接种器械灭菌器

接种器械灭菌器

（植物组培，微生物，细胞培养接种）

HYY-II型

【华越洋--接种器械灭菌器】属于小型器具杀菌器，采用了最新的德国进口发热元件和数显温控技术，整机用不锈钢制成，具有重量轻、体积小、杀菌快、保温好、控温精确、节能、无污染等特点.

材质：整机304不锈钢，防腐防锈，美观耐用。

平均功耗：100w;输入电压：220v;外型尺寸：

190*100*170mm;净重：1.9kg

随机配件：石英玻璃珠2份，器具搁置架1个，保险丝2个.

细菌接种技术

（一）平板划线接种法（又称分离培养法）平板划线接种法为最常用的分离培养细菌的方法，通过平板划线后，可使细菌分散生长，形成单个菌落，有利于从含有多种细菌的标本中分离出目的菌。平板分离划线的方法较多，其中以分区划线法与曲线划线法较为常用。其目的都要使细菌呈现单个菌落生长，便于同杂菌菌落鉴别。 现只介绍分区划线法。 1、右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，挑取大肠杆菌（或葡萄球菌）培养物少许。 2、左手斜持琼脂平板，皿盖留在桌上，于火焰近处将菌涂于琼脂平板上端，来回划线，涂成薄膜（约占平板总表面积的1/10），划线时接种环与平板表面成30~40o角，轻轻接触，以腕力在平板表面行轻快地滑移动作，接种环不应划破培养基表面。 3、烧灼接种环，杀灭环上残留细菌，待冷（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从薄膜处取菌作连续平行划线，约占平板表面1/5左右，再次烧灼接种环，等三次平行划线……以同样方法作第四次，第五次划线，将平板表面划完。 4、划线完毕，盖上平皿盖，底面向上，用标签或腊笔注明菌名检验号码，接种者信息等，置37℃孵育培养24小时后观察结果。 （二）纯培养细菌接种法（斜面培养基接种法：用于培养，保存菌种及其它实验用） 1、取一支斜面培养基及一支纯菌种管，并排倾斜放在左手四指中拇指压住并以手掌支住两试管底部。右手将白金环于火焰上灭菌、冷却。并拔起两试管的棉塞。（勿放置桌上，如棉塞太紧时应预先松动）。 2、试管口部于火焰上往返通过2~3次灭菌，将灭菌白金环伸入有菌试管中，取少量细菌（一般应从斜面底部沾取），然后小心移至准备接种的试管中。 3、接种方法是自管底向上连续平划线，若以保存菌为目的时可自管底上划一粗直线即可。 4、取出接种环，将试管上部再经火焰灭菌，塞好棉塞，接种环灭菌后放回原处。 5、若自平皿培养物中取菌时，只应沾取一个单个菌落。 6、接种菌应作好标记，标明菌种名称，日期等，置37℃温箱中培养，次日观察结果。液体培养基接种法：用于增菌及鉴定细菌生长特点，如表面生长，沉淀生长，均匀混浊生长等。操作技术基本与上法相同，只是接种时应将沾菌之接种环沿接近液体表面之管内壁轻轻摩擦（勿用力振荡）使细菌混入培养基内，置37℃温箱中培养，次日观察结果。 （三）半固体培养基穿刺培养法用于保存菌种及间接观察细菌之动力（无动力之细菌仅沿穿刺线生长，清晰可见；有动力的细菌使培养基呈现混浊样，穿刺线甚至难以看出）。用无菌操作技术，灭菌穿刺针沾取细菌后，垂直刺入半固体培养基中央直达近管底处，再沿原穿刺线抽出即可，置37℃温箱培养，次日观察结果。

环氧乙烷灭菌器标准操作操作规程

1 目的 2 适用范围 HDX-3型环氧乙烷灭菌柜。 3 职责 操作人员按本规程使用和卫生清洁。 维修人员按本规程维修和保养。 生产管理部经理负责监督本规程的执行。 4 内容 操作前准备 4.1.1 检查设备标识牌为“正常”。 4.1.2 检查饮用水进水水压，水箱水位是否正常。蒸汽缸水位在1/3-1/2位置。 4.1.3 检查电控柜所有开关是否置于零位。 4.1.4 检查真空阀，放空阀，加药阀等阀门是否处于关闭状态。 4.1.5 检查压缩空气是否正常，观察压力表压力是否正常。 4.1.6 检查门密封圈是否完好。 4.1.7 检查各压力表、气动阀是否正常。 开机 4.2.1 打开压缩空气阀，观察压缩空气压力表压力是否正常。打开电源开关，绿色指示灯亮。 4.2.2 打开计算机，进入日常中的流程画面。 运行 4.3.1 确认出料门已关闭，并锁紧。 4.3.2 确认进料门旁边无障碍物。 4.3.3 将“手动/自动”开关置“手动”位置,然后将进料门开关置“开”的位置，系统自动完成门锁锁松，门封吸入等过程，门自动打开，开门同时开门指示灯亮，直至灯灭，才确认门已开到底。 4.3.4 装箱：装入被灭菌物品。灭菌物品之间、灭菌物品与柜壁之间应保留一定间隙。

