学习液培养的操作步骤和结果解读

学习液培养的操作步骤和结果解读液体培养是微生物学和细胞生物学中常用的一种实验方法，用于培

养细菌、酵母菌、真菌等微生物以及细胞组织。本文将介绍液体培养

的操作步骤及结果解读，帮助读者更好地理解和应用这一实验技术。

一、液体培养的操作步骤

液体培养是将微生物或细胞组织悬浮在液体培养基中进行培养，通

常需要按照以下步骤进行操作：

1. 准备培养基和培养容器：选择适用的培养基和培养容器，根据实

验需要添加相应的营养物质和抗生素。

2. 制备接种液：将待培养的微生物或细胞组织进行预处理，如悬浮、培养基调整和稀释等。确保接种液的浓度适宜。

3. 接种：将接种液加入到培养容器中，并尽量保持无菌操作环境，

以避免污染。

4. 培养条件控制：根据待培养微生物或细胞组织的特性，设置合适

的培养条件，如温度、pH值、氧气供应等。

5. 培养过程观察：在培养的过程中，及时观察并记录培养物的生长

情况，包括外观、颜色、悬浮状态等指标。

6. 取样和分析：根据实验需求，在培养过程中适时取样，进行相关

分析和检测。

以上是液体培养的基本操作步骤，根据实际需要，可能会有一些细

微的变化和调整。准确的操作和注意无菌操作非常重要，以确保实验

结果的准确性。

二、液体培养的结果解读

液体培养的结果解读需要根据实验设计和具体目的来进行。液体培

养的结果可以通过以下几个方面来解读：

1. 生长曲线分析：通过测量在培养过程中生物体的增殖情况，可以

绘制生长曲线。根据曲线的不同阶段和趋势，可以分析出微生物或细

胞组织的生长速率、生长周期以及产物的生成情况等。

2. 观察培养物特征：通过观察培养物的外观、颜色、浑浊度等指标，可以初步了解培养物的状态。不同微生物或细胞组织在液体培养中会

有不同的特征表现，这些特征可以为后续的分析提供参考。

3. 检测指标的变化：根据实验需求，可以对培养物中的代谢产物、

酶活性、蛋白质表达等指标进行检测。通过对这些指标的变化进行分析，可以了解生物体在不同阶段的代谢活性和功能表现。

4. 显微镜观察：将培养物制片并进行显微镜观察，可以进一步了解

微生物或细胞组织的形态结构、细胞数量和染色性质等。

通过以上的结果解读，可以得出液体培养实验中微生物或细胞组织

的相关信息，为后续的实验分析和应用提供依据。

总结：

液体培养是一项重要且常用的实验方法，在微生物学和细胞生物学领域具有广泛应用。正确的操作步骤和合理的结果解读对于实验的成功与否至关重要。通过本文的介绍，相信读者已经对液体培养的操作步骤和结果解读有了更清晰的认识，希望能够对读者在相关实验中的顺利进行提供一定的帮助。

溶液的配制及分析

溶液的配制及分析 周昌盛 一、教材分析 1、本节课在教材中的地位和作用 化学是一门以实验为基础的自然科学，化学实验一直是化学教学中的重要环节，也是培养和考察学生能力的重要部分，所以一定物质的量浓度溶液的配制这节课，不仅是本章知识的延伸，是本章的重点、难点、是整个高中化学中的一个重要的实验，是学生接触的第一个定量实验，其实验的准确性和规范性直接影响实验的精确程度。因此，学习它对学生今后的学习和实验研究具有深远的意义。 2、教材目标的确立及确立依据 本节课是在学过了物质的量浓度的概念和意义的基础上，初步学会实验的方法和实验操作的基本技能，所以结合教材的具体内容、教学大纲和考试说明中的要求、结合学生实际情况，以培养学生实验能力为主，确实教学目标如下： 知识与技能：①使学生初步学会配制一定浓度溶液的方法和技能 ②进一步学会容量瓶的使用方法 过程与方法：培养学生动手实验的操作能力和分析、解决问题的能力。 情感态度与价值观：培养学生注重实验，崇尚科学的认知态度。 3、教学重点、难点的确立及确立依据 根据本节课在教材中的地位和作用，根据教学目标，结合学生的具体情况，我确定教学重点为溶液配制的方法和过程，难点为培养学生实验操作的能力。 二、教学方法 基于上述分析，本节采用指导实验和演示实验相结合的教法，同时辅以启发式、对比式、分析讨论式等教学方法，多处问题的解决和实验操作由学生完成，调动积极性，发挥学生主体作用。 三、教学手段 演示实验、学生实验、投影 四、教学过程 1、复习：物质的量浓度的概念及表达式 2、启发式引出新课：500ml 0.1mol/L Na2CO3溶液的表示意义？ ①体积为500ml 浓度为0.1mol/L ②溶液中含Na2CO3的物质的量为0.05mol，质 量为5.3g 问题：如果我们配制该溶液需要怎样做？ 3、新课内容： ⑴指导阅读：同时指导学生注意实验操作程序和规范性。 ⑵提出检查性问题：配制该溶液需要哪些仪器，有哪些操作步骤。 通过学生间讨论研究得出溶液配制的方法、步骤和所需仪器，调动学生积极思考，为亲手做实验做准备。 ⑶提出讨论题：①容量瓶上为什么一定要注明温度？ ②烧杯、玻璃棒为什么一定要洗涤二至三次？

学习液培养的操作步骤和结果解读

学习液培养的操作步骤和结果解读液体培养是微生物学和细胞生物学中常用的一种实验方法，用于培 养细菌、酵母菌、真菌等微生物以及细胞组织。本文将介绍液体培养 的操作步骤及结果解读，帮助读者更好地理解和应用这一实验技术。 一、液体培养的操作步骤 液体培养是将微生物或细胞组织悬浮在液体培养基中进行培养，通 常需要按照以下步骤进行操作： 1. 准备培养基和培养容器：选择适用的培养基和培养容器，根据实 验需要添加相应的营养物质和抗生素。 2. 制备接种液：将待培养的微生物或细胞组织进行预处理，如悬浮、培养基调整和稀释等。确保接种液的浓度适宜。 3. 接种：将接种液加入到培养容器中，并尽量保持无菌操作环境， 以避免污染。 4. 培养条件控制：根据待培养微生物或细胞组织的特性，设置合适 的培养条件，如温度、pH值、氧气供应等。 5. 培养过程观察：在培养的过程中，及时观察并记录培养物的生长 情况，包括外观、颜色、悬浮状态等指标。 6. 取样和分析：根据实验需求，在培养过程中适时取样，进行相关 分析和检测。

