硫酸软骨素含量测定方法的研究进展
硫酸软骨素生产工艺
硫酸软骨素生产工艺 动物软骨中均含有酸软骨素，大家畜的鼻中隔及喉头骨中含量较多，据报道，猪鼻中隔含有41%左右。 药物硫酸软骨素是从软骨中提取的硫梳软骨素A和硫酸软骨素C等各种硫酸软骨素的混合物。有的商品称康得灵。本品用于因链、霉素所引起的听觉障碍症的预防和冶疗，如偏头痛、神经痛、风湿痛、肝炎等症。 性状：硫酸软骨素是一种白色粉末，吸水性强，易溶于水而成粘稠液体，不溶于乙醇、丙酮和乙醚等有机溶剂中，其盐类对热较稳定上。 制法：硫酸软骨的制剂和片剂，它的生产工艺主要有稀碱和浓碱和浓碱提取两种，下面各介绍两种。 一、稀碱提取工艺之一 工艺流程： 猪喉（鼻）软骨，浸出氢氧化钠过滤，浸出液，酶水解盐酸、胰酶53～54℃，水解液，吸附活性白土、活性炭，沉淀氯化钠、乙醇，PH值6.3～7，沉淀物，干燥无水乙醇60～65℃，干品，制剂氯化钠P值5.5，注射液。 操作过程： 浸出：将2%氢氧化钠250千克置浸泡罐内，加入洁白干燥软骨40千克，在室温下每隔半小时缓缓搅拌1次，待浸出液比重达波美5.0（20℃）度时出料。用纱布过滤。骨渣再用适量蒸镏水浸泡20分钟，过滤。二次过滤液合并，使滤液总体积为200升。 酶解：将上述滤液置消化罐中，搅拌下缓缓加入1：1盐酸并调PH值8.8～9.0，用循环水浴加热。罐内温度达50℃时加入相当于1：25倍胰酶1300克（宜使用高倍的胰酶）继续升温，控制消化温度为53～54℃，不得超过50℃循环水浴温度55～57℃保持，水解7小时。在水解过程中，由于氨基酸的增加，PH值会有下降，需用10%的氢氧化钠随时调整PH值至8.8～9.0，在水解过程后期，取反应液少许，用滤纸自然过滤到比色管中，10毫升滤液滴加10%三氯醋酸1～2滴。若仅微显浑浊，说明消化情况良好，否则可酌情增加适量胰酶。 吸附：使内温53～54℃保持，用1：2盐酸调节PH值至10%氢氧化风俗溶液调PH 值至6.0，并加入与滤液体积等同的1%氯化钠溶液。溶解后过滤，滤液在搅拌下缓缓加入伍0%乙醇，使醇含量为75%，每隔30分钟搅拌一次，共搅拌4～6次，使细小颗粒增大而沉降。静置8小时以下，虹吸出上清液。硫酸软骨素沉淀用无水乙醇充分脱水，洗涤2次，抽干，60～65干燥或真空干燥。 制剂：硫酸软骨素注射液配制 配方：硫酸软骨素40克（以纯品计）氧化钠17克注射用水加至3000毫升按配方称取标示量107%的硫酸软骨素粉，撒入注射用水中，使其膨胀，搅拌溶解。再加入氯化钠，调整PH值5.5左右，加热煮沸，用布氏漏斗趁热过滤，滤液迅速冷却，于0～5处放置过夜。次日过，滤液加入0.3～0.5%活性炭迅速加热至微沸，保持15分钟，用砂滤包扎滤纸，乘药液微沸时真空抽滤，滤液迅速冷却至室温，补加水稀释至全量，过滤至澄明，灌封，常压灭菌。 硫酸软骨素溶液易繁殖微生物，必要时可在处方中加入2%（V/V）的苯甲醇。 说明与讨论： 本品以含硫量计可达到5%以上，相当于硫酸软骨素或硫酸软骨素钠的百分含量，分别为71.64%及75.07%。 用胰酶水解，可同时作用于蛋白质和糖元。为了避免水解反应局部过热而影响酶的
硫酸软骨素行业分析
硫酸软骨素行业分析 东吴证券李葳 1、行业发展现状 （1）原料药行业 原料药是用于药品制造中的一种物质或物质的混合物，原料药的制作方法多样，包括：化学合成、植物提取或者生物技术，通过这些方法生成的粉末、结晶、浸膏等可以用于制作临床应用的医药。原料药可继续根据来源细分成下图中所示的种类。 从世界范围来看，原料药行业的竞争格局主要集中在五大生产区域：西欧、北美、日本、中国和印度。西欧在上世纪90 年代一度是世界上最大的原料药生产地区，西欧地区制药工业起步较早，技术水平先进，具有一定的规模优势，原料药的出口市场遍及全球广大地区，当时的产量占据全球原料药需求的60-65%。但是在世界的另一边，两大文明古国中国和印度得益于成本上的优势在原料药生产和出口领域迅速崛起，逐步发展成为主要的原料药生产和出口国家，西欧的原料药市场份额被慢慢蚕食。但是西欧失去的市场份额主要集中在“大剂量、低效益”的原料药产品，西欧在“小剂量、高效益”的品种上仍然具有优势地位，拥有工艺优势。北美是全球最大
的原料药需求和进口地区。但生产原料药涉及到环保、成本等方面的因素，许多原料药并不在该地区生产，但是诸多研发机构设立在北美地区，其中美国拥有多家研发机构，所以美国较其他国家具有药品专利优势。 中国目前已经发展成为全球最大的原料药生产国，中国可以生产的原料药及医药中间体达1600 多个品种，产能达到200多万吨，生产地区主要集中在石家庄、沈阳、淄博、哈尔滨、天津等老医药工业基地。近年来，原料药在中国药品出口中所占比重最大，占所有医药保健品出口总额50%以上，是中国具有绝对优势的出口产品，其增长幅度直接影响到中国整体医药出口的增长变化。 （2）保健品行业 随着居民生活水平的逐步提高，人们对身体的健康状况以及如何预防疾病的发生越发关注，除了不断加强身体锻炼外，人们对保健品的需求也在不断增加。美国在1988 年时保健品的种类已经达到2000 余种，销售金额在72 亿美元以上。日本从1980 年起就以每年50 亿日元的速度增长，1989 年已有6500亿日元的市场规模。保健品进入到中国居民的视野当中是在20 世纪80年代，当时是保健食品行业的第一个高速发展时期，其间涌现出了3000多家保健食品生产企业。1995 年到1998 年保健食品行业中的企业数量和销售额大面积萎缩，经历了一个低谷期。从2005 年开始，中国保健食品行业进入新的成长期。2010 年中国保健食品的产值超过近1000 亿元，至此，中国保健食品行业开始进入繁荣发展的成长时期。从人均消费水平来看，美国和澳洲分别为56 美元和41.3 美元，而国内市场仅为11.4 美元，我国保健品行业依旧处于行业发展初期，后续发展可期。 图表1：2014 年美国、澳洲和中国保健品人均消费水平