4.3.5 关进料门 4.3. 5.1 确定灭菌物品已装箱完毕，门周围已符合安全关门的条件，并对门密封圈上机油后可关门。 4.3. 5.2 进料门开关置“关”的位置，黄色指示灯亮，门自动关闭，黄色指示灯灭，表明门已关到底，门锁自动锁紧，门封自动充气。 4.3.6 出料门密封圈上油 4.3.6.1 确认进料门是否已关闭，并锁紧。 4.3.6.2 将出料门开关置“开”的位置，门自动打开。 4.3.6.3 将机油均匀涂在密封圈上。 4.3.6.4 将出料门开关置“关”的位置，门自动关闭后，确认是否关紧。 4.3.7 进入自动控制程序 4.3.7.1 将手动工作方式切换为自动工作方式。 4.3.7.2 按“启动/灭菌”按钮，程序将按着设定的参数依次自动完成加热--保温--预真空--保压四个过程。 4.3.8 加湿 4.3.8.1 在保温时,打开蒸汽发生器开关(注意:当压力表压力≥时，须关掉)。 4.3.8.2 当保压结束后，报警指示灯闪烁，警笛鸣响，即提醒到了加湿过程。 4.3.8.3 按下“报警复位”按钮，警灯与警笛即停止。 4.3.8.4 当蒸汽压力表压力≥时，打开蒸汽源阀门，然后排掉蒸汽管道内的残留水。 4.3.8.5 打开蒸汽阀（尽量小开，缓慢加湿）。 4.3.8.6 当湿度显示数值到80%RH时，关闭蒸汽阀和蒸汽源。 4.3.9 加药 4.3.9.1 按“启动/灭菌”按钮,程序进入加药过程。 4.3.9.2 当气化器温度升至设定的气化温度（45℃）时，缓慢打开加药阀与钢瓶阀进行加药（尽量小开，缓慢加药）。 4.3.9.3 当加药量到4KG时，关闭钢瓶阀和加药阀。 4.3.4 进入灭菌与清洗自动程序 按“启动/灭菌”按钮，程序将按着设定的参数依次自动完成灭菌和清洗过程。 4.3.5 开出料门 4.3. 5.1 清洗完后，报警指示灯闪烁，报警笛鸣响，按下“报警复位”按钮，并确认灭菌室内压力保持在大气压力附近5KPa以内时，可以开出料门。 4.3. 5.2 将出料门开关置“开”的位置，门锁自动松锁，门封吸入，门自动打开，开门指示灯亮，当指示灯熄灭时，表明门已开到底。 4.3.6 出箱：移出灭菌物品。

最新环氧乙烷灭菌器的验证

第一章总则 1 2 1.1 目的 3 根据GB18279--2000标准(《医疗器械的灭菌――环氧乙烷灭菌的验证及日常控 4 制》)的要求，对环氧乙烷灭菌器进行有效性确认(验证)，以保证满足一次性医疗器械无菌5 的要求。 6 1.2 范围 本验证方案仅适用于杭州电达消毒设备厂生产(及改造)的HDX系列环氧乙烷灭菌器的验 7 8 证。 9 注意：本验证资料仅作为本厂对使用单位（用户）技术服务的延伸，不宜作为任何方式的认证（如CE认证、ISO9000认证等）的依据。 10 11 1.3 验证 12 1.3.1 验证方案：验证方案由供应方（杭州电达消毒设备厂，下同）制定，并经使用单位13 （用户）管理者代表确认后，方可实施。 14 1.3.2 验证实施：使用（用户）单位应由相关职能部门的人员组成验证小组，并负责按照15 验证方案组织实施环氧乙烷灭菌器的验证；供应方可派技术人员提供协助。 16 1.3.3 验证结论：应由双方人员共同对验证的过程和所取得的数据进行确认，形成验证结17 论并会签。 18 1.3.4 验证资料：所有有关验证的资料、所取得的数据、记录和验证报告由使用（用户）19 单位妥善保管、存档。 第二章验证方案 20 21 2.1 物理性能确认

2.1.1 真空速率试验 22 23 要求：预真空至-15Kpa的时间≤6min 24 预真空至-50Kpa的时间≤30min 条件：温度──恒定 25 26 2.1.2 真空泄漏试验 27 要求：预真空── -50Kpa 28 泄漏速率──≤0.1Kpa/min 29 条件：温度──恒定 30 时间── 60min 2.1.3 正压泄漏试验 31 32 要求：正压──＋50Kpa 33 泄漏速率──≤0.1Kpa/min 34 条件：温度──恒定 35 时间── 60min 36 2.1.4 加湿试验 37 要求：湿度明显变化并在30～85％RH范围内38 条件：温度──恒定

细胞工程复习题

第二章 2、简要说明MS培养基的基本组成。 1）大量元素母液配制 MS培养基的大量元素主要包括硝酸铵（NH4NO3）、硝酸钾(KNO3)、磷酸二氢钾（KH2PO4）、硫酸镁（MgSO4?7H2O）和氯化钾（CaCl2,CaCl2?2H2O）五种化合物。 2）微量元素母液配制 MS培养基的微量元素由7种化合物（除Fe外）组成MnSO4?4H2O、ZnSO4?7H2O、H3BO3、KI、NaMoO4?2H2O、CuSO4?5H2O、CoCl2?6H2O。 3）铁盐母液配制 MS培养基中的铁盐是硫酸亚铁（FeSO4?4H2O）和乙二胺四乙酸二钠（Na2?EDTA）的螯合物，必须单独配成母液。 4）有机母液的配制 MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、烟酸硫胺素和盐酸吡哆素。 5）激素母液配制 MS培养基中的激素有生长素类、细胞分裂素 6、初代培养时，接种的一般程序是什么？ 1）在接种前打开超净工作台紫外灯照射20~30min，关闭紫外灯后，打开超净工作台的风机10min以上，开始无菌操作。 2）接种人员先洗净，在缓冲室内换好经过消毒的工作服，带上口罩，并换上拖鞋等。 3）上超净工作台后，用酒精棉球认真擦拭双手，特别是指甲处，然后擦拭工作台面及四周，装有培养基的培养器皿和盛外植体的烧杯也要用酒精擦拭消毒后，再放进工作台。 4）先用酒精棉球擦拭接种工具，然后在酒精灯火焰上进行灼烧灭菌或放在接种器械灭菌器中灭菌，灭菌后放在器械架上使其自然冷却。 5）把植物材料放在75%乙醇中浸泡约30s，再用0.1%的升汞中浸泡5~10min，浸泡时刻进行搅动，使植物材料与消毒剂有良好的接触，然后用无菌水冲洗3~5次。 6）接种时培养瓶瓶口要在酒精灯火焰附近，并在接种前后灼烧瓶口。 7）接种结束后，清理和关闭超净工作台。 第三章 1.基本概念 细胞的全能性：是指细胞具有发育成完整个体的遗传潜能。 细胞分化：是指发育起始状态的合子沿个体发育方向不断分化出形态结构、生理功能不同的细胞、组织、器官而最终形成完整植株的过程。即由于细胞的分工而导致其结构和功能改变或发育方式改变的过程。 去分化：已有特定结构和功能的植物组织，在一定的条件下，其细胞被诱导改变原有的发育途径，逐步失去原有的分化状态，转变为具有分生能力的胚性细胞的过程叫脱分化或去分化。体细胞胚： (somatic embry)又称胚状体，是指离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物。 人工种子：（artificial seeds）又称合成种子（synthetic seeds）或体细胞种子（somatic seeds）。就是将离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒。 7、离体培养条件下，茎、芽和根的再生方式有几种？ 答:在组织培养中，通过茎芽和根而再生植株的方式大致有3种：

