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安捷伦1100液相工程师现场培训资料

Agilent 1100 LC 现场培训教材

一、培训目的：

●基本了解1100LC硬件操作。

●掌握化学工作站的开机，关机，参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。

二、培训准备：

1、仪器设备：Agilent 1100LC

●G1310A :(单元泵)；G1312A(二元泵)；G1311A(四元泵)。

● G1313A（自动进样器）。(1329A)

●G1316A（柱温箱）。

●G1314A（VWD检测器）。

● G1362A（示差检测器）。

● G1315A/B (DAD检测器)。

● G1321A (FLD检测器)。

●色谱柱: Zorbax eclipse XDB C8,150mm×4.6mm i.d。

2、溶剂准备：

●色谱级纯或优级纯乙腈（ACN）或甲醇。

●二次蒸馏水

基本操作步骤:

(一)、开机：

1、打开计算机,进入Windows NT （或Windows 2000）画面,并运行Bootp Server程序。

2、打开 1100 LC 各模块电源。

3、待各模块自检完成后，双击Instrument 1 Online图标，化学工作站自动与1100LC

通讯，进入的工作站画面如下所示。

4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”，“Show status toolbar”，“System diagram”,”Sampling diagram”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。

5、把流动相放入溶剂瓶中。

6、打开Purge阀。

7、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入泵编辑画面。

8 、设Flow：5ml/min，单击OK。

9、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump control选项，选中On，单击OK，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。

10、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump Control选项，选中Off，单击Ok关泵，关闭Purge valve。

11、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入Pump编辑画面，设Flow：1.0ml/min。

12、单击泵下面的瓶图标，如图所示（以二元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的

体积。单击Ok。

（二）数据采集方法编辑：

1、开始编辑完整方法：

●从“Method”菜单中选择“Edit entire method”项，如上图所示选中除“Data analysis”

外的三项，单击Ok，进入下一画面。

2、方法信息：

●在“Method Comments”中加入方法的信息（如：方法的用途等）。

●单击Ok 进入下一画面。

3、泵参数设定：（以二元泵为例）

●在“Flow”处输入流量,如1ml/min，在“Solvent B”处输入70.0,(A=100-B) ,也可Insert 一行”Timetable” ,编辑梯度。在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。

●单击Ok进入下一画面。

4、自动进样器参数设定:

●选择合适的进样方式, 如图所示，进样体积 1.0ul ,洗瓶位臵为6号。“Standard

Injection”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。“Injection with Needle Wash”

----可以输入进样体积和洗瓶位臵，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。“Use

injector program”---可以点击Edit 键进行进样程序编辑。

●点击Ok进入下一画面。

5、柱温箱参数设定:

●在”Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击”more>>”键,如图所示,选中”Same as left”---使柱温箱的温度左右一致。

●点击ok进入下一画面。

6、VWD检测器参数设定:

●在”Wavelength”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在”Peak width (Response time)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如>0.1min (2s)。

●在Timetable中可以“Insert”一行，输入随时间切换的波长，如1min ，波长=300nm。点击ok进入下一画面。

7、DAD检测器参数设定:

●检测波长: 254nm,BW=30nm, 参比波长=350nm,BW=100nm;

●检测波长：一般选择最大吸收处的波长。样品带宽BW：一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长：一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。参比带宽BW：至少要与样品信号的带宽相等，许多情况下用100nm作为缺省值。Peak width（Response time）：其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。Slit—狭缝窄，光谱分辨率高；宽时，噪音低。同时可以输入采集光谱方式，步长，范围，阈值。选中所用的灯。

●点击Ok进入下一画面。

8、RID检测器参数设定:

●色谱条件:

进样体积: 20ul 。光学单元温度: Off 。

极性: 正。峰宽(响应时间) : 4s 。

●如图所示: “Optical Unit Temperature”---若环境温度控制在±2℃,设定为Off, 若环境温度不稳定,则设定光学单元温度为高于环境温度5度,以防样品在池中沉淀。“Peak width”---大多数分析设为4S，只有在高速分析下设为更短。“Automatic recycling after analysis”---在不进行分析时可以让流动相循环，节省流动相，检测器连续运行，可随时投入使用。

● ***** 点击RID图标，选择RID Control ：Heater 设为On，若要循环流动相，必须将“Recycling Valve”设为ON。手动purge 参比池，将其设为On，并输入Purge 时间。

9、FLD检测器参数设定:

