哺乳动物胚胎冷冻保存综述

哺乳动物胚胎冷冻保存综述

09动物生物技术2班 200930380216 宋骥晨

摘要：哺乳动物胚胎冷冻保存效果受冷冻保护剂、冷冻方法、解冻方法等多种因素影响, 其中冷冻方法是一个关键性因素。目前胚胎冷冻方法主要有常规慢速冷冻法和玻璃化冷冻法两种。常规慢速冷冻法是指利用甘油、乙二醇等做冷冻保护剂通过缓慢降温的方式进行胚胎冷冻; 玻璃化冷冻法是指利用高浓度的冷冻保护剂通过快速降温的方式进行胚胎冷冻。与常规慢速冷冻法相比, 玻璃化冷冻法简化了操作过程, 大大缩短了操作时间, 不需昂贵的程序控制冷冻仪。

关键词：胚胎; 冷冻保存; 冷冻保护剂; 冷冻; 解冻

胚胎冷冻保存是采取特殊的保护措施和降温程序使胚胎在

-196℃温度下停止代谢活动, 而升温后又不失去代谢能力的一种长期保存技术, 是实现动物胚胎生产技术实用化和商业化的重要保证。1972年, whittingham等首先发明了慢速冷冻法, 成功地保存了小鼠胚胎, 并在解冻后移植产下了后代。这种方法经过30多年的发展, 冷冻效果已基本稳定, 迄今为止, 已有多种动物胚胎经常规冷冻、解冻后移植至受体得到后代。

1.胚胎冷冻保存原理

胚胎细胞是发育中的细胞, 细胞内水分含量达到80%以上, 如

果不经保护, 冷冻时细胞内部就会形成冰晶, 破坏蛋白质的结构使其发生不可逆的变化, 从而导致胚胎死亡。常规慢速冷冻法的原理是通过加入低浓度的防冻剂, 缓慢降温将胚胎内的水分在冻结前脱出, 阻止冷冻过程中形成有害冰晶而造成胚胎损伤。将胚胎放到含有渗透性防冻剂的溶液中,防冻剂使胚胎细胞内的水分能够在-10℃以上不冻结并且能替换出部分水分。随着降温的进行, 细胞外液开始形成冰晶, 细胞外液浓度变高, 由于渗透压的原理使细胞内的水分开始脱出。为了保证细胞外液冰晶形成的时间总是早于细胞内液, 大多数冷冻程序采用植冰的方式来诱发细胞外液冰晶的生长, 植冰通常在-5℃到- 7℃进行。缓慢降温使细胞内的水分有更多的时间在冻结前脱出。需要指出的是, 胚胎在冷冻过程中不可避免地要形成冰晶。关键是冰晶的大小和数量能否造成胚胎的损伤。玻璃化冷冻保存的原理是在足够低的温度下或采用高浓度的防冻剂使冷冻过程中形成玻璃样物质减少细胞内外冰晶的形成。总之, 无论采取何种冷冻方法, 胚胎冷冻保存的原理都是阻止冷冻、解冻过程中细胞内形成致死冰晶。

2.抗冻保护剂和冷冻保护液

在哺乳动物的胚胎冷冻过程中, 冰晶的形成对胚胎的损伤是致命的。-15℃~ -50℃是一个致死温度区, 在这个温度区细胞容易形成大的冰晶。加入抗冻保护剂能避免冰晶的形成。抗冻保护剂主要分为3类：（1）低分子质量可渗物质, 如甲醇、乙二醇、丙二醇、甘油等一些醇类; （2）低分子质量不可渗物质, 如葡萄

糖、半乳糖、蔗糖等糖类; （3）高分子质量不可渗物质, 如聚乙烯吡咯烷酮、羟乙基淀粉以及其他一些聚合物。冷冻保护液常用杜氏磷酸盐缓冲液来配制, 并且保持ph 值为7.2~7.4也可用简单的生理盐水或TCM-199来配制。这些低温保护剂以不同的方法来保护胚胎细胞免受冷冻损伤, 有效的低温保护剂可将各种低温保护剂有机结合起来。

3.冷冻方法

自从1972年whittingham等首次采用慢速冷冻法成功地冷冻保存小鼠胚胎以来, 许多学者开始了对胚胎冷冻保存方法的研究, 研究的热点主要集中在提高冷冻保存胚胎的活力和简化冷冻程序上。到目前为止, 胚胎冷冻方法主要有常规慢速冷冻法、玻璃化冷冻法。

3.1常规慢速冷冻

尽管哺乳动物胚胎冷冻保存技术已经出现多年, 冷冻技术的研究也取得了很大的进步, 但是到目前为止, 常规慢速冷冻法仍然是哺乳动物胚胎冷冻保存的主要方法。此方法选择较低浓度的渗透性冷冻保护剂, 采用缓慢降温和快速解冻的方法来冷冻保存胚胎。常规慢速冷冻法可分为以下几个步骤（1）室温下胚胎置于冷冻液中5-10min, 使胚胎和冷冻液间达到平衡; （2）在-5℃到-9℃之间植冰; （3）以0.3℃-0.6℃/分的速度缓慢降温;(4)降温到-30℃到-40℃之间, 投入液氮中保存;（5）以250℃/分的速度快速解冻; （6）在培养或移植前, 室温下除去冷冻保

护剂。

3.2玻璃化冷冻

玻璃化冷冻保存是指通过冷冻过程中形成玻璃样物质来减少细胞内外冰晶的形成, 以保护胚胎的一种冷冻方法。这种方法采用快速降温和高浓度的冷冻保护剂, 使冷冻过程中溶液变得十

分黏稠和坚固, 不形成冰晶。自从1985 年Rally 和Fahy 首次用玻璃化法冷冻小鼠胚胎获得成功, 玻璃化冷冻技术就成为学者

们的研究热点。目前,玻璃化冷冻技术不仅能成功地冷冻保存多种哺乳动物的胚胎,而且还能冷冻保存对低温敏感性高的卵母细胞。影响胚胎玻璃化冷冻保存效果的两个关键因素是冷冻保护剂和冷冻速度。只有最大冷冻速度和最低冷冻保护剂浓度之间达到平衡, 才能获得好的冷冻效果。要在一定的冷冻速度下形成玻璃化状态,就需要高浓度的冷冻保护剂, 但是浓度过高的冷冻保护剂又会对胚胎产生毒害。不同种冷冻保护剂形成玻璃化的能力和对胚胎的毒性也不一样。因此寻找毒性低、形成玻璃化能力强的玻璃化冷冻液成为胚胎玻璃化冷冻研究的热点之一。大量研究表明把不同种类的冷冻保护剂组合成玻璃化冷冻液, 能达到降低

冷冻保护剂对胚胎毒害作用, 提高玻璃化冷冻效果的目的。

冷冻速度是形成玻璃化状态的另一个关键因素, 提高冷冻速度可以使玻璃化溶液中冷冻保护剂的浓度降低, 降低冷冻保护

剂对胚胎的毒害作用。起初, 胚胎的冷冻载体采用0. 25mL 或0. 5mL 的细管, 直接投入液氮中。为提高胚胎的冷冻速度, 研究人

员发明了许多非常具有创意的冷冻载体。Vajta G 等( 1998 ) 发明了OPS 法,Lane M 等( 1999 ) 采用冷环法, Liebermann J 等( 2002) 发明FDP 法, Vanderzw almen P 等( 2003) 发明半管法, Son W Y 等( 2003) 采用电镜铜网法( electron microscopy copper grids) , Bagis H 等( 2005) 利用金属表面法( metal surface) , Niasar-i Naslaji( 2006) 采用电泳上样吸头法。这些新型冷冻载体都极大的提高了冷冻速度, 不同程度地提高

