多维色谱技术

高效液相色谱(HPLC)

高效液相色谱（HPLC）操作规程 一操作 1.准备工作 ⑴流动相的准备 应根据实验选择合适的流动相，所有流动相原则上应选择HPLC级别，水应选择超纯水，并应保持新鲜。 所有流动相在进行实验前应经过相应的脱气处理，脱气时间应根据流动相的量相应增加，但一般超声脱气不应少于20min。 在实验过程中应保证足够的流动相，流动相的量与流速、洗脱时间等有关，应根据具体情况进行准备。 ⑵样品的准备 对于待测的样品，在进样之前应经过滤膜过滤，根据样品的不同选择不同种类、不同直径的滤膜。 2. 排气 打开purge阀，键入stop→prime，直到无气泡停止stop。 B泵同样操作。 关闭purge阀。 3. 开机 打开电脑主机和显示器，点击Galaxie，进入工作站。选择系统，点击Agilent HPLC. 点击overview，可观察仪器各部分状态。 打开泵及检测器的电源。 二 分析方法建立 1.进入工作站系统界面。 点击数据，文件→新建→方法，出现视窗，点击前进即可。 键入方法名和相应描述→点击ok后出现方法文档。 2.210的设定 点击控制→210图标→Elution。 选择流动相A和B的种类。 Compressibility、Pressure Constant以及Refill Time属于内置参数无需设定。 设置A、B流动相的比例，通过改变B的比例设定。 如需梯度洗脱，则根据方法对Equilibrium Time 和Hold Time进行设定。 点击Misscellaneous。 Start Mode选择Inject Trigger on Pump A。 End of Sequence 选择Leave Pump on。 210设定结束。 3.325的设定 点击325图标，选择Signal。 其中Detector Bunch Rate建议设置成2（10Hz），Noise Monitor Length建议设定成64，Response Time建议设定0.5。 根据方法设定相应波长。 其余三项包括Peak Sensor、Relay、Misscellaneous不需设定。 325设定结束。 此时方法已经建立，选择文件，保存方法即可。

全自动二维液相色谱仪拟具备技术参数

全自动二维液相色谱仪拟具备技术参数 目的：本仪器要求可以应用于抗肿瘤、抗生素、精神类、抗癫痫以及其他类等药物血样浓度的测定及临床监测，厂方能提供药物测定方法或现场指导用户完成方法建立。测定方法需符合2015版《中国药典》的《生物样品定量分析方法验证指导原则》，至少能完成代表性药物的方法学验证，如伏立康唑血药浓度（线性范围0.1~7.0ug/ml）、替考拉宁血药浓度（0.5~25.0ug/ml）。 1、数量：1 套 2、主要配置：模块化结构，单个模块故障，不影响整机使用,由两个高压单元泵和一套低压四元梯度泵、五通道以上脱气机、紫外检测器及流通池一套、自动进样器一套（进样体积不小于1ml），工作站一套，自动化切换系统及分析软件包组成。 3、主要应用：该系统在一个模块内放置独立的两套以上梯度分析泵，紫外检测器，自动进样器、柱温箱、原装色谱工作站各一套，要求流速范围为（0.000-10.000ml/min），压力40MPa，满足日常分析，半制备的要求，更大程度的发挥其优势： 3.1要求可实现二维或者多维液相色谱分析：对于复杂难分离的血液样品，只需离心沉淀蛋白后，即可取上层清液进行分析测定，并可针对更复杂的样品，在完成一维分离后，通过阀切换到另外一套色谱流路中，进一步进行分离。 3.2主要分析系统寿命参数：采用丙戊酸、甲氨蝶呤、万古霉素、利培酮等测试系统，一维色谱柱在进样（上升沉淀液）可保证500次以上使用寿命的基础要求，色谱柱压力不超过20MPa,二维色谱柱可保证1500次以上的使用寿命。 3.3 二维或者多维液相色谱稳定性参数：甲氨蝶呤及丙戊酸钠蛋白沉淀后测定，日内精密度、日间精密度小于15% 3.4可实现并联分析：两套液相梯度泵和检测器共用同一自动进样器，柱温箱，进口原装工作站，实现两套独立的液相色谱分析系统，可以同时进行分析测试，互不干扰，满足用户不同样品的分析。 3.5可实现串联分析：其中一套色谱梯度泵系统在做样品分析，另外一套色谱梯度泵在做冲洗和平衡，色谱柱在两个流路中切换，节省样品分析时间，大大提高工作效率。 3.6可实现全自动在线SPE分析：其中一套色谱泵用于在线相萃取，另外一套色谱泵用于色谱分析，吸附切换在SPE柱的待分析物通过切换阀切换到分析流路中，可将原来繁琐费时的

多维气相色谱

多维气相色谱 仪器编号：ABF001 该仪器考虑我国汽油组成的特点和规格要求，采用多维气相色谱方法测定汽油中的饱和烃、烯烃、芳烃等烃族组成及苯含量。本方法采用直接进样，允许测定试样的烯烃含量上限为65%，除测定烯烃含量外，可直接测定出汽油中的芳烃含量和苯含量。 采用多维气相色谱的方法，依据不同色谱柱对烃族组分吸附性及色谱特性的差异，使汽油中的主要烃族组分分离，用氢火焰离子化检测器（FID）检测，通过记录的各烃族组分的色谱峰面积，采用校正的归一化方法计算汽油中有关烃族组分的质量分数或体积分数。 汽油样品应用范围： 终馏点低于205℃以下的石油馏分 中饱和烃、烯烃、芳烃和苯含量的测定。 浓度范围（质量分数或体积分数）： ◆烯烃含量：5~65% ◆芳烃总量：5~50% ◆苯含量：0.3~5% 采用SI国际单位制单位,配套的数据处理工作站，保证了系统的自动化操作：分析人员只要把样品注入进样器，即可报出分析结果，几乎没有人为的影响因素。 多维气相色谱快速测定汽油中的烯烃、芳烃和苯含量徐广通，杨玉蕊，陆婉珍 (石油化工科学研究院，北京100083)摘要针对车用无铅汽油国家标准GB17930—1999中对烯烃、芳烃和苯含量提出的明确限值要求，以及现用标准方法和其它分析技术在分析汽油组成时存在的问题，结合国外汽油