色谱条件：

●样品：P/N 01018-68704 用甲醇稀释为1:10。

●进样体积：5ul。

●柱温箱: 30℃。 EX=246nm, EM=317nm ,PMT=10。

●响应时间=4s. 停止时间：出峰完毕。

●Excitation A:激发波长:200-700nm,步长为1nm,或Zero Order。

●Emission: 发射波长: 280-900nm, 步长为1nm,或Zero Order。

●PMT: 大多数应用适当的设定值为10,若高浓度样品峰被切平头,则减少 PMT 值。

●“Peak width”：大多数应用设为4s，只有快速分析采用小的设定值。

●Multi Ex ：多波长及光谱（激发）。

●Multi Em：多波长及光谱（发射）。

●同时可以输入范围Range、步长step、采集光谱。

10、在“ Run time checklist ”中选中“Data acquisition”，单击Ok。

11、单击“Method”菜单，选中“Save method as”，输入一方法名，如“test”，单击Ok。

12、从菜单“View”中选中”Online signal” ,选中Windows 1,然后单击Change 钮,将所要

绘图的信号移到右边的框中,点击Ok.(如同时检测二个信号,则重复12,选中Windows 2)。

13、从“Run control ”菜单中选择“Sample info”选项，如上图所示，输入操作者名

称，在“Data file ”中选择“Manual”或“Prefix”。

区别: Manual--每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖掉。Prefix—在Prefix 框中输入前缀，在Counter 框中输入计数器的起始位，仪器会自动命名，如vwd0001，vwd0002……。

14、从Instrument菜单选择System on。

15、等仪器Ready，基线平稳，从Method菜单中选择“Run method”，进样。（DAD, VWD色谱图如下所示：）

（三）、数据分析方法编辑:

1、从“View”菜单中，单击“Data analysis”进入数据分析画面。

2、从“File”菜单选择“Load signal”，选中您的数据文件名，如下图所示。单击

Ok。

3、做谱图优化,从“Graphics”菜单中选择“Signal options”选项，。从Ranges中

选择Auto scale及合适的显示时间，单击ok,或选择”Use Ranges”调整。反复

进行，直到图的比例合适为止。

4、积分:

(1)、从“Integration”中选择“Auto integrate”,如积分结果不理想,再从菜单中选择“Integration Events”选项，选择合适的Slope sensitivity，Peak width，Area reject，Height reject。

(2)、从“Integration”菜单中选择“Integrate”选项，则数据被积分。

(3)、如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。

(4)、单击左边“√”图标，将积分参数存入方法。

5、打印报告:

(1)、从“Report”菜单中选择“Specify report”选项，进入如上画面。

(2)、单击“Quantitative Results”框中Calculate右侧的黑三角，选中Percent（面积百

分比），其它选项不变。

(3)、单击Ok.

(4)、从“Report”菜单中选择“Print report”，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打

印机上，则单击Report 底部的“Print”钮。

(四)、关机:

●关机前，用 100%的水冲洗系统20分钟，然后用有机溶剂冲洗系统10分钟（如ACN），然后关泵，

（适于反相色谱柱）。[正相色谱柱用适当的溶剂冲洗]

●退出化学工作站，及其它窗口，关闭计算机（用shut down关）。

●关掉Agilent 1100电源开关。

(五)、Agilent 1100 LC维护保养：

1、色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充满溶剂，两端封死（如ACN适于反相色谱柱，正相色谱柱

用相应的有机相）

2、对于手动进样器，当使用缓冲溶液时，要用水冲洗进样口，同时搬动进样阀数次，每次数毫升。

*3、流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的蒸馏水（易长菌）。

*4、带seal-wash的 1100，要配制90%水+10%异丙醇，以每分2—3滴的速度虹吸排出，溶剂不能干涸。

5、其它主意事项见说明书，或由现场工程师介绍。

维护知识问答

1、为什么溶剂和样品要过滤?

溶剂和样品过滤非常重要，它会对色谱柱、仪器起到保护作用，消除由于污染对分析结果的影响。

色谱柱：由于填料颗粒很细，色谱柱内腔很小，溶剂和样品中的细小颗粒会使色谱柱和毛细管容易堵塞。

仪器：溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损，同时也会增加泵头内的蓝宝石活塞杆和活塞的磨损。