了玻璃化冷冻效果。在这些研究中, Vajta 发明的OPS法最受欢迎。OPS 法是通过将细管加热后拉长拉细, 使得管壁变薄, 细管体积变小来提高冷冻速度的, 其冷冻速度达20 000℃/ min 以上。采用OPS法冷冻胚胎防止了冷冻损伤, 降低了冷冻保护剂的毒性和渗透性损伤。目前, 多项研究表明OPS法的冷冻保存结果达到或超过了常规慢速冷冻法。即使对采用常规慢速冷冻法不易成功冷冻保存的细胞或胚胎, 如卵母细胞、猪胚胎、体外受精胚胎、经过显微操作的胚胎等, OPS 法也取得了较好的效果。

4. 解冻方法

解冻方法对胚胎的存活和进一步发育能力有很大的影响, 研究表明慢速解冻能够降低胚胎的存活率。水浴解冻可以使温度变化速度为4460℃/min, 而在空气中解冻才不到196℃/min, 且这种解冻方法经常导致透明带破裂。总之, 快速解冻对提高胚胎冷冻效果是非常有益的。一般解冻时将细管在空气中或10℃到28℃停留10s,然后投入22℃到35℃间的水浴中10s到30s。解冻后为了

避免冷冻保护剂对胚胎产生毒害作用, 应立即将冷冻保护剂除去, 通常用蔗糖溶液将冷冻保护剂脱出。目前,蔗糖的浓度还没

有一致的共识,一般多用0.5mol/mL的蔗糖。

5. 结语

随着其它生物技术的发展, 给胚胎冷冻技术的应用提供了新

思路和新方法。这对解决我国动物遗传资源急速衰减, 挽救濒危品种. 建立胚胎库和配子库, 提供了一个广阔的前景。通过不断改进, 相信超低温冷冻保存技术将不仅仅适用于胚胎的保存.还

会适用于其它细胞和组织结构, 特别是OPS 玻璃化冷冻法具有

诸多优于其它冷冻方法的特点, 它将很可能成为超低温冷冻保

存技术的首选方法之一。

参考文献

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个人观点:

这篇文章主要讲解了胚胎冷冻保存的知识,胚胎冷冻保存是

动物细胞培养过程中相当重要的一个环节。通过这篇文章，让我在课堂上学习到的相应知识得到了进一步的扩展和延伸，而胚胎冷冻方面的研究必然会在未来动物转基因领域占据更加重要的

地位。

哺乳动物教案

第七节哺乳动物 知识目标：1、说明哺乳动物的形态、结构和生理功能的特点，概述哺乳动物的主要特征； 2、阐明狼和兔在牙齿等方面与其陆地生活相适应的特点； 3、了解哺乳动物与人类的生活关系。 过程与方法：通过进行观察、分析、类比等方法的训练，培养学生观察、分析、总结和概括的能力。 教学重点：1、理解哺乳动物的形态结构与功能性适应的特点。 2、了解哺乳动物与人类的生活关系。 教学难点：哺乳动物与陆地生活相适应的特点。 教学方法：情景教学法，设疑提问法，讨论法。 教学准备：教师：多媒体教学课件的制作与准备。 学生：预习教材，了解哺乳动物的食性特点及生活方式。 一、情境引入： 教师展示：P36“想一想，议一议”图文：上图争相吃奶的小狗多可爱！哺乳动物用乳汁哺育幼崽。小动物一般在出生后，就会吮吸乳汁。与其他抚育后代的方式相比，哺乳有什么优越性？ 生：回答...... 引入新课：这就是我们第七节要解决的问题。 【答疑解惑】

①乳汁中含有丰富的营养物质，使得哺乳动物的后代在优越的营养条件下健康地、迅速地生长和发育，②哺乳动物的雌兽能较好的的保护自己的幼崽。 二、自主、合作、交流 任务一：总结哺乳动物的两个主要特征 1、观察猕猴、野马、大象的体表，与鸟类的体表有什么相同点与不同点？ 体表被毛，有保温作用，是恒温动物 2、展示袋鼠、熊猫、猴哺乳的图片，引导学生从生殖和发育方面说出，哺乳动物的胎生、哺乳特征。 ①联系青蛙产卵，鱼类产鱼籽的存活率 ②鸟类产卵，乌龟产卵的存活率 ③鸟类育雏，企鹅的孵卵图片 总结胎生哺乳的优越性： 胎生：绝大多数哺乳动物的胚胎在雌性体内发育，通过胎盘从母体获得营养，发育到一定阶段后从母体中产出。 哺乳：雌性用自己的乳汁哺育后代，使后代在优越的营养条件下成长。胎生、哺乳提高了后代的成活率 提示：（1）胚胎在母体里发育，母体直接产出幼崽。胎生比卵生提高了后代的存活率。

2019版高考生物二轮复习专题专项检测卷八现代生物科技专题B卷__重点增分练含解析

重点增分练 一、选择题1．拟采用“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”的方法繁殖一种名贵花 卉。下列有关叙述错误的是( ) A．消毒的原则是既要杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害 B．在愈伤组织培养基中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞 C．出芽是外植体经细胞脱分化后再分化的结果，受基因选择性表达的调控D．诱导分化生长物生根时，培养基中通常含有NAA等植物生长调节剂 解析：选B 愈伤组织细胞有细胞壁，加入细胞融合的诱导剂也不能使细胞融合；再分化出芽是基因选择性表达的结果；NAA等植物生长调节剂可以诱导分化生根。2．(2019届高三·苏锡常镇四市调研)将鼠胚胎干细胞(ES细胞)种植于饲养层细胞上， 添加干细胞因子、血小板生成素及动物细胞培养液，培养6 d后，检测发现86%的细胞形态与结构特征呈现出造血干细胞样细胞(CD34＋细胞)的特点。下列有关叙述错误的是( ) A．从早期胚胎中分离出来的细胞就是ES细胞 B．干细胞因子等物质可促进ES细胞分化形成CD34＋细胞 C．ES细胞形成CD34＋细胞的根本原因是基因的选择性表达 D．本实验结果尚不能支持“动物细胞具有全能性”的观点 解析：选A 从早期胚胎中分离出来的细胞有ES细胞，但不都是ES细胞；干细胞因子 等物质可促进ES细胞分化形成CD34＋细胞；ES细胞形成CD34＋细胞的过程为细胞分化，其实质是基因的选择性表达；本实验结果只是形成了多种不同的细胞，并没有形成完整的个体， 因此尚不能支持“动物细胞具有全能性”的观点。 3．下表是有关动物细胞培养与植物组织培养的比较，错误的是( ) 解析：选A 殖。

哺乳动物的教案

哺乳动物的教案 一、教学目标 （一）知识目标 1．概述哺乳动物的主要特征。 2．举例说明哺乳动物与人类生活的关系。 （二）能力目标 通过分析、概括形态各异、生活环境差别很大的哺乳动物的共同特征，尝试进行比较、分析、概括。 （三）情感、态度与价值观目标 关注哺乳动物和人类生活的关系。 二、教学重点 哺乳动物的主要特征；哺乳动物与人类生活的关系。 三、教学难点 辩证地认识哺乳动物和人类生活的关系。 四、教学准备 查阅相关资料，设计并制作多媒体课件。 五、教学过程 （一）创设情境，引发思考，导入新课 创设形态各异、生活环境差别很大的哺乳动物的图片情境。请学生辨识这些动物，讨论这些动物是否都属于哺乳动物？并说出理由。学生可能会说出这些动

