双酶偶联催化分光光度法测定血清次黄嘌呤

双酶偶联催化分光光度法测定血清次黄嘌呤

作者：李忠琴;许小平;王武

作者机构：江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214036;福州大学化学化工学院,福建,福州,350002;江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214036;福州大学化学化工学院,福建,福州,350002;江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214036

来源：光谱学与光谱分析

ISSN：1000-0593

年：2008

卷：028

期：009

页码：2169-2172

页数：4

中图分类：O657.3

正文语种：chi

关键词：黄嘌呤氧化酶;辣根过氧化物酶;次黄嘌呤检测;分光光度

摘要：依据黄嘌呤氧化酶和辣根过氧化物酶催化反应的特征,研究了以黄嘌呤氧化酶-辣根过氧化物酶-苯酚-4-氨基安替比林为反应显色体系,建立了检测血清和组织中次黄嘌呤浓度的新方法.通过对该测定体系影响因素的考察,确定最佳反应条件为:黄嘌呤氧化酶(XO,EC 1.2.3.22)0.32 U·mL-1,辣根过氧化物酶(HRP)7.oU·mL-1,4-氨基安替比林(AAP)1 mmol·L-1,苯酚(PA)6 mmol·L-1溶于100 mmol·L-1 Tris-HCL缓冲液(pH 8.3);反应温度为37℃,保温时间为8 min检测波长为508 nm.测定次黄嘌呤浓度的线性范围为0.2～3.0 mmol·L-1,线性关系良好(r=0.997 9),检测限为0.05 mmol·L-1.方法操作简单易行,测定结果准确可靠.可有效应用于普通实验室和常规临床血液生化检测.