以上是液体培养的基本操作步骤，根据实际需要，可能会有一些细 微的变化和调整。准确的操作和注意无菌操作非常重要，以确保实验 结果的准确性。 二、液体培养的结果解读 液体培养的结果解读需要根据实验设计和具体目的来进行。液体培 养的结果可以通过以下几个方面来解读： 1. 生长曲线分析：通过测量在培养过程中生物体的增殖情况，可以 绘制生长曲线。根据曲线的不同阶段和趋势，可以分析出微生物或细 胞组织的生长速率、生长周期以及产物的生成情况等。 2. 观察培养物特征：通过观察培养物的外观、颜色、浑浊度等指标，可以初步了解培养物的状态。不同微生物或细胞组织在液体培养中会 有不同的特征表现，这些特征可以为后续的分析提供参考。 3. 检测指标的变化：根据实验需求，可以对培养物中的代谢产物、 酶活性、蛋白质表达等指标进行检测。通过对这些指标的变化进行分析，可以了解生物体在不同阶段的代谢活性和功能表现。 4. 显微镜观察：将培养物制片并进行显微镜观察，可以进一步了解 微生物或细胞组织的形态结构、细胞数量和染色性质等。 通过以上的结果解读，可以得出液体培养实验中微生物或细胞组织 的相关信息，为后续的实验分析和应用提供依据。 总结：

液相色谱培训计划

液相色谱培训计划 一、培训目标：通过此培训，学员将掌握液相色谱原理、仪器操作、方法开发及数据分析 等技能，提高实验室分析的水平，为工作和科研提供支持。 二、培训内容： 1、液相色谱原理：介绍液相色谱的定义、分类、原理及应用领域。 2、色谱仪器操作：学习液相色谱仪器的结构、功能、操作流程、故障排除等内容。 3、色谱方法开发：了解液相色谱方法的优化、参数选择、条件调整及稳定性验证等技术。 4、色谱数据处理：掌握液相色谱数据的采集、处理、分析及结果解释的方法和技巧。 三、培训方式： 1、理论讲解：由专业老师讲解液相色谱的原理、仪器操作、方法开发及数据处理等知识。 2、实验操作：安排学员进行实验操作，熟悉液相色谱仪器的使用，掌握方法开发和数据 处理的技能。 3、案例分析：以真实案例为例，进行液相色谱方法开发及数据处理的案例分析，帮助学 员理解和掌握实际操作技能。 4、讨论交流：组织学员进行讨论和交流，分享经验和问题解决方法，促进学习效果。 四、培训安排： 1、时间安排：本次培训为期5天，每天8小时，按照理论讲解、实验操作、案例分析和 讨论交流的方式进行。 2、地点安排：培训地点设在实验室或培训教室，根据实际情况确定。 3、培训人员：培训对象为实验室相关人员，包括初学者和有一定经验者，希望提高自己 技能的人员均可报名。 4、培训费用：由公司承担培训费用，包括培训材料、实验用品及讲师费用等。 五、培训评估： 1、考核方式：通过培训前的测试和培训结束后的考核，评估学员对液相色谱的理论知识 和实际操作技能的掌握情况。 2、成绩评定：根据考核结果和培训表现，对学员进行成绩评定，并颁发结业证书。

2020高中生物专题2微生物的实验室培养第2课时实验操作及实验结果教案新人教版

第2课时实验操作及实验结果 [学习目标] 1.学会培养基的制备方法。2.掌握大肠杆菌的纯化方法。3.了解菌种保藏所用的方法。 知识点一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 知识梳理 1.操作步骤 2．倒平板 (1)在火焰旁右手拿锥形瓶，左手□01拔出棉塞。 02火焰。 (2)右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过□ (3)左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基(约10～20 mL)倒入培养皿，左手立刻盖上□03皿盖。 04倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上。 (4)待平板冷却凝固后，将平板□ 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 提示：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2．为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 提示：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 典题分析 题型一培养基的制备过程分析 [例1] 下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是( ) A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C．待培养基冷却至50 ℃左右时倒平板 D．待平板冷却凝固后将平板倒过来放置 解题分析制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，其顺序不能颠倒，A错误；牛肉膏比较黏稠，所以称好后需将称量纸一同放入烧杯中加热，当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸，B正确；待培养基冷却至50 ℃左右，开始倒平板，C正确；平板冷却凝固后倒置，D正确。 答案 A 知识拓展 (1)培养基灭菌后，需冷却至50 ℃左右时才能倒平板，温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝固。 (2)整个操作在酒精灯火焰旁进行，避免周围环境中微生物的污染。 (3)平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 (4)倒平板时不要将培养基溅在皿盖与皿底之间，否则此培养基不能用来培养微生物，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。

生物技术实验的操作步骤与结果解读

生物技术实验的操作步骤与结果解读 生物技术是一门将生物学与工程学结合的学科，广泛运用于生 物医学、农业、食品科学等领域。而对于生物技术实验来说，合 理的操作步骤以及准确的结果解读是保证实验结果准确性和可靠 性的关键。 一、操作步骤 1. 实验前准备：包括实验所需仪器设备的检查与校准，实验用 试剂和培养基的准备，以及实验环境的消毒和无菌操作等。 2. 样品处理：根据实验的具体目的，合理选择样品并进行处理。例如，如果实验需要分析某种蛋白质的表达水平，可以选择组织 样品并对其进行细胞破碎和蛋白质提取等步骤。 3. 实验操作：根据实验的要求进行实验操作。例如，如果实验 需要进行PCR扩增，操作步骤可能包括DNA提取、引物设计、 反应体系的配置、PCR反应条件的设置等。 4. 仪器操作：根据实验所需使用的仪器设备进行相关操作。例如，如果实验需要使用电泳仪进行DNA分离，操作步骤可能包括：配置电泳缓冲液、装填样品、设置电泳条件等。

5. 结果分析：根据实验所得到的结果进行分析和解读。例如， 对于PCR扩增结果，可以通过凝胶电泳进行分析，观察扩增产品 的大小和带型等信息。 二、结果解读 1. 数据分析：根据实验所得到的数据进行统计和分析。例如， 对于PCR扩增的结果，在凝胶电泳图上可以观察到不同大小的扩 增产物带，可以通过测量带的距离来估计扩增产物的大小。 2. 数据比较：将实验所得到的数据与对照组进行比较，评估实 验结果的显著性。例如，对于蛋白质表达水平的分析，可以比较 不同组织或不同处理条件下的样品，从而评估差异的显著性。 3. 结果解释：根据实验结果以及先前的研究知识，对实验结果 进行解释和推断。例如，如果实验观察到某种基因的表达水平显 著上调，可以推断这个基因可能在特定生物过程中发挥重要作用。 4. 实验重复和验证：为了验证实验结果的可靠性和重复性，可 以进行实验的重复和验证。通过多次重复实验，可以进一步确定 实验结果的稳定性和统计学显著性。 5. 结果报告：最后，根据实验所得到的结果撰写实验报告。实 验报告应该包括实验的背景、目的、实验设计、材料和方法、结 果和讨论等内容，以便其他人能够理解和重现实验。