物都是胎生、哺乳的，体温都是恒定的等等。引出课题，今天我们就一起来学习哺乳动物的相关知识。 【设计意图】识别形态各异、生活环境差别很大的哺乳动物，初步讨论哺乳动物的主要特征。 （二）概述哺乳动物的主要特征 1．刚才同学们初步说出了哺乳动物的主要特征，现在我们先来回顾一下：从体表来看，哺乳动物与其他类群的动物有什么区别？我们学过的腔肠动物、线形动物、环节动物、软体动物、节肢动物、鱼类、两栖类、爬行类、鸟类的体表都有什么特有的结构？哺乳动物呢？ 【设计意图】总结不同类群动物体表的特有结构，可以使学生对各个类群的特征有更清晰的认识，也便于从体表特征的角度初步区分各主要类群。 2．绝大多数哺乳动物体表被毛，但生活在不同环境里的动物体表的毛还是不同的。 准备生活在非洲等热带地区的河马和生活在北美北部的灰狼图片，让学生观察图片中的动物及其生存环境，思考：河马和灰狼分别生活在怎样的环境中？为什么河马几乎无毛发，而灰狼在寒冷的冬季有厚厚的体毛到夏天则变薄？哺乳动物的体毛起到怎样的作用呢？学生通过分析比较、小组讨论等，能更深入地理解并认同“哺乳动物体表被毛”这一特征，及其重要意义。 【设计意图】比较不同环境中的哺乳动物皮毛不同，理解哺乳动物体表被毛的主要作用是保温。 3．除了体表被毛这一外在特征之外，哺乳动物区别于其他动物的本质特征是什么呢？请学生看“想一想，议一议”，思考：和其他类群的动物相比，为什么胎生、哺乳提高了后代的成活率？准备奶制品包装袋上的营养成分数据照片，请学生思考：为什么奶水可以为幼崽提供最好的营养？补充考拉、袋鼠等有袋目的哺乳动物，加深学生对哺乳动物“哺乳”这一重要特征的理解。为什么说绝大

5.1.7哺乳动物试题及解析

1.(2014?郴州)下列关于哺乳动物的叙述，正确的是( ) A. 体表被毛，有于吸引异性和求偶 B. 胎生可以提高产仔数量 C. 胎生、哺乳有利于提高后代成活率 D. 所有哺乳动物都是通过胎生繁殖后代 【答案】C 【解析】试题分析：哺乳动物的主要特征：一般具有胎生哺乳，体表被毛覆盖，有保温作用，体腔内有膈，牙齿分为门齿、臼齿、犬齿，心脏四腔，用肺呼吸，体温恒定等。哺乳动物中只有鸭嘴兽是卵生。 A、哺乳动物体表被毛，有利于保温，不是有于吸引异性和求偶，A不正确; B、胎生可以提高后代的成活率，不是可以提高产仔数量如驴，B不正确; C、胎生、哺乳有利于提高后代成活率，C正确; D、鸭嘴兽是卵生的哺乳动物，因此绝大部分哺乳动物都是通过胎生繁殖后代，D不正确。故选：C. 2.（2017辽宁营口）哺乳动物后代的成活率大大提高，主要与下列哪项特征有关？（） A.体温恒定 B.胎生哺乳 C.分布广泛 D.牙齿有分化 【答案】B 【解析】试题分析：哺乳动物在繁殖期间哺乳动物雌雄交配，雄性的精子进入雌性的体内，和卵细胞结合，形成受精卵，在雌性动物的子宫内发育形成胚胎，胚胎在母体的子宫内，通过胎盘和母体之间进行物质交换，发育成胎儿，胎儿从母体生出来，这种生殖方式叫胎生，刚出生的幼体身上无毛，眼睛没有睁开，不能行走，只能靠母体的乳汁生活，叫哺乳，所以称为哺乳动物，大大提高了后代的成活率，增强了对陆上生活的适应能力． 3.（2017山东东营）十二生肖是华夏先民图腾崇拜和早期天文学的结晶，让每个人都具有与生俱来的属相，代表着全中国所有人的精神风貌。下列哪项是丑牛、巳蛇、酉鸡的共同特征？（） A.体温恒定 B.用肺呼吸 C.胎生哺乳 D.心脏四腔

高二下期期末考试生物试题

2012—2013学年度下学期期末考试 高二生物试题 一、选择题（共40分，每题1分） 1．有关基因工程叙述正确的是() A．限制酶只在获取目的基因时才用B．基因工程产生的变异属于人工诱变 C．质粒都可以作为载体D．蛋白质的氨基酸排列顺序可能为合成目的基因提供线索 2．某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶(Amy)基因a，通过基因工程的方法，将基因a与载体结合后导入马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在。下列有关这一过程的叙述不正确的是() A．获取基因a的限制酶的作用部位是图中的① B．连接基因a与载体的DNA连接酶的作用部位是图中的② C．基因a进入马铃薯细胞后，可随马铃薯DNA分子的复制而复制，传给子代细胞 D．通过该技术人类实现了定向改造马铃薯的遗传性状 3．如图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因(kan r)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下列叙述正确的是( ) A．构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶 B．愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株 C．卡那霉素抗性基因(kan r)中有该过程所利用的限制性核酸内切酶的识别位点 D．抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传 4.下列叙述符合基因工程概念的是（） A.B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因 B.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株 C.用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株 D.自然界中存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上 5．正确表示基因操作“四步曲”的是( ) ①获取目的基因②目的基因导入受体细胞③基因表达载体的构建④目的基因的检测和鉴定 A.①②③④ B.④①③② C.①③②④ D.③①②④ 6．通过基因工程的方法，使番茄果肉细胞含有人奶蛋白。有关该基因工程叙述错误的是( ) A．采用反转录的方法得到的目的基因有启动子、终止子 B．用同种限制酶处理质粒和含目的基因的DNA，可产生相同的黏性末端而形成重组DNA 分子 C．番茄的叶肉细胞可作为受体细胞 D．启动子对于目的基因在番茄的叶肉细胞中表达是不可缺少的 7．人们试图利用基因工程的方法，用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质。生产流程是：

