深圳市人类间充质干细胞库建设与管理规范

SZDB/Z 126—2015

I SZDB/Z

深 圳 市 标 准 化 指 导 性 技 术 文 件

人类间充质干细胞库建设与管理规范

2015 - 02 -06发布 2015-03 -01实施 深圳市市场监督管理局 发布 ICS

07.080 C 04

SZDB/Z 126-2015

SZDB/Z 126—2015

II 目次

前言................................................................................. I II

1 范围 (1)

2 规范性引用文件 (1)

3 术语和定义 (1)

4 生命伦理 (4)

5 人类间充质干细胞库建设 (4)

6 机构设置 (5)

7 操作规范 (6)

8 安全管理 (10)

附录A（资料性附录）供者健康信息采集 (16)

附录B（资料性附录）人类间充质干细胞样本编码规则 (17)

附录C（资料性附录）人类间充质干细胞库整体的操作流程 (18)

参考文献 (19)

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III

前言

本指导性技术文件按GB/T 1.1–2009给出的规则起草。

本标准由深圳市经济贸易和信息化委员会归口。

本标准负责起草单位：深圳华大基因研究院。

本标准主要起草人：周欣、张勇、张曦、冀旭、燕舞、林洁璇、张家文、黄海军、彭冬秀、孙长斌、

杨阳、黎苑杰。

本标准为首次发布。

SZDB/Z 126—2015 人类间充质干细胞库建设与管理规范

1 范围

本标准规定了人体来源间充质干细胞库相关的生命伦理、间充质干细胞库建设、机构设置、操作规范和安全管理的基本方法。

本标准适用于人体来源间充质干细胞库的建设与管理规范。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本

适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。

GB/T 1.1-2009 标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写

GB 2894-2008 安全标志及其使用导则

GB/T 5458-2012 液氮生物容器

GB 7000.2-2008 应急照明灯具安全要求

GB/T 12905-2000 条码术语

GB 13690-2009 化学品分类和危险性公示通则

GB 15258 化学品安全标签编写规定

GB/T 17172-1997 417 条码

GB/T 18347-2001 128 条码

GB/T 18883-2002 室内空气质量标准

GB 19489-2008 实验室生物安全通用要求

GB 19652-2005 放电灯（荧光灯除外）安全要求

GB/T 20269-2006 信息安全技术信息系统安全管理要求

GB/T 22278-2008 良好实验室规范原则

GB/T 27025-2008 检测和校准实验室能力的通用要求

GB 50016-2006 建筑设计防火规范

GB 50034-2004 建筑照明设计标准

GB 50052-2009 供配电系统设计规范

GB 50140-2005 建筑灭火器配置设计规范

GB 50346-2012 实验室建筑技术规范

GB 50351-2005 储罐区防火堤设计规范

AQ 3013-2008 危险化学品从业单位安全标准化通用规范

CNAS-CL05-2009 实验室生物安全认可准则

MH/T 1019-2005 民用航空危险品运输文件

WS/T 224-2002 真空采血管及其添加剂

WHO Third Edition 实验室生物安全手册

3 术语和定义

1

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2 下列术语和定义适用于本指导性技术文件：

3.1

干细胞库stem cell bank

用于储存不同来源干细胞的专门机构。

3.2

样本specimen

在特定时间从受试者或捐献者中采集的器官、组织等标本。

3.3

接收区 receiving zone

样本到达时用于初步检查、清点接收或样本转移前进行包装、清点的缓冲区域。

3.4

冷藏区refrigerated storage zone

为样本提供冷藏储存环境（2℃～8℃）或冷藏设备（温度为2℃～8℃）的区域。

3.5

冷冻区frozen storage zone

为样本提供0℃以下储存环境或设备的区域。根据低温程度的不同，可分为普通低温冷冻储存区（–4℃低温设备区）、超低温冷冻储存区（–86℃低温设备区）、深低温冷冻储存区（–135℃以下低温设备区）。

3.6

细胞制备cell preparation

细胞样本经过一系列规范处理达到入库标准的过程。

3.7

质量控制quality control

为达到入库质量要求所采取的操作技术和活动。

3.8

样本编码sample coding

根据编码规则对样本进行编号的过程。

3.9

细胞分离cell isolation

从机体组织或器官中分离出单个细胞的过程。

SZDB/Z 126—2015 3.10

原代培养primary culture

直接从机体取下组织、器官或细胞后立即进行的培养过程。

3.11

传代培养subculture

当原代培养成功后，随着培养时间的延长和细胞不断分裂，为避免发生接触性抑制，

将培养物分割成小的部分，重新接种到新的培养器皿（瓶）的培养基中进行的培养过程。

3.12

细胞冻存 cell cryopreservation

使细胞暂时脱离生长状态而保存其细胞特性的方法。

3.13

细胞复苏cell thawing

使细胞从脱离生长状态重新获得生长活力的方法。

3.14

冻存管tube

在细胞冻存过程中用于储存细胞的特殊密封的无菌小管。

3.15

液氮罐liquid nitrogen container

用于储存细胞的一种深低温冷冻设备。

3.16

生物危险 biohazard

因生物因子导致的直接或潜在的危险。

3.17

实验室生物安全laboratorial biosafety

实验室的生物安全条件和状态不低于允许水平，并符合相关法规和标准对实验室生物安

全责任的要求，避免实验室人员、来访人员、社区及环境受到不可接受的损害。

3.18

化学安全chemical safety

使用化学物品时遵守一定的规范并有相应的紧急预案应对事故,防止危险化学品事故的

发生并将事故的影响或损失降至最低。

3.19

3

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4 知情同意informed consent

具有完全民事行为能力的自然人，在充分获取信息并准确理解其内容后，作出参与研

究的决定，应签署知情同意书，一式两份。此决定不受恐吓、利诱或其他不当行为的影响。

3.20

生命伦理bioethics

指生命科学和卫生保健领域内人类行为的道德规范和原则。

3.21

伦理审查委员会ethical review committee

负责对科学研究中涉及的伦理道德问题进行评估和审查的专门组织。

3.22

科学审查委员会scientific review committee

负责对生物样本采集和使用的方案进行科学性审查的专门组织。

3.23

生物安全评审委员会institutional biosafety committee

负责制定生物安全政策和安全操作规范的专门组织。

4 生命伦理

4.1 知情同意

人类间充质干细胞库的工作人员应当对风险及收益进行有效评估，确保样本提供者或其近亲属对项目信息充分知情、形成全面和准确的认识，自愿做出是否同意的决定，并签署知情同意书。

4.2 隐私保护措施

研究人员、医务人员应当对样本提供者的个人信息采取保密措施，若确需提供，需要提交科学委员会批准后方可提供。违反法律规定的，应依法追究民事责任、行政责任和刑事责任。

4.3 安全保护

研究人员或相关医务人员在获取样本的过程中一般为最小风险，不增加样本提供者的额外风险。避免为取样本而置样本提供者于危险之中。

5 人类间充质干细胞库建设

5.1 人类间充质干细胞库场地建设及要求

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5.1.1 人类间充质干细胞库场地选择要符合干细胞制备实验室以及干细胞长久低温保存的

要求。

5.1.2 符合人类间充质干细胞实验室要求，是指干细胞制备过程中无菌、无病毒、无生物

化学物质、无尘和无噪音等污染如垃圾场旁、医院废弃物旁、道路旁和闹市中等地方不能作

为人类间充质干细胞库建设场地。

5.1.3 符合长久保存要求，是指不能频繁更换保存场地，因此将要进行拆迁的建筑，易发

生自然灾害(如易发生洪水、泥石流、海啸和火山爆发等)的地方不能作为人类间充质干细胞

库建设场地。

5.1.4 人类间充质干细胞库的建设设计应符合GB 19489-2008的规定，功能区域应至少包

括样本接收区、样本预处理区、干细胞培养区、干细胞操作区、干细胞冻存区、人类间充质

干细胞库和医疗废弃物处理区等区域，每个区域应标识洁净和风险级别。

5.1.5 人类间充质干细胞库的办公区与实验区之间应有墙壁进行物理隔开，工作人员由安

全通道进入实验区，办公区域的通风系统应与实验区域的通风系统独立分开，以确保办公区

域的空气质量不受实验区域空气的影响。

5.1.6 人类间充质干细胞库的建设应由具有实验室建设资质的工程公司进行建设，建设过

程中所使用工人应为上岗员工，不得随意更换建设人员。人类间充质干细胞库的建设所用材

料应符合要求，达到防强酸、防强碱、防震等效果。人类间充质干细胞库建设完成后，各功

能区域的洁净级别应由专业的检测人员进行检测并出具合格证明。

5.2 实验室设施与设备

5.2.1 空调与通风系统

5.2.1.1 通风系统应符合GB/T 18883的规定，气流由“清洁”空间向“污染”空间流动，

最大限度减少室内回流与涡流。

5.2.1.2 人类间充质干细胞库实验室空调系统应符合GB 19489-2008的规定，有足够的温

度和湿度控制能力，实验室各个区域的温度与湿度应控制在规定范围内。

5.2.2 照明系统

人类间充质干细胞库的照明系统应符合GB 19489-2008的规定，干细胞库及实验室的核

心工作区的照度不低于350勒克斯，其它区域不低于200勒克斯。

5.2.3 备用电源

人类间充质干细胞库实验室的供电系统应符合GB 50052和GB 19489-2008的规定，应

急照明不得少于30分钟，需安装后备电池或者与后备发电机相连，并符合GB 7000.2的规

定。

5.2.4 安全设施

人类间充质干细胞库的安全设施应符合GB 19489-2008的规定，包括门禁、监控、报警

和危险处理系统。

6 机构设置

6.1 伦理审查委员会

5

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6.1.1 人类间充质干细胞库设伦理审查委员会。伦理审查委员会由医药学、伦理学、法学等专家以及无利害关系的社区代表等人员组成。