硫酸软骨素
硫酸软骨素
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硫酸软骨素 硫酸软骨素： 糖胺聚糖的一种，由Ｄ－葡糖醛酸和Ｎ-乙酰氨基半乳糖以β－１,4-糖苷键连接而成的重复二糖单位组成的多糖,并在N-乙酰氨基半乳糖的C-4位或C-6位羟基上发生硫酸酯化。大量存在于动物软骨中。 硫酸软骨素钙: 硫酸软骨素对角膜胶原纤维具有保护作用,能促进基质中纤维的增长,增强通透性，改善血液循环，加速新陈代谢，促进渗透液的吸收及炎症的消除；其聚阴离子具有极强的保水性，能改善眼角膜组织的水分代谢,对角膜有较强的亲和力，能在角膜表面形成一层透气保水膜，促进角膜创伤的愈合及改善眼部干燥症状。 基本资料 【产品类属】:粘多糖类物质，主要分为硫酸软骨素钠盐和硫酸软骨素钙盐等，其中以硫酸软骨素钠盐最为常见,应用也最为广泛。 【萃取来源】 :猪、牛、鸡、鲨鱼的软骨 主要的应用途径是作为治疗关节疾病的药品常与氨基葡萄糖配合使用,具有止痛,促进软骨再生的功效,可以从根本改善关节问题。 市场需求 是提取于动物软骨的黏多糖类物质,在心血管疾病、关节病的防治等方面具有重要的作用,是目前市场上较重要的生化产品.硫酸软骨素目前具有供不应求和继续上升的市场.硫酸软骨素除了作为药品外,大量的是作为改善关节病的补充品，作为健康食品应用，在美国已经风行多年.经过多年的应用,已经证明硫酸软骨素对改善老年退行性关节炎、风湿性关节炎有一定的效果，因此市场仍呈快速上升的势头．仅在美国的消量每年就可达600 吨左右.而中国有1３亿人口,患老年退行性关节病和冠心病的人很多,因此有着硫酸软骨素消费的巨大潜在市场． 硫酸软骨素的作用 硫酸软骨素能发挥以下功效以纾解关节疼痛问题: １.提供垫衬作用，缓和行动时的冲击和摩擦 软骨素的作用犹如“液状磁石”，能将水分吸入蛋白多糖分子内，使软骨变厚及有如海绵般，并增加关节内的滑液量。如此一来,它便能提供“垫衬”作用以增强关节的减震能力和缓和行走或跳动时的冲击和摩擦。 2.把重要的氧供和营养素输送至关节，帮助清除关节内的废物
硫酸软骨素文献综述
硫酸软骨素的研究近况 摘要：本文就近几年国内外对硫酸软骨素的研究情况进行概述，主要涉及其生 产工艺、分析方法及临床应用。 关键词：硫酸软骨素生产工艺分析方法临床应用 正文：硫酸软骨素(Chondroitin Sulfate, CS)是哺乳动物结缔组织的主要成分 之一, 主要分布于软骨、骨、肌腱、韧带、肌膜和血管壁中, 属于糖胺聚糖(Glycosam inoglycans,GAGs) 类物质。根据其分子结构中糖醛酸种类和氨基己糖上硫酸酯位置的差异, 主要分为三种类型: 硫酸软骨素A (CS-A ) , 硫酸软骨素B (CS-B) , 硫酸软骨素C (CS-C) 等。近年来, CS 作为一种新型药用活性成分, 逐渐受到人们的重视。本文就其生产工艺、分析方法及临床应用的新进展予 以综述。 1生产工艺 提取工艺 可用中性盐法、酸法、碱法、酶解法等提取C S 。目前多采用碱提取与酶解提取相结合的方法[1]。高华等[2]在碱-酶解的提取方法中加大了碱的浓度,用 lmol/ L 氢氧化钠溶液提取2h ,时间缩短并可避免杂质析出, CS的收率和纯度分别达到了32.6 % 和95.2%。胥传来等[3]则在鳖鱼软骨的酶解提取CS前先用2%乙酸钠盐解, 产品含氮量可下降0.67% ,而氨基己糖质量分数提高了1.87% ,具有一定工业生产价值。李瑞国[4]对浓碱-酶解(I)、稀碱-酶解(II)、稀碱稀盐-酶解(III)和稀碱浓盐(IV) 4 种提取工艺进行了比较,发现工艺I 提取时间短、产品颜色深而分子量较小; 工艺II、III、IV操作较容易、产品色泽好且分子量较大, 尤以工艺IV制得的产品质量较好。华子义[5]采取碱性复合酶和胰酶双酶解法提取CS, 得率比传统方法提高了1 % -2 % , 生产周期缩短1/3 , 生产成本降低5 %。Nakano等[6]以0.1mol/ L乙酸钠在pH 4.5 、3 7℃条件下先预处理牛鼻软骨, 使软骨组织在内源酶作用下自动分解, 从而无需使用外源酶,生产成本降低,经DEAE离子交换色谱纯化可得含CS 89%的GAGs混合物。 分离纯化
硫酸软骨素含量测定方法研究进展
硫酸软骨素含量测定方法的研究进展 摘要：综述了硫酸软骨素含量测定方法的研究进展。含量测定方法包括比色法、色谱法、电泳法、原子吸收法、比浊法、配位滴定法及免疫法等。硫酸软骨素的测定方法按其测定指标主要分为软骨素二糖、氨基己糖、葡萄糖醛酸、硫酸基和阴性基团5类。对各种含量测定方法的原理和特点进行了介绍。 关键词：硫酸软骨素高效液相色谱醋酸纤维素薄膜电泳法 硫酸软骨素(chondroitin sulfate，CS)系从动物软骨组织中提取、纯化所得的酸性黏多糖，具有降血脂、抗肿瘤、抗衰老、治疗关节炎、促进溃疡愈合、耳呜症及神经痛等多种作用，无明显的毒副作用。在临床具有广阔的应用前景。近年来，CS大量出口美国及欧洲，已成为出口量最大的生化医药产品之一。 CS的含量测定方法有许多种，每种含量测定方法均有其特点，但测定原理均是基于其组成的糖单位(D-葡糖醛酸和N-乙酰-D-氨基半乳糖)、硫酸基以及酸性黏多糖的大分子性质。在分子结构上，CS由D-葡萄糖醛酸和N-乙酞-D-氨基己糖以1, 3糖苷键连接形成重复二糖，二糖单位之间以1, 4糖苷键连接形成糖链，氨基己糖糖环的4位C或6位C可硫酸化，硫酸化后分别形成硫酸软骨素A(CS-A)和硫酸软骨素C(CS-C)。