样品过滤头的类型：

30mm内径：适用于大进样量的过滤，由0.2μm和0.45μm两种规格,材料有纤维素,醋酸纤维,聚四氟乙烯。处理样品体积少于50μl。

13mm内径：适用于范围广的过滤，由0.2μm和0.45μm两种规格,材料为纤维素。

3mm内径：适用于小进样量的过滤，由0.2μm和0.45μm两种规格。处理样品体积为7μl。

滤膜类型：

聚四氟乙烯滤膜：适用于所有溶剂，酸和盐，并无任何可溶物。

醋酸纤维滤膜：不适用于有机溶剂，特别适用于水基溶液，推荐

用于蛋白质和其相关样品。

尼龙66滤膜：适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可用于强酸，

70%乙醇、二氯甲烷、不适用于二甲基甲酰胺。

再生纤维素滤膜：具有蛋白吸收低，同样适用水溶性样品和有机溶剂。

2、为什么HPLC用缓冲盐时要加在线Seal-wash选项？

HPLC用缓冲盐时,由于泵头内的缓冲盐溶液存在高压析盐现象,析出的细小盐粒非常坚硬,它附着在蓝宝石活塞杆上,随着蓝宝石活塞杆的往复运动,容易产生划痕,并磨损密封垫,造成漏液等故障现象。在线Seal-wash选项能有效的带走可能存在的缓冲盐结晶。缓冲盐的浓度在0.1mol或大于0.1mol时,必须使用该在线冲洗选项.

清洗液配制: 90%水+10%异丙醇.该混合液可抑制菌类生长和减小水的表面张力。以2-3滴/min的速度虹吸流下，不能干涸。

3、为什么Agilent 1100LC的流动相管路非常细?

毛细管线分类：0.17mm内径 ------绿色 ;0.12mm内径-------红色。

PEEK 管线：内径 -----0.13mm;0.18mm;0.25mm;0.5mm。

毛细管线优点: 柔韧性好.

***Agilent 公司同时备有1/16in 的粗外径毛细管线,适用于不同习惯的用户 ,优点是刚性好,但柔韧性差一些。

4、流动相使用前为什么要脱气？

流动相使用前必须进行脱气处理，以除去其中溶解的气体（如O2），以防止在洗脱过程中当流动相由色谱柱流至检测器时，因压力降低而产生气泡。气泡会增加基线的噪音，造成灵敏度下降，甚至无法分析。溶解的氧气还会导致样品中某些组份被氧化，柱中固定相发生降解而改变柱的分离性能。若用FLD，可能会造成荧光猝灭。

常用的脱气方法比较：

氦气脱气法：利用液体中氦气的溶解度比空气低，连续吹氦脱气，效果较好，但成本高。

加热回流法：效果较好，但操作复杂，且有毒性挥发污染。

抽真空脱气法：易抽走有机相。

超声脱气法：流动相放在超声波容器中，用超声波振荡10-

15min，此法效果最差。

在线真空脱气法：Agilent1100LC真空脱机利用膜渗透技术，在线脱气，智能控制，无需额外操作，成本低，脱气效果明显优于以上几种方法，并适用于多元溶剂体系。

5、如何防止溶剂瓶内溶剂过滤器的堵塞，以及堵塞后的处理？

溶剂的质量或污染以及藻类的生长会堵塞溶剂过滤器，从而影响泵的运行，尤其水溶液或磷酸盐缓冲液（PH=4—7）。以下几种方法可以有效防止溶剂瓶内溶剂过滤器的堵塞。

A：请严格执行溶剂过滤。

B：请勿使用多日存放的蒸馏水及磷酸盐缓冲液

C：如果应用许可，可在溶剂中加入0.0001---0.001M的叠氮化钠.

D:在溶剂瓶内溶剂的上方小流量连续吹氩气,以隔绝空气。

E：避免使溶剂瓶暴露在直射阳光下，尽量使用琥珀色的溶剂瓶盛放水溶液或磷酸盐缓冲液。

堵塞后的处理法方法：

将过滤头从组件中取下，在浓硝酸（35%）中浸泡1h，然后用二次蒸馏水冲洗干净并超声处理。

6、Agilent 1100LC泵如何维护？

Agilent 1100LC泵给色谱柱提供稳定、无脉动、流量准确的流动相，及时合理的维护非常重要。

A：流动相使用前请必须脱气、过滤。

B：使用缓冲盐时，要加在线Seal-wash选项。

C：关机前，用 100%的水冲洗系统20分钟，然后用有机溶剂冲洗系统10分钟（如甲醇），然后关泵，（适于反相色谱柱）。[正相色谱柱用适当的溶剂冲洗]