小度写范文[哺乳动物之最]哺乳动物与人类关系模板

[哺乳动物之最]哺乳动物与人类关系 哺乳动物是指用母乳哺育幼儿的动物，是动物世界中形态结构最高等、生理机能最完美的类群。总的来讲，哺乳动物的智力水平要比其他种类的动物的智力水平高。全世界现存哺乳动物大约有4000多种，其中有的善于在陆地上奔跑，有的能够在空中飞翔，也有些种类常年生活在水中。哺乳动物的基本特征：所有哺乳动物都是恒温动物，体表的皮毛可以帮助其保持体温，都有骨骼，用肺呼吸，多为胎生。所有的4000多种哺乳动物中，有哪些动物处于极端的生活环境?有哪些动物有着极其独特的形态和生理特征呢? 怀孕期最短的哺乳动物――鼠兔。鼠兔身长约12厘米，体重为120克左右。后肢长于前肢，无尾巴，耳呈椭圆形。由于既像老鼠，又像兔子，所以叫鼠兔，它的怀孕期只有15天左右。怀孕期最长的哺乳动物――大象。大象的怀孕期是所有的哺乳动物中最长的，要18-20个月。哺乳期最短的哺乳动物――冠海豹。小冠海豹出生时大约20公斤，哺乳期内大约每天增加5公斤，但哺乳期仅4天，是所有哺乳动物中哺乳期最短的。哺乳期最长的哺乳动物――人类。根据需要，人的哺乳期可以从一年延长到两三年，甚至更长。跑得最快的哺乳动物――猎豹。猎豹是一种十分凶猛的野兽，属猫科动物。有非洲猎豹和美洲猎豹。猎豹的四肢特别发达健壮，躯干部分成弓形，富有弹性，腰部和腿部有很强的爆发力，这种体型十分适宜奔跑，在300米以内，它的步幅可跨7米，奔跑时速超过110公里，可与汽车或火车相比。所以．猎豹有动物“短跑冠军”之称。最缓慢的哺乳动物――三趾蛞蝓。南美赤道地带的三趾蛞蝓在地面的平均奔跑速度介于每分钟1.8米和2.4米之间，即每小时0.1～0.16公里之间。速度最慢的树栖哺乳动物――树懒。生活在南美洲亚马逊热带雨林中的树懒，它的平均对地速度是每分钟2～2.44米。最大的哺乳动物――蓝鲸。它也是地球上生活的最大的动物，蓝鲸不仅仅是现存世界上最大的动物，也是到目前为止最大的动物，它比中生代的恐龙都大得多，这种庞然大物，重达200吨。最大的陆生哺乳动物――象。目前世界上只有两种象，亚洲象和非洲象。亚洲象又名印度象，身体较非洲象稍小些，主要分布在印度、泰国、马来西亚、巴基斯坦、缅甸、越南、斯里兰卡和我国的云南省。非洲象分布在非洲各地的丛林以及丘陵地带。非洲象的体型较大些，体重可达5～6吨。最长寿的哺乳动物――大象。在哺乳动物中，除人类以外，最长寿的动物是大象，据说它能活60到70岁。当然野生大象和人工饲养的是不同的，前者的寿命短些。据记载，哥拉帕格斯群岛的长寿象能活180岁到200岁。最小的哺乳动物――小麝?。小麝?又名尖嘴鼠，吻尖长，且能伸缩，体长不超过4.5厘米，体重1.2～1.7克。小麝?仅分布于我国长江以北地区。最小的飞行类哺乳动物――大黄蜂蝙蝠。它是最小的蝙蝠，体重仅2克。最大的灵长类哺乳动物――低地猿。发现于刚果东部的雄性东部低地猿两足站立时高度为1.75米，平均体重达163.4公斤。最小的灵长类哺乳动物――小鼠狐猴。最小的灵长类哺乳动物是西马达加斯加落叶林中最近被重新发现的小鼠狐猴。该种动物头部和身体的长度为6.2厘米，尾部长度为13.6厘米，平均重量为30.6克。最小的鳍脚亚目哺乳动物――海狗。该动物生长在加拉帕戈斯群岛。成年雌性海狗体长为1.2米，重量为27公斤。雄性海狗则大得多，平均高度为1.5米，重量为64公斤。最大的啮齿类哺乳动物――水老鼠。南美北部的水老鼠，头部和身体的长度为1～1.3米，重量可达79公斤。一只在笼中喂肥的该种动物可达113公斤。最小的啮齿类哺乳动物――北部小鼠、俾路支小跳鼠。墨西哥和美国得克萨斯、亚利桑那州的北部小鼠和巴基斯坦的俾路支小跳鼠头部和身体的长度都为3.6厘米。寿命最长的啮齿类哺乳动物――苏门答腊有冠豪猪。纪录中啮齿类动物最大的年龄为27岁零3个月，这是一只1965年1月12日死于美国华盛顿特区的苏门答腊有冠豪猪。最原始的哺乳动物――鸭嘴兽。鸭嘴兽是一种卵生、哺乳的半水栖动物，因嘴形似鸭嘴而得名。它在学术上具有重要意义，代表了从爬行类到哺乳类的过渡阶段，是珍贵

胚胎工程习题

专题3 胚胎工程 一、选择题 1．下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是() A．卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 B．胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割 C．胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点 D．胚胎干细胞是一类未分化细胞，可从早期胚胎中分离获取 2．下列有关哺乳动物个体发育的叙述，错误的是() A．胚后发育过程中伴有细胞分化 B．幼鹿经过变态发育过程长出发达的鹿角 C．胚胎发育过程中也会出现细胞衰老 D．来自原肠胚同一胚层的细胞经分化发育成不同的组织 3．高等哺乳动物受精后不久，受精卵最后发育成一个完整的幼体，下列叙述错误的是() A．高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于囊胚期，终止于生命结束 B．高等哺乳动物胚胎发育经历的时期中最关键的时期是原肠胚期 C．进行胚胎分割时，应选择原肠胚期的胚胎进行 D．下图是胚胎发育过程中囊胚期示意图，①②③依次称之为透明带、滋养层、内细胞团 4．下列有关胚胎工程的叙述，正确的是() A．卵裂期每一个细胞的体积比受精卵大 B．试管动物是无性生殖 C．对某一胚胎的干细胞核移植，产生的动物中雄性和雌性的几率各占 2 1 D．通过胚胎移植技术可充分发挥良种母畜的繁殖潜力 5．“试管婴儿”技术是将不孕夫妇的精子和卵子细胞取出在试管中完成受精，并在试管中培养受精卵使其发育到囊胚阶段，再将胚胎移入女性子宫内发育成胎儿。“试管婴儿”技术在生物学上所依据的原理是() A．有性生殖B．组织培养C．克隆技术D．基因工程 6．胚胎培养是指() A．自然受精形成的受精卵发育为早期胚胎 B．人工授精形成的受精卵发育为早期胚胎 C．将早期胚胎移植入受体子宫内的发育 D．体外受精形成的受精卵发育为早期胚胎 7．下列不是精子、卵子发生的区别的是() A．初级精母细胞、初级卵母细胞的形成时间 B．MⅠ和MⅡ的时间连续性 C．成熟生殖细胞是否经过变形 D．成熟生殖细胞中染色体的数量 8．保证胚胎在移植前后所处的生理环境一致的方法是() A．用抗利尿激素同时处理供体和受体 B．用孕激素同时处理供体和受体 C．用催产素处理供体和受体 D．用促性腺激素同时处理供体和受体 9．下列对牛的胚胎移植过程的描述，不正确的是() A．使用促性腺激素对供体进行超数排卵处理

资料胚胎工程习题

[资料]胚胎工程习题 专题3 胚胎工程 一、选择题 1(下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是( ) A(卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 B(胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割 C(胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点 D(胚胎干细胞是一类未分化细胞，可从早期胚胎中分离获取 2(下列有关哺乳动物个体发育的叙述，错误的是( ) A(胚后发育过程中伴有细胞分化B(幼鹿经过变态发育过程长出发达的鹿角 C(胚胎发育过程中也会出现细胞衰老 D(来自原肠胚同一胚层的细胞经分化发育成不同的组织 3(高等哺乳动物受精后不久，受精卵最后发育成一个完整的幼体，下列叙述错误的是( ) A(高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于囊胚期，终止于生命结束 B(高等哺乳动物胚胎发育经历的时期中最关键的时期是原肠胚期 C(进行胚胎分割时，应选择原肠胚期的胚胎进行 D(下图是胚胎发育过程中囊胚期示意图，???依次称之为透明带、滋养层、内细胞团 4(下列有关胚胎工程的叙述，正确的是( ) A(卵裂期每一个细胞的体积比受精卵大 B(试管动物是无性生殖 1C(对某一胚胎的干细胞核移植，产生的动物中雄性和雌性的几率各占2