分析的发展趋势及我国汽油生产的工艺和汽油组成分布特点，提出了一套新的多维气相色谱技术测定汽油中烯烃、芳烃和苯含量的方法，并研制了新的烯烃捕集阱，可捕集汽油中高达70%的烯烃，且具有良好的可逆性和使用寿命，提出的方法可以在12min内通过一次色谱进样实现汽油中烯烃总量、芳烃总量和苯含量的测定。试验结果与荧光指示剂吸附法(FIA，GB/T11132-1989)相比具有很好的一致性，但分析速度和方法的再现性得到明显改善，试验成本也大大降低。 关键词：汽油料烯烃芳烃苯气相色谱法 1 前言 在车用无铅汽油的国家标准GBl7930—1999中指定用荧光指示剂吸附法(简称FIA法，GB/T11132—1989)测定汽油烃族组成。该方法在使用时由于涉及吸附剂性能、汽油组成分布、试验装置、操作习惯等多方面因素的影响，结果的再现性允许范围较宽。如该方法对烯烃含量为35%的汽油，允许再现性为8.2%，如此大的偏差范围，对炼油催化剂和工艺的研究、生产过程的控制，以及产品的质量监测会带来许多不利的影响，此外FIA法的操作成本和分析时间都比较长。为提高分析结果的准确性和精密度，获得更为详尽的汽油组成信息，人们在采用毛细管色谱测定汽油组成方面做了大量的研究工作，但色谱峰识别的可靠性最终会影响汽油烃族组成(PIONA)分析结果的可靠性，特别对高烯烃汽油样品的测量偏差较大。 为避免烃组分识别对分析结果的影响，根据色谱分离的原理，人们开始探索采用多维气相色谱(MGC)技术测定汽油烃族组成，但在方法回收率和烯烃捕集容量上存在问题。采用多维色谱技术测定汽油总烯烃含量(ASTM D6296)和汽油详细组成的方法(ASTM D6293)已得到ASTM的认可。上述2个方法中，仪器的设计和方法的建立均以低烯烃含量的汽油为分析对象，捕集阱的吸附容量较小，使用范围要求直接进样的烯烃含量不得超过5%，否则必须进行稀释处理。显然这2种方法在分析我国较高烯烃含量的汽油时受到限制，并且仪器的价格

多维液相色谱分离技术在复杂蛋白质组学样品鉴定中的应用

多维液相色谱分离技术在复杂蛋白质组学样品鉴定中的应用 作者：张罗敷胡晓芳徐学敏（上海交通大学上海200030） 期刊：现代生物医学进展Progress in Modern Biomedicine Vol.13 NO.1 JAN.2013 一目的 在蛋白质组学研究中，无论是以分析生物体内尽可能多的蛋白质组成情况的" 竭泽法" 研究策略，还是以分析不同时期细胞内蛋白质组成变化的"功能法" 研究策略，若要良好的实现研究目标，很大程度上取决于是否有强大的样品分离和鉴手段，对蛋白质组样本进行深入的分析。生物体内蛋白质组的复杂性很高，其动态范围达到1010，而质谱检测范围具有一定的限制性。对于复杂的蛋白组学样品，在进入质谱检测之前进行有效的分离是提高质谱检测效率的关键。经典的蛋白质组学样品分离手段是二维凝胶电泳（2D-E），蛋白质混合物先后按照等电点差异和分子量差异，在凝胶上分离和富集，这种方法能分析数千个蛋白质，在蛋白质组学研究中发挥过重大作用。但是，由于基于二维凝胶电泳的蛋白质分离和鉴定技术耗费人力，并且在高分子量蛋白、低分子量蛋白、极碱性蛋白和疏水性蛋白检测方面有限制。近年来，随着蛋白组学技术的发展，液相色谱- 串联质谱的联用技术（液质联用）逐渐成为蛋白组学的主流技术。高效液相色谱（high performance liquid chro-matography，HPLC）由于其高自动化、高重现性以及高分离效率，成为蛋白和肽段分离的重要方法，而且通过与质谱联用，能够形成高自动化的分离和鉴定系统。在基于液质联用的蛋白质组学工作方法中，常使用"鸟枪法（shotgun strategy）"，即蛋白质混合物通过酶解后生成的肽段混合物进行色谱分离，并将洗脱的肽段连续地输送到质谱中检测。 现在人们普遍认为，由于从实际生物学样本中提取的蛋白质组学样品复杂性很高，仅通过一维色谱分离无法对其达到满意的分离效果，多维液相色谱分离技术由此应运而生。" 多维液相色谱"（multi-dimensional liquid chromatography，MDLC）是指通过不同分离原理的液相色谱的串联使用，提高分离系统的峰容量和分辨率，从而实现复杂样品充分分离的一种技术。根据Giddings 等建立的数学模型，在理想的多维液相色谱分离系统中，每一维分离都应该是正交的，即具有相互独立的分离原理。此时多维液相色谱系统的总峰容量（n）等于系统中每一维分离的峰容量（ni）的乘积，即n=n1×n2×n3……。因此，恰当使用各种分离模式，可以使单维的色谱分离效果得到最大的发挥，组合形成的多维色谱分离系统可以大幅度地提高分离系统的峰容量和分离能力，充分解析复杂程度较高的样品。在本文中，我们介绍了在蛋白质组学研究中用到的多种多维液相色谱分离系统。在这些系统中，为了使样品得到充足的分离，多种不同的分离原理HPLC 方法被灵活地结合运用。充分利用样品分子的各种理化特性，在每一个分离维度上都尽量达到较好的分离效果，在整体上有效降低了样品的复杂程度。同时，在不断追求深入而全面的蛋白鉴定的同时，多维液相色谱分离系统的维数也有所提高，出现了二维、三维甚至更高分离维数的系统。 二做了什么 1二维液相色谱分离系统 为了有效的分离在鸟枪法分析方法中产生的复杂肽段混合物，二维液相色谱分离系统（two dimensional liquid chro-matography，2DLC）结合了两种原理不同的HPLC 类型，先后对肽段混合物进行2 次分离。最常用的2DLC 是离子交换色谱- 反相色谱的二维串联。1999 年，J. Yates 实验室首次提出了将强阳离子交换（strong cation exchange，SCX）色谱- 反相色谱这一二维分离系统和质谱连接，后来称为多维蛋白鉴定技术（multi-dimensional protein identification technology，Mud PIT）的高自动化分析方法。在这一方法中，通过一根前后两段分别装有SCX 和PR 填料的双相毛细管柱构建了在线SCX-RP 分离系统。在这一方法中

