墨旱莲水煎剂对致衰老小鼠肝脏中SOD_MDA_GSH_Px的影响

收稿日期:2006 07 06

Protective Effects of Soybean Phospholipid on

Neonatal Rat Neurotoxicity in Vitro

Wang Cuiy ao ,et al

(Dep artment of B iochemistr y ,L iaoning M edical College,J inZhou 121001)

Abstract Objective:T o study the protective effects of soy bean pho spho lipid lipsom es (SPL)on g luta

m ate(Glu) induced neurotox icity in vitro.Methods:The cortical neurons of neo natal rat w ere cultured in vitro for 8or 10days.Assay LDH ,M DA and SOD.The pro tective effects of SPL on glutam ate induced neu r otox icity w ere observ ed.Results:Ex posur e of neo natal rat cer ebral cells to Glu medium dev elo ped a neuro to xicity,expressed in the increase of LDH and M DA,and the decr ease o f activity o f SOD,as w ell as the de v elo pm ent of m orpho logical injury.SPL(0.2m g/m l~1.6m g/m l)sig nificantly protected neurons ag ainst a bov e demage.C onclusion:SPL can protect r at cer ebral cortical neuro ns from Glu induced neurotox icity by suppressing the generation of lipid perox ide.

Key words soybean phospholipid;liposome;glutam ate;cerebral cor tical neuron culture

文章编号:1004 4337(2007)02 0208 02 中图分类号:R 33 文献标识码:A

药学研究

墨旱莲水煎剂对致衰老小鼠肝脏中

SOD 、M DA 、GSH Px 的影响

石变华 庄晓燕 白秀珍(辽宁医学院 锦州121001)

摘 要: 目的:研究墨旱莲对D 半乳糖致衰老小鼠肝脏中SOD 、M DA 、GSH Px 的影响。方法:通过测定小鼠肝脏SOD 、GSH Px 的活性及M DA 的含量的变化,研究墨旱莲水煎剂的延缓衰老功效。结果:墨旱莲水煎剂会显著增强SOD 、GSH Px 的活性,降低M DA 的含量。结论:墨旱莲水煎剂有显著的延缓衰老作用。

关键词: 墨旱莲; D 半乳糖; 衰老; 肝脏

中药墨旱莲为菊科植物鳢肠(Eclipta pr ostr ata L )的全草。其性味甘、酸、凉,入肝、肾、胃、小肠、大肠五经,对临床很多疾病有很好的治疗效果。墨旱莲具有免疫调节、扩血管、抗诱变、抗炎等药理作用。本实验以D 半乳糖致衰老小鼠为研究对象,探讨墨旱莲的延缓衰老作用。1 材料和方法1 1 材料

1 1 1 药品与试剂 墨旱莲购自锦州大德堂药房;M D A 、SO D 、GSH Px 测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所;其余试剂均为国产分析纯试剂。

1 1

2 实验动物 昆明系小鼠,3月龄,25~30g,雌雄各半。由辽宁医学院实验动物中心提供。

1 1 3 墨旱莲水煎剂的制备 制备前准备:墨旱莲干品蒸

馏水漂洗3次,烘箱干燥后用粉碎机粉碎,过100目筛;!水煎剂的制备:将过筛的墨旱莲以蒸馏水浸泡半小时,加热至沸腾,文火煮1小时,如此反复3次,将3次所得的煎出液混合后减压浓缩,干燥后待用;?用药前准备:将提取物以蒸馏水溶解,配制成每毫升相当于生药1.0g 的溶液。1 2 方法

1 2 1 实验动物分组及用药 取昆明系小鼠50只,随机分成5组,每组10只。#组空白对照组,?组半乳糖致衰组,%组低剂量用药组,&组中剂量用药组,?组高剂量用药组。#组每日灌胃生理盐水,?组、%组、&组、?组每日皮下注射D 半乳糖1mg/10g 鼠重,同时灌胃墨旱莲水煎剂分别为6mg /g 、12mg/g 、24mg/g 鼠重。连续42天,第43天取材检测。1 2 2 肝组织SO D 、M DA 和GSH Px 的测定 按照试剂盒说明书测定。

208 Journal o f M athematical M edicine

Vo l.20 No.2 2007

1 2 3 数据处理 实验数据采用SP SS11.5统计软件处理,计算均值及标准差均采用t检验。

2 结果

?组与#组比较血清和肝脏SO D、GSH Px的活性降低且M D A的含量升高;%组、&组、?组中肝脏SO D、G SH Px 的活性与?组比较均有不同程度的升高且M D A的含量有不同程度的降低,即墨旱莲由于剂量不同表现出不同程度的延缓衰老作用。其中尤以?组的作用最显著。见表1。

表1 墨旱莲水煎剂对肝的延缓衰老作用

组别例数SOD(N U/ml)G SH Px(U/mg pr.)M DA(nmo l/mgpr.)

#组10901(11.060.01(5.637.50(3.10

?组10599(21.1*35.09(3.82*12.65(6.21*

%组10780(31.0#40.50(2.80#11.58(5.31#

&组10800(21.8##45.63(3.08##10.50(4.29##

?组10821(11.0##48.9(4.59##8.21(5.51##

注:与正常组相比,*P<0.01;与D 半乳糖组相比,#P<0.05,##P<0.01。

3 讨论

正常机体的自由基氧化作用与抗氧化防御作用处于动态平衡状态。当清除自由基的酶和非酶系统的防御功能减退时,这种动态平衡失调,导致生物体老化[1]。D 半乳糖亚急性中毒动物是国内外近年常用的衰老模型[2],已证明D 半乳糖可产生拟衰老反应,对氧自由基代谢的损伤与人体衰老的改变基本一致[3]。本实验D 半乳糖致小鼠衰老,实验结果显示?组小鼠SOD、GSH Px的活性及M DA的含量与#组比较有显著差异(P<0.01),证明本实验D 半乳糖致衰老模型成功。

国内已有实验证实墨旱莲黄酮类提取物有延缓衰老的作用[4]。本实验利用D 半乳糖制造小鼠衰老模型,给小鼠口服不同剂量的墨旱莲水煎剂。从表1中可看出,%组、&组、?组中SO D、GSH Px的活性高于?组及M DA的含量低于?组,且呈剂量依赖性,说明墨旱莲水煎剂对D 半乳糖致衰老小鼠有显著延缓衰老作用。

细胞线粒体是氧自由基损伤的主要靶位,也是细胞内源性氧自由基的主要来源[4]。线粒体的老化是细胞衰老的重要原因之一[5]。脂质过氧化(L PO)产物M DA的水平往往可反映活性氧损伤程度。抗氧化酶SO D和G SH P x活性是反映机体抗氧化能力的重要指标。所以认为墨旱莲的延缓衰老的作用机理可能是保护线粒体免受自由基损害。墨旱莲延缓衰老作用的有效成分可能是黄酮类成分[6],具体还有待于进一步研究。

参 考 文 献

1 Nohl H.In volvement off reeradi calsinageing:a con sequ ence or

cause of s enescence.Bri M ed Bull,1993,49(3):653

2 龚国清,徐黻本.小鼠衰老模型的研究.中国药科大学学报,1991,

22:101~103.

