸水浴中30min后，滤纸过滤二次，补加水到100ml，

苏木素伊红染色液说明书

苏木素-伊红染色液（H-E）说明书 【产品名称】苏木素-伊红染色液（H-E）H&E Staining System 【产品编号】HE-500ml,HE-1000ml,HE-2500ml 【包装规格】苏木素染色液500ml、1000ml2500ml；伊红染色液500ml、1000ml 2500ml；返蓝染色液500ml、1000ml2500ml。 【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。 【检验原理】苏木素-伊红染色液（H-E）由3部分组成：苏木素染色液、伊红染色液和返蓝染色液。 苏木素氧化后与金属媒染剂作用，可形成不可替代的细胞核颜料。带有正电荷的苏木素-金属媒染剂复合体，易与细胞核内DNA上带负电荷的磷酸基团结合，因而使细胞核染色形成特定的蓝色。 伊红染色液是一种广泛用于组织学染色中与苏木素染色形成对比的染料（HE染色法）。此染色法可观察到清晰的细胞结构。样本中细胞核可经苏木素染色呈蓝色，细胞质经伊红染色呈粉红色。伊红是一种阴离子染料，可将红细胞染成亮红色，同样也可对其他基本的细胞组分（细胞质，胶原及肌纤维）进行染色。 返蓝染色液为组织学染色试剂，可替代水洗，快速使核染色质和核膜显现蓝色。由于其坚硬度和碱性，水冲洗后改变苏木素染核后的颜色。使用BioGnost 返蓝染色液，粘附在玻片上的样本不会发生像使用其他返蓝染色液时发生降解。【主要组成成分】苏木素：乙二醇、苏木素、碘酸钠、硫酸铝；伊红：伊红、乙醇；返蓝染色液：碳酸锂。 【储存条件及有效期】保证产品包装完整的情况下，储存温度在+15°C和+25°C 之间。保持储存环境干燥，不要放置于寒冷的环境中，不要冷冻产品，避免直接阳光直射。产品使用效期为2年，具体效期见标签。 【适用仪器】不适用 【样本要求】使用合适的设备仪器收集组织样本，并标记清楚，根据操作说明进行实验。 为避免发生错误，染色及诊断过程最好由具相关专业知识的技术人员操作。 根据标准医疗诊断实验室标准镜检诊断。 【检验方法】

Luxol Fast Blue髓鞘染色液(伊红法)使用说明书

Luxol Fast Blue髓鞘染色液（伊红法）使用说明书 货号：G3240 有效期：12个月有效。 产品内容： 产品名称规格Storage 试剂(A):Luxol Fast Blue染色液50ml RT避光 试剂(B):Luxol分化液50ml RT 试剂(C):伊红染色液50ml RT避光 产品简介： 髓鞘（myelin sheath）是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜，即髓鞘由髓鞘细胞和细胞膜组成，是神经细胞的质膜沿着轴索的轴心螺旋缠绕形成的多层脂双层结构，髓鞘上有郎飞氏结，可使神经冲动跳跃传递。髓鞘染色在病理诊断中有一定意义，髓鞘的病理变化分为早期、中期和晚期。在早期着色较深；病变中期阶段的髓鞘变性形成脂滴，可用脂质染色加以显示，后期彻底溃变并被吞噬细胞清除，故不再有髓鞘的阳性结果。 很多疾病都可以引起髓鞘的变化，Luxol Fast Blue髓鞘染色可以显示病理情况下髓鞘是否完整、变性、坏死程度及修复情况，对神经组织的病理诊断和研究均有意义，例如神经纤维受损时，髓鞘可出现膨胀、曲折成球形、断裂或脱鞘完全消失等改变。 操作步骤（仅供参考）： 1.石蜡切片5～8μm，脱蜡至水； 2.95%乙醇稍洗； 3.入Luxol Fast Blue染色液，室温过夜（冰冻切片染色时间不超过16h）； 4.入95%乙醇洗去多余染色液；