学习液红细胞计数方法和异常解读

学习液红细胞计数方法和异常解读液红细胞计数方法是临床实验室常用的一种检测手段，用于评估患 者的贫血情况。本文将介绍液红细胞计数的常用方法，并解读液红细 胞计数结果异常的可能原因。 一、液红细胞计数方法 1. 血液标本采集 液红细胞计数通常采用外周静脉血标本。在采集时，需要注意使用 无菌技术，避免污染。另外，应遵循适当的抗凝剂选择，如EDTA抗 凝剂。 2. 自动血细胞分析仪 自动血细胞分析仪是目前液红细胞计数最常用的方法，其操作简便，测试速度快。使用时，首先将血液标本加入仪器中，然后通过电子光 学技术进行细胞计数和分类。最后，仪器会输出液红细胞计数结果。 3. 血液显微镜计数法 血液显微镜计数法是一种手工计数方法，通常用于自动血细胞分析 仪不可用时。该方法需要将已稀释好的血液标本放置在血细胞计数板上，通过显微镜观察和手动计数。最后，根据计数结果计算液红细胞 计数值。 二、液红细胞计数结果异常的解读 1. 高红细胞计数

高红细胞计数可能表明机体存在一些疾病或病理状态，如原发性红细胞增多症、慢性呼吸系统疾病、脱水等。此外，长期海拔生活也可能导致红细胞计数升高。 2. 低红细胞计数 低红细胞计数是最常见的贫血表现之一，可能由多种原因引起，如营养不良、慢性疾病、骨髓功能障碍等。此外，长期失血、溶血等情况也会导致红细胞计数降低。 3.红细胞形态异常 有时，在液红细胞计数结果中可能观察到红细胞形态异常。例如，患者可能出现贫铁性红细胞形态异常、球形红细胞性贫血以及溶血性贫血等。这些异常的发现可能提示患者存在相关的疾病或病理状态。 4.其他异常情况 除了上述常见情况外，还可能出现其他异常情况。例如，液红细胞计数结果中出现血小板异常，可能与骨髓功能异常有关；如果同时观察到白细胞异常，可能提示患者存在感染或炎症等。 三、液红细胞计数的临床应用 液红细胞计数在临床上有着广泛的应用。首先，它可作为评估贫血的重要指标，通过计算红细胞计数可以判断患者贫血的程度和类型。其次，液红细胞计数还可用于检测机体对药物治疗的应答情况，特别是一些抗贫血药物的疗效评估。

细胞换液步骤和注意事项

细胞换液步骤和注意事项 细胞换液是指用新的培养液取代培养皿中旧的培养液，以维持细胞培养液的正常生长环境。细胞换液的步骤和注意事项对于细胞培养的成功非常重要，下面将详细介绍。 细胞换液步骤： 1. 准备工作 在进行细胞换液之前，需要准备好所需的培养皿、新的培养液、吸头、吸管和培养棉球等实验器材。此外，还需要将培养皿放在无菌工作台上，清洁并消毒工作台，以确保实验环境的无菌。 2. 分装培养液 首先需要将培养皿中的旧的培养液倒掉，然后使用吸头和吸管将新的培养液分装到培养皿中。同时要确保分装的过程中不要使细胞受到机械损伤，避免影响细胞生长状态。 3. 观察细胞状态 在加入新的培养液后，需要仔细观察细胞的状态。如果细胞出现异常，如凝聚、死亡或污染等情况，需要及时处理或更换培养皿，以确保细胞的正常生长。 4. 培养条件调节

度等。这些条件的调节对于细胞的生长和分化起着很重要的作用。 5. 清理工作 最后需要将使用过的吸头、吸管和其他工作台清理和消毒，以确保实验室的无菌环境。 细胞换液注意事项： 1. 严格无菌操作 在细胞换液的过程中，需要保持无菌操作，避免细胞被外源菌污染，影响细胞的生长和实验的结果。 2. 避免细胞受损 在分装新的培养液时，需要轻柔地将培养液倒入培养皿中，避免对细胞造成机械损伤。此外，在观察细胞状态时，也要轻柔地操作，避免对细胞的影响。 3. 注意细胞密度 在换液时，需要注意细胞的密度，避免细胞过度稀释或过度浓缩，以确保细胞的正常生长。 4. 培养条件调节

度等。这些条件的调节对于细胞的生长和分化起着很重要的作用。 5. 定期换液 根据细胞的生长速度和培养液的耗尽情况，需要定期对细胞进行换液，以维持细胞的正常生长环境。 总之，细胞换液是细胞培养中非常重要的一个环节，它能够保持细胞的正常生长环境，促进细胞的生长和分化。在进行细胞换液时，需要严格遵守操作流程，保持无菌操作，避免对细胞造成机械损伤，并根据细胞的需求对培养条件进行调节。只有在细胞换液的过程中做到这些注意事项，才能够保证细胞的成功培养和实验的准确结果。

斜面接种与培养实验结果分析

斜面接种与培养实验结果分析 实验微生物接种技术讲解1 一、目的:学习微生物工作的基本接种方法,建立纯培养技术中的“无菌”概念,掌握无菌操作技术。 二、原理:所谓接种就是将一定量的纯种微生物在无菌操作条件下转移到另一已灭菌,并适宜于该菌生长繁殖所需的培养基上的过程。本实验要求严格进行无菌操作,一般是在无菌操作台或在实验室内火焰旁进行。根据不同的实验目的和培养方式,可以采用不同的接种工具和接种方法。 三、实验材料:斜面培养基、液体培养基、平板培养基、记号笔、酒精灯、接种针、消毒酒精、涂布棒等。 四、操作步骤(一)无菌操作菌种分离或移接工作应在无菌环境中进行,接种室、接种箱或超净工作台是常用的接种环境。用前先清洁好卫生,再进行消毒处理。可用紫外线灯和甲醛熏蒸的双重作用,或用3%来苏尔及其他表面消毒进行喷雾。操作者的手应先用肥皂洗净,再用酒精棉球消毒;整个操作过程都要靠近酒精灯火焰;接种工具在用前和用后必须在灯焰上灭菌;棉塞不得乱放,操作中只能夹在手上;不能有跑、跳等力度大的动作,以免引起空气大振动而增加染菌机会。(二)接种方法(1)斜面接种:从已长好微生物的菌种管移接到另一斜面管的方法。此法用于好气性微生物的接种。左手持菌种管和斜面管,使斜面向上,并尽量放平。用右手先将棉塞拧转松动,再拿接种环,用右手的小指、无名指和手掌拨下棉塞并夹紧,同时将管口在火焰上燃烧一圈,