环氧乙烷灭菌器安装及注意事项(最新版)

环氧乙烷灭菌器安装及注意事 项(最新版) Security technology is an industry that uses security technology to provide security services to society. Systematic design, service and management. ( 安全管理 ) 单位：______________________ 姓名：______________________ 日期：______________________ 编号：AQ-SN-0898

环氧乙烷灭菌器安装及注意事项(最新版) 一、灭菌器的安装 *灭菌器应放在专用的房间。房间内应接入电源(蒸气源)、水源及下水和通风设施，并有专用接地装置。 *灭菌器的安装位置。应保证周围有一定的空间位置，以便安装和维修；灭菌器门前应留有足够的空间，以保证灭菌物品进出方便。 *灭菌器放置应尽量水平。 *电源应接入三相四线制交流380V-50HZ电源，并配有专用的配电盘。灭菌器箱体和电气控制柜之间应开好放线地槽。 *水源蒸气源接有压力表及相应的手动阀门，以保证使用安全。下水管道的口径应不小于100毫米。 *气体钢瓶应接有压力表，不得而知接近热源，不得而知爆晒，存放温度应小于50度。

二、注意事项 1、环氧乙烷是易燃易爆物品，保证安全十分重要。所以，灭菌车间应配备防火措施。另外，禁止吸烟，禁止使用其他明火，并保持车间内通风。 2、环氧乙烷有一定的毒性，人体一次吸入过量会有不适感觉，甚至出现头痛、呕吐等中毒现象。如出现上述现象，应迅速离开现场，到空旷阴凉处呼吸新鲜空气，直到症状消除为止。如人体皮肤、眼睛等接触到环氧乙烷 3、应定期更换水循环系统内的用水。定期更换废气处理系统内的废水。 三、环氧乙烷灭菌安全规程 1、总则 环氧乙烷是一种易燃易爆、有中等毒性的危险化学品，空气中浓度超3%，遇到明火可能引起爆炸。环氧乙烷灭菌器又是机电一体，具有较高自动化程度、承受一定压力的设备。因此，环氧乙烷灭菌器的使用和操作，必须严格遵守本安全规程。

环氧乙烷灭菌器的验证

第一章总则 1.1 目的 根据GB18279--2000标准(《医疗器械的灭菌――环氧乙烷灭菌的验证及日常控制》)的要求，对环氧乙烷灭菌器进行有效性确认(验证)，以保证满足一次性医疗器械无菌的要求。 1.2 范围 本验证方案仅适用于杭州电达消毒设备厂生产(及改造)的HDX系列环氧乙烷灭菌器的验证。 注意：本验证资料仅作为本厂对使用单位（用户）技术服务的延伸，不宜作为任何方式的认证（如CE认证、ISO9000认证等）的依据。 1.3 验证 1.3.1 验证方案：验证方案由供应方（杭州电达消毒设备厂，下同）制定，并经使用单位（用户）管理者代表确认后，方可实施。 1.3.2 验证实施：使用（用户）单位应由相关职能部门的人员组成验证小组，并负责按照验证方案组织实施环氧乙烷灭菌器的验证；供应方可派技术人员提供协助。 1.3.3 验证结论：应由双方人员共同对验证的过程和所取得的数据进行确认，形成验证结论并会签。 1.3.4 验证资料：所有有关验证的资料、所取得的数据、记录和验证报告由使用（用户）单位妥善保管、存档。 第二章验证方案 2.1 物理性能确认 2.1.1 真空速率试验 要求：预真空至-15Kpa的时间≤6min 预真空至-50Kpa的时间≤30min 条件：温度──恒定 2.1.2 真空泄漏试验 要求：预真空── -50Kpa 泄漏速率──≤0.1Kpa/min 条件：温度──恒定 时间── 60min 2.1.3 正压泄漏试验 要求：正压──＋50Kpa

泄漏速率──≤0.1Kpa/min 条件：温度──恒定 时间── 60min 2.1.4 加湿试验 要求：湿度明显变化并在30～85％RH范围内 条件：温度──恒定 预真空── -25～-50Kpa 2.1.5 灭菌室空载箱壁温度均匀性试验 要求：控制温度──℃，最大温差≤±3℃ 条件：压力──常压 24点温度传感器分布见附图 2.1.6 灭菌室空载空间温度均匀性试验 要求：控制温度──℃，最大温差≤±3℃，并确定冷点位置 条件：压力──常压 25点温度传感器分布见附图 2.1.7 满载温度均匀性试验 要求：控制温度──℃，最大温差≤10℃ 条件：压力──常压 负载──箱，负载分布见附图 25点温度传感器分布见附图 2.2 微生物性能确认（半周期法） 要求：⑴．通过半周期法，在保持其它灭菌工艺不变的条件下，将灭菌作用时间进行变化，并将不同灭菌作用时间的灭菌指示物(枯草杆菌的黑色芽胞变种――Atcc9372)在无菌环境下进行培养，检测试验微生物生长，找出细菌全部杀灭的时间临界值（最短有效灭菌时间）。 ⑵．应至少重复进行1～2次该时间临界值的有效性确认。 条件：⑴．灭菌工艺 灭菌温度──℃ 保温时间──分钟 预真空── Kpa 保压时间──分钟 湿度── 30～85％RH 加药量── mg/l（ Kg/ m3） 灭菌时间──分钟 换气真空度── Kpa 换气次数──至少３次