本文对CS的含量测定方法进行综述，以便对不同CS测定方法及特点有一较全面的了解。 1.测定硫酸软骨素的指标物质 根据CS的分子结构特点，研究出以CS某一化学成分为测定指标的多种方法，这些指标包括软骨素二糖、氨基己糖、葡萄糖醛酸、硫酸基、阴性基团等5类。 1.1 以葡萄糖醛酸为指标的测定方法 在酸性条件下降解CS，生成与其软骨素二糖单位摩尔数相等的葡萄糖醛酸，再加入咔唑、间苯三酚和4-氨基-3-肼基-5-巯基-1, 2, 4，-三唑(AHMT)等色原物质与葡萄糖醛酸显色，最后测定反应液特定波长处吸收值，以葡萄糖醛酸或CS标准品为对照制作标准曲线，转换为葡萄糖醛酸含量，根据葡萄糖醛酸与软骨素二糖之间的分子量之比换算成CS含量。 1.2 以硫酸基为指标的测定方法 CS 中硫酸基的测定方法主要有离子色谱法和间接原子吸收法等。这两种方法首先以强酸降解CS生成游离硫酸基，前者以离子色谱检测经分离的反应液中的硫酸基与软骨素二糖的分子量之比计算CS含量；后者以已知过量的钡离子与降解CS产生的游离硫酸基反应，再通过原子吸收光谱法测定过量的钡离子，换算出CS样品中硫酸基含量，然后计算CS含量。 1.3 以氨基己糖为指标的测定方法 测定氨基己糖的经典方法是Elson-Morgan法，该方法以盐酸氨基己糖作对照品，利用盐酸水解CS释放出氨基己糖，而氨基己糖在碱性条件下先与乙酞丙酮缩合，其产物与对二甲氨基苯甲醛的醇溶液结合后显红色，于特定波长处测定吸光值，计算样品中氨基己糖含量，再根据氨基己糖与软骨素二糖单位之间的分子量之比换算成CS含量。 1.4 以软骨素二糖为指标的测定方法 在超声波作用下或在软骨素酶作用下使CS降解成软骨素二糖单位，记录软骨素二糖溶液经过色谱柱的洗脱曲线，将样品的出峰时间和峰面积(或峰高)与标准品比较，以此确定其含量(软骨素二糖是CS的基本组成单位，理论上其含量与
氨基葡聚糖和硫酸软骨素在治疗骨性关节炎中的应用
1312134. 8Rommen RM.Operation of open reduction of fractures and dislocation of ankle.Unfallching ,1994,97(1):39246.9Babis GC ,Vauanos ED ,Papaioamou NP ,et al.Result of surgical treat 2ment of tibial plafond fracture.Clin Orthop ,1997,341:992105.10Bourne RB.Pilon fracture of the distal tibia.Clin Orthop ,1989,240: 42. 11Teeny SM ,Wiss DA.Open reduction and lateral fixation of tibial pla 2 fond fracture :variables contributing to poor results and complications.Clin Orthop ,1993,292:1082117. 12罗从风,于晓雯,蒋建.有限内固定结合外固定支架治疗高能量 Pilon 骨折.中华骨科杂志,1998,18(10):5842586. 13Joseph B ,Erik E.Pilon fractures assessment and treatment.Orthop Clin of North Am ,2002,33(1):2312245.14鞠道平,韩建平.粉碎性Pilon 骨折的关节处理.临床骨科杂志, 2000,3(2):1332134.15胡剑秋,来进杰,张玉柱.用有限手术固定合杉树皮小夹板外固定 治疗Pilon 骨折.中医正骨,1999,11(8):26. 16Mario M ,Stefano M ,G iuseppe R ,et https://www.wendangku.net/doc/bf12160442.html,bined percutaneous inter 2 nal and external fixation of type 2C tibial plafond fractures.J Bone Joint Surg ,2002,84(Supp2):1092115. 17季滢瑶,胡广,林昌孝.手术治疗Pilon 骨折82例分析.中国矫形 外科杂志,2002,10(3):2432244.18Patterson M G ,Cole JD.Two stage delay open reduction and internal fixation of serve Pilon fracture.J Orthop Trauma ,1999,13:85291.19Mast J N ,Spiegel PG ,Poppos J N.Fracture of the tibial.Clin Orthop , 1998,230:68. 20邓昌,林圣洲.Pilon 骨折的诊断与治疗(附45例报告).骨关节损 伤杂志,1997,12(2):1192120. 21谭俊铭,冯水云,梁再跃,等.Pilon 骨折的踝关节融合探讨(附45 例报告).中国矫形外科杂志,2000,8(5):4272430. 22Thordarson https://www.wendangku.net/doc/bf12160442.html,plication after treament of tibial Pilon farcture : prevention and management strategies.J Orthop Surg ,2000,8:2532256. 