分子生物学葵花宝典

一、名词解释

1、基因：能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列，是决定遗传性状的功能单位。

2、基因组：细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和。

3、端粒：以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。该

结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体，仅在真核细胞染色体末端存在。4、操纵子：是指数个功能上相关的结构基因串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控

区（包括启动子和操纵基因）以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位，所转录的RNA为多顺反子。

5、顺式作用元件：是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和

结合的特异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。

6、反式作用因子：是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调

节基因转录活性的蛋白质因子。

7、启动子：是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。

8、增强子：位于真核基因中远离转录起始点，能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序

列。它可位于被增强的转录基因的上游或下游，也可相距靶基因较远。

9、基因表达：是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程，

合成特定的蛋白质，进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。

10、信息分子：调节细胞生命活动的化学物质。其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动

的化学物质称为细胞间信息分子；而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子。

11、受体：是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合，进而发

生生物学效应的的特殊蛋白质。

12、分子克隆：在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组，将重组分子导

入合适宿主，使其在宿主中扩增和繁殖，以获得该DNA分子的大量拷贝。

13、蛋白激酶：是指能够将磷酸集团从磷酸供体分子转移到底物蛋白的氨基酸受体上的

一大类酶。

14、蛋白磷酸酶：是具有催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分

子，与蛋白激酶相对应存在，共同构成了磷酸化和去磷酸化这一重要的蛋白质活性的开关系统。

15、基因工程：有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状

的系列过程。

16、载体：能在连接酶的作用下和外源DNA片段连接并运送DNA分子进入受体细胞的

DNA分子。

17、转化：指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程。

18、感染：以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子，在体外经过包

装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。19、转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间

通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程。

20、转染：指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。

21、DNA变性：在物理或化学因素的作用下，导致两条DNA链之间的氢键断裂，而核酸

分子中的所有共价键则不受影响。

22、DNA复性：当促使变性的因素解除后，两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形

成DNA双螺旋结构。

23、退火：指将温度降至引物的T M值左右或以下，引物与DNA摸板互补区域结合形成

杂交链。

24、筑巢PCR：先用一对外侧引物扩增含目的基因的大片段，再用内侧引物以大片段为

摸板扩增获取目的基因。可以提高PCR的效率和特异性。

25、原位PCR：以组织固定处理细胞内的DNA或RNA作为靶序列，进行PCR反应的过程。

26、定量PCR：基因表达涉及的转录水平的研究常需要对mRNA进行定量测定，对此采

用的PCR技术就叫定量PCR。

27、基因打靶：是指通过DNA定点同源重组，改变基因组中的某一特定基因，从而在生

物活体内研究此基因的功能。

28、DNA芯片：DNA芯片技术是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量的

DNA探针以显微打印的方式有序地固化于支持物表面，然后与标记的样品杂交，通过对杂交信号的检测分析，即可获得样品的遗传信息。由于常用计算机硅芯片作为固相支持物，所以称为DNA芯片。

29、错义突变：DNA分子中碱基对的取代，使得mRNA的某一密码子发生变化，由它所

编码的氨基酸就变成另一种的氨基酸，使得多肽链中的氨基酸顺序也相应的发生改变的突变。

30、无义突变：由于碱基对的取代，使原来可以翻译某种氨基酸的密码子变成了终止密

码子的突变。

31、同义突变：碱基对的取代并不都是引起错义突变和翻译终止，有时虽然有碱基被取

代，但在蛋白质水平上没有引起变化，氨基酸没有被取代，这是因为突变后的密码子和原来的密码子代表同一个氨基酸的突变。

32、移码突变：在编码序列中，单个碱基、数个碱基的缺失或插入以及片段的缺失或插

入等均可以使突变位点之后的三联体密码阅读框发生改变，不能编码原来的蛋白质的突变。

33、癌基因：是细胞内控制细胞生长的基因，具有潜在的诱导细胞恶性转化的特性。当

癌基因结构或表达发生异常时，其产物可使细胞无限制增殖，导致肿瘤的发生。包括病毒癌基因和细胞癌基因。

34、细胞癌基因：存在于正常的细胞基因组中，与病毒癌基因有同源序列，具有促进正

常细胞生长、增殖、分化和发育等生理功能。在正常细胞内未激活的细胞癌基因叫原癌基因，当其受到某些条件激活时，结构和表达发生异常，能使细胞发生恶性转化。35、病毒癌基因：存在于病毒（大多是逆转录病毒）基因组中能使靶细胞发生恶性转化

的基因。它不编码病毒结构成分，对病毒无复制作用，但是当受到外界的条件激活时可产生诱导肿瘤发生的作用。

36、基因诊断：以DNA或RNA为诊断材料，通过检查基因的存在、结构缺陷或表达

异常，对人体的状态和疾病作出诊断的方法和过程。

37、RFLP：即限制性片段长度多态性，个体之间DNA的核苷酸序列存在差异，称为

DNA多态性。若因此而改变了限制性内切酶的酶切位点则可导致相应的限制性片段的长度和数量发生变化，称为RFLP。

38、基因治疗：一般是指将限定的遗传物质转入患者特定的靶细胞，以最终达到预防或

改变特殊疾病状态为目的治疗方法。

39、反义RNA：碱基序列正好与有意义的mRNA互补的RNA称为反义RNA。可以作为一

种调控特定基因表达的手段。

40、核酶：是一种可以催化RNA切割和RNA剪接反应的由RNA组成的酶，可以作为基因

表达和病毒复制的抑制剂。

41、三链DNA：当某一DNA或RNA寡核苷酸与DNA高嘌呤区可结合形成三链，能特异地

结合在DNA的大沟中，并与富含嘌呤链上的碱基形成氢键。

42、SSCP：单链构象多态性检测是一种基于DNA构象差别来检测点突变的方法。相同长

度的单链DNA，如果碱基序列不同，形成的构象就不同，这样就形成了单链构象多态性。

43、管家基因：在生物体生命的全过程都是必须的，且在一个生物个体的几乎所有细胞

中持续表达的基因。

44、细胞全能性：指同一种生物的所有细胞都含有相同的DNA，即基因的数目和种类是

一样的，但在不同阶段，同一个体的不同组织和器官中基因表达的种类和数目是不同的。

45、SD序列：转录出的mRNA要进入核糖体上进行翻译，需要一段富含嘌呤的核苷酸序

列与大肠杆菌16S rRNA3，末端富含嘧啶的序列互补，是核糖体的识别位点。

46、反义核酸技术：是通过合成一种短链且与DNA或RNA互补的，以DNA或RNA为目标

抑制翻译的反义分子，干扰目的基因的转录、剪接、转运、翻译等过程的技术。

47、核酸探针：探针是指能与某种大分子发生特异性相互作用，并在相互作用之后可以

检测出来的生物大分子。核酸探针是指能识别特异碱基顺序的带有标记的一段DNA或RNA分子。

48、周期蛋白：是一类呈细胞周期特异性或时相性表达、累积与分解的蛋白质，它与周

期素依赖性激酶共同影响细胞周期的运行。

49、CAP：是大肠杆菌分解代谢物基因活化蛋白，这种蛋白可将葡萄糖饥饿信号传递个

许多操纵子，使细菌在缺乏葡萄糖时可以利用其他碳源。

50、顺反子

51、结构域

52、

二、问答题

（一）、病毒、原核、真核基因组的特点？

答：1、病毒基因组的特点：

①种类单一；②单倍体基因组：每个基因组在病毒中只出现一次；③形式多样；④大

小不一；⑤基因重叠；⑥动物/细菌病毒与真核/原核基因相似：内含子；⑦具有不

规则的结构基因；⑧基因编码区无间隔：通过宿主及病毒本身酶切；⑨无帽状结构；

⑩结构基因没有翻译起始序列。

2、原核基因组的特点：

①为一条环状双链DNA；②只有一个复制起点；③具有操纵子结构；④绝大部分为单拷

贝；⑤可表达基因约50%，大于真核生物小于病毒；⑥基因一般是连续的，无内含子；

⑦重复序列很少。

3、真核基因组的特点：

①真核生物基因组远大于原核生物基因组，结构复杂，基因数庞大，具有多个复制起点；

②基因组DNA与蛋白质结合成染色体，储存于细胞核内；③真核基因为单顺反子，而

细菌和病毒的结构基因多为多顺反子；④基因组中非编码区多于编码区；⑤真核基因多为不连续的断裂基因，由外显子和内含子镶嵌而成；⑥存在大量的重复序列；⑦功能相关的基因构成各种基因家族；⑧存在可移动的遗传因素；⑨体细胞为双倍体，而精子和卵子为单倍体。

（二）、乳糖操纵子的作用机制？

答：1、乳糖操纵子的组成：大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶，此外还有一个操纵序列O，一个启动子P和一个调节基因I。

2、阻遏蛋白的负性调节：没有乳糖存在时，I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O 处，乳糖操纵子处于阻遏状态，不能合成分解乳糖的三种酶；有乳糖存在时，乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构，不能结合于操纵序列，乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。所以，乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。

3、CAP的正性调节：在启动子上游有CAP结合位点，当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时，cAMP浓度升高，与CAP结合，使CAP发生变构，CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点，激活RNA聚合酶活性，促进结构基因转录，调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录，对乳糖操纵子实行正调控，加速合成分解乳糖的三种酶。