5.蒸馏水冲洗； 6.入Luxol分化液分色15s； 7.入70%乙醇分色30s至灰白质清晰； 8.蒸馏水冲洗。（如果分色不足，可重复6～7步骤）； 9.入伊红染色液，复染30s～2min，水洗； 10.用95%、100%乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。 染色结果： 髓鞘呈蓝色，背景呈红色。 注意事项： 1.分化这一步很关键，应严格控制分化时间，可在镜下观察分化程度。 2.固定液以10%的福尔马林为佳。 3.切片不宜太厚，应控制在8～9μm以内，否则易出现脱片或过染等现象。 4、如室温染色效果不佳或者缩短染色时间，可在56℃下染色。 5、复染液染色水洗后不能用70%乙醇脱水，否则会脱去luxol fast blue的蓝色。

植物制片的染色及显微化学鉴定方法

植物制片的染色及显微化学鉴定方法 一、目的与要求 1、学习植物制片的一般染色方法。 2、学会并掌握常用显微化学鉴定法，即细胞壁化学组成及细胞内主要后含物性质的鉴定方法。 二、材料和用品 1、自备材料：植物叶片、芹菜叶柄、土豆块茎、花生种子等等，解剖器、剃刀或双面刀片。 2、其它材料和用品：显微镜、载玻片、盖玻片、纱布、吸水纸、蒸馏水、染色缸；0.1%番红、0.1% 固绿或1%苯胺蓝等染液、中性树胶、二甲苯、酒精、碘—氯化锌、盐酸—间苯三酚、苏丹Ⅲ、碘—碘化钾、10%氯化铁、盐酸等。 三、实验内容 1、植物制片的染色方法 2、常用显微化学鉴定法 四、实验方法 1、植物制片的染色方法 用徒手切片法切得的薄片，如果仅仅是为了临时观察，制成临时装片即可，这种临时制片不能长久保存，只能作临时观察之用，又由于没经过染色，结构显示的也不够清晰。为了求得更清晰地显示其细微结构及化学成分，并能够较长时间的保存，可以进一步染色及其它处理以至封片，从而可制成半永久或永久制片。常用的染色方法是番红—苯胺蓝（或固绿）二重染色法，具体操作方法有二： 方法一： （1）将植物切片材料放入30%酒精中，5分钟后移入水中。 （2）用0.1%番红水溶液染色12—24小时。 （3）倒去番红液，用清水冲洗数次后，再放回50%酒精中浸泡5分钟。 （4）将材料从50%酒精中转入70%酒精中脱色，直至硬木质化的细胞壁呈现红色，其它部分呈粉红色或近于无色时为止。 （5） 1%苯胺蓝（用70%酒精配制）对染2—5分钟。若用0.1%固绿对染，则仅需半分钟左右即可。 注意：此步染色，要不时地在显微镜下检视，切忌染色过深，当木质化细胞壁呈红色，其它部分为淡蓝或淡绿色时，即可停止。 （6）用95%酒精冲去多余染液，再经无水酒精脱水5分钟。 （7）放入等量无水酒精与二甲苯溶液中及纯二甲苯中透明各3分钟。 （8）将切片材料移入载玻片上，在二甲苯未干时立即加一滴中性树胶封片，尔后将玻片平放，自然凉干或置于摄氏35度温箱中烘干。 染色结果：木质化细胞壁呈现红色，纤维素细胞壁呈现蓝色或淡绿色。 方法二： （1）将切得的薄片移入盛有FAA固定液的小容器中，盖上盖固定半小时到1小时，24小时以上也可。材料经固定如不及时制片可移入70%酒精中长期保存。 （2）材料从固定液中移入盛有蒸馏水的小培养皿中，漂洗半小时到1小时，换水一次。 （3）将材料移入载玻片上，用吸水纸吸去多余水分，加一滴苯胺番红染色约10分钟。 （4）吸去染液，滴入95%酒精洗两次，去浮色及脱水。 （5）加一滴苯胺固绿复染约2～5秒钟，并轻轻晃动玻片，使染色均匀。（注意：此步骤要迅速，若染色时间过长会使红色全部褪去。） （6）吸去染液，滴入无水酒精洗两次，去浮色及脱水。 （7）滴入等量无水酒精与二甲苯溶液约1分钟后吸去，再滴入纯二甲苯冲洗2次，使材料透明。 （8）擦去材料以外的残存药剂，使玻片清洁，但不使材料上的二甲苯干掉，并及时镜检。 （9）镜检后，如材料的构造清晰，红绿对比鲜明，立即加一滴中性树胶封片。 染色结果同样是木质化细胞壁呈现红色，纤维素细胞壁呈现淡绿色。这种方法更节省时间一些。 2、常用显微化学鉴定法 显微化学鉴定法即将材料经化学试剂处理后，在显微镜下检查、判定细胞壁的化学组成及细胞内含物性质的方