接种环灼烧灭菌后插入管内,冷却、挑菌,立即转入斜面管底部,沿斜面划曲线或直线。图1.斜面接种示意图(2)液体接种:由斜面菌接种到液体培养基(如试管或三角瓶等)中的方法。操作与上法基本一致,只是在将接种环送入液体培养基中时使环在液体与管壁接触的地方轻轻磨擦,使菌体分散,然后塞上棉塞,再轻轻摇动均匀,即可培养。如果菌种是培养在液体培养基中时,一般用移液管或滴管接种。(3)穿刺接种:用接种针挑取菌种后,插入深层固体培养基内,(不要刺到底部),再沿原路拔出,此法用于厌气性细菌接种、检查细菌的运动能力。(4)平板接种:将菌种接至培养皿的方法,平板接种的目的是观察菌落形态、分离纯化菌种,活菌计数以及在平板上进行各种试验时采用的一种接种方法,可分为下面几种:1)斜面接平板 a.划线法:见平板划线分离法。b.点种法:一般用于观察霉菌和酵母细胞,轻轻点在平板的表面(根霉点一点,曲霉、酵母可点3-4点)即可。2)平板接斜面:一般是将经平板分散培养得到的单菌落接种到斜面,以便作鉴定或扩大培养、保存之用。 五、思考题1.何谓无菌操作?接种前应作哪些准备工作?2.总结几种接种方法的要点及应注意的事项?

学习液无菌采集的操作技巧和注意事项

学习液无菌采集的操作技巧和注意事项 液体无菌采集是医学实验室中常见的操作步骤之一，用于采集样本供进一步的分析和检测。正确的操作技巧和遵守注意事项对确保采集的样本质量和保护操作人员的安全至关重要。本文将介绍液体无菌采集的操作技巧和注意事项，帮助读者全面了解和掌握这项技能。 一、液体无菌采集的操作技巧 1.准备工作 在进行液体无菌采集之前，确保操作区域整洁干净，并准备好所需的器具和试剂。检查器具的完好性和有效期，并检查消毒条件。务必佩戴个人防护装备，包括实验手套和口罩。 2.选择合适的容器 根据采集的液体性质选择合适的容器。常见的容器包括试管、离心管、培养皿等。确保容器在无菌状态下，并避免污染。 3.无菌操作技巧 液体无菌采集时，必须时刻保持无菌操作。首先，用消毒酒精或其它无菌溶液擦洗双手。然后，戴上无菌手套，并确保手套表面无明显破损。在采集样本前，务必将采集器具消毒。 4.采集液体样本

将无菌采集器具离心，以确保器具上没有附着的颗粒物。将采集器具直接放入样本中，确保器具完全浸湿。避免采集过多的样本，以免影响后续实验。 5.密封容器 在采集完液体样本后，务必及时将容器密封，并确保容器表面没有残留液滴。可以使用无菌膜或者盖子密封容器。 二、液体无菌采集的注意事项 1.避免交叉污染 在液体无菌采集的过程中，必须严格遵守无菌操作的原则，避免交叉污染。这包括：避免将未消毒的手套接触无菌物品，避免多次使用同一容器等。 2.避免剧烈摇晃样本 在液体无菌采集过程中，避免剧烈摇晃样本。过度摇晃会导致样本的混合和溅出，影响后续实验结果。 3.正确处理和标识样本 采集完液体样本后，务必正确处理和标识样本。对于不同种类的液体样本，要有相应的处理方法和标识要求。确保样本送至实验室后能够准确识别。 4.妥善处理废液

液体培养技术的操作步骤和关键技巧

液体培养技术的操作步骤和关键技巧 液体培养技术是现代微生物学研究的重要方法之一，它可以用于细胞生长、代谢产物分析、酶活性研究等领域。液体培养技术的操作步骤和关键技巧对于实验结果的可靠性和科学性至关重要。本文将对液体培养技术的操作步骤和关键技巧进行论述，以帮助读者更好地掌握这一技术。 一、准备工作 在进行液体培养实验前，必须进行准备工作。首先，要准备好所需的培养基和试剂。培养基的配制需要按照实验的需要进行，使用无菌技术操作，防止细菌的污染。其次，要准备好培养容器，如培养皿、培养瓶等。这些容器也需要在使用前进行无菌处理。最后，要准备好待培养的菌种或细胞。菌种的选择要根据实验的目的和要求来确定。 二、操作步骤 1. 准备液体培养基 首先，将所需的培养基配制好，按照配方将试剂加入到无菌水中，并进行搅拌混匀。然后，将配制好的培养基进行高温高压灭菌，以杀灭其中的细菌和真菌等微生物。 2. 培养容器的无菌处理 将培养容器（如培养瓶）放入高温高压灭菌器中进行高温高压处理，以确保容器内的细菌和真菌等微生物被杀灭。处理完毕后，使用无菌操作将培养容器取出。 3. 菌种接种 将待培养的菌种从冷冻保存物中取出，用无菌移液器将菌种接种到培养容器中的培养基中。注意，在接种菌种的过程中要保持无菌操作，避免细菌的污染。

4. 培养条件设定 根据待培养菌种的特性，设置适当的培养条件。包括培养温度、培养时间、培 养基的pH值、培养基的营养成分等。这些条件需要根据具体的实验要求进行设定，以提供合适的生长环境给菌种。 5. 培养过程的观察 在培养过程中，需要对菌种的生长情况进行定期观察。可以通过目测或使用显 微镜对菌种进行观察，并记录其生长速度、形态特征等。此外，也可以对培养基中的各种代谢产物进行分析，以研究菌种的代谢活性。 6. 培养液的采集与分析 在培养结束后，需要采集培养液进行进一步的分析。可以使用无菌提取方法将 培养液中的代谢产物提取出来，然后进行色谱、质谱等分析方法进行定性和定量分析。这样可以得到更详细和准确的菌种代谢信息。 三、关键技巧 1. 无菌操作 无菌操作是液体培养技术操作中的关键环节。在整个实验过程中，需要保持操 作场所的干净和无菌状态。使用无菌操作平台、消毒剂进行操作区域的清洁和消毒。同时，要做好个人的消毒和防护工作，包括佩戴实验手套、口罩等。 2. 培养条件的调控 培养条件的调控对于菌种的生长和代谢产物的产生具有重要作用。在进行液体 培养实验时，要根据菌种的需求调节合适的培养温度、培养基的pH值、氧气供应等。这些条件的调控需要根据实验的要求来进行，以获得最佳的实验结果。 3. 数据采集与分析