气相色谱习题及解答

气相色谱分析法习题 一、简答题 1．简要说明气相色谱分析的基本原理 2．气相色谱仪的基本设备包括哪几部分?各有什么作用? 3．当下列参数改变时： (1)柱长缩短，(2)固定相改变，(3)流动相流速增加，(4)相比减少 是否会引起分配系数的改变?为什么? 4．当下列参数改变时： (1)柱长增加，(2)固定相量增加，(3)流动相流速减小，(4)相比增大 是否会引起分配比的变化?为什么? 5．试以塔板高度H做指标,讨论气相色谱操作条件的选择. 6．试述速率方程中A, B, C三项的物理意义. H-u曲线有何用途?曲线的形状主要受那些因素的影响? 7．当下述参数改变时：(1)增大分配比，(2) 流动相速度增加，(3)减小相比，(4) 提高柱温，是否会使色谱峰变窄?为什么? 8．为什么可用分离度R作为色谱柱的总分离效能指标? 9．能否根据理论塔板数来判断分离的可能性?为什么? 10．试述色谱分离基本方程式的含义,它对色谱分离有什么指导意义? 11．对担体和固定液的要求分别是什么? 12．试述“相似相溶”原理应用于固定液选择的合理性及其存在的问题。 13．试述热导池检测器的工作原理。有哪些因素影响热导池检测器的灵敏度？ 14．试述氢焰电离检测器的工作原理。如何考虑其操作条件？ 15．色谱定性的依据是什么?主要有那些定性方法? 16．何谓保留指数?应用保留指数作定性指标有什么优点? 17．有哪些常用的色谱定量方法?试比较它们的优缺点和使用范围? 二、选择题 1.在气相色谱分析中, 用于定性分析的参数是 ( ) A 保留值 B 峰面积 C 分离度 D 半峰宽 2. 在气相色谱分析中, 用于定量分析的参数是 ( ) A 保留时间 B 保留体积 C 半峰宽 D 峰面积 3. 良好的气-液色谱固定液为 ( ) A 蒸气压低、稳定性好 B 化学性质稳定 C 溶解度大, 对相邻两组分有一定的分离能力 D A、B和C 4. 使用热导池检测器时, 应选用下列哪种气体作载气, 其效果最好？ ( ) A H2 B He C Ar D N2 5. 试指出下列说法中, 哪一个不正确? 气相色谱法常用的载气是 ( ) A 氢气 B 氮气 C 氧气 D 氦气 6. 色谱体系的最小检测量是指恰能产生与噪声相鉴别的信号时 ( ) A 进入单独一个检测器的最小物质量 B 进入色谱柱的最小物质量 C 组分在气相中的最小物质量 D 组分在液相中的最小物质量 7. 在气-液色谱分析中, 良好的载体为 ( ) A 粒度适宜、均匀, 表面积大 B 表面没有吸附中心和催化中心 C 化学惰性、热稳定性好, 有一定的机械强度 D A、B和C 8. 热导池检测器是一种 ( ) A 浓度型检测器 B 质量型检测器 C 只对含碳、氢的有机化合物有响应的检测器

高效液相色谱原理

高效液相色谱法（HPLC） 一、方法原理 1、液相色谱法概述 高效液相色谱分析法

其工作流程为：高压输液泵将贮液器中的流动相以稳定的流速(或压力)输送至分析体系，在色谱柱之前通过进样器将样品导人，流动相将样品依次带入预柱、色谱柱，在色谱柱中各组分被分离，并依次随流动相流至检测器，检测到的信号送至数据处理系统记录、处理和保存。

HPLC仪器的基本结构 2、高效液相色谱法的特点（HPLC） 与经典柱色谱原理相同，是由液体流动相将被分离混合物带入色谱柱中，根据各组分在固定相及流动相中吸附能力、分

