弯沉检测方法

弯沉检测方法

一弯沉值的概念

1、弯沉

指在规定的标准轴载作用下，路基路面表面轮隙位置产生的总垂直变形（总弯沉）或垂直回弹变形值（回弹弯沉），以为单位。

2、设计弯沉值

根据设计年限内一个车道上累计当量轴次、公路等级、面层和基层类型而确定的路面弯沉设计值。

3、竣工验收弯沉值

是检验路面是否达到设计要求的指标之一。当路面厚度计算以设计弯沉值为控制指标时，则验收弯沉值应小于或等于设计弯沉值；当厚度计算以层底拉应力为控制指标时，应根据拉应力计算所得的路面厚度，重新计算路面弯沉值，该弯沉值即为竣工验收弯沉值。

二贝克曼梁法

1、试验目的和适用范围

⑴适用于测定各类路基路面的回弹弯沉，用以评价其整体承载能力，可供路面结构设计适用。

⑵沥青路面的弯沉以标准温度20℃为准，当地面平均温度在20℃±2℃以内时可不修正。在其他温度测试时，对沥青层厚度大于5cm的沥青路面，弯沉值应予温度修正。

2、仪具与材料

⑴测试车：双轴、后轴双侧4轮的载重车，其标准轴荷载、轮胎尺寸、轮胎尺寸、轮胎间隙、轮胎气压等主要参数应符合下表要求。测试车应采用后轴10t标准轴载BZZ-100的汽车。

⑵弯沉仪：由贝克曼梁、百分表及表架组成。贝克曼梁由铝合金制成，上有水准泡，前臂（接触地面）与后臂（装百分表）长度比为2：1。长度有两种：和。在半刚性基层沥青路面或水泥砼路面上测试时，宜采用的贝克曼梁，对柔性基层或混合式结构沥青路面可采用。弯沉值采用百分比量得，也可用自动记录装置进行测量。

⑶接触式路面温度计：端部为平头，分度不大于1℃。

⑷皮尺、口哨、白油漆或粉笔、指挥旗等。

3、试验方法与步骤

⑴试验前准备工作

①检查并保持测试用车的车况及刹车性能良好，轮胎内胎符合规定充气压力。

②向测试车车槽中装载（铁块或集料），并用地中衡称量后轴总质量及单侧轮轴线，均应符合要求的轴重规定，汽车行驶及测定过程中轴重不得变化。

③测定轮胎接地面积：在正整光滑的硬质路面上用千斤顶将汽车后轴顶起，在轮胎下方铺一张新的复写纸和一张方格纸，轻轻落下千斤顶，即在方格纸上印上轮胎印痕。用求积仪或数方格的方法测算轮胎接地面积，精确至。

④检查百分表测量灵敏情况。

⑤当在沥青路面上测定时，用路表温度计测定试验时气温及路表温度（一天中气温不断变化，应随时测定），并通过气象台了解前5d的平均气温(日最高气温与最低气温的平均值)。

⑥记录沥青路面修建或改建时材料、结构、厚度、施工及养护情况。

⑵测试步骤

①在测试路段布置测点，距离随测试需要而定。测点应在路面行车道的轮迹带上，用白油漆或粉笔做上标记。

②将汽车后轮轮隙对准测点后约3~5cm的位置上。

③将弯沉仪插入汽车后轮之间的缝隙处，与汽车方向一致，梁臂不得碰到轮胎，弯沉仪侧头置于测点上（轮隙中心前方3~5cm处）。并安装百分表于弯沉仪的测定杆上，百分表调零。并用手指轻轻叩打弯沉仪，检查百分表是否稳定回零。

弯沉仪可以是单侧测定也可以是双侧同时测定。

④测定者吹哨发令指挥汽车缓缓前进，百分表随路面变形的增加而持续向前转动，当表针转动到最大值时，迅速读取初读数L1。汽车仍在继续前进，表针反向回转，待汽车驶出弯沉影响半径（约3m以上）后，吹口哨或挥动红旗，汽车停止。待表针回转稳定后读取终读数L2。汽车前进速度宜为5km/h左右。

4、弯沉仪的支点变形修正

⑴采用弯沉仪进行完成测定时，有可能引起弯沉仪支座处变形，因此测定时应检验支点处有无变形。如有，则应用另一台检验用的弯沉仪安装在测定用弯沉仪的后方，其测点架于测定用弯沉仪的支点旁。当汽车开出时，应同时测定两台弯沉仪的弯沉读数，如检验用弯沉仪的百分表有读数，即应该记录并进行支点变形修正。在同一结构层进行测定时，可在不同的位置测定5次，取平均值，以后每次测定时以此作为修正值。

⑵不需要进行支点变形修正。

5、结果计算及温度修正

⑴测点的回弹弯沉值计算：L T＝(L1－L2)×2

L T：路面温度为T时的回弹值。

⑵进行支点变形修正时，测点的回弹弯沉值计算：L T＝(L1－L2)×2＋（L3－L4）×

6

L3：车轮中心临近弯沉仪侧头时检验用弯沉仪的最大读数。

L4：汽车驶出弯沉影响半径后检验用弯沉仪的终读数。

此式适用于测定用弯沉仪支座处有变形，但百分表架处路面已无变形的情况。

⑶沥青面层厚度大于5cm，且路面温度超过20℃±2℃范围时，回弹弯沉值应进行温度修正。

①

②

③

6、报告的内容

⑴弯沉测定表、支点变形修正值、测试时的路面温度及温度修正值。

⑵每一个评定路段的各测点弯沉的平均值、标准差及代表弯沉。

路基弯沉检测方法

路基弯沉检测方法 路面弯沉值就是从整体上反映了路面各层次的整体强度，路基的强度一般用回弹模量来反映。如果弯沉值过大，其变形也就越大，路面各层也就容易破裂。 路基弯沉检测的基本规定： 频率：测定代表弯沉值时，应以每公里每一双车道为一评定路段。每路段检查80～100个点。对多车道公路必须按车道数与双车道之比，相应增加测点数。 方法：路面弯沉的计算 路面测点的回弹弯沉值：LT＝2(L1-L2) 式中LT——在路面温度T时的回弹弯沉值，0.01mm。 L1——车轮中心临近弯沉仪测头时百分表的最大读数，0.01mm。 L2——汽车驶出弯沉影响半径后百分表的终读数，0.01mm。当需要进行弯沉仪支点变形修正时，路面测点的回弹弯沉值： LT＝2(L1-L2)＋6(L3-L4) 式中L3——车轮中心临近弯沉仪测头时检验用弯沉仪的最大读数，0.01mm。 L4——汽车驶出弯沉影响半径后检验用弯沉仪的终读数，0.01mm。 弯沉代表值是弯沉测量值的上波动界限，用下式计算：LR＝L＋