6.1.2 伦理审查委员会对相关伦理问题进行审查和评价。伦理审查委员会负责建立干细胞库的伦理准则和相应的伦理操作规范，并在科学性前提下对样本相关研究项目开始前进行伦理审查及对已通过审查或正在进行的项目进行伦理监督与审查，以保护样本提供者的权益和安全。

6.2 科学审查委员会

6.2.1 人类间充质干细胞库应设有科学审查委员会。科学审查委员会应由生物和医学领域的专家组成。

6.2.2 科学审查委员会应负责对生物样本采集和使用的方案进行科学性审查。

6.3 生物安全评审委员会

6.3.1 人类间充质干细胞库应设有生物安全评审委员会。生物安全评审委员会应由生物学家、医务人员、技术人员和实验室管理人员等各方面的专家或工作人员组成。

6.3.2 生物安全评审委员会负责干细胞库的生物安全政策和安全操作规范的审查。

7 操作规范

7.1 采集

7.1.1 采集场所

7.1.1.1 人类间充质干细胞样本的采集场所或环境需达到相应洁净度，保证无菌采集，标本可用。

7.1.1.2 牙齿样本和经血样本的采集场所无特别要求，需注意个人卫生。

7.1.1.3 羊水样本、新生儿脐带、脐带血和胎盘样本、人类骨髓液样本的采集场所需达到Ⅱ级一般洁净手术室要求。

7.1.1.4 人类脂肪组织、滑膜组织和宫内膜组织样本的采集场所需达到Ⅲ级普通洁净手术室要求。

7.1.2 采集方法

7.1.2.1 总则

人类间充质干细胞库应针对不同样本制定相应标准采集方法和管理制度，并在符合GMP 的标准上严格执行。人类间充质干细胞样本需由专业的医护人员或接受过样本采集专业培训的人员进行。以下方法为人类间充质干细胞库建议或可用样本采集方法。

7.1.2.2 新生儿脐带来源间充质干细胞样本采集方法

a)待胎儿娩出后，用蘸有75%酒精的纱布擦拭脐带；

b)截取至少15厘米无针孔的脐带放入保存液中，标识清楚，置于无菌采集袋中；

c)脐带的两端需要用手术线结扎。

7.1.2.3 新生儿胎盘来源间充质干细胞采集方法

a)胎儿娩出后，待胎盘与母体完全分离，用蘸有75%酒精的纱布擦拭；

b)迅速将胎盘放入保存液中；

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c)将胎盘放入无菌采集袋，清晰标识。

7.1.2.4 新生儿脐带血来源间充质干细胞采集方法

a)待新生儿娩出后，断脐结扎。用蘸有75%酒精的纱布擦拭胎盘远端脐带。

b)采血针穿刺消毒部位脐静脉，引流脐带血至脐带血采集袋，至无脐带血流出。

c)旋紧采血袋软管旋塞，或做热合处理，并清楚标识。

7.1.2.5 人类脂肪来源间充质干细胞采集方法

a)脂肪组织采集前应联系整形医师，制定抽脂方案和术前术后的防感染措施。

b)行脂肪抽吸术，抽取脂肪组织，置于无菌采集袋中保存，并清楚标识。

7.1.2.6 人类牙髓来源间充质干细胞采集方法

a)采集儿童正常生长期即将脱落乳牙，或成年人正畸或阻生需拔除的第三磨牙。

b)采集之前清洁口腔；并用棉球擦拭牙齿四周进行消毒。

c)用拔牙器械拔出牙齿，即时转移到无菌保存液中保存，并清楚标识。

7.1.2.7 人类骨髓来源间充质干细胞采集方法

a)骨髓组织采集前应联系外科医师，制定骨髓穿刺方案和术前术后的防感染措施。

b)行骨髓穿刺术，抽取骨髓液，即时转移至无菌采集袋中保存，并清楚标识。

7.1.2.8 人类子宫内膜间充质干细胞采集方法

a)手术切除成年女性子宫内膜增厚组织或子宫内膜异位组织，置于采集液中保存，并

清楚标识。

b)成年女性月经期第二天或第三天，将月事杯消毒后置于阴道内，收集经血。月事杯

取出后，将经血转移至保存液中保存，并清楚标识。

7.1.2.9 人类羊水来源间充质干细胞采集方法

a)在孕妇妊娠中期，妊娠16～20周时进行羊水穿刺。

b)在B超引导下，抽取羊水样本。

c)将羊水样本转移至无菌采集袋中，并清楚标识。

7.1.2.10 人类母乳来源间充质干细胞采集方法

a)清水煮沸吸乳器3～5分钟灭菌。清洁双手，并75%酒精消毒哺乳期女性乳头及周围

部位。

b)依照吸乳器操作说明，采集母乳。

c)将母乳转移至采集液中保存，并清楚标识。

7.1.2.11 人类滑膜来源间充质干细胞采集方法

a)无菌环境下，手术采集供者关节处滑膜组织样本。

b)采集后将样本立即转移至保存液中保存，并清楚标识。

7.2 样本接收

7.2.1 样本接收应遵从安全与准确的原则，做到样本与供者一一对应。

7.2.2 样本接收时，做好自我防护工作，接触样本之前应戴好手套与口罩。

7.2.3 首先送达接收室的运输箱内样本及信息记录表是否齐全，同时确认记录表上应该记

录的信息已经填写完成。

7.2.4 观察样本容器外包装的外观，检查有无破损并记录。

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7.2.5 检查信息记录表上信息是否与样本信息一一对应，确认无误后进行接收。

7.2.6 接收样本后用医用酒精把容器外表面擦拭干净，如不能及时对样本进行处理，要把样本保存在规定保存条件下。

7.2.7 样本接收后应及时将信息反馈给样本发送方。

7.3 人类间充质干细胞的分离与原代培养方法

7.3.1 总则

人类间充质干细胞库应建立人类间充质干细胞的样本采集以及干细胞分离和原代培养的标准操作规程及管理程序，并在符合GMP的标准上严格执行。可行及建议样本采集方法和原代细胞分离方法。

7.3.2 新生儿脐带间充质干细胞分离与原代培养

新生儿脐带组织剥取华通氏胶，以组织块培养法或酶消化法分离新生儿间充质干细胞，贴壁法做原代培养。

7.3.3 新生儿脐带血来源间充质干细胞分离与原代培养

新生儿脐带血样本，与磷酸缓冲液1:1稀释后，以密度梯度离心法分离单个核细胞，贴壁法培养。定期更换培养基直到贴壁生长的成纤维细胞样的细胞达到汇合。

7.3.4 新生儿胎盘间充质干细胞分离与原代培养

剥取胎盘羊膜、绒毛膜或绒毛组织，以酶消化法分离胎盘间充质干细胞，贴壁法做原代培养。

7.3.5 人类脂肪间充质干细胞分离与原代培养

成人脂肪组织，以酶消化法分离脂肪间充质干细胞，贴壁法做原代培养。

7.3.6 人类牙髓间充质干细胞分离与原代培养

牙齿样本，完整剥离牙髓，以酶消化法分离牙髓间充质干细胞，贴壁法做原代培养。

7.3.7 人类骨髓间充质干细胞分离与原代培养

人骨髓液样本，以密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞，贴壁法作原代培养。

7.3.8 人类宫内膜间充质干细胞分离与原代培养

宫内膜组织样本以酶消化法分离子宫内膜干细胞，并做原代培养。或经血样本以密度梯度离心法，分离子宫内膜干细胞，贴壁法做原代培养。

7.3.9 人羊水来源间充质干细胞分离与原代培养

人羊水样本，100目滤器过滤后离心，弃上清。以培养液重悬细胞沉淀，贴壁法培养。定期更换培养基直到贴壁生长的成纤维细胞样的细胞达到汇合。

7.3.10 人类母乳来源间充质干细胞分离与原代培养

人类母乳样本，100目滤器过滤后离心，弃上清。以培养液重悬细胞沉淀，贴壁法培养。定期更换培养基直到贴壁生长的成纤维细胞样的细胞达到汇合。

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SZDB/Z 126—2015 7.3.11 人类滑膜来源间充质干细胞分离与原代培养

人类滑膜组织样本，以酶消化法分离滑膜间充质干细胞。离心洗涤后，贴壁法培养。定

期更换培养基直到贴壁生长的成纤维细胞样的细胞达到汇合。

7.4 换液

为了保证细胞所处环境的稳定，需进行换液操作，并在符合GMP要求基础上严格执行，

并有严格的质量控制，需有明确的细胞鉴别特征，无外源微生物污染。

7.5 传代

根据原代细胞融合度，判断是否可以进行传代操作，传代操作应即时、迅速、密度适宜，

并在符合GMP要求基础上严格执行，并有严格的质量控制，需有明确的细胞鉴别特征，无外

源微生物污染。

7.6 冻存

细胞数目达到冻存要求的细胞系，可进行冻存操作。冻存细胞需加入适当的冷冻保护液，

遵循程序降温的原则，并在符合GMP要求基础上严格执行，有严格的质量控制，需有明确的

细胞鉴别特征，无外源微生物污染。

7.7 入库

将冻存好的细胞移至液氮罐中（温度为-196～-135 ℃）长期储存。并有严格的过程控

制及完整的的信息录入、档案填写。

7.8 细胞复苏

7.8.1 自液氮或干冰容器中取出冻存管，检查盖子是否旋紧。

7.8.2 将冻存管立即投入37℃水浴锅中，轻摇冻存管使其在1分钟内全部融化，以75%酒

精擦拭保存管外部，移入无菌操作台内。

7.8.3 取出细胞悬液，将解冻的细胞悬液加入含有培养基的离心管内，离心洗涤2～3次，

加入新鲜培养基重选细胞，混合均匀，转移至培养瓶，放入CO2 培养箱培养。

7.9 细胞出库

7.9.1 总则

人类间充质干细胞在需要使用、转移或销毁时，可执行细胞出库。执行细胞出库前应先

向伦理审查委员会和科学审查委员会提出申请，通过审核后方可进行。人类间充质干细胞库

应建立人类间充质干细胞使用、转移和销毁的标准操作规程。

7.9.2 细胞使用出库

7.9.2.1 临床治疗需使用细胞库内细胞时，实验室出库负责人员需核对库存细胞信息和细

胞使用者信息，制定严格的细胞发放计划，由实验室出库负责人员填写能够记录细胞储存位

置变更的相关文件后，由质控人员监督从液氮罐中取出需要的细胞进行使用。

7.9.2.2 科研性使用库内细胞时，需保证细胞供者在充分知情并签订知情同意书的情况下

完成细胞出库，由实验室出库负责人员填写能够记录细胞储存位置变更的相关文件后，由质

控人员监督从液氮罐中取出需要的细胞进行使用。

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7.9.2.3 其他情况有需要使用细胞库内细胞时（如定期检测细胞活力等），由实验室出库负责人员填写能够记录细胞储存位置变更的相关文件后，由质控人员监督从液氮罐中取出需要的细胞进行使用。