改良番红O-固绿软骨染色液说明书

改良番红O-固绿软骨染色液说明书 货号：G1371 规格：5×50ml/5×100ml 有效期：6个月有效 产品简介： 软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。 改良番红0-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而成绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织和骨组织区分开。番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系，间接反映了基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨受到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，从而导致番红O淡染或不着色。通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析。固绿与胶原纤维结合，不宜褪色。番红O-固绿染色的分化很关键，分化过度易导致切片不着色，分化不足易导致切片着色过深。 产品组成： 名称规格5×50ml5×100ml Storage 试剂(A)A1:Weigert A液25ml50ml RT避光 A2:Weigert B液25ml50ml RT避光临用时，取A1、A2等量混合为Weigert染液，24h后失去染色力，不宜预先配制。 试剂(B):酸性分化液50ml100ml RT 试剂(C):固绿染色液50ml100ml RT避光 试剂(D):Safranin O stain50ml100ml RT避光 试剂(E):弱酸溶液50ml100ml RT 自备材料： 10%福尔马林固定液，脱钙液，蒸馏水，系列乙醇。 第1页，共2页

附录一 染色液的配制 免费

附录一染色液的配制 1、吕氏（Loefflev）美蓝染色液 A液：2%美蓝（Methylene blue）95%酒精溶液 B液：10%KOH溶液 取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。 2、石炭酸复红染色液 A液：4%碱性复红（basic fuchsin）95%酒精溶液 B液：5%石炭酸溶液 将碱性复红在研钵中研磨后，逐渐加入95%酒精，继续研磨使其溶解、配成A液。 取A液10ml、B液90ml混合即可。一般可将此溶液稀释5-10倍使用。但稀释液易变质失效，一次不宜多配。 3、革兰氏（gram）染色液 （1）草酸铵结晶紫染液： A液：1%结晶紫（Crystal violet）95%酒精溶液 B液：1%草酸铵（Ammonium oxalate）溶液 取A液20mlB液80ml，静置48/小时后使用。 （2）路哥氏（Lugol）碘液： 碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml 先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液另，待碘全部溶解后，加够水即成。 （3）95%酒精溶液 （4）沙黄（蕃红）复染液： 2.5%沙黄（Safranlne O）95%酒精溶液。 取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。 4、芽孢染色液 （1）5%孔雀绿(Malachite green)溶液。 （2）0.5%沙黄溶液。 5、荚膜染色液 将黑色素在蒸馏水中煮沸5min，配成5%溶液，然后加入福尔马林（40%甲醛）0.5%(V/V)作防腐剂。 （2）沙黄染色液 与革兰氏染色液中的沙黄复染液相同。

