当前位置：文档库 › 最新医学真菌检验技术资料

最新医学真菌检验技术资料

医学真菌学检查是诊断真菌病的重要依据，随着真菌感染病例的日益增多，对实验室的诊断也提出了更高的要求。不论是患者浅部或深部感染诊断，几乎全依赖于临床标本的真菌学检查。特别是系统性真菌感染，其早期特异的诊断方法是挽救患者生命的关键，而病原真菌的形态结构十分多样，在不同条件下同一真菌也可有不同特点的形态。因此，在真菌的实验室检查中，必须熟练掌握各类真菌的形态特征以及在不同条件下的演变规律，才能获得对致病真菌正确的诊断。目前真菌感染的实验室检查方法主要包括常规检查法和特殊检查法两类。常规检查法主要包括：①形态学检查(直接镜检+染色镜检)。②培养检查。③组织病理学检查。特殊检查主要包括：①血清学方法。②分子生物学方法。

一、进行真菌实验室诊断的注意事项

①应有独立实验室，不应与其他细菌、病毒等实验室共用，以防发生相互污染。②在每天工作前与工作后，工作台均要以消毒水例如5%石碳酸或0.5%过氧乙酸擦拭，如遇操作台被真菌或标本污染，应即覆盖纸巾，并用5%石碳酸消毒20min，切忌工作台污染后即用水冲洗，以免污染扩散。③培养菌检体及真菌污染的物质在丢弃前，必须高压灭菌或焚烧。④在进行真菌检查时，不可试着闻平板培养基特殊的气味。⑤不可对Histoplasma capsulatum 以及Coccidioides immitis进行载玻片培养技术，因为其等具有高度感染性的孢子能够随着空气传播。⑥实验室禁止任意养花、草、动物等生物，以防实验污染。⑦工作环境应定期消毒。一般紫外线照射不能杀灭真菌，应用40%甲醛(可于每4㎡空间用35ml 40%甲醛加18g高锰酸钾在密闭情况下熏蒸24h，或用环氧乙烷进行消毒，每2～4周消毒1次。⑧如果用平板培养基接种标本，必须将平板培养基密封，以免发生危险，在不常做真菌检测的实验室，最安全的培养方法是利用含有棉花塞的试管培养基(使空气能够循环)。⑨美国梅育诊所主张利用平板培养基进行真菌的分离，步骤如下：平板培养基必须在生物安全箱内操作及检查。平板培养必须用胶带封好，平板培养基必须含30ml 的量，并保持培养箱60%以上的湿度，同时增加琼脂的浓度至2%，以免脱水。⑩真菌的诊断，需要经验的累积及备有良好的图谱参考书。

二、分离及鉴定真菌的培养基

(一)配制培养基的一般原则

①各成分混匀后以文火缓慢加热，并不断搅拌，煮沸1min，过热会破坏有效成分。②分装试管应在高压灭菌前，而分装平皿应在高压灭菌后。③高压灭菌一般在118～121磅，10～15min。④需加血液或不能高压的成分如抗生素，应在培养基冷却至50左右时加入混匀。⑤试管分装量约7~8ml，平皿约15ml，如需培养4～6周，平皿内应有35～40ml的量。培养基中抗生素的浓度和添加方法：氯霉素、庆大霉素和放线菌酮能耐热，可在培养基高压灭菌前加入，其他抗生素均在培养基高压灭菌后冷却至45℃～50℃时加入。青霉素20～100μg/ml，链霉素40～200μg/ml，氯霉素50μg/ml，放线菌酮500μg/ml，庆大霉素5μg/ml。

(二)分离和鉴定真菌的培养基

各种医学真菌所用培养基的成分，又可根据不同要求，分成分离、富集、选择、特性研究等含不同成分培养基，具体见表。

表分离鉴定真菌培养基分类表

培养基种类分离用培养基

使用目的

1.Brain heart infusion agar 分离腐生性及病原性真菌

2.Brain heart infusion agar with antibiotics 分离除了皮肤丝状真菌以外的真菌

3.Brain heart infusion biphasic blood Culture bottles 从血液中分离真菌

4.Dermatophyte test medium 分离皮肤丝状菌，建议仅做筛检用

5.Inhibitory mold agar 分离除了皮肤丝状真菌以外的真菌

6.Mycosel or mycobiotic agar 分离皮肤丝状菌

7.Ssbouraud dextrose agar 分离腐生性及病原性真菌

8.Yeast estract phosphate agar 分离除了皮肤丝状真菌以外的真菌

区分试验培养基

1.Ascospore agar 检测产子囊孢子酵母菌

2.Cornmeal agar with Tween 80 and trypan blue 检测产厚膜孢子酵母菌

3.Cottonseed conversion agar 使双相型真菌由霉菌型转变为酵母型

4.Czapek’s agar 分离及区分Aspergillus spp

5.Niger seed agar 鉴定Cryptococcus neoformans

6.Nitrate reduction medium 检测Cryptococcus spp.还原nitrate能力

7.Potato dextrose agar 证实Trichophyton rubrumm 产色素能力制作载玻片培养技术

8.Yeast fermentation broth 测定酵母菌的发酵能力

9.Yeast nitrogen base agar 测定酵母菌的糖类同化能力

三、临床样本的采集与处理

(一)皮屑边缘、疱壁、脓液、深层趾(指)间皮屑或活动边缘皮屑，取材前75%酒精消毒，作KOH涂片，同时种于沙氏琼脂加氯霉素2管，置25℃培养2周。

(二)甲屑用细挫或牙科磨钻取病甲与正常甲交界处并且贴近甲床部的甲屑，标本用酒精浸泡待干燥后种于沙氏(SDA)培养4周，并同时作KOH涂片。

(三)毛发取病发(变色，无光泽，弯曲，脆易折断，松动易拔除)15根，75%酒精消毒，3～5根作直接镜检，5～10根种于沙氏琼脂(加氯霉素)，划破斜面掩埋。

(四)脓液无菌采集，注意颗粒，用无菌蒸馏水稀释后寻找。可作G染色或抗酸染色，常规的KOH 涂片及SDA接种培养也是必要的。

(五)CSF 采集于无菌试管3～5ml，立即送检。置冰箱不宜超过1h。离心后以无菌吸管吸取离心沉淀物1ml，作墨汁涂片镜检和培养(SDA)25℃或37℃4周。

(六)血液无菌抽血3～5ml立即于无菌抗凝管中，BHIB:血标本量为培养基量的1/10，37℃5～7d 出现浑浊或菌团，挑取镜检同时移种SDA(注：每天检查完毕后需摇动培养基，37℃震荡培养可加速真菌的生长，提高检出率。不作直接检查，因其直接检查阳性率低。

(七)体液、痰液、尿液、粪便①体液标本量10ml离心沉淀取2ml沉淀液做直接镜检培养。②晨痰3～5ml集于无菌瓶中(无菌生理盐水漱口数次后)，挑取黏液或脓性部分：KOH涂片培养。③早晨中段尿或清洁尿10ml，离心取沉淀液1ml做KOH涂片培养(SDA每管种0.5ml)。④拭子：一般尽量不用，缺点：A.不能得到足量的标本；B.采集的标本也不易从棉花纤维上分离下来；C.容易干竭。采集标本后应迅速放入内装1~2ml无菌蒸馏水的试管送检KOH涂片培养。⑤纸盒送检，挑取黏液、脓血、乳酪样部分KOH 涂片培养(加抗生素)注：单纯培养阳性，不一定有临床意义，KOH涂片发现菌丝，有诊断意义。

(八)组织：标本置无菌平皿中立即送检，置无菌匀浆器加2ml蒸馏水，研磨成浆或1～2mm3的小块，KOH涂片培养。

四、真菌学检验的基本技术

(一)直接镜检

是最简单也是最有用的实验室诊断方法，常用的方法有：①氢氧化钾/复方氢氧化钾法：标本置于载玻片上，加一滴浮载液，盖上盖玻片，放置片刻或微加热，即在火焰上快速通过2～3次，不应使其沸腾，以免结晶，然后轻压盖玻片，驱逐气泡并将标本压薄，用棉拭或吸水纸吸去周围溢液，置于显微镜下检查。检查时应遮去强光，先在低倍镜下检查有无菌丝和孢子，然后用高倍镜观察孢子和菌丝的形态、特征、位置、大小和排列等。浮载液：A.10%~20%的KOH。配方：氢氧化钾10～20g，蒸馏水加至100ml，待氢氧化钾完全溶解后揺匀存放在塑料瓶内，适用于皮屑、甲屑、毛发、痂皮、痰、粪便、组织、耵聍等的检查。B.复方氢氧化钾溶液配方：氢氧化钾(AR)10g，二甲基亚砜(AR)40ml，甘油50ml, 蒸馏水加至100ml,配制方法：将氢氧化钾先加入30ml蒸馏水中溶解后，再依次加入DMSO、甘油揺匀后，用蒸馏水加到100ml，装入塑料瓶内。此配方的优点是：配方中加DMSO，能促进角质的溶解，有甘油涂片不易干，不易制成氢氧化钾结晶，氢氧化钾的浓度相对低，腐蚀性亦低，为进行大面积普查或大批量采集标本作镜检带来了方便。②胶纸粘贴法：用1cm×1.5cm的透明双面胶带贴于取材部位数分钟后自取材部位揭下，撕去复带在上面的底板纸贴在载玻片上，使原贴在取材部位的一面暴露在上面，再进行革兰染色或过碘酸锡夫染色，在操作过程中应注意双向胶带粘贴在载玻片上时不可贴反，而且要充分展平，否则影响观察。③涂片染色检查法：在载玻片上滴1滴生理盐水，将所采集的标本均匀涂在载玻片上，自然干燥后，火焰固定或甲醇固定。再选择适当的染色方法，染色后，以高倍镜或油镜观察。