7.9.3 细胞转移出库

7.9.3.1 人类间充质干细胞库内部因整改、扩容或评估冻存干细胞质量等情况而需要进行干细胞转移时，按照具体的干细胞转移操作规范进行转移操作。

7.9.3.2 干细胞转移操作所用的时间应在规定时限内，确保干细胞及其冻存容器的温度在-135℃以下。

7.9.3.3 转移过程要做好相应记录。

7.9.4 细胞销毁出库

7.9.4.1 储存时限一般应超过20年。

7.9.4.2 当样本提供者提出反悔意见，撤销知情同意书，要求销毁所提供的样本时，应遵从样本提供者的意见将样本销毁，并将样本提供者相关信息和数据从信息系统中清除。7.9.4.3 样本的销毁应首先提出销毁申请，通过伦理审查委员会和科学审查委员会的审核后方可进行，人类间充质干细胞库应建立销毁的标准操作规范，并按照此规范操作。

7.9.4.4 应对样本的销毁进行记录，包括销毁的原因、批准和执行销毁的日期、销毁的操作人员等。

8 安全管理

8.1 人员管理

8.1.1 人员培训与考核

8.1.1.1 人类间充质干细胞库工作人员应接受专业技能培训，并考核通过后方可上岗。干细胞制备等专业岗位需具备一定的教育背景。培训项目包括但不限于生命伦理、细胞培养基础、相关仪器使用及维护方法、安全管理、质量控制、物料管理及清洁卫生等内容。

8.1.1.2 人类间充质干细胞库人员每年应至少培训并考核一次。考核未通过者，应重新接受培训，成绩合格后方可再次上岗。

8.1.1.3 人类间充质干细胞库人员培训及考核结果应有相关档案记录及查阅制度。

8.1.2 人员出入制度

8.1.2.1 人类间充质干细胞库相关区域应建立实验室人员及外来人员准入制度，并建立相应人员准入登记记录制度。

8.1.2.2 有以下情况者不宜从事人类间充质干细胞库工作，或进入人类间充质干细胞库相关区域：

a)有严重免疫系统疾病，或正在服用免疫耐受药物者；

b)有呼吸道感染或发热症状者；

c)身体有开放式损伤者；

d)有传染性疾病或病毒携带者；

e)如有其他特殊情况，相关人员应征求人类间充质干细胞库主管人员的意见，批准后

方可进入。

8.1.3 人员健康管理

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8.1.3.1 人类间充质干细胞库人员录用之前应进行严格体检，条件合格者方可录用。

8.1.3.2 人类间充质干细胞库人员应建立员工健康档案，并至少每年体检一次。

8.1.3.3 人类间充质干细胞库若发生生物安全暴露，相关人员应接受必要救治并制定医学

观察方案。对于出现异常情况者，应暂时调离工作岗位，或永久调离。再次上岗应体检合格，

并取得主管人员的批准。

8.1.4 供者健康管理

8.1.4.1 间充质干细胞供者需提供一般信息、既往病史、家族史等。信息登记可参考附录

B。

8.1.4.2 供者必须经过检验筛选证明无人源特定病毒，结果应符合GB 18467-2001的规定。

8.2 实验室安全管理

8.2.1 消防安全

8.2.1.1 人类间充质干细胞库需配备必要的防火系统及灭火装置。特定区域如档案储存区

域应配备相应的特殊灭火装置如干冰灭火器。

8.2.1.2 人类间充质干细胞库应定期对消防系统和消防装置进行检查，以确保其处于随时

可用状态。

8.2.1.3 人类间充质干细胞库的防火系统建设应符合GB 19489-2008的规定。

8.2.1.4 人类间充质干细胞库灭火器的配置应符合GB 50140的规定。

8.2.2 压力容器安全

8.2.2.1 压力容器指压力气瓶及高压灭菌装置。

8.2.2.2 压力容器应由专业人员操作，并需持有压力容器资格证明文件。压力容器使用应

建立使用记录档案。

8.2.2.3 压力容器安全应符合《中华人民共和国特种设备安全法》的规定。

8.2.3 化学用品安全

8.2.3.1 人类间充质干细胞库涉及到的有毒有害物质，应设立相应的储存制度，包括储存

条件、储存地点和指定的管理人员；并有相应的记录登记制度。

8.2.3.2 人类间充质干细胞库涉及到的有毒有害物质，应制定明确的使用及管理制度；并

有相应的记录登记制度。

8.2.3.3 人类间充质干细胞库应建立危险化学用品事故危险评估和应急预案，以应对可能

发生的危害性事故。

8.2.3.4 人类间充质干细胞库内涉及有毒有害物质的工作区域，应符合AQ 3013的规定。

8.2.4 液氮安全

8.2.4.1 液氮罐和管道系统需设置减压阀，以防止爆炸。

8.2.4.2 应用到大量液氮罐储存时，需安装氧浓度检测器。

8.2.4.3 人类间充质干细胞库工作人员在操作中接触到液氮时，需使用防护面罩和防冻手

套并做好其它防冻措施。

8.2.4.4 人类间充质干细胞库应确保维持正常功能至少3天的液氮供应量。人类间充质干

细胞库应定期检查液氮容量，并建立相应的检查登记制度。

8.2.4.5 人类间充质干细胞库的液氮安全，应符合GBT 5458-1997的规定。

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8.2.5 生物安全

8.2.5.1 人类间充质干细胞库应建立严格的生物安全及危害性评估方案、生物安全审查制度及生物安全事故应急预案。

8.2.5.2 人类间充质干细胞库的生物安全制度应通过生物安全委员会及生命伦理委员会的批准后方可实行。

8.2.5.3 涉及到感染性物质的操作、运输等行为，应由受过培训的专门人员进行，并使用特定的操作或运输工具；并需建立完善的记录文件。

8.2.5.4 人类间充质干细胞库的生物安全制度应符合《WHO生物安全手册》和GB 19489-2008的规定。

8.2.6 安全标识

8.2.6.1 人类间充质干细胞库相关区域及相关设施应具有安全标识，包括标识的形式如颜色、图标、光信号等和标识内容如危险品、消防设施、洁净区等应清晰明确。

8.2.6.2 人类间充质干细胞库中相关安全标识的设计和编写应符合GB 15258和GB 2894

的规定。

8.3 物料仪器管理

8.3.1 物料管理

8.3.1.1 物料采购

a)人类间充质干细胞库所用物料需从具备专业资质并经过验证核实的供应商处采购，

且具备检验合格证明文件。

b)物料的采购信息应具有严格的记录登记制度，采购信息包括但不限于采购人员和物

料的名称、编号、数量、规格、供应商、生产商、产地、批号、有效期、运输条件、注意事项等。

8.3.1.2 物料标识

物料应具有清楚明确的标识，包括物料的编号、名称、规格、数量、供应商、批号、有效期、储存条件、运输条件、使用方法以及注意事项。

8.3.1.3 物料库存管理

a)人类间充质干细胞库应具有物料管理系统和相应的物料信息管理系统。

b)物料应严格按照储存条件正确储存。对于物料的储存条件和有效期，应具有定期的

审查制度和特殊情况下的应急预案，并具有记录登记文件。

c)物料的库存管理应符合人类间充质干细胞库的工作实际，在具备一定量物料储备的

同时，避免物料长期积压导致的效力下降或过期使用。

d)物料的出入库应具有严格的记录登记制度，包括:物料的标识、物料出入库经手人

员姓名、岗位以及出库用途等信息。

8.3.1.4 物料使用管理

a)物料应严格按照使用方法正确使用。

b)物料的使用应具有严格的文件记录制度，包括物料的标识、使用范围、使用时间

等信息。物料的使用信息要做到可溯源。

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SZDB/Z 126—2015 8.3.2 仪器管理

8.3.2.1 设备使用

a)主要设备都按指定操作程序操作，重点设备、技术水平要求较高的设备，其操作规

程要制定得详细、清楚。

b)设备操作人员在上机前进行设备的结构、性能、技术规范、维护知识和安全操作规

程的理论教育与实际技能的培训，做到“三懂”（懂结构、懂原理、懂性能）、“四

会”（会使用、会保养、会检查、会排查简单故障）。

c)仪器设备的使用人必须严格按照标准操作程序进行操作。

d)在整个制备过程（包括制备及检验）中起主要（关键）作用或与产品质量相关性较

大的设备要及时填写设备运行记录。恒温设备运行过程中，应每日监测其设定温度

与实际温度是否一致。

8.3.2.2 设备维护

a)内委维护：仪器设备管理员对仪器设备进行内部维护。

b)外委维护：由合作单位相关部门进行维护，仪器设备管理员和实验室主管配合。

c)外聘维护：保修期内维护由工程师维护，保修期外可外聘仪器设备经销商指定的售

后工程师进行维护。

8.3.2.3 设备维修

a)使用过程中出现故障，无法使用。

b)可使用但达不到工艺要求。

c)质控部检测出不合格项。

d)需要升级满足工艺需求时，需要发起维修流程根据需要维修的性质选择由仪器设备

管理员具体组织实施、由实验室主管同合作单位沟通组织实施或是由仪器设备管理

员和实验室主管共同组织实施。

8.4 样本管理

8.4.1 人类间充质干细胞库应有独立的数据管理系统，对样本的出入库和样本的储存位置

进行追踪管理，并制定相关记录文件用于检索。

8.4.2 异常的人类间充质干细胞储存样本要设有独立的储存设备，并在信息管理系统中明

确标识。

8.4.3 人类间充质干细胞库应有能与数据管理系统兼容的监控系统，监测并记录人类间充

质干细胞库内的环境变化，包括储存设备内的各项重要指标、储存室内的环境温度、湿度和

含氧量等。

8.4.4 人类间充质干细胞库应制定库存核实计划，根据数据管理系统记录的样本储存位置

信息进行核实，确保样本储存在正确的位置。

8.4.5 库存核实应至少每年一次，具体周期根据人类间充质干细胞库的实际情况而定，另

外可进行不定期的抽样核实。

8.4.6 库存核实时应至少检查上次库存核实后新进样本的1%。

8.4.7 人类间充质干细胞库应制定样本质量控制计划，按一定的周期对储存的样本进行检

测，如提取样本中的DNA、RNA或其他生物分子进行比对分析、生物学效力、形态是否变异

和是否受杂菌污染等。

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8.4.8 人类间充质干细胞库数据管理系统、人类间充质干细胞库温控系统、储存样本核实的相关操作需设定专门人员完成。