ZA·S 式中LR——一个评定路段的代表弯沉，0.01mm。 L——一个评定路段内经各项修正后的各测点弯沉的平均值。 S——一个评定路段内经各项修正后的全部测点弯沉的标准差。 ZA——与保证率有关的系数，采用下列数值。 高速、一级公路ZA＝2.0 二级公路ZA＝1.645 二级以下公路ZA＝1.5 计算平均值和标准差时，应将超出L±(2～3)S的弯沉特异值舍弃。对舍弃的弯沉值过大的点，应找出其周围界限进行处理。

产碱性蛋白酶菌株的筛选_分子鉴定及其酶学性质的初步研究

碱性蛋白酶是在碱性范围内水解蛋白质肽键的酶类，一般最适pH值为9~11，属内肽酶中的丝氨酸蛋白水解酶类，主要用于加酶洗涤剂中，在制革、纺织、医药、化妆品等的生产中也有广泛的应用[1]。目前，全世界所生产的酶中碱性蛋白酶占到总产量的30%左右，显示出良好的使用性能和经济价值。 碱性蛋白酶广泛存在于细菌、放线菌和真菌中，其中以芽孢杆菌属的碱性蛋白酶研究的最深入。本实验从山东东营的盐碱地采集土样，从中分离出若干株产碱性蛋白酶的菌株，并对其进行16S rRNA分子鉴定以及酶学性质的初步研究，以期为工业应用提供基础理论依据。 1材料与方法 1.1土样来源 山东东营盐碱地中采集土样。 1.2培养基 富集培养基：牛肉膏0.5g、蛋白胨1g、NaCl0.5g、水 产碱性蛋白酶菌株的筛选、分子鉴定及其酶学性质的初步研究 成堃，路福平*，李玉，王盛楠，王建玲 （天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院，天津300457） 摘要：从盐碱地土壤中筛选到5株产碱性蛋白酶的细菌，分别命名为TCCC11001、TCCC11004、TCCC11013、TCCC11024、TC-CC11029。将其革兰氏染色、16S rRNA鉴定为Bacillus subtilis、Bacillus alcalophilus、Bacillus pumilus、Bacillus subtilis、Bacillus licheni-formis。将菌株接入发酵培养基中，37℃、180r/min摇床培养48h，发酵液进行不同处理后Folin法测定酶活。结果发现：TCCC11001、TCCC11029的最适作用温度为40℃，TCCC11004、TCCC11013、TCCC11024的最适作用温度为50℃；TCCC11001、TCCC11004、TC-CC11013、TCCC11024、TCCC11029的最适作用pH值分别为10.0、11.0、10.0、9.0、11.0；TCCC11004、TCCC11013于40℃保温2h，残留酶活为最高酶活70%；TCCC11001、TCCC11024、TCCC11029的残留酶活＜50%。DFP、PMSF完全抑制酶的活性，表明5种蛋白酶是典型的丝氨酸蛋白酶。 关键词：碱性蛋白酶；芽孢杆菌；分子鉴定；热稳定性 中图分类号：Q93-331；Q55文献标识码：A文章编号：0254－5071（2009）02-0033-04 Screening,molecular classification of alkaline protease-producing strains and enzyme characteristics CHENG Kun,LU Fuping*,LI Yu,WANG Shengnan,WANG Jianling (Tianjin Key Lab of Industrial Microbiology,College of Bioengineering,Tianjin University of Science and Technology,Tianjin300457,China) Abstract：5strains which could produce alkaline protease were isolated from soil and named TCCC11001,TCCC11004,TCCC11013,TCCC11024 and TCCC11029.They were regarded as Bacillus subtilis,Bacillus alcalophilus,Bacillus pumilus,Bacillus subtilis,Bacillus licheniformis after deter-mination of16s rRNA and Gram staining.Enzyme activities were determined after incubating these strains at37℃,180r/min for48h.The results showed the optimal temperature of TCCC11001and TCCC11029was40℃,and for the others,the temperature was50℃;the optimal pH of these five strains were10.0,11.0,10.0,9.0and11.0respectively.Residual enzyme activities of TCCC11004and TCCC11013were as much as70%com-pared to the maximum activity when incubated at40℃for2h,and residual enzyme activities of TCCC11001,TCCC11024,TCCC11029were less than50%.The enzyme activity could be completely inhibited by DFP and PMSF,and it showed that these five proteases were typical serine protease. Key words:alkaline protease;Bacillus;molecular determination;thermostability 收稿日期：2008-10-23 基金项目：国家高技术研究发展计划（863计划）资助项目（2007AA02Z212）；国家科技基础条件平台项目（2005DKA21204-10） 作者简介：成堃（1982-），女，山东济南人，博士研究生，研究方向为发酵工程；路福平*，教授，通讯作者。 [13]TAKAHASHI M,SEKINE T,UBA N,et al.The production of recom- binant APRP,an alkaline protease derived from Bacillus pumilus TY-O-67,by in vitro refolding of Pro-enzyme Fixed on a solid surface[J].J Biochem，2004，136（4）：549-556. [14]WONG S L,CHESTER W.The subtilisin E gene of Bacillus subtilis is transcribed from aσ38Promoter in vivo[J].Proc Natl Acad Sci USA，1984，81：1184-1188. [15]CHANG C T,FAN M H,KUO F C.Potent fibrinolytic enzyme from a mutant of Bacillus subtilis IMR-NK1[J].J Agr Food Chem，2000，48（8）：3210-3216.[16]SEO,J H,LEE S P.Production of Fibrinolytic enzyme from soybean Grits fermented by Bacillus firmus NA-1[J].J Med Food，2004，7（4）：442-449. [17]KIM H K,KIM G T,KIM D K,et al.Purification and characterization of a novel fibrinolytic enzyme from Bacillus sp.KA38originated from fermented fish[J].J Ferment Bioeng，1997，84：307-312. [18]PENG Y,HUANG Q,ZHANG R H,et al.Purification and characteriza- tion of a fibrinolytic enzyme produced by Bacillus amyloliquefaciens DC-4screened from dou-chi,a traditional Chinese soybean food[J]. Comp Biochem Phy B，2003，134：45-52. !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!