4、协调调节：乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制，互相协调、互相制约。

（三）、真核生物转录水平的调控机制？

答：真核生物在转录水平的调控主要是通过反式作用因子、顺式作用元件和RNA聚合酶的相互作用来完成的，主要是反式作用因子结合顺式作用元件后影响转录起始复合物的形成过程。

1、转录起始复合物的形成：真核生物RNA聚合酶识别的是由通用转录因子与DNA形

成的蛋白质-DNA复合物，只有当一个或多个转录因子结合到DNA上，形成有功能的启动子，才能被RNA聚合酶所识别并结合。

转录起始复合物的形成过程为：T FⅡD结合TATA盒；RNA聚合酶识别并结合T F ⅡD-DNA复合物形成一个闭合的复合物；其他转录因子与RNA聚合酶结合形成一个开放复合物。

在这个过程中，反式作用因子的作用是：促进或抑制T FⅡD与TATA盒结合；促进或抑制RNA聚合酶与T FⅡD-DNA复合物的结合；促进或抑制转录起始复合物的形成。

2、反式作用因子：一般具有三个功能域（DNA识别结合域、转录活性域和结合其他蛋

白结合域）；能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件；对基因的表达有正性或负性调控作用。

3、转录起始的调控：

?反式作用因子的活性调节：①表达式调节——反式作用因子合成出来就具有活性；

②共价修饰——磷酸化和去磷酸化，糖基化；③配体结合——许多激素受体是反式

作用因子；④蛋白质与蛋白质相互作用——蛋白质与蛋白质复合物的解离与形成。

?反式作用因子与顺式作用元件的结合：反式作用因子被激活后，即可识别并结合上游启动子元件和增强子中的保守性序列，对基因转录起调节作用。

?反式作用因子的作用方式——成环、扭曲、滑动、Oozing。

?反式作用因子的组合式调控作用：每一种反式作用因子结合顺式作用元件后虽然可以发挥促进或抑制作用，但反式作用因子对基因调控不是由单一因子完成的而是几种因子组合发挥特定的作用。

（四）、真核生物转录后水平的调控机制？

答：（1）、5，端加帽和3，端多聚腺苷酸化的调控意义：5，端加帽和3，端多聚腺苷酸化是保持mRNA稳定的一个重要因素，它至少保证mRNA在转录过程中不被降解。

（2）、mRNA选择性剪接对基因表达调控的作用

（3）、mRNA运输的控制

（五）、受体的特点？

答：1、高度专一性；2、高度亲和性；3、可逆性；4、可饱和性；5、特定的作用模式

（六）、表皮生长因子介导的信号传导途径？

答：表皮生长因子受体是一个典型的蛋白酪氨酸激酶受体，这个信号转导途径的主要步骤是：1、受体二聚化的形成及其磷酸化：表皮生长因子与受体的结合使受体发生二聚化，从而

改变受体构象，使蛋白酪氨酸激酶活性增强，受体自身的几个蛋白酪氨酸残基在激酶的作用下发生磷酸化。

2、募集接头蛋白Grb2：表皮生长因子受体自身被磷酸化后，不仅其激酶活性增强，而且

其构象发生变化，从而适合与含SH2结构域的蛋白分子相结合。Grb2是作为接头蛋白结合到受体上。

3、调控分子SOS的活化：SOS含有可与SH3结构域相结合的富含脯氨酸基序，当Grb2

结合到磷酸化的表皮生长因子受体后，它的两个SH3结构域即可结合SOS，使之活化。

4、低分子量G蛋白Ras的活化：SOS可促进Ras释放GDP，结合GTP的反应，使Ras激

活。活化的Ras作用其下游分子Raf，使之活化。Raf是MAPK级联反应的第一个分子，由此启动了MAPK的三级激活过程。

5、MAPK的级联激活：Raf是一种MAPKKK，它作用于MEK，使之磷酸化而激活，活化的MEK

在作用于MAPK家族的ERK1，使之磷酸化激活由此完成了三级激活。

6、转录因子的磷酸化及转录调控作用：活化的ERK可以转至细胞核内，使某些转录调控

因子发生磷酸化，从而影响基因的转录。

（七）、cAMP信号转导途径？

答：1、组成：胞外信息分子（主要是胰高血糖素、肾上腺素和促肾上腺皮质激素），受体，G蛋白，AC，cAMP , PKA。

2、途径：

信号分子与受体结合，引起受体构象变化

受体活化G蛋白

活化后的G蛋白激活腺苷酸环化酶（AC）

AC催化ATP生成cAMP

cAMP活化PKA，PKA使目标蛋白磷酸化，调节代谢酶的活性或调节基因的表达（八）、IP3-Ca2+信号途径：

信号分子与受体结合，引起受体构象变化

受体活化G蛋白

活化后的G蛋白激活PLC

PLC水解PIP2生成IP3 和DG

IP3 使钙通道打开，细胞内Ca2+升高

Ca2+与CaM结合，激活Ca2+-CaM依赖的蛋白激酶

Ca2+-CaM依赖的蛋白激酶使目标蛋白磷酸化。

（九）、分子克隆中常用的工具酶及良好载体的条件？

答：（1）、常用的工具酶

1、限制性核酸内切酶：是细菌产生的一类能识别和切割双链DNA分子内特定的碱基

顺序的核酸水解酶。

2、DNA连接酶：将两段DNA分子拼接起来的酶。

3、DNA聚合酶：催化单核苷酸链延伸。

4、逆转录酶：依赖于RNA的DNA聚合酶，这是一种有效的转录RNA成为DNA的酶，

产物DNA又称互补DNA。

5、末端脱氧核糖核酸转移酶：将脱氧核糖核酸加到DNA的3末端。

6、碱性磷酸酶：催化去除DNA、RNA等的5磷酸基团。

7、依赖DNA的RNA聚合酶：识别特异性启动子，RNA转录。

（2）、良好载体的条件

1、必须有自身的复制子；

2、载体分子上必须有限制性核酸内切酶的酶切位点，即多克隆位点，以供外源DNA插入；

3、载体应具有可供选择的遗传标志，以区别阳性重组子和阴性重组子；

4、载体分子必须有足够的容量；

5、可通过特定的方法导入细胞；

6、对于表达载体还应具备与宿主细胞相适应的启动子、前导顺序、增强子、加尾信号等DNA调控元件。（十）、蓝-白筛选的原理？

答：某些质粒带有大肠杆菌的半乳糖苷酶基因片段，在半乳糖苷酶基因的基因区外又另外引入了一段含多种单一限制酶位点的DNA序列。这些位点上如果没有克隆外源性DNA片段，在质粒被导入lac-的大肠杆菌后，质粒携带的半乳糖苷酶基因将正常表达，与大肠杆菌的半乳糖苷酶基因互补，产生有活性的半乳糖苷酶，加入人工底物X-gal和诱导剂IPTG后，出现蓝色的菌落。如果在多克隆位点上插入外源DNA片段，将使lac Z基因灭活，不能生成半乳糖苷酶，结果菌落出现白色。由于这种颜色标志，重组克隆和非重组克隆的区分一目了然。（十一）SANGER双脱氧链终止法的原理？

答：DNA链中核苷酸以3’,5’-磷酸二酯键连接，合成DNA所用的底物是 2’-脱氧核苷三磷酸。2’,3’ddNTP与普通dNTP不同，它们在脱氧核糖的3’位置缺少一个羟基。在DNA 聚合酶作用下通过三磷酸基团掺入到延伸的DNA链中，但由于没有3’羟基，不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键，因此，正在延伸的DNA链不能继续延伸。在DNA合成反应混合物的4种普通dNTP中加入少量的一种ddNTP，链延伸将与偶然发生但却十分特异的链终止竞争，产物是一系列的核苷酸链，其长度取决于引物末端到出现过早链终止位置间的距离。在4组独立酶反应中分别采用4种不同的ddNTP，结果将产生4组寡核苷酸，它们将分别终止于模板链的A、C、G或T位置。

（十二）、核酸分子杂交的原理？

答：具有互补序列的两条单链核酸分子在一定的条件下（适宜的温度及离子强度等）碱基互补配对结合，重新形成双链；在这一过程中，核酸分子经历了变性和复性的变化，以及在复性过程中个分子间键的形成和断裂。杂交的双方是待测核酸和已知序列。

（十三）、影响杂交的因素？

答：1、核酸分子的浓度和长度：核酸浓度越大，复性速度越快。探针长度应控制在50-300个碱基对为好。

2、温度：温度过高不利于复性，而温度过低，少数碱基配对形成的局部双链不易解离，适宜的温度是较T

值低25度。

M

3、离子强度：在低离子强度下，核酸杂交非常缓慢，随着离子强度的增加，杂交反应率增加。高浓度的盐使碱基错配的杂交体更稳定，所以进行序列不完全同源的核酸分子杂交时必须维持杂交反应液中的盐浓度和洗膜液中的盐浓度。

4、杂交液中的甲酰胺：甲酰胺能降低核酸杂交的T

值。它有以下优点：在低温下探针

M

更稳定；能更好地保留非共价结合的核酸。

5、核酸分子的复杂性：是指存在于反应体系中的不同顺序的总长度。两个不同基因组DNA变性后的相对杂交速率取决于样品浓度绝对一致时的相对复杂性（即DNA中的碱基数）。

6、非特异性杂交反应：在杂交前应对非特异性杂交反应位点进行封闭，以减少其对探针的非特异性吸附作用。

（十四）、探针的种类和优缺点？

答：1、cDNA探针：通过逆转录获得cDNA后，将其克隆于适当的克隆载体，通过扩增重组质粒而使cDNA得到大量的扩增。提取质粒后分离纯化作为探针使用。它是目前应用最为广泛的一种探针。