8.5 质量管理

8.5.1 质量体系文件管理

人类间充质干细胞库应制定质量手册、管理性文件、标准操作文件及相关记录。

8.5.2 质量手册

参照国际标准化组织ISO 9001、ISO 14001、OHSAS 18001认证的要求，对人类间充质干细胞库的质量目标、质量方针、组织机构、职责权限、运行过程、控制方法以及质量管理体系的应用范围进行完整的介绍。

8.5.3 管理性文件

人类间充质干细胞库各类管理活动的规程，包括设备设施的维护、物料供应、纠正预防、不合格品处理、内部评审以及各类文件的制定、审核、发放、回收、修订、销毁、撤销相关程序。

8.5.4 标准操作文件

人类间充质干细胞库应将实验和设备操作等制定标准的操作文件，用于指导技术工作人员的操作过程。

8.5.5 相关记录

收集人类间充质干细胞库各类活动所产生的数据和信息，实际详细的进行记录并保存。

8.5.6 质量控制

8.5.6.1 参照《血站管理办法》，人类间充质干细胞库必须制定样本采集、干细胞制备、检测、储存的规章制度、操作规程，以便工作人员在常规操作中对材料、试剂和设备进行质量控制。

8.5.6.2 确保完成必要及相关的检验，确保只有符合质量要求的标本、试剂耗材、培养液、一次性无菌用品方可投入使用，符合质量要求的干细胞方可储存。

8.5.7 质量检验

8.5.7.1 应采用有效的检验试剂耗材，对整个制备储存过程进行检验。制备样本应进行病毒血清学检测，检测结果必须合格，所有的检验方法必须经过验证。

8.5.7.2 所有样本供者应进行病毒血清学检测，检测结果必须合格，检测结果阳性者应予以销所有的冻存入库样本应进行微生物检测，检测结果应合格。

8.5.7.3 所有冻存入库样本应进行细胞均一性、形态、活力、纯度鉴定。

8.5.7.4 对应检测样本进行留样，至少留样至检测结果出具。

8.5.7.5 应建立不合格品管理机制并实施。

8.5.8 质量保证

8.5.8.1 人类间充质干细胞储存体系的设计与研发应考虑GMP和ISO 9001的要求，其产品的设计、开发、输入、输出、评审、验证、确认、更改的控制全过程都要建立相应的管理规程，进行严格的控制。

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8.5.8.2 明确规定制备和质量控制活动，并实施。

8.5.8.3 明确管理职责。

8.5.8.4 保证制备以及采购和使用的试剂耗材、培养液正确无误。

8.5.8.5 确保中间产品所需的控制以及其它中间控制环节得到实施。

8.5.8.6 确保验证的实施。

8.5.8.7 严格按各种书面规程进行制备、检查、检验和复核。

8.5.8.8 有适当的措施保证贮存和随后的各种处理过程中，干细胞质量在规定时间内保持

相对稳定。

8.5.8.9 定期评估质量保证体系的有效性及时效性、适用性。

8.5.8.10 结合内外部审核，对质量目标、方针进行内外部评审及管理评审。

8.5.9 质量风险管理

应事先对人类间充质干细胞整个制备入库过程进行评估，可采取回顾或者前瞻的方式，

持续进行危险识别、风险评估和实施必要的控制机制。

8.6 信息化管理

8.6.1 样本追踪

系统应对每一个录入数据库的样本设置唯一的ID，人类间充质干细胞库样本接收没有

标记的样本时，每个样本容器都必须标上含有样本编码的条形码。

8.6.2 样本编码

8.6.2.1 总则

样本的编码应遵循唯一性的总原则。在满足总原则的基础上，应精简，长度保持统一。

8.6.2.2 标签编码

人类间充质干细胞库打印标签时，标签的编码应该按附录B规定的编码规则进行编码。

同时，确保标签能在各种储存环境，特别是在干冰和液氮环境下能正常使用。

8.6.2.3 编码规则

编码规则的设定应该确保在资源库内有效分辨各类来源的间充质干细胞，同时不与其他

商品或者产品编码雷同。

8.6.3 信息安全

人类间充质干细胞库的信息管理系统应建立安全保障，防止黑客入侵、计算机病毒传播

和数据损坏等意外情况，并应进行定期的维护和备份，以应对信息和数据的意外损坏，及时

进行异地备份和历史备份。

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附录A

（资料性附录）

表A.1 供者健康信息采集

间充质干细胞

间充质干细胞及来源 间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cell，MSC）是干细胞的一种，因能分化为间质组织而得名，具有亚全能分化潜能，在特定的体内外环境下，能够诱导分化成为多种组织细胞。间充质干细胞具有干细胞的共性，即自我更新、多向分化和归巢的能力。 间充质干细胞具有向多种类型细胞分化的能力，可以分化为神经、心脏、肝脏、骨、软骨、肌腱、脂肪、上皮等多种细胞。这种多向分化的能力给人类多种疾病的治疗提供了重要的原材料。 间充质干细胞来源：间充质干细胞广泛分布于胎儿和成体的骨髓、骨膜、松骨质、脂肪、滑膜、骨骼肌、胎肝、乳牙、脐带、脐带血中，其中脐带来源的间充质干细胞质量高、纯净、数量多。 间充质干细胞生物学特性 间充质干细胞具有以下特性： 1）具有强大的增殖能力和多向分化潜能，在适宜的体内或体外环境下不仅可分化为造血细胞，还具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细胞的能力。 2）具有免疫调节功能，通过细胞间的相互作用及产生细胞因子抑制T细胞的增殖及其免疫反应，从而发挥免疫重建的功能。 3）具有来源方便，易于分离、培养、扩增和纯化，多次传代扩增后仍具有干细胞特性，不存在免疫排斥的特性。 正是由于间充质干细胞所具备的这些免疫学特性，使其在自身免疫性疾病以及各种替代治疗等方面具有广阔的临床应用前景。通过自体移植可以重建组织器官的结构和功能，并且可避免免疫排斥反应。

间充质干细胞的临床应用 1.间充质干细胞在细胞替代治疗中的前景 以组织工程学为手段可望解决的问题几乎涉及人类面临的大多数医学难属，如烧伤、放射损伤等患者的植皮；肌肉、骨及软骨缺损的修补；髋、膝等关节的替换；血管疾病或损伤后的血管替代；糖尿病患者的胰岛植入；心脏病患者的瓣膜替代、房室间隔缺损的修补；癌症患者手术切除后组织或器官的替代；放射损伤及大剂量放疗、化疗后的造血与免疫重建；肝、肾等重要脏器因损伤或功能衰竭的置换；部分遗传缺陷性疾病的治疗等。在不久的将来，某些组织工程产品，如人造皮肤、血管、骨、软骨、肌肉、瓣膜、神经甚至胰岛、肾、肝等组织器官或细胞将相继问世，然后植入患者体内，用以恢复损伤、替代退行性组织器官以及改变遗传缺陷性组织器官的功能。人类也将进入实际应用现代组织工程产品的新时代。 目前，在组织干细胞定向分化领域取得了明显的进展。在体外可以定向诱导一些多能干细胞分化为骨、软骨、肌肉、脂肪、肌腱、神经等多种组织细胞，这些成果很令人鼓舞。造血干细胞的移植已得到广泛开展，通过输注造血干细胞来对恶性血液病患者进行造血重建已取得成功，这为组织干细胞的研究提供了成功的范例。 MSC因其具有高度的自我更新能力和多向分化潜能，以及取材方便、体内植入后不良反应较弱等优点而备受关注，将成为细胞替代治疗的理想种子细胞。 MSC与生物材料相结合，能够修复骨、软骨、肌腱等各种组织的缺损，这是组织工程中的新领域。 MSC在治疗组织09官退行性疾病方面也展示了前景。随着年龄的增长，机体的组织器官会出现退行性的改变，从而引发一些相关疾病，如肌肉萎缩、肌营养不良、脑萎缩、帕金森病、阿尔茨海默综合征等。而这些组织的再生比较固难，MSC在体内外能够分化为肌肉细胞和神经细胞，为治疗这些退行性疾病带来了希望。 遗传缺陷性疾病发病率也很高，而且治疗难度极大。利用体外分离的MSC或其诱导分化后的细胞来改善遗传缺陷组织的功能，这一治疗途径正在被尝试。 2. 间充质干细胞在基因治疗中的前景 一些干细胞不仅具有多向分化潜能，而且易于外源基因的转染和表达。将体外经过基因修饰的干细胞用于治疗，可以避免转染载体进入受体产生的不良影响。基因修饰的干细胞可以在多个靶位发挥作用。 (1)干细胞潜能的改变——干细胞靶位基因转染以后可以改变干细胞的某些特性。从成人或成年动物分离的干细胞有时会表现出年龄相关性、遗传性或获得性疾病相关性再生能力损伤，基因转录或酶切修饰可以有效地维持、加强或抑制干细胞的分化和增殖能力。 (2)器官系统性能的改善——干细胞子代靶位转入干细胞的基因可以随着干细胞的分化传代而遗传给子代细胞，在基因转导的干细胞重建的器官系统中持续表达，改善重建