3 张熙,李文彬.D 半乳糖亚急性中毒大鼠拟衰老生化改变.中国药

理学与毒理学杂志,1990,4(4):309

4 许春富.自由基清除剂对脑缺血的保护作用.国外医学脑血管病

分册,1994,2:213

5 刘永海,吴丽娟,陈清棠.线粒体形态结构随增龄的变化.中华老

年医学杂志,1996,15(2):122

6 林朝朋,芮汉明,许晓春.墨旱莲黄酮类提取物抗自由基作用及体

内抗氧化功能的研究.军事医学科学院院刊,2005,4:344~345, 362

The Effect of Eclipta alba to the Livers of Mice of Senility

Shi Bianhua,et al

(L iaoning M edical College,J inz hou121001)

Abstract Objective:observing the effect o f Eclipta alba apozem to the liver s of the mice that w ere in duced senilily by D galactose.Methods:Determ ining the activity of SOD and GSH Px and the content o f MDA in the livers of the m ice to find the effectiveness of Eclipta alba apozem.Result:Eclipta alba apozem can enhance the activity of SOD and GSH Px and deg rade the co ntent of MDA.C onclusions:Eclipta alba apozem has the effect o f delaying aging.

Key words Eclipta alba;D galactose;senility;liver

209

数理医药学杂志2007年第20卷第2期

糖尿病与肝脏的关系

糖尿病与肝脏的关系 目前的高脂血症、探讨胰岛素抵抗、体重指数与2型糖尿病脂肪肝(DFL)的关系。方法对2型糖尿病合并脂肪肝的患者进行身高、体重、空腹血糖(FBG)、血脂(TG、TC、HDL、LDL)、血浆胰岛素(FINS)测定,计算胰岛素敏感指数(ISI)、体重指数(BMI),同时检查是否合并其他的糖尿病慢性并发症,并与2型糖尿病非脂肪肝患者进行比较。结果2型糖尿病合并脂肪肝组与未并发脂肪肝组相比TG、TC、LDL、FINS、FBG、BMI均升高,HDL、ISI降低(P<0.05或P<0.01)。结论2型糖尿病合并脂肪肝患者存在脂代谢紊乱、胰岛素抵抗及超重,而且大血管的并发症发生率较高。对2型糖尿病尽可能防止高胰岛素血症,控制血糖,维持正常血脂,减少胰岛素抵抗(IR),对预防和减少2型糖尿病脂肪肝的发生具有重要意义。 ：对68例糖尿病患者进行血脂化验室检测及肝脏超声,对56例脂肪肝患者进行糖耐量试验,两项结果对照比较。结论:4%～46%的脂肪肝患者合并有糖尿病;近乎50%糖尿病患者有脂肪肝;约30%～70%的糖尿病患者可有无症状性的肝肿大和轻度的肝酶异常。T2DM易合并脂肪肝,约75%的患者两病共存。 脂肪肝虽然在早期基本没有什麽症状,但肝细胞中长期堆积的大量脂肪会导致肝细胞的损伤,坏死,造成脂肪性肝炎。储存了大量脂肪的肝细胞其解毒代谢糖脂的能力均下降,由于其糖脂代谢能力下降可加重糖尿病及血脂紊乱的程度。脂肪肝可以是糖尿病的后果,根据近年来的文献，肥胖、2型糖尿病、脂肪肝的关系进行了综述。 脂肪肝患者81％存在超重或肥胖，44％有2型糖尿病。与肥胖、胰岛素反抗有着密切关系，是近年来代谢性疾病的热点领域之一。、2型糖尿病、脂肪肝的关系研究进展做一回。 瘦素与2型糖尿病的关系 1瘦素与胰岛素反抗 胰岛素反抗是2型糖尿病的重要特征之一。IR机体组织对胰岛素的反应下降，即一定量胰岛素产生的生物学效应低于正常水平，糖耐量减退或糖尿病、高胰岛素血症、高血压、肥胖、高脂血症等的共同发病基础。瘦素缺乏和高瘦素血症均可导致IR。高瘦素血症与IR的因果关系尚不清楚，可以从以下几方面进行推测。IR导致高瘦素血症。IR患者长期的高胰岛素血症刺激了Ob基因的过度表达，进而使血中瘦素升高，产生高瘦素血症。高瘦素血症导致IR。这为多数学者所认可，进一步的解释是胰岛素对脂代谢的作用是促进脂肪合成和抑制脂肪分解，而瘦素对脂肪的分解作用本身就造成了胰岛素反抗；瘦素对体内糖代谢的主要器官肝脏、肌肉、脂肪组织等有特异性，导致具有高瘦素血症的肥胖个体胰岛素反抗；瘦素还可抑制胰岛素在脂肪细胞中的多种代谢作用，包括葡萄糖转运、脂肪分解、糖原合成等，间接地加重胰岛素反抗。互为因果。生理情况下，胰岛素刺激瘦素分泌，瘦素则可抑制胰岛素分泌，在胰岛素与瘦素之间存在着一个双向的反馈环。一旦这种平衡遭到破坏，胰岛素对瘦素的敏感性降低，则可导致IR，IR可进一步引起高瘦素血症。也有学者认为瘦素不是引起IR的主要原因。

肝切片的实验报告

肝切片的实验报告 篇一：肝切片实验报告？ 实验九显微摄影――小鼠肝脏结构年级专业 *班 *组学号姓名αβ 500μm 1 m 2 100μm i 100μm 4 50μm 图版说明： 图1：小鼠肝脏横切部分结构，示肝小叶（a），静脉血管（b）。图2：图1（α部位）的放大，示肝小叶（c）。图3：示肝小叶（d）。图4：示静脉血管（e）。 图5：示肝细胞（f），肝细胞细胞核（g）。图6：图2（β部位)的放大，示上皮细胞（h），上皮细胞细胞核（i），肝血窦（j），中 央静脉（k），肝动脉（l），血细胞（m）。结构说明：肝脏是脊椎动物身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面扮演着氧化，储存肝 糖，解读等功能。肝脏由肝小叶组 成，肝小叶是肝脏的基本组成成分，它来执行肝脏的基本职能。而肝小叶又是由肝细胞组成，当肝细胞大量损坏时，肝小叶不能正常工作，影响肝脏 正常生理功能，而出现各种各样的症状。肝小叶成棱柱状，中央有一条中央静脉穿过，肝细 胞围绕中央静脉成放射状排列。肝细胞是一种高度分化并具有多种功能的细胞，胞质内各种细胞器丰富而发达，并

含有 糖原，脂滴等内涵物。细胞器和内涵物的含量与分布常因细胞的功能状况或饮食变化而变动。 一般肝细胞里线粒体含量都比较多，遍布于胞质内，为肝细胞的功能活动不断提供能量。肝细胞核大而圆，居中央，染色质丰富色浅，核膜清楚，核仁1至数个。部分肝细胞（约 25%）有双核，有的肝细胞的核体积较大，为多倍体核。肝血窦位于肝板之间，互相吻合成网状管道。血窦腔大而不规则，血液从肝小叶的周边 经肝血窦流向中央，汇聚到中央静脉。 5 50μm篇二：实验报告(一) 实验名称：实验性空气栓塞实验时间：成绩：实验目的：了解空气栓塞对机体的影响实验材料：家兔，20ml注射器及针头，解剖刀，剪，镊子，面盒，浸有二甲苯的棉球若 干 等实验方法（简要说明）： 1. 先观察家兔的一般状况：活动状态、呼吸频率、嘴唇颜色及瞳孔大小等。 2. 用浸有二甲苯的棉球涂擦一侧耳廓，使局部血管扩张，便于穿刺注射。 3. 用注射器经耳缘静脉注入空气10～15ml，记录时间，