细菌的分布与消毒灭菌

第2章细菌的分布与消毒灭菌 学习要点 一、细菌的分布 1. 土壤 主要存在一些自营菌和腐物寄生菌，在自然界物质循环中起重要作用。 土壤中也有一些随着人及动物的分泌物、排泄物及尸体、残骸进入土壤的致病菌，但只有能形成芽胞的致病菌，如破伤风梭菌、肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、炭疽芽胞杆菌等可长时间存活。 处理被泥土污染的创伤时要特别注意防止破伤风梭菌、产气荚膜梭菌等的感染。 2．水 如被人和动物粪便污染，就可能带上伤寒沙门菌、痢疾志贺菌、霍乱弧菌、致病性大肠埃希菌、钩端螺旋体等。通过水源易引起各种感染，特别是消化道传染病的暴发流行。 3．空气 空气中的细菌是吸附在尘埃微粒上，常见的致病菌有结核分支杆菌、白喉棒状杆菌、百日咳鲍特菌、金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、脑膜炎奈瑟菌、军团菌等，可引起呼吸道传染病或伤口感染。 4．有生命物体的表面和与外界相通的腔道中 这些部位能为细菌生长繁殖提供条件，存在着复杂的细菌群及其它微生物，包括致病菌和非致病菌。 5．无生命物体的表面和与外界相通的内表面 其细菌均来源于土壤、水、空气以及人和动物的污染。 二、消毒与灭菌 是指用物理或化学方法来抑制或杀死外环境中及机体体表的微生物，以防止微生物污染或病原微生物传播的方法。 以下术语常用来表示物理或化学方法对微生物的杀灭程度。 消毒指杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀灭芽胞或某些非

病原微生物。用以消毒的药品称为消毒剂（disinfectant）。 灭菌指杀灭物体上所有微生物的方法。包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。经过灭菌的物品称“无菌”物品。需进入人体内部的医用器材要求绝对无菌。 防腐防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。细菌一般不死亡。 无菌不存在活菌的意思。防止细菌进入人体或其它物品的操作技术，称为无菌操作。 清洁是指通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。是物品消毒、灭菌前必须经过的处理过程，有利于提高消毒、灭菌的效果。1．物理消毒灭菌法 热力灭菌法 高温对细菌具有明显的致死作用。但细菌芽胞对温度的抵抗力较繁殖体强。 (1) 干热消毒灭菌法 ①焚烧：直接点燃或在焚烧炉内焚烧。适用于废弃物品或动物尸体等。 ②烧灼：直接用火焰灭菌，适用于微生物学实验室的接种环、试管口等的灭菌。 ③干烤：利用干烤箱灭菌，一般加热至160℃～170℃经2 h。适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品。 (2) 湿热消毒灭菌法 ①巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，以保持食物中不耐热成分不被破坏的消毒方法。今广泛采用加热至71.7℃持续15～30s。 ②煮沸法：一般细菌的繁殖体5min能被杀死。此法常用于消毒食具、刀剪、注射器等。 ③高压蒸汽灭菌法：是一种最有效的灭菌方法。当蒸汽压力达到103.4 kPa(1.05kg/cm2)，温度为121.3℃，如维持15～20min，可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。此法常用于培养基、生理盐水、手术器械和敷料等耐高温、耐湿热物品的灭菌，是医院使用最广的灭菌方法。

YN-A型医用快速灭菌器灭菌效果观察.

YN-A型医用快速灭菌器灭菌效果观察 李平,郭志红,杨燕,朱涛,杜全立医院手术室、口腔科等在手术及诊疗过程中常需某些器械的应急灭菌，压力蒸汽、干烤及消毒液浸泡灭菌作用时间较长，难以满足要求。为适应特殊情况下医疗器械快速灭菌的需要，我们协助盈诺医用设备有限公司，研制出YN-A型医用快速灭菌器（简称灭菌器），在实验室对其灭菌效果进行了试验观察。现将结果报告如 下。 1 材料和方法 1.1 材料该灭菌器体积为 520mm×560mm×330mm，内腔为300mm×500mm×240mm，腔体上、下层分别装有6支和8支强光灯管（电压220V、功率2.25kW），在上、下贴近光源处安装涂有远红外涂料的金属网，距下层红外金属网30mm处有一不锈钢载物架，被消毒物品放置其上，箱内温度由微电脑进行控制。 1.2 方法根据国家卫生部1999年颁布的5消毒技术规范6第三版第一分册实验技术规范，灭菌与消毒器械杀灭微生物效果鉴定实验技术进行灭菌实验。试验菌为枯草杆菌黑色变种（ATCC9372）芽胞，由军事医学科学院微生物流行病研究所提供。用 0.03mol?L-1磷酸盐缓冲液稀释成菌量为1×10 8~5×10 8cfu?mL-1的菌悬液，菌悬液中含1%蛋白胨，用1mL微量注射器6号针头吸取适量菌悬液滴染下列物品（每载体滴染0.01~0.02mL）：经脱脂灭菌的不锈钢圆片（直径 15mm）；将止血钳、镊子、卵圆钳等切割成段，经脱脂灭菌后的头部锯齿处；经脱脂灭菌后的止血钳关节闭合处；经脱脂灭菌后的骨科钳的关节闭合处。滴染菌液后用灭菌L棒涂匀，置37℃温箱30min。 1.3 灭菌处理开机预热15s，使腔内初始温度为60~70℃，将10把止血钳平铺于载物架上，使灭菌器处于满载状态，在载物架不同位置布放染菌载体，设置灭菌温度和保温时间，启动工作开关并记录升温时间，灭菌试验结束即刻取出染菌载体于无菌室内进行接种。 1.4 接种、培养不锈钢片、器械头用无菌镊夹取后直接接种于营养肉汤管中。对止血钳！骨科钳用无菌棉拭子沾取营养肉汤于染菌处反复涂擦采样，再将棉拭子折断于肉汤管中。37℃温箱培养逐日观察至第7天记录结果。以阴性对照（未接种载体）肉汤管不长菌，阳性对照（载体置室温下）肉汤管长菌，试验载体的肉汤管不长菌为灭菌合格。同时对阳性对照载体进行活菌计数。 2 结果 2.1 对染菌载体不锈钢片的灭菌效果每一平皿内置2片染菌的不锈钢片，盖上皿盖，放于载物架不同位置，在灭菌器满载状态下，温度设置为210℃、保温2min。试验重复5次，对不锈钢片表面的枯草杆菌黑色变种芽胞达灭菌要求（表1）。 表1不同保温时间对不锈钢片染菌载体的灭菌效果（P/T ） 设置210℃ 保温时间（min） 灭菌器内部位 外左角