D：及时更换Purge Valve内的过滤芯。（当打开Purge Valve时，压力高于10bar，表明过滤芯已堵）。E：使用合适的密封圈。

7、如何选择合适的泵头活塞密封圈？

泵头活塞的标准密封圈能适合于大多数应用，但使用正相溶剂（如正己烷），不适合使用标准活塞密封圈，特别是长时间使用时，需更换另一种不同的密封圈，我们建议使用聚四氟乙烯密封圈。（p/n0905-1420 2/pk）***注意：聚四氟乙烯密封圈的压力范围为：0—200bar；建议在泵的压力限制中，将最大压力设为200bar。

8、使用梯度比例发时要注意那些事项？

当盐溶液与有机溶剂溶液混合时，盐溶液能与有机溶剂溶液完全混溶，而不会出现沉淀。但是在比例阀的混合点，重力作用使盐颗粒沉淀下来，通常，阀A接水相/盐溶液，D接有机溶剂，此法连接可有效使盐回落到盐溶液中，并被溶解。若颠倒过来，盐可能落在有机溶剂中，出现问题。

强烈建议：当使用缓冲盐溶液和有机溶剂时，推荐将缓冲盐通道接在A通道上，有机溶剂通道直接接在A通道的上方D通道上；定期用水冲洗所有的通道，以除去阀口上可能出现的盐沉淀。

9、在线真空脱气机使用要注意那些事项？

一般来说，Agilent 1100LC 的真空脱气机无需过多维护，只需注意几个注意事项就可以了。

A：第一次使用，要用随仪器附带的注射器抽满脱气机腔体；更换不同类型的溶剂时，要先抽空，再抽满。B：不用的通道要充满溶剂或密闭起来。

10、更换色谱柱时要注意什么事项?

在使用HPLC时,应特别注意”柱外效应”对分析结果的影响，由于样品分子在液体流动相中的扩散系数比在气体中小4~5个数量级，液体流动相的流速也比气相慢1-2个数量级。因此，样品进入色谱柱后，在柱子以外的任何死体积（进样器、柱接头、连接管、检测器）中，样品分子的扩散和滞留，都会引起色谱峰的展宽，而使柱效降低。为使柱外效应减之最小，获得理想的分析结果，仪器的流动相管路连接非常重要,一般Agilent 1100LC 在第一次安装时,均有受过专业培训的安装工程师负责安装,各种接头会处理的非常完美。客户只需在更换色谱柱时注意接头处理就可以了，一般柱子入口接头为不锈钢卡套接头，柱子出口为不锈钢卡套接头或PEEK管线手拧街头，当完成第一次安张后，不锈钢卡套已固定死，当接不同的柱子时，要注意柱子接头处的形状和长度，否则会产生一个非常大的死体积。

下面是不同厂家柱子接头的形状和长度，请参考：

11、手动进样阀需做那些维护，使用时要注意什么？

对于手动进样器，当使用缓冲溶液后，或者进浓度差异比较大的样品时要用专用工具而不是用带针头的注射器冲洗进样口，同时搬动进样阀数次，每次数毫升。

注意事项：

●安装时六通阀的5，6出口要与注射器在同一水平线上，以防止虹吸现象的发生，导致进样

量的重复性变异。

●进样量的多少要根据定量管的LOOP体积决定。

当样品量少时：进样体积由注射器的进样体积决定，但最大进样体积要小于1/2loop体积。

当样品量较多时：进样体积由定量管的体积决定，为保证样品完全把定量管的流动相臵换干净，需注射5—6倍的LOOP体积。

●C：要使用专用的液相注射器进样，绝对不可以用气相的注射器。

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作 1. 目的：明确安捷伦高效液相色谱仪的规范操作，确保数据的准确性。 2. 范围：适用于安捷伦高效液相色谱仪。 3. 职责：检验人员对此负责。 4.操作规程：系统组成本系统由1个溶剂二元输送泵（分主/A泵和副/B泵）、手动进样阀、柱温箱、检测器、化学工作站和电脑等组成。准备 4.2.1使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相，用合适的μm滤膜过滤，超声脱气20min。 4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。 4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的μm滤膜过滤。 4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常将待测样品按要求前处理，准备HPLC 所需流动相，检查线路是否连接完好，废液瓶是否够用等。开机： 4.3.1 打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序。4.3.2 打开1200 LC 各模块电源。 4.3.3 待各模块自检完成后，双击[Instrument 1 Online]图标，化学工作站自动与1200LC 通讯，进入的工作站画面如下所示。 4.3.4 从[视图]菜单中选择[方法和运行控制]画面, 点击[视图]菜单中的[显示顶部工具栏]，[ 显示状态工具栏]，[系统视图],[样品视图]，使其命令前有[√]标志，来调用所需的界面。 4.3.5 把流动相放入溶剂瓶中。