落锤式弯沉仪工作原理及使用的范围

落锤式弯沉仪工作原理及使用的范围 落锤式弯沉仪(Falling Weight Deflectometer, FWD)是目前国际上最先进的路面弯沉检测设备，它具有无破损、测速快、精度高等优点，并很好地模拟了行车荷载作用，检测结果为弯沉盆数据，因此在国际上的应用也日益广泛。其应用范围主要是在路面养护管理方面及后续路面结构设计提供依据。 1落锤式弯沉仪的工作原理 落锤式弯沉仪通过计算机系统控制下的液压系统启动落锤装置，使一定质量的落锤从一定高度自由落下，冲击力作用于承载板上并传递到路面，从而对路面施加脉冲荷载，导致路面表面产生瞬时变形，分布于距测点不同距离的传感器检测结构层表面的变形，记录系统将信号传输至计算机，即测定在动态荷载作用下产生的动态弯沉及弯沉盆。测试数据可用于反算路面结构层模量，从而比较科学地评价路面的承载能力。 2与常规检测手段的比较 2.1常规检测方法我国现行的路面弯沉常规检测手段采用的是贝克曼梁法，基本原理是杠杆原理。在规定的标准轴载作用下，路基或路面表面轮隙位置产生的垂直变形值（回弹弯沉），利用黄河载重汽车加载，人工读取百分表的读数，以此来测量路基或路面表面的回弹弯沉值。存在主要问题有：（1）以人工操作为主，工作强度大，效率低，可靠性差； （2）支点变形，影响检测结果，对支点变形的修正很难测准； （3）仅测得静态汽车荷载作用下路基路面单点（最大）回弹弯沉值； （4）没有反映路面结构在行车荷载作用下的动力特性和整个弯沉盆形状； （5）不适用于对路网进行大范围长期跟踪观测。 2.2高效检测方法 （１）数据采集传输通过高精度传感器完成，路面结构不同，弯沉盆半径亦不同。路基或柔性基层沥青路面传感器分布在距荷载中心2.5米范围内即可。目前，我国高等级公路大多采用半刚性基层沥青路面结构，弯沉影响半径已达3－5米，传感器分布范围应布置在距荷载中心3－4米范围内，以量测路面弯沉盆形状； （２）FWD主要的技术特点是测速快（每测点约40多秒），精度高（分辩率为1微米），并较好地模拟了实地行车荷载对路面的动力作用，能根据上一锤荷载和压强数值自动调整下一锤的荷载，向设定荷载逼近，从而能准确地测定较完整的弯沉盆信息。 （３）操作方式为计算机控制下的自动量测，所有测试数据均可显示在屏幕上或打印出来或存储在软盘上。可输出作用荷载、弯沉（盆）、路表温度及测点间距等。可打印弯沉平均值、标准差、变异系数及代表弯沉值等数据。 3落锤式弯沉仪与贝克曼梁的相关性 落锤式弯沉仪（FWD）所测的弯沉为动态总弯沉，与贝克曼梁所测的静态回弹弯沉不同。可通过对比试验得到两者之间的相关关系，并据此将落锤式弯沉仪测定的动态弯沉换算成贝克曼梁测定的静态回弹弯沉值。 3.1路段的选择选择结构类型完全相同的路段，针对不同地区选择某种路面结构代表性路段，进行两种测定方法的对比试验，选择对比路段的长度理论上应是越长越好，但在实际应用中，每种相同结构、每次对比试验不应少于50个

弯沉检测步骤.doc

现场弯沉检测 1、检测频率： 每一双车道评定路段（不超过1km）检查80~100个点，多车道公路必须按车道数与双车道之比，相应增加测点。（依据JTG F80/1-2004）2、贝克曼梁弯沉仪检测目的与适用范围： 本方法适用于测定各类路基路面的回弹弯沉以评定其整体承载能力，可供路面结构设计使用。 3、仪具与材料技术要求和适用范围： ①标准车：采用后轴10t标准轴载BZZ-100的汽车，参数应符合JTG E60-2008 T0951-2008 表T0951规定。 ②路面弯沉仪：由贝克曼梁、百分表及表架组成，按长度分为2种。 ⑴总长度3.6m，前后臂分别为2.4m和1.2m；适用于柔性基层和混合式结构沥青路面。 ⑵总长度5.4m，前后臂分别为3.6m和1.8m；适用于半刚性基层沥青路面和水泥混凝土路面。

4、主要准备工作： ①检查标准车车况及制动性能，轮胎胎压符合规定要求。 ②标准车后轴总质量及单侧轮荷载应符合轴重规定。 ③测定测定轮胎接地面积，用求积仪或数方格的方法测算轮胎接地面积，准确值0.1cm2。 ④检查弯沉仪百分表量测灵敏情况。 ⑤当在沥青路面上测定时，用路表温度计测定试验时气温及路表温度，记录沥青路面修建或改建材料、结构、厚度、施工及养护等情况。 5、测试步骤： ①在测试路段布置测点，测点应在路面行车车道的轮迹带上，并画上记号。 ②将试验车后轮轮隙对准测点后约3~5cm处的位置上。 ③将弯沉仪插入汽车后轮的缝隙处，与汽车方向一致，梁臂不得碰轮胎，弯沉仪测头置于测点上（轮隙中心前方3~5cm处），用手轻轻叩打弯沉仪，检查百分表应稳定回零。弯沉仪可以单侧测定，也可以双侧同时测定。 ④汽车缓缓前进，百分表随路面变形的增加而持续向前转动，当表针转动到最大值时，迅速记录初读数L1，汽车继续前进，表针反向回转，待汽车驶出弯沉影响半径（约3m以上）后，汽车停止。待表针回转稳定后，再次读取终读数L2。汽车前进的速度宜为5km/h左右。 ⑤弯沉仪支点变形修正：3.6m弯沉仪需要支点变形修正，5.4m弯沉仪不需支点变形要修正。