23皮佑辉,卓小为,代维立.Pilon 骨折65例.中国骨伤,1998,11(6): 526. 24K ellem J F ,Waddell J P.Fracture of the distal metaphysis with intra 2 articular extension :the distal explosion fracture.J Trauma ,1979,19:5932601. (收稿日期:2003-09-15 本文编辑:连智华) 氨基葡聚糖和硫酸软骨素在治疗骨性关节炎中的应用 Application of amino 2glucosamine and Chondroitin sulfate in the treatment of osteoarthritis 郭亭,赵建宁 GUO Ting ,ZHA O Jian 2ning 关键词 骨关节炎; 药物疗法 K ey w ords Osteoarthritis ; Drug therapy 南京军区南京总医院骨科,江苏 南京 210002 氨基葡聚糖及硫酸软骨素是天然的含氨基多糖类化合 物,易溶于水,90%～98%的成分易被肠黏膜吸收,较小的分子形状允许其可以通过血液-滑膜屏障,覆盖并分散至关节软骨内,能够被软骨细胞吸收。单独或联合应用这两种药物治疗均在临床及实验中取得较好治疗效果,且毒副作用小[1]。1 骨性关节炎的药物治疗现状 对于骨性关节炎的药物治疗应该是系统和策略的,从小剂量的对乙酰氨基酚到大剂量运用非甾体类抗炎药(NSAID )类药物,药物的选择应根据病人的症状、病史以及身体状况综 合考虑[2] 。对于临床炎症表现轻,仅以疼痛为主的患者,先考虑定时或必要时口服镇痛剂,国外首选对乙酰氨基酚,止痛效果明显,但长期大量应用后有对肝、肾损害的报道;对于关节的炎症较重患者,NSAID 仍是传统的首选用药,常用药物有双氯芬酸、布洛芬、萘普生以及昔布类药物,但不良反应较多,尤其是胃肠道的反应限制了其长期应用。 近年来由于选择性COX 22抑制剂的应用,保留了COX 21酶对于胃黏膜层的保护作用,通过促进某些蛋白多糖(PG )的生物合成,抑制胃酸分泌,调节肾血流动力和水电质的平衡,从而最大限度地避免出现胃肠道副反 应;对于滑膜炎症重,关节有急性炎症表现的患者还可考虑局部应用皮质类激素。 关节腔内注射药物可包括:透明质酸钠(HA )、超氧化物歧化酶(SOD )以及软骨保护剂如氨基葡聚糖(G A G )等,针对骨性关节炎的发病机制,还可选用基质降解酶抑制剂、金属蛋白酶抑制剂以及抑制白介素21(IL 21)产生和活性的药物,如双醋瑞因为大黄提取物,活性成分为二乙酰大黄酸,通过抑制IL 21和氧自由基的产生和释放,抑制金属蛋白酶的活性及稳定溶酶体膜而达到抗炎及保护关节软骨的作用,同时多种细胞因子在软骨损伤修复过程中起到重要作用,如转化生长因 子(TGF 2β)具有促进软骨细胞增殖和分化、抑制多种炎性介 质(IL 21、IL 26、TNF α、MMP5、NO 等)活性及免疫反应等多重生物学功能,局部应用能够延缓或阻断关节软骨基质的降解, 促进缺损处关节软骨的修复,选用基因治疗的手段或组织工程学的方法可有效利用外源性生长因子。 维生素A 、C 、D 和E 是食物中的主要抗氧化剂,可以通过预防软骨的氧化损伤,调节关节腔内炎症反应,以及参与胶原的合成过程来发挥治疗OA 的作用,临床单独运用较少,多为辅助性治疗。对于骨性关节炎药物治疗的策略应是早诊断、早治疗、预防关节软骨的进一步损伤,同时使用长疗程的方案。
硫酸软骨素质量标准 及含量测定
硫酸软骨素质量标准及含量测定 青岛大学药学系 高华 gaohuaqy@https://www.wendangku.net/doc/bf12160442.html,
一、硫酸软骨素结构 是种 硫酸软骨素(Chondroitin Sulfate，CS)，是一种重要的天然酸性粘多糖 。 硫酸软骨素是由D-葡糖醛酸和N-乙酰基-D-氨基半乳糖以β-1,3糖苷键结合而成的双糖，而双糖之间以β-1,4苷键连接而成生物大分子。 -14 CS相对分子质量一般为5000～50000Da。 根据硫酸基在半乳糖上位置不同主要分为硫酸软骨素A(CSA)硫酸软骨素C(CSC)
硫酸软骨素结构 根据硫酸基在半乳糖上位置不同主要分为硫酸软骨素A(CSA)和硫酸软骨素C(CSC) 硫酸软骨素A（CSA）硫酸软骨素C（CSC）硫酸基团在半乳糖的第4位C上硫酸基团在半乳糖的第6位C上
二硫酸软骨素存在形式 二、硫酸软骨素存在形式 ChS的来源有陆产动物和海洋动物两大类。陆产动物主要是牛、猪、羊和禽等软骨组织中，如喉骨、鼻中骨、气管、血管壁等，主要成分4-硫酸软骨 素(CSA) 。海洋动物包括软骨鱼的软骨、海参和贝类等，主要成分6-硫酸软骨素(CSC)。 贝类等主要成分6 软骨中的硫酸软骨素与蛋白质相结合以蛋白多糖的形式存在组织中。
三、硫酸软骨素质量标准 z USP32--美国药典29版 硫酸软骨素（牛、猪、鸡、鲨鱼） z JPC1997 --《日本药局方外标准》(1997) 硫酸软骨素（牛、猪、鲨鱼） 硫酸软骨素（牛猪鲨鱼） z WS-10001-(HD-0894)-2002硫酸软骨素A 钠 z WS-10001-(HD-0892)-2002 硫酸软骨素（供注射用）z WS-10001-(HD-0895)-2002 硫酸软骨素A钠胶囊 WS-10001-(HD-0896)-2002 硫酸软骨素滴眼液 WS-10001-(HD-0854)-2002 复方硫酸软骨素片
硫酸软骨素