常见镜检染色方法有：①革兰染色。所有真菌、放线菌均为革兰染色阳性，被染成蓝黑色。适用于酵母菌、孢子丝菌、组织孢浆菌及诺卡菌、放线菌的感染。②乳酸酚棉蓝染色：用于各种真菌培养物的镜检。③印度墨汁：用于检测脑脊液(CSF)中的新生隐球菌。④抗酸染色：用于抗酸菌及诺卡菌的诊断。⑤瑞氏染色：用于组织胞浆菌和马内菲青霉的检测。⑥过碘酸锡夫染色(PAS)：用于体液渗出液和组织匀浆等。真菌胞壁中的多糖染色后呈红色，细菌和中性细胞偶可呈假阳性，但与真菌结构不同，不难区别。⑦嗜银染色(GMS)：真菌可染成黑色，主要用于测定组织内真菌。

(二) 真菌培养

从临床标本中对致病真菌进行培养，目的是为了进一步提高对病原体检出的阳性率，以弥补直接镜检的不足，同时确定致病菌的种类。真菌培养检查除需要一般细菌检验用到的器具外，还应准备真菌专用的接种针、接种环、或接种钩(用铂丝或镍丝制成)、微型小铲、刀片、针头等，常规分离鉴定使用的培养基为沙氏葡萄糖琼脂(SDA)斜面培养基，加0.05%氯霉素，还有多种性质的培养基(见第二部分)以满足各种不同的需要，可酌情选用接种的方法，根据不同的临床标本，大体可分为点植法和划线法两种。①点植法：

适用于皮屑、甲屑、毛发、痂皮、组织等有形固体标本，将标本直接与培养基表面点状接触。②划线法：适用于痰、分泌物、脓液、组织液、组织块的研磨液等液体标本，用接种针(环)划线接种在培养基表面。

培养方法有多种，接临床标本接种时间分为直接培养法和间接培养法；按培养方法分为试管法、平皿法(大培养)和玻片法(小培养)。①直接培养：采集标本后直接接种于培养基上。②间接培养：采集标本后，暂保存，以后集中接种。③试管培养：是临床上最常用的培养方法之一，培养基置于试管中，主要用于临床标本分离的初代培养和菌种保存。④大培养：将培养物接种在培养皿或特别的培养瓶内，主要用于纯菌种的培养和研究。⑤小培养：主要用于菌种鉴定，大致分为三种：玻片法，方块法和钢圈法。A.玻片法：在消毒的载玻片上，均匀地浇上熔化的培养基，不宜太厚。凝固后接种待鉴定菌株，置于平皿中，保湿。待有生长后，盖上消毒的盖玻片，显微镜下直接观察，常用米粉吐温琼脂培养基观察白念珠菌的顶端厚壁孢子和假菌丝。B.方块法：适用于霉菌菌落的培养。取无菌平皿倒入约15ml 熔化的培养基，待凝固后用无菌小铲或接种刀划成1cm2大小的小块。取一小块移在无菌载玻片上，然后在小块上方四边的中点接种待鉴定菌株，盖上消毒的盖玻片，放入无菌平皿中的V形玻棒上，底部铺上无菌滤纸，并加入少量无菌蒸馏水，孵育，待菌落生长后直接将载玻片置显微镜下观察。C.钢圈法：先将固体石蜡加热熔化，取直径约2cm，厚度约0.5cm有孔口的不锈钢小钢圈，火焰消毒后趁热浸入石蜡油，旋即取出冷却，石蜡油即附着于小钢圈中。再取一无菌载玻片，火焰上稍加热，将小钢圈平置其上，孔口向上。小钢圈上石蜡油遇载玻片的热即熔化后凝固，钢圈就会固定在载玻片上。用无菌注射器经孔口注入熔化的培养基，培养基量约占小钢圈容量的1/2，注意避免气泡。待培养基凝固后取一消毒盖玻片，火焰上加热后，趁热盖在小钢圈表面，也即固定其上。最后用接种针伸入孔口进行接种。这种方法的优点是形成一种封闭式培养，在显微镜下直接观察菌落时可避免孢子吸入人体，而且不易被污染，盖玻片也可取下染色后封固制片保存。

(三)培养检查

标本接种后，每周至少检查2次，观察以下指标：①菌落外观：A.生长速度：缓慢生长菌：7～14d，快速生长菌：2～7d。一般浅部真菌超过2周深部真菌超过4周仍无生长，可报告阴性。B.外观：a.扁平。

b.疣状。

c.折叠规则或不规则。

d.缠结或垫状。

e.其他。C.大小：菌落大小用cm来表示，菌落大小与生长速度和培养时间有关。D.质地：a.平滑状。b.粉状。c.粒状。d.棉花状。e.粗毛状。

f.皮革状。

g.粘液状。

h.膜状。E.顔色：不同的菌种表现出不同的顔色，呈鲜艳或暗淡。致病性真菌的顔色多较淡，呈白色或淡黄色，而且其培养基也可变色，如马尔尼菲青霉等，有些真菌菌落不但正面有顔色，其背面也有深浅不同的顔色。菌落的顔色与培养基的种类、培养温度、培养时间、移种代数等因素有关。所以，菌落的顔色虽在菌种鉴定上有重要的参考价值，但除少数菌种外，一般不作为鉴定的重要依据。F.菌落的边缘：有些菌落的边缘整齐，有些不整齐。G.菌落的高度和下沉现象：有些菌落下沉现象明显，如黄癣菌、絮状表皮癣菌等，更有甚者菌落有时为之裂开。H.渗出物：一些真菌如青霉、曲霉的菌落表面会出现液滴。I.变异：有些真菌的菌落日久或多次传代培养而发生变异，菌落顔色减退或消失，表面气生菌丝增多，如絮状表皮癣菌在2～3周后便发生变异。②显微镜检查：小培养可置普通显微镜下直接观察，而试管和平皿培养的菌落则需挑起后做涂片检查。

五、组织病理学检查

真菌病的组织病理检查与直接镜检培养同样具有相当重要的价值，尤其对深部真菌病的诊断意义更大，如用特殊染色可提**性率。

真菌的组织病理反应与其他一些疾病的组织病理反应极其相似，往往只有在仔细研究了病理切片并发现了真菌之后才考虑到真菌病的诊断。而在这种情况下，标本已被固定，培养有时已不可能进行，组织病理切片就成了真菌感染的主要依据。所以临床上在送病理标本的同时，要尽可能考虑到真菌感染的可能，以便

同时采集标本送真菌实验室进行真菌学检查。

真菌在组织内一般表现为：①孢子：酵母和双相型真菌在组织内表现为孢子。②菌丝：许多真菌在组织中只表现为菌丝。组织中发现无色分隔、分支的菌丝多为念珠菌和曲霉。粗大、不分隔少分支的菌丝为接合菌，多为毛霉、根霉、犁头霉等。粗大、少分支有隔的菌丝为蛙粪霉菌。棕色菌丝为暗色丝孢霉病，由暗色孢科真菌引起。③菌丝和孢子，主要见于念珠菌感染。④颗粒：为组织内由菌丝形成的团块。⑤球囊或内孢囊：球囊内含有内孢子，为球孢子菌或鼻孢子菌在组织内的特征性结构。