配系数、离子交换作用或分子尺寸大小的差异来进行分离。 由于高压输液泵、高灵敏度检测器和高效固定相的使用，提高了柱效率，降低了检出限，缩短了分析时间。 特点是选择性高、分离效能高、分析速度快的特点。 高沸点有机物的分析、离子型化合物、高分子化合物、热稳定性差的化合物以及具有生物活性的物质，弥补了气相色谱法的不足。 高效液相色谱法与气相色谱法相比，各有所长，互相补充。 如果能用气相色谱法分析的样品，一般不用液相色谱法，因为气相色谱法分析速度更快、更方便、成本更低。 3、高效液相色谱法的固定相和流动相 （1）固定相 表面多孔型和全多孔型两大类。 （2）流动相（淋洗液） 流动相的选择对改善分离效果产生重要的辅助效应。 从实用，选用的流动相具有廉价、易购的特点外，还应满足下列要求： ①与固定相互不相溶，并能保持色谱柱的稳定性。 ②高纯度，以防所含微量杂质在柱中积累，引起柱 性能的改变。 ③与所用的检测器相匹配。 ④应对样品有足够的溶解能力，以提高测定的灵敏 度。 ⑤具有低的黏度（可减少溶质的传质阻力，提高柱 效）和适当低的沸点。

实例解析——高效液相色谱(hplc)

实例解析——高效液相色谱(HPLC) 一、原理 利用不同物质在两相中（液液、液固、离子交换、尺寸排阻）具有不同的分配系数，当二者相对运动时候，物质在两相中反复多次分配，从而使得物质得到完全分离 二、适用范围 高沸点、热不稳定的天然产物、生物大分子、高分子化合物、离子型样品、生化样品三、特点 高压、高效、高灵敏度 四、仪器组成 流动液贮存提供脱气，输液系统、进样系统、分离系统、检测系统，控制记录系统贮液瓶、高压泵、进样器、分离柱、检测器、记录仪 五、仪器选择 由实验条件确定是选用二元高压还是四元低压、一般来说，二元高压的准确度较高。四元低压是先将样品按比例混合再泵入，而二元高压是先泵入不同比例的溶剂再混合。确定采用的脱气系统，一般采用在线脱气。确定进样方式，人工手动六通阀进样，还是进样针自动进样，一个适用于少量样品，一个适用于大量样品。 选择检测器，如果是有较强的紫外吸收的可用紫外可见检测器(二极管阵列检测器)，如果是芳香族化合物，可选用荧光检测器，对于离子可采用电导检测器。 六、实验条件优化 配置待测物质的标准溶液 1、色谱柱的确定 分析样本确定是采用何种类型的色谱柱 (1)分配色谱，两项间分配系数 流动相选用极性的物质（甲醇、乙腈、水）则固定相选择非极性物质。一般用 C18 ODS柱。 (2)吸附色谱， (3)离子交换色谱 各种离子与树脂上交换集团的交换能力不同。固定相：离子交换树脂，流动相 为无机酸、无机碱。常用于分离离子或者可解离的化合物 (4)排阻色谱法 配置含待测物质的标准品溶液，采用不同C18柱分离，检测，对照不同色谱图像，可得到分离效能最高的色谱柱 2、最佳流动相梯度洗脱程序的确定 梯度洗脱：按照一定的程度，不断改变流动相中个溶剂组成的比例以改变流动相的 极性。将色谱柱上不同的组分洗脱出来。 配置不同的梯度洗脱方案，用标准溶液进行试验，并选取能达到最高分离效能的梯 度洗过方案作为最佳流动相梯度洗脱程序 3、流动相的确定 在分离效能相似条件下选择更经济、毒性小的流动相 4、流速确定 流速太大，待分离组分来不及与固定相充分作用，故其中的组分较易被洗脱下来，出峰时间变短，而且柱压比较高，会引起泵负荷的增加，进而导致色谱柱的使用命

在线气相色谱仪简单介绍

在线气相色谱仪利用色谱柱先将混合物分离，然后利用检测器依次检测已分离出来的组分。色谱柱的直径为数毫米，其中填充有固体吸附剂或液体溶剂，所填充的吸附剂或溶剂称为固定相。 在线气相色谱仪利用色谱柱先将混合物分离，然后利用检测器依次检测已分离出来的组分。色谱柱的直径为数毫米，其中填充有固体吸附剂或液体溶剂，所填充的吸附剂或溶剂称为固定相。与固定相相对应的还有一个流动相。流动相是一种与样品和固定相都不发生反应的气体，一般为氮或氢气。待分析的样品在色谱柱顶端注入流动相，流动相带着样品进入色谱柱，故流动相又称为载气。载气在分析过程中是连续地以一定流速流过色谱柱的;而样品则只是一次一次地注入，每注入一次得到一次分析结果。样品