医学检验--常用血清酶和同工酶测定的临床意义

常用血清酶和同工酶测定的临床意义 1.连续监测法测定血清肌酸激酶（CK） 2.连续监测法测定乳酸脱氢酶（LD）总活性 3.连续监测法测定血清（天）门冬氨酸氨基转移酶（AST） 4.连续监测法测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT） 5.连续监测法测定血清碱性磷酸酶（ALP） 6.连续监测法测定血清中谷氨酰基转移酶（GGT） 7.淀粉酶（AMY）测定 8.比色法测定酸性磷酸酶（ACP） 连续监测法测定血清肌酸激酶（CK） CK是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体。 正常人体中有三种同工酶，即CK-BB（CK1）、CK-MB（CK2）和CK-MM（CK3）。 CK作用后生成的磷酸肌酸含高能磷酸键，是肌肉收缩时能量的直接来源。 CK需要镁离子激活。 1.原理 酶偶联反应测定CK活性浓度。 在340nm监测NAD（P）H的生成量，可计算出CK的活性浓度。 2.生理变异 年龄、性别和种族对CK含量都有一定影响。 CK含量和肌肉运动密切相关。 3.参考值 男性38～174U/L（37℃）； 女性26～140U/L（37℃）。 4.临床意义 升高： （1）心肌梗死。心肌梗死发生后2～4h此酶即开始升高，12～48h达最高峰值，可高达正常上限的10～12倍，在2～4天降至正常水平。 （2）病毒性心肌炎。 （3）肌营养不良症、皮肌炎、骨骼肌损伤。 （4）脑血管意外、脑膜炎、甲状腺功能低下等疾病及一些非疾病因素如剧烈运动、各种插管及手术、肌肉注射冬眠灵和抗生素。 降低：甲亢，长久卧床者总CK（主要为CK-MM）可下降。 5.CK同工酶检测原理及临床意义 CK是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体，正常人体中有三种同工酶：

浅谈路基路面落锤式弯沉仪测定弯沉检验方法

浅谈路基路面落锤式弯沉仪测定弯沉检验方法 摘要：本文介绍落锤式弯沉仪适用范围、组成及测定步骤，并将其测定的动态弯沉转换至回弹弯沉值的方法步骤，用于评定道路承载能。 关键词：弯沉检测、落锤式弯沉仪（FWD） 一、概述 近年来，弯沉检测设备及其相应的检测技术得到了迅速的发展。采用落锤式弯沉仪（FWD）测定路面的动态弯沉并用来反算路面的回弹模量, 作为目前世界上较先进的路面强度无损检测设备之一得到了广泛的应用，其代替传统的贝克曼梁法法已越来越得到人们的认可，并已列入《公路路基路面现场测试规程》（JTG E60-2008））指定弯沉检测设备之一。这对更深一步的开发使用FWD、充分发挥FWD的优点、准确地评价路面的结构状况具有重要的现实意义。 二、适用范围 本方法适用于测定在落锤式弯沉仪标准质量的重锤落下的一定高度发生的冲击荷载作用下，路基或路面表面所产生的瞬时变形，即测定在动态荷载作用下产生的动态弯沉及弯沉盆。并可由此反算路基路面各层材料的动态弹性模量，作为设计参数使用。所测结果以转换至回弹弯沉值后可用于评定道路承载能力，也可用于调查水泥混凝土路面接缝的传力效果，探查路面板下的空洞等。 三、仪器与材料 1、荷载发生装置：重锤的质量及落高根据使用目的与道路等级选择，荷载由传感器测定。重锤质量量为200kg±10kg,可采用50kN±2.5kN的冲击荷载。承载板为十字对称分开4部分且底部固定有橡胶片，直径为300mm。 2、弯沉检测装置：由一组高精度位移传感器组成，自承载板中心开始，沿道路纵向隔开布置7个在0～250cm范围内，0、30、60、90四点，其他根据需要决定。 3、运算及控制装置：能在冲击荷载作用的瞬间，记录冲击荷载及各个传感器所在位置测点的动态变形。 4、牵引装置：牵引FWD并安装运算及控制装置的车辆。 三、方法与步骤 1、准备工作

三种弯沉检测技术

利用贝克曼梁测定路面回弹弯沉值操作简便，应用广泛，我国路面设计及检测的标准方法和基本参数都是建立在这种试验方法基础之上的，但是，这种试验方法整个测试过程全是人工操作，测试结果受人为因素的影响较大，而且测速慢。自动弯沉仪是测定路面弯沉值的高效自动化设备，可对路面进行高密集点的强度测量，适用于路面施工质量控制、验收及路面养护管理。 1．主要设备 自动弯沉仪测定车：洛克鲁瓦型，由测试汽车、测量机构、数据采集处理系统三部分组成。测量机构安装在测试车底盘下面。 自动弯沉仪测定车的主要技术参数如下： 测试车轴距： 6.57m 测臂长度：1.75-2.40m 后轴荷载：100kn 测定轮对路面的压强：0.7mpa 最小测试步距：4-10m 测试精度：0.01mm 测试速度：1.5-4.0km/h 2．工作原理 自动弯沉仪的基本工作原理与贝克曼梁的原理是相同的，都是采用简单的杠杆原理。 自动弯沉仪测定车在检测路段以一定速度行驶，将安装在测试车前后轴之间底盘下面的弯沉测定梁放到车辆底盘的前端并支于地面保持不动，当后轴双轮隙通过测头时，弯沉通过位移传感器等装置被自动记录下来，这时，测定梁被拖动，以二倍的汽车速度拖到下一测点，周而复始地向前连续测定。通过计算机可输出路段弯沉检测统计计算结果。 3.使用技术要点 （1）自动弯沉仪做长距离移动时，应根据路况把一些对通过能力影响大的组件、部件拆下来，待移动到测量工地时，再进行安装调试。 （2）操作计算机，根据要求输入有关信息及命令。 （3）为了保证系统a／d转换板与位移传感器的测量精度，应进行自动弯沉仪的标定。（4）自动弯沉仪所采集数据以文本方式存储于计算机中，其记录格式分节点数据。弯沉值数据及弯沉盆数据三种。输入有关信息和参数后，可显示出左右双侧的弯沉峰值柱状图及峰值、距离和温度等；计算出平均值、标准差和代表弯沉值；显示弯沉盆图形并计算出曲率半径。 应当注意，自动弯沉仪测定的是总弯沉，因而与贝克曼梁测定的回弹弯沉有所不同。可通过自动弯沉仪总弯沉与贝克曼梁回弹弯沉对比试验，得到两者相关关系式，换算为回弹弯沉，用于路基、路面强度评定。 关于自动弯沉仪测定路面弯沉试验方法可详见《公路路基路面现场测试规程》（jtj 059-95）。 二、落锤式弯沉仪 利用贝克曼梁方法测出的回弹弯沉是静态弯沉。自动弯沉仪检测弯沉时，因为汽车行进速度很慢，所测得的弯沉也接近静态弯沉。为了模拟汽车快速行驶的实际情况，不少国家开发了动态弯沉的测试设备。落锤式弯沉仪（falling weight deflectometer，简称fwd）模拟行车作用的冲击荷载下的弯沉量测，计算机自动采集数据，速度快，精度高。近年来，采用落锤式弯沉仪（fwd）测定路面的动态弯沉，并用来反算路面的回弹模量。已成为世界各国道路界的热门课题。这种设备特别适用于高等级公路路面和机场的弯沉量测和承载能力评定。落锤式弯沉仪是目前国际上最先进的路面强度无损检测设备之一。 1．主要设备