中医知识：肾与五脏的关系

肾与五脏 1.心与肾 心与肾在生理上的关系，主要体现在两个方面：一是在心阴心阳与肾阴肾阳之间的依存关系方面；一是在心血与肾精之间的依存关系方面。心在五行属火，位居于上焦而属阳；肾在五行属水，位居于下焦而属于阴。从阴阳、水火的升降理论来说，位于下者，以上升为顺；位于上者，以下降为和。《素问·六微旨大论》说“升已而降，降者为天；降已而升，升者为地。天气下降，气流于地；地气上升，气腾于天”表明阴阳水火升降原理。心有阴阳，肾亦有阴阳，各自相互对立依存，以维持动态平衡。心之阴阳必须下降于肾，而充养肾之阴阳；肾之阴阳必须上升至心，以濡养温煦心之阴阳，只有心肾阴阳之间的上下交通，相互依存，才能保证这两脏之阴阳充足，并维持动态平衡关系，而称为心肾相交，也即是“水火既济”。如《慎斋遗书》说“心肾相交，全凭升降……升降者水火”。《格致余论·房中补益论》说“人之有生，心为火，居上；肾为水，居下。水能升而火能降。一升一降，无有穷已，故生意存焉。”反之若心火不能下降于肾而上亢，肾水不能上济于心而下泄，肾无心火则水寒,心无肾水则火炽心肾之间的生理功能就会失去协调，而出现一系列的病理表现，即为“心肾不交”或“水火未济”，临床出现失眠、心悸、怔忡、心烦、腰膝酸软，或见男子梦遗，女子梦交等症。心主血，肾藏精，血与精之间可以相互化生。血化为精，如《医原》所说“谷气归心，奉君火而化赤，赤血得金气敷布，下行入肾化精”。精化为血，如《张氏医通》所说“精不泄，归精于肝而化清血”。这种精血互生关系，即体现了心肾之间在生理上的关系之一。亦为心肾相交、水火既济的功能创造了物质基础。临床所见心血不足导致肾精不足，或肾精不足导致心血不足，出现面色无华、心悸、耳鸣、腰酸膝软等症，就是心(血)肾(精)同病的征象。 2.肺与肾 肺与肾在生理上的关系，主要体现在水液代谢与呼吸运动两方面的协同作用和依存关系。肺主通调水道，为“水之上源”，肾为主水之脏，肺肾的协同作用，保证了水液的正常输布与排泄，肺的宣发肃降和通调水道，有赖于肾阳的蒸腾气化，而肾的主水功能亦有赖于肺的宣发肃降和通调水道。肺肾在水液代谢功能方

取小鼠脑组织

丁香园上面总结的方法，排版有点乱。 其实过程与大鼠近似，我的经验是： 1. 材料准备；大剪刀、眼科剪、眼科镊、大镊子、滤纸、竹签等； 2. 步骤：处死小鼠，取头颅； 剪开皮肤，漏出颅骨； 用大尖镊子夹住两侧眼眶，用眼科剪稍剪除颅骨中线； 再用眼科镊夹住颅骨从内向外夹，从下向上逐步去除颅骨； 当全脑露出时，再用眼科镊去除脑膜和血管； 然后用竹签从嗅球处向下取出全脑，即可。 3. 注意事项：用力轻柔，否则容易弄破脑部； 用剪刀剪颅骨时，一定要贴壁向上剪，否则容易剪破脑部； 去除脑膜时，不能硬拉，否则容易弄破大脑； 取出全脑时应把头顶朝下，用竹签轻轻取出，离桌面也不要太远、高； 若留病理，建议一定要取完整无损的大脑。 做免疫组化的话，稍微麻烦一点儿，因为脑组织含水量多，要固定的好，就需要先灌注。先麻醉小鼠 剪开胸腔，找到心脏，从心尖入针，剪开右心耳 先用生理盐水灌注直到从心耳流出来的水清亮了 再改用固定液（一般是4%多聚甲醛）灌注至小鼠四肢僵硬 小鼠只需要用注射器就行了，我做的25～35g的小鼠一般用50mLNS+30mL多聚甲醛。具体步骤：常规麻醉小鼠，将其固定，用剪刀剪开胸部皮肤，暴露出皮下组织，剪开时注意钝性分离，以免误伤。然后用镊子提起剑突，用剪刀剪开胸腔，剪断两侧肋骨，暴露整个胸腔，小心误伤肺及心脏、大血管。用镊子撕开心包膜，暴露心脏，用眼科剪剪开右心耳，然后提起心尖将准备好的生理盐水注射器插入左心室，注射，注射时小心针头滑脱。生理盐水灌流至肺和肝的颜色都变成灰白色即可。然后用多聚甲醛灌流，针孔最好是同一个，多聚灌流时小鼠四肢会抽搐，待抽搐结束，小鼠僵硬即可。取下小鼠，用剪刀在颈部离断头颅，用剪刀在小鼠头颅中间皮肤剪一刀，将两边皮肤向下翻用手捏住，暴露整个颅骨，用眼科剪从脊髓端插入椎孔，沿着颅正中线剪开颅骨，注意剪刀向上翘一些，以免误伤脑组织，剪开后用弯眼科镊分离颅骨，小心分离，直至暴露整个大脑，然后用弯镊伸入颅底离断颅底神经，就可以取出整个脑子了。放多聚里固定24h后包埋切片即可。 具体操作如下： 实验操作步骤： 1) 小鼠称重，以每克小鼠0.0025ml 4%戊巴比妥钠剂量的实施腹腔麻醉。也可以用10%的水合氯醛，3-5ul/g腹腔注射麻醉。 2) 将麻醉的小鼠仰放在操作台上，去毛。 3) 解剖小鼠，暴露心脏。 4) 找到心尖部，左手用镊子提起心尖部，右手或左手将灌流针刺破心尖部进针约0.5cm（最好是用小点的针头，用止血钳固定针尖，剪开右心耳。 5) 将灌流器的导管部开口放到生理盐水中里，打开灌流器灌流，直到从右心耳流出的液体为无色，同时小鼠肝脏色淡，肠管肿胀为止，停止灌流。没有灌流器的用注射器或者吊瓶都可以。