硫酸软骨素 硫酸软骨素(Chondroitinsulfate)大量存在于动物软骨中，商品是从动物组织中提取制备的酸性粘多糖。硫酸软骨素是糖胺聚糖的一种，由D-葡糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖以β-1,4-糖苷键连接而成的重复二糖单位组成的多糖，并在N-乙酰氨基半乳糖的C-4位或C-6位羟基上发生硫酸酯化。主要分为硫酸软骨素钠盐和硫酸软骨素钙盐等，主要应用于关节炎、滴眼液等。作为治疗关节疾病的药品，常与葡萄糖胺配合使用，具有止痛，促进软骨再生的功效，对改善老年退行性关节炎、风湿性关节炎有一定的效果，可以改善关节问题。 基本资料 【所属行业】：生物医药 【产品类属】：粘多糖类物质，主要分为硫酸软骨素钠盐和硫酸软骨素钙盐等，其中以硫酸软骨素钠盐（CHONDROITINSULFATESODIUM）最为常见，应用也最为广泛。 【萃取来源】：猪、牛、鸡、鲨鱼的软骨 【应用途径】：应用途径:主要应用于关节炎、滴眼液等。 治疗关节、疼痛：主要的应用途径是作为治疗关节疾病的药品常与氨基葡萄糖配合使用，具有止痛，促进软骨再生的功效，可以从根本改善关节问题。 治疗眼科：硫酸软骨素对角膜胶原纤维具有保护作用，能促进基质中纤维的增长，增强通透性，改善血液循环，加速新陈代谢，促进渗透液的吸收及炎症的消除；其聚阴离子具有强的保水性，能改善眼角膜组织的水分代谢，对角膜有较强的亲和力，能在角膜表面形成一层透气保水膜，促进角膜创伤的愈合及改善眼部干燥症状。 【消费及消费情况】：全球最大的消费国是美国，最大原料生产国是中国，国内山东、河北为最大的集散地。著名的公司有嘉兴恒杰生物、河北三鑫集团、烟台东诚生化、青岛绿萃生物、青岛九龙生物、中化（青岛）实业等公司。 【药理作用】硫酸软骨素是从动物组织中提取制备的酸性粘多糖。 【适应证】用于关节炎尤其是退行性关节炎以及腰间盘突出的手术
硫酸软骨素总述
硫酸软骨素 一、产品简介: 硫酸软骨素是来自动物软骨组织的一类天然的酸性粘多糖（因其具有粘稠性）——糖胺聚糖（其中糖胺聚糖作为动物蛋白聚糖的代表成分，在软骨组织中以蛋白多糖形式存在），不同动物体内所存在的硫酸软骨素类型不同，主要是CAS、CSC及各种硫酸软骨素的混合物，其中猪牛羊的骨中主要含有硫酸软骨素A，鲨鱼乌贼等海洋动物的软骨中主要含有硫酸软骨素C。 区别：蛋白多糖以蛋白为核心，糖蛋白以多糖为主体；或者说侧重点不同，虽然组成成分是一样的，但是糖蛋白定义为蛋白，蛋白聚糖定义为糖。 糖胺聚糖：1）蛋白聚糖由三部分组成---核心蛋白、糖胺聚糖、连接区寡糖；2）糖胺聚糖除了通过共价键与蛋白聚糖的核心蛋白连接(糖肽键）外，糖胺聚糖还通过静电作用或立体化学效应与其他蛋白质发生专一性程度不同的结合。而蛋白多糖的聚集体则通过次级键（氢键和盐键）形成，可见从软骨组织中提取硫酸软骨素仅依靠破坏次级键的方法是不够的，而必须以降解蛋白质的方法，破坏多糖链与蛋白的共价结合方能达到提取硫酸软骨素的目的；3）因为糖胺聚糖具有粘稠性，所以蛋白聚糖也被称为粘蛋白。软骨中粘蛋白等中的糖胺聚糖多由两种氨基己糖（氨基葡萄糖和氨基半乳糖）之一和两种己糖醛酸（葡萄糖醛酸和艾杜糖醛酸）之一以各种糖苷键连接而成；4）除透明质酸（属于非蛋白多糖提取）外，糖胺聚糖分子中的氨基己糖
上均含有硫酸基，该硫酸基与己糖醛酸上的羧酸都会导致整个蛋白聚糖分子显酸性，所以糖胺聚糖又被称为酸性粘多糖。 二、理化性质: 1、物理性质： 硫酸软骨素，简称CS，分子式：（C14H21NO14S)n，成品外观白色粉末状，无臭无味，易溶于水，不溶于乙醇和丙酮、冰醋酸等有机溶剂，遇水后迅速膨胀，对热不稳定，需避光密封保存。 其分子中含有大量的硫酸基和羧基，故呈酸性反应，可与钠钾钙离子结合成盐，其盐类对热稳定。在高温、碱性、酸性环境溶液中易水解成单糖或小分子量多糖，因而溶液粘度下降。（游离的硫酸软骨素水溶液遇较高温不稳定，主要是乙酰基被水解，从其结构上脱落下来。） 2、化学性质： 硫酸软骨素是来自动物软骨组织的一类天然的酸性粘多糖——糖胺聚糖。硫酸软骨素是氨基己糖和葡萄糖醛酸交替连接而成的直链分子，作为动物糖胺聚糖中的代表物质，硫酸软骨素由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-氨基半乳糖（结构图如下所示）以1,3糖苷键连接形成双糖，双糖单位之间以1,4糖苷键连接。一般硫酸软骨素约含有50-70个双糖单位，动物组织中的硫酸软骨素平均分子量约为260000。在分子结构上硫酸软骨素氨基己糖环的4位或6位可硫酸化。
高聚物相对分子量测定方法
高聚物相对分子量测定方法 高聚物的分子量及分子量分布，是研究聚合物及高分子材料性能的最基本数据之一。它涉及到高分子材料及其制品的力学性能，高聚物的流变性质，聚合物加工性能和加工条件的选择。是在高分子化学、高分子物理领域对具体聚合反应，具体聚合物的结构研究所需的基本数据之一。科标分析实验室科研团队集成多名资深行业专家，拥有博士、硕士等高学历人才数名，提供专业分子量测定服务，为客户提供检测数据，检测方法，检测图谱等论文需要的资料。 （1）端基分析法（end-group analysis，简称EA） 如果线形高分子的化学结构明确而且链端带有可以用化学方法（如滴定）或物理方法（如放射性同位素测定）分析的基团，那么测定一定重量高聚物中端基的数目，即可用下式求得试样的数均相对分子质量。 式中：m－试样质量；Z－每条链上待测端基的数目；n－被测端基的摩尔数。 如果用其他方法测得，反过来可求出Z，对于支化高分子，支链数目应为Z－1。 （2）沸点升高和冰点降低法（boiling-point elevation,freezing-point depression） 利用稀溶液的依数性测定溶质相对分子质量的方法是经典的物理化学方法。对于高分子稀溶液，只有在无限稀的情况下才符合理想溶液的规律，因而必须在多个浓度下测ΔT b（沸点升高值）或ΔT f（冰点下降值），然后以ΔT/C对C作图，外推到c－>0时的值来计算相对分子质量。 式中：A2称第二维里系数。 （3）膜渗透压法（osmometry，简称OS）