血清α-淀粉酶(AMS)测定

血清α-淀粉酶（AMS）测定 1. 实验原理 AMS测定采用酶动态比色测定法。所用底物为4,6-亚乙基-α,D-麦芽七糖苷-对硝基苯酚（EPS－G7）。样品中α－淀粉酶分解底物EPS－G7，生成对硝基苯酚（PNP），在405nm处比色，吸光度的上升速率与样品中α-淀粉酶的活力成正比。 2 亚乙基－G5 ＋ 2 G2PNP 5EPS-G7＋5H2O α-淀粉酶 2 亚乙基－G4 ＋ 2 G3PNP 亚乙基－G3＋G4PNP α-葡萄糖苷酶 2G2PNP＋2G3PNP＋G4PNP＋14H2O 5PNP＋14G （反应式中PNP：对硝基苯酚；G：葡萄糖） 2. 标本采集与处理：

2.1 病人准备：无特殊要求。 2.2 标本类型：血清、肝素或EDTA处理的血浆、尿液。 2.3 血清分离血清或血浆应在收集后尽快分离出来。未酸化的尿液，随机或限时收取。 3. 标本存放：不要用嘴吸取标本或对标本吹气，以免唾液污染标本唾液中的淀粉酶使结果升高。血清淀粉酶在20～25℃稳定一个星期，避免微生物降解作用；在2～8℃时稳定一个月。尿液样品在2～8℃可稳定10天，在15～25℃可稳定2天。对于尿液，酸性pH值可使淀粉酶的稳定性减弱，因此，储存前pH值应调至大约7.0。 4. 标本运输：常温条件下运输 5. 标本拒收标准：细菌污染、溶血的不能做测定。 6. 实验材料： 6.1 AMS测定试剂盒（试剂1 6×64 ml ＋试剂2 6×16 ml） 6.1.1 试剂组成 试剂1： GOOD’S 缓冲液pH 7.1 100mmol/L

氯化钠50mmol/L 氯化镁10mmol/L α-葡萄糖苷酶≥23KU/L 试剂2： EPS－G73mmol/L 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：原试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为24个月。6.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染则试剂不能使用。 6.1.5注意事项：唾液和皮肤中含有α-淀粉酶，应避免用嘴吸取试剂，避免皮肤接触试剂。试剂中含叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜。 6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪 8. 操作步骤 8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化

路基弯沉值计算

弯沉值计算方法 青路面弯沉变化及测试 沥青路面弯沉变化及测试 沥青路面弯沉变化及测试 [文章]：沥青路面弯沉变化及测试 摘要：本文论述了沥青路面弯沉变化的三个阶段及分析测定弯沉的正确时间，着重介绍贝克曼梁弯沉仪测试弯沉的关键所在，并简要介绍了其它三种测试路面弯沉的方法。 关键词：沥青路面弯沉测试 路面弯沉不仅反映路面各结构层及土基的整体强度和刚度，而且与路面的使用状态存在一定的内在联系。因此工程竣工前，路面弯沉作为一项重要的检测指标，反映了路面的整体强度质量。在路面工程分项工程的质量评定中，高速公路和一级公路的弯沉分值分别为15和20分，如弯沉达不到，该分项不可能达到优良。由此可见，了解路面弯沉的变化规律、正确测试路面弯沉，对正确评价路面质量有着极其重要的作用。 1 路面弯沉的变化规律 路表弯沉的变化，是一个多方面因素综合作用的复杂过程。路基路面各层的材料性质、结构组成类型、压实状况、压实程度、温湿度环境、气候条件、交通组成、检测时的环境条件以及所使用的仪器设备及检测人员的检测水平等均对弯沉的大小产生很大影响。 沥青路面的表面弯沉变化过程分为三个阶段。路面竣工后的前1～2年为第一阶段。在这一阶段，由于车辆荷载的重复碾压，渐趋压实，加上半刚性基层材料随着龄期强度增长，从而导致路表弯沉将逐渐减小，大约在路面竣工后的第2年达到最小值。 路面竣工后的第2年到第4年为第二阶段。在这一阶段，表现为路表弯沉的不断增长。这是因为，一方面半刚性基层的强度增长已十分缓慢，并逐渐趋于相对稳定状态；另一方面，由于车辆荷载的重复作用以及水、温度状况的变化，加之路面混合料本身因拌和不均匀，而导致强度不均匀性等因素的影响，结构内部的微观缺陷将因局部范围的应力集中而扩展，并逐渐出现小范围的局部破坏，从而导致路面结构整体刚度的下降，使得路表弯沉急剧增大。如果设计不当，没有严格控制工程质量，或是工程质量的不均匀性，则有可能在这一阶段出现局部路面的早期破坏。 路面竣工3-4年后直至达到极限破坏状态为弯沉变化的第三阶段。在这一阶段，路面由于各种复杂因素产生的局部强度不足的问题已充分暴露，内部缺陷附近局部区域积蓄的高密度能量也已通过缺陷的扩展而转移，并自动实现了整个系统的能量平衡，从而使得结构内部损伤的进一步发展得到抑制。路面结构的整体刚度重新达到一种新的较低水平的相对稳定。因此，路表弯沉进入了一个相对稳定的缓慢变化阶段。即所谓的结构疲劳破坏的稳定发展阶段，并