干细胞中心建设项目申报书

目录 内容提要 第1章总论....................................................... １1 §1.1 项目背景 ................................................ １1 §1.1.1 项目名称........................................... １1 §1.1.2 项目出资方及资本结构............................... １1 §1.1.3 项目拟建地点....................................... １1 §1.1.4 立项依据........................................... １1 §1.2 可行性研究结论 .......................................... ２2 §1.2.1 市场预测和项目规模................................. ２2 §1.2.2 公用系统供应.. (2) §1.2.3 项目地址 (102) §1.2.4 环境保护 (102) §1.2.5 组织及劳动定员 (113) §1.2.6 项目建设进度 (114) §1.2.7 投资估算和资金筹措 (114) §1.2.8 项目财务和经济评价 (124) §1.2.9 项目综合评价结论 (126) 第2章项目背景和发展概况 (137) §2.1 项目提出的背景 (137) §2.1.1 国家及行业发展规划 (137) §2.1.2 项目发起人和发起原因 (7) §2.2 项目发展概况 (148) §2.3 投资的必要性 (15) 第3章市场分析与营销方案 (1710) §3.1 市场调查 (1710) §3.2 市场预测 (11)

人脂肪来源间充质干细胞库的初步建立

人脂肪来源间充质干细胞库的初步建立 徐潇，张旭毅，闫俊灵，陈冲，赵欣，李明辉，汤苏阳 【摘要】［摘要］目的探讨建立生物学性状稳定的人脂肪来源间充质干细胞(hADSCs)库的可行性，旨在为组织工程种子细胞提供更多来源。方法对分离得到的hADSCs采用液氮低温冻存,并在一定时间复苏培养,以流式细胞仪检测其表面抗原Z在诱导培养基中对其进行成脂和成骨诱导培养,光镜下观察细胞形态Z 免疫组织化学方法检测成骨诱导的特异标志物碱性磷酸酶(ALP)的表达, 观察hADSCs在复苏前后的分化能力。结果从脂肪组织中分离培养扩增获得数目稳定的hADSCs ,经冻存并复苏后的hADSCs形态和表面抗原保持不变Z可继续扩增10代以上，倍增时间为48h o复苏后第2、第6、第10代hADSCs 均保持了较强的成脂及成骨分化能力。结论初步建立hADSCs库,可为再生医学修复重建组织工程提供较好的种子细胞。 【期刊名称】解放军医学杂志 【年(卷),期］2016(041)012 【总页数】6 【关键词】［关键词］脂肪来源间质干细胞；干细胞库；低温保存；可行性研究近年来，再生医学的迅速发展为组织工程修复组织缺损提供了种子细胞和可利用的细胞基质，其中脂肪干细胞与其他干细胞相比具有来源丰富、取材简单、便于培养、无组织配型及免疫排斥问题、可跨胚层多向分化、增殖速度快等显著优点Z是优秀的组织工程种子细胞［1-3］O人脂肪来源间充质干细胞(human adipose-derived Stem CeIlS , hADSCs)是从脂肪组织中分离获得的一种具有自我更新及多向分化潜能的干细胞［4］,是极具前景的组织工程和基因治

脐带间充质干细胞治疗技术的临床研究策略

脐带间充质干细胞治疗技术的临床研究策略 脐带间充质干细胞（UCMSC ）具备药品的“工厂化、规模化、标准化”生产特点，是目前“成药”性最高的成体干细胞（ASC ）之一。UCMSC 还有广泛的生物效应，对各种损伤、退变和炎症性疾病的疗效明确，且具有免疫原性低、异体治疗无免疫排斥反应、临床应用的安全性高、无伦理限制等临床应用优势。UCMSC 的研究与应用受到了国内外研究者的广泛关注，已对其高效制备技术、体内生物学行为、临床疗效与机制及安全性进行了深入研究，解决了临床前关键技术和理论问题，进入了迈向临床验证的最后一公里，即将成为临床疾病治疗的新型“药物”和技术。但如何科学、合理、规范、循序渐进地推进UCMSC 向临床转化，是管理部门和研究者共同面临的问题。笔者在对UCMSC 进行系统性临床前研究的基础上，对UCMSC 治疗系统性损伤和自身免疫性疾病的临床技术及规范进行了探讨。 1 . UCMSC 治疗的临床适应证 UCMSC 制剂可在临床上用于涉及组织细胞损害（变性、坏死、缺失）、自身免疫和炎症反应引起的疾病的治疗，但在同种疾病的不同阶段、不同个体之间，疗效可能不尽相同，其原因在于UCMSC 来源、质量及临床实施方法的差异。根据UCMSC 的生物学特性及疾病治疗机制研究进展，UCMSC 的临床适应证主要有： （1）机械性创伤：包括武器、交通与意外伤害、自然灾害等导致的各种类型的组织器官损伤； （2）退变性疾病：如衰老、器官纤维化、骨质疏松、器官萎缩、动脉硬化等； （3）缺血性疾病：心脑血管意外、血管栓塞等； （4）中毒性疾病：如酒精、食物、药物、毒剂、环境等导致的肝、肾、神经中毒等； （5）自身免疫性疾病：系统性红斑狼疮，再生障碍性贫血、类风湿性关节炎、多发性硬化、自身免疫性肝病等； （6）炎症性疾病：慢性炎症、急性系统性炎症综合征等； （7）代谢性疾病：糖尿病、甲状腺功能异常、高血酯症、高血压等； （8）组织残缺性疾病：主要用于组织缺损的局部再生及人工组织构建与移植治疗。 总之，UCMSC 的适应范围很广，可通过多种机制发挥治疗作用，对并发多种疾病的患者有“一药治多病”的效应。

喜格干细胞库建设之设计要求

《人间充质干细胞库建设与管理规范》 DB33/T2030—2017 SICOLAB干细胞库建设之设计要求 范围：人间充质干细胞库、胎盘组织造血干细胞库的建设、操作规范、质量管理的基本方法。适用：人间充质干细胞库、胎盘组织造血干细胞库建设与管理。 一、喜格选址要求 1、选择周围环境较好的场地，空气质量标准应符合GB3095标准分级二级标准； 2、不能建设在易发生自然灾害（地震、洪水、海啸等）的地区； 3、不能建设在将要拆迁的建筑；不能建设在市政规划不明确区域。 二、建设基本要求 1、干细胞库实验室建设与设计应与GB19489、GB50346、GB50591规定相符 2、干细胞库实验室应包括业务区与办公区。 ①业务区包括：样本接收室、干细胞制备室、配液室、检验室、干细胞存储室、更衣室、缓冲室、物料存储室、医疗垃圾存放室、消毒清洗室等（应标识洁净和风险级别）。 ②办公区包括办公室、会议室、档案室和监控室等。 3、设计注意 ①洁净区、非洁净区完全分开。 ②办公区域与实验区域的通风系统应独立分开； ③不同科室应设有防污染措施，如缓冲间、气闸室和传递窗等。 4、人流、物流通道应独立设置，避免混杂和交叉污染。 5、物料、废弃物应设专用传递窗，并具备消毒灭菌功能。 6、办公区域与实验区域应进行物理隔离，工作人员由专用通道进入实验区。 7、门、窗、压差 ①洁净室内的密闭门应朝空气洁净度较高的房间开启并加设闭门器； ②无窗洁净室的密闭门上宜设观察窗； ③不同等级的洁净室、洁净区与非洁净区的压差，应不小于5Pa； ④洁净区与室外的压差，应不小于10Pa。 8、建设材料应防渗漏、防火、耐腐蚀、防水和不起尘等，易于清洁和消毒灭菌。 9、库内所有窗户应为密闭窗，玻璃耐撞击、防破碎。 10、洁净室内不宜安装水池和地漏。 三、设施系统 1、消防要求 ①应符合GB50016要求。 ②干细胞库内宜安装火灾自动烟感报警装置、消防疏散警示标识、紧急逃生通道、安全出口； ③安全出口（全封闭的玻璃门，并备有安全锤），安全出口设计应能够使仪器设备进出。

间充质干细胞培养方法

间充质干细胞培养方法 1. 间充质干细胞MSC基本形态 2. 干细胞应用与干细胞调控。 3. 间充质干细胞MSC生长过程 4. 间充质干细胞MSC培养的合适气体环境 5. 细胞培养板的选择 6. 如何选用细胞培养基 7. 如何维持培养液p H 8. 血清与干细胞的培养 9. 胎牛血清（F B S ）是否需要灭活 10. 细胞的细菌、真菌污染及排除 11. 细胞培养污染的预防 12. 使用胰蛋白酶时加入E DTA的目的是什么 13. 胶原酶的种类和选型 14. 胶原酶V S胰酶 15. 干细胞的种类和表面标记 16. 间质干细胞培养原理概述 17. 间质干细胞成脂和成骨诱导分化 18. 干细胞老化的表现和处理 19. 细胞传代消化过程指导 20. 冷冻保护剂作用和选择 21. 细胞冻存指导 22. 干细胞冷冻和复 23. 移植细胞的基因修饰 1．间充质干细胞MSC基本形态 体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征，可分为贴附型生长细胞，常表现为成纤维型细胞和上皮细胞。悬浮型细胞在培养中悬浮生长。 间充质干细胞MSC基本形态：形态与成纤维细胞类似，细胞在支持物表面呈梭形或不规则三角形生长，细胞中央有卵圆形核，胞质向外伸出2－3 厘米个长短不同的突起。可看到细胞成螺旋状生长。 2．干细胞应用与干细胞调控 干细胞的调控是指给出适当的因子条件，对干细胞的增殖和分化进行调控，使之向指定的方向发展。 2.1源性调控 干细胞自身有许多调控因子可对外界信号起反应从而调节其增殖和分化，包括调节细胞不对称分裂的蛋白，控制基因表达的核因子等。另外，干细胞在终末分化之前所进行的分裂次数也受到细胞调控因子的制约。 （1）胞蛋白对干细胞分裂的调控 干细胞分裂可能产生新的干细胞或分化的功能细胞。这种分化的不对称是由于细胞本身成分的不均等分配和周围环境的作用造成的。细胞的结构蛋白，特别是细胞骨架成分对细胞的发育非常重要。如在果蝇卵巢中，调控干细胞不对称分裂的是一种称为收缩体的细胞器，包含有许多调节蛋白，如膜收缩蛋白和细胞周期素A。收缩体与纺锤体的结合决定了干细胞分裂的部位，从而把维持干细胞性状所必需的成分保留在子代干细胞中。