肝脏疾病患者的护理试题及答案

肝脏疾病患者的护理试题及答案 一、A1型题 1．与原发性肝癌发生关系最密切的疾病是 A．甲型肝炎B．乙型肝炎C．肝脓肿D．中毒性肝炎E．肝棘球蚴病 2．原发性肝癌的主要相关因素是 A．胆道感染B．肝炎后肝硬化C．血吸虫性肝硬化 D．酒精性肝硬化E．肝脏良性肿瘤 3．肝癌最常见的转移途径是 A．肝内血行转移B．肝外血行转移C．直接蔓延 D．淋巴转移E．种植转移 4．按组织学分类，在我国原发性肝癌哪种类型最常见 A．肝细胞型B．肝管细胞型C．混合型D．弥漫性E．巨块型 5．肝叶切除术后避免过早活动的目的是 A．保存体力B．减少能量消耗C．利于肝细胞再生 D．利于有效引流E．避免肝断面出血 6．下列对诊断早期原发性肝癌最有价值的检查是 A．甲胎蛋白检查B．血沉检查C．碱性磷酸酶测定 D．谷氨转肽酶测定E．X线检查 7．原发性肝癌普查常首选 A．CT B．AFP C．MRI D．AKP E．B超 8．肝癌定位检查中首选的方法是 A．B超B．CT C．AFP测定 D．选择性腹腔动脉造影E．肝穿刺针吸细胞学检查 9．诊断小肝癌和微小肝癌最佳的方法是 A．CT B．AFP C．MRI D．肝血管造影E．B超 10．原发性肝癌病人常见并发症是 A．高蛋白、高脂肪、高维生素饮食B．适量输血、血浆或白蛋白 C．术前3d口服肠道不吸收抗生素D．术前晚、术晨清洁灌肠 E．配血宜鲜血与库存血各半 11．肝癌术前护理哪项是错误的 A．高蛋白高脂肪高维生素饮食B．适量输血血浆或白蛋白 C．术前3天口服肠道不吸收抗生素D．术前晚术晨清洁灌肠 E．配血宜鲜血与库血各半 12．肝癌病人术前护理不正确的是 A．给予维生素K B．适量输血和白蛋白C．便秘者给肥皂水灌肠 D．全面检查肝功能和凝血功能E．术前3d口服肠道不吸收抗菌药 13．肝脏手术后最严重的并发症是 A．出血B．肺部感染C．腹腔感染D．胆汁性腹膜炎E．腹水 二、A2型题 14．男性，65岁，肝癌肝叶切除术后第1天，患者感腹痛.心慌.气促.出冷汗，血压90／≤60mmH9，首先应考虑为 A．胆汁性腹膜炎 B．肠梗阻 C．肝断面出血 D．膈下脓肿 E．阑尾炎 15．男性，60岁，诊断为原发性肝癌，行肝叶切除术后第3天，出现嗜睡.烦躁不安.黄疽.少尿等，应考虑 A．胆汁性腹膜炎 B．膈下脓肿 C．肝性脑病 D．内出血 E．休克 16．患者，男性，36岁，患肝硬化l0年，近半月来出现肝增大，持续肝区疼痛不能忍受人院。查体：明显消瘦，腹部彭隆，移动性浊音(+)，肝大质硬，表面凹凸不平。考虑并发 A．上消化道出血 B．电解质紊乱和酸中毒 C．原发性肝癌

小鼠肝脏过氧化物酶制备与测定

小鼠肝脏过氧化物酶制备与测定

摘要目的分离纯化过氧化氢酶，测定其相关性质。方法采用匀浆、盐析、透析、层析等方法分离纯化过氧化氢酶，采用Lorry 法测定蛋白含量，SDS-PAGE法测定蛋白质相对分子质量，双倒数法测定酶的米氏常数。结论相对分子质量为60.25kD，以过氧化氢为底物时酶的Km值为0.133mol/L，酶层析后的比活为0.686IU/mg。 关键词小鼠过氧化氢酶纯化米氏常数SDS-PAGE 前言过氧化氢酶(Hydrogen Peroxidase)又名触酶(Catalase，CAT),是一种广泛存在于生物组织的氧化还原酶[1]。过氧化氢酶是一种四聚体血晶素酶, 由四个相同四面体排列的亚基组成,每一个亚基相对分子质量约60000，每一个分子都包含有四个高铁血红素基团,分子量在240000左右[2]。 在人体内以肝和肾脏所含过氧化氢酶活性最高, 结缔组织活性最弱,其它组织如红细胞、脾、小肠、肌肉等均含有过氧化氢酶。过氧化氢酶在细胞内主要与线粒体及过氧化物酶体结合, 在红细胞内呈溶解状态。过氧化氢酶是一种与D－氨基酸氧化酶等一系列需氧脱氢酶相偶联的酶, 具有重要的生理功能。过氧化氢酶能将细胞代谢所产生的毒性物质迅速加以清除, 从而起到和谷胱肽过氧化酶共同保护琉基酶、膜蛋白和解毒的作用。近年来, 过氧化氢酶的活性测定被作为与肿瘤和抗衰老有关的酶学指标而受到关注。[3] 近年来，过氧化氢酶活性的测定被作为与肿瘤和抗衰老有关，蛋白质的分离纯化方法是生命科学领域关注的热点之一。[4] 1实验器材 1.1实验动物 昆明小鼠6只，雌雄不限，由河北医科大学动物实验中心提供。 1.2主要仪器 5200型紫外分光光度计（上海元析仪器有限公司），UV-5200 冷冻离心机(湖南相依实验仪器开发有限公司)，BCD-185冰箱（青岛海尔公司），微量移液器，40W匀浆器（江苏国华仪器厂），电泳仪（北京六一） 2实验方法

肾与五脏的关系

肾与五脏的关系 肾与五脏的关系 五脏之间的关系是非常密切的，《侣山堂类辩》说“五脏之气，皆相贯通”。脏与脏之间的关系，古人在理论上多以五行的生克乘侮来进行阐述，即生理上任何一脏与其他四脏都存在着生我、我生、克我、我克四方面的联系，病理上任何一脏与其他四脏都存在着相乘、相侮、子及母、母及子四方面的影响。但经过历代医家的观察和研究，脏与脏之间的关系早已超越了五行生克乘侮的范围，目前主要从各脏的生理功能来阐述其相互之间的关系，并用病理上的相互影响来反证其生理上的关系。 1.心与肾 心与肾在生理上的关系，主要体现在两个方面：一是在心阴心阳与肾阴肾阳之间的依存关系方面；一是在心血与肾精之间的依存关系方面。心在五行属火，位居于上焦而属阳；肾在五行属水，位居于下焦而属于阴。从阴阳、水火的升降理论来说，位于下者，以上升为顺；位于上者，以下降为和。《素问·六微旨大论》说“升已而降，降者为天；降已而升，升者为地。天气下降，气流于地；地气上升，气腾于天”表明

阴阳水火升降原理。心有阴阳，肾亦有阴阳，各自相互对立依存，以维持动态平衡。心之阴阳必须下降于肾，而充养肾之阴阳；肾之阴阳必须上升至心，以濡养温煦心之阴阳，只有心肾阴阳之间的上下交通，相互依存，才能保证这两脏之阴阳充足，并维持动态平衡关系，而称为心肾相交，也即是“水火既济”。如《慎斋遗书》说“心肾相交，全凭升降……升降者水火”。《格致余论·房中补益论》说“人之有生，心为火，居上；肾为水，居下。水能升而火能降。一升一降，无有穷已，故生意存焉。”反之若心火不能下降于肾而上亢，肾水不能上济于心而下泄，肾无心火则水寒,心无肾水则火炽心肾之间的生理功能就会失去协调，而出现一系列的病理表现，即为“心肾不交”或“水火未济”，临床出现失眠、心悸、怔忡、心烦、腰膝酸软，或见男子梦遗，女子梦交等症。心主血，肾藏精，血与精之间可以相互化生。血化为精，如《医原》所说“谷气归心，奉君火而化赤，赤血得金气敷布，下行入肾化精”。精化为血，如《张氏医通》所说“精不泄，归精于肝而 化清血”。这种精血互生关系，即体现了心肾之间在生理上的关系之一。亦为心肾相交、水火既济的功能创造了物质基础。临床所见心血不足导致肾精不足，或肾精不足导致心血不足，出现面色无华、心悸、耳鸣、腰酸膝软等症，就是心(血)肾(精)同病的征象。