一株纤维素酶产生菌的鉴定及酶学性质研究

一株纤维素酶产生菌的鉴定及酶学性质 研究 1 引言 1.1 研究纤维素酶的作用和意义 纤维素是植物纤维的主要成分，也是地球上最丰富的可再生有机资源。据报道，全世界每年通过光合作用产生的纤维素，其中有89%尚未被人类利用，我国每年仅农业生产中形成的农作物残渣(稻草、秸秆等)就约有7亿t，如何有效利用这些资源已经成为近年来研究的热点。纤维素占植物干重的35%-50%，是地球上分布最广的碳水化合物，同时又是自然界数量最大的可再生资源。纤维素废弃物的有效利用和生物转化已成为世界上许多国家关注的重要科研领域之一。要使纤维素酶真正能够用于工业生产，首先要降低纤维素酶的生产成本。因此，选育高酶活的纤维素分解菌株就成了解决问题的关键之一。 1.2牛胃消化纤维素 图1-1 图1-2 瘤胃微生物(rumen rnicrobes)是指栖息在瘤胃中的微生物。瘤胃是反刍动物降解纤维素的消化器官，纤维素的降解靠瘤胃微生物分泌的纤维素分

解酶，瘤胃内含有复杂的微生物区系，不同的微生物对纤维素和其它营养物质的消化各显功能，并有互补作用。纤维素的消化是纤维素酶水解的结果，纤维素酶是多组分复合酶，主要为内切型葡聚糖酶，外切型葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶。瘤胃微生物通过合成和分泌β-1，4-纤维素分解酶复合物，确保了对植物细胞壁的水解，调控瘤胃内环境促进微生物分泌消化酶，或者向饲料中添加酶制剂，都有利于饲料纤维素的利用。 瘤胃微生物能分泌纤维素酶，因此瘤胃有较强的发酵和分解纤维素的作用。在瘤胃微生物中，对纤维素降解起主要作用的还是瘤胃细菌。本文主要从牛胃液中分离出兼性氧的高产纤维素酶细菌，对分离所得菌株进行初步鉴定及并对其发酵产纤维素酶的酶学性质进行初步探讨，从而为最终得到产纤维素酶，性能优良的微生物菌株。 2 菌种的鉴定 2.1 材料与方法 2.1.1实验的菌种实验用的菌种由齐肇然同学提供的产纤维素酶枯草芽孢杆菌属的Q菌种。 2.1.2 培养基 固体培养基：蛋白胨5.0g，(NH4)2S041.0g，羧甲基纤维素钠 CMC—Na 10.0g，NaCl3.0g，KH2PO4 2.0g，MgSO4·7H2O 1.0g，FeSO4·7H20 10.0mg、MnSO4·H20 5.0mg，琼脂粉20.0g，蒸馏水1000mL，调pH值6.7。 发酵培养基：蛋白胨2.0g，酵母膏1.0g，(NH4)2SO4 2.0g，CMC-Na 20.0g，NaC1 3.0g，KH2PO42.0 g，MgSO4·7H20 1.0g，FeSO4·7H2O 10.0 mg MnSO4·H2O 5.0mg，调pH值6.7。 Q菌的硫化氢培养基：蛋白胨10.0g ，牛肉膏10.0g ，酵母膏5.0g ，柠檬酸氢二铵[（NH4）2HC6H5O7] 2.0g，葡萄糖(C6H12O6·H2O) 20.0g，乙酸钠（CH3COONa·3H2O）5.0g ，磷酸氢二钾（K2HPO4·3H2O）2.0g，硫酸镁（MgSO4·7H2O）0.58g ，硫酸锰（MnSO4·H2O）0.25g，琼脂 18.0g、蒸馏水1000mL，pH6.2～6.6。 Q菌的硝酸盐培养基：硝酸盐培养基，硝酸盐培养基成分为硝酸钾0.2g 蛋白5g，蒸馏水1000mL，pH 7.4。试剂：甲液（对氨基苯磺酸0.8g 5moL/L