灭菌

一、灭菌（Sterilization） 是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢，使之达到无菌保障水平。经过灭菌处理后，未被污染的物品，称无菌物品。经过灭菌处理后，未被污染的区域，称为无菌区域。 杀灭或者消除传播媒介上的一切微生物，包括致病微生物和非致病微生物，也包括细菌芽胞和真菌孢子。同时，灭菌可以看成是一个过程。 灭菌 sterilization 用来使产品无存活微生物的过程 二、微生物 微生抵抗力取物对灭菌剂的决于原始存在的群体密度、菌种或环境赋予菌种的抵抗力。灭菌是获得纯培养的必要条件，也是食品工业和医药领域中必需的技术。将培养基、发酵设备或其他目标物中所有微生物的营养细胞及其芽胞（或孢子）杀灭或去除，从而达到无菌的过程。 三、灭菌原则 1.基本要求 重复使用的诊疗器械、器具和物品，使用后应先清洁，再进行消毒或灭菌。 被朊病毒、气性坏疽及突发不明原因的传染病病原体污染的诊疗器械、器具和物品，应执行WS/T 367第11章的规定。 耐热、耐湿的手术器械，应首选压力蒸汽灭菌，不应采取化学消毒剂浸泡灭菌。环境与物体表面，一般情况下先清洁，再消毒；当受到患者血液、体液等污染时，先去除污染物，再清洁与消毒。 医疗机构消毒工作中使用的消毒产品应经卫生行政部门批准或符合相应标准技术规范，并应遵循批准使用的范围、方法和注意事项。 2.方法的选择 根据物品污染后导致感染的风险高低选择相应的消毒或灭菌方法： 1）高危险度物品，应采用灭菌的方法处理； 2）中危险度物品，应采用达到中水平消毒以上效果的消毒方法； 3）低危险度物品，宜采用低水平消毒方法，或做清洁处理；遇有病原微生物污染时，针对所污染的病原微生物种类选择有效的消毒方法 根据物品上污染微生物的种类、数量选择消毒或灭菌的方法： 1) 对收到致病菌芽孢、真菌孢子、分枝杆菌和经学传播病原体污染的物品，应采用高水平消毒或灭菌； 2）对受到真菌、亲水病毒、螺旋体、支原体、衣原体等病原微生物污染的物品，应采取中水平以上的消毒方法； 3）对受到一般细菌和亲脂病毒等污染的物品，应采用达到中水平或低水平的消毒方法； 4）杀灭被有机物保护的微生物时，应加大消毒剂的使用剂量和/或延长消毒时间；5）消毒物品上微生物污染特别严重时，应加大消毒剂的使用剂量和/或延长消毒时间；[2]

环氧乙烷灭菌安全规程

环氧乙烷灭菌安全规程 灭菌器的安装： 1、场地：环氧乙烷灭菌器应放置在独立的车间，场地远离人群，现场30～50米范围内不得有明火作业，以及其它产生明活的情况； 2、隔离：环氧乙烷灭菌器安放的车间，必须有隔离措施，即环氧乙烷灭菌柜体、电气控制柜、机架、环氧乙烷钢瓶等，应分别安装在互相独立的房间，或按照本厂提供的安装图进行隔离； 3、通风：环氧乙烷灭菌器安放的车间，要有良好的通风，通风条件差的要进行强制通风，严禁灭菌车间与户外密闭；（安装的通风设备应是防爆型的） 4、照明：环氧乙烷灭菌车间使用的照明及电气开关等，均应是防爆型的； 5、排放：灭菌完毕后，环氧乙烷残气需经设备废气处理系统处理后，方可排出； 6、消防：环氧乙烷灭菌车间及灭菌区域内，应有明显防火、禁烟标记；灭菌车间应是重点消防区域，要有足够的消防、灭火设备；三、灭菌器的操作： 1、人员：从事灭菌工作的人员，必须经过厂方的培训，持有厂方颁发的上岗证，方可上岗操作，任何无证操作都将视为违章，由此而产生的后果自负，同时，非操作人员禁止进入灭菌车间； 2、操作规程：灭菌器的操作应严格按照操作(使用) 说明书进行，严禁擅自变更操作程序和违反操作规程操作； 3、操作人员守则：操作人员应有强烈的责任感。灭菌时，不得离开工作岗位。严禁灭菌器在无人状态下工作，未经本厂允许，不得擅自更改电气控制柜的线路和增减电气设备，不得擅自增减、更改计算机系统的硬件和软件设备；四、环氧乙烷的储存：