当高分子溶液与纯溶剂倍半透膜隔开时，由于膜两边的化学位不等，发生了纯溶剂向高分子溶液的渗透。当渗透达到平衡时，纯溶剂的化学位应与溶液中溶剂的化学位相等，即 或 由Floy-Huggins理论，从Δμ1的表达式可以得到 由于C2项很小，可忽略， 式中：χ) A2表征了高分子与溶剂相互作用程度的大小。 对于良溶剂，χ1； 对于θ溶剂，χ1； 对于非溶剂，χ1
高分子分子量的主要测定方法
高分子分子量的主要测定方法 用途 高聚物的分子量及分子量分布，是研究聚合物及高分子材料性能的最基本数据之一。它涉及到高分子材料及其制品的力学性能，高聚物的流变性质，聚合物加工性能和加工条件的选择。也是在高分子化学、高分子物理领域对具体聚合反应，具体聚合物的结构研究所需的基本数据之一。 表征方法及原理 1.粘度法测相对分子量（粘均分子量Mη） 用乌式粘度计，测高分子稀释溶液的特性粘数[η]，根据Mark-Houwink公式[η]＝kMα，从文献或有关手册查出k、α值，计算出高分子的分子量。其中，k、α值因所用溶剂的不同及实验温度的不同而具有不同数值。 2.小角激光光散射法测重均分子量（Mw） 当入射光电磁波通过介质时，使介质中的小粒子（如高分子）中的电子产生强迫振动，从而产生二次波源向各方向发射与振荡电场（入射光电磁波）同样频率的散射光波。这种散射波的强弱和小粒子（高分子）中的偶极子数量相关，即和该高分子的质量或摩尔质量有关。根据上述原理，使用激光光散射仪对高分子稀溶液测定和入射光呈小角度（2℃－7℃）时的散射光强度，从而计算出稀溶液中高分子的绝对重均分子量（MW）值。采用动态光散射的测定可以测定粒子（高分子）的流体力学半径的分布，进而计算得到高分子分子量的分布曲线。 3.体积排除色谱法（SES）（也称凝胶渗透色谱法（GPC）） 当高分子溶液通过填充有特种多孔性填料的柱子时，溶液中高分子因其分子量的不同，而呈现不同大小的流体力学体积。柱子的填充料表面和内部存在着各种大小不同的孔洞和通道，当被检测的高分子溶液随着淋洗液引入柱子后，高分子溶质即向填料内部孔洞渗透，渗透的程度和高分子体积的大小有关。大于填料孔洞直径的高分子只能穿行于填料的颗粒之间，因此将首先被淋洗液带出柱子，而其他分子体积小于填料孔洞的高分子，则可以在填料孔洞内滞留，分子体积越小，则在填料内可滞留的孔洞越多，因此被淋洗出来的时间越长。按此原理，用相关凝胶渗透色谱仪，可以得到聚合物中分子量分布曲线。配合不同组分高分子的质谱分析，可得到不同组分高分子的绝对分子量。用已知分子量的高分子对上述分子量分布曲线进行分子量标定，可得到各组分的相对分子量。由于不同高分子在溶剂中的溶解温度不同，有时需在较高温度下才能制成高分子溶液，这时GPC柱子需在较高温度下工作。 4.质谱法 质谱法是精确测定物质分子量的一种方法，质谱测定的分子量给出的是分子质量m对电荷数Z之比，即质荷比（m/Z）过去的质谱难于测定高分子的分子量，但近20余年由于我的离子化技术的发展，使得质谱可用于测定分子量高达百万的高分子化合物。这些新的离子化
关节腔注射玻璃酸钠
选择关节腔注射治疗者，首先排除全身严重疾病，糖尿病控制不良、使用激素长久者。注射地点：选择专科治疗室（定期消毒）或门诊小手术室。体位：平卧屈膝或坐位屈膝位。戴口罩、帽子、手套，常规消毒铺巾。从膝关节间隙穿入关节腔（外侧居多）落空感明显，回抽无血等，缓慢注入玻璃酸钠注射液（上海昊海生物科技股份有限公司 2 ml∶20 mg），注射部位按压3～5 min，外贴敷料覆盖，主动活动注射膝约5 min，嘱注射当日不湿水，每周一次，连续5次为一疗程。注射治疗期嘱注意减少过度活动，局部清洁，增强体质，避免外伤等。针对重症患者或糖尿病患者加服抗生素1～3 d，并适当辅以延缓骨关节病中药口服，如仙灵骨葆胶囊。关节肿胀积液明显者，先抽吸炎性关节液，注射曲安奈德剂25 mg 5～7 d后再行玻璃酸钠注射。 1.4.1 治疗方法：所有患者均接受硫酸氨基葡萄糖250mg 1日3次口服，双氯芬酸钠缓释片0.1g 1日1次口服。实验组在上述用药基础上，行膝关节腔内玻璃酸钠20mg注射，每周1次，连续应用5次后作疗效评定。 所有患者在治疗前后都采用 Lysholm膝关节评分法进行评定[5] 。把膝部疼痛、肿胀、上下楼及下蹲等表现进行评分。症状体征总评分来反应膝关节功能情况,显效:关节疼痛、肿胀消失,无晨僵、无关节弹响声;有效:关节肿胀疼痛、肿胀减轻,无晨僵、活动时可伴有弹响声;好转;膝关节疼痛、肿胀较治疗前有所减轻,疼痛能忍受,伴有晨僵、关节弹响声;无效:关节疼痛、肿胀无明显改变,有晨僵及关节活动时伴有弹响声 膝关节骨性关节炎是一种退行性变,发病机制复杂,治疗多采用非甾体类药物对症治疗,但长期使用伴发消化道溃疡,肝、肾功能损害,血液及神经系统的损害等并发症。并且临床也证实非甾体类药物抑制软骨合成及破坏软骨细胞,长期服用反而会加重病情。
粘度法测定聚合物的分子量