2、基因组探针：从基因组文库里筛选得到一个特定的基因或基因片段的克隆后，大量扩增、纯化，切取插入片段，分离纯化为探针。

3、寡核苷酸探针：根据已知的核酸顺序，采用DNA合成仪合成一定长度的寡核苷酸片段作为探针。

4、RNA探针：采用基因克隆和体外转录的方法可以得到RNA或反义RNA作为探针。（十五）、探针的标记法？

答：1、缺口平移法：此法是利用适当浓度的DNase Ⅰ在DNA双链上随机切割单链，造成单链切口。切口处产生一个5末端和3末端，3末端就可以作为引物，在大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的催化下，以互补的DNA单链为摸板，依次将dNTP连接到切口的3末端的羟基上，合成新的DNA单链；同时DNA聚合酶Ⅰ的5→3的核酸外切酶活性在切口处将旧链从5末端逐步切除，新合成链不断延伸，从而使原DNA分子上的部分核苷酸残基被标记的核苷酸所取代。

2、随机引物法：随机引物是人工合成的长度为6个寡核苷酸残基的寡聚核苷酸片段的混合物。对于任何一个用作探针的DNA片段，随机引物混合物中都会有一些六核苷酸片段可以与之结合，起到DNA合成引物的作用。将这些引物与变性的DNA单链结合后，以4种dNTP （其中一种是标记物标记的dNTP）为底物，合成与探针DNA互补的切带有标记物的DNA探针。

3、PCR标记法：在PCR反应底物中，将一种dNTP换成标记物标记的dNTP，这样标记的dNTP就在PCR反应的同时掺入到新合成的DNA链上。

4、末端标记法：只是将DNA片段的一端进行标记。

（十六）、PCR的基本原理？

答：PCR是在试管中进行的DNA复制反应，基本原理是依据细胞内DNA半保留复制的机理，以及体外DNA分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质，人为地控制体外合成系统的温度，以促使双链DNA变成单链，单链DNA与人工合成的引物退火，然后耐热DNA聚合酶以dNTP为原料使引物沿着单链模板延伸为双链DNA。PCR全过程每一步的转换是通过温度的改变来控制的。需要重复进行DNA模板解链、引物与模板DNA结合、DNA聚合酶催化新生DNA 的合成，即高温变性、低温退火、中温延伸３个步骤构成PCR反应的一个循环，此循环的反复进行，就可使目的DNA得以迅速扩增。DNA模板变性：模板双链DNA→单链DNA，94℃。退火：引物＋单链DNA→杂交链，引物的Tm值。引物的延伸：温度至70 ℃左右， Taq DNA 聚合酶以４种dNTP为原料，以目的DNA为模板，催化以引物３’末端为起点的5’→3’DNA 链延伸反应，形成新生DNA链。新合成的引物延伸链经过变性后又可作为下一轮循环反应的模板PCR，就是如此反复循环，使目的DNA得到高效快速扩增。

（十七）、PCR引物设计的基本要求？

答：1、引物长度一般为15～30个核苷酸。过短影响PCR的特异性，过长会提高相应退火温度，使延伸温度超过TaqDNA聚合酶最适温度74℃,影响产物的生成。

2、引物的碱基尽可能随机，避免出现嘌呤、嘧啶碱基堆积现象。3’端不应有连续3个G和C。否则会使引物和模板错误配对。G+C含量一般占45％ -55％。3’端和5’端引物具有相似的Tm值,Tm值计算公式：Tm＝4(G+C)+ 2(A+T)

3、引物自身不应存在互补序列以避免折叠成发夹结构。引物的连续互补序列，一般不超过3bp。

4、两个引物之间不应存在互补序列，尤其应避免3’端的互补重叠。

5、引物与非特异扩增区的序列的同源性不超过70％，引物3’末端连续8个碱基在待扩增区以外不能有完全互补序列，否则易导致非特异性扩增。

6、引物3’端碱基是引发延伸的起点，因此一定要与模板DNA配对。引物3’端最佳碱基选择是G和C，形成的碱基配对比较稳定。

7、引物与模板结合时，引物的5’端最多可以游离十几个碱基而不影响PCR反应的进行。

8、引物的5’端可以修饰，如附加限制酶位点，引入突变位点，用生物素、荧光物质、地高辛标记，加入其它短序列包括起始密码子、终止密码子等。

（十八）、PCR的反应条件？

答：1、PCR反应的缓冲液：

●Tris-HCl缓冲液

●KCl 促进引物的退火，浓度太高时会抑制Taq DNA聚合酶活性。

●加入BSA或明胶有利于保护TaqDNA聚合酶活性。

●必要时加入适量二甲基亚砜(DMSO)或甲酰胺利于破坏模板二级结构，提高PCR反应

特异性。

2、镁离子浓度一般用量1.5-2.0 mmol/L，Taq DNA聚合酶活性需要Mg 2+。Mg 2+浓

度过低，会显著降低酶活性。Mg 2+浓度过高又使酶催化非特异性扩增增强。Mg 2+浓度还会影响引物的退火、模板与PCR产物的解链温度，从而影响扩增片段的产率。

3、底物浓度工作浓度20-200umol/L， dNTPs浓度过高可加快反应速度，也增加碱基的错配率和实验成本。降低浓度会导致反应速度下降，可提高反应的特异性。在PCR反应中，4种dNTP必须以等摩尔浓度配制，以减少PCR反应的错配误差并提高使用效率。

4、Taq DNA聚合酶 75-80℃时具有最高的聚合酶活性，150个核苷酸/秒；具有良好的热稳定性，95℃仍有活性，应用浓度一般为1-2.5u/100ul反应体积。

5、引物 0.1-0.5umol/L。引物浓度偏高会引起错配或非特异性扩增、生成引物二聚体，使目的DNA片段产率下降。退火温度与引物Tm值有关，引物Tm值在55-80 ℃范围较为理想。

6、反应温度和循环次数

（十九）、影响大肠杆菌系统外源基因表达的因素？

答：1、启动子的强弱；2、基因的剂量；3、影响RNA转录和翻译效率的因素：SD序列、mRNA；

4、外源基因密码子的选择；

5、表达产物的大小；

6、表达产物的稳定性。

（二十）、大肠杆菌系统表达外源基因必须具备的条件？

答：1、要求外源基因的编码区不能含有内含子；

2、表达的外源片段要位于大肠杆菌启动子的下游，并形成正确的阅读框架；

3、转录出的mRNA必须有与大肠杆菌16S rRNA3，末端相匹配的SD序列，才能被有效的翻译成蛋白质。

4、蛋白产物必须稳定，不易被细胞内蛋白酶快速降解，且对宿主无害。

（二十一）、真核细胞表达外源基因的条件？

答：1、首先必须具备哺乳动物细胞表达的功能元件。要求哺乳动物细胞表达载体带有能在真核细胞中表达外源基因的真核转录调控元件；

2、注意选择转染的受体细胞，不同类型的细胞具有不同的特性；

3、注意选择适当的选择标记。

（二十二）、转基因动物的概念、原理及应用？

答：1、概念：是指用人工方法将外源基因导入或整合到基因组内，并能稳定传代的一类动物。它的特点是“分子及细胞水平操作，组织及动物整体水平表达”。

2、基本原理：将目的基因或基因组片段用显微注射等方法注入实验动物的受精卵或着床前的胚胎细胞中，使目的基因整合到基因组中，然后将此受精卵或着床前的胚胎细胞再植入受体动物的输卵管或子宫中，使其发育成携带有外源基因的转基因动物，人们可以通过分析转基因和动物表型的关系，揭示外源基因的功能；也可以通过转入外源基因培育优良的动

物品种。

3、应用：建立用于研究外源基因表达调控体系；建立医学中常用的疾病模型；培育动物新品种；药理学和药用蛋白的生产研究。

（二十三）、基因敲除的基本程序？

答：通过DNA同源重组，使得胚胎干细胞特定的内源基因被破坏而造成功能丧失，然后通过胚胎干细胞介导得到该基因丧失的小鼠模型的过程称为基因敲除。

1、打靶载体的构建：同源序列要足够长，要含有筛选用的标志基因。

2、胚胎干细胞的体外培养

3、打靶载体导入胚胎干细胞

4、同源重组胚胎干细胞的筛选

5、基因敲除胚胎干细胞注射入胚泡

6、胚泡植入假孕小鼠的子宫中

7、杂交育种获得纯合的基因敲除动物

（二十四）、DNA芯片的原理？

答：DNA芯片技术就是一种大规模的集成的固相核酸分子杂交，以大量已知碱基序列的寡核苷酸片段为探针，检测样品中哪些核酸序列与其互补，然后通过定性定量分析得出待测样品的基因序列及表达的信息。其方法包括芯片的制备、样品的准备、分子杂交和检测分子。（二十五）、诱变剂的作用机制？