大鼠肝脏组织病理切片的制作和 HE 染色

大鼠肝脏组织病理切片的制作和HE 染色 步骤如下： （一）固定与修块 取组织块放入Bouin氏液中，组织块的直径应小于7mm。6小时左右后用双面 刀片将组织块修剪成3-5mm3大小。 （二）脱水与透明 1．75%乙醇50分钟 2．85%乙醇50分钟 3．95%乙醇（I）30分钟 4．95%乙醇（II）30分钟 5．100%乙醇（I）30分钟 6．100%乙醇（II）30分钟 7 1/2 二甲苯（乙醇与二甲苯等体积）20分钟 8．二甲苯（I）20分钟 9．二甲苯（II）10分钟（可依据透明效果而定） 若脱水不好，二甲苯溶液颜色会变混浊。在每一步骤之后，要充分滤干组织 块，一般用筒纸吸干组织块上的液体，以免影响其他液体的浓度，但也要防止组织块干燥。全过程约需要5h。 （三）浸蜡、包埋与修蜡块 1．浸蜡：将60℃恒温箱打开，使石蜡充分溶解，待脱水与透明结束后，将 组织块转入石蜡里，放置于60℃恒温箱120分钟。 2．包埋：将60℃的石蜡倒入纸盒内，然后用小镊子将各组织块按一定的顺 序排列好，使切面朝下。不同组别的同一组织包埋于一个蜡块中，以保证切片和染色条件相同。为防止倒入纸盒内的石蜡底部立刻凝固，可将纸盒置于一玻璃板上（或大培养皿内），然后将玻璃板置于80-90℃左右热水上，包埋时蜡盒底部 要放平，做蜡块的蜡要反复冻融较好。 3．修蜡块：待纸盒内蜡凝固后，用刀片将其修成梯形，组织块与蜡块边缘 之间的距离不得小于2mm。 （四）切片 在载玻片上擦少量甘油蛋白。可滴半滴甘油蛋白于载玻片上，用手指充分抹 匀，呈半干状为佳。切片厚约4-8μm，将切片在55℃左右水浴中展开，展开程度以带黄颜色的组织完全摊平为准。用涂有甘油蛋白的载玻片从水浴中捞取切片，放入37℃烘箱中过夜。每个组织块捞片2张。过夜后，将载玻片置于玻片架上，进行下面的实验。 （五）脱蜡、染色与脱水 倾斜玻片架，将玻片架和载玻片下缘的试剂用筒纸吸干，减轻对其他试剂浓 度的影响。全过程约需要60分钟。 1．脱蜡 （1）二甲苯（I）15分钟 （2）二甲苯（II）15分钟 （3）100%乙醇2分钟 （4）95%乙醇（I）1分钟 （5）95%乙醇（II）1分钟 （6）蒸馏水浸洗1分钟

中医肝与五脏的关系

中医肝与五脏的关系 Pleasure Group Office【T985AB-B866SYT-B182C-BS682T-STT18】

中医中肝脏藏血，重要性不言而喻，中医讲肝肾同源，今天艾蓬轩给大家分享下中医中肝脏与其他脏器的关系。肝脏的生理结构和功能 肝脏是我们人体非常重要的器官，那么肝脏究竟与其他器官有什么不一样下面我们一起了解一下。 肝脏是人体内最大的器官，平均重量可达到公斤，成年男子的肝脏差不多有42码的球鞋这么大。 其实肝脏就是个傻大个，性情憨厚，天天干活都不知道累，因为肝脏是唯一没有痛感神经的器官，所以无论它累成怎么样，它也从不呻吟叫苦，也不会喊痛，这也是人们经常忽略它健康状况的根本原因。 除此之外，它还是一个能自我完善的好同志，曾经有一位年经的母亲就为了挽救自己两岁零三个月的女儿，而捐献出自己1/4的肝脏。 我们一直在为这种舍身救女的母爱所感动，也曾经为这位母亲的健康状况而担忧，其实肝脏是人体唯一可以再生的器官，即使切除一半，它也会不急不慢的长出来，另外，肝脏也是最愿意位移的器官，它会随人的呼吸能上下挪动，活动范围能达到二到三厘米，这也是为什么大夫在为我们检查肝脏的时候，让我们不断吸气呼气的原因了。 在西医的眼里，肝脏是一个代谢系统，一个重要脏器，就像是我们人体的一个化工厂，它掌管着糖、脂肪、蛋白质的解毒、代谢，人体大部分的新陈代谢和有毒物质的转化，所以它也是最易污染的部门。 在中医的眼里，肝脏是一个部位，它有两大功能，一是主疏泄和二是主藏血。肝主疏泄，所谓疏泄就是让你能够疏通、畅达，比如说人生气了，时间久了，肝气郁结，就影响脾胃的运化功能，也就是消化功能就差，所以人生气了就不想吃饭。 肝主藏血，肝脏不只管藏血，还管调节全身气血运行，管血液分配，比如说人在运动的时间，肝脏就把血液分配到四肢，女性朋友生理期前，肝脏就把血液分配到血海，即冲脉，那个时候肝脏的血液少了，柔韧性格就下降了，所以女性朋友总有那么几天会脾气不好。

rbp4与肝脏疾病的关系

RBP4与肝脏疾病的关系 he Relationship between RBP4 and Liver Disease 关键词：RBP4；肝脏疾病；脂肪因子 Key Words: RBP4, Liver Disease, adipocyte factors 摘要：肝脏的养护已成为健康管理中一个重要的课题，不健康的生活与饮食习惯给肝脏带来了极大的危害，本文从RBP4的生物学特性来研究其与肝脏疾病的发生、发展与预后的相关性，具有很好的指导价值。 Abstract: The maintenance of liver has been an improtant topic of health management, theunhealthy habits of life and diet bring huge hazard to liver. And this paper is to study thepertinence of RBP-4 and the ocurrence, development, and prognosis of liver disease from the biological characteristics of RBP-4. And this kind of study has great significance. 脂肪组织能分泌多种脂肪因子，如瘦素（leptin）、抵抗素（resistin）、RBP-4、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、脂联素（adiponectin）、心血管活性肽（apelin）、网膜素（omentin）等[1－2]。其中，瘦素、抵抗素、、RBP-4、TNF-α、IL-6能致胰岛素抵抗，而脂联素、心血管活性肽、网膜素能改善胰岛素抵抗。本文着重介绍RBP-4的生物学特性及其与肝脏疾病的关系。 Adipose tissue can secrete several kinds of adipocyte factors, such as leptin, resistin, RBP-4, tumor necrosis factor-α，TNF-α, interleukin-6，IL-6, adiponectin, apelin, omentin, RBP-4、TNF-α、IL-6, etc[1－2]. Among these, leptin, resistin, RBP-4, TNF-α, IL-6 can cause insulin resistance, but adiponectin, apelin, and omentin can improve insulinresistance. This paper is focused on introducing biological characteristics of RBP-4, and it’s relationship with liver disease. 1 RBP4的生物学特性 RBP4是视黄醇类结合蛋白家族中的一员，由184个氨基酸残基和3个二硫键组成，有1个位点能特异结合1分子全反式视黄醇，相对分子质量为21 000，编码基因位于lOq，mRNA全长为941 bq。 RBP4主要在肝细胞粗面内质网合成，约15％～30％在脂肪组织合成，其广泛分布于血液、脑脊液、尿液及其他体液中，约20％储存于脂肪组织[3－4]，正常人血清含量为25～70 mg/L，半衰期仅为3～12h。 RBP4在维生素A储存、代谢和转运到周围靶器官的过程中发挥重要作用。维生素A在肝中以视黄酰