壳聚糖酶生产菌筛选鉴定及其酶学性质

壳聚糖酶生产菌筛选、鉴定及其酶学性质 阎贺静，周念波，涂邵勇，梅双喜，王海波，李 佳 （武汉生物工程学院生物工程系，湖北武汉430415） 摘 要：以壳聚糖为唯一碳源，筛选获得壳聚糖酶活力较高的菌株，根据菌株菌落形态及ITS 序列分析，初步鉴定该菌株为烟 曲霉(Aspergillus fumigatus )。该壳聚糖酶的最适反应温度为55℃，最适pH 值为5.6，在45~60℃和pH 值4.0~8.0范围内稳定，Mn 2+对 酶有明显的促进作用，Ag +、Cu 2+、Zn 2+对酶有明显的抑制作用，其酶学特征表明该壳聚糖酶在壳聚糖降解方面具有应用潜力。 关键词：壳聚糖酶；筛选；鉴定；酶学特性中图分类号：Q814.1 文献标识码：A 文章编号：1004-874X （2012）24-0161-04 Isolation,identification and enzyme characteristics of a strain producing chitosanase YAN He-jing,ZHOU Nian-bo,TU Shao-yong,MEI Shuang-xi,WANG Hai-bo,LI Jia (Bioengineering Department,Wuhan Bioengineering Institute,Wuhan 430415,China ) Abstract:The aim of this paper was to screen chitosanase producing strain and to investigate the characteristics of the chitosanase produced by this strain.Chitsoan was used as the sole carbon source for the acclimatization and screening of strain.A strain with a higher chitosanase activity was isolated from soil.It was identified as Aspergillus fumigatus by its morphology in solid medium and by analyzing the sequence of ITS.The optimum temperature and pH were 55℃and 5.6,respectively.And the chitosanase is stable at 45~60℃and pH 4.0~8.0,respectively.The activity of the enzyme is strongly promoted by Mn 2+and inhibited by Ag +,Cu 2+and Zn 2+.The properties of chitosanase indicated that it has a great potential application in chitosan degradation. Key words:chitosanase;isolation;identification;enzyme characteristics 壳聚糖酶(chitosanase ，EC.3.2.1.132)又称壳聚糖-N-乙酰-氨基葡糖苷水解酶(chitosan N-acetylglucosaminohydr-olase)，是一种对线性壳聚糖具有水解专一性的酶。壳聚糖酶对真菌细胞壁有降解作用，广泛应用于真菌原生质体的提取。同时，壳聚糖酶还可用于真菌的分类研究以及真菌致病菌的诊断。此外，壳聚糖酶在酶解壳聚糖为壳寡糖方面作用理想，且在食品及医药领域具有巨大应用潜力，使壳聚糖酶成为目前国内外研究热点。 目前，壳聚糖酶生产水平较低、价格昂贵，限制了壳聚糖酶的应用。因此，提高壳聚糖酶的生产水平成为研究重点。国内外学者对此进行了大量研究，主要集中在高产菌株筛选、诱变以及基因工程菌构建等方面。目前已筛选出多种产壳聚糖酶的微生物，包括细菌如Bacillus circulans 、Bacillus cereus 及Bacillus subtilis [1-3]，链霉菌如 Streptomyces [4]，真菌如Aspergillus fumigatas 、Aspergillus oryzae 及Trichoderma reesei 等[5-7]。但壳聚糖酶产量较高者并不多见。近年来，随着分子生物学技术的发展，许多壳聚糖酶基因被克隆、表达。国内外已有许多成功克隆表达壳聚糖酶的例子，如Streptomyces N -174、Bcillus circulans MH -K1、Bacillus subtilis HD145、Aspergillus fumigatus 等[8-11]。但是，壳聚糖酶的克隆、表达主要集中在 酶的催化特性及分子结构研究，关于重组酶产量的报道较少。虽然国内近年来关于壳聚糖酶的克隆和表达的研究报告逐年增多，但重组体壳聚糖酶的产量尚未满足工业化生产的水平[12-15]。因此，获得高效、稳定的壳聚糖酶基因及其高产菌株仍是目前应用中的关键问题。从自然界中发现、筛选、诱变或构建壳聚糖酶高产菌株是提高目的酶生产水平的主要途径。我们从湖泊、河流附近采集样品进行壳聚糖酶生产菌的筛选，对筛选菌株进行平板培养考察其生长特性，并进行ITS 序列分类鉴定，通过粗酶酶学特性的研究考察该壳聚糖酶的应用潜力。 1 材料与方法 1.1 试验材料 供试土壤采集于武汉各地河流、湖畔附件的泥土或水 底淤泥。其他化学试剂均为分析纯。 初筛培养基：胶体壳聚糖1%（取1g 壳聚糖粉末用30mL 1%HAC 溶解)、(NH 4)2SO 40.5%、K 2HPO 40.2%、NaCl 0.5%、MgSO 4·7H 2O 0.1%、琼脂2%。复筛培养基：(NH 4)2SO 41%、酵母提取物0.05%、 K 2HPO 40.07%、KH 2PO 40.03%、NaCl 0.5%、MgSO 4·7H 2O 0.05%、葡萄糖0.1%、胶体壳聚糖1%。 发酵培养基同复筛培养基。 1.2试验方法 1.2.1菌株筛选（1）样品处理：称取10g 新鲜样品加入装有90mL 无菌水和玻璃珠的三角瓶中，室温震荡30min 使样品充分打散，静置获得样品悬液。 收稿日期：2012-11-17 基金项目：湖北省教育厅项目(B20114607);武汉市教育局项目 (2010085) 作者简介：阎贺静（1987-），女，博士，讲师，E-mail ：yanhejing@ji https://www.wendangku.net/doc/cf9989120.html, 广东农业科学2012年第24期 161

市政道路工程弯沉值的测定与应用

市政道路工程弯沉值的测定与应用 摘要国内外普遍采用回弹弯沉值来表示路基路面的承载能力，通常所说的回弹弯沉值是指标准后轴载双轮组轮隙中心处的最大回弹弯沉值。在路表测试的回弹弯沉值可以反映路基、路面的综合承载能力。本文讨论了影响弯沉值的主要因素。 关键词道路工程弯沉值应用 1、弯沉值的几个概念 1.1弯沉。弯沉是指在规定的标准轴载作用下，路基或路面表面轮隙位置产生的总垂直变形（总弯沉）或垂直回弹变形值（回弹弯沉），以0.01mm为单位。 1.2设计弯沉值。根据设计年限内一个车道上预测通过的累计当量轴次、公路等级。面层和基层类型而确定的路面弯沉设计值。 1.3竣工验收弯沉值。竣工验收弯沉值是检验路面是否达到设计要求的指标之一。当胳面厚度计算以设计弯沉值为控制指标时，则验收弯沉值应小于或等于设计弯沉值；当厚度计算以层底拉应力为控制指标时，应根据拉应力计算所得的结构厚度，重新计算路面弯沉值，该弯沉值即为竣工验收弯沉值。 1.4弯沉值的测试方法。弯沉值的测试方法较多，目前用的最多的是贝克曼梁法，在我国已有成熟的经验，但由于其测试速度等因素的限制，各国都对快速连续或动态测定进行了研究，现在用得比较普遍的有法国洛克鲁瓦式自动弯沉仪，丹麦等国家发明并几经改进形成的落锤式弯沉仪（FWD），美国的振动弯沉仪等。 2、道路路面弯沉的变化规律 路表弯沉的变化，是一个多方面因素综合作用的复杂过程。路基路面各层的材料性质、结构组成类型、压实状况、压实程度、温湿度环境、气候条件、交通组成、检测时的环境条件以及所使用的仪器设备及检测人员的检测水平等均对弯沉的大小产生很大影响。沥青路面的表面弯沉变化过程分为三个阶段。路面竣工后的前1～2年为第一阶段。在这一阶段，由于车辆荷载的重复碾压，渐趋压实，加上半刚性基层材料随着龄期强度增长，从而导致路表弯沉将逐渐减小，大约在路面竣工后的第2年达到最小值。 路面竣工后的第2年到第4年为第二阶段。在这一阶段，表现为路表弯沉的不断增长。这是因为，一方面半刚性基层的强度增长已十分缓慢，并逐渐趋于相对稳定状态；另一方面，由于车辆荷载的重复作用以及水、温度状况的变化，加之路面混合料本身因拌和不均匀，而导致强度不均匀性等因素的影响，结构内部的微观缺陷将因局部范围的应力集中而扩展，并逐渐出现小范围的局部破坏，从