答：1、碱基的类似物诱发突变

2、改变DNA的化学结构

3、结合到DNA分子上诱发移码突变

4、紫外线及其他射线引起的DNA分子的变化

（二十六）、突变类型及其遗传效应？

答：1、突变类型：

①点突变：DNA大分子上一个碱基的变异。分为转换和颠换。

②缺失：一个碱基或一段核苷酸链从DNA大分子上消失。

③插入：一个原来没有的碱基或一段原来没有的核苷酸链插入到DNA大分子中间。

④倒位：DNA链内重组，使其中一段方向倒置。

2、突变的遗传效应：

①遗传密码的改变：错义突变、无义突变、同义突变、移码突变

②对mRNA剪接的影响：一是使原来的剪接位点消失；二是产生新的剪接位点。

③蛋白质肽链中的片段缺失：

（二十七）、基因治疗的策略？

答：1、基因置换或称基因矫正：特定的目的基因导入特定的细胞，通过定位重组，让导入的正常基因置换基因组内原有的缺陷基因，不涉及基因组的任何改变。

2、基因添加或称基因增补：通过导入外源基因使靶细胞表达其本身不表达的基因。

3、基因干预：采用特定的方式抑制某个基因的表达，或者通过破坏某个基因而使之不

能表达，以达到治疗疾病的目的。

4、基因标记：基因标记实验是基因治疗的前奏，并不在于直接治疗疾病而是期望能够

提供有关正常细胞生物学和疾病病理方面的信息。

（二十八）、基因诊断常用的生物学技术。

（二十九）、简述重组DNA技术的过程。

陈印-葵花宝典-法律法规

目录 建造师管理制度 法律体系和法的形式 民法 合同法 担保法 建筑法 招标投标法 建设工程质量管理条例 安全生产法 建设工程安全管理条例 劳动法 民事诉讼法 仲裁法 最高人民法院《关于审理施工合同纠纷适用法律问题的解释》 最高人民法院《关于建设工程价款优先受偿权问题的批复》 注册建造师管理规定 定义和一般规定* 注册建造师，是指通过考核认定或考试合格取得建造师资格证书，并按照规定注册，取得中华人民共和国建造师注册证书和执业印章，担任施工单位项目负责人及从事相关活动的专业技术人员。 未取得注册证书和执业印章的，不得担任大中型建设工程项目的施工单位项目负责人，不得以注册建造师的名义从事相关活动。 考点提示：

（1）取得资格证书是取得注册证书和执业印章的前提； （2）未取得注册证书和执业印章的，可以担任小型项目的项目负责人； （3）项目负责人包括但不限于项目经理。 注册 取得资格证书的人员，经过注册方能以注册建造师的名义执业。 （一）初始注册 申请初始注册时应当具备以下条件： （一）取得资格证书； （二）受聘于一个相关单位； （三）达到继续教育要求； （四）没有本规定不予注册情形。 初始注册者，可自资格证书签发之日起3年内提出申请。逾期未申请者，须符合本专业继续教育的要求后方可申请初始注册*。 取得一级建造师资格证书并受聘于一个建设工程勘察、设计、施工、监理、招标代理、造价咨询等单位的人员，应当通过聘用单位向单位工商注册所在地的省、自治区、直辖市人民政府建设主管部门提出注册申请（初审）。 ** 取得二级建造师资格证书的人员申请注册，由省、自治区、直辖市人民政府建设主管部门负责受理和审批，并送国务院建设主管部门备案。 考点提示： （1）资格证书签发后任何时候都可以提出初始注册申请，只不过3年之后才提出的，需要参加继续教育并取得相应证明； （2）注册不得由本人提出申请，必须由聘用单位提出申请，注意一级有初审程序，不是直接向建设部提出。 （二）延续注册 注册证书与执业印章有效期为3年。注册有效期满需继续执业的，应当在注册有效期届满30日前，申请延续注册。延续注册的，有效期为3年。 （三）变更注册* 在注册有效期内，注册建造师变更执业单位，应当与原聘用单位解除劳动关系，并办理变更注册手续，变更注册后仍延续原注册有效期。 （四）增项注册

《青铜葵花》试题及答案

《青铜葵花》试题及答案 1.青铜不识字，是谁教会了青铜读书写字的：（） A．老师 B．嘎鱼 C．爸爸 D．葵花 2.狂风吹倒了青铜家的房子，他们搭了一个窝棚，青铜用（）做灯给葵花写作业。 A．钨丝 B．干草 C．萤火虫 D．煤油 3.青铜家的那片茨菰田最后怎么样了：（） A．被蝗虫吃掉了 B．被牛糟蹋了 C．被嘎鱼家的鸭吃掉了 D．被人偷采掉了 4.葵花参加春节文艺宣传队演出时所戴的项链是哪里来的：（） A．爸爸妈妈给她买的 B．青铜用冰凌给她做的 C．老师借给她的 D．老师叫女同学借给她的 5.当葵花想到大麦地去看爸爸，坐在小船上漂流发生危险时，是谁救了她：（） A．干校的叔叔们 B．大麦地的乡亲们 C．青铜 D．嘎鱼 6.刘瘸子的到来给大麦地小学的孩子们带来了什么，让他们热闹了一回：（） A．照相 B．卖冰糖葫芦 C．卖冰棍 D．捏泥人 7.奶奶临终前把手镯拿下来，她是想：（） A．送给葵花 B．送给青铜 C．留给儿媳妇

D．留给儿子传下去 8.葵花远走江南回家，为了等葵花回家，青铜一直守在桥上，手里拿着：（） A．纸灯笼 B．纸风车 C．纸船 D．纸伞 9.葵花最终生活在哪里：（） A．青铜家里 B．村长家里 C．城里阿姨家 D．福利院 10.嘎鱼家祖祖辈辈养的是：（） A．鸡 B．鸭 C．鹅 D．鱼 11.葵花刚到干校时，天天要去看大麦地的原因是（） A．她想见到大麦地 B．大麦地有她的亲人 C．大麦地这个名字很好听 D．大麦地是一个村庄 12.青铜为什么会成为哑巴？（） A．失火时被火烧坏了嗓子 B．为了寻找失踪的葵花喊坏了嗓子 C．发高烧烧坏了嗓子 D．被嘎鱼欺负而成为哑巴 13.葵花爸爸一生最为成功的作品是（） A．用青铜制作成的葵花 B．绘画作品葵花 C．种植的葵花田 D．用青铜制作成的各种纪念品 14.爸爸去世之后后，苦命的葵花被送到谁家抚养：（） A ．嘎鱼家 B．青铜家 C．村长家 D．阿姨家

二级建造师市政公用工程管理与实务葵花宝典：全书整理

二建市政葵花宝典：全书数字整理+肖国祥考前划重点 二级建造师市政实务全书数字全整理总结版 强度： 1、切缝法施工，当混凝土强度达到设计强度25%~30%时方可切缝。 2、混凝土路面达到设计强度40%以后，可允许行人通过。 3、普通硅酸盐水泥配置的喷射混凝土强度低于设计强度的 30%时，以及矿渣硅酸盐水泥配置 的喷射混凝土强度低于设计强度的40%时，不得受冻。 4、混凝土的强度不应低于设计所要求的吊装强度，一般不得低于设计强度的75%。 5、对孔道已压浆的预应力混凝土构件，其孔道水泥浆的强度不应低于设计强度的75%。 6、跨径≤2.0m 的板时，混凝土强度达到设计强度标准值的 50%、跨径为 2.8m 的板、梁，混 凝土强度达到设计标准值的75%，方可拆除。 7、封底一般先浇一层素混凝土垫层，达到50%设计强度后，绑扎钢筋，浇筑上层底板砼。 8、待底板混凝土强度达到70%后，对集水井停止抽水。 9、大型沉井达到100%，小型沉井达到70%时，方可进行拆除承垫木工作。 10、 预应力筋放张时，混凝土强度不得低于设计强度的75%. 11、 封锚混凝土的强度一般不宜低于构件混凝土强度80%，且不得低于30Mpa。 12、 对后张预制构件，压浆强度一般不应低于压浆设计强度的75%。 13、 冬期施工期间，当采用硅酸盐水泥或普通硅酸盐水泥配置的混凝土，抗压强度未达到 设计强度的30%时，当采用矿渣硅酸盐水泥配置混凝土，抗压强度未道道设计强度的40%， 混凝土不得受冻。浸水冻融条件下的混凝土开始受冻时，不得小于设计强度的75%。 14、 当收件跨度≤8m时，在混凝土强度符合设计强度75%时，方可拆除。当构件跨度＞8m 时，在混凝土强度符合设计强度100%时，方可拆除。 温度 1、出厂摊铺温度135-170.。沥青碾压开始温度120°——150°，终了温度55°——85°。 2、热拌沥青混合料路面表面温度低于5°，方可开放交通。 3、普通沥青混合料施工温度宜在135°—170°之间。 4、改性沥青比普通沥青料施工温度高10°—20°。 5、水泥混凝土路面施工气温在20°—29°。 6、气温低于5°，不应进行喷射作业。 7、后张法预应力砼采用蒸汽养护时，其恒温应控制在6°以下。 8、大体积混凝土的浇筑温度不宜高于28°。 9、压浆过程中及压浆后 48h 内，混凝土的温度不得低于 5°，否则应采取保温措施；当气温 高于35°，压浆宜在夜间进行。 10、 控制混凝土优先采用加热水的方法，水加热温度不宜高于80°，骨料加热温度不得高 于60°。 11、 拌制设备宜设在气温不低于10°的厂房或暖棚内。 12、 混凝土拌合物入摸温度不宜低于10° 13、 拆模时混凝土与环境的温差不得大于15°，当温差在10°—15°时。拆模后的混凝土 表面采取临时覆盖措施。 14、 采用外部热源加热养护的混凝土，当环境气温在0°以下时，应待混凝土冷却至5°以 下后，方可拆模。 一、0.5-1.0