实验十 粘度法测定聚合物的分子量 一、 实验目的 掌握用乌氏粘度计测定高分子溶液粘度的方法并计算粘均分子量M η。 二、 实验原理 高分子溶液具有比纯溶剂高得多的粘度，其粘度大小与高聚物分子的大小、形状、溶剂性质以及溶液运动时大分子的取向等因素有关。因此，利用高分子粘度法测定高聚物的分子量基于以下经验式： Mark 经验式： 式中：[η]－特性粘数 M －粘均分子量 K －比例常数 α－与分子形状有关的经验参数 K 和α值与温度、聚合物、溶剂性质有关，也和分子量大小有关。K 值受温度的影响较明显，而α值主要取决于高分子线团在某温度下，某溶剂中舒展的程度，其数值介于0.5～1之间。K 与α的数值可通过其它绝对方法确定，例如渗透压法、光散射法等，从粘度法只能测定得［η］。 粘度除与分子量有密切关系外，对溶液浓度也有很大的依赖性，故实验中首先要消除浓度对粘度的影响，常以如下两个经验公式表达粘度对浓度的依赖关系： []α ηKM =（10-2） （10-3） （10-1）
式中：r η－相对粘度 sp η－增比粘度 sp η/c －比浓粘度 c －溶液浓度 βκ,－均为常数 1-=r sp ηη （10-5） 式中：t －溶液流出时间，0t －纯溶剂流出时间 显然 ][η即是聚合物溶液的特性粘数，和浓度无关，由此可知，若以c sp /η和 c sp /ln η分别对c 作图，则它们外推到 0→c 的截距应重合于一点，其值等于][η。 ln r ηsp C η或 C 图1 外推法求[η]值 图10-1 外推法求][η值 三、仪器和试剂 试剂：聚乙烯醇，蒸馏水 []c c r c sp c ηηηln lim lim 0 →→==（10-4） （10-6）
硫酸软骨素生产工艺
动物软骨中均含有酸软骨素，大家畜地鼻中隔及喉头骨中含量较多，据报道，猪鼻中隔含有左右. 药物硫酸软骨素是从软骨中提取地硫梳软骨素和硫酸软骨素等各种硫酸软骨素地混合物.有地商品称康得灵.本品用于因链、霉素所引起地听觉障碍症地预防和冶疗，如偏头痛、神经痛、风湿痛、肝炎等症.资料个人收集整理，勿做商业用途 性状：硫酸软骨素是一种白色粉末，吸水性强，易溶于水而成粘稠液体，不溶于乙醇、丙酮和乙醚等有机溶剂中，其盐类对热较稳定上.资料个人收集整理，勿做商业用途 制法：硫酸软骨地制剂和片剂，它地生产工艺主要有稀碱和浓碱和浓碱提取两种，下面各介绍两种. 一、稀碱提取工艺之一 工艺流程： 猪喉（鼻）软骨，浸出氢氧化钠过滤，浸出液，酶水解盐酸、胰酶～℃，水解液，吸附活性白土、活性炭，沉淀氯化钠、乙醇，值～，沉淀物，干燥无水乙醇～℃，干品，制剂氯化钠值，注射液.资料个人收集整理，勿做商业用途 操作过程： 浸出：将氢氧化钠千克置浸泡罐内，加入洁白干燥软骨千克，在室温下每隔半小时缓缓搅拌次，待浸出液比重达波美（℃）度时出料.用纱布过滤.骨渣再用适量蒸镏水浸泡分钟，过滤.二次过滤液合并，使滤液总体积为升.资料个人收集整理，勿做商业用途 酶解：将上述滤液置消化罐中，搅拌下缓缓加入：盐酸并调值～，用循环水浴加热.罐内温度达℃时加入相当于：倍胰酶克（宜使用高倍地胰酶）继续升温，控制消化温度为～℃，不得超过℃循环水浴温度～℃保持，水解小时.在水解过程中，由于氨基酸地增加，值会有下降，需用地氢氧化钠随时调整值至～，在水解过程后期，取反应液少许，用滤纸自然过滤到比色管中，毫升滤液滴加三氯醋酸～滴.若仅微显浑浊，说明消化情况良好，否则可酌情增加适量胰酶.资料个人收集整理，勿做商业用途 吸附：使内温～℃保持，用：盐酸调节值至氢氧化风俗溶液调值至，并加入与滤液体积等同地氯化钠溶液.溶解后过滤，滤液在搅拌下缓缓加入伍乙醇，使醇含量为，每隔分钟搅拌一次，共搅拌～次，使细小颗粒增大而沉降.静置小时以下，虹吸出上清液.硫酸软骨素沉淀用无水乙醇充分脱水，洗涤次，抽干，～干燥或真空干燥.资料个人收集整理，勿做商业用途制剂：硫酸软骨素注射液配制 配方：硫酸软骨素克（以纯品计）氧化钠克注射用水加至毫升 按配方称取标示量地硫酸软骨素粉，撒入注射用水中，使其膨胀，搅拌溶解.再加入氯化钠，调整值左右，加热煮沸，用布氏漏斗趁热过滤，滤液迅速冷却，于～处放置过夜.次日过，滤液加入～活性炭迅速加热至微沸，保持分钟，用砂滤包扎滤纸，乘药液微沸时真空抽滤，滤液迅速冷却至室温，补加水稀释至全量，过滤至澄明，灌封，常压灭菌.资料个人收集整理，勿做商业用途 硫酸软骨素溶液易繁殖微生物，必要时可在处方中加入（）地苯甲醇. 说明与讨论： 本品以含硫量计可达到以上，相当于硫酸软骨素或硫酸软骨素钠地百分含量，分别为及.资料个人收集整理，勿做商业用途 用胰酶水解，可同时作用于蛋白质和糖元.为了避免水解反应局部过热而影响酶地活力，工艺中采用循环水浴加热装置.资料个人收集整理，勿做商业用途 软骨浸泡时间长，蛋白质含量则相应增多，从而会影响到成品地纯度.为些规定浸出液比重地限度为波美度.浸出地速度与室温有关.资料个人收集整理，勿做商业用途 由于此工敢地酶水解不可能完全彻底，而胰酶本身即为一种蛋白质，使用活性白土作为吸附
最新粘度法测定高聚物的分子量及其相关知识点
粘度法测定高聚物的分子量 [适用对象]药学、药物制剂、中药学、制药工程、中药学（国际交流方向）、生物工程专业[实验学时] 4学时 一、实验目的 1、掌握粘度法测定高聚物相对分子质量的原理。 2、用乌氏粘度计测定聚乙烯醇的特性粘度，计算聚乙烯醇的粘均相对分子质量。 二、实验原理 单体分子经加聚或缩聚过程便可合成高聚物。并非高聚物每个分子的大小都相同，即聚合度不一定相同，所以高聚物摩尔质量是一个统计平均值。对于聚合和解聚过程的机理和动力学的研究，以及为了改良和控制高聚物产品的性能，高聚物摩尔质量是必须掌握的重要数据之一。 高聚物溶液的特点是粘度特别大，原因在于其分子链长度远大于溶剂分子，加上溶剂化作用，使其在流动时受到较大的内摩擦阻力。 粘性液体在流动过程中，必须克服内摩擦阻力而做功。其所受阻力的大小可用粘度系数η（简称粘度）来表示（kg·m-1·s-1）。 高聚物稀溶液的粘度是液体流动时内摩擦力大小的反映。纯溶剂粘度反映了溶剂分子间的内摩擦力，记作η0，高聚物溶液的粘度则是高聚物分子间的内摩擦、高聚物分子与溶剂分子间的内摩擦以及η η>η0,相对于溶剂，溶液粘度增加0三者之和。在相同温度下，通常 的分数称为增比粘度，记作ηsp，即 ηsp=（η-η0）/η0