临床级干细胞实验室建设标准中英文对照

临床级干细胞实验室建设标准Rating Scale Definitions

Assessment Objectives评估目标

1.Standard Operating Procedures and Methods 标准化操作规程（SOP）和方法 a.SOP in writing and available to approved personnel. SOP正确编写，并且对工作人员来说是切实可用的。 b.Personnel properly performing SOP as stated. 工作人员能够按照SOP正确操作。 c.Are current SOPs being implemented? 当前使用的SOP是有效的？ https://www.wendangku.net/doc/9112383882.html,b Facilities and Environmental Control 实验室设施及环境控制 a.Facility of suitable size and properly maintained. 实验室设备的匹配性及恰当的维护。 b.Facility divided into separate or defined areas for each operation. 仪器设备分区放置及每项操作有专门的区域。 c.Does the facility maintain a proper access/egress? 实验室的出入口安排恰当。 d.Proper environmental control for equipment and facilities. 实验室环境控制安排合理性。 e.Facility restricted to authorized personnel. 出入实验室人员的权限。 3.Equipment Maintenance and Calibration 设备维护和校正 a.Equipment properly maintained. 仪器设备的正确维护。 b.Equipment of suitable design and use. 仪器设备合理匹配和使用。 c.Proper SOP established for the cleaning, maintenance, testing, calibration, use, and standardization of the equipment established. 建立正确的清洁、维护、测试、校准、使用设备的SOP。 4.Supplies and Reagents Management Control 耗材和试剂管理控制

间充质干细胞治疗小脑萎缩

间充质干细胞治疗小脑萎缩（山东干细胞网） 遗传性小脑共济失调，即遗传性小脑萎缩，是一组以共济运动障碍为突出表现的慢性进行性小脑变性疾病，发病年龄多在33—34岁，病情进行性加重。发病机理目前并不清楚，病变主要累及小脑，但脊髓、颅神经、基底节、脑干、大脑皮质等也可受累。遗传方式为常染色体显性遗传，因此，如果有本病家族史的人尽量不要生育。 患者：宋某，男性，40岁，患有遗传性小脑共济失调，即遗传性小脑萎缩。其具有明显的家族遗传性，其外公、姨、母亲、两个哥哥均患有该病。 入院时，患者口齿不清，行走经常跌倒 ，双手动作笨拙，症状逐渐加重，并出现双下肢无力，下蹲后不能自行站起。后经间充质干细胞移植成功治疗，基本恢复正常的生活。 目前采用的治疗方法是给予体外培养扩增的间充质干细注射，每周1次，共4次为一个疗程，同时给予系统功能锻炼。 干细胞治疗后在这位患者出院的时候，已经能行走稳健，未再出现跌倒情况，口齿清楚。后来，这位患者的两位哥哥也来做间充质干细胞治疗，恢复的效果也不错。 干细胞治疗重度颅脑外伤后遗症期 患者，男性，35岁。诊断：重度颅脑外伤后遗症期 重度颅脑外伤术后言语及肢体活动障碍8个月，拟行神经外科行颅骨修补和干细胞移植治疗。 干细胞移植治疗前： 四肢肌张力均高，以左侧为著，右上肢、右下肢活动较灵活，左侧肢体处于肌紧张状态，疼痛刺激后有屈曲。 影像学检查：双侧大脑见多发片状低密度区，CT值10-15Hu，边尚清。左侧侧脑室后部与左脑内低密度区贯通，脑内见引流管影。脑室系统略扩张，右侧脑室后角增大明显。右侧颅骨见巨大缺损区，左侧颅骨呈术后状态。[印象]双侧大脑多发软化灶、脑积水分流术后。 干细胞移植治疗后效果： 颅骨修补并干细胞脑内移植治疗后4天，患者左侧上肢肌张力明显降低，第二次干细胞移植后，次日患者左上肢肌张力进一步降低，左下肢肌力增强，达三级，屈伸自如(之前在强刺激下能才在水平面屈曲)。该患者再经过一阶段锻炼，有望下地行走。

人类间充质干细胞库建设与管理规范

SZDB/Z 126—2015 I SZDB/Z 深 圳 市 标 准 化 指 导 性 技 术 文 件 人类间充质干细胞库建设与管理规范 2015 - 02 -06发布 2015-03 -01实施 深圳市市场监督管理局 发布 ICS 07.080 C 04 SZDB/Z 126-2015

SZDB/Z 126—2015 II 目次 前言................................................................................. I II 1 范围 (1) 2 规范性引用文件 (1) 3 术语和定义 (1) 4 生命伦理 (4) 5 人类间充质干细胞库建设 (4) 6 机构设置 (5) 7 操作规范 (6) 8 安全管理 (10) 附录A（资料性附录）供者健康信息采集 (16) 附录B（资料性附录）人类间充质干细胞样本编码规则 (17) 附录C（资料性附录）人类间充质干细胞库整体的操作流程 (18) 参考文献 (19)

SZDB/Z 126—2015 III 前言 本指导性技术文件按GB/T 1.1–2009给出的规则起草。 本标准由深圳市经济贸易和信息化委员会归口。 本标准负责起草单位：深圳华大基因研究院。 本标准主要起草人：周欣、张勇、张曦、冀旭、燕舞、林洁璇、张家文、黄海军、彭冬秀、孙长斌、 杨阳、黎苑杰。 本标准为首次发布。

SZDB/Z 126—2015 人类间充质干细胞库建设与管理规范 1 范围 本标准规定了人体来源间充质干细胞库相关的生命伦理、间充质干细胞库建设、机构设置、操作规范和安全管理的基本方法。 本标准适用于人体来源间充质干细胞库的建设与管理规范。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本 适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。 GB/T 1.1-2009 标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写 GB 2894-2008 安全标志及其使用导则 GB/T 5458-2012 液氮生物容器 GB 7000.2-2008 应急照明灯具安全要求 GB/T 12905-2000 条码术语 GB 13690-2009 化学品分类和危险性公示通则 GB 15258 化学品安全标签编写规定 GB/T 17172-1997 417 条码 GB/T 18347-2001 128 条码 GB/T 18883-2002 室内空气质量标准 GB 19489-2008 实验室生物安全通用要求 GB 19652-2005 放电灯（荧光灯除外）安全要求 GB/T 20269-2006 信息安全技术信息系统安全管理要求 GB/T 22278-2008 良好实验室规范原则 GB/T 27025-2008 检测和校准实验室能力的通用要求 GB 50016-2006 建筑设计防火规范 GB 50034-2004 建筑照明设计标准 GB 50052-2009 供配电系统设计规范 GB 50140-2005 建筑灭火器配置设计规范 GB 50346-2012 实验室建筑技术规范 GB 50351-2005 储罐区防火堤设计规范 AQ 3013-2008 危险化学品从业单位安全标准化通用规范 CNAS-CL05-2009 实验室生物安全认可准则 MH/T 1019-2005 民用航空危险品运输文件 WS/T 224-2002 真空采血管及其添加剂 WHO Third Edition 实验室生物安全手册 3 术语和定义 1

干细胞资源储存库建设项目可行性研究报告方案

干细胞资源储存库建设项目可行性研究报告方案（可用于发改委立项及银行贷款+2013详细案例范文） 【编制机构】：博思远略咨询公司（360投资情报研究中心） 【研究思路】：

【关键词识别】：1、干细胞资源储存库建设项目可研 2、干细胞资源储存库建设市场前景分析预测 3、干细胞资源储存库建设项目技术方案设计 4、干细胞资源储存库建设项目设备方案配置 5、干细胞资源储存库建设项目财务方案分析 6、干细胞资源储存库建设项目环保节能方案设计 7、干细胞资源储存库建设项目厂区平面图设计 8、干细胞资源储存库建设项目融资方案设计 9、干细胞资源储存库建设项目盈利能力测算 10、项目立项可行性研究报告 11、银行贷款用可研报告 12、甲级资质13、干细胞资源储存库建设项目投资决策分析 【应用领域】： 【干细胞资源储存库建设项目可研报告详细大纲——2013年发改委标准】： 第一章干细胞资源储存库建设项目总论 项目基本情况 项目承办单位 可行性研究报告编制依据 项目建设内容与规模 项目总投资及资金来源 经济及社会效益 结论与建议

第二章干细胞资源储存库建设项目建设背景及必要性项目建设背景 项目建设的必要性 第三章干细胞资源储存库建设项目承办单位概况 公司介绍 公司项目承办优势 第四章干细胞资源储存库建设项目产品市场分析 市场前景与发展趋势 市场容量分析 市场竞争格局 价格现状及预测 市场主要原材料供应 营销策略 第五章干细胞资源储存库建设项目技术工艺方案 项目产品、规格及生产规模 项目技术工艺及来源 项目主要技术及其来源 项目工艺流程图 项目设备选型 项目无形资产投入 第六章干细胞资源储存库建设项目原材料及燃料动力供应主要原料材料供应 燃料及动力供应 主要原材料、燃料及动力价格 项目物料平衡及年消耗定额 第七章干细胞资源储存库建设项目地址选择与土建工程项目地址现状及建设条件 项目总平面布置与场内外运 总平面布置 场内外运输 辅助工程 给排水工程 供电工程