试剂试液培养基学习总结

试剂试液培养基学习总结 1、目的 目的是描述并在可能的情况下定义，在OMCLs中如何设置使用的试剂(化学品)的有效期(并指导OMCL应用它们)。 还旨在对用于定性、半定量和定量目的试剂溶液（自制溶液 in-house solutions）提供指导，规范其在omcl中的的使用、标签标示、储存和有效期管控。 2、范围 OMCL成员对商用试剂(化学品)和自制试剂溶液的使用。 不适用于商业现成试剂或即用型配制试剂（reagent preparationsfor immediate use），因为其不是存储的，而是当日使用。 3、试剂(化学试剂) 试剂是指固体，气体，纯化学或生化级的液体或溶液，有机溶剂以及水。 质量准则，假定质量准则由适当的内部标准操作程序(sop)所涵盖。一般情况下，试剂的选择、采购、接收和储存应特别考虑。重点的关键步骤是采购具有预期质量的试剂，以及在收到试剂后，检查和验证是否符合先前规定的规格标准。这些步骤必须在试剂的贴标和储存之前完成。 试剂的保质期是制造商给出的一个规定的期限或日期，通常可以

在该特定试剂的分析证书(CoA)上找到。在这段时间内或在到期日之前，如果试剂储存条件符合CoA中的质量标准（通常在材料安全数据表(MSDS)或在任何其他相关文件中，如CoA或标签），则此效期或期限是适用的并应遵守。 没有保质期（shelf life）或复试日期的试剂，有时，制造商没有定义保质期，因为在适当的条件下，未开封保存的试剂被认为具有广泛的保质期，或者制造商没有支持的稳定性数据。由于试剂的质量可能会因使用而改变(环境条件的影响)，因此强烈建议设定有效期。例如，这可以通过进行风险评估来实现。

初中化学实验教案：溶液浓度实验的操作步骤与结果分析

初中化学实验教案：溶液浓度实验的操作步骤与结果分析 1. 实验引言 在化学领域中，浓度是指溶液中所含溶质物质的量与溶剂总量之比。溶液浓度实验可以帮助学生理解溶液中物质的含量，掌握测量和计算溶液浓度的方法。 2. 实验目的 掌握使用色谱法测定氯离子浓度、重力滴定法和酸碱滴定法等方法计算未知溶液浓度的技巧。 3. 实验材料 •氯离子标准溶液（已知浓度） •碘标准溶液（已知浓度） •盐酸（HCl）、氨水（NH3）等草酸锌、羟基胺、盐类等实验试剂 4. 实验步骤 步骤一：准备工作 1.将所需试剂按照相应配比称称取，并将其放置于标准容器中。 2.准备好所需的实验仪器和装置，包括容量瓶、滴管、移液管、烧杯、试管 等。

步骤二：测量溶液的体积 1.使用容量瓶或移液管准确地取一定体积的已知浓度溶液，并将其转移到干 净试管中。 2.记录所取溶液的体积，并称为"VmL"。 步骤三：添加指示剂 1.在已取得待测溶液中加入适量的指示剂。常用的指示剂有淀粉溶液、甲基 橙等。 2.搅拌均匀，使指示剂充分与待测溶液混合。 步骤四：滴加反应剂 1.从容量瓶中取出一定体积的滴定试剂，并使用滴管缓慢地滴加到待测溶液 中。 2.滴加过程中要持续搅拌，并记录滴定试剂滴数，记作"N"。 步骤五：判断终点 1.实验者需要观察反应过程中颜色变化或者其他指标变化。 2.当观察到颜色发生明显改变时，停止滴定，并记录终点滴定试剂数，记作 "N0"。 5. 数据处理与结果分析 1.利用滴定试剂数、已知浓度溶液体积和待测溶液体积，根据计量关系计算 出未知溶液的浓度。

2.如果使用色谱法测定氯离子浓度，可以绘制氯离子标准曲线，并通过对比 样品的吸光度与曲线进行定量分析。 3.溶液浓度实验的结果分析需要考虑实验误差，对数据进行统计处理，并给 出合理的结论。 6. 安全注意事项 •在进行实验过程中要遵守实验室安全操作规范，佩戴护目镜和实验手套。•注意正确使用化学试剂，并避免吸入或接触有毒物质。 •确保对实验仪器和装置进行适当的清洁和消毒处理。 以上是初中化学实验教案：溶液浓度实验的操作步骤与结果分析。希望能对你有所帮助！如果还有其他问题，请随时提问。

学习液沉渣检查的操作步骤和解读指南

学习液沉渣检查的操作步骤和解读指南 液沉渣检查是一种常见的实验方法，用于分析和评估液体中的固体颗粒含量。本文将介绍液沉渣检查的操作步骤和解读指南，以帮助读者更好地了解和应用该实验方法。 一、操作步骤 1. 准备工作 在进行液沉渣检查之前，首先要对实验室进行准备工作，包括清洁实验设备，准备好所需的试剂和仪器。 2. 样品采集 从需要检测的液体中取样品。取样时要确保样品的代表性，并避免任何外界污染。 3. 沉淀样品 将取得的样品放置在一个容器中，使其静置一段时间，让其中的悬浮颗粒逐渐沉淀下来。 4. 沉淀样品的处理 将沉淀样品转移到一个离心管中，然后进行离心操作，以便将沉淀物与上清液分离。 5. 液沉渣观察

将沉淀样品倒置，并将其放在一个显微镜下观察。使用适当的增大 倍数，以便清晰地看到颗粒的形态、大小和数量。 6. 沉渣颗粒计数 在显微镜下，随机选择几个视野，使用目镜刻度计数器计数沉渣中 的颗粒数量。记录每个视野中的颗粒数，并计算平均值。 7. 结果分析 根据颗粒的形态、大小和数量，评估样品中的固体颗粒含量。可以 使用图表或报告的形式呈现结果。 二、解读指南 1. 样品分类 根据检测目的和需求，将样品进行分类，例如食品、环境、医药等。根据样品的特性和行业标准，判断颗粒含量是否符合相关要求。 2. 颗粒形态和大小 观察沉渣中的颗粒形态和大小，可以得出关于颗粒来源和特征的重 要信息。不同形态和大小的颗粒可能代表不同的物质和污染源。 3. 颗粒数量计算 根据颗粒计数的结果，可以评估样品中固体颗粒的含量。较高的颗 粒数量可能表明样品质量较差或受到污染。 4. 结果解读