华科考博分子生物学历年真题汇总(葵花宝典2016)s

华中科技大学同济医学院考博分子生物学（专业基础）简答题历年试题汇总 1.顺式作用元件有哪些，并加以解释。2015，2012考 2.人类基因组计划的4张图，各自的意义是什么？ 3.癌基因激活的主要途径？ 问答：1.什么是基因治疗，基因治疗的主要策略是什么？基因治疗的技术及主要内容，2015，2014，2013考 问答2.蛋白质组学的主要技术有哪些并解释？2015，2012考 2014简问答题 1.PCR原理，步骤，写出6种PCR衍生技术2013，2014，2009考 2.何谓基因克隆？简述其基本过程。09年 3.重组DNA技术，问答题20分，14年考 4.举例说明基因表达的调控机制。题目太大，原核调控，真核调控？13年 问答5.人类基因定位的常用方法及原理。12年，09年考 简问6.简述反式作用因子的结构特点及作用方式09年 简问7.简述逆转录病毒的结构特点09年考 问答：真核细胞中基因表达的特异性转录调控因子是指什么？根据他们的结构特征可以分为哪些类型？它们和DNA相互识别的原理是什么？2013年考 问答：试述大肠杆菌中表达蛋白质产物的步骤。2013年考 试比较克隆载体、原核载体和真核载体的特点2012年考 2016年真题 英译中名词解释（20分）

反义RNA；操纵子；限制性核酸内切酶；选择性剪切；抑癌基因；基因诊断； RNA干扰；质粒； gene maping；管家基因 简答题。 真核基因组的结构和功能特点20分 人类基因组的结构特征15分 原癌基因的特点15分 蛋白质组研究常用技术有那些，简介其作用。15分 当前基因治疗技术面临的技术问题有哪些？15分 以下为2001-2004年试题及网上答案 基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作，又叫分子克隆，DNA 重组技术。 1. 在GENBANK中检索IL-2的mRNA序列；在genecard里检索IL-2高表达的组织；同时检索一下有关文献； 2. 如果考虑使用原核表达系统（通常是大肠杆菌表达系统），将IL-2的成熟肽的基因序列找出（呵呵，我没有检索，不清楚是否有信号肽）进行分析； 3. 根据表达载体，设计含有合适酶切位点的、对应成熟肽编码区的引物； 4. 提取IL-2高表达的组织的mRNA，RT-PCR，T载体克隆或直接酶切克隆至表达载体中、测序。

一级建造师考试 建设工程法律法规 重点总结 《葵花宝典》完整版

2014年一级建造师考试建设工程法律法规重点总结 陈老师《葵花宝典》完整版 一级建造师考试 建设工程法规与相关知识 2014年 葵花宝典 (精讲班) 建造师考试命题基本规律 及有效的学习路径 陈印 全国一级注册建造师执业资格考试,自2004年举办至今,已历经九届。考试范围及考查重点日渐清晰。结合考试的具体情况,提出如下学习路径,考生可根据自身情况取舍: (一)严肃的执业资格考试,尤其是标准化考试,为确保命题客观、答案确定唯一,每一道题必定应以指定教材上的具体论述为依据,努力避免超出大纲和指定教材的范围,这是命题的根本原则,只有掌握这一原则才可能防止命题人和答题人各自自由发挥、才可能存在没有争议的“标准答案”。因此,学习自始至终应围绕指定教材进行,答题也必须始终根据指定教材上的具体论述来作答。看到一道题,首先要坚信它是在考你书上某个角落里的某句话,而不是在考你的工作经验和生活经验,如果想不起来它是在考书上哪一句话,这道题做对的可能性基本上

就很小了。 (二)考试四门课,指定教材自300页到400页不等。即使按3个月时间准备,每天2小时,总共180小时,分到每门课45小时,共2700分钟。如果书有300页,则每页教材9分钟必须消化。读完都费劲,何况还必须对相关考点透彻理解,各种题型都已熟悉。显然,如果把每一句话都当作重点来学习,是不可能完成上述任务的,也没有必要。 (三)因此,学习的首要任务是把书读薄,在第一时间找到重点章节,和各章节的复习重点,即“考点”。从历年真题来看,也存在着“重者恒重,轻者恒轻”的规律,各门课程的考核重点虽不是一成不变,但也是相对稳定的。以法规为例,需要重点学习的考点约有2、300个,其中许多考点往往又有多种考核方式,称之为“题型”。学习备考的全部核心内容就是:对重要的点,要从考点出发熟悉所有相关题型,从题型反过来更深刻地理解考点,反复进行,不断深化。而在此范围外的点,则大可以一眼带过。 (四)对各门课程的重点每个人可能都有自己的理解。但我的理解不重要,你的理解也不重要,只有一个人的理解才是真正重要的,即命题人认为哪里是重点?因此,必须让自己找到的重点尽量客观,或者说尽可能真正接近考试的重点。这就是决定整个复习成败的关键环节:真题研究。常常有人认为,真题没有价值,已经考过的题目不会再考,错!理由是: (1)许多重要的点往往是年年考次次考、一级考二级考、翻来覆去地考、换汤不换药地考。几年来,真题涉及的考点重复率至少高达80%,从这个意义来说,做真题就是在做未来的考题。 (2)和市面上、网络上各种模拟题相比,真题水平最高,对考点的把握最透。

量化投资修行之葵花宝典

量化投资修行之葵花宝典 很多朋友问过，顺手认真整理了一下，个人观点，特指“量化组合投资领域”，仅供各位朋友参考 预备知识 预备知识包括：数学、计算机、投资学。 数学方面至少包括微积分、线性代数、优化理论、概率统计基础、线性回归等知识点。当然，数学专业出身最佳，肯定满足条件，一般理工科也都基本满足要求，即使有所欠缺，花一点时间也就自学补上了。 计算机方面有两点：一是要会编程，MATLAB、C++、Java、Python、R等语言或软件只要会用一种就行，但要求比较熟练，有过几万行代码的经验；二是了解数据库和SQL语言，因为量化投资中涉及对海量数据的管理和分析，所以需要建立和维护数据库，并用SQL从数据库按各种形式查询数据。 投资学方面只要通过大学的《投资学》课程就好，像William Sharpe等3人合著的《投资学》，还要好几部其它优秀的《投资学》教程都可以。要是能够通过CFA，那就最好了，知识面更广。 入门阶段 Barra USE3 handbook Barra是量化投资技术提供商，是量化投资先驱。其经典的美国股票风险模型第3版（USE3）手册，详细介绍了股票市场多因子模型的理论框架和实证细节。手册共几十页，不太长，描述规范清晰，不陷入无意义的细节，非常适合于入门。

系统学习阶段 系统化学习1：Quantitative Equity Portfolio Management（QEPM），Ludwig Chincarini 偏学术风格 偏学术界的作者撰写的关于量化股票组合投资的系统教程。尤其是前几章概述部分写得非常精彩、易懂、准确。把该领域的各个方面高屋建瓴地串讲了一遍。后面部分的章节似乎略有些学术了，但也值得一读。 由于其较高的可读性，适于初学者学习。 系统化学习2：Active Portfolio Management（APM）， Grinold & Kahn 偏业界风格 业界先驱所著，作者均曾任Barra公司的研究总监。本书深度相对较深，描述也偏实践，介绍了许多深刻的真知。并且书中很多论述精彩而透彻。该书被奉为量化组合投资业界圣经。不过该书有些章节撰写得深度不一，初学者容易感到阅读起来有点困难。所以推荐：首次阅读不必纠结看不懂的细节，只要不影响后续阅读就跳过具体细节；有一定基础后，建议经常反复阅读本书。 系统学习3：Quantitative Equity Portfolio Management（QEPM），Qian & Hua & Sorensen APM的补充 业界人士所著。针对性地对APM没有展开讲的一些topic做了很好的深入探讨。建议在APM之后阅读。该书风格比较数学，不过对数学专业背景

分子生物学葵花宝典

一、名词解释 1、基因：能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列，是决定遗传性状的功能单位。 2、基因组：细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和。 3、端粒：以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。该 结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体，仅在真核细胞染色体末端存在。4、操纵子：是指数个功能上相关的结构基因串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控 区（包括启动子和操纵基因）以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位，所转录的RNA为多顺反子。 5、顺式作用元件：是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和 结合的特异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。 6、反式作用因子：是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调 节基因转录活性的蛋白质因子。 7、启动子：是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。 8、增强子：位于真核基因中远离转录起始点，能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序 列。它可位于被增强的转录基因的上游或下游，也可相距靶基因较远。 9、基因表达：是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程， 合成特定的蛋白质，进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。 10、信息分子：调节细胞生命活动的化学物质。其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动 的化学物质称为细胞间信息分子；而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子。 11、受体：是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合，进而发 生生物学效应的的特殊蛋白质。 12、分子克隆：在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组，将重组分子导 入合适宿主，使其在宿主中扩增和繁殖，以获得该DNA分子的大量拷贝。 13、蛋白激酶：是指能够将磷酸集团从磷酸供体分子转移到底物蛋白的氨基酸受体上的 一大类酶。 14、蛋白磷酸酶：是具有催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分 子，与蛋白激酶相对应存在，共同构成了磷酸化和去磷酸化这一重要的蛋白质活性的开关系统。 15、基因工程：有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状 的系列过程。 16、载体：能在连接酶的作用下和外源DNA片段连接并运送DNA分子进入受体细胞的 DNA分子。 17、转化：指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程。 18、感染：以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子，在体外经过包 装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。19、转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间 通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程。 20、转染：指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。 21、DNA变性：在物理或化学因素的作用下，导致两条DNA链之间的氢键断裂，而核酸 分子中的所有共价键则不受影响。 22、DNA复性：当促使变性的因素解除后，两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形 成DNA双螺旋结构。