D(通过胚胎移植技术可充分发挥良种母畜的繁殖潜力5(“试管婴儿”技术是将不孕夫妇的精子和卵子细胞取出在试管中完成受精，并在试管 中培养受精卵使其发育到囊胚阶段，再将胚胎移入女性子宫内发育成胎儿。“试管婴儿”技 术在生物学上所依据的原理是( ) A(有性生殖 B(组织培养 C(克隆技术 D(基因工程 6(胚胎培养是指( ) A(自然受精形成的受精卵发育为早期胚胎 人工授精形成的受精卵发育为早期胚胎 B( C(将早期胚胎移植入受体子宫内的发育 D(体外受精形成的受精卵发育为早期胚胎 7(下列不是精子、卵子发生的区别的是( ) A(初级精母细胞、初级卵母细胞的形成时间 B(M?和M?的时间连续性C(成熟生殖细胞是否经过变形 D(成熟生殖细胞中染色体的数量 8(保证胚胎在移植前后所处的生理环境一致的方法是( ) A(用抗利尿激素同时处理供体和受体 B(用孕激素同时处理供体和受体 C(用催产素处理供体和受体 D(用促性腺激素同时处理供体和受体 9(下列对牛的胚胎移植过程的描述，不正确的是( ) A(使用促性腺激素对供体进行超数排卵处理 B(对供体和受体使用激素进行同期发情处理 C(冲卵是指从供体母牛子宫中冲洗出受精卵 D(通过胚胎检查，发育到囊胚或桑椹胚才可移植

家畜胚胎超低温冷冻保存的研究进展

家畜胚胎超低温冷冻保存的研究进展 蔡元1、2，张凤鸣1、2，潘红梅1、2、，陈四清1、2 (1.重庆市畜牧科学院重庆荣昌402460 .2.重庆市养猪工程技术研究中心重庆荣昌402460) 摘要：本文对家畜胚胎冷冻保护液的成分、冷冻方法、胚胎解冻方法与冷冻保护剂的脱除及最新研究进展进行了综述。 关键词：家畜；胚胎；冷冻保存 Present Research Advance in Cryopreservation of Livestock Embryos Cai yuan1、2, Zhang fengming1 2 ,Pan hongmei1、2 ,Chengsiqing1 2 (1.Chongqing Institute of Animal Science ,Chongqing Rongchang 402460 2.Chongqing Swine engineering Research，Chongqing Rongchang 402460) Abstract： Advances on cryoprotextive solution, freezing way, thaw way and the elimination of cryoprotective solution and recent situation in livestock embryos were reviewed in this paper. Key words：Livestock；Embryo；Cryopreservation 家畜胚胎的超低温冷冻保存技术不仅为动物种质资源的保存和良种家畜的国际交流提供了简单有效的手段,而且还是胚胎移植、体外受精、转基因和克隆等胚胎生物技术不可分割的组成部分。自从1972年,英国学者Whittingham等人首次冷冻保存小鼠胚胎获得成功后[1]，到目前已经在20多种哺乳动物上获得成功，奶牛、黄牛、山羊、绵羊、马、兔和小鼠等的冷冻胚胎已得到较广泛的使用[2-3]，特别是牛和羊的胚胎冷冻保存研究进展很快，其冷冻胚胎已经走向商品化应用。目前人们对冷冻保存原理、冷冻保存的因素和冷冻方法进行了广泛的研究并取得了巨大进步。 1、抗冻保护剂和冷冻溶液 在哺乳动物的胚胎冷冻过程中，加入抗冻保护剂的目的是为了防止冰晶的形成。抗冻保护剂常可分为三类：(1)细胞内液抗冻保护剂。常用低分子量可渗性物质，例如甲醇、乙二醇(EG)、丙二醇(PG)、甘油(G)、二甲基亚砜(DMSO)等；(2)细胞外液抗冻保护剂。常用低分子量不可渗性物质，例如半乳糖(Galactose)、蔗糖(Sucrose)、海藻糖(Trchaose)、聚蔗糖(Ficoll)等。（3）大分子量不可渗性物质，例如聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，聚乙烯醇(PVA)，羟乙基淀粉及其它一些聚合物。 在实际应用中，缓慢冷冻法经常只使用一种抗冻保护剂，如甘油或乙二醇等，而快速冷冻和玻璃化冷冻常应用多种抗冻保护剂，如甘油和丙二醇、甘油和乙二醇或者乙二醇和丙二醇，再加入葡萄糖、蔗糖或半乳糖。甘油可调节细胞脱水并保护蛋白结构，而糖类，例如海藻糖可以保持膜结构，甘油本身并不能保持细胞膜结构，而且在高浓度和高温下可以诱发膜融合，因此解冻后需尽快除去甘油。这些不同低温保护液的特性表明，他们是以不同方法来保持胚胎细胞免受冷冻损伤，有效的低温保护液应将各种低温保护剂

玻璃化冷冻法保存人类囊胚的临床应用

玻璃化冷冻法保存人类囊胚的临床应用 戴志俊季钢张芳芳张奕 （合肥市妇幼保健院，合肥230001，安徽） 摘要：目的：探讨玻璃化冷冻法保存人类囊胚的临床应用效果。方法：回顾性分析2011年1月～10月在我院生殖中心行玻璃化冷冻解冻囊胚患者共12个周期的结局。结果：玻璃化冷冻解冻共21枚胚胎，存活21枚（存活率100%），共解冻12个周期，均有胚胎移植，获得临床妊娠5例（妊娠率41.67%），着床率23.81%（5/21）。结论：玻璃化冷冻法是保存人类囊胚的一种有效方法。 关键词：囊胚，玻璃化，冷冻保存，人类 Clinical Application Of Vitrification For Human Blastocysts Dai Zhijun, Ji Gang , Zhang Fangfang , Zhang Yi （Hefei Maternity and Child Health Hospital,Hefei 230001,Anhui）Abstract:Objective: To examine the clinical value of vitrification for human blastocysts. Methods: Retrospective analysis of 12 patients who conduct embryos vitrification from Jua.2011 to Oct.2011. Results: All of the 21 blastocysts were thawed and survived , survival rate was 100%(21/21);5 cycles of 12 cycles got clinical pregnancy after transferred, clinical pregnancy rate were 41.67% ,implantion rate were 作者单位：合肥市妇幼保健院 安徽医科大学妇幼保健临床学院安徽230001

人教版选修三 体内受精和早期胚胎发育 作业3

体内受精和早期胚胎发育 1．下列细胞，哪一个代表已经完成受精的卵子（） 【答案】C 【解析】判断卵子是否受精的重要标志是卵细胞膜和透明带的间隙出现两个极体，观察题图可知，C正确。 2．如图为女性生殖系统示意图。据图分析，产生卵细胞的场所、精子和卵细胞结合的场所、胚胎发育的场所依次是（） A．②①③ B．②③① C．③①② D．①②③ 【答案】C 【解析】女性生殖系统主要包括卵巢、输卵管、子宫、阴道等。③卵巢能产生卵细胞并分泌雌性激素；①输卵管的作用是输送卵细胞，也是受精作用的场所；②子宫是胚胎发育的场所；阴道是精子进入女性体内和婴儿出生的通道。 3．关于精子变形的叙述错误的是（） A．细胞核变为精子头部的主要部分 B．高尔基体发育为头部的顶体 C．中心体演变为精子的尾 D．线粒体退化消失 【答案】D 【解析】 试题分析：在精子的变形过程中，细胞核变为精子头部，高尔基体发育为头部的顶体，中心体演变为精子的尾，线粒体聚集于尾的基部形成线粒体鞘，故D错。 考点：本题主要考查精子的变形，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。 4．下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述,正确的是 A．体外受精完成后即可进行胚胎移植操作 B．异体骨髓移植成功后，康复者的血型仍旧是原有血型，不会发生改变 C．卵裂期胚胎中细胞数目在不断增加,而有机物的总量却在不断减少 D．通过胚胎移植产生多个后代的繁殖方式都属于有性生殖 【答案】C 【解析】 试题分析：受精完成后需要进行早期胚胎培养后再进行胚胎移植，故A错误；异体骨髓移植成功后，康复者的血型发生改变，故B错误；卵裂期胚胎中细胞数目在不断增加，有机物的总量却在不断减少，故C正确；通过胚胎移植产生多个后代的繁殖方式不一定都属于有性生殖，如胚胎分割移植，故D错误。