在色谱柱中得以分离是基于热力学性质的差异。 在线气相色谱仪利用色谱柱先将混合物分离，然后利用检测器依次检测已分离出来的组分。色谱柱的直径为数毫米，其中填充有固体吸附剂或液体溶剂，所填充的吸附剂或溶剂称为固定相。 与固定相相对应的还有一个流动相。流动相是一种与样品和固定相都不发生反应的气体，一般为氮或氢气。待分析的样品在色谱柱顶端注入流动相，流动相带着样品进入色谱柱，故流动相又称为载气。载气在分析的过程中，是连续地以一定流速流过色谱柱的；而样品则只是一次一次地注入，每注入一次得到一次分析结果。 样品在色谱柱中得以分离是基于热力学性质的差异。固定相与样品中的各组分具有不同的亲合力(对气固色谱仪是吸附力不同，对气液分配色谱仪是溶解度不同)。当载气带着样品连续地通过色谱柱时，亲合力大的组分在色谱柱中移动速度慢，因为亲合力大意味着固定相拉住它的力量大。亲合力小的则移动快。4根柱管实际上是一根，只是用来表示样品中各组分在不同瞬间的状态。 样品是由A、B、C3个组分组成的混合物。在载气刚将它们带入色谱柱时，三者是完全混合的，如状态(Ⅰ)。经过一定时间，即载气带着它们在柱中走过一段距离后，三者开始分离，如状态(Ⅱ)。再继续前进，三者便分离开，如状态(Ⅲ)和(Ⅳ)。固定相对它们的亲合力是A>B>C，故移动速度是C>B>A。走在前面的组分C首先进入紧接在色谱柱后的检测器，如状态(Ⅳ)，而后B和A也依次进入检测器。 检测器对每个进入的组分都给出一个相应的信号。将从样品注入载气为计时起点到各组分经分离后依次进入检测器，检测器给出对应于各组分的大信号(常称峰值)所经历的时间称为各组分的保留时间tr。

录井气在线气相色谱仪

Gengho耕禾节能环保检测服务部为客户提供以下服务： 一、耕禾节能环保根据客户行业确定VOCS的检测因子，负责提供相应的录井气在线气相色谱仪，所提供的产品各项指标满足当前国家标准的有关最新要求； 二、耕禾负责安装调试完成的在线监测仪后期7*24小时的运行维护，维护期间保持软件免费更新且技术上领先，在客户必要的情况下用较少的投资进行扩展； 三、应用领域：钻探油井、岩层录井气组分含量； 四、技术参数 典型谱图 录井气在线气相色谱仪的相关说明 VOCs（Volatile Organic Compounds）学名为挥发性有机物，其成分包括烃类、含氧烃、卤代烃、低沸点多环芳烃等多种类型，是环境空气主要污染物之一。VOCs 易引起光化学污染、大气雾霾，严重危害人体健康。控制VOCs 排放，是改善大气环境质量的有效手段之一。VOCs 主要来源于固定污染源排放，涉及行业包括喷涂行业、皮革行业、石油化工厂、印刷行业、污水/垃圾处理厂、加油站泄露、生物质、燃煤、半导体工业，冶金工业等。VOCs在线监测方法主要有气相色谱-火焰离子化检测法（GC-FID）、傅里叶红外法（FTIR）、光离子化检测法（PID）。 耕禾提供的VOCs在线监测系统满足或优于如下规范、标准的最新版本。如果几种规范和标准适用于同一情况，则应遵循最为严格的规范： HJ 732-2014《固定污染源废气挥发性有机物的采样气袋法》 HJ 733-2014《泄漏和敞开液面排放的挥发性有机物检测技术导则》 HJ 734-2014《固定污染源废气挥发性有机物的测定固相吸附-热脱附/气相色谱-质谱法》 HJ 718-2014《环境信息共享互联互通平台总体框架技术规范》 HJ 719-2014《环境信息系统数据库访问接口规范》 HJ 720-2014《环境信息元数据规范》 HJ 721-2014《环境数据集加工汇交流程》 HJ 722-2014《环境数据集说明文档格式》 HJ 723-2014《环境信息数据字典规范》

高效液相色谱法(HPLC)的概述

此帖与GC版的对应，是为了让大家更好的学习和了解LC 主要容包括： 1?高效液相色谱法（HPLC）的概述 2.髙效液相色谱基础知识介绍（1——13楼） 3.髙压液相色谱HPLC发展概况、特点与分类 4.液相色谱的适用性 5.应用 高效液相色谱法（HPLC）的概述 以高压液体为流动相的液相色谱分析法称高效液相色谱法（HPLC）。其基本方法是用高压泵将具有一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂泵入装有填充剂的色谱柱，经进样阀注入的样品被流动相带入色谱柱进行分离后依次进入检测器，由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色信号或进行数据处理而得到分析结果。 由于高效液相色谱法具有分离效能高、选择性好、灵敏度高、分析速度快、适用围广（样品不需气化，只需制成溶液即可）、色谱柱可反复使用的特点，在《中国药典》中有50种中成药的定量分析采用该法，已成为中药制剂含量测定最常用的分析方法。 高效液相色谱法按固定相不同可分为液-液色谱法和液-固色谱法；按色谱原理不同可分为分配色谱法（液-液色谱）和吸附色谱法（液-固色谱）等。 目前，化学键合相色谱应用最为广泛，它是在液一液色谱法的基础上发展起来的。将固定液的官能团键合在载体上，形成的固定相称为化学键合相，不易流失是其特点，一般认为有分配与吸附两种功能，常以分配作用为主。C18 （0DS）为最常使用的化学键合相。 根据固定相与流动相极性的不同，液-液色谱法又可分为正相色谱法和反相色谱法，当流动相的极性小于固定相的极性时称正相色谱法，主要用于极性物质的分离分析；当流动相的极