组织病理片中根据形态和染色能基本确定种名的真菌为：荚膜组织胞浆菌、杜波伊斯组织胞浆菌、副球孢子菌、皮炎芽生菌、链状芽生菌、粗球孢子菌、新生隐球菌和鼻孢子菌等。根据组织病理中真菌的形态能确定属而不能确定种的病为：放线菌病、奴卡菌病、无绿藻病、念珠菌病、曲霉病和不育大孢子菌病等。多个属的真菌感染可引起相同的临床表现，在组织病理中真菌的形态无法区别的病有皮肤着生芽生菌病、暗色丝孢霉病、接合菌病、皮肤癣菌病和足菌肿等。足菌肿的颗粒若染色适当，很易确定为放线菌性或真菌性的，也能区别出细菌性颗粒。真菌性颗粒中的菌丝又分为无色或暗色两大类。各种病原菌基本上形成各自顔色、大小、形成和结构的颗粒，可以初步区别，但最后确定必须依靠真菌培养。

六、血清学方法

随着诊断技术的进展，以免疫学方法检测真菌病已成为可能，引起深部真菌感染的病原菌主要有白念珠菌、曲霉菌和隐球菌等，传统的检测方法主要为血培养和组织活检，但血培养历时太长，且深部真菌感染的病原菌常不易培养成功，阳性率较低。而深部真菌感染的临床征象错综复杂，又使得组织活检缺乏典型改变，影响正确诊断，这些都使得这些方法所起的作用极为有限，真菌的抗原、抗体及代谢产物的血清学检查用于深部真菌感染的实验室检测，可取得很好的效果。目前常用的免疫诊断方法有：①特异性抗原的检测：A.乳胶凝集试验(LA)。B.酶联免疫试验(EIA)。C.荧光免疫测定法(FA)。②特异性抗体检测：由于受检者都为免疫低下患者，因其致阳性率低，故现已少用。

七、分子生物学方法

近年来随着分子生物学的发展，已有聚合酶链反应(PCR)扩增、分子探针、限制性酶切片段长度多态性分析(RFLP)、DNA指纹图谱、随机扩增DNA多态性(RAPD)等方法。用于深部真菌病的诊断和分型研究，形成了以PCR技术为基础的一系列分子诊断方法。从这些新技术对多种致病真菌鉴定的应用过程中发现，此类方法具有操作简便、省时省力、特异性、敏感性高的优点。特别是从分子水平对真菌从遗传进化角度阐明菌种间内在的分类学关系，真正达到人们追求已久的自然分类的目的。我们有理由相信，随着PCR 及相关技术在临床的应用及更广泛深入的研究，将会对真菌感染的诊断和鉴定产生根本的影响。

临床医学检验技士资格考试真题及答

临床医学检验技士资格考试真题及答案 1.以下关于纤维蛋白原错误的说法是 A.是参与血浆凝固过程和糖蛋白 B.属于血浆蛋白质 C.电泳时位子α球蛋白区带 D.在肝脏合成 E.又称为凝血因子I 答案：C 2. SI制中酶活性单位为 A.U/L B.Katal/L C.g/L D.ml/L E.% 答案B： 3.下列哪一项不是糖尿病的典型表现 A.黏液性水肿 B.血尿酮体阳性 C.体重减轻 D.血糖升高

E.多饮、多食、多尿答案：A 4.被称为“好胆固醇”的是 A.HD.L-C B.VLD.L-C C.CM-C D.LD.L-C E.ID.L-C 答案：A 5.正常成年人血清LD.H同工酶电泳区带浓度结果为 A.LD.2> LD.1 > LD.3 > LD.4 > LD.5 B.LD.5 > LD.1 > LD.2 > LD.3 > LD.4 C.L D.3 > LD.1 > LD.2 > LD.4 > LD.5 D.LD.1 > LD.2 > LD.3 > LD.4 > LD.5 E.LD.4 > LD.1 > LD.2 > LD.3 > LD.5 答案：A 6.阻塞性黄疸病人血清中肯定不增高的酶是 A.胆碱酯酶 B.ALP C.ALT D.G-GT

答案：A 7.黄疸发生的机制不包括 A.红细胞破坏过多 B.肝细胞摄取胆红素障碍 C.肝细胞处理胆红素能力下降 D.肝细胞对胆红素的排泄增多 E.胆道梗阻答案：D. 8.肝中与胆红素结合的主要物质是 A.硫酸根 B.乙酰基 C.葡萄糖醛酸 D.甲基 E.甘氨酰基答案：C 9.某一种物质完全由肾小球滤过，然后又由肾小管完全重吸收，则该物质的消除率是A.0 B.50% C.90% D.100%

临床微生物学与检验测试题及答案

临床微生物学与检验测试题及答案——细菌感染的实验室检查与诊断及细菌生理一、名词解释 1.血清学诊断 2.培养基 3.基础培养基 4.选择培养基 5.鉴别培养基 6.菌落二、填空题 1.实验室细菌学检查结果的准确与否和标本的选择、、有直接关系。 2.辅助诊断风湿热的抗“O”实验属于。 3.血清学试验一般需作两次，其血清分别取自疾病的和.第二次抗体效价比第一次时方有诊断意义。 4.对流行性脑炎患者进行细菌学检查，可采集的标本有、和。 5.进行病原菌的分离培养时，从有正常菌群部位采取的标本应接种于培养基或培养基。 6.细菌感染实验室检查中，常用的血清学方法有、和三大类。 7.属于直接凝集反应的血清学试验有和。三、单项选择题 1.目前在传染病的预防接种中，使用减毒活疫苗比使用灭活疫苗普遍，关于其原因下述不正确的是 A.减毒活疫苗的免疫效果优于灭活疫苗 B.减毒活疫苗刺激机体产生的特异性免疫的持续时间比灭活疫苗长 C.减毒活疫苗能在机体内增殖或干扰野毒株的增殖及致病作用，灭活疫苗则不能 D.减毒活疫苗可诱导机体产生分泌型IgA，故适用于免疫缺陷或低下的患者 E.减毒活疫苗一般只需接种一次即能达到免疫效果，而灭活疫苗需接种多次 2.白百破三联疫苗的组成是

A.百日咳类毒素，白喉类毒素，破伤风类毒素 B.百日咳死疫苗，白喉类毒素，破伤风类毒素 C.百日咳死疫苗，白喉死疫苗，破伤风类毒素 D.百日咳活疫苗，白喉活疫苗，破伤风死疫苗 E.百日咳活疫苗，白喉死疫苗，破伤风死疫苗 3.使用时要注意防止Ⅰ型超敏反应的免疫制剂是 A.丙种球蛋白 B.胎盘球蛋白 C.抗毒素 D.白细胞介素 E.干扰素 4.关于胎盘球蛋白的叙述，错误的是 A.由健康产妇的胎盘和婴儿脐带中提取制备 B.一般含IgM C.一般不会引起超敏反应 D.主要用于麻疹，甲型肝炎和脊髓灰质炎等病毒性疾病的紧急预防 E.免疫效果不如高效价的特异性免疫球蛋白 5.伤寒病人发病第一周内，分离病原菌应采取的标本是 A.血液 B.尿液 C.粪便 D.呕吐物 E.脑脊液 6.咽喉假膜标本涂片染色后，镜检出有异染颗粒的棒状杆菌，其临床意义在于诊断 A.结核病 B.军团病 C.白喉

临床检验技师微生物真菌检验讲义

第二十八章真菌检验本章内容真菌的基本特性真菌的基本微生物检验方法病原性真菌一、真菌的基本特性真菌是真核细胞型微生物，属于真菌界。具有典型细胞核，有完整细胞器，不含叶绿素；寄生或腐生方式生存，由单细胞或多细胞组成；细胞壁含几丁质和（或）纤维素；能进行有性生殖和（或）无性生殖。分类绝大多数对人类有益，如食用真菌及能产生抗生素的真菌等。能引起人类和动物疾病的真菌仅150余种。分为黏菌、真菌两个门。其中与医学有关的真菌主要属于接合菌亚门、子囊菌亚门、担子菌亚门和半知菌亚门，鞭毛菌门中仅腐霉属在医学上有重要性。绝大部分致病性真菌属于半知菌亚门。结构基本结构为菌丝和孢子。菌丝：真菌在适宜环境中，由孢子生出芽管逐渐延长或呈丝状，称为菌丝。菌丝继续生长并向两侧分支，交织成团，称为丝状体。营养菌丝：伸入到培养基内的菌丝。气中菌丝：露出培养基表面的（部分气中菌丝可产生有性或无性孢子的称为生殖菌丝）。

孢子有性孢子：同一个菌体或不同菌体上的两个细胞融合形成。无性孢子：菌丝直接生成，并不发生细胞融合。致病性真菌多为无性孢子。真菌孢子与细菌芽孢区别真菌与细菌区别培养与繁殖气体环境：需要较高的湿度和氧气。温度酸碱：22～28℃，某些深部病原性真菌在37℃生长良好，pH 5.0～6.0。培养特点：最常用沙保弱培养基，生长缓慢。多数真菌是以出芽、形成菌丝、产生孢子以及菌丝分枝与断裂等方式进行繁殖。抵抗力对热的抵抗力不强，一般60℃1h即被杀死。对干燥、日光、紫外线及多数化学药品的耐受性较强；对1%～3%苯酚、2.5%碘酒、0.1%的升汞及10%甲醛比较敏感；对常用抗生素均不敏感，灰黄霉素、制霉菌素、两性霉素等对某些真菌有抑制作用。致病性