生物人教版八年级上册《哺乳动物》的教学设计

《哺乳动物》的教学设计 一、教学目标 （一）知识目标 1．概述哺乳动物的主要特征。 2．举例说明哺乳动物与人类生活的关系。 （二）能力目标 通过分析、概括形态各异、生活环境差别很大的哺乳动物的共同特征，尝试进行比较、分析、概括。 （三）情感、态度与价值观目标 关注哺乳动物和人类生活的关系。 二、教学重点 哺乳动物的主要特征；哺乳动物与人类生活的关系。 三、教学难点 辩证地认识哺乳动物和人类生活的关系。 四、教学准备 查阅相关资料，设计并制作多媒体课件。 五、教学过程 （一）创设情境，引发思考，导入新课 创设形态各异、生活环境差别很大的哺乳动物的图片情境。请学生辨识这些动物，讨论这些动物是否都属于哺乳动物？并说出理由。学生可能会说出这些动物都是胎生、哺乳的，体温都是恒定的等等。引出课题，今天我们就一起来学习哺乳动物的相关知识。

【设计意图】识别形态各异、生活环境差别很大的哺乳动物，初步讨论哺乳动物的主要特征。 （二）概述哺乳动物的主要特征 1．刚才同学们初步说出了哺乳动物的主要特征，现在我们先来回顾一下：从体表来看，哺乳动物与其他类群的动物有什么区别？我们学过的腔肠动物、线形动物、环节动物、软体动物、节肢动物、鱼类、两栖类、爬行类、鸟类的体表都有什么特有的结构？哺乳动物呢？ 【设计意图】总结不同类群动物体表的特有结构，可以使学生对各个类群的特征有更清晰的认识，也便于从体表特征的角度初步区分各主要类群。 2．绝大多数哺乳动物体表被毛，但生活在不同环境里的动物体表的毛还是不同的。 思考：河马和灰狼分别生活在怎样的环境中？为什么河马几乎无毛发，而灰狼在寒冷的冬季有厚厚的体毛到夏天则变薄？哺乳动物的体毛起到怎样的作用呢？学生通过分析比较、小组讨论等，能更深入地理解并认同“哺乳动物体表被毛”这一特征，及其重要意义。 【设计意图】比较不同环境中的哺乳动物皮毛不同，理解哺乳动物体表被毛的主要作用是保温。 3．除了体表被毛这一外在特征之外，哺乳动物区别于其他动物的本质特征是什么呢？请学生看“想一想，议一议”，思考：和其他类群的动物相比，为什么胎生、哺乳提高了后代的成活率？准备奶制品包装袋上的营养成分数据照片，请学生思考：为什么奶水可以为幼崽

胚胎冷冻保存技术

胚胎冷冻保存技术 摘要; 胚胎冷冻保存技术可使胚胎移植不受时间地点的限制，从而达到提高胚胎移植效率的目的。研究和优化胚胎冷冻保存技术对胚胎工程的发展有重要的意义。 关键词：胚胎冷冻保存 为便于长途运输和随时供移植使用，将那些６～７日龄已有２０～３０个细胞的新鲜活胚胎（或分割后的半胚胎、１／４胎）在－１９６℃的超低温下冷冻贮存就是胚胎冷冻保存技术。这是在冷冻精子的技术基础上进一步发展起来的一项新技术。目前用冷冻胚胎移植的成功率约为鲜胚胎的７０％～８０％，胚胎冷冻保存技术可使胚胎移植不受时间地点的限制，从而达到提高胚胎移植效率的目的。 现有的胚胎冷冻保存方法有四种： 一、常规冷冻法 常规冷冻法：也叫慢速冷冻法、逐步降温法。将采集到的胚胎用培养液洗涤后置入有不同冷冻保护剂(甘油或二甲亚枫(DMSO)等)浓度的三种冷冻液中(冷冻液浓度由低到高，最终浓度1．4M)，每种冷冻液中平衡5分钟，然后将胚胎和冷冻液装入细管中封口、标记，放入冷冻仪中进行冷冻。冷冻速率先以1～3~C／分下降至-6～-7℃，在此温度诱发结晶，平衡10分钟，然后，以0．3℃／分的速率降温至-35～_38℃，之后投入液氮中保存。胚胎解冻后，需按胚胎进入冷冻液时的相反浓度，即从高到低浓度脱除冷冻保护剂，每步5分钟，最后置入含20％血清的PBS保护液中洗涤3次，彻底脱除冷冻保护剂。或者将解冻后的胚胎放入0．5M(或1．0M)的蔗糖溶液中平衡10分钟，再用上述PBS液洗涤3次。 二、一步冷冻法 一步冷冻法：也叫一步细管法。该方法是由慢速冷冻法改进而来，细管内的冷冻液和蔗糖液是分开的，因此，在细管内用蔗糖液可一步脱除甘油抗冻剂，从而利于在生产中推广应用。 三、程序冷冻法 程序冷冻法主要采用低浓度冻结保存剂梯度脱水,经程序冷冻仪缓慢降温。主要操作步骤包括:将细胞顺序放入一系列逐渐增加保存剂浓度的溶液中梯度脱水,置入程序冷冻仪快速降温至-6℃植冰(人工诱导冰晶形成),然后程序冷冻仪缓慢降温至-30℃~-80℃后液氮贮存。 程序冷冻法主要使用渗透较慢的低温保护剂，如乙二醇(EG)、丙二醇(PG)、甘油(G)、二甲基亚砜(DMSO)，使冷冻保护剂充分渗透人胚胎细胞内，平衡后，利用程序降温仪缓慢降温，最后投入液氮保存。程序冷冻法采用较低浓度的冷冻保护剂，对胚胎毒性损害小，解冻后存活率较高。但因其操作繁琐，降温速度慢，致使所需时间长，需要特殊的降温装置，在不具备实验条件的场所不能使用此法进行胚胎冷冻。目前国内外均较少使用。 通常在程序化慢冷的液体中，各含有一种细胞渗透性冷冻保护剂和一种非细胞渗透性保护剂，于室温下，在低浓度的冷冻保护剂溶液中预平衡，然后放置在终浓度的冷冻液中。在冷冻仪内于预设的程序下降温标本，经过冷冻保护剂的处理后，胞内渗透压增高，意味着细胞内液冰点下降。由于细胞自身的特性，