6、鞭毛染色液 A液：单宁酸5.0g、FeC131.5g、蒸馏水100ml，福尔马林（15%）2.0ml、NaOH(1%)1.0ml。 配好后应当日使用，次日即效果差，第三日则不能使用。 B液：2%AgNO3溶液 待AgNO3溶解后，取出10ml备用。向其余的90ml AgNO3中滴入浓NH4OH，使之成为很浓厚的悬浮液，再继续滴加NH4OH，直到新形成的沉淀又重新刚刚溶解为止。再将10ml德用的AgNOa溶液慢慢滴入。此时会出理薄雾，轻轻摇动后，薄雾状沉淀又消失，再滴入AgNO3溶液直到摇动后仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为止。如所呈雾不重，此染液可使用一周；如雾重，则银盐沉淀出，不宜使用。 7、乳酸石炭酸棉蓝染色液 石炭酸2.0g、甘油40ml、乳酸（密度1.21）20ml、蒸馏水20ml、棉蓝（Cotton blue）0.05g 石炭酸在蒸馏水中加热溶解,然后加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,使其溶解即成。 8、富尔根氏（Feulgen）核染色液 （1）Schiff氏试剂：将1g碱性复红加于200ml煮沸的蒸馏水中，振荡5分钟，冷却至50℃左右过滤。加入1.0NHC120ml，摇匀。待冷至25℃时，加Na2S2O5（偏重亚硫酸钠）3g，摇匀后装在棕色瓶中，用黑纸包好，放于暗处过夜，此时试剂应为淡黄色（如为粉红色则不能用）。再用中性活性炭过滤，其滤液振荡1分钟后再过滤，滤液置于冷暗处备用。注意：过滤需在避光条件下进行。 在整个操作过程中所用的一切器皿都需十分洁净、干燥，以消除还原性物质。 （2）Schandium 固定液 取50ml升汞水溶液加95%酒精25ml。 B液：冰醋酸 取A液9ml加B液1ml，混匀后加热至60℃。 （3）亚硫酸水溶液 10%偏重亚硫酸钢水溶液5ml、1MHC115ml、蒸馏水100ml。 9、Albert氏异染颗粒染色液 A液：甲苯胺蓝0.15g、孔雀绿0.2g、95%酒精2ml、蒸馏水

HE(苏木素-伊红)染色试剂盒操作说明及注意事项

HE（苏木素-伊红）染色试剂盒操作说明及注意事项 货号：G1120 规格：3×10ml/3×100ml 保存：常温保存，复检期至少1年。 产品内容G1120-10G1120-100 苏木素染液10ml100ml 分化液10ml100ml 伊红染液10ml100ml 注意：环境温度时，分化液可能会结晶析出，将分化液37℃水浴融化后即可，不影响使用。产品说明： 苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-Eosin staining)，简称HE染色法，是病理学常规制片中最基本的染色方法。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。 染色过程需要优化，着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。例如，很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。 本产品所包含试剂均为工作液，可直接使用。 操作说明（以下步骤仅供参考）： （一）石蜡组织切片染色。 1．取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，切片。 2．石蜡切片脱蜡水化： ①二甲苯（I）中脱蜡5min。

②换用新鲜的二甲苯（Ⅱ），再脱蜡5min。 ③无水乙醇5min。 ④95%乙醇2min。 ⑤80％乙醇2min ⑥70%乙醇2min。 ⑦蒸馏水2min。 3．苏木素染液染色5-20min(具体时间根据染色结果和实验要求调整)，自来水冲洗。4．分化液分化30s。 5．自来水浸泡15min或温水（约50℃）5min。 6．置伊红染液几秒-2min(具体时间根据染色结果和实验要求调整)，自来水冲洗。7．自来水浸泡5min。 8．脱水，透明，封片： ①95％乙醇（I）1min ②95％乙醇（Ⅱ）1min ③100％乙醇（I）1min ④100％乙醇（Ⅱ）1min ⑤二甲苯石炭酸（3：1）1min ⑥二甲苯（I）1min ⑦二甲苯（Ⅱ）1min ⑧中性树胶封固，镜下观察。 （二）冰冻切片 冰冻切片不用脱蜡，可固定后直接染色，其方法与石蜡切片相同。 注意事项：