手指与五脏的关系

手指与五脏的关系 人体的手有78个反射区，如心、肝、脾、胃、肾、大肠、小肠、膀胱、前列腺等；还有针对症状治疗的高血压、低血压、遗尿、失眠、多梦、胆囊炎、左头痛、右头痛等相应的敏感点。较长时间的拍手可以震荡气脉，带动十二经脉和奇经八脉（含任督二脉）的循环，把身上的污秽毒素通过排泄器官排出去，若是亚健康可趋于健康，倘若反射区所对应的脏器有病，通过反复拍手震荡刺激可逐渐改变病态而走向健康。 大拇指是脾胃二经的反射区，食指是肝经胆经的反射区，中指是心包经小肠经的反射区，无名指是肺和大肠经的反射区，小指是肾与膀胱、心经的反射区。手掌上也有很多反射区，通过不断的反复震荡刺激而促使神经中枢作出调节，从而祛病保健康。如患了感冒，拍手拍到汗流浃背即好；心脏功能不佳、心律不齐，拍手2、3个月会有改善；手指酸麻或颤抖的拍手1、2个月会痊愈；高血压的拍手血压会下降：低血压的拍手血压会上升；痛风、头晕、头痛、过敏性鼻炎通过拍手可逐渐痊愈；便秘的人练拍手功可逐渐改善而趋于正常。关键在于“持之以恒”。 拍手的方式有几种：一坐着拍，二站着拍，三边走边拍，四原地踏步拍，五跳着拍。后三种比较好，因为手三阳经、手三阴经、足三阳经、足三阴经均参与活动，效果较好。 以手的打击面来分，可以分为： 1、标准的拍手功：使用大的力量来拍手，发出的声音清脆响亮，方法是十指张开，两手的手掌对手掌，手指对手指用力拍，是“实心掌拍法”，打击面完全，刺激量大，治病的效果理想。拍击的场所最好在空旷之处，也可以戴上手套以减

少噪音。饭后需要隔半小时方可施行。 2、双通的拍手功：拍时将手掌弓起，拍下去时只拍到手指尖及手掌的边缘部分，缩小了打击面，效果差一些。 在拍手后每个人情况不一样，反应有的手上拍出白粉，有的人手拍出裂口多处，糖尿病患者手拍出流油和出粘液汗水，还有的手发青紫。但裂口能很快自愈。这些现象都是排病现象。拍手法是一种自我按摩疗法，各种疾病只要坚持训练都有明显效果。 为什么简单的拍手能收到疗效呢通过实践，拍手时心情愉快，全身容易放松，姿式不受限制，力度好掌握。总之，方法很简便，是手部自我按摩的好方法，具有一定自我保健防病治病的作用。其机理可能有如下几点： 1．手足相对应而且经络相通：即足三阴通手三阴(如足太阴脾经通手少阴心经，足厥阴肝经通手太阴肺经，足少阴肾经通手厥阴心包经。手阳明大肠经通足阳明胃经，手少阳三焦经通足少阳胆经，手太阳小肠经通足太阳膀胱经)。所以拍手可使双足发热，拍手的强烈震动和按摩作用，能起到疏通经络、调正气血、促进循环等功能。 2．人体经络是健康的总开关，拍手和按摩足部相结合是疏通经络开穴疗病的好方法。因为手是全身主要经脉的集中区之一，十二正经的一半在手上，而且治病的经络要穴五输穴(井、荥、输、经、合穴)均在小臂或小腿以下和手指端脚趾端。(如手上的少商、少冲等井穴和足上大敦、太冲等肝经井穴荥穴以及肾经涌泉太溪井穴原穴)。 3．手足上具有全身各器官的反射区和全息区。同时手指、足趾均与五脏相对应，手指是检测五脏健康水平的晴雨表。

小鼠肝脏取材步骤

小鼠肝脏组织取材步骤 小鼠肝脏组织取材步骤，并列出完成此次实验所需要的试剂、仪器、材料等相关物品及实验人员安排情况。 材料：小鼠 试剂：DMEM 戊巴比妥钠 75%酒精 PBS 器械消毒液戊二醛 仪器：解剖台备皮刀弯盘组织剪眼科剪手术刀柄刀片血管钳眼科镊 培养皿无菌手套 实验人员安排：小鼠养殖管理组准备工作组实验操作组 实验步骤: 1. 取材前夜禁食，自由饮水。 2. 小鼠称重，按照50mg/kg的比例用5ml的注射器配合针头抽取戊巴比妥钠备用。 3. 正左手的小指和无名指抓住大鼠的尾巴，另外三个手指抓住大鼠的颈部，使大鼠头部向向下。这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部，防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。右手持注射器，从腹部近腿根处刺入后再腹部皮下穿行深入，动作轻柔，缓慢注射。注射完药物后，缓缓拔出针头，手指按住针口对小鼠腹部轻柔按摩，促进麻醉药物的吸收，掐小鼠尾部检测小鼠麻醉程度。 4.将小鼠四肢固定于解剖台上，暴露小鼠整个胸部和腹部，修剪去腹部毛发，75%酒精消毒。 5.沿腹侧正中线自阴茎上源由下而上剪开腹部皮肤直至剑突，向两侧钝性剥开皮肤与皮下组织，暴露腹壁浅肌层。沿白线钝性分离腹壁肌肉，剪开腹膜，暴露腹腔，将肝脏向上翻起，显露肝门，眼科剪剪除肝脏周围结缔组织和血管。 6.结扎剪断肝门管道系统，钝锐结合完整取出大鼠肝脏，放置于无菌培养皿，生理盐水冲洗，称重并记录。①切取肝左叶约1mm×1mm×1mm组织3块，3-戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH 7.4)或4-戊二醛固定；②左叶肝组织浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定；③右叶肝组织称重记录分装后全部放置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。 7.切取肝左叶约1mm×1mm×1mm组织3块，3-戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4-戊二醛固定；左叶肝组织浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定；右叶肝组织称重记录分装后全部放置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。