肝功能-血清酶学检测的临床意义

监鏖出堡拯圭！塑！堡！旦箜！！鲞筮生蛸 Ｉ．肝功能——血清酶学检测的临床意义 宋国培 （吉林省肝病研究所，吉林长春１３００２１） 【中图分类号ｌＲ５７５【文献标识码】ｃ【文章编号】１００Ｉ一５２５６【２呻３）０４—０１９５—０３ 肝脏有广泛的生理功能，如代谢、解毒、排泄、免 疫、凝血和纤溶因子的生成等。现有的各种肝功能 检查只能反映其中某个方面，各项肝功能检查结果 亦并非平行，肝脏的代偿功能很强，病变轻时，肝功 能检查可能难常，因此肝功能的判定必须结合临床 及其它影象学检查全面考虑、综合判断，才能较准确 地了解肝脏病变性质及程度。 Ｊ缸清酶学检查是反映肝细胞受损，细胞膜的通 透性增加，甚或肝细胞坏死，细胞内的酶释放人血液 循环，使血液中酶的水平升高，因此检测血清酶水平 可评估肝细胞受损的状况。目前为提高诊断率，从 三个方面进行研究：（１）寻找更特异性、更敏感的酶； （２）观察两个酶的比值；（３）检测同工酶。 １氨基转移酶（转氨酶） 是目前临床应用最广最有价值的实验室检测肝 功能之一。其中主要是丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ、曾 称ＧＩ，ｒ），它存在于肝、肾、心肌、骨骼肌、胰、脾、肺、 红细胞和血清中，以肝脏含量最高，主要存在于肝细 胞浆中，肝内含量约为血中的１００倍，如果释放的酶 全部保持活力，只要１％的肝细胞坏死，可使血清酶 活力增加ｌ倍。肝细胞内浓度比血清高１０００一５０００ 倍，在肝细胞膜通透性增加时，即使无坏死，肝细胞 内转氨酶亦可由如此明显的浓度梯度差而泄漏人ｍ 中。血清ＡＬＴ半寿期约４７±１０小时。 门冬氨酸氨基转移酶（Ａ汀，曾称ＧｏＴ）也广泛 存在于上述诸器官中，但以心肌含量最高，故血清中 ＡＳＴ活性升高应排除心肌病变后才考虑肝脏病变。 ＡｓＴ在肝细胞浆内只占２０％，其余８０％存在于线粒 体内，在肝细胞浆内ＡＳＴ／ＡＬＴ之比为０．６：ｌ，而在整 个肝细胞内两者之比为３：１，因此ＡＩＪ是反映肝病 变最敏感的指标之一，而血中Ａ明显著增高时，在 排除心肌病变后，应考虑肝线粒体大量破坏、肝细胞 坏死。｜血Ｌ清ＡｓＴ半寿期约１７±５小时。 收稿日期：２００２—１ｌ１８修订日期：２００３一０３一１５ 作者简介：宋国培（１９３４一），男，上海人，主任医师，教授，本刊主编 研究方向肝硬化防治。１９， 血清转氨酶升高反映肝细胞受损，其增高程度 大致与病变严重程度相平行。转氨酶下降可能是疾病恢复的标志，但也可能是肝细胞坏死殆尽的结果，此时转氨酶下降而胆红素升高，即所谓“胆酶分离”，是肝细胞大量坏死的表现，常为临终前表现，病死牢高达８８．８％。但应注意药物降酶比降胆红素快的现象。 血清ＡｓＴ／ＡＬＴ比值还有助于鉴别诊断，急性肝炎时多小于ｌ；慢性肝炎多大于ｌ；酒精性肝病时常大于２，若能排除原发性肝癌则有助于酒精性肝病的诊断。严重肝细胞坏死时，线粒体中的ＡｓＴ释放入血，以致ＡｓＴ／ＡＬＴ比值升高。比值为ｏ．３Ｉ～Ｏ．６３者预后较佳，１．２０～２．２６者往往进展为暴发性肝衰竭而死亡。比值愈大肝损害愈严重。 Ａ卵同工酶来自线粒体者为ＡｓＴｈ，来自胞浆中可溶性者为Ａｓｒｓ，肝细胞坏死时Ａｓｒｍ显著升高。Ａ孵ｈ长期升高表示病变转为慢性。 胆道疾病时，如胆石症引起梗阻，虽肝细胞无病变，仍可见ＡＬＴ轻或中度增高，一般不超过３倍，且梗阻解除即于２４～４８小时大幅度下降，普合并Ｈｆ：细胞损害则可更高，因正常肝细胞内转氨酶①通过肝细胞膜到肝窦状隙进入血液；②通过溶酶体进入毛 细胆管至小肠，故胆道梗阻时，转氨酶升高。 原发性肝癌时Ａ洲ＡＬＴ＞１（约半数＞３），慢性肝病尤其ＡＬＴ无明显升高，ＡｓＴＩｍ处于高值者，麻疑及肝癌，凶某种癌性因子特异性损伤肝线粒体；吐土可能出现某种异常埘ｒ同功酶所致。 ２谷胱甘肽ｓ转移酶（ＧｓＴ） 是一组具有解毒和结合功能的同工酶，在肝细胞中主要分布于胞浆。人肝至少含８型以上Ｇｓｒｒ，曾被称为Ｙ蛋白（连接蛋白，配体素，ｌｉ帮画ｎ）参与肝细胞对胆红素、胆汁酸、靛青绿（ＩｃＧ）等的摄取、转运。苯巴比妥等可诱导肝脏增加（研，故临床试用于肝内胆汁淤积治疗。ＧｓＴ分子量较转氨酶小，更易透过肝细胞膜，肝病时血清峰值出现比转氨酶早且高，因此测定（研’是反映急性肝细胞损伤的极敏感指标。又由于其半衰期短（１．８小时），所以峰值