学习灌装实验报告

学习灌装实验报告 学习灌装实验报告 一、引言 学习灌装实验是化学实验中的一项重要内容，通过实验可以了解灌装过程中的原理和操作技巧。本次实验的目的是研究灌装过程中的关键参数对产品质量的影响，并探讨如何优化灌装工艺，提高生产效率和产品质量。 二、实验原理 在灌装实验中，我们使用了灌装机进行自动化操作。灌装机通过控制液体的流量和速度，将液体准确地注入到瓶子中，实现产品的灌装。灌装机的核心部件是灌装头，它通过气压控制液体的流动，并通过传感器检测液位，确保灌装的准确性。 三、实验步骤 1. 准备工作：清洗瓶子和灌装机，确保无杂质和污染。 2. 设置参数：根据产品要求，设置灌装机的流量、速度和灌装量等参数。 3. 灌装操作：将待灌装液体放入灌装机的储液罐中，启动机器并将瓶子放置在灌装台上。 4. 监测液位：通过传感器监测液位，当液位达到设定值时，停止灌装。 5. 完成灌装：取出灌装好的瓶子，并进行封口和标识。 四、实验结果 通过实验我们发现，灌装过程中的关键参数对产品质量有着重要影响。首先，流量的大小直接影响了灌装的速度和稳定性。过大的流量会导致液体溅出或者灌装不均匀，而过小的流量则会延长灌装时间，降低生产效率。其次，灌装量

的准确性对产品质量和成本控制也非常重要。如果灌装量过多或者过少，都会 影响产品的使用效果和市场竞争力。 五、实验分析 根据实验结果，我们可以得出以下结论和分析： 1. 流量的选择应根据产品的特性和灌装要求进行调整。对于粘稠液体，应适当 增大流量，以保证灌装的顺畅性；而对于易挥发液体，则应减小流量，以防止 液体的损失。 2. 灌装量的准确性可以通过调整灌装时间和传感器的灵敏度来控制。在实际生 产中，可以通过对灌装机进行调试和校准，以提高灌装的准确性和稳定性。 3. 灌装过程中的温度和湿度也会对产品质量产生一定影响。在实验中，我们发 现温度过高会导致液体的挥发和氧化，而湿度过大则会引起液体的变质和霉变。因此，在实际生产中，应控制好环境条件，以确保产品的质量和安全性。 六、实验总结 通过本次实验，我们深入了解了灌装过程中的原理和操作技巧，并掌握了灌装 机的使用方法和调试技巧。同时，我们也发现了灌装过程中的关键参数对产品 质量的重要影响，并提出了相应的优化建议。在今后的工作中，我们将进一步 研究灌装工艺的改进和优化，以提高生产效率和产品质量。 七、参考文献 [1] 张三, 李四. 灌装实验报告[M]. 化学出版社, 20XX. [2] 王五, 赵六. 灌装机操作手册[M]. 机械工业出版社, 20XX. 以上是关于学习灌装实验的报告，通过实验我们对灌装过程中的关键参数和操 作技巧有了更深入的了解，并提出了优化灌装工艺的建议。这对于提高生产效

初中化学_粗盐中难溶性杂质的去除(实验)教学设计学情分析教材分析课后反思

《粗盐中难溶性杂质的去除》教学设计 执教者

《粗盐中难溶性杂质的去除》学案 学情分析

学生已经具备了过滤、蒸发等实验基本操作的知识，也有了有关酸碱盐和溶液的相关知识。在此基础上来学习粗盐的提纯，可以说是水到渠成。根据学生已有的知识和技能，来学习重结晶法提纯物质，对学生来说没有什么难度，自己看书便能找到答案，但是这样是不符合化学学科特点的，更不能体现学生的主体地位。因此，以学生已有的知识和技能为载体，来解决生活和生产上的实际问题，即将旧知识进行巩固，又学习了新方法。 效果分析 本课能密切联系学生的学习生活实际，精心选取典型的的事例，结合学生已有的生活经历和体验创设教学情境，设计符合学生实际的课堂活动，激发学生兴趣，调动学生学习的积极性；设计科学合理、有思维价值的问题，让学生在感悟、讨论、交流、辩论中培养学生自主合作、分析探究问题的能力。 由于大部分学生对实验操作比较熟悉，本实验的操作比较简单，效果比较明显，任务完成情况应该较好。能够顺利完成，并得到正确的结论。 教材分析 本课时学习的内容较少，也比较简单，主要目的是通过粗盐中的难容性杂质去除的实验向学生介绍分离混合物的一般方法，锻炼学生的实验操作技能并渗透从混合物中提纯和分离物质的思路和方法。除应用到一些溶液的知识外，还用到了前面学过的实验基本操作知识和酸、碱、盐的有关知识。重点是让学生通过实验，领悟从混合物中提纯和分离物质的思想和方法。依据新课标的要求，本节课的教学目标为： 知识目标：学会用重结晶法提纯混有泥沙的粗盐。 能力目标：通过粗盐提纯的实验，让学生动手操作中学会过滤和蒸发等分离混合物的基本操作方法。 情感目标:通过学生参与粗盐中难容性杂质的去除的过程，养成耐心、细致的使用习惯。培养善于合作、勤于思考、严谨细致、勇于实践的科学精神。 评测练习 1. 实验室里将粗盐制成精盐的过程中，在溶解、过滤、蒸发三个步骤的操作中都要用到玻璃棒，分别说明在这三种情况下使用玻璃棒的目的；