4.3.6 打开冲洗阀。 4.3.7 点击[泵]图标，点击[设置泵…]选项，进入泵编辑画面。 4.3.8 设流速：5ml/min，点击[确定]。 4.3.9 点击[泵] 图标，点击[控制…]选项，选中[启动]，点击[确定] ，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。 4.3.10 点击[泵] 图标，点击[控制…]选项，选中[关闭]，点击[确定]关泵，关闭冲洗阀。 4.3.11 点击[泵]图标，点击[设置泵…选项]，设流速：min。 4.3.12 点击泵下面的瓶图标，如下图所示（以单元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积，点击[确定]。数据采集方法编辑 4.4.1开始编辑完整方法：从[方法]菜单中选择[编辑完整方法…] 项，如下图所示选中除[数据分析]外的三项，点击[确定]，进入下一画面。 4.4.2方法信息 4.4.2.1在[方法注释]中加入方法的信息（如：测试方法）。 4.4.2.2 点击[确定]，进入下一画面。 4.4.3 泵参数设定 4.4.3.1 在[流速]处输入流量,如1ml/min，在[溶剂B]处输入,(A=100-B) ,也可[插入]一行[时间表] ,编辑梯度。在[压力限]处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。 4.4.3.2 点击[确定]，进入下一画面。 4.4.4 柱温箱参数设定 4.4.4.1 在[温度]下面的空白方框内输入所需温度,如：40度。并选中它,点击[更多>>] 键,如图所示,选中[与左侧相同]，使柱温箱的温度左右一致。 4.4.4.2 点击[确定]，进入下一画面。 4.4.5 检测器参数设定：检测波长：一般选择最大吸收处的波长。样品带宽：一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长：一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。参比带宽：至少要与样品信号的带宽相等，许多情况下用100nm作为缺省

安捷伦1260操作规程全新

安捷伦1260液相操作规程一、开机 1)打开计算机，登陆windows操作系统。 2)打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标,进入化学工作站，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。 3)把各流动相放入溶剂瓶中。 4)旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击 “方法”选项进入泵编辑画面。将泵流量设到5ml/min，溶剂A 设到100%，打开泵，排出管线中的气体2—3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力（若大于10bar，则应更换排气阀内过滤白头）。 5)依此切换到B、C、D溶剂分别排气。 6)将泵的流量设到0.5ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=80%， B=20%；关闭排气阀（顺时针）。 7)再将泵的流量设到0.8ml/min，2分钟后将泵的流量设到1ml/min，冲洗色谱柱20—30分钟。

8)把缓冲液换成流动相，待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯，观察基线情况。二、数据采集方法编辑 1)编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样品数据文件名等。 2)编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项.选中项单击“确定”入下一画面“方法注释”，编辑好单击“确定” 进入下一画面“选择进样源”，选中Als单击“确定”入下一画面“设置方法”进行参数设定。 3)四元泵参数设定：在“流速”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂” 处选中B输入80%(A=100-B-C-D)，在右面注释栏中标明各溶剂的名称；设置“停止时间”和“后运行时间”，在“压力限值” 处输入柱子的最大耐高压以保护柱子如：250bar，在“时间表” 添加编辑梯度。 4)进样器参数设定：在进样模式中输入进样量xxul。“标准进针” ——只能输入进样体积此方式无洗针功能。“针清洗后进样” ——可以输入进样体积和洗瓶位置为xx，此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针。 5)进样器进样程序参数设定：选中使用进样程序，在“函数”中添加相应函数即可按程序进样。

Agilent 1200高效液相色谱培训材料使用说明书

Agilent 1200 LC [Agilent Chemstation B.04.02 Classic (中文)] 现场培训教材安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部

一、目录二、培训目的 (3) 三、培训准备 (3) 1. 仪器准备 (3) 2. 溶剂准备 (3) 四、方法建立 (3) 1. 开机准备 (3) 2. 数据采集方法编辑 (5) 9 G1310A(单元泵) (5) 9 G1312A，G1312B XL(二元泵)/G1311A(四元泵)： (7) 9 G1313A(标准型自动进样器)，G1329A/B(自动控温自动进样器) (8) 9 G1367B/C/D(高性能自动进样器) (9) 9 G1328A(手动进样器) (11) 9 G1316A,G1316B XL(柱温箱) (11) 9 G1314A/B/D/E,G1314C XL(可变波长紫外检测器) (13) 9 G1315B/D ,G1315C XL(二极管阵列检测器)/ G1365B/D ,G1365C XL(多波长紫外检测器) (15) 9 G1362A(示差检测器) (17) 9 G1321A(荧光检测器) (19) 9 G4218A(蒸发光散射检测器) (23) 3. 数据分析方法编辑 (25) 9 谱图优化 (25) 9 积分参数优化 (25) 9 校正 (27) 9 打印报告 (28) 9 光谱 (29) 4. 建立全新完整方法向导 (31) 9 新建完整方法： (32) 9 保存方法： (36)