2018年二建法规《葵花宝典》陈印

2018年二建法规《葵花宝典》陈印 全国二级建造师执业资格考试建设工程法规及相关知识讲义葵花宝典 xx年4月陈印目录建造师管理制度法律体系和法的形式民法合同法担保法建筑法招标投标法建设工程质量管理条例安全生产法建设工程安全管理条例劳动法民事诉讼法仲裁法最高人民法院《关于审理施工合同纠纷适用法律问题的解释》最高人民法院《关于建设工程价款优先受偿权问题的批复》47 注册建造师管理规定定义和一般规定* 注册建造师，是指通过考核认定或考试合格取得建造师资格证书，并按照规定注册，取得中华人民共和国建造师注册证书和执业印章，担任施工单位项目负责人及从事相关活动的专业技术人员。 未取得注册证书和执业印章的，不得担任大中型建设工程项目的施工单位项目负责人，不得以注册建造师的名义从事相关活动。 考点提示：（1）取得资格证书是取得注册证书和执业印章的前提；（2）未取得注册证书和执业印章的，可以担任小型项目的项目负责人；（3）项目负责人包括但不限于项目经理。 注册取得资格证书的人员，经过注册方能以注册建造师的名义执业。 （一）初始注册申请初始注册时应当具备以下条件： （一）取得资格证书；

（二）受聘于一个相关单位； （三）达到继续教育要求； （四）没有本规定不予注册情形。 初始注册者，可自资格证书签发之日起3年内提出申请。逾期未申请者，须符合本专业继续教育的要求后方可申请初始注册*。 取得一级建造师资格证书并受聘于一个建设工程勘察.设计.施工.监理.招标代理.造价咨询等单位的人员，应当通过聘用单位向单位工商注册所在地的省.自治区.直辖市人民政府建设主管部门提出注册申请（初审）。** 取得二级建造师资格证书的人员申请注册，由省.自治区.直辖市人民政府建设主管部门负责受理和审批，并送国务院建设主管部门备案。 考点提示：（1）资格证书签发后任何时候都可以提出初始注册申请，只不过3年之后才提出的，需要参加继续教育并取得相应证明；（2）注册不得由本人提出申请，必须由聘用单位提出申请，注意一级有初审程序，不是直接向建设部提出。 （二）延续注册注册证书与执业印章有效期为3年。注册有效期满需继续执业的，应当在注册有效期届满30日前，申请延续注册。延续注册的，有效期为3年。 （三）变更注册* 在注册有效期内，注册建造师变更执业单位，应当与原聘用单位解除劳动关系，并办理变更注册手续，变更注册后仍延续原注册有效期。

分子生物学(下)

分子生物学（下） 1、原核基因调控机制的类型与特点 1.负转录调控：调节基因的产物是阻遏蛋白，起阻止结构基因转录的作用。 (1)负控诱导:阻遏蛋白不与诱导物结合时,结构基因不转录; (2)负控阻遏:阻遏蛋白与诱导物结合时,结构基因不转录. 2.正转录调控:调节基因的产物是激活蛋白. (1)正控诱导系统:诱导物的存在是激活蛋白处于活性状态; (2)正控阻遏系统:诱导物使激活蛋白处于非活性状态. 2、乳糖操纵子和色氨酸操纵子 大肠杆菌乳糖操纵子：乳糖——开动大肠杆菌乳糖操纵子——表达利用乳糖的三个酶——细菌利用乳糖。 乳糖操纵子的控制模型内容 （1）Z、Y、A基因的产物由同一条多顺反子的mRNA分子所编码； （2）该mRNA的启动区（P）位于阻遏基因（I）与操纵区（O）之间，不能单独起始半乳糖苷酶和透过酶基因的高效表达； （3）操纵区是DNA上的一小段序列（26bp），是阻遏物的结合位点； （4）当阻遏物与操纵区结合时，Lac mRNA的转录起始受到抑制； （5）诱导物通过与阻遏物结合，改变它的三维构象，使之不能与操纵区相结合，激发Lac mRNA 的转录。 大肠杆菌色氨酸操纵子：加入色氨酸——阻遏色氨酸操纵子—相关合成酶基因关闭。 色氨酸操纵子与负控阻遏系统 Trp体系参与生物合成而不是降解; Trp合成分5步,有7个基因参与. 组成包括:阻遏基因（R）、启动区(P)、操纵区（O）、前导区（L）、弱化区（a）和结构基因区； Trp操纵子的转录调控包括阻遏系统和弱化系统. 3、原核与真核基因表达调控的异同 4、DNA水平的表达调控 染色质的丢失：不可逆 核的全能性（totipotency）：细胞核内保存了个体发育所必需的全部基因 基因扩增(gene amplification)：增加基因的拷贝数 非洲爪蟾卵母细胞rRNA基因卵裂时，扩增2000倍，达1012个核糖体 药物：诱导抗药性基因的扩增；肿瘤细胞：原癌基因拷贝数异常增加 基因重排(gene rearrangement)：将一个基因从远离启动子的地方移到距它很近的位点从而启动转录。如免疫球蛋白基因重排 DNA甲基化(DNA methylation)： mCpG，即“CpG岛”：在DNA上成串出现，通常被甲基化，极易自发脱氨形成胸3腺嘧啶。 甲基化(methylated)程度高，基因表达降低； 去甲基化(undermethylated)：基因表达增加 DNA甲基化能引起染色体结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式改变——控制基因表达 染色质(chromatin)或染色体(chromosome)结构对基因表达的调控 （1）“开放”型活性染色质结构对转录的影响：转录发生前，染色质在特定区域被解旋松弛，使转录因子与启动区DNA结合——诱导转录。 （2）“灯刷型”染色体上的环形结构与基因的转录活性：两栖类动物卵细胞减数分裂

葵花宝典 CISSP真题录

1．状态检测防火墙什么时候实施规则变更备份？B A 防火墙变更之前 B 防火墙变更之后 C 作为完全备份的一部分 D 作为增量备份的一部分 2．哪项违反了CEI？ B A 隐瞒之前的犯罪记录行为 B CISSP从业者从事不道德行为 3．FTP的风险？B A 没有目标认证 B 明文传输 4．L2TP是为了通过什么协议实现？ A A PPP B PCP 5．VOIP在语音通信过程当中，弱点? B A 没有目标认证 B 没有源认证 6．(1) 假如：T为IDS控制成本费用200000美元 E为每年恢复数据节省费用50000美元 R是为实施控制措施之前的每年恢复费用100000美元 问：实际投资回报为： A -50000 B -100000 C 100000 D 150000 A (投资回报就是控制前-控制后, 投资回报负值就是省了多少，正值就是赚了多少) (2) 问年度预期损失ALE怎么计算： B A (R+E)/T B（R-E）+T C (R-T)*E D T/(R-E) 7．ipsec隧道模式下的端到端加密，ip包头 B A 加密，数据不加密 B和数据一起加密 C 不加密，数据加密 8．实施一个安全计划，最重要的是：B

A 获取安全计划所需的资源 B 与高层管理者访谈 9．安全要求属于： B A. ST安全目标 B. PP C . TOE 10．TOE属于 A A CC B 可信计算机 11．公司进行信息安全评估，打算把所有应用程序维护外包，问对服务提供商什么是最重要的？ C A BIA B 风险管理 C SLA 12．公司运维外包服务，问什么时候跟服务提供商确定安全要求？ A A 合同谈判 B 合同定义 1.外部审计师违反了公司安全要求，问惩罚判定来源： C A 公司安全要求 B 外部审计公司要求 C 双方协议 2.公司实施一个纵深防御政策，问由内到外的层次设计？A？ A 边界场地出入口办公区计算机机房 B 围墙场地出入口计算机机房办公区域 3.802.1 b具有什么功能？ 共享密钥 4.SSL协议双向认证，部分使用，除了客户端验证服务器，还有？ A A 服务器对客户端自我验证 B 客户端对服务器自我验证 5.可重复使用是在CMMI的哪个阶段？第二个 A、不可预测 B、可重复 C、可定义 D、可管理 E、可优化