小鼠胚胎冷冻方案

药品器材清单 PMSG 孕马血清促性腺激素 hCG 人绒毛膜促性腺激素 DPBS 杜氏磷酸缓冲液 M16 体外培养液 EG 乙二醇 蔗糖 塑料细管 1ml注射器 35mm培养皿若干 二氧化碳培养箱 小鼠胚胎的获取 控光（14h光照，10h黑暗）饲养1-2周后的4-6周龄小白雌鼠，腹腔注射10 IU/只PMSG，48h后腹腔注射10 IU/只hCG。注射hCG后（计时为0h）当晚与雄鼠（≥8周龄）合笼（雌：雄=2:1或1:1）。次日早晨检查阴道栓，见栓雌鼠于72-82h颈椎脱臼处死，采集桑椹胚。在DPBS中洗净后移入M16培养基，置于5 %CO2,95 %空气,相对湿度100 %的二氧化碳培养箱中待用。 小鼠胚胎的玻璃化冷冻 平衡液EG10，见附录溶液的配制。 玻璃化溶液EFS40 ，见附表2。或者EG40，亦见附录溶液的配制。 解冻稀释液用DPBS稀释而成的0. 5mol/L蔗糖溶液。 将室温调至25℃,经1～2小时将溶液及用具充分平衡后，用0. 25ml的塑料细管(Flance) 按顺序吸入解冻稀释液5cm———空气1㎝——1.5cm玻璃化溶液。 用吸管将胚胎移入平衡液平衡5分钟,而后导入细管内的玻璃化溶液中平衡30秒。这30秒接着吸入空气1cm——吸满解冻稀释液，封口后直接投入液氮中保存。 小鼠冷冻胚胎的解冻 将冻好保存于液氮中的细管,取出后直接投入25℃水中快速解冻。当解冻稀释液部分由乳白变为透明时取出,用吸水纸将细管水珠拭净,剪断细管两端的栓塞后,用含有解冻稀释液(0. 8ml)的注射器(带16号针头),将细管内容物冲洗于表面皿中，轻轻摇匀,置于实体显微镜下回收胚胎。回收的胚胎于解冻稀释液中平衡5分钟,以便脱出细胞内部乙二醇,再用PBS洗净后,移入M16溶液中于5 %CO2,95 %空气,相对湿度100 %的二氧化碳培养箱中培养。 小鼠胚胎的发育能力判定 体外培养回收的胚胎在M16中培养48小时以内恢复到囊胚或继续发育的胚胎视为有发育能力胚胎。 胚胎移植解冻后的胚胎,约经3小时培养,选择外形良好的胚胎移植于与结扎输精管的公鼠交配后即假妊娠第3天受体鼠的子宫中,一侧5～7枚,每只受体10～14枚胚胎为宜。妊娠19～22天观察产仔情况。

山东省临沂市2018-2019学年高二下学期期中联考生物试题word版(有全部答案)

2018—2019学年高二下学期期中考试 生物试题 第I卷（选择题，共45分） 一、选择题(共30小题，每小题1.5分。每小题给出的四个选项中，只有一个选项最符合题目要求) 1．在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“载体”分别是指 A.大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶 B.噬菌体、质粒、DNA连接酶 C.限制酶、RNA连接酶、质粒 D.限制酶、DNA连接酶、质粒 2．限制性核酸内切酶是切割DNA的工具。有关描述不符合事实的是 A．主要从原核生物中分离纯化出来 B．能识别双链DNA分子的特定的核苷酸序列 C．使特定部位的两个核苷酸间的磷酸二酯键断开 D．切割产生的DNA片段末端称为黏性末端 3．质粒是基因工程最常用的载体，下列关于质粒的说法正确的是 A．质粒在宿主细胞内都要整合到染色体DNA上 B．质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型细胞器 C．基因工程操作中的质粒一般都是经过人工改造的 D．质粒上碱基之间数量存在A+G=U+C 4．甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法中错误的是 A．甲方法可建立该细菌的基因组文库B．乙方法可建立该细菌的cDNA文库 C．甲方法要以脱氧核苷酸为原料D．乙方法需要逆转录酶参与 5．利用PCR扩增目的基因,下列叙述不正确的是 A．前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列 B．利用DNA双链复制的原理 C．扩增时要用解旋酶使DNA解链为单链 D．使其数量呈指数方式增加 6．下列关于基因表达载体构建的相关叙述，不正确的是 A．某些病毒可以作为运载体B．必须在细胞内进行 C．抗生素抗性基因可作为标记基因D．终止子位于基因的末端 7.关于转化及转化方法的叙述，错误的是 A. 采用显微注射法可将目的基因导入动物细胞

哺乳动物胚胎冷冻保存综述

哺乳动物胚胎冷冻保存综述 09动物生物技术2班 200930380216 宋骥晨 摘要：哺乳动物胚胎冷冻保存效果受冷冻保护剂、冷冻方法、解冻方法等多种因素影响, 其中冷冻方法是一个关键性因素。目前胚胎冷冻方法主要有常规慢速冷冻法和玻璃化冷冻法两种。常规慢速冷冻法是指利用甘油、乙二醇等做冷冻保护剂通过缓慢降温的方式进行胚胎冷冻; 玻璃化冷冻法是指利用高浓度的冷冻保护剂通过快速降温的方式进行胚胎冷冻。与常规慢速冷冻法相比, 玻璃化冷冻法简化了操作过程, 大大缩短了操作时间, 不需昂贵的程序控制冷冻仪。 关键词：胚胎; 冷冻保存; 冷冻保护剂; 冷冻; 解冻 胚胎冷冻保存是采取特殊的保护措施和降温程序使胚胎在 -196℃温度下停止代谢活动, 而升温后又不失去代谢能力的一种长期保存技术, 是实现动物胚胎生产技术实用化和商业化的重要保证。1972年, whittingham等首先发明了慢速冷冻法, 成功地保存了小鼠胚胎, 并在解冻后移植产下了后代。这种方法经过30多年的发展, 冷冻效果已基本稳定, 迄今为止, 已有多种动物胚胎经常规冷冻、解冻后移植至受体得到后代。 1.胚胎冷冻保存原理 胚胎细胞是发育中的细胞, 细胞内水分含量达到80%以上, 如

果不经保护, 冷冻时细胞内部就会形成冰晶, 破坏蛋白质的结构使其发生不可逆的变化, 从而导致胚胎死亡。常规慢速冷冻法的原理是通过加入低浓度的防冻剂, 缓慢降温将胚胎内的水分在冻结前脱出, 阻止冷冻过程中形成有害冰晶而造成胚胎损伤。将胚胎放到含有渗透性防冻剂的溶液中,防冻剂使胚胎细胞内的水分能够在-10℃以上不冻结并且能替换出部分水分。随着降温的进行, 细胞外液开始形成冰晶, 细胞外液浓度变高, 由于渗透压的原理使细胞内的水分开始脱出。为了保证细胞外液冰晶形成的时间总是早于细胞内液, 大多数冷冻程序采用植冰的方式来诱发细胞外液冰晶的生长, 植冰通常在-5℃到- 7℃进行。缓慢降温使细胞内的水分有更多的时间在冻结前脱出。需要指出的是, 胚胎在冷冻过程中不可避免地要形成冰晶。关键是冰晶的大小和数量能否造成胚胎的损伤。玻璃化冷冻保存的原理是在足够低的温度下或采用高浓度的防冻剂使冷冻过程中形成玻璃样物质减少细胞内外冰晶的形成。总之, 无论采取何种冷冻方法, 胚胎冷冻保存的原理都是阻止冷冻、解冻过程中细胞内形成致死冰晶。 2.抗冻保护剂和冷冻保护液 在哺乳动物的胚胎冷冻过程中, 冰晶的形成对胚胎的损伤是致命的。-15℃~ -50℃是一个致死温度区, 在这个温度区细胞容易形成大的冰晶。加入抗冻保护剂能避免冰晶的形成。抗冻保护剂主要分为3类：（1）低分子质量可渗物质, 如甲醇、乙二醇、丙二醇、甘油等一些醇类; （2）低分子质量不可渗物质, 如葡萄