临床医学检验师试题及答案

17年临床医学检验(师)《专业实践技能》全真模拟试卷(1) 一、以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案，并在答题卡上将相应题号的相应字母所属的方框涂黑。第1题不影响酶活性测定的因素为（B） A．底物浓度 B．样品杯直径 C．温度 D．pH值 E．缓冲液的离子强度第2题用ELISA双抗体夹心法检测抗原A时，固相载体的包被物是（B） A．酶标记A抗体 B．未标记的抗A抗体 C．未标记抗原A D．酶标抗球蛋白抗体 E．酶标记抗原A 第3题下列哪一项指标可作为卵巢癌转移的指标（E） A．CEA B．AFP C．CA125 D．癌抗原 E．CA19-9 第4题下列哪项疾病属于自发性血小板增多（B） A．炎症性疾病 B．骨髓增生性疾病 C．恶性肿瘤 D．脾切除 E．原发性(特发性)血小板减少性紫癜第5题在免疫球蛋白测定中，检测阈值可达0.1mg/L的方法有（D） A．散射免疫比浊法 B．酶联免疫吸附法 C．免疫胶乳比浊法 D．以上3种方法均可 E．单相免疫扩散法

第6题低密度脂蛋白中含量最多的载脂蛋白是（C）A．ApoAⅠ B．ApoAⅡ C．ApoB D．ApoCⅡ E．ApoE 第7题不属于连续监测法中干扰因素是（E） A．样品本身含有与化学反应有关的酶 B．工具酶中混有杂酶 C．样品中某些代物或药物的干扰 D．分析容器的污染 E．自动生化分仪的类型第8题反映肝细胞受损，膜通透性增加的血清酶是（B）A．γ-GT B．ALT C．MAO D．ChE E．ALP 第9题巨幼红细胞性贫血时，血片易见（D） A．球形红细胞 B．靶形红细胞 C．口形红细胞 D．有核红细胞 E．镰刀形红细胞第10题属于肿瘤特异性抗原的是（C） A．胚胎抗原 B．甲胎蛋白 C．黑色素瘤抗原 D．癌胚抗原 E．CA199 第11题沉淀反应形成的反应现象（A） A．肉眼可见

2013年医学检验士考试考题 2

1 A、黏附 B、释放 C、凝集 D、收缩 E、吸附 C 2、CD 3、CD8是指下列何种细胞的标志物（） A、总T细胞 B、辅助性T细胞 C、细胞毒性T细胞 D、NK细胞 E、B细胞答 C 3、准确度是指（） A、对同一样品重复进行检测时所得结果的符合程度 B、样品的测定值与真值的符合程度 C、样品测定值与平均值的偏差 D、样品测定值与标准品值的符合程度 E、样品的测定值与真值的偏差 B 4、E玫瑰花环形成率代表（） A、B细胞百分率 B、T细胞百分率 C、中性粒细胞百分率 D、巨噬细胞百分率 E、NK细胞百分率 B 5、临床中进行外斐试验最常采用的方法为（） A、正向间接凝集反应 B、反向间接凝集反应 C、玻片凝集法 D、试管凝集法 E、ELISA法 D 6、关于补体参与的"抗原抗体试验"下列哪些叙述是正确的（） A、红细胞与溶血素结合 B C、补体与抗原结合 D E、补体与 A 7、下列有关抗原抗体反应特点的叙述中错误的是（） A、抗原抗体的反应具有特异性 B、抗原抗体只有在分子比例合适时才会出现最强的反应 C D、抗原抗体的反应具有不可逆性 E、抗原、抗体具有特异的结合部位 D 8、免疫电泳技术在临床上最常用于（） A、体液免疫功能的测定 B、抗感染抗体的检测 C、M蛋白的鉴定 D、单克隆抗体的鉴定 E、多克隆抗体的鉴定 C 有疑问点这里 325877.[临床医学检验技术(士)考试]血清中含量最高的免疫球蛋白是 A、IgG B、IgD C、IgM D、IgA E、IgE A 9、成人血清中出现哪一种免疫球蛋白增高提示可能有新近感染（） A、IgG B、IgA C、IgM D、IgE E、IgD C 10、细细胞镰变试验同下列哪种Hb关系密切（） A、HbC B、HbE C、HbH D、HbS E、HbBart D 11、目前尿素自动化分析最常用的测定方法是（） A、尿素酶偶联谷氨酸脱氢酶法 B、酚一次氯酸盐显色法 C、纳氏试剂显色法 D、二乙酰-肟法 E、脲酶-波氏比色法 A 12、比色分析A=εLC中符号C表示（）

酵母的分子生物学鉴定

生物技术通报ＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹＢＵＬＬＥＴＩＮ ?技术与方法? ２００８年第５期收稿日期：２００８－０３－１４基金项目：国家高技术研究发展计划（８６３）项目基金（２００３ＡＡ２１４０６１，２００６ＡＡ０２０２０３）作者简介：唐玲（１９８３－），女，硕士研究生，研究方向：分子生物学；Ｅ－ｍａｉｌ：ｔａｎｇｌｉｎｇ１０１４９９＠１６３．ｃｏｍ通讯作者：闫云君（１９６９－），男，教授，博士生导师；Ｅ－ｍａｉｌ：ｙａｎｙｕｎｊｕｎ＠ｔｏｍ．ｃｏｍ；Ｔｅｌ：（０２７）８７７９２２１４酵母种类繁多，不仅作为一种重要的工业微生物被广泛应用于各个领域，近年来，人们还利用酵母发酵来生产抗生素，维生素和酶等高附加值的产品，但酵母也会引发食物、制造物的腐坏变质，从而给人们带来巨大的经济损失，有的酵母还是人体和动物的致病菌（如，Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ）。近两个世纪以来，酵母菌分类主要依据形态学鉴定和生理生化特性。目前，已发展起来各种用于酵母快速检测的商业化的试剂盒，可实现部分酵母（多是针对导致疾病的部分致病酵母）的鉴定，但是该类试剂盒对酵母的检测不仅费时，而且鉴定结果准确性不高。由于受到环境因素的影响，某些酵母菌属、种在形态学及生理生化特性方面差异极不显著，在这样的背景下，以化学为基础的分类法建立起来，通过细胞壁的成份、生物合成以及同功酶电泳图谱分析来对酵母进行分类鉴定。现在，随着分子生物学的发展，ＤＮＡ－ＤＮＡ杂交，染色体组型分析（ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｉｃｋａｒｙｏｔｙｐｉｎｇ），染色体ＤＮＡ的限制性片段长度的多态性分析（ＲｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎＦｒａｇｍｅｎｔＬｅｎｇｔｈＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍａｏｆｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌＤＮＡ），线粒体ＤＮＡ（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌＤＮＡ）及核糖体ＤＮＡ序列分析（ｒｉｂｏｓｏｍａｌＤＮＡｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ），实时ＰＣＲ（ｒｅａｌ－ｔｉｍｅＰＣＲ），基因芯片（ｇｅｎｅｃｈｉｐｓ）等分子生物学的方法广泛地应用于酵母的鉴定中。分子生物学的方法不仅能够快速的将各种酵母鉴定到属或种，而且鉴定的结果精确度更高。随着数据库中分子信息量的增加，近年来应用分子生物学技术鉴定酵母菌种的研究越来越广泛。１核糖体ＤＮＡ鉴定法核糖体ＤＮＡ普遍存在于生物中，真核生物的核糖体ＲＮＡ中包括２６Ｓ、１８Ｓ、５．８Ｓ和５Ｓ４种不同酵母的分子生物学鉴定唐玲刘平黄瑛杨江科闫云君（华中科技大学生命科学与技术学院分子生物物理教育部重点实验室，武汉４３００７４）摘要：酵母种类繁多，与人类的关系极其密切，但目前由于研究方法的不同，对于酵母的分类还存在着不同的分类体系。而准确快速的对酵母进行鉴定，既可以有效防止食品腐化变质，又可以增加经济效益，同时也为酵母的分类鉴定奠定一定的理论基础。对常用的核糖体ＤＮＡ鉴定法、ＤＮＡ指纹图谱鉴定、脉冲场电泳鉴定、实时ＰＣＲ和基因芯片等分子生物学鉴定方法在酵母鉴定工作中的研究情况进行了比较。关键词：核糖体ＤＮＡＤＮＡ指纹图谱脉冲场凝胶电泳实时ＰＣＲ基因芯片ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｆｏｒＹｅａｓｔＴａｎｇＬｉｎｇＬｉｕＰｉｎｇＨｕａｎｇＹｉｎｇＹａｎｇＪｉａｎｇｋｅＹａｎＹｕｎｊｕｎ（ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｐｈｙｓｉｃｓ，ＨｕａｚｈｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｗｕｈａｎ４３００７４）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｙｅａｓｔｓｈａｖｅｗｉｄｅｒａｎｇｅａｎｄａｒｅｉｍｐｏｒｔａｎｔｔｏｈｕｍａｎｂｅｉｎｇｓ．Ｔｈｅｒｅｅｘｉｓｔｓｏｍｅｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｓｏｆｙｅａｓｔｓｂａｓｅｄｏｎｒｅｓｅａｒｃｈｍｅｔｈｏｄｓ．Ｉｔｉｓｎｅｃｅｓｓａｒｙｔｏｆｉｎｄａｎａｃｃｕｒａｔｅａｎｄｅｆｆｉｃｉｅｎｔｍｅｔｈｏｄｔｏｉｄｅｎｔｉｆｙｙｅａｓｔｓ，ｔｈｕｓｂｅｉｎｇａｂｌｅｔｏｐｒｅｖｅｎｔｆｏｏｄｃｏｒｒｕｐｔｉｏｎ，ａｎｄｉｎｃｒｅａｓｅｅｃｏｎｏｍｉｃｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ．Ａｌｓｏ，ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｂｏｕｔｔｈｅｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｃｏｕｌｄｂｅｐｒｏｖｉｄｅｄ．Ｔｈｉｓｐａｐｅｒｄｅｓｃｒｉｂｅｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｙｅａｓｔ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｒｉｂｏｓｏｍａｌＤＮＡ，ＤＮＡｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇ，ｐｕｌｓｅｄｆｉｅｌｄｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ｒｅａｌ－ｔｉｍｅＰＣＲａｎｄｇｅｎｅｃｈｉｐｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＲｉｂｏｓｏｍａｌＤＮＡＤＮＡｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇＰｕｌｓｅｆｉｅｌｄｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲＧｅｎｅｃｈｉｐｓ

常见微生物检验项目及临床意义

细菌培养与其它检验项目的临床意义卫生部规定接受抗菌药物治疗的住院患者微生物检验样本送检率不低于30%（卫办医政发〔2011〕56号）。特介绍微生物检验项目，方便统计与分析点评。细菌检验为感染性疾病诊断和治疗提供依据：目标性治疗：提高微生物的送检率与检出率，有利于诊断与使用抗菌药。经验治疗：根据本地区病原菌类型时间、区域、耐药谱等使用抗菌药。调整治疗方案针对性用药：获得准确病原菌和细菌药敏结果。细菌培养的临床意义细菌培养与其它检验项目不同，由于其样本采集易受杂菌的干扰和培养条件的限制，因而造成检测结果有时与临床不完全一致，故在分析细菌培养报告时应明白：细菌培养阴性不代表无细菌感染、细菌培养阳性不代表该菌一定是病原菌，应结合患者具体情况而定。 1、血液和骨髓培养目前血液培养仍然是菌血症和败血症的细菌学检验的基本方法，并且广泛地应用于伤寒、副伤寒及其它细菌引起的败血症的诊断。菌血症系病原菌一时性或间断地由局部进入血流，但并不在血中繁殖，无明显血液感染临床征象。常可发生在病灶感染或牙齿感染，尤以拔牙、扁桃体切除及脊髓炎手术后等多见。败血症是指病原菌侵入血流，并在其中大量生长繁殖，造成身体的严重损害，引起显著的全身症状（如不规则高热与全身中毒等症状），它多继发于组织器官感染，尤其是当机体免疫功能低下、广谱抗生素和激素的应用及烧伤等。单次的血培养结果，对临床无鉴别指导意义，应多次多部位采集血液进行培养，才可判定检出菌究竟是病原菌还是污染菌。抽血时应特别注意皮肤消毒和培养瓶口的灭菌。 2、脑脊液培养正常人的脑脊液是无菌的，故在脑脊液中检出细菌（排除操作中的污染）应视为病原菌。引起脑膜炎的细菌种类不同，化脓性脑膜炎病原菌多为脑膜炎奈瑟菌，除此之外尚有肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等。 3、尿液培养尿液细菌培养对于膀胱和肾脏感染的及早发现和病原学诊断很有价值，对于尿道、前列腺以及内外生殖器的炎症也有一定价值。尿液中出现细菌通常称为菌尿症，如果尿液本身澄清但培养出细菌，一般为标本采集时未彻底消毒尿道口引起。如果细菌培养阳性同时伴有脓尿出现，则提示有尿路感染的可能（需指出轻度感染时可无脓尿出现）。泌尿系感染常见菌为大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、变形杆菌等，除结核分枝支杆菌外，这些细菌又是尿道口常驻菌，极易引起标本留样污染，应注意鉴别。某些真菌疾病，如曲菌病在播散时也可造成肾脏感染，且尿中也能检查到。

真菌检测方法

分离培养：无菌采取病料接种马铃薯琼脂培养基中，置37℃恒温箱中培养24小时，长成绒毛样菌丝，未见其它细菌生长。经48小时培养长成白色菌落。72小时菌落呈纽扣状，由中心向外周逐渐变深，转变成灰白色、灰绿色。取培养物镜检可见大量球形的分生孢子。通常人们把真菌和霉菌认为是一种病原的两种说法。真正真菌包括霉菌，霉菌只是众多真菌中的一种。真菌是由单细胞或多细胞组成，按有性或无性方式进行繁殖的真核细胞类微生物。根据其侵犯人体的部位分为前部真菌和深部通常人们把真菌和霉菌认为是一种病原的两种说法。真正真菌包括霉菌，霉菌只是众多真菌中的一种。真菌是由单细胞或多细胞组成，按有性或无性方式进行繁殖的真核细胞类微生物。根据其侵犯人体的部位分为前部真菌和深部真菌，包括皮肤癣菌、孢子丝菌、念珠菌、曲霉菌、隐球菌、组织胞浆菌等。而霉菌多为细胞真菌的一种，也为深部感染真菌，包括烟曲菌、黄曲菌、黑曲菌、土曲菌等，常发生于免疫力低下的患者，引起全身播散性感然，影响预后。培养基的选择应根据实验材料和检验目的来确定。目前国标方法中使用的培养基有:马铃薯葡萄糖琼脂(PDA),孟加拉培养基(RBC)、高盐察氏培养基(CAO),其中PDA和RBC适合于一般的霉菌和酵母菌生长,而CAO则适合于高渗性霉菌生长,酵母菌几乎不长。在日常检测中我们发现,有些常见的耐高渗性霉菌,如局限曲霉、谢瓦曲霉、赤曲霉、Wallemia等在PDA、RBC上生长非常缓慢或不长,而这些菌在高渗培养基如M40Y、DG18(M40Y琼脂配方:蔗糖400g,麦芽提取汁20g,酵母提取汁5g,琼脂20g,氯霉素50mg,蒸馏水1000ml;DG18琼脂配方:葡萄糖10g,蛋白胨5g,KH2PO41g,MgSO4·7H2O 0.5g,氯霉素0.1g,0.2%二氯硝基苯胺1.0mL,琼脂15g,蒸馏水1000mL,PH6.5)上则正常生长,孢子、形态特征发育良好,而且酵母菌也能在M40Y、DG18上生长,因此,若能同时采用PDA和M40Y(或DG18)分离培养各类样品中的霉菌,将能更全面地反映出污染霉菌的菌相。特别是对干燥食品、高糖食品、淹渍食品等,更有必要同时采用M40Y或DG18。由于霉菌中很多种类不会产生有毒的霉菌毒素,危害较小,而有的菌株即使污染数量不多,但其产生的霉菌毒素却危害较大,因此仅作霉菌计数并不能全面反映其危害程度,重要的是要知道污染菌的菌相,才能更好地判断被污染食品的安全程度。为此,国外有些研究者设计出各类选择性培养基,可以识别产毒的霉菌。如AFPA培养基(配方:酵母提取汁20g,蛋白胨10g,柠檬酸铁铵0.5g,0.2%二氯硝基苯胺1.0mL,琼脂15g,蒸馏水1000mL,PH5.6)用于分离黄曲霉毒素产生菌高污染率的食品。产黄曲霉毒素的菌株黄曲霉和寄生曲霉在AFPA上30℃培养2~3天就形成背面有亮橙黄色的特征性菌落,非常容易识别。有人利用该培养基分离黄曲霉高污染食品花生、玉米等,取得了满意的结果。因此,针对不同样品,有目的地设计出相应的选择性培养基,以筛选污染菌中的危险菌群,将是一个值得探索的方向。 2接种方式接种方式主要有倾注法和涂布法两种。目前国际方法中采用倾注法,但近来国际上有不少学者认为霉菌计数采用涂布法更合适。Beuchat和Matsuda等人分别对这两种方法作了大