性大于固定相的极性时称反相色谱法，主要用于非极性物质或中等极性物质的分离分析。 在中药制剂分析中，大多采用反相键合相色谱法。 系统组成： （一）高压输液系统 由贮液维、脱气装置、高压辙液泵、过滤券、梯度洗脱装置等组成。 1.贮液罐 由玻璃、不锈钢或氟塑料等耐腐蚀材料制成。贮液謹的放置位置要高于泵体，以保持输液靜压差，使用过程应密闭，以防止因蒸发引起流动相组成改变，还可防止气体进入。 2.流动相 流动相常用甲醇-水或乙肠一水为底剂的溶剂系统。 流动相在使用前必须脱气，否则很易在系统的低压部分逸出气泡，气泡的出现不仅影响柱分离效率，还会影响检测器的灵敏度甚至不能正常工作。脱气的方法有加热回流法、抽真空脱气法、超声脱气法和在线真空脱气法等。 3.高压输液泵 是髙效液相色谱仪的关键部件之一，用以完成流动相的输送任务。对泵的要：耐腐蚀、耐高压、无脉冲、输出流量围宽、流速恒定，且泵体易于清洗和维修。高压输液泵可分为恒压泵和恒流泵两类，常使用恒流泵（其压力随系统阻力改变而流量不变）。 （二）进样系统 常用六通阀进样器进样，进样量由定量环确定。操作时先将进样器手柄置于釆样位置（L OAD）,此时进样口只与定量环接通，处于常压状态，用微量注射器（体积应大于定量环体积）注入样品溶液，样品停留在定量环中。然后转动手柄至进样位置（INJECT）,使定量环接入输液管路，样品由高压流动相带入色谱柱中。 （三）色谱柱 由柱管和填充剂组成。柱管多用不锈钢制成。柱填充剂有硅胶和化学键合固定相。在化学键合固定相中有十八烷基硅烷键合硅胶（又称ODS柱或C18柱）、辛烷基硅烷键合硅胶（C 8柱)、氨基或飢基键合硅胶等，在中药制剂的定量分析中，主要使用ODS柱。由于ODS属于非极性固

在线气相色谱分析仪尾气的集中回收

在线气相色谱分析仪尾气的集中回收 [摘要]随着石化行业对控制要求的提高，在线气相色谱分析仪得到广泛应用。由于在线气相色谱分析仪对于尾气控制要求较高，且尾气成分复杂，含有毒、腐蚀等各种成分，不能直排，所以需要一套尾气回收系统。本文将对这类在线气相色谱分析仪尾气回收系统的设计予以探讨以求解决方案。 [关键字]在线气相色谱分析仪；尾气回收系统 Summary:Alo ng with the exaltation of petrochemical profession to control request, on-line spirit mutually color table analysis the instrument get an extensive application.In order to being on-line to annoy mutually co lor table analysis instrument for tail spirit control have higher request, and the tail annoy compositio n complicated, imply po ison, decay etc. various composition, can not keep a row, so needing a set of tail to annoy recalls system.This text will be on-line to this spirit mutually color table analysis instrument tail the spirit recall system of the design give a study in order to the solution. Key word: On-line to annoy mutually color table analytical instrument；The tail spirit recalls system 随着石化行业及在线分析仪表的迅速发展，对于温度、压力的间接控制已不能满足日益提高的工艺控制要求，越来越多的石化装置在关键工艺点设置了各种在线分析仪已达到对工艺过程中特定组份的实时监控。其中的在线气相色谱分析仪，由于其可以同时对多种组份进行分析而得到了广泛的应用。目前通常的设置做法是将装置区内的

高效液相色谱基本常识

被分离组分在柱中的洗脱原理 Ⅱ基本概念和理论 一、基本概念和术语 1.色谱图和峰参数 ⊕色谱图（chromatogram）--样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号－时间曲线，又称色谱流出曲线（elution profile）. ⊕基线（base line）--流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。 ⊕噪音（noise）――基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。 ⊕漂移（drift）基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起，柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。 ⊕色谱峰（peak）--组分流经检测器时相应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称性正态分布曲线（高斯Gauss曲线）。不对称色谱峰有两种：前延峰（leading peak）和脱尾峰（tailing peak ）.前者少见。 ⊕拖尾因子（tailing factor,T）--T=B/A,用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子（symmetry factor）或不对称因子（asymmetry factor）《中国药典》规定T应为0.95～1.05。T<0.95为前延峰，T>1.05为拖尾峰。 ⊕峰底――基线上峰的起点至终点的距离。 ⊕峰高（Peak height,h）――峰的最高点至峰底的距离。 ⊕峰宽（peak width,W）--峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。W=4σ。⊕半峰宽（peak width at half-height,Wh/2）--峰高一半处的峰宽。W h/2＝2.355σ。 ⊕标准偏差（standard deviation, σ）--正态分布曲线x=±1时（拐点）的峰宽之半。正常峰宽的拐点在峰高的0.607倍处。标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。σ小，分散程度小、极点浓度高、峰形瘦、柱效高；反之，σ大，峰形胖、柱效低。 ⊕峰面积（peak area,A）――峰与峰底所包围的面积。A=×σ×h＝2.507σh=1.064Wh/2h 2.定性参数（保留值） ⊕死时间（dead time,t0）--不保留组分的保留时间。即流动相（溶剂）通过色谱柱的时间。在反相HPLC中可用苯磺酸钠来测定死时间。 ⊕死体积（dead volume,V0）――由进样器进样口到检测器流动池未被固定相所占据的空间。它包括4部分：进样器至色谱柱管路体积、柱内固定相颗粒间隙（被流动相占据，Vm）、柱出口管路体积、检测器流动池体积。其中只有Vm参与色谱平衡过程，其他3部粉只起峰扩展作用。为防止峰扩展，这3部分体积应尽量减小。V0＝F×t0（F为流速） ⊕保留时间（retention time,tR）--从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值的时间。⊕保留体积（retention volume,VR）--从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值时流出溶剂的体积。又称洗脱体积。VR＝F*tR . ⊕调整保留时间（adjusted retention time,tR’）--扣除死时间后的保留时间。也称折合保留时间（reduced retention time）。在实验条件（温度、固定相等）一定时，tR’只决定于组分的性质，因此，tR’(或tR)可用于定性。TR’=tR-t0 ⊕调整保留体积（adjusted retention volume,VR’）--扣除死体积后的保留体积。VR=VR-V0 或VR=F*tR’ 3.柱效参数 ⊕理论塔板数（theoretical plate number,N）用于定量表示色谱柱的分离效率（简称柱效）。 N取决于固定相的种类、性质（粒度、粒径分布等）、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。如果峰形对称并符合正态分布，N可近似表示为： N=（tR/σ）2=16(tR)2/W =5.54(tR/W1/2)2 W：峰宽；σ：曲线拐点处峰宽的一半，即峰高0.607处峰宽的一半。 N为常量时，W随tR成正比例变化。在一张多组分色谱图上，如果各组份含量相当，则后洗脱的峰比前面的峰要逐渐加宽，峰高则逐渐降低。 用半峰宽计算理论塔板数比用峰宽计算更为方便和常用，因为半峰宽更容易准确测定，尤其是对稍有拖尾的峰。