改良番红O-固绿软骨染色液

改良番红O-固绿软骨染色液 简介： 软骨组织由软骨细胞和软骨基质组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。改良番红O-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织与骨组织区分开。 组成： 编号名称DB0082 5×50ml DB0082 5×100ml Storage 试剂(A) A1: Weigert A液25ml 50ml RT 避光A2: Weigert B液25ml 50ml RT 试剂(B): 酸性乙醇分化液50ml 100ml RT 试剂(C): 固绿染色液50ml 100ml RT 避光试剂(D): Safranin O stain 50ml 100ml RT 避光试剂(E): 乙酸溶液50ml 100ml RT 使用说明书1份 操作步骤(仅供参考)： 1、标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。 2、常规脱蜡至水。 3、入新鲜配制的Weigert染液染色。 4、酸性乙醇分化液分化。 5、蒸馏水洗1min。 6、在固绿染色液内浸染，蒸馏水洗1min。 7、入Safranin O stain内浸染色，蒸馏水洗1min。 8、用乙酸溶液洗涤切片，以便去除残留的固绿，蒸馏水洗1min。 9、分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。 10、二甲苯透明，光学树脂封固。 染色结果： 软骨基质深红色 软骨细胞核蓝色

细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织呈灰绿色 注意事项： 1、需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。 2、Weigert染液不可预先配制后放置，配制好后一般24h后失去染色力。 3、切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。 有效期：6个月有效。

改良番红 O-固绿软骨染色液

第1页，共2页 改良番红G1371 5×50ml/5×100ml 6个月有效 软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O 法等。 改良番红0-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O 结合呈现红色，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而成绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织和骨组织区分开。番红O 是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。番红O 着色与阴离子的浓度近似成正比关系，间接反映了基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨受到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，从而导致番红O 淡染或不着色。通过图像分析软件可对番红O 染色的软骨基质进行定量分析。固绿与胶原纤维结合，不宜褪色。番红O-固绿染色的分化很关键，分化过度易导致切片不着色，分化不足易导致切片着色过深。 10%福尔马林固定液，脱钙液，蒸馏水，系列乙醇。 1、 标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。 2、 常规脱蜡至水。 3、 入新鲜配制的Weigert 染液染色3-5min ，水洗。 4、 酸性分化液分化15s 。 5、 蒸馏水洗10min 。

6、在固绿染色液内浸染5min。 7、快速用弱酸溶液洗涤切片10-15s，以便去除残留的固绿。 8、入Safranin O stain内浸染5min。 9、分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。 10、二甲苯透明，光学树脂封固。 1、需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。 2、Weigert苏木素染液不可预先配制后放置，配制好后一般24h失去染色能力。 3、切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。 4、切片分化时间应恰当，以背景呈绿色为宜。 5、 Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。 6、95%乙醇脱水时间不宜过长。 7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 第2页，共2页

含铁血黄素染色液(伊红法)

含铁血黄素染色液(伊红法) 简介： 含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或棕黄色颗粒，因其 含铁，且为金黄色，故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后，在溶酶体酶的作用下，血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。Perls 普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色，即经过亚铁化钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞或间质内。普鲁士蓝染色用于显示局部组织内的各种出血性病变，常见于吞噬细胞内，可以很好地区分含铁血黄素与其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广，可以进行复染，该染色液的复染液采用伊红。 组成： 操作步骤(仅供参考)： (一)石蜡切片染色： 1、 组织固定于10%中性福尔马林，常规脱水包埋。 2、 切片厚度4μm ，常规脱蜡至水。 3、 蒸馏水水洗1min 。 4、 切片入Perls stain 浸染。 5、 蒸馏水充分冲洗。 6、 入伊红染色液淡染细胞核。 7、 自来水冲洗。 8、 常规脱水透明，中性树胶封固 (二)冰冻切片染色： 1、 无需脱蜡，直接迅速用蒸馏水冲洗2～3min 。 2、 染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。 (三)细胞染色： 1、4%多聚甲醛固定10～20min 。 编号 名称 DJ0002 2×50ml DJ0002 2×100ml Storage 试剂(A): Perls stain A1: Perls stain A 25ml 50ml RT A2: Perls stain B 25ml 50ml RT 临用前，取A1、A2等量混合即为Perls stain ，不宜提前配制。 试剂(B): 伊红染色液 50ml 100ml RT 避光 使用说明书 1份