2019年度临床医学检验技士资格考试真题及答案word资料30页

2019年度临床医学检验技士资格考试真题及答案一、以下每一道考题下面有A、B、C、D.、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案，并在答题卡上将相应题号的相应字母所属的方框涂黑。 1. 以下关于纤维蛋白原错误的说法是 A.是参与血浆凝固过程和糖蛋白 B.属于血浆蛋白质 C.电泳时位子α球蛋白区带 D.在肝脏合成 E.又称为凝血因子I 答案：C 2. SI制中酶活性单位为 A.U/L B.Katal/L C.g/L D.ml/L E.% 答案B： 3. 下列哪一项不是糖尿病的典型表现 A.黏液性水肿 B.血尿酮体阳性 C.体重减轻 D.血糖升高 E.多饮、多食、多尿

答案：A 4. 被称为“好胆固醇”的是 A.HD.L-C B.VLD.L-C C.CM-C D.LD.L-C E.ID.L-C 答案：A 5. 正常成年人血清LD.H同工酶电泳区带浓度结果为 A.LD.2> LD.1 > LD.3 > LD.4 > LD.5 B.LD.5 > LD.1 > LD.2 > LD.3 > LD.4 C.L D.3 > LD.1 > LD.2 > LD.4 > LD.5 D.LD.1 > LD.2 > LD.3 > LD.4 > LD.5 E.LD.4 > LD.1 > LD.2 > LD.3 > LD.5 答案：A 6. 阻塞性黄疸病人血清中肯定不增高的酶是 A.胆碱酯酶 B.ALP C.ALT D.G-GT E.AST 答案：A 7. 黄疸发生的机制不包括

A.红细胞破坏过多 B.肝细胞摄取胆红素障碍 C.肝细胞处理胆红素能力下降 D.肝细胞对胆红素的排泄增多 E.胆道梗阻答案：D. 8. 肝中与胆红素结合的主要物质是 A.硫酸根 B.乙酰基 C.葡萄糖醛酸 D.甲基 E.甘氨酰基答案：C 9. 某一种物质完全由肾小球滤过，然后又由肾小管完全重吸收，则该物质的消除率是 A.0 B.50% C.90% D.100% E.120% 答案：A 10. 正常情况下，能被肾脏几乎完全重吸收的物质是 A.尿素 B.肌酐

菌种鉴定

?（1）常规鉴定常规鉴定内容有形态特征和理化特性。形态特征包括显微形态和培养特征；理化特性包括营养类型、碳氮源利用能力、各种代谢反应、酶反应和血清学反应等。 ?（2）BIOLOG碳源自动分析鉴定 BIOLOG鉴定系统以微生物对不同碳源的利用情况为基础，检测微生物的特征指纹图谱，建立与微生物种类相对应的数据库。通过软件将待测微生物与数据库参比，得出鉴定结果。该系统已获美国FDA认可，已逐步应用于食品和饮品企业、环保、海洋生物/水产品、制药、农业微生物、生物治理、化妆品、临床等领域的微生物鉴定试验中。 CICC拥有国内最全的BIOLOG数据库，涉及革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、厌氧菌、酵母、丝状真菌在内近2000种微生物。 ?（3）分子生物学鉴定应用分子生物学方法从遗传进化角度阐明微生物种群之间的分类学关系，是目前微生物分类学研究普遍采用的鉴定方法。CICC拥有微生物菌种分类鉴定的分子生物学实验室，配有PCR仪、高速冷冻离心机、电泳仪、HPLC、凝胶成像系统、紫外控温分析系统等先进仪器设备，以及DNAMAN、 BIOEDIT、CLUSTALX、TREEVIEW等序列分析软件。目前CICC可采用核酸序列分析法分析细菌16S rDNA/16S-23S rDNA区间序列、酵母18S rDNA/26S rDNA（D1/D2）序列及丝状真菌的18S rDNA/ ITS1-5.8S-ITS2序列，提供科学的鉴定结果。 ?（4）API细菌数值鉴定系统 API鉴定系统涵盖15个鉴定系列，约有1000种生化反应，目前已可鉴定超过600种的细菌。鉴定过程中，可根据细菌所属类群选择适当的生理生化鉴定系列，通过软件将待测细菌与数据库参比，得出鉴定结果。 CICC目前可应用API 50CH系列、API 20 E系列、API Staph系列对乳酸杆菌（Lactobacillus sp.）和相关细菌、芽孢杆菌（Bacillus sp.）、葡萄球菌属（Staphylococcus sp.）、微球菌属（Micrococcus sp.）和库克菌属（Locuria sp.）进行鉴定。 ?（5）功能性分析及功能基因

临床微生物学与检验习题集

临床微生物学及检验习题集第一部分基础题绪论一、名词解释:微生物()、微生物学()、医学微生物学( )二、选择题1．下列描述的微生物中，不是所有微生物共同特征的是A个体微小B 分布广泛C 种类繁多D 只能在活细胞内生长繁殖E 结构简单2．不属于原核细胞型微生物的是A 细菌B真菌 C支原体 D 衣原体E立克次体3属于真核细胞型微生物的是 A 螺旋体 B 放线菌 C 真菌 D 细菌 E 立克次体4下列那种微生物属于非细胞型微生物 A 细菌B衣原体 C支原体 D病毒 E立克次体细菌的形态及结构一、名词解释：1.肽聚糖（）2.脂多糖()3. 质粒（）4. 异染颗粒()5. 革兰染色()6. 芽胞()7荚膜() 二、选择：1．及真核细胞结构相比较，细菌所特有的一种重要结构是A核蛋白体（核糖体）B线粒体C高尔基体 D细胞膜 E 细胞壁2．及细菌运动有关的结构是A鞭毛B菌毛C纤毛D荚膜E轴丝3．及内毒素有关的细菌结构是A外膜层B核膜C线粒体膜D荚膜E细胞膜4．芽胞及细菌致病有关的是A抗吞噬B产生毒素C耐热性D粘附于感染部位E侵袭力 5．细菌核质以外的遗传物质是 A B 核蛋白体 C质粒D异染颗粒 E性菌毛 6．及细菌粘附功能有关的细菌结构是A菌毛B荚膜 C中介体D 胞浆膜E细胞膜

7．不属于细菌基本结构的是A鞭毛B细胞质C 细胞膜D核质（拟核）E细胞壁 8．细菌内毒素的主要成份是 A 肽聚糖 B 蛋白质 C鞭毛 D 核酸E脂多糖 9．及细菌感染侵袭相关的结构是A 中介体B 细胞膜 C异染质颗粒D 芽胞E 荚膜 10．青霉素的抗菌作用机理是A 干扰细菌蛋白质的合成B抑制细菌的核酸代谢C抑制细菌的酶活性D破坏细菌细胞壁中的肽聚糖E破坏细胞膜11细菌的L型是指：A细菌的休眠状态B细胞壁缺陷型细菌C非致病菌D不可逆性变异的细菌E光滑型—粗糙型菌落()变异 12．溶菌酶杀菌的作用机理是：A裂解聚糖骨架的β-1，4糖苷键 B竞争肽聚糖合成中所需的转肽酶C及核蛋白体的小亚基结合 D竞争性抑制叶酸的合成代谢 E破坏细胞膜 13．关于细菌的L型错误的是：A主要由肽聚糖结构的缺损引起的B可在体外试验中形成C呈多形性D需在高渗透压的培养基中分离培养E失去产生毒素的能力而使其致病力减弱 14．细菌的革兰染色性不同是由于A细胞核结构B细胞壁结构C 细胞膜结构同D磷酸壁的有无 E中介体的有无15．细菌哪种结构类似真核细胞线粒体A核蛋白体B中介体C胞质颗粒D质粒 E 核质16．需用电子显微镜才能观察到的结构是A荚膜B异染颗粒C鞭毛D菌毛 E芽胞17．革兰染色所用试剂的顺序是A稀释