1、环氧乙烷应储存在单独的房间内。房间应有通风、防爆、消防设施； 2、环氧乙烷钢瓶应储存在阴凉、远离热源处，环氧乙烷的储存温度应低于30度； 3、环氧乙烷钢瓶应有固定支架。五、环氧乙烷灭菌器安全检查： 1、设备完好：灭菌器的使用必须保持完好，特别是电气控制柜和箱体气密性的完好。设备使用过程出现故障，应立即停止灭菌，并将箱体内的环氧乙烷抽空； 2、泄漏检查：环氧乙烷灭菌时，应定期对灭菌柜进行测漏(可用含1%酚酞的硫代硫酸钠溶液浸湿的试纸，贴于可疑漏气处，如试纸变红，即证明有环氧乙烷漏出)； 3、故障排除：故障排除应由操作人员和设备专业技术人员进行，可参考厂方提供的维护和保养手册(常见故障排除一览表)，若故障不能排除，应及时与厂方联系。六、操作人员的安全防护： 1、着装：操作人员应服装整洁，带防护手套，不得穿带钉的鞋子； 2、救护：操作人员如发现头晕、恶心、呕吐等中毒症状，应立即离开现场到通风处休息，严重者应及时送医院诊治； 3、健康保健：从事环氧乙烷灭菌的人员应定期进行体检。

环氧乙烷灭菌器灭菌验证报告

***环氧乙烷灭菌验证报告文件编号***文件版本A/0 生效日期2012年12月12日 文件分发明细 副本： □总经理□管理代表□副总经理 □生产技术部□生产部□质量部 □供销部□总经办 正文：文控中心盖受控章 制订审核批准 制订日期2012年12月 30日 审核日期 2012年12月 30日 批准日期2012年12月30日 修改记录 版号修改状态修改内容制订/日期审核/日期批准生效/日期

目录 1. 目的...................................................................... 2. 范围...................................................................... 3. 引用文件和标准............................................................ 4. 确认小组.................................................................. 设备和材料................................................................ 6. 操作流程及参数............................................................ 灭菌产品的装载及监测传感器的分布 .......................................... 8. 安装确认.................................................................. 9. 运行确认.................................................................. 10. 物理性能确认.............................................................. 11. 生物性能确认结果.......................................................... 12. 产品安全性能确认.......................................................... 13. 过程的异常和方案修改...................................................... 14. 产品二次灭菌.............................................................. 15. 结论...................................................................... 16. 附件目录..................................................................

组织培养实验器材

植物组织培养设备： 1、高压消毒锅：用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒。 2、超净工作台：用于培养物的无菌操作。 3、接种工具：包括双筒实体显微镜、镊子、剪刀、解剖刀、酒精灯或接种灭菌器（电热消毒器）等。 4、培养设备：包括空调机、定时器、温度控制器、增湿机或去湿机、培养架、摇床、恒温培养箱、人工培养箱等。 5、化学实验及分析设备：包括分析天平,天平、酸度计、蒸馏水器、烘箱或玻璃仪器烘干器、电炉、药品柜、冰箱、晾干架等。 6、封口膜，培养瓶，试管，培养皿，专用记号笔，托盘，手术接种剪，直镊，枪型接种镊，手术刀柄，超净工作台，接种灭菌器，不锈钢接种盘，组织培养架，光照培养箱，人工气候箱，生化培养箱，恒温恒湿箱，照度计，PH计，酸度计，电导率仪，干湿温度计，玻璃棒温度计，电子天平，精密电子秤，磁力搅拌器，生物显微镜，高压灭菌锅，纯水器，组培推车，三角烧瓶，烧杯，量筒，试管架，试管刷，容量瓶，酒精灯，干燥器，吸球及移液管（0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20ML)，容量瓶，试剂瓶（含棕色试剂瓶）。 组培试剂类： 3.1.植物生长调节剂类Plant growth regulator： 6-苄氨基嘌呤(6-BA) 6-Benzylaminopurine； 6-糠氨基嘌呤（KT；激动素）6-Furfurylaminopurine(Kinetin)； 腺嘌呤（腺素）Adenine； 氯吡苯脲(KT-30；CPPU)Forchlorfenuron； 反玉米素Trans-zeatin； 塞苯隆(TDZ)Thidiazuron； 生物素Biotin； α-萘乙酸(NAA)1-Naphthylacetic acid； 3-吲哚乙酸(IAA) 3-Indole acetic acid； 3-吲哚丁酸(IBA) 3-Indole butyric acid； 2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)2,4-Dichlorophenoxyacetic acid； 赤霉素GA3 Gibberellic acid； 奈乙酰胺（NAD）2-（1-Naphthyl）acetamide； β-奈氧乙酸β-Naphthoxyacetic acid； 对氯苯氧乙酸(防落素)4-Chlorphenoxyacetic acid； 对溴苯氧乙酸4-Bromophenoxyacetic acid； 对碘苯氧乙酸4-Iodophenoxyacetic acid； 24-表油菜素内脂24-Epibrassinolide； 芸苔素内酯Brassinolide； 赤霉素GA4+7 (GA4:GA7=1:2)Gibberellin A4+7； 青鲜素Maleic hydrazide； 丁酰肼(比久)Daminozide； 吲哚-3-丙酸Indole-3-propanoic acid； 吲哚-3-丙烯酸3-Indole-propenoic acid； 吲哚-3-甲醇3-Indole-methanol； 吲哚-3-甲醛Indole-3-carboxylic acid；