染色剂配制

常用染色液的配制 1．草酸铵结晶紫染色液 A液：结晶紫2.5g，95%乙醇25mL。 B液：草酸铵1.0g，蒸馏水1000mL。 制备时，将结晶紫研细，加入95%乙醇溶解，配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。两液混合静止48h后，过滤后使用。 2．鲁格尔氏（路戈氏）碘液 碘1.0g，KI 2.0g，蒸馏水300mL。先用3~5 mL蒸馏水溶解KI，再加入碘片，稍加热溶解，加足水过滤后使用。 3．脱色液：95%乙醇；或丙酮乙醇溶液：95％乙醇70mL，丙酮30mL 4．沙黄（番红）染色液 2.5％沙黄（番红）乙醇溶液：沙黄（番红）2.5g，95%乙醇100mL。 此母液存放于不透气的棕色瓶中，使用时取20mL母液加80mL蒸馏水使用。 5．0.1％美兰染色液 0.1g溶解于100mL蒸馏水中。 6．吕氏碱性美蓝色染色液 A液：美蓝0.3g，95%乙醇30mL。 B液：KOH 0.01g，蒸馏水100mL，分别配制A液和B液，混合即可。 7．瑞氏染色液 瑞氏染料粉未0.3g,甘油3mL，甲醇97mL。将染料放乳钵内研磨，先加甘油，后加甲醇，过夜后过滤即可。 8．5％孔雀绿水溶液（芽孢染色用） 孔雀绿5.0g,蒸馏水100mL。先将孔雀绿放乳钵内研磨，加少许95％乙醇溶解，再加蒸馏水。 9．黑色素水溶液（荚膜负染色用）

黑色素10g，蒸馏水100mL，40％甲醛（福尔马林）0.5mL。将黑色素溶于蒸馏水中，煮沸5min，再加福尔马林作防腐剂，用玻璃棉过滤。 10．硝酸银鞭毛染色液 A液：单宁酸5.0g，FeCL3 1.5g，福尔马林(15%) 2.0mL，1%NaOH 1.0mL，蒸馏水100mL。 B液：AgNO3 2.0g,蒸馏水100mL。 将AgNO3溶解后，取出10mL备用，向其它的90mL硝酸银液中加浓氢氧化铵，则形成很厚的沉淀，再继续滴加氢氧化铵到刚刚溶解沉淀成为澄清溶液为之。再将备用的硝酸银慢慢滴入，则出现薄雾，但轻轻摇动后，薄雾状的沉淀又消失，再滴入硝酸银，直到摇动后，仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为之。如雾重，则银盐沉淀出，不宜使用。 11．改良利夫森（Leifson’s）鞭毛染色液 A：20％单宁（鞣酸）2.0mL；B：饱和钾明矾液(20%) 2.0mL；C：5％石炭酸2.0mL；D：碱性复红酒精（95％）饱和液1.5mL。 将以上各液于染色前1~3d，按B加到A中，C加到A、B混合液中，D加到A、B、C混合液中的顺序，混合均匀，马上过滤15~20次，2~3d内使用效果较好。 12．石炭酸复红染色液 A液:碱性复红0.3g，95%乙醇10mL；B液：石炭酸（苯酚）5g，蒸馏水95mL。 先将染料溶解于乙醇，将苯酚溶于水，AB两液混合即可。 13．乳酸石炭酸棉蓝染色液 石炭酸（苯酚）10g，乳酸（比重1.21）10mL，甘油20mL，棉蓝（苯胺蓝）0.21g，蒸馏水10mL。 将石炭酸加入蒸馏水中，加热溶解，再加入乳酸和甘油，最后加棉蓝。 附录Ⅴ：常用缓冲液的配制 1．pH7.0磷酸盐缓冲液（PBS）（20℃pH值7.0~7.1） 甲液：KH2PO4 34.0g，蒸馏水1000mL；乙液：K2HPO4 43.6g，蒸馏水1000mL。 甲液二份和乙液三份混合即可。