间充质干细胞在体内的作用机制

间充质干细胞在体内的作用机制 摘要：随着细胞组织工程的研究不断深入，对干细胞在体内机制的不断了解研究，21世纪在全球多个国家药品管理局批准了干细胞制剂进入临床运用，为传统医药无法治疗和控制的疾病，提供了新的治疗途径，本文主要介绍现已广泛应用于临床的间充质干细胞制剂的作用机制。 关键词：间充质干细胞；作用机制 干细胞技术研究为人类疾病的治疗提供的新的途径、方法和手段，干细胞在生命科学、新药试验和疾病研究这三大生物医药领域发挥重要作用。目前，临床应用最为广泛之一的间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSC）是干细胞家族的重要成员。它可以在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞，连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。 一、间充质干细胞的治疗作用机制 1.归巢作用 MSC的归巢作用可能与以下几个方面有关： 1.1.表达大量趋化因子和趋化因子受体（CXCR4）并且能够通过向炎症趋化因子和细胞因子迁移归巢到炎症部位[1，2]。 1.2.MSC表面的CD44使间充质干细胞与内皮细胞上的E-选择蛋白结合从而归巢到含内皮细胞的炎症部位[3]。 1.3.整联蛋白和黏附因子（ICAM-1、ICAM-2、VCAM-1、ALCAM）参与间充质干细胞与内皮细胞的结合[4，5]。 2.免疫调节作用（主要为免疫抑制）[6] MSC可能先通过免疫激活的T细胞释放IFNγ、TNFα和IL-1等细胞因子，进而刺激MSC产生大量不同趋化因子和一氧化氮（nitric oxide，NO）；趋化因子招募T细胞向MSC聚集，MSC生成的NO抑制T细胞增殖，产生免疫抑制效果。 3.抗炎作用 3.1.MSC可能通过CD4+CD25+FOX P3+Treg细胞和IL1-RA表达来抑制IL-1?因子的作用。

脂肪间充质干细胞成瘤性分析

脂肪间充质干细胞成瘤性分析 干细胞是具有增殖和分化潜能的细胞，具有自我更新复制的能力，能够产生高度分化的功能细胞。目前，各类干细胞在临床治疗上的应用研究如火如荼，已有已有大量实验证实干细胞治疗的有效性。由于干细胞具有较强的分化和增殖能力，人们对其在人体使用时的安全性产生了怀疑，其中最主要的是干细胞注射后的异常分化导致的致瘤性。 癌细胞是肿瘤的组成细胞，与干细胞的相同点在于具有增殖和多向分化的能力。不同点在于癌细胞的增殖和分化不可控，而干细胞的增殖和分化受到了机体的调控，是有目的有方向的调控，用于补充机体所需的各种细胞。因此，干细胞与癌细胞并不相同，人们所担忧的是注射干细胞后，不但造成干细胞所处的微环境改变，而且干细胞同样会造成机体的微环境改变，这样的改变对人体是否安全？ 干细胞按照其分化潜能，可分为全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞。受精卵即为全能干细胞，当其在调控下可有序增殖，定向分化，最终发展成为一个正常的个体。胚胎干细胞同样为全能干细胞，来源于胚胎囊胚时期的内细胞团。由于其具有无限增殖全能分化的能力，同时对外界抵抗较弱，其基因容易受到外界影响而突变，在实验过程中发现其有潜在的致瘤性，注射至机体后可能会导致畸胎瘤。目前另一种研究热门的干细胞为iPSC（诱导多能干细胞），是在体细胞中转入四个转录因子，使其去分化重新恢复全能干细胞的特性。它的出现解决了干细胞的获得问题，但iPSC是将激活的癌基因转入细胞，致瘤性问题会较胚胎干细胞更为严重。 而多能干细胞和单能干细胞的分化方向已经固定，增殖能力有限，同时机体本身已大量存在，实验主要关注于体外扩增后回输体内，补充体内干细胞增殖较慢无法满足机体需求，并不会对细胞的基因型和转录组造成改变，理论上讲注射入机体后不存在致瘤性。目前的干细胞注射治疗研究热点有神经干细胞对神经退行性疾病和外部损伤的治疗，软骨干细胞对软骨组织磨损及缺失的治疗，皮肤干细胞对烧伤或创伤的治疗，成纤维细胞在美容中的应用，以及临床上已广泛应用的造血干细胞对血液疾病的治疗。这些大样本及长期的应用及研究，均未发现其对机体所造成的致瘤性等其他伤害，同时发现干细胞起到比药物更好的治疗效果或治疗传统药物无法应对的疾病。 间充质干细胞属于多能干细胞的一种，主要分布于成人的骨髓、外周血、脂肪和新生儿的脐血和脐带，可以分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞。目前研究较多的是从骨髓和外周血提取的间充质干细胞，而新生儿的脐血和脐带的间充质干细胞则有获得方面的伦理问题及使用时的异体移植所产生的免疫排斥问题，实验关注度不如骨髓和外周血。 已有大量实验证实，骨髓间充质干细胞可在体外诱导后从静脉回输或向病变部位移植，治疗脊髓损伤、阿尔兹海默、帕金森、心肌缺损、血管内皮缺损、软骨缺损等疾病，并在这些研究中未见到肿瘤发生。同时也有实验关注于血液间充质干细胞的致瘤性，经体外和体内同时验证，也未发现肿瘤发生。并有实验报道，间充质干细胞经静脉回输入有肿瘤的裸鼠后，会聚集在肿瘤附近，抑制肿瘤的生长，具有一定的抑癌作用。目前国外也已有多家公家公司将骨髓间充质干细胞的产品申请专利及向药品管理部门或卫生部门申请临床化及药品化。因此，通过大量的实验及权威部门的证实，均说明了骨髓间充质干细胞的安全性，当其在体外增殖及诱导分化回输至机体后，不会对机体产生致瘤性。 脂肪间充质干细胞与骨髓间充质干细胞同属于间充质干细胞，具有相同的表现型，对CD29、CD44、CD71、CD70、CD105/SH2和SH3为阳性反应，对CD31、CD34、CD45为阴性反应，说明了两类细胞在基因表达方面的一致性。同时有实验证实，不同部位提取的间充质干细胞在自然分化条件下分化方向不同，主要向周围相同细胞分化。但当在有相同外界因子的诱导下，可向同一种特定细胞分化，如软骨细胞、神经干细胞、内皮细胞等。这些说明二者

脂肪间充质干细胞的研究进展及临床展望_0

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 脂肪间充质干细胞的研究进展及临床展望脂肪间充质干细胞的研究进展及临床展望【关键词】干细胞1 引言目前干细胞的来源主要有两种，即胚胎干细胞(embryonic stem cells， ESC) 和成体干细胞(adultste cells，ASC) 。 ESC 由于涉及伦理道德及对其分化能力控制等各方面问题，目前各国对 ESC 研究普遍持谨慎态度；而 ASC 存在取材困难，获得率低(约 1 105 骨髓间质细胞方能获取一个间充质干细胞) ［ 1］等不利因素其临床应用前景也明显受到限制。 在此情况下，人们从人脂肪组织抽吸物中获得了一种成纤维细胞形态的细胞群［ 2］，具有取材容易，获得率高，自我更新能力与多向分化潜能类似 ASC 等优势，因而有望成为组织工程和基因工程中新的干细胞来源，并且具有较好的临床应用前景。 2 PLA 细胞简介 2. 1 PLA 细胞的发现近年来发现，脂肪组织可分泌多种激素样物质，对机体内分泌环境具有调节作用，脂肪组织已不再是一个简单、被动的能量贮存场所，应作为重要的内分泌器官来进行研究［ 3］。 由于干细胞研究中已发现越来越多的器官或组织分离出 ASC，如神经干细胞、血液干细胞、骨髓间充质干细胞、肌肉干细胞、成骨干细胞、皮肤干细胞［ 4］等，而脂肪组织与骨髓组织一样均在胚胎发育过程中源自中胚层，因此能否从脂肪组织中有效分离出 1/ 12