肝星状细胞及其与肝脏疾病的关系

#讲座与综述# 肝星状细胞及其与肝脏疾病的关系 徐丹,卢大雷 作者单位:475000 河南省开封市医学科学研究所;475000 河南省开封市医用细胞生物学实验室 =关键词> 肝星状细胞;肝脏疾病;关系 =中图分类号> R 32912+8 =文献标识码> A =文章编号> 1674-3296(2010)06-0124-02 肝星状细胞(H SC)是细胞外基质(EC M )的主要来源细 胞,分为静止和活化2种类型[1] 。随着细胞学、分子生物学等基础医学科学的发展和应用,人们对H SC 的研究和认识不断深入,发现其在肝脏疾病中发挥着重要作用。本文就H S C 的生物学特性、活化及其调控以及H SC 与肝脏疾病的关系做一综述。 1 肝星状细胞的生物学特性 1.1 HSC 性质及功能 H SC 位于肝窦内皮细胞(SEC )和肝细胞之间的窦间隙狄氏腔内,其数量占肝脏细胞总数的15%,占肝脏间质细胞的1/3[2]。正常情况下HSC 表现为富含维生素A 脂滴的静止状态,其主要功能:储存脂肪,以供给肝细胞能量;代谢和贮存维生素A;通过其纤长突起的收缩功能调节肝窦内微循环,从而影响着肝脏的血流分布和门静脉压力;合成和分泌胶原及糖蛋白、蛋白多糖等基质成分;合成基质金属蛋白酶(MMP )及其组织抑制剂(T I M P);表达细胞因子及受体。1.2 H SC 生物学特性 肝脏损伤后,HSC 则激活成为肌成纤维样细胞-活化型,其生物学特征主要表现为:胞体增大,胞突伸展,胞质中脂滴消失,维生素A 含量减少;细胞大量增生,并且向肝损伤部位迁徙;表达A 2平滑肌蛋白,为活化型H SC 的标志;具有收缩功能,活化的H SC 合成内皮素增加,引起H SC 收缩,导致肝内微循环收缩和肝窦血管阻力升高;EC M 分泌增多,活化的H SC 是ECM 生产的主要来源;分泌多种细胞因子,表达多种受体,对化学因子刺激的敏感性增加;表达结蛋白、波形蛋白及神经胶原酸性纤维蛋白;释放MM P 及TI MP 。2 肝星状细胞的活化及调控 2.1 H SC 活化 在1995年由德国的G ress ner 提出了H SC 激活的/三步模式0。炎症前期:由各种病因导致肝实质细胞损伤,产生多种细胞因子,通过旁分泌作用于H SC ,从而促使HSC 大量增殖;炎症期:活化的库普弗细胞、巨噬细胞及血小板释放多种细胞因子(TGF 2A 、TGF 2B )和血小板衍生生长因子(PD GF)等,进一步刺激HSC 增殖并向肌成纤维细胞(M FB)转化[3],其中PDGF 是最强的促进H SC 增殖的刺激因子;炎症后期:激活后的HSC 产生大量的细胞因子和生长因子并通过旁分泌和自分泌作用,进一步刺激未激活转化的HSC 转变为M FB 并合成EC M 。这时即使去除致病因子,肝纤维化仍可继续发展。 2.2 H SC 活化的调控 2.2.1 PDGF:目前认为PD GF 具有明显的促有丝分裂和刺激胶原及纤维连接蛋白合成的作用。H SC 既是PDGF 的产生细胞,又是PDGF 作用的靶细胞。而PDGF 是H SC 最强的有丝分裂原,能够强烈刺激HSC 的活化、分裂和增殖。 2.2.2 转化生长因子(TGF 2B 1):TGF 2B 1具有强烈的促HSC 合成EC M 作用,TGF 2B 1还可刺激HSC 的PD GF 受体的表达,增强PDGF 的作用;TGF 2B 1亦可通过抑制MMP 合成而抑制EC M 的降解。 2.2.3 肿瘤坏死因子2A (TNF 2A ):T NF 2A 能促进HSC 的激活,刺激EC M 合成并分泌多种细胞因子作用。另外,TNF 2A 通过增加H SC 中蛋白水解酶抑制物的合成,还可抑制EC M 的降解。Andus 等研究表明:T NF 2A 对活化的H S C 的增殖和凋亡均起到抑制作用,可能是慢性肝损伤时活化的H SC 寿命延长的内在机制。 2.2.4 胰岛素样生长因子21(I GF 21):I GF 21是一种细胞上类似胰岛素原的多肽促分裂原,能刺激H SC 的活化和增殖,通过对细胞外信号调节激酶和磷脂酰肌醇232激酶的激活,增加胶 原的合成[4] 。 除此之外细胞因子白介素26、白介素21、瘦素等也对HSC 的活化有调节作用。总之,H SC 活化过程是自分泌或旁分泌多种细胞因子协同作用的结果,但这些不同因素可能通过相似的细胞内途径发挥作用。3 肝星状细胞与肝脏疾病 3.1 脂肪性肝炎 脂肪性肝病主要表现为肝实质细胞的脂质过度沉积。现有证据表明,肝星状细胞内脂质的量、脂滴类型和其表面脂蛋白受体的改变与H SC 的活化和增殖有关[5]。F raser 等研究表明,酒精性肝损伤在脂肪肝早期阶段,肝组织炎症、坏死不明显或缺乏时HSC 即已激活。 非酒精脂肪肝一般需在脂肪性肝炎的基础上才能发展为肝硬化,即按传统的细胞变性坏死-炎症-纤维增生模式发展,提示非酒精性脂肪性肝炎是非酒精性脂肪肝发生肝硬化的必经阶段。但是研究发现,少数非酒精性脂肪肝患者在无明显肝组织炎症和肝细胞坏死的情况下发生肝纤维化,这可能是脂肪肝对肝细胞损伤本身即是H SC 和EC M 增多的启动因素[6]。3.2 病毒性肝炎 病毒性肝炎是由多种不同肝炎病毒引起的一组以肝脏损害为主的传染病,其病理表现为免疫功能紊乱、特异性免疫反应增强、自身免疫反应明显、肝纤维化以及病毒浸润。有报道显示,在慢性乙型肝炎肝纤维化时,由于乙型肝炎病毒的直接作用和其介导的免疫病理导致库普弗细胞的大量浸润,肝细胞碎片激活库普弗细胞使其分泌TGF 2B 1、TGF 2B 1进一步激活H SC 和其他间质细胞导致的大量分泌[7]。 3.3 肝硬化 在我国,肝硬化主要由HBV 感染或酒精性肝病所致,最近发现由于肝病引起肠道菌群失调,内毒素吸收增多,可改变星状细胞Toll 样受体4,增强转化生长因子激活星状细胞的活性,有利于肝纤维组织增生。乙型肝炎病毒X 蛋白也可以直接或通过激活细胞因子而激活星状细胞,刺激纤维组织增生[8]。 3.4 肝癌 肝细胞肝癌(HCC)发生的过程中常伴有明显的

肝脏切片

大鼠肝脏脂肪组织石蜡包埋切片 本实验室现提供整体实验课题外包服务，如大鼠肝脏，脂肪组织石蜡切片，免疫组化整体实验代做，小鼠心肌细胞培养，后续Western blot,荧光定量PCR 检测等，因本实验室自己课题量也较多，所对外承接课题数量有限，如有需要的同学请在线提前预约（即将毕业研究生优先）。 制作优质大鼠各器官石蜡切片 1.1标本：大鼠各个脏器———心、肝、脾、肺、肾、大脑、脊髓、胃肠、垂体、胸腺、淋巴结、肾上腺、卵巢、睾丸、子宫、膀胱、附睾。 1.2固定液：中性甲醛溶液，固定时间为24h。 1.3取材：心脏：最大纵断面取1块，厚度为2mm肝脏：右叶纵断面取1块，厚度为2mm；脾脏：纵断面取1块，厚度为2mm肺脏：纵断面取1块，厚度为2mm；肾脏：最大面剖开取一半，包括皮质、髓质和肾盂；大脑：最大面剖开取一半；脊髓：横断面剖开取1块，厚度2~3m;胃：沿大弯侧剪开，纵切一长条，长1cm，宽2mm；肠：横断面切取一段，约2mm；垂体：全包；胸腺：全包；淋巴结：全包；肾上腺：全包；卵巢：全包；子宫：横断面剖开取一段，厚度2mm；睾丸：最大面剖开，取半；附睾：纵断面剖开取半；膀胱：剖开取半。 1.4包埋：胃肠、子宫、膀胱立埋，其余脏器平埋，蜡温为65~70℃。 1.5切片：厚度4μm，摊片水温56℃左右，选取无皱折的4片。 动物组织石蜡切片苏木素-伊红（HE）染色切片置70℃的烤箱中30min 入二甲苯脱蜡20min；入梯度乙醇100%→95%→85%→75%，自来水冲洗2min；入苏木精30min，取出自来水冲洗2min；入盐酸乙醇分化5s，自来水冲洗2min；入伊红5s，自来水冲洗2min；入梯度乙醇75%→85%→95%Ⅰ→95%Ⅱ→100%入二甲苯Ⅰ→二甲苯Ⅱ；中性树胶封片。