什么是微生物检验

什么是食品微生物检验吴崇食质12级1班学号：20122629 微生物是个体难以用肉眼观察的一切微小生物之统称。微生物包括细菌、病毒、真菌、和少数藻类等。（但有些微生物是肉眼可以看见的，像属于真菌的蘑菇、灵芝等。）病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的“非细胞生物”，但是它的生存必须依赖于活细胞。根据存在的不同环境分为空间微生物、海洋微生物等，按照细胞机构分类分为原核微生物和真核微生物。微生物对人类最重要的影响之一是导致传染病的流行。在人类疾病中有50%是由病毒引起。微生物导致人类疾病的历史，也就是人类与之不断斗争的历史。在疾病的预防和治疗方面，人类取得了长足的进展，但是新现和再现的微生物感染还是不断发生，像大量的病毒性疾病一直缺乏有效的治疗药物。一些疾病的致病机制并不清楚。大量的广谱抗生素的滥用造成了强大的选择压力，使许多菌株发生变异，导致耐药性的产生，人类健康受到新的威胁。一些分节段的病毒之间可以通过重组或重配发生变异，最典型的例子就是流行性感冒病毒。每次流感大流行流感病毒都与前次导致感染的株型发生了变异，这种快速的变异给疫苗的设计和治疗造成了很大的障碍。而耐药性结核杆菌的出现使原本已近控制住的结核感染又在世界范围内猖獗起来。微生物千姿百态，有些是腐败性的，即引起食品气味和组织结构发生不良变化。当然有些微生物是有益的，它们可用来生产如奶酪，面包，泡菜，啤酒和葡萄酒。微生物非常小，必须通过显微镜放大约1000 倍才能看到。比如中等大小的细菌，1000个叠加在一起只有句号那么大。想像一下一滴牛奶，每毫升腐败的牛奶中约有5千万个细菌，或者讲每夸脱牛奶中细菌总数约为50亿。也就是一滴牛奶中可能含有50 亿个细菌。微生物能够致病，能够造成食品、布匹、皮革等发霉腐烂，但微生物也有有益的一面。最早是弗莱明从青霉菌抑制其它细菌的生长中发现了青霉素，这对医药界来讲是一个划时代的发现。后来大量的抗生素从放线菌等的代谢产物中筛选出来。抗生素的使用在第二次世界大战中挽救了无数人的生命。一些微生物被广

医学检验技师考试真题及答案

2008年医学检验技师考试真题及答案一、以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案，并在答题卡上将相应题号的相应字母所属的方框涂黑。 1.血清中的淀粉酶可水解淀粉分子中的何种键 A.α-1葡萄糖苷键 B.β-4葡萄糖苷键 C.α-1、4葡萄糖苷键 D.β-1、4葡萄糖苷键和C 答案：C 2.糖尿病的“三多一少”症状是指 A.多糖，多脂，多尿，消瘦 B.多饮，多食，多大便，小便少 C.多饮，多食，多尿，消瘦 D.高蛋白，高脂肪，多尿，消瘦 E.以上都不是答案：C 3.可防止糖酵解的抗凝剂氟化钠抗凝剂 B.肝素 C.草酸钾 D.柠檬酸钠抗凝剂答案：A 4.将胆固醇转变成胆汁酸的脏器是 A.小肠 B.大肠 C.胃 D.胰腺 E.肝脏答案：E 5.下列哪项可导致血清总蛋白增高的原因为 A.营养不良 B.消耗增加 C.脱水 D.肝功能障碍 E.丢失过多答案：C 6.下列关于肝硬化的叙述何者是正确的是 A.肝硬化时，肝糖原合成增多 B.肝硬化时，乳酸，丙酮酸及α-酮戊二酸生成减少 C.肝硬化时，肝脏的生物转化功能增强 D.肝硬化Ⅳ型胶原合成增多 E.肝硬化时肝脏对激素的灭活功能增强答案：D 7.原尿成分与血浆成分不同的是 A.葡萄糖的含量 B.钾的含量 C.蛋白质的含量 D.钠的含量 E.尿素的含量答案：C 8.不适于尿液中尿酸测定的防腐剂为 A.甲苯 B.二甲苯 C.草酸钾 D.盐酸 E.麝香草酚答案：D

9.阴离子隙（AG）增高常见于下列哪种情况 A.呼吸性酸中毒 B.呼吸性碱中毒 C.代谢性碱中毒 D.代谢性酸中毒 E.失代偿性呼吸性碱中毒答案：D 10.小儿佝偻病是哪种元素缺乏 A.铁 B.硒 C.锌 D.钙 E.碘答案：D 11.停经后典型的激素变化是下降，LH上升，E2下降上升，LH下降，E2上升上升，LH上升，E2下降上升，LH下降，E2下降下降，LH下降，E2下降答案：C 12.临床上不须进行TDM的抗生素类药物为 A.丁胺卡那霉素 B.青霉素 C.链霉素 D.氯霉素 E.妥布拉霉素答案：B 13.一般认为用于确诊性试验的分析方法应具备 A.高灵敏度 B.高特异性 C.重复性好 D.总有效率高 E.高准确度答案：B 14.关于医学决定水平下列哪种说法是错误的 A.可用来排除某种疾病 B.可用来确定某种疾病 C.就是参考值的另一种说法 D.若高于或低于该值，应采取一定的治疗措施 E.对于某个项目可以有两个或三个医学决定水平答案：C 15.某生化指标在人群中为正态分布，制定其参考值范围通常用 A. ±1SD B. ±2SD C. ±3SD D. ±4SD E. ±5SD答案：B 16.诊断试验的灵敏度是指 A.某一试验用于无病的试者时所得真阴性的比例 B.某病患者的诊断试验为真阳性的比例

微生物检验(完整版)

微生物检验（完整版）名解微生物：是一群个体微小结构简单肉眼不能看见的微小生物的总称种：亲缘关系较近的微生物群体在进化发育阶段上有一定的共同形态和生理特征微生物学：生物学的一个分支是研究微生物在一定条件下的形态结构生理生化遗传变异特性及微生物的进化分类生态等生命活动规律以及微生物之间与人类动植物自然界互相关系的一门科学抗生素：是由某些微生物在代谢过程中产生的能抑制或杀灭某些其他微生物和肿瘤细胞的微量生物活性物质细菌素：是某些细菌菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质条件致病菌：正常菌群在宿主体内具有相对稳定性一般不致病消毒：指杀死物体上的病原微生物但不一定能杀死细菌芽孢的方法灭菌：指杀灭物体上所有的微生物的方法防腐：指防止或抑制微生物生长繁殖的方法无菌：指没有货的微生物的存在质粒：是细菌染色体外的遗传物质也是环状闭合的双联DNA分子比染色体小存在于细胞质中可自主复制突变：是指细菌遗传物质的机构发生突然而稳定的改变所致的变异现象可遗传给后代基因转移：外源性物质由供体菌转入受体细胞内的过程基因重组：供体菌的基因进入受体菌细胞并在其中自行复制与表达或矛受体菌DNA整合在一起的过程病毒：是一类个体微小结构简单只含一种核酸只能在活的易感细胞内以复制方式增殖的

非细胞型微生物复制周期：病毒的增殖被人为分成吸附穿入脱壳生物合成装配成熟与释放七个步骤的完整过程缺陷病毒：是指因病毒基因组不完整或因基因某一点改变而不能进行正常增殖的病毒顿挫感染：病毒进入宿主细胞若细胞缺乏病毒复制所需的酶能量和必要成分等则病毒无法合成自身成分不能够装配和释放子代病毒的现象干扰现象：两种病毒感染同一种细胞时可发生一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象人工自动免疫：是将疫苗等免疫原接种于人体刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答使机体获得特异性免疫力人工被动免疫：是指注射含某种病毒特异性中和抗体的免疫血清等一系列细胞因子是机体立即获得特异性免疫干扰素：是由病毒或干扰素诱生剂作用于中性粒细胞成纤维细胞或免疫细胞产生的一种糖蛋白致病性：一定种类的病原微生物在一定的条件下能在特殊的宿主体内引起特定疾病的能力半数致死量：在规定时间内通过一定途径能使一定体重或年龄的某种动物半数死亡或感染需要的最小病原体数量或毒素量急性感染：发作突然病程较短一般是数天或数周局部感染：病原体侵入机体后局限就在一定部位生长繁殖引起病变的一种感染类型毒血症：致病菌侵入宿主体后只在机体局部生长繁殖病菌不进入血液循环但其产生的外毒素入血引起特殊的毒性症状败血症：致病菌侵入血流后在其中大量繁殖并产生毒性产物引起全身性毒性症状内毒素血症：革兰阴性菌侵入血流并在其中大量繁殖崩解后释放出大量毒素也可有病灶

真菌学实验指导

本课程，本课程是大学本科生物技术、生物科学专业的选修课程。介绍真菌分类现状、分类方法（包括传统与现代分类方法的比较）、分类依据及其原则。本课程的教学不限于介绍研究的成果，重在介绍分析和解决问题的方法，以培养学生分析问题和创新的能力。所以在理论学习的同时开设综合性实验，培养学生观察、分析和动手能力。基本掌握真菌分离、鉴定的方法，并应用于真菌其它领域的研究。本指导书适用于生物技术和生物科学专业。