环氧乙烷灭菌器安全操作规程正式样本

文件编号：TP-AR-L6952 There Are Certain Management Mechanisms And Methods In The Management Of Organizations, And The Provisions Are Binding On The Personnel Within The Jurisdiction, Which Should Be Observed By Each Party. （示范文本） 编制：_______________ 审核：_______________ 单位：_______________ 环氧乙烷灭菌器安全操作规程正式样本

环氧乙烷灭菌器安全操作规程正式 样本 使用注意：该操作规程资料可用在组织/机构/单位管理上，形成一定的管理机制和管理原则、管理方法以及管理机构设置的规范，条款对管辖范围内人员具有约束力需各自遵守。材料内容可根据实际情况作相应修改，请在使用时认真阅读。 一、准备 1．检查上水箱水位是否置于三分之二以上。 2．检查电热或蒸气阀、循环阀、真空泵、加药 阀、放空阀是否置于关的状态。 二、装箱 1．开总电源。 2．开气泵。（注：气泵压力设置为0.6MPa－ 0.8MPa，应在此后灭菌过程中始终维持在此范围内， 切忌增大或减少这个压力。 3．开门。（检查门封条是否完好、清洁，并给

门封条上机油。若发现门封条破损，应 禁止使用，并且更换门封。） 4．装箱。（灭菌物品及物品与灭菌器之间应保留一定距离。） 5．关门。 6．开门封充气阀。 三、加热 1．开电热（或开节气阀）。 2．开循环泵。 3．当灭菌室温度达到灭菌温度时（40℃－50℃），关电热（或关蒸气阀）开关和循环泵。 四、灭菌室抽真空 1．检查灭菌室温度是否确实达到灭菌温度。 2．开真空泵和真空阀。（注：真空泵和真空阀

环氧乙烷灭菌器作业指导书

环氧乙烷灭菌器 作业指导书 一、操作流程： 1.将消毒物品放置进消毒仓内，不能靠内壁放置，不能超过总容量 的80%； 2.放置好消毒物品后，将消毒仓门关闭，拧紧舱门螺栓，至密封条 有明显压痕为止； 3.确保舱体后面的手动加水及手动排残按钮关闭，打开水源及电 源； 4.电源打开的时候，会出现嘀嘀的报警声，此时机器自动加水，大 约持续5秒钟。如长时间不用之后第一次开机，自动加水容易加不满，此时应打开机器背面的手动加水按钮，至溢流口排水为止。 加水完毕后，按两次操作面板的开始按钮，自动进入抽真空阶段，负压达到3个的时候，自动停止。 5.机器内负压达到3个之后，自动进入加热阶段，大约需要半个小 时左右，温度上升到50摄氏度之后，自动抽真空至60个负压。 达到60个负压时，机器发出报警声，此时应手动加入环氧乙烷气体。 6.加入环氧乙烷气体时，先打开连接机器的气阀，然后尽量缓慢的 打开气瓶开关，加药量应尽量精确控制，气瓶气阀不要打开太大，以免加药量多浪费。 7.在负压下降到4的时候，马上关闭气瓶开关，可根据实际情况适

当调整，比如在负压到4.2左右的时候即可开始关闭。关闭气瓶阀门后，将连接机器的气阀关闭。 8.加入环氧乙烷气体后，机器自动进入灭菌过程，大约为5个小时， 之后为1.5小时左右的排残过程。全部为机器自动运行，可不用一直盯着。 9.消毒全过程结束后，屏幕显示END字样，松开消毒仓螺栓后， 门如果无法打开，表示舱内存有负压，可打开机器后方手动排残按钮，待舱内无负压后即可打开舱门。 10.打开舱门后，将舱门保持10分钟左右的敞开状态，让残留的环 氧乙烷气体排出，之后拿出消毒物品至通风环境晾3-12个小时，排除环氧乙烷残留。 二、注意事项： 1.进水阀门可根据水压调整，过大浪费，过小则造成进水时间长 2.环氧乙烷瓶体应避免阳光直射，环境温度不可过高，放置于通风 阴凉环境内，远离火源及热源。 3.平时机器不用的时候，将水箱内的水排出，水电阀门全部关闭。 4.排残及溢流的管路必须固定，以免因来回甩动脱离下水口，导致 环氧乙烷气体泄漏。 5.液体、粉尘、油剂、一头通透一头堵死的管状物等不能消毒，以 免负压环境破坏消毒物品；如用袋子密封消毒，袋子内应尽量少存在气体。 三、设置：

植物组织培养常用设备及价格参考

植物组织培养设备 一、称量配药 1.各种封口膜和实验室常用耗材 产品名称规格价格备注 无菌培养容器封口膜12*12 cm，500张/袋70 16*16 cm，500张/袋80 琼脂粉 强度1200+g/cm2，每升用量4.5g 135/1kg 强度1300+g/cm2，每升用量3.5g 155/1kg 干粉培养基MS、B5、White、N6、1/2MS 60/ 瓶 专用记号笔红色、蓝色 5.80 定性滤纸Φ11cm，快速9.50 脱脂棉500g 15 脱脂纱布0.8*15m 50 2. 天平类 产品名称规格单价备注FA1004 称量范围0～100g ，精度：0.0001g 7000 FA1104 称量范围0～110g ，精度：0.0001g 7100 FA1604 称量范围0～160g ，精度：0.0001g 7520 FA2004 称量范围0～200g ，精度：0.0001g 7990 FA2104 称量范围0～210g ，精度：0.0001g 8100 塞多利斯BS124S 称量范围0～120g ，精度：0.0001g 7990 塞多利斯BS224S 称量范围0～210g ，精度：0.0001g 9900 塞多利斯BS2202S 称量范围0～2010g ，精度：0.01g 6480 塞多利斯BS4202S 称量范围0～4010g ，精度：0.01g 8900 光学分析天平TG328A 称量范围0～200g ，精度：0.0001g 1670 电子天平JA12002N 称量范围0-1200g，精度0.01g 4400 电子天平JA21002N 称量范围0-2100g，精度0.01g 6300 电子天平JA31002N 称量范围0-3100g，精度0.01g 6900 电子天平JA5003N 称量范围0-500g，精度0.01g 6530 电子天平JY1002 称量范围0-100g/，精度0.01g 1180 电子天平JY2002 称量范围0-200g/，精度0.01g 1380 电子天平JY2502 称量范围0-250g/，精度0.01g 2300 电子天平JY5002 称量范围0-500g/，精度0.01g 3000