中医：肝与五脏的关系

中医中肝脏藏血,重要性不言而喻，中医讲肝肾同源，今天艾蓬轩给大家分享下中医中肝脏与其他脏器的关系。 肝脏的生理结构和功能 肝脏是我们人体非常重要的器官,那么肝脏究竟与其他器官有什么不一样？下面我们一起了解一下。肝脏是人体内最大的器官,平均重量可达到１.5公斤,成年男子的肝脏差不多有４2码的球鞋这么大。其实肝脏就是个傻大个，性情憨厚，天天干活都不知道累,因为肝脏是唯一没有痛感神经的器官,所以无论它累成怎么样，它也从不呻吟叫苦,也不会喊痛,这也是人们经常忽略它健康状况的根本原因。 除此之外,它还是一个能自我完善的好同志,曾经有一位年经的母亲就为了挽救自己两岁零三个月的女儿，而捐献出自己1/4的肝脏。 我们一直在为这种舍身救女的母爱所感动,也曾经为这位母亲的健康状况而担忧,其实肝脏是人体唯一可以再生的器官，即使切除一半,它也会不急不慢的长出来，另外，肝脏也是最愿意位移的器官，它会随人的呼吸能上下挪动，活动范围能达到二到三厘米，这也是为什么大夫在为我们检查肝脏的时候，让我们不断吸气呼气的原因了。 在西医的眼里，肝脏是一个代谢系统，一个重要脏器，就像是我们人体的一个化工厂,它掌管着糖、脂肪、蛋白质的解毒、代谢,人体大部分的新陈代谢和有毒物质的转化,所以它也是最易污染的部门。 在中医的眼里，肝脏是一个部位，它有两大功能，一是主疏泄和二是主藏血。肝主疏泄，所谓疏泄就是让你能够疏通、畅达，比如说人生气了,时间久了，肝气郁结,就影响脾胃的运化功能,也就是消化功能就差，所以人生气了就不想吃饭。

肝主藏血,肝脏不只管藏血,还管调节全身气血运行，管血液分配，比如说人在运动的时间，肝脏就把血液分配到四肢，女性朋友生理期前,肝脏就把血液分配到血海，即冲脉，那个时候肝脏的血液少了，柔韧性格就下降了,所以女性朋友总有那么几天会脾气不好。 肝脏负责着人体的代谢、合成、解毒、贮存、分解、排泄，您关注过它吗？它对健康影响您知道吗?肝脏是人体非常重要的器官，有多重要？曾有这么一句话：肝脏好,人生是彩色的，肝脏不好,人生是黑白的。 肝脏与人体健康 我们人体是世上最强大、最精密的“仪器”，每个脏器看似独立,其实是密切相关,脏与脏之间互相依存,又互相制约。肝脏与其他器官有什么关系呢?又与哪些疾病有关？ 肝与情绪的关系 中医讲，肝主怒,怒伤肝,肝血太重，就容易造成面红耳赤,头晕，头疼,这种就是肝火旺的表现，中医讲人卧血归肝,肝藏血,充足睡眠能养血的同时又可以充分的使肝气得到一个疏泄，长期睡眠不足，会造成肝火越来越旺,表现为情绪暴躁，爱发脾气,所以说人的充足睡眠可以养肝,可以使情绪能够达到非常好的境界。反过来调整好自己的情绪,也利于养肝。 肝与眼睛的关系 中医里有一句话就是说肝和眼睛的关系,叫“肝开窍于目”，眼睛也是肝脏的“窗口”。眼睛经常发花、眼角干涩、看不清东西,除了视力下降引起的问题,也可是肝脏功能衰弱的先兆。 凡非外伤引起的视力下降均与肝气血虚有关，如果肝脏湿热重，眼睛表现浑浊而黄，如果肝火很旺，眼睛表现红甚至发炎，如果肝气亏，看书稍久就容易疲劳,进一步亏下去，便成近视眼了。

利用石蜡切片对小鼠肝脏组织器官细微结构的观察

摘要：本文采用石蜡永久制片和光学显微摄像的方法对经过环磷酰胺处理过的小鼠肝脏的显微结构进行了研究，分析环磷酰胺对小鼠肝脏的显微结构产生的影响。结果表明，一定剂量的环磷酰胺对肝脏具有损伤作用。 关键词：小鼠肝脏石蜡切片 环磷酰胺( Cyclophosphamide, Cp) 是人工合成的氮芥类烷化剂。可以抑制细胞增殖，非特异性杀伤抗原敏感性小淋巴细胞，限制其转化为免疫母细胞，可以作为细胞周期非特异性广谱抗肿瘤药，被广泛用于治疗急慢性淋巴细胞性白血病、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤等；但同时可以引起剂量依赖性肝损伤的副作用——原因可能是环磷酰胺主要代谢物丙烯对肝脏有毒副作用，能引起肝细胞坏死，肝小叶中心充血，同时伴有氨基转移酶含量升高的现象。 1 材料与仪器 1.1 实验材料 小白鼠 1.2 实验仪器： 镊子、毛笔、蜡杯、溶蜡箱、酒精灯、切片机、载玻片、盖玻片、染色缸、光学显微镜。1.3 试剂： 中性福尔马林固定液、各浓度酒精、二甲苯、石蜡、伊红染液、苏木精染液、加拿大树胶 2 实验方法 2.1 取材 用左手拇指和食指捏住小白鼠头的后部，并用力下压，右手抓住鼠尾，用力向后上方拉，即可使颈椎脱臼，小白鼠瞬间死亡。取肝组织。 2.2 固定 将小鼠肝脏块投入中性福尔马林固定液中固定。 2.3 脱水 将组织经各浓度酒精各1 h，95%、100% 的酒精各两次，每次30 min。 2.4 透明 将组织块置于酒精二甲苯混合液中15 min，再将组织块置于二甲苯中透明两次，每次10 min。最后将组织块置于二甲苯石蜡混合液中20 min。

2.5 透蜡 将组织块置于已溶化的石蜡中，放入溶蜡箱保温，共三次，前两次45 min，第三次 30 min。 2.6 包埋 向纸盒中倒入少许石蜡，将组织块用镊子夹取到纸盒中，放入盛有冷水的盆中使其凝固。2.7 切片 右手摇动转轮，让蜡块切成蜡带，左手持毛笔将蜡带提起，当切成的蜡带到一定长度时，将蜡带放在纸上。 2.8 贴片、展片 选取蜡带放置在载玻片上。将载玻片放置在机器上进行展片，待蜡带完全展开时将载玻片拿下，放入盒内。 2.9 脱蜡复水 将石蜡切片经二甲苯Ⅰ脱蜡 20 min，二甲苯Ⅱ脱蜡 10 min，然后放入各级酒精溶液中各2 min，蒸馏水中2 min。 2.10染色 将石蜡切片在苏木精染液中浸40min，然后蒸馏水涮洗几次至发蓝（约2min），镜检。 2.11 脱水Ⅰ、复染、脱水Ⅱ 将镜检合格的石蜡切片依次在各级酒精中浸2min，再在伊红水溶液浸二十至三十秒，再依次在95%、纯酒精Ⅰ、纯酒精Ⅱ中各浸 3 min。 2.12 透明 将石蜡切片放入二甲苯Ⅰ、Ⅱ中各 3 min。 2.13封藏：中性树胶封存 将载玻片取出，在切片中央滴一滴树胶，用镊子盖上盖玻片。 3 小鼠肝脏石蜡切片观察 见下图：