1、实验：内生真菌的分离及鉴定 ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????3 2、实验报告基本内容要求 ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????7 3、实验报告格式????????????????????????????????????????????????????????????????8

实验内生真菌的分离及鉴定实验学时：18 实验类型：综合实验要求：选修一、实验目的 1.了解真菌形态的基本特征。 2.掌握丝状真菌制片方法和真菌鉴定方法。二、实验内容采集植物样品包括叶、茎、根、花、种子或果实，然后对分离样品的内生真菌，并进行形态和分子生物学方法的鉴定。三、实验原理、方法和手段（一）实验原理根据真菌的形态特征和ITS序列等分子证据对分离到真菌进行归类和鉴定。（二）实验手段和方法 1、内生真菌分离纯化方法 1.1样品的表面消毒及预处理分别取根、茎、叶、果实，用洗涤剂在自来水下洗净。老树皮用75%酒精进行表面消毒后，用镊子取出，于酒精灯上烧灼15秒至表面焦糊，切成1×1cm2大小置于PDA固体培养基上。对于根、茎、叶、果实按下列程序进行表面消毒： 75%的酒精漂（浸）洗2-3min→无菌水冲洗4-6次→0.1%升汞不同的消毒时间（共设置7个梯度）→无菌水冲洗4-6次→用灭菌滤纸吸干多余水分→无菌刀片将材料切成小块将根、茎的表皮、韧皮部、木质部大致分开，并切成0.5×0.5cm2大小。将果实的外种皮去掉，消毒之后将内种皮去掉。灭菌时，沥干的植物材料转放到烧杯中，记好时间，倒入消毒溶液，不时用玻璃棒轻轻搅动，以促进材料各部分与消毒溶液充分接触，驱除气泡，使消毒彻

常见微生物检验项目与临床意义

微生物检验项目与临床意义卫生部规定接受抗菌药物治疗的住院患者微生物检验样本送检率不低于30%（卫办医政发〔2011〕56号）。特介绍微生物检验项目，方便统计与分析点评。细菌检验为感染性疾病诊断和治疗提供依据：目标性治疗：提高微生物的送检率与检出率，有利于诊断与使用抗菌药。经验治疗：根据本地区病原菌类型时间、区域、耐药谱等使用抗菌药。调整治疗方案针对性用药：获得准确病原菌和细菌药敏结果。细菌培养的临床意义细菌培养与其它检验项目不同，由于其样本采集易受杂菌的干扰和培养条件的限制，因而造成检测结果有时与临床不完全一致，故在分析细菌培养报告时应明白：细菌培养阴性不代表无细菌感染、细菌培养阳性不代表该菌一定是病原菌，应结合患者具体情况而定。 1、血液和骨髓培养目前血液培养仍然是菌血症和败血症的细菌学检验的基本方法，并且广泛地应用于伤寒、副伤寒及其它细菌引起的败血症的诊断。菌血症系病原菌一时性或间断地由局部进入血流，但并不在血中繁殖，无明显血液感染临床征象。常可发生在病灶感染或牙齿感染，尤以拔牙、扁桃体切除及脊髓炎手术后等多见。败血症是指病原菌侵入血流，并在其中大量生长繁殖，造成身体的严重损害，引起显著的全身症状（如不规则高热与全身中毒等症状），它多继发于组织器官感染，尤其是当机体免疫功能低下、广谱抗生素和激素的应用及烧伤等。单次的血培养结果，对临床无鉴别指导意义，应多次多部位采集血液进行培养，才可判定检出菌究竟是病原菌还是污染菌。抽血时应特别注意皮肤消毒和培养瓶口的灭菌。 2、脑脊液培养正常人的脑脊液是无菌的，故在脑脊液中检出细菌（排除操作中的污染）应视为病原菌。引起脑膜炎的细菌种类不同，化脓性脑膜炎病原菌多为脑膜炎奈瑟菌，除此之外尚有肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等。 3、尿液培养尿液细菌培养对于膀胱和肾脏感染的及早发现和病原学诊断很有价值，对于尿道、前列腺以及内外生殖器的炎症也有一定价值。尿液中出现细菌通常称为菌尿症，如果尿液本身澄清但培养出细菌，一般为标本采集时未彻底消毒尿道口引起。如果细菌培养阳性同时伴有脓尿出现，则提示有尿路感染的可能（需指出轻度感染时可无脓尿出现）。泌尿系感染常见菌为大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、变形杆菌等，除结核分枝支杆菌外，这些细菌又是尿道口常驻菌，极易引起标本留样污染，应注意鉴别。某些真菌疾病，如曲菌病在播散时也可造成肾脏感染，且尿中也能检查到。尿液的细菌学培养具有重要的诊断意义，但培养阴性并不能否定泌尿道感染，一般应注意病程、采样的时机、方法以及其它原因的影响。尿道口的消毒是中段尿细菌培养的关键步骤，是引起假阳性的最主要因素，故尿液细菌培养阳性要注意排除留样污染，如果检出菌的数量大于10万CFU/ml,则基本可认为是病原菌。 4、痰液和咽拭子标本的培养痰液及支气管分泌物的细菌学检验对于呼吸道疾病的诊断、治疗具有一定的意义。对无法咳痰的患者，用咳嗽后的咽拭子做培养检查，仍是发现致病菌的主要依据。

【优质】微生物检验试题

【优质】微生物检验试题 A型题 1、下列属非细胞型微生物的是 A 细菌 B 放线菌 C 真菌 D 病毒 E 立克次体 2、没有细胞壁的原核细胞型微生物是 A 细菌 B 放线菌 C 支原体 D 衣原体 E 立克次体 3、菌体呈矛头状且呈双排列的细菌是 A 脑膜炎奈瑟菌 B 淋病奈瑟菌 C 卡他布兰汉菌 D 微球菌 E 肺炎链球菌 4、维持细菌固有形态依靠细菌的 A 细胞壁 B 细胞膜 C 细胞质 D 荚膜 E 芽孢 5、青霉素能抑制 A 磷壁酸的形成 B 蛋白质的合成 C 肽聚糖的合成 D 核质的复制 E 脂质的的合成 6、一般认为细菌的运动器官是 A 芽孢 B 荚膜 C 鞭毛 D 菌毛 E 纤毛 7、细菌染色应用最广泛的染料是 A 中性染料 B 碱性染料 C 酸性染料 D 瑞特燃料 E 姬姆萨燃料 8、革兰染色法的染色步骤是 A 结晶紫或龙胆紫初染、碘液媒染、酒精脱色、复红或沙黄复染 B结晶紫或龙胆紫初染、酒精脱色、碘液媒染、复红或沙黄复染 C结晶紫或龙胆紫初染、酒精脱色、复红或沙黄复染 D 美蓝初染、碘液媒染、酒精脱色、复红或沙黄复染 E 复红初染、酒精脱、美蓝复染 9、用革兰染色，革兰阴性菌染成

A紫色 B 蓝色 C 红色 D 黄色 E 灰色 10、关于鉴别培养基下列那一项是正确的 A 含有细菌需要的最基本营养成分，可供大多数细菌生长 B 含有丰富的营养成分，可供营养要求较高的细菌生长 C 可选择所欲分离的细菌，而抑制其它细菌生长 D 供细菌生化反应实验，借以鉴定细菌之用 E 加有还原性物质，降低培养基的氧化还原电势 11、在临床细菌学检验中，含菌量较多的标本，如粪便，接种方法适宜用 A 平板倾注培养法 B 平板连续划线法 C 平板分段划线法 D 斜面接种法 E 半固体穿刺接种法 12、某菌为革兰阴性菌，在KIA上:分解葡萄糖和乳糖，产气，不产生HS;在MIU上:2动力阳性，吲哚阳性，脲酶阴性，在IMViC 上，，――;氧化酶阴性，触酶阳性，硝酸盐还原试验阳性。该菌是 A 大肠埃希菌 B 肺炎克雷伯菌 C 宋内志贺菌 D 小肠结肠炎耶尔森菌 E 阴沟肠杆菌 13、由单一核酸(DNA或RNA)和蛋白质外壳组成的微生物是 A 支原体 B 衣原体 C 立克次体 D 螺旋体 E 病毒 14、与细菌生化反应鉴别有关的代谢产物是A毒素 B热原质 C抗生素 D 糖代谢产物 E 细菌素 15、下述细菌结构中抵抗力最强的是 A 细胞壁 B 荚膜 C鞭毛 D 芽孢 E核糖体 16、下述哪一项是荚膜的作用, A抵抗吞噬细胞的吞噬 B 细菌的运动器官 C可传递细菌的遗传物质 D可吸附粘膜上皮细胞 E 维持细菌的形态 17、革兰阴性球菌，肾形、成双排列的细菌可能是