2014二级建造师《相关法规》(葵花宝典)-陈印

全国十佳 建科教育 职业教育 二级建造师考试建设工程法规与相关知识Array葵花宝典 （精讲班）

建造师考试命题基本规律 及有效的学习路径 陈印 全国二级注册建造师执业资格考试，自2005年举办至今，已历经十届。考试范围及考查重点日渐 清晰。结合考试的具体情况，提出如下学习路径，考生可根据自身情况取舍： （一）严肃的执业资格考试，尤其是标准化考试，为确保命题客观、答案确定唯一，每一道题必定应以 指定教材上的具体论述为依据，努力避免超出大纲和指定教材的范围，这是命题的根本原则，只有掌握 这一原则才可能防止命题人和答题人各自自由发挥、才可能存在没有争议的“标准答案”。因此，学习 自始至终应围绕指定教材进行，答题也必须始终根据指定教材上的具体论述来作答。看到一道题，首 先要坚信它是在考你书上某个角落里的某句话，而不是在考你的工作经验和生活经验，如果想不起来它 是在考书上哪一句话，这道题做对的可能性基本上就很小了。 （二）考试三门课，指定教材自300页到400页不等。即使按3个月时间准备，每天2小时，总共180 小时，分到每门课60小时，共3600分钟。如果书有300页，则每页教材12分钟必须消化。读完都费 劲，何况还必须对相关考点透彻理解，各种题型都已熟悉。显然，如果把每一句话都当作重点来学习， 是不可能完成上述任务的，也没有必要。 （三）因此，学习的首要任务是把书读薄，在第一时间找到重点章节，和各章节的复习重点，即“考点”。从历年真题来看，也存在着“重者恒重，轻者恒轻”的规律，各门课程的考核重点虽不是一成不变，但 也是相对稳定的。以法规为例，需要重点学习的考点约有2、300个，其中许多考点往往又有多种考核 方式，称之为“题型”。学习备考的全部核心内容就是：对重要的点，要从考点出发熟悉所有相关题 型，从题型反过来更深刻地理解考点，反复进行，不断深化。而在此范围外的点，则大可以一眼带过。 （四）对各门课程的重点每个人可能都有自己的理解。但我的理解不重要，你的理解也不重要，只有一 个人的理解才是真正重要的，即命题人认为哪里是重点？因此，必须让自己找到的重点尽量客观，或者 说尽可能真正接近考试的重点。这就是决定整个复习成败的关键环节：真题研究。常常有人认为，真 题没有价值，已经考过的题目不会再考，错！理由是： （1）许多重要的点往往是年年考次次考、一级考二级考、翻来覆去地考、换汤不换药地考。几年来， 真题涉及的考点重复率至少高达80%，从这个意义来说，做真题就是在做未来的考题。 （2）和市面上、网络上各种模拟题相比，真题水平最高，对考点的把握最透。或者换一个角度来理解，历年真题是命题人本人出的模拟题，是最权威的模拟题；而市面上的模拟题却一定不是命题人本人出 的题。因此，考生万不可本末倒置，缘木求鱼。 （五）真题研究采用如下步骤： （1）一门课听完后，立即开始做一到两遍历年真题，不要求闭卷，开卷做就很好。但是务必要强迫 自己把每一道题考的是哪一页里的哪一句话搞清楚，即答题依据要找到。 (2)把这句话划出来，边上做记号，如：一级07年单选37题，二级05年多选65题，一句一句 划好。

2014二级建造师市政公用工程管理与实务 葵花宝典 全书重点数字总结

二级建造师市政实务全书数字全整理总结版 强度： 1、切缝法施工，当混凝土强度达到设计强度25%~30%时方可切缝。 2、混凝土路面达到设计强度40%以后，可允许行人通过。 3、普通硅酸盐水泥配置的喷射混凝土强度低于设计强度的30%时，以及矿渣硅酸盐水泥配置 的喷射混凝土强度低于设计强度的40%时，不得受冻。 4、混凝土的强度不应低于设计所要求的吊装强度，一般不得低于设计强度的75%。 5、对孔道已压浆的预应力混凝土构件，其孔道水泥浆的强度不应低于设计强度的75%。 6、跨径≤2.0m的板时，混凝土强度达到设计强度标准值的50%、跨径为2.8m的板、梁，混 凝土强度达到设计标准值的75%，方可拆除。 7、封底一般先浇一层素混凝土垫层，达到50%设计强度后，绑扎钢筋，浇筑上层底板砼。 8、待底板混凝土强度达到70%后，对集水井停止抽水。 9、大型沉井达到100%，小型沉井达到70%时，方可进行拆除承垫木工作。 10、预应力筋放张时，混凝土强度不得低于设计强度的75%. 11、封锚混凝土的强度一般不宜低于构件混凝土强度80%，且不得低于30Mpa。 12、对后张预制构件，压浆强度一般不应低于压浆设计强度的75%。 13、冬期施工期间，当采用硅酸盐水泥或普通硅酸盐水泥配置的混凝土，抗压强度未达到 设计强度的30%时，当采用矿渣硅酸盐水泥配置混凝土，抗压强度未道道设计强度的40%，混凝土不得受冻。浸水冻融条件下的混凝土开始受冻时，不得小于设计强度的75%。 14、当收件跨度≤8m时，在混凝土强度符合设计强度75%时，方可拆除。当构件跨度＞8m 时，在混凝土强度符合设计强度100%时，方可拆除。 温度 1、出厂摊铺温度135-170.。沥青碾压开始温度120°——150°，终了温度55°——85°。 2、热拌沥青混合料路面表面温度低于5°，方可开放交通。 3、普通沥青混合料施工温度宜在135°—170°之间。 4、改性沥青比普通沥青料施工温度高10°—20°。 5、水泥混凝土路面施工气温在20°—29°。 6、气温低于5°，不应进行喷射作业。 7、后张法预应力砼采用蒸汽养护时，其恒温应控制在6°以下。 8、大体积混凝土的浇筑温度不宜高于28°。 9、压浆过程中及压浆后48h内，混凝土的温度不得低于5°，否则应采取保温措施；当气温 高于35°，压浆宜在夜间进行。 10、控制混凝土优先采用加热水的方法，水加热温度不宜高于80°，骨料加热温度不得高 于60°。 11、拌制设备宜设在气温不低于10°的厂房或暖棚内。 12、混凝土拌合物入摸温度不宜低于10° 13、拆模时混凝土与环境的温差不得大于15°，当温差在10°—15°时。拆模后的混凝土 表面采取临时覆盖措施。 14、采用外部热源加热养护的混凝土，当环境气温在0°以下时，应待混凝土冷却至5°以 下后，方可拆模。 一、0.5-1.0 1、箱涵顶进时地下水降低到开挖面下0.5-1.0米；（其他顶进，比如顶管施工和盾构施工， 是0.5）

《青铜葵花》试题及答案

《青铜葵花》试题及答案 1、青铜不识字,就是谁教会了青铜读书写字得:() A.老师 B.嘎鱼 C.爸爸 D、葵花 2.狂风吹倒了青铜家得房子,她们搭了一个窝棚,青铜用( )做灯给葵花写作业、 Ａ。钨丝 B.干草 Ｃ、萤火虫 D、煤油 3.青铜家得那片茨菰田最后怎么样了:( ) A、被蝗虫吃掉了 B。被牛糟蹋了 C。被嘎鱼家得鸭吃掉了 D.被人偷采掉了 4.葵花参加春节文艺宣传队演出时所戴得项链就是哪里来得:( ) A.爸爸妈妈给她买得 B、青铜用冰凌给她做得 C.老师借给她得 D。老师叫女同学借给她得 5.当葵花想到大麦地去瞧爸爸,坐在小船上漂流发生危险时,就是谁救了她:( ) A、干校得叔叔们 B、大麦地得乡亲们 C、青铜 Ｄ、嘎鱼 6。刘瘸子得到来给大麦地小学得孩子们带来了什么,让她们热闹了一回:( ) A。照相 B、卖冰糖葫芦 C。卖冰棍 Ｄ、捏泥人 7、奶奶临终前把手镯拿下来,她就是想:( ) Ａ.送给葵花 B。送给青铜 C。留给儿媳妇 Ｄ.留给儿子传下去 ８。葵花远走江南回家,为了等葵花回家,青铜一直守在桥上,手里拿着:( ) A.纸灯笼 B.纸风车 Ｃ.纸船

D、纸伞 ９、葵花最终生活在哪里:( ) A.青铜家里 B、村长家里 C.城里阿姨家 D.福利院 10。嘎鱼家祖祖辈辈养得就是:( ) A、鸡 B.鸭 C.鹅 D、鱼 11.葵花刚到干校时,天天要去瞧大麦地得原因就是( ) A。她想见到大麦地 Ｂ。大麦地有她得亲人 C.大麦地这个名字很好听 D.大麦地就是一个村庄 12。青铜为什么会成为哑巴？( ) A。失火时被火烧坏了嗓子 Ｂ、为了寻找失踪得葵花喊坏了嗓子 C.发高烧烧坏了嗓子 D.被嘎鱼欺负而成为哑巴 １3。葵花爸爸一生最为成功得作品就是( ) A.用青铜制作成得葵花 B。绘画作品葵花 C。种植得葵花田 Ｄ、用青铜制作成得各种纪念品 14.爸爸去世之后后,苦命得葵花被送到谁家抚养:( ) A .嘎鱼家 B。青铜家 Ｃ.村长家 Ｄ、阿姨家 15.嘎鱼爸爸与青铜爸爸打架得原因就是:( ) A。嘎鱼爸爸说青铜家偷吃了她家得鸭子 B.青铜爸爸说嘎鱼家偷吃了她家得鱼 C、嘎鱼欺负了青铜与葵花 Ｄ.青铜与葵花欺负了嘎鱼 16。为了供孩子上学,青铜全家一起做了一件什么事情:( )

一级建造师法规知识总结(葵花宝典第二季)