TGC2000-AF在线气相色谱仪

TGC2000-AF 在线气相色谱分析仪
1. 简介 TGC2000-AF 在线气相色谱分析仪是为分析液氧和液空微量碳氢化合物(C1～C4)设计的仪 器。主要用于监测空分工艺中的甲烷、乙烷、乙烯、丙烷、乙炔、正丁烷、异丁烷、丙烯等组分。 该仪器配备高灵敏度的火焰离子化检测器。该仪器不经过样品浓缩，能够直接测定液氧和液空 中低至 0.1ppm 的乙炔含量。 2. 主要技术指标 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 检测限：对气体中乙炔的检测限≤0.05ppm； 。 检测组份：甲烷、乙烷、乙烯、丙烷、乙炔、正丁烷、异丁烷、丙烯、 1，3-丁二烯； 检测器最高使用温度：200℃； 色谱柱最高使用温度：50℃（严禁超温）； 线性动态范围：1×105； 线性度：±2%； 输入高阻： 109?； 基流补偿电压：±15V连续可调； 数据传输：RJ45 8芯网络线或10组4～20毫安的信号接口 工作环境温度：－5℃～45℃； 电源电压：～220V±2% , 50HZ±2.5Hz； 仪器外形尺寸：500（长）×482.6（宽）×219.5（高）； 仪器功率：≤1000w。
3．仪器适用范围 ? ? 液氧和液空中烃类的检测； 更换色谱柱，对气体中总烃含量的分析。
4．成套分析仪器推荐配置 成套分析仪器推荐配置如下表： 序 设备名称 1 2 3 4 5 6 7 在线气相色谱分析仪 色谱工作站 计算机 气体标准样品 氢气 空气 取样阀 Q5 型号 TGC-2000AF ZB2010 —— AL8 数量 1套 1套 1套 1瓶 1套 1套 1套 配套分析取样用 备注 含色谱仪主机及常用备件 配套色谱仪用，只含数据采集卡和软件； 双通道同时工作。 含计算机和打印机。配套色谱工作站使用 氧中 5 组分，含瓶


工业在线气相色谱分析仪基础知识问答

1、什么叫担体？作用是什么？ 答：担体又称载体，在分配型色谱柱中，为了使固定液与流动相之间有可能界面通常将固定液均匀地涂渍在具有多孔结构的惰性支承的表面上，形成一层很薄的高沸点、有机化合物液膜，该惰性支承体称为担体。 2、气固柱的填充吸附剂有哪些？ 答：常用的吸咐剂有活性碳，分子筛，活性氧化铝，石墨化碳，膨润土，高分子小球等。 3、影响色谱柱分离度[固定相已固定]的主要因素有哪些？ 答：(1)、色谱长度和填料的性质，色谱柱越长，组分之间分辩效果越好，但色谱柱越长压降越大，而输入的压力是有限的。色谱柱过长会增大进出口压力比，相反会降低分离度。 (2)、色谱柱填料颗粒大小也是主要因素，粒子越细，由于表面积增加，分辩效果越好，但是颗粒细会增大柱压降，也会起反作用。 (3)、柱温对分辩效果也有很大影响，因为气体在液体中的溶解度或在固体表面的吸附程度都随温度增高而降低，在气液色谱分析中，当超过一定温度时，静态的液体通常会从色谱柱中挥发掉，所以选择柱温时应考虑到样品的沸点。一般是略低于样品沸点的平均值。 (4)、载气种类的影响。常用的载气有N2、H2、He、Ar等，其中H2、He气的分子量较小，有利于提高分析速度，但浓度较高的介质易在其间形成扩散，影响分离度，所以在实际测量中H2、He气体一般都用在介质浓度较低的区域并提高其流速，减少扩散的影响。N2、Ar等分子量较大的气体的优点是扩散作用小，缺点是在柱中压降大流速慢，即分析周期长。 (5)、载气流速的影响。介质在固定相上的滞留时间，主要取决于介质自身的特性(挥发性，极性等)和载气的流速。所以流速快慢直接影响分离度。 (6)、进样时间和进样量的影响。进样时间应尽量短，原则上的瞬间进样会提高分离度。进样量应尽量小，但应使检测器能够识别。 4、提高柱的分离度要求哪些条件？ 答：较低的进出口压力、小的容积、较低的柱温(柱温每升高30℃保留时间减少一半)、小的柱径、比较小的进样量、分子量大的载气（扩散小)、装柱均匀。 5、色谱的几种分离方法？ 答：冲洗法－－用载气做流动相样品在短时间内定量注入。 顶替法－－样品先进入柱内，然后用顶替剂顶替出柱。 迎头法－－将样品当作流动相连续进入色谱柱。 6、样品在固定相上基于哪些作用进行分离的？ 答：主要基于挥发性，极性，和特殊作用，还有是否含有氢离子等。 7、色谱检测器的种类？ 答：热导型检测器(TCD)，氢火焰离子检测器(FID)，氦离子化式检测器，电子捕获式检测器(ECD)，火焰光度式检测器(FPD)，密度天平式检测器，截面积离子化式检测器。 8、色谱柱的种类？ 答：按其功能分为分配柱(分离柱)和吸附柱。按极性分极性柱和非极性柱。极性柱：同沸点物质非极性键早于极性键物质出柱。非极性柱：非极性物质按沸点高低分离、同沸点物质极性键早于非极性键物质出柱。 9、工业用色谱柱有哪些特殊要求？ 答：对担体的要求：(1)、具有化学惰性和无吸附性。(2)、多孔性、提供一个大的支撑表面。(3)、能牢固地与固定液结合。(4)、机械强度要好。(5)、颗粒均匀。 对柱系统的要求：(1)、样品中的所有组份应能定量分离，并能在每周期内完成出柱。(2)、