初中化学_【课堂实录】溶液的配制教学设计学情分析教材分析课后反思

《溶液的配制》教学设计 （1）教材分析 “溶液的配制”是初中化学一个重要的定量实验，也是新课程标准要求学生学会做的基本实验之一。通过实验进行科学探究，是学习化学的重要方法。此实验用到的称量仪器是托盘天平和量筒，能否正确使用托盘天平和量筒，对减少实验误差，起至关重要的作用。本课对之前所学过的溶质质量分数进行深入了解，并且学会将配置溶液的实验方法应用于实际生活和生产中，让化学知识为人类服务。 （2）学情分析 学生学习本课之前对溶质质量分数已有一定的了解，教师能够利用的是学生对配制溶液的实验方法仍然有强烈的兴趣。调查表明，学生对化学实验充满了憧憬，他们对化学仪器、药品、可能出现的意想不到的实验现象充满了好奇。本课的重点是使学生主动体验实验探究的过程，在知识的形成、联系、应用过程中养成科学态度，获得科学方法，练习观察、记录、分析实验现象并得出结论等技能。另外，通过一系列定量实验，使学生体会到定量实验在化学研究中的重要作用。 （3）教学目标 知识与技能： 1、通过自主思考和合作探究，学会配制一定溶质质量分数溶液的方法。 2、通过溶液配制的具体操作，达到熟练取用药品、正确使用托盘天平和量筒等仪器的目的。 过程与方法： 3、以配制一定溶质质量分数的溶液为载体，以自主、合作、探究为主要学习方式，发展学生探究能力，提高学生科学素养。 情感、态度、价值观： 4、通过了解溶液在生活、生产、医疗上的应用，感受化学与生活息息相关。通过溶液的配制，体会定量实验在化学研究中的重要作用，养成“动脑思考、规范操作、仔细观察”的实验习惯和严谨认真的科学态度。 （4）教学流程

注： 【学生课前活动】1、查阅资料，了解溶液在生产、生活和科学研究中的应用。 2、复习托盘天平和量筒的正确操作。 学情分析 初四学生已经具备了一定的化学知识，对溶液的组成已经有了宏观与微观、定性与定量的认识。在日常生活中有配制溶液的体验，但还没有根据需要定量配制溶液的意识；初步掌

学习液离心沉淀法的操作步骤和解读

学习液离心沉淀法的操作步骤和解读液离心沉淀法是一种常用于分离悬浮物和溶解物的实验方法。通过 利用离心机的离心力，可以使悬浮物沉淀到管底，从而实现物质的分离。本文将介绍学习液离心沉淀法的基本操作步骤和对实验结果的解读。 一、实验所需材料和设备 在进行液离心沉淀实验前，需要准备以下材料和设备： 1. 离心管：通常为透明塑料管，具有较好的耐腐蚀性能； 2. 标准溶液：用于校准离心机的转速，通常为已知浓度的某种溶液； 3. 待测样品：液体样品，需要分离其中的悬浮物； 4. 离心机：用于提供离心力的仪器设备； 5. 定时器：用于记录离心时间。 二、液离心沉淀法的操作步骤 1. 校准离心机转速 首先，需要校准离心机的转速。取一定量的标准溶液，将其倒入离 心管中，然后将离心管放入离心机内，调节离心机的转速至所需的数值。通常，离心速度的单位为r/min（转/分钟）。 2. 准备样品和离心管

将待测样品充分摇匀，保证样品的均匀性。然后，取一定量的样品，缓慢地倒入离心管中，注意避免产生气泡。 3. 装填离心机 将装有样品的离心管放入离心机内，确保离心管上下位置的平衡， 保持离心管之间的距离。 4. 开始离心 关闭离心机的盖子，设置离心机的转速和离心时间。根据样品的性 质和所需沉淀速度，设置适当的离心转速和离心时间。 5. 结束离心 当离心时间到达设定的时间后，打开离心机的盖子，取出离心管。 注意，离心管内的沉淀物应保持在管底，避免与上层液体混合。 6. 分离上清液和沉淀物 将离心管慢慢倾斜，用吸管或移液器将上清液吸取到另一个容器中，避免吸取到沉淀物。如有需要，可以多次重复此步骤以确保上清液完 全分离。 7. 对沉淀物进行处理和解读 取出离心管，观察离心管中残留的沉淀物。根据实验的目的和需要，可以对沉淀物进行进一步处理，如洗涤、干燥等。然后，根据沉淀物 的性质和数量，进行数据分析和解读。 三、实验结果的解读

高中生物_《植物细胞的质壁分离与复原》教学设计学情分析教材分析课后反思

“植物细胞的质壁分离与复原”的实验教学设计 【教材分析及设计思路】 “植物细胞的质壁分离与复原”实验，应该说是教材中“探究植物细胞的吸水和失水”实验的一部分，原实验是一个探究实验，难度较大，但是本课题只从质壁分离与复原角度进行实验，降低了实验难度，主要是让学生通过实验，学会观察质壁分离与复原的方法，明确质壁分离与复原的现象。因此依据新课标，在教学中采用“自主、合作、探究”教学方式。以小组合作学习为主，提高能力，掌握方法。 【教学目标】 1.知识与技能：说明植物细胞发生质壁分离与复原的原理及条件。 2.过程与方法：学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。 3.情感、态度和价值观： (1)培养学生在科学研究过程中一丝不苟的科学态度和实事求是的科学精神; (2)学会合作分工，与他人分享实验成果。 【教学重点】 学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法； 【教学难点】 （1）洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片的制作。 （2）对实验现象与结果的分析。 【实验准备】 1、材料：紫色的洋葱鳞片叶 2、用具：刀片，尖头镊子，滴管，载玻片，盖玻片，显微镜，吸水纸。 3、试剂：质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液，质量浓度为0.5g/ml的蔗糖溶液，清水等。【教学方法】 本节课以自主探究为主要学习方式，学生通过科学探究体验、获得知识技能，培养能力。故采用讨论学习法，发现性学习法。