9 保存即时改变的方法 (36) 9 调用方法： (36) 5. 进样 (36) 9 单针进样 (36) 9 序列进样 (37) 五、关机 (37) 1. 关闭检测器的灯 (41) 2. 冲洗系统 (41) 3. 封存色谱柱 (41) 4. 关闭电脑 (41) 5. 关闭模块 (41) 六、 RRLC(快速液相)注意事项 (41) 七、 Agilent 1200保养维护 (43) 八、 Agilent 1200常见问题解决方法 (45)

Agilent-1290-超高效液相色谱仪标准操作规程

Agilent 1290 超高效液相色谱仪标准操作规程一、目的制定Agilent 1290超高效液相色谱仪使用操作规程，确保操作人员能正确规范地操作液相色谱仪。二、范围适用于Agilent1290超高效液相色谱仪的使用。三、操作规程 1 开机 1.1 打开计算机，进入 Windows画面。 1.2 打开 1290INFINITY HPLC 各模块电源。 1.3 待各模块自检完成后，双击“Instrument 1 Online”图标，化学工作站自动与 12001290INFINITY HPLC 通讯。 1.4 从“View”菜单中选择“方法和运行控制”画面，点击”视图”菜单中的“样品视图 “系统视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。 1.5 点击泵下面的瓶图标，选择‘瓶填充‘如下图所示，输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积。点击“Ok”。 1.6 从菜单“视图”中，选中“在线信号”，选中“信号窗口 1”，然后点击“改变…”钮，将所要绘图的信号移到右边的框中，点击“确定”。(如同时检测二个信号，则重复选中“信号窗口 2”) 2 排气 2.1 首先在方法编辑中，泵的参数设置部分，选好需要排空的通道（保证是开的） 2.2 点击仪器状态视图中泵的图标，选择控制，出现如下图 2.3 勾上吹扫，并且输入流速，时间，比例就可以 purge 泵头。排空的时候阀会自动切换，无需人为介入。 2.4 当我们发现泵头里面有气泡出不来的时候，选择预备---开。然后点击确定。此时泵会用很强烈的方式朝外泵液体，并持续 20 次自动停止。 3 编辑数据采集方法 3.1 开始编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法…”项，如下图所示选中除“数据分析”外

安捷伦1100技术资料

一、产品介绍安捷伦1100 液相色谱仪安捷伦LC1100液相色谱仪是安捷伦公司研发的一款色谱仪，原产地是美国。自1996年间世以来，在全球已安装超过130,000台1100组件和55,000多套化学工作站数据处理系统，是目前单一型号市场占有率最高的液相色谱系统。二、仪器配置 1.四元泵 2.脱气机 3.自动进样器 4.柱温箱 5.VWD紫外检测器三、技术参数： Agilent 1100泵系统 ● 电子流控阀(EFC)控制的毛细液相泵系统，精度高、流速范围广柱流速范围：1-20ul/min;10-100ul/min（可选件）

0.001-2.5m1/min(EFC关闭状态) ● 高压制备泵系统，单元或双元高压制备泵流速范围:0.001-100m1/min ● 分析型泵系统流速范围：单元泵：0.001-10m1/min 二元泵：0.001-5m1/min 四元泵：0.001-10m1/min 品种齐全的Agilent 1100系列进样系统 ● 标准手动进样器（分析型或制备型） ● 标准自动进样器样品瓶容量：可达100个(2mlx100) 进样量：0.1-100ul(0.1-1800ul)可选件 ● 微盘式自动进样器样品瓶容量：2x96(孔板)，2x386(孔板)或100x2ml

进样量：0.1-100ul(标准件) 0.1-1500ul可选件 ● 微量标准自动进样器/微盘式自动进样器进样量：0.01-8ul（标准）;0.01-40ul（可选） ● 恒温标准自动进样器/微盘式自动进样器温度范围：4-40℃可设定步进1℃ ● 220型微孔板式自动进样器－组合化学样品管理系统样品瓶容量：各种规格试管多达12个微孔板（96孔板,384孔板）进样量：0.1-5ul;0.1-20ul Agilent 1100系列检测器 ● 可变波长扫描紫外检测器（VWD) 波长范围：190?600nm ● 多波长检测器(MWD) 波长范围：190?950nm（双灯源） ● 二极管阵列检测器(DAD)