而溶液粘度与纯溶剂粘度的比值称作相对粘度，记作ηr ，即 ηr =η/η0 ηr 反映的也是溶液的粘度行为，而ηsp 则意味着已扣除了溶剂分 子间的内摩擦效应，仅反映了高聚物分子与溶剂分子间和高聚物分子间的内摩擦效应。 高聚物溶液的增比粘度ηsp 往往随质量浓度C 的增加而增加。为了 便于比较，将单位浓度下所显示的增比粘度ηsp /C 称为比浓粘度， 而1n ηr /C 则称为比浓粘度。当溶液无限稀释时，高聚物分子彼此相 隔甚远，它们的相互作用可忽略，此时有关系式 [η]称为特性粘度，它反映的是无限稀释溶液中高聚物分子与溶剂分子间的内摩擦，其值取决于溶剂的性质及高聚物分子的大小和形态。由于ηr 和η sp 均是无因次量，所以[η]的单位是质量浓度C 单位的倒数。 在足够稀的高聚物溶液里，ηsp /C 与C 和ln ηr /C 与C 之间分别符 合下述经验关系式： ηsp /C=[η]+κ[η]2C ln ηr /C=[η]-β[η]2C 上两式中κ和β分别称为Huggins 和 Kramer 常数。这是两直线方程，通过ηsp /C 对C 或ln ηr /C 对C 作图，外推至C=0时所 得截距即为[η]。显然，对于同一高聚物， 由两线性方程作图外推所得截距交于同一点，如右图所示。 ηsp /C 或ln ηr /C []ηηη==→→c c r c sp c ln lim lim 00
硫酸软骨素的提取
蛋壳膜硫酸软骨素的提取工艺及其优化 摘要：以蛋壳膜为原料，采用稀碱与酶解相结合的方法提取硫酸软骨素。以胰蛋白酶、胃蛋白酶分解去除杂蛋白，经酒精沉淀并干燥后得到产品。实验得到的最佳提取工艺为：料液比１：１．５，碱浓度５％，碱提温度４０℃， 胰蛋白酶、胃蛋白酶的用量分别为１．５％、０．８％，ｐＨ值分别为８．２和５．５，酶的各自最适条件作用时间均为２．０ｈ。 关键词：硫酸软骨素；蛋壳膜；胰蛋白酶；胃蛋白酶 Optimization of Extraction Technology of Chondroitin Sulfate from Eggshell Membrane LIU Guo-qing，LING Qing-zhi，SUN Jun-fei (School of Biotechnology and Food Engineering, Hefei University of Technology, Heifei 230009, China) Abstract ：Chondroitin sulfate was extracted from the eggshell membrane with a method of dilute alkali-enzyme hydrolysis. The product of chondroitin sulfate was gotten after ethanol disposition and desiccation by eliminating the protein with trypsin and pepsin. The results showed the optimum conditions of weight proportion 1:1.5 (material:liquid), alkali concentration 5%, temperature 40 ℃. Dosage of trypsin and pepsin 1.5% and 0.8% respectively, pH value 8.2 and 5.5 respectively and reaction time 2.0 h respectively. Key words：chondroitin sulfate；eggshell membrane；trypsin；pepsin 硫酸软骨索(chondroitin sulfate，简称CS)是来自于动物软骨和鸟类卵的壳膜等组织的一类重要的酸性粘多糖即糖胺聚糖[1]。硫酸软骨素呈白色或微黄色粉末，无臭，无味，吸水性较强易溶于水而成黏度大的溶液，不溶于乙醇、丙酮和乙醚等有机溶剂，其盐类对热源较稳定，受热80℃亦不分解。一般硫酸软骨素约含有50～70个双糖的基本结构，按其化学组成和结构，可分为CSA、CSC、CSD三种同分异构体，它们均由D-氨基葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-氨基半乳糖组成，只是因硫酸基团位置不同[1-2]。研究发现，该物质具有良好的抗衰老功能，可以制成各种美容产品和保健食品。如果将其提纯为药品，可治疗某些神经性头痛、关节痛、动脉硬化等病症，还可用于链霉素副作用引起的听觉障碍以及肝功能受损的辅助治疗[1]。硫酸软骨素作为一种新型药用活性成分，近年来日益受到各国人们的重视。蛋壳膜是一种以角膜为主体，与黏多糖类相结合的复合蛋白质，溶化后可以获得乙酰氨基葡萄糖半乳糖、葡萄糖醛酸、透明质酸、硫酸软骨素、氨基酸等可溶性高分子化合物的混合物[3]。我国的蛋壳资源数量巨大，开展蛋制品加工副产业将在很大程度上改变蛋壳来 源分散、不易收集、污染严重的现状，同时也为生产硫酸软骨素提供广泛的原料来源。 硫酸软骨素的提取方法有很多种，如高温高压法、中性盐法、碱提法、酶解法等，以上工艺中，浓碱提取工艺产品颜色较深，且废碱液对环境的危害较大；稀碱提取工艺蛋白质含量和氮含量较高，生产周期较长；稀碱稀盐和稀碱浓盐提取工艺，产率和纯度都不高。综 合考虑产率和纯度，稀碱-酶解提取工艺是一种较实用的方法[2,4-6]。本实验以蛋壳膜为原料，