冷冻胚胎案二审判决

江苏省无锡市中级人民法院 民事判决书 （2014）锡民终字第01235号 上诉人（原审原告）沈新南。 上诉人（原审原告）邵玉妹。 两上诉人的共同委托代理人郭小兵，江苏瑞莱律师事务所律师。 两上诉人的共同委托代理人郭伟，江苏瑞莱律师事务所律师。 被上诉人（原审被告）刘金法。 被上诉人（原审被告）胡杏仙。 原审第三人南京鼓楼医院，住所地南京市鼓楼区中山路321号。 法定代表人韩光曙，该院院长。 委托代理人王玢，该院生殖中心医生。 委托代理人郑哲兰，江苏永衡昭辉律师事务所律师。 上诉人沈新南、邵玉妹因与被上诉人刘金法、胡杏仙，原审第三人南京鼓楼医院监管权和处置权纠纷一案，不服宜兴市人民法院（2013）宜民初字第2729号民事判决，向本院提起上诉。本院于2014年7月2日受理后，依法组成合议庭审理了本案，现已审理终结。 原审法院审理查明： 沈杰与刘曦于2010年10月13日登记结婚，于2012年4月6日取得生育证明。2012年8月，沈杰与刘曦因“原发性不孕症、外院反复促排卵及人工授精失败”，要求在南京市鼓楼医院（以下简称鼓楼医院）施行体外受精-胚胎移植助孕手术；鼓楼医院在治疗过程中，获卵15枚，受精13枚，分裂13枚；取卵后72小时为预防“卵巢过度刺激综合征”，鼓楼医院未对刘曦移植新鲜胚胎，而于当天冷冻4枚受精胚胎。治疗期间，刘曦曾于2012年3月5日与鼓楼医院签订《辅助生殖染色体诊断知情同意书》，刘曦在该同意书中明确对染色体检查及相关事项已经了解清楚，同意进行该检查；愿意承担因该检查可能带来的各种风险；所取样本如有剩余，同意由诊断中心按国家相关法律、法规的要求代为处理等。2012年9月3日，沈杰、刘曦与鼓楼医院签订《配子、胚胎去向知情同意书》，上载明两人在鼓楼医院生殖医学中心实施了试管手术，获卵15枚，移植0枚，冷冻4枚，继续观察6枚胚胎；对于剩余配子(卵子、精子)、胚胎，两人选择同意丢

案例动物与人类生活的关系

案例动物与人类生活的关系 动物与人类生活的关系 苗喜林 一、课程资源分析 本节可供开发利用的课程资源很丰富,自从人类出现以来就和动物们相依相存,共同生活在地球上,如果没有各种动物人类将不会生存,更谈不上进步与发展。也正是因为人类与动物这种自古以来的密切关系,构成了本节课丰富而深厚的课程资源,如:动物在人类的衣、食、医、行、娱乐等方面的贡献的实例,或有关这些方面的奇闻趣事,自己在生活中的经验和见闻,最新的生物学技术的应用等等。 二、教学策略与手段 本节课利用两课时完成,第一节课以信息交流会的形式,让学生展示和交流他们收集到的有关动物与人类生活的关系的资料,以小组为单位进行,每个小组收集一个主题方向的内容,通过这样的交流与展示可以提高学生收集和处理资料信息的能力,表达和交流的能力。第二课时引导学生学习有关生物反应器和仿生的知识,以讨论的方式让学生明确生物反应器的优点,结合学生已有的知识基础说出各种仿生学的例子。 三、教学目标 1、知识与技能:举例说出现代生物学技术------生物反应器、仿生在人类生活和社会发展中的作用;说出利用生物反应器生产各种物质的优点。 2、过程与方法:通过参与调查动物在人类生活中的作用的活动,使学生掌握调查的一般方法。 3、情感态度与价值观:学会用辩证的观点看待动物在人类生活中的作用,建立可持续发展的观点;培养学生爱护动物的情感和热爱科学的态度。 四、教学重点与难点 1、学生积极参与调查动物在人类生活中的作用的实践活动,培养实践能力; 2、调查活动的组织、开展与落实。 五、教学流程 导入新课 师:同学们,动物是我们人类的好朋友,人类从在地球上出现开始,就与动物结下了不解之缘,动物与我们的生活有着密切的关系:你想进一步了解身边的动物吗?你知道关于生物的奇闻趣事吗?接下来让我们共同走进丰富多彩的动物世界,聆听和交流一下关于动物与人类生活关系的知识。开始我们的信息交流 会: 第一小组:我们组调查了动物与人类衣的关系,主要到服装店请教有关人士,通过调查我们发现我们所穿的衣物有很大一部分都来自动物,比如冬天时穿的羽绒服都是鸭、鹅等家禽身上的绒羽做成的;羊绒、羊毛衫等都是用羊或藏羚羊身上的绒毛织成的;高贵的裘皮大衣、皮草衣物来自于各种哺乳动物的皮毛;又柔

胚胎工程复习题

同步练习 一、选择题: 1、下列关于哺乳动物精子和卵子的发生的叙述，正确的是 A．一个精原细胞经过减数分裂可直接产生4个精子 B．精子的头部主要含细胞核，中心体发育为它的顶体 C．卵泡的形成和在卵巢内的储备，是在胎儿时期完成的 D．排卵是指卵泡从卵巢中排出，马、牛的排卵都是排出次级卵母细胞 2、关于高等动物受精作用的叙述，错误的是 A．受精作用发生在输卵管 B.精子和卵子的结合过程中，卵子完成减数第二次分裂 C.受精作用的标志是在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体 D.精子与透明带接触后会发生透明带反应，防止多精入卵 3、高等哺乳动物受精后不久，受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚、囊胚、原肠胚和组织器官的分化，最后发育成一个完整的幼体，下列有关叙述不正确的是 A. 右图是胚胎发育过程中囊胚期示意图，②③依次称之为滋养层、内细胞团 B. 高等哺乳动物胚胎发育经历的时期是受精卵→桑椹胚→囊胚期→原肠胚 期→幼体，其中最关键的时期是原肠胚期 C. 培养③处细胞时，如果缺少氨基酸供应，细胞一般会停留在细胞周期的分 裂期 D. ③处的细胞在功能上最大特点是具有全能性，能分化为成年动物体内任何一种组织细胞 4、下列有关体外受精和早期胚胎培养的叙述，正确的是 A．无论何种方法，采集到的精子和卵母细胞必须在相应溶液中培养一段时间方可进行受精B．精子的体外获能方法有培养法和化学诱导法，家兔和猪的精子一般是用培养法 C．早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液的成分完全相同 D．将受精卵培育成早期胚胎后，可直接进行移植或在37℃下保存 5、下列有关胚胎移植的叙述中，错误的是 A．冲卵指的是从子宫中冲出胚胎，而非冲出卵子 B．受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态 C．不同动物胚胎移植的时间不同，人的胚胎移植最好在囊胚时期进行 D．移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应6、将牛的胚胎分割后进行移植，可孕育出多头性状一致的小牛。下列哪项与该过程的实质是相同的 A．将胰岛素基因导入大肠杆菌，经过筛选得到可用于生产的工程菌 B．淋巴细胞与瘤细胞融合成杂交瘤细胞 C．利用植物的根尖组织细胞培育大量幼苗 D．DNA分子在不同限制性内切酶的作用下，形成许多片段 7、以下对于胚胎移植意义的说法正确的是 ①良种畜群迅速扩大，加速了育种工作和品种改良 ②在世界范围内，胚胎移植不受时间和地域的限制，大量节省了购买种畜的费用 ③利用胚胎冷冻保存技术，建立胚胎库，保存品种资源和濒危物种 ④在肉用家畜的生产中，一次给受体移入多个胚胎，可增加双胎和多胎的比例 A．①② B．①③ C．①②③ D．①②③④