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程资料

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、开机（1）打开计算机，登陆windows操作系统。（2）打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，从视图菜单中选择“方法和运行控制”画面。（3）进行仪器配置，点仪器-仪器配置-选择所需模块-自动配置-输入IP地址：192.168.254.11。把各流动相放入相应的溶剂瓶中。（4）编辑方法。方法-新建方法-方法-编辑完整方法-编辑各项（四元泵、TCC、VWD、仪器曲线参数设定，仪器参数默认），完成后，文件→方法另存为→编辑名称，保存方法。（5）排气。旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”设置泵流速，排气可设置1.2ml/min，l流量梯度100，也可 5ml/min，流量梯度10。一般冲洗3-5min，注意倾斜储液瓶使过滤头处的气体进入管道才可使气体排出，观察管路中气体位置，以其排净为目的。关泵，关闭排气阀（顺时针）。（注意：先开排气阀，再开泵，先关泵，后关排气阀）。（6）在让液体进入柱子之前应将甁填充设置为实际值，谨防空进。将泵流速设置1ml/min,用过渡液即缓冲液冲洗色谱柱20—30分钟。（7）换流动相，待柱前压力基本稳定后，打开检测器，视图，在线信号，选择信号，观察基线情况。二、数据采集信息编辑及进样

（1）编辑样品信息：点“单次样品”小瓶，或点击运行信息-单次进样，设定操作者姓名，样品数据文件名，进样量等。（2）编辑好样品信息后方可进样。三、数据处理（1）打开桌面“仪器1脱机”，单击“数据分析”进入数据分析画面。（2）从“文件”菜单中选择调用信号，选择您的数据文件名，单击确定。（3）谱图优化。从“图形”菜单中选择“信号选项”从范围中选择“自动量程”及合适的显示时间，或选择“自定义量程”调整，反复进行，直到图比例合适为止。（4）积分。从“积分”中选择“自动积分”，若积分结果不理想，从菜单中选“积分事件”，更改数据为合适的“斜率灵敏度、峰宽、最小峰面积、最小峰高”，从“积分”中选择积分选项，则数据被积分，如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到满意为止。单击左边图标将积分参数存入方法。（5）校正表设计。点击“校正”菜单中的“校正设置”给出各个参数，点击确定，调出建立校正表所需的谱图并对谱图进行图形优化和积分优化。点击校正→新建校正表，选择自动设定→确定，在校正表中给出正确的“化合物名”和“含量”如需增加校正点数，校正→添加级别，给出第二校正点的含量，以此类推。校正表建立完成后点击“确定”点击“保存图标”将校正表存入方法中，或点击文件-方法另存为-找到对应文件夹，编辑日期及前缀存入。

Agilent1100操作方法分解

高效液相色谱知识收藏 Agilent1100高压液相色谱仪基本操作步骤Agilent1100液相基本操作步骤Agilent1100高压液相色谱仪维护保养知识保养事项：高压液相色谱HPLC常见故障及排除方法液相色谱柱使用及保养高压液相色谱HPLC培训教程(一) 高压液相色谱HPLC培训教程(七) 高效液相色谱仪中反相HPLC柱子的清洁和再生 HPLC对流动相的基本要求高效液相色谱 Waters 600E-2487 HPLC系统SOPWaters高效液相色谱系统操作规程高效液相色谱仪(Agilent 1100)操作注意事项色谱扫盲班

Agilent1100高压液相色谱仪基本操作步骤Agilent1100液相基本操作步骤 (一)、开机： 1、打开计算机,进入Windows NT （或Windows 2000）画面,并运行Bootp Server程序。 2、打开 1100 LC 各模块电源。 3、待各模块自检完成后，双击Instrument 1 Online图标，化学工作站自动与1100LC 通讯，进入的工作站画面。 4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”，“Show status toolbar”，“System diagram”,”Sampling diagram”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。 5、把流动相放入溶剂瓶中。 6、打开Purge阀。 7、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入泵编辑画面。 8 、设Flow：5ml/min，单击OK。 9、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump control选项，选中On，单击OK，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。 10、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump Control选项，选中Off，单击Ok 关泵，关闭Purge valve。 11、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入Pump编辑画面，设Flow：1.0ml/min。 12、单击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积。单击Ok。（二）数据采集方法编辑： 1、开始编辑完整方法： ●从“Method”菜单中选择“Edit entire method”项，如上图所示选中除“Data analysis ”外的三项，单击Ok，进入下一画面。 2、方法信息： ●在“Method Comments”中加入方法的信息（如：方法的用途等）。 ●单击Ok 进入下一画面。 3、泵参数设定：（以二元泵为例） ●在“Flow”处输入流量,如1ml/min，在“Solvent B”处输入70.0,(A=100-B) ,也可Insert 一行”Timetable” ,编辑梯度。在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。 ●单击Ok进入下一画面。 4、自动进样器参数设定: ●选择合适的进样方式, 进样体积 1.0ul ,洗瓶位置为6号。“Standard Injection”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。“Injection with Needle Wash”----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。“Use injector program”---可以点击Edit 键进行进样程序编辑。 ●点击Ok进入下一画面。 5、柱温箱参数设定: ●在”Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击”more>>”键,如图所示,选中”Same as left”---使柱温箱的温度左右一致。 ●点击ok进入下一画面。