20XX年一级建造师建设工程法律及相关知识 葵花宝典第二季（Mr.陈） 第一章基本知识必考25分 1、法律体系 名称调整的关系重要例子 宪法国—民 民法商法民—民招投标法 行政法官—民建筑法 经济法民—民（有国家监督）土地管理法、节约能源法 社会法劳动、保障、福利劳动法、劳动合同法、安全生产法等 刑法国—犯人刑法 诉讼法规范诉讼程序三大：民事诉讼、行政诉讼、仲裁法 2、法的效力层级：上位优于下位，特别优于一般，新优于旧。 需裁决的情况： 1）同一机关，新的一般规定与旧的特别规定不同时，由制定机关裁决； 2）地方法规与部门规章不同时： 由国务院提出意见：适用地方法规，国务院决定； 适用部门规章，国务院提请全国人大常委会裁定。 3）部门规章与地方规章不同时，国务院裁决。（10年考过） ◆案例要点：1）审计是国家对建设单位的一种行政监督，不影响建设与承建的合同效力。承包合同案件应以合同为判决依据，只在合同约定以审计为依据、约定不明、约定无效，才能将审计结论作判决依据。2）审计结论不影响合同，不作为合同纠纷、结算依据。 3、项目经理部行为的法律后果由企业法人承担。（押题） ◆案例要点：企业法人对它的法定代表人和其他工作人员的经营活动，承担民事责任。 4、代理：在代理权限范围内，以被代理人的名义活动 法定、指定代理均为法律指定，委托代理则随意 5、无权代理3种：1）未经授权，2）超越代理权，3）代理权已终止。 6、表见代理：无权，有效。 ◆案例要点：行为人无权代理，相对人有理由相信有代理权（空白合同书及介绍信），该代理行

为有效。 7、物权分：所有权（占有、使用、收益、处分）、用益物权、担保物权 用益物权：对他人的动产、不动产，含建设用地使用权利、地役权 建设用地使用权-------------不登记不设立 地役权---------------------不登记也设立 船舶航空器、机动车等物权---不登记也生效 不动产物权-----------------不登记不生效 ◆案例要点：合同生效与建设用地使用权设立无关;原告有权要求解除合同并索赔，也有权继续履行合同。 8、1）脱落、坠落造成损害，所有人、管理人或使用人不能证明自己，应承担侵权责任。 2）倒塌造成损害，建设于施工单位承担连带，因其他人原因，由其他人承担---无过错责任3）抛掷品造成损害，由可能加害的建筑物使用人承担（除证明自己的除外）---推定过错9、专利法保护的对象：发明20、实用新型10、外观设计10 （期限自申请日起计算，专利不能延期） 授予专利权的发明和实用新型，应具备3性：新颖、创造、实用性 外观设计应具备5性：3性+美感、适于工业应用 10、注册商标有效期10年，自核准注册之日计算，可以续期 11、软件著作权保护期50年 买正版软件的3个权利：装入、制作备份、必要修改（改后未经著作权人许可不得向别人提供）。 12、知识产权赔偿数额确定4法：1）实际损失，2）所获利益，3）知识产权许可使用费的倍数，4）法院确定。赔偿还应包含制止侵权的合理开支。 13、担保合同是从合同 担保方式5种：保证（最常用）、抵押、质押、留置和定金 保证合同：1）保证人与债权人书面订立 2）保证方式分一般保证、连带保证，约定不明，按连带执行 3）不能做保证人的：国家机关、公益事业单位及社团（学校医院幼儿园）、企业法人的分支机构及职能部门。 4）保证期间，主债权可随意转让 14、质押分动产和权利质押 权利质押含1）汇票支票等票据，2）股票，3）知识产权，4）其他。

2021年企业人力资源管理师考试葵花宝典HR猫猫

公司人力资源管理师考试 葵 花 宝 典 目录

第一章公司人力资源管理师考试简介 第二章公司人力资源管理师考试问题汇总 第三章成绩查询网站汇总 第四章二级公司人力资源管理师论文指引 第五章学习技巧 第一章公司人力资源管理师考试简介

一、职业名称 公司人力资源管理师。 二、职业定义 从事人力资源规划、招聘与配备、培训与开发、绩效管理、薪酬福利管理、劳动关系管理等工作专业管理人员。 三、职业级别 本职业共设四个级别，分别为：四级公司人力资源管理师（国家职业资格四级）、三级公司人力资源管理师（国家职业资格三级）、二级公司人力资源管理师（国家职业资格二级）、一级公司人力资源管理师（国家职业资格一级）。 四、职业能力特性 具备较强学习能力、沟通能力、信息解决能力、分析综合能力、团队合伙能力和客户服务[客户涉及内部客户（各职能部门）和外部客户（劳动管理和社会服务部门），客户服务指提供服务、协助，或与之协同工作。]能力。 五、背景 随着国内改革开放进一步和社会主义市场经济进一步发展，公司面临来自国内、国际同行激烈竞争，不但是产品、服务竞争，更是公司人力资源竞争，保证公司有一支布满开拓和创新能力人力资源队伍则是公司人力资源管理人员重大责任。国内大多数公司当前人力资源管理工作大多还处在比较低层次人事行政管理阶段，因此，引进国际先进人力资源管理理论与技术办法，开展全国统一人力资源管理人员职业资格认证，建立专业化、职业化人力资源管理人员队伍势在必行。 人力资源管理人员是指从事人力资源规划、员工招聘选拔、绩效考核、薪酬福利管理、勉励、培训与开发、劳动关系协调等工作专业管理人员。规定其从业人员具备较强人际沟通

葵花宝典 CISSP真题录

1．状态检测防火墙什么时候实施规则变更备份？ B A 防火墙变更之前 B 防火墙变更之后 C 作为完全备份的一部分 D 作为增量备份的一部分 2．哪项违反了CEI？ B A 隐瞒之前的犯罪记录行为 B CISSP从业者从事不道德行为 3．FTP的风险？ B A 没有目标认证 B 明文传输 4．L2TP是为了通过什么协议实现？ A A PPP B PCP 5．VOIP在语音通信过程当中，弱点? B A 没有目标认证 B 没有源认证 6．(1) 假如：T为IDS控制成本费用200000美元 E为每年恢复数据节省费用50000美元 R是为实施控制措施之前的每年恢复费用100000美元问：实际投资回报为： A -50000

B -100000 C 100000 D 150000 A (投资回报就是控制前-控制后, 投资回报负值就是省了多少，正值就是赚了多少) (2) 问年度预期损失ALE怎么计算： B A (R+E)/T B（R-E）+T C (R-T)*E D T/(R-E) 7．ipsec隧道模式下的端到端加密，ip包头 B A 加密，数据不加密 B和数据一起加密 C 不加密，数据加密 8．实施一个安全计划，最重要的是： B A 获取安全计划所需的资源 B 与高层管理者访谈 9．安全要求属于： B A. ST安全目标 B. PP C . TOE 10．TOE属于 A

A CC B 可信计算机 11．公司进行信息安全评估，打算把所有应用程序维护外包，问对服务提供商什么是最重要的？ C A BIA B 风险管理 C SLA 12．公司运维外包服务，问什么时候跟服务提供商确定安全要求？ A A 合同谈判 B 合同定义 1.外部审计师违反了公司安全要求，问惩罚判定来源： C A 公司安全要求 B 外部审计公司要求 C 双方协议 2.公司实施一个纵深防御政策，问由内到外的层次设计？ A？ A 边界场地出入口办公区计算机机房 B 围墙场地出入口计算机机房办公区域 3.802.1 b具有什么功能？ 共享密钥 4.SSL协议双向认证，部分使用，除了客户端验证服务器，还有？ A A 服务器对客户端自我验证 B 客户端对服务器自我验证

《葵花宝典》之诗歌鉴赏学生版

葵花宝典 ——诗歌鉴赏 一、诗歌的表达技巧 1、修辞方法：比喻、拟人、设问、反问、借代、对偶、夸张、衬托、用典、化用、互文、反复等。 2、表达方式：记叙、议论、描写、抒情。 抒情：可分为直接抒情，间接抒情（借景抒情、托物言志；情景交融）。 描写：可分为动静结合、虚实结合、点面结合、明暗结合、正侧结合、粗笔勾勒、白描工笔；乐景写哀、哀景写乐等。 3、表现手法：赋、比、兴；抑扬变化、铺陈描写、象征联想、衬托、对比、想象、联想、照应、托物言志等。 4、篇章结构：开门见山、曲笔入题、卒章显志、以景结情、总分得当、以小见大、层层深入、过渡照应、伏笔铺垫等。 5、思想感情有：迷恋、忧愁、惆怅、寂寞、伤感、孤独、烦闷、恬淡、闲适、欢乐、仰慕、激愤，坚守节操、忧国忧民等。 6、作用：深化意境、深化主旨、意境深远、意境优美、意味深长、耐人寻味、言近旨远等。 7、语言风格：刚健、雄奇、悲壮、旷达、苍凉、沉郁、飘逸、含蓄、缠绵、清新、明丽、秀丽、恬淡、凄美、明快、生动、讽刺等。 二、古典诗词鉴赏题问答模式例析：不能在追问的答案 （一）分析意境型 1、提问方式：这首诗营造了一种怎样的意境? 提问变体：这首诗描绘了一幅怎样的画面?表达了诗人怎样的思想感情? 2、答题步骤：翻译+氛围+情感 3、注释：①描绘图景时，应抓住诗中的主要景物，用自己的语言再现画面。可以适当想像 再创造，语言力求优美。 ②概括景物所营造的氛围特点。一般用两个双音节词即可，例如孤寂冷清、恬静 优美、雄浑壮阔、萧瑟凄凉等， 答题示例 绝句二首（其一）杜甫 迟日江山丽，春风花草香。 泥融飞燕子，沙暖睡鸳鸯。 [注]此诗写于诗人经过“一岁四行役”的奔波流离之后，暂时定居成都草堂时。 ①此诗描绘了怎样的景物?表达了诗人怎样的感情?请简要分析。 自己作答：