高效液相色谱

高效液相色谱仪简介 系别：应用化学系 专业班级：应用化工技术0921 姓名：曹晋波 指导教师：贺永强 运城学院 2012年 5 月

高效液相色谱仪 摘要：高效液相色谱仪高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。 关键词：流动相，色谱柱(固定相)，吸附，解吸 1 前言 高效液相色谱（high performance liquid chromatography, HPLC）也叫高压液相色谱（high pressure liquid chromatography）、高速液相色谱（high speed liquid chromatography）、高分离度液相色谱（high resolution liquid chromatography）等。液相色谱分析是指流动相为液体的色谱技术,是色谱法中最古老的一种,但通过改进填料的粒度及柱压,在经典的液相柱色谱的基础上引入了气相色谱的塔板理论,在技术上采用了高压输液泵,高效固定相和高灵敏度的检测器,实现了分析速度快、分离效率高和操作自动化,这种色谱技术被称为高效液相色谱法是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱。又因分析速度快而称为高速液相色谱。 1．1 高效液相色谱发展 1960年代，由于气相色谱对高沸点有机物分析的局限性，为了分离蛋白质、核酸等不易气化的大分子物质，气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。1971年科克兰等人出版了《液相色谱的现代实践》一书，标志着高效液相色谱法(HPLC)正式建立。在此后的时间里，高效液相色谱成为最为常用的分离和检测手

气相色谱试卷

气相色谱试卷 答卷人：评分： 一、填空（每空1分，，共20分） 1.装柱老化时，应将柱的入口端与色谱仪的气化室相连接（柱不能接反，否则固定相将在柱中移动，使柱效发生变化）。开始老化时出口不得接检测器，以免流出物沾污检测器。 2.色谱分析各组分保留时间变短和分离变坏，说明柱子失效，原因来自样品和载气的污染。活化的方法是提高柱温，增加载气流速，让色谱柱内污染物流出。 3.载气纯度不符合要求时，会使基线不稳，噪声大。 4.氢气表和氢气钢瓶嘴是反扣螺纹，逆时针方向松开；而氮气表和氮气瓶嘴及其他气体的瓶嘴都是正扣螺纹。 5.气相色谱定量方法有归一化法、内标法、外标法等方法。 6.色谱仪检定时实验室内不得存放与实验无关的易燃和易爆，无强烈机械振动 和电磁干扰。 7.检定中所需流量计测量不确定度≤1%。 8.氢火焰离子化检测器和热导池检测器分别属于_质量型__和_温度型检测器。 气相色谱仪的心脏是_色谱柱___。 9.色谱法中，将填入玻璃管内静止不动的一相称为固定相，自上而下运动的 一相称为流动相，装有固定相的柱子称为色谱柱。 二、选择题（每题2分，共20分） 1.以下检测器属于质量型检测器的有（B）。

Ａ、ＴＣＤＢ、ＦＰＤＣ、ＥＣＤ 2.在气相色谱分析中,用于定性分析的参数是 (A) A保留值 B峰面积 C分离度 D半峰宽 3.在气相色谱分析中,用于定量分析的参数是 (D) A保留时间 B保留体积 C半峰宽 D峰面积 4.良好的气-液色谱固定液为 (D) A蒸气压低、稳定性好 B化学性质稳定 C溶解度大,对相邻两组分有一定的分离能力 D A、B和C 5.使用热导池检测器时,应选用下列哪种气体作载气,其效果最好？ (A) A H2 B He C Ar D N2 6.试指出下列说法中,哪一个不正确?气相色谱法常用的载气是 (C) A氢气 B氮气 C氧气 D氦气 7.色谱体系的最小检测量是指恰能产生与噪声相鉴别的信号时 (B) A进入单独一个检测器的最小物质量 B进入色谱柱的最小物质量 C组分在气相中的最小物质量 D组分在液相中的最小物质量 8.在气-液色谱分析中,良好的载体为 ( D ) A粒度适宜、均匀,表面积大 B表面没有吸附中心和催化中心C化学惰性、热稳定性好,有一定的机械强度 D A、B和C 9.热导池检测器是一种 ( A ) A浓度型检测器 C只对含碳、氢的有机化合物有响应的检测器B质量型检测器 D只对含硫、磷化合物有响应的检测器 10.使用氢火焰离子化检测器,选用下列哪种气体作载气最合适？ ( D)