间充质干细胞在免疫治疗中的应用

文章编号(Article ID):1009-2137(2005)01-0158-06?综述?间充质干细胞在免疫治疗中的应用 廖联明,韩钦,赵春华 中国医学科学院基础医学研究所,北京,100730 摘要 近年来对间充质干细胞的研究越来越多,对于间充质干细胞的自我更新和体外扩增的能力及其多向分化的潜能已经被广泛认识。同时,间充质干细胞还具备低免疫原性以及免疫调节活性,使其非常适合用于细胞治疗。目前对间充质干细胞发挥免疫调节的作用机制还不完全了解。本文综述了间充质干细胞免疫调节机制的研究现状及其在免疫治疗中的应用前景。 关键词 间充质干细胞;免疫调节;免疫耐受 中图分类号 R39214;R730.51文献标识码 A Application of Mesenchymal Stem Cell in Immunotherapy———Review L IA O L ian2M i ng,HA N Qi n,ZHA O Chun2Hua Instit nte of Basic Medical Sciences,Chi nese Academy of Medical Sciences,Beiji ng100730,Chi na Abstract There has been an increasing interest in recent years on mesenchymal stem cell(MSC).It is well known that MSCs are capable of self2renewal and differentiating into many cell lineages.MSC can be expended to a large quantity that is required for clinical trans plantation.Recent studies show that MSC have potential application in immune diseases due to their unique immunologic characteristics,such as low immunogenicity and immunoregulatory function.But their immunoregulatory mechanism is not yet clear.This review discusses the advances in researches on the mechanism of MSCs′immunoregulatory function and potential clinical application in immune disease and organ transplantation. K ey w ords Mesenchymal stem cell;immune regulation;immune tolerance J Ex p Hem atol2005;13(1):158-163 免疫抑制剂在器官移植和自身免疫性疾病的临床治疗中起着举足轻重的作用。但是,免疫抑制剂的副作用,包括免疫抑制引起的感染、肿瘤发生率增加等,也一直困扰着临床医生。在器官移植中,诱导受者对异基因移植物的特异性免疫耐受,减少、甚至完全不用免疫抑制剂,一直是免疫学家和临床医生的一个梦想。这是理论上解决异基因移植排斥,骨髓移植中移植物抗宿主病等临床问题的最佳方案。 在器官或组织移植中,稳定嵌合与特异性耐受诱导密切相关1。已有报道,骨髓干细胞移植后在受者体内可检测到稳定的造血系嵌合,并能诱导对供者的特异性耐受2-4。但骨髓移植前预处理的毒性、移植失败的风险和移植后出现的急、慢性移植物抗宿主病等问题,使骨髓移植仍然局限于恶性肿瘤或严重免疫系统疾病的患者,不适合用于特异性免疫耐受的诱导。最近报道,在未作任何预处理的大鼠中,胚胎样干细胞移植后在其体内可建立造血嵌合,并能诱导对随后相同供者来源的心脏移植物的特异耐受5。这一发现对寻找理想的免疫耐受诱导方法的研究者是一个很大的鼓舞。但是,胚胎干细胞存在众所周知的伦理问题和导致胚胎瘤的潜在危险。因此,在器官移植特异性耐受诱导方面,除了骨髓干细胞和胚胎干细胞以外,寻找一个新的细胞群体是非常必需的。最近,我们以及其他实验室都观察到骨髓源的间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)具有免疫调节活性。在小鼠6和灵长类动物7中,输注MSC可以延长异基因皮肤移植物的存活。在造血系统恶性肿瘤患者接受骨髓干细胞移植的同时输注供者来源的MSC,观察到MSC移植组的移植物抗宿主病(GV HD)发生率明显低于未移植MSC组8。另一研究小组也报道了相近的实验结果9。虽然结果还只是初步的,但为MSC的免疫调节特性提供了直接的证据。目前,MSC对免疫系统影响还并不十分清楚,它们潜在的临床应用价值,包括诱导异基因移植物耐受和免疫调节作用,还有待于进一步的研究。 通讯作者:赵春华,教授,博士,组织工程中心主任.电话:(086)22-27210060.传真:(086)22-27210060.E2mail:chunhuaz@public. https://www.wendangku.net/doc/9112383882.html, 2003-11-26收稿;2004-09-01接受 ? 8 5 1 ?中国实验血液学杂志　Journal of Ex perimental Hem atology2005;13(1):158-163

间充质干细胞研究进展及其临床应用前景

?２２８?生国篮旦匡煎！Ｑ塑生！！旦笠！鲞筮丝塑￡！ｉ塑旦墼丛鲤：堕！！！Ｑ嫂：Ｙ丛：堡：些！：１２ 病情持久不愈，气血郁滞，经脉失畅，化湿生痰，痰血瘀结而致。根据其病机，选用小金丸治疗，取得较好疗效，值得推广。５治疗乳腺囊性增生病悼３ 将５００例乳腺囊性增生病患者随机分为治疗组和对照组各２５０例，对照组单用三苯氧胺治疗，治疗组在对照组相同治疗的基础上加用小金丸治疗。结果：治疗组总有效率为９２．０％，对照组总有效率为６７．６％，两组有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）。乳腺囊性增生病系内分泌障碍性增生病，一是体内女性激素代谢障碍，尤其是雌孕激素比例失调，使乳腺实质增生过度和复旧不全；二是部分乳腺实质成分中女性激素受体的质和量的异常，使乳房各部分增生程度参差不齐。三苯氧胺与此激素竞争受体，阻断过高的雌激素作用于乳腺组织，但部分患者临床效果甚微，或服药期间疗效较好，停药后复发。小金丸的药理实验证实对乳腺泡和导管增生有明显抑制作用，同时能抑制纤维母细胞摄取１４．甘氨酸减少胶原纤维合成，又能促进细胞吞噬胶原纤维及其断片，增强细胞溶酶体释放组织蛋白水解胶原纤维，从而消降纤维细胞的增生、粘连，疗效肯定，不良反应小，但疗程较长。中医学认为乳腺增生病主要是气机郁滞，痰瘀互结，冲任失调所致，治当理气化瘀散结，活血祛瘀为原则。小金丸方中麝香走窜通络，散结开壅，枫香脂调气血，土鳖消肿定痛，地龙通络，制草乌祛风湿，温经散寒，当归活血，香墨消肿化瘀，五灵脂、乳香、没药活血化瘀、消肿定痛。诸药合用有温通、活血、消壅、散结之效。可使气旺络通，痰散结消。配合三苯氧胺治疗乳腺增生病，标本兼治，故能取得较好疗效。 ６治疗慢性盆腔炎包块怕１ 将６０例患者（疾湿疥阻兼脾肾两虚型）分为２组各３０例，治疗组口服小金丸和血宝胶囊配合宫颈湿敷血竭粉治疗。对照组用西医抗炎治疗。治疗前后Ｂ超测量盆腔包块的大小、检测雌激素水平、观察临床症状消失的情况。结果：总有效率治疗组８６．６７％，对照组为６３．３３％，２组比较，差异有显著性意义（Ｐ＜０．０５）；随访半年复发率，治疗组为２３．０８％，对照组为６３．１５％，２组比较，差异有非常显著性意义（Ｐ＜０．０１）；雌激素水平治疗前后比较及治疗后组问比较，差异均无显著性意义（Ｐ＞０．０５）。慢性盆腔炎包快属中医学瘢瘕范畴，多起于经行产后，胞脉胞络空虚，血室正开，痰湿之邪乘虚而入，蕴结胞宫；失治误治，余邪未净，迁延１３久，病及血分，致瘀积胞中，积聚成瘾。小金丸功能散结消肿，化瘀止痛，原用于痰气凝滞所致的瘰疬、瘿瘤、乳岩、乳癖，用于此药治疗盆腔炎包块属异病同治，有异曲同工之妙。现代药理研究表明小金丸具有抗炎、消肿、抗肿瘤和镇痛作用。血宝胶囊具有益肾健脾、补阴培阳之效。血宝既可助小金丸化痰散结、活血消ｊ｝毂之力，又可防止小金丸攻邪太过损伤正气。廊竭粉是伤科活血疗伤之圣药，取其破散瘾积宿血之功。内服外用双管齐下，共奏化痰散结、化瘀消瘕之功，使邪去而不伤正。本研究表明，用中成药扶正消瘾法治疗慢性盆腔炎包块具有无创性、服用简便、疗效好，复发率低的优点。 ７治疗结节性筋膜炎ｏ¨ ５例结节性筋膜炎患者，内服小金丸０．６ｇ，２次／ｄ。局部服用黄金膏（金黄散＋凡士林）＋四虎散（由生草乌、生半夏、生南星、狼毒组成）外敷，方法：根据肿块大小，先用金黄膏涂布于纱布上，再掺加四虎散，外面用单层纱布包裹，最后在药物表面撒少量蒸馏水，敷贴患处，每２ｄ换１次。结果５例均治愈。最短治愈时间２６ｄ，最长治愈时间３５ｄ，平均治愈时间３０．８ｄ。结节性筋膜炎又称为假肉瘤性筋膜炎，是一种发生于浅筋膜的良性增生性病变。小金丸具有消痰化坚、活血止痛、消结散毒的作用；金黄散清热、解毒、消肿、定痛；四虎散化痰散结止痛。内外治结合，共奏解毒化肿、化痰散结、活血止痛之效，故用于治疗本病能取得较满意的疗效。 参考文献 ［１］秦树光，等．小金丸联合甲状腺素片治疗甲状腺肿的ｌ｜缶床分析．现代中西医结合杂志，２００５，１４（８）：１０１８． ［２］屈江宁．小金丸治疗良性前列腺增生８０例．世界中医药，２００８，３（５）：２７７． ［３］马宝华，等．小金丸治疗带状疱疹后遗神经痛４４例．中国中医急诊，２００３，１２（５）：４７３． ［４］余勇．小金丸治疗聚合性痤疮２４例．医药导报，２０００，１９（３）：２６３． ［５］杨玉国，等．小金丸与三苯氧胺合用治疗乳腺囊性增生病２５０例分析．实用中医药杂志，２００５，２１（５）：２６１． ［６］邱明英，等．小金丸为主治疗慢性盆腔炎包块的临床研究．新中医，２００８，４０（４）：５５ ［７］吴亚旭．中药治疗结节性筋膜炎５例．江苏中医药，２００５，２６（１１）：２７． 间充质干细胞研究进展及其临床应用前景李玲玲李晶 【关键词】骨髓间充质干细胞；多向分化；组织工程 间充质干细胞（ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ＭＳＣｓ）通常是指从骨髓或其他组织中分离到的在体外具有多向分化潜能的一类细胞。自Ｆｒｉｅｄｅｎｓｔｅｉｎ等首次报道骨髓中有少量细胞在培养过程中能贴壁分化形成类似骨、软骨的集落后，人们对这些细胞产生了浓厚兴趣。随后从鼠、兔、犬、人等多种动物的骨髓中均分离到了这种贴壁细胞。它们具有多向分化潜能， 作者单位：１３００２１吉林省前卫医院（李玲玲）；吉林省人民医院中西医结合科（李晶）在体外不同诱导条件下可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞及神经细胞…。 与软骨细胞、骨髓基质细胞、胚胎干细胞等相比，ＭＳＣｓ具有强大的增殖力、较强的多向分化潜能，而且具有取材方便、便于自体移植、便于外源基因转染及表达调控等诸多优点。最近。还发现ＭＳＣｓ具有免疫调节功能嵋ｏ。因此，ＭＳＣｓ是组织工程的一种新的理想种子细胞。目前，已知ＭＳＣｓ是源于中胚层的具有高度自我更新能力和多向分化潜能的成体干细胞，广泛存在于全身结缔组织和器官间质中¨１。本文就ＭＳＣｓ 万方数据