【教学流程图】 【实验教学过程】

【板书设计】 四、实验步骤制作临时装片显微镜观察0.3g/ml蔗糖

教学用具

五、学情分析： 高中阶段学生具备一定的知识水平，思维能力、学习能力也得到一定的发展。 但在实验技能方面还相当欠缺特别是农村中学的学生，初中实验基本没做过，高中实验条件欠缺，因此实验能力较差，发现问题、分析问题、解决问题的探究思维很不成熟。 针对学生现有的水平，在教学过程中运用的教学方法有：层进设问法讨论法探究法层进设问法，使学生容易开展科学探究，这也符合学生的认知规律。选用探究法教学适宜开展教学，能充分训练学生的观察能力、分析能力和创造性思维。在探究过程中，让学生参与讨论。这样，既深化知识，又训练了学生的表达能力、交流能力，培养了学生合作学习的能力。 八、效果分析： 实验效果基本可以，大部分同学能观察到质壁分离及复原现象，能观察到液泡颜色的变化、液泡体积的变化，也能看到原生质层位置的改变，也能看到质壁分离的复原现象。能通过小组分工、合作，培养学生的合作意识，能通过学生的实际操作锻炼学生的动手能力。 出现的问题及原因分析： 1.撕取洋葱鳞片叶表皮细胞撕取不好，液泡破裂，色素外流，导致观察不清。 2.质壁分离时间过长，使细胞失水过多死亡，导致观察不到质壁分离不能复原现象。 四、教材分析： 1教材的地位和作用 《观察植物细胞的质壁分离与复原》位于人教版高中生物必修教材第一册第四章第一节，学生已经熟悉了细胞膜的结构，细胞膜的制备实验，并基本掌握临时装片的制作和显微镜的使用等技能。为即将学习的物质运输做好了铺垫。根据本教材的结构和内容分析，结合着高二年级学生的认知结构及其心理特征，我制定了以下的教学目标： 2.教学目标：1.知识与技能：说明植物细胞发生质壁分离与复原的原理及条件。 2.过程与方法：学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。 3.情感、态度和价值观： (1)培养学生在科学研究过程中一丝不苟的科学态度和实事求是的科学 精神。 (2)学会合作分工，与他人分享实验成果。 【教学重点】学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法； 【教学难点】（1）洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片的制作。

微生物学实验三 培养基的配制及灭菌

实验三培养基的配制及灭菌 培养基是指利用人工方法将适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的各种营养物质混合配制而成的营养基质。主要用于微生物的分离、培养、鉴定以及菌种保藏等方面。培养基一般应含有微生物生长繁殖所需要的碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子和水等营养成分。此外，为了满足微生物生长繁殖或积累代谢产物的要求，还必须控制培养基的pH。一般细菌、放线菌适于生长在中性或微碱性的环境中，而酵母菌和霉菌则适于生长在偏酸性的环境中。因此，在配制培养基时，须将培养基调节在一定pH的范围内。 迄今为止，培养基的种类极其繁多。按培养基的成分，可将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。 天然培养基是指利用动物、植物、微生物或其它天然有机成分配制而成的培养基。其优点是营养丰富、价格便易；缺点是成分不能准确确定且不稳定。实验室常用的牛肉汁或麦芽汁培养基即为天然培养基。 合成培养基是指完全利用已知种类和成分的化学试剂配制而成的培养基。优点是各成分均为已知且含量稳定，缺点是价格较贵。实验室常用的高氏一号培养基即为合成培养基。 半合成培养基是指由天然有机成分和已知化学试剂混合组成的培养基。实验室常用的马铃薯葡萄糖培养基即为半合成培养基。 按培养基的物理状态，可将培养基分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基。固体培养基是指在液体培养基中加入一定量的凝固剂（常加1.5％～2％的琼脂）经融化冷凝而成；半固体培养基是指在液体培养基中加入0.2％～1％左右的琼脂，经融化冷凝而成；液体培养基是指培养基中不加凝固剂琼脂，培养基呈液体状态。 按培养基的用途，可将培养基分为加富培养基、选择培养基和鉴别培养基。 加富培养基是指在培养基中加入某些特殊营养物质，促使某种持殊性能的微生物迅速生长，有利从混合菌群中分离出所需种类微生物。例如为了分离能够利用石蜡的微生物，常在培养基中加入石蜡作为碳源。 选择培养基是指在培养基中加入某些微生物生长抑制剂，抑制那些不需要的微生物的生长，以达到从混杂微生物菌群的环境中分离到所需的微生物。例如用于分离真菌的马丁培养基。 鉴别培养基是指在培养基中加入特定指示剂，它能与某一微生物的代谢产物产生显色反应，便于微生物的快速鉴定。例如用于鉴定大肠杆菌的伊红美蓝培养基。 本章着重介绍培养基的常规配制程序，培养细菌、放线菌、酵母菌和霉菌常用培养基的配制方法，以及几种常用选择培养基和鉴别培养基的配制方法。此外还介绍高压蒸汽灭菌法，它是微生物学实验中最常用也是最重要的灭菌方法。

MTT配制、原理、操作步骤、结果分析、注意事项

MTT配制、原理、操作步骤、结果分析、注意事项 D

一般细胞增殖实验每孔2000个就可以（相当于细胞悬液密度为2×104/ml），细胞毒性实验每孔5000—10000个（相当于细胞悬液密度为5×104/ml）。此外，还应根据细胞本身特性，如生长快慢，来决定细胞数量。比如：生长较快的细胞密度可略小。 2．将细胞悬液制备好后，轻轻混匀，每孔加入100ul, 这样待测细胞的密度为5000—10000/孔（边缘孔用无菌PBS填充）。 ●注意：因细胞在混匀后仍要继续沉降， 因此接种的过程中要反复多次混匀，如每 加6个孔就混匀一次，以确保接种的细胞 密度在各孔之间完全相同，这对于MTT 的结果至关重要。 3.将接种好的细胞培养板放入培养箱中培养，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板）,加入浓度梯度的药物,原则上，细胞贴壁后即可加药，或两小时，或半天时间，但我们常在前一天下午铺板，次日上午加药.一般5-7个梯度,每孔100ul,设3-5个复孔.建议设6个，否则难以反应真实情况。下图可做为96孔板的的参考步局。 ●对于加药，有人直接将药物按不同体积加入到96孔板中，以形成浓度梯度。但本人认为应尽量在EP管中将不同浓度的药物配好，然后将96孔板中的培养上清去掉（可以用排枪吸走）

再加入100ul含不同浓度药物的培养基，这样能保证药物浓度的准确。另外，需注意的是，如果用这种方法，不要把96孔板的培养液全部吸走后再加药，应该吸完一部分后立即加样，避免由于96孔板干燥引起细胞死亡。 4.5%CO2，37℃孵育16-48小时，倒置显微镜下观察药物的作用效果。下图为一典型的药物梯度为细胞的毒性作用。 5.每孔加入10ulMTT溶液（5mg/ml，即0.5%MTT），继续培养4h。若药物与MTT能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS冲2-3遍后，再加入含MTT的培养液。 6.终止培养，准备溶解结晶。 溶解结晶的方法有两种，第一种，用 DMSO溶解 1)MTT加入培养4h后，结晶可充分形 成。将上清去掉，该过程要注意不能把 Formazan结晶移走。有人直接用移液 器将上清移走，也有人建议先铺几张滤 纸在桌面，然后将96孔板轻轻倒置， 这样上清便被滤纸吸走，以减少结果的 损失。个人认为，这两种方法都有可能 导致结晶的损失，从而引起结果的不准 确。采用哪种方法，可以自己摸索一下 再决定。 2)每孔加入150ul二甲基亚砜，置摇床 上低速振荡