环氧乙烷灭菌器安装及注意事项

行业资料：________ 环氧乙烷灭菌器安装及注意事项 单位：______________________ 部门：______________________ 日期：______年_____月_____日 第1 页共12 页

环氧乙烷灭菌器安装及注意事项 一、灭菌器的安装 x灭菌器应放在专用的房间。房间内应接入电源(蒸气源)、水源及下水和通风设施，并有专用接地装置。 x灭菌器的安装位置。应保证周围有一定的空间位置，以便安装和维修；灭菌器门前应留有足够的空间，以保证灭菌物品进出方便。 x灭菌器放置应尽量水平。 x电源应接入三相四线制交流380V-50HZ电源，并配有专用的配电盘。灭菌器箱体和电气控制柜之间应开好放线地槽。 x水源蒸气源接有压力表及相应的手动阀门，以保证使用安全。下水管道的口径应不小于100毫米。 x气体钢瓶应接有压力表，不得而知接近热源，不得而知爆晒，存放温度应小于50度。 二、注意事项 1、环氧乙烷是易燃易爆物品，保证安全十分重要。所以，灭菌车间应配备防火措施。另外，禁止吸烟，禁止使用其他明火，并保持车间内通风。 2、环氧乙烷有一定的毒性，人体一次吸入过量会有不适感觉，甚至出现头痛、呕吐等中毒现象。如出现上述现象，应迅速离开现场，到空旷阴凉处呼吸新鲜空气，直到症状消除为止。如人体皮肤、眼睛等接触到环氧乙烷 3、应定期更换水循环系统内的用水。定期更换废气处理系统内的废水。 第 2 页共 12 页

三、环氧乙烷灭菌安全规程 1、总则 环氧乙烷是一种易燃易爆、有中等毒性的危险化学品，空气中浓度超3%，遇到明火可能引起爆炸。环氧乙烷灭菌器又是机电一体，具有较高自动化程度、承受一定压力的设备。因此，环氧乙烷灭菌器的使用和操作，必须严格遵守本安全规程。 2、灭菌器的安装 2.1场地 环氧乙烷灭菌器应放置在独立的车间，场地远离人群，现场30～50米范围内不得有明火作业，以及其它产生明火的情况。 2.2隔离 环氧乙烷灭菌器安放的车间，必须有隔离措施，即环氧乙烷灭菌柜体、电气控制柜、机架、环氧乙烷钢瓶等，应分别安装在互相独立的房间，或按照厂方提供的安装图进行隔离。 2.3通风 环氧乙烷灭菌器安放的车间，要有良好的通风，通风条件差的要进行强制通风，严禁灭菌车间与户外密闭。安装的通风设备应是防爆型的。 2.4照明 环氧乙烷灭菌车间使用的照明及电气开关等，均应是防爆型的。 2.5排放 灭菌完毕后，环氧乙烷残气需经设备废气处理系统处理后，方可排出 2.6消防 环氧乙烷灭菌车间及灭菌区域内，应有明显防火、禁烟标记。灭菌 第 3 页共 12 页

器械灭菌确认中的微生物检验

医疗器械灭菌过程的确认和常规控制中的微生物检验 1概述 无菌医疗器械的无菌控制中的微生物检验，除了包括众所周知的产品放行中的微生物检验以外，还包括常规生产过程控制中的生物负载的估测和灭菌确认中的无菌检验。多年以来，我国一直沿用以产品上无菌检验的结果控制产品出厂这样一种落后的放行方法。自从2000年将ISO11134、11135和11137医疗器械湿热灭菌、环氧乙烷灭菌和辐照灭菌的确认和常规控制的国际标准等同转化为GB 18279、GB18280 和GB18280三项国家标准（简称“三项标准”）以来，使国人普遍了解并接受了国际上灭菌控制技术特别是微生物控制中的新理念和新技术。对促进我国医疗器械的灭菌技术发展起到了非常大的促进，传统的产品放行方式正逐步得到扭转。然而，三项标准并不是医疗器械灭菌标准的全部，对灭菌前器械上微生物的数量、种类和特性的了解，是灭菌过程的确认和常规控制的前提。对此国际标准组织发布了ISO11737.1-1995《医疗器械的灭菌—微生物法—第1部分：产品上微生物总量的估测》和ISO11737.2-1998《医疗器械

灭菌—微生物法—第2部分：灭菌过程的确认中所进行的无菌试验》两项国际标准，主要不得用以无菌医疗器械过程控制和验证中的微生物检验。这两项国际标准是三项标准的重要补充，具有非常重要的地位。无论是医疗器械的生产者还是管理者都必须熟悉或了解。 2 无菌和生物负载的概念 2.1 无菌 围绕无菌有两个英文单词，sterility 和sterile。前者定义为无存活微生物的程度，在三项标准中将其命名为“无菌程度”。后者定义为无存活微生物，在三项标准中将其命脉名为“无菌”。在无菌医疗器械的国际标准中，前者用于灭菌要求，后者用于产品名称和包装标识。然而在我国的诸多标准中都将这两个单词混称为“无菌”。 用于对医疗器械灭菌的物理的和/或化学的作用 对微生物灭活，常近似于一个指数关系；这就意味着无论灭菌的程度如何，微生物总是难免以一个有限概率存活下来。“无菌”是指微生物存活概率低于10-6。对于一个给定的处理过程，这种存活概率由微生物的