Agilent 1200高效液相色谱仪标准操作程序

Agilent 1200高效液相色谱仪标准操作程序 1.目的使操作人员的操作步骤规范化。 2.适用范围适用于仪器安装、调试、校准后正常状态下进行的操作。 3.责任者质控科仪器分析员对此规程负责。 4.规程 4.1清洗液、流动相、封柱液预处理 4.1.1所有清洗液、流动相、封柱液在使用前均需过滤、脱气以及混合均匀。 4.1.2甲醇-水（10：90）、乙腈-水（10：90）、超净水、乙腈均需存放在棕色溶剂瓶中。 4.1.3含有乙腈的溶液以及不含乙腈但含有较高比例的其他有机溶剂的溶液在过滤时需使用有机相微孔滤膜，其它溶液在过滤时需使用水相微孔滤膜。 4.1.4存放清洗液、流动相、封柱液的溶剂瓶在每次装入溶液前需用少量过滤好的该溶液清洗数次。 4.2接通电源,开启连机电脑,再接通仪器电源,仪器自检完毕，处于准备进行状态。双击桌面图标“仪器1联机”，打开Agilent 1200化学工作站，在左上角下拉框中选择“方法与运行控制”界面。显示如下

图标：注意：一定要先双击“仪器1联机”图标，进入联机状态，方可双击“仪器1脱机”图标，同时进入脱机界面。否则，将无法联机。 4.2泵 4.2.1 准备清洗液并装入溶剂瓶中，将吸滤器放入瓶内。安装所需用柱子。 4.2.3 将吹扫阀（即“Purge”阀）打开，单击泵图标，选择“设置泵”，将“流速”设置为3.00ml/min。选择清洗液所在通道（建议为A通道），单击“确定”，在“系统视图”中单击“启动”运行泵，泵运行10分钟后，观察压力，应小于10bar，若大于此压力，应更换purge阀滤芯，调节流速1.00ml/min。 4.2.4关闭purge阀，观察柱压是否正常。

Agilent1100高效液相色谱仪操作规程

Agilent1100高效液相色谱仪操作规程操作说明： 1.开机前准备： 1.1仪器设备：Agilent 1200LC ● G1322A (在线脱气机)。 ● G1311A (四元泵)。 ● G1329A（标准型自动进样器）。 ● G1316A（柱温箱）。 ● G1315A（DAD检测器）。 ●色谱柱 1.2溶剂准备： ●有机相必须是色谱级纯。 ●水相必须是二次蒸馏水或用二级蒸馏水配置的缓冲盐溶液、酸碱溶液。 ●流动相使用前必须过0.45μm的微孔滤膜。有机相和水相微孔滤膜的选择参考下表。

2.基本操作步骤: (一)、开机： 1、打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序（部分安装程序不需要运行Bootp）。 2、打开 1200 LC 各模块电源。 3、待各模块自检完成后，双击“仪器1 联机”图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。 4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击“视图”

菜单中的“仪器实际值”，“在线光谱”，“化学工作站状态”，“系统视图”,“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。 5、把流动相放入溶剂瓶中。 6、打开冲洗阀。 7、点击“泵”图标，点击“设置泵…”选项，进入泵编辑画面。 8 、设流速：5ml/min，点击“确定”。 9、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“启动”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。 10、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“关闭”，点击“确定”关泵，关闭冲洗阀。 11、点击“泵”图标，点击“设置泵…选项”，设流速：例如1.0ml/min。 12、点击泵下面的瓶图标，如下图所示（以单元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积，点击“确定”。

安捷伦1200液相色谱操作规程

1 目的：建立一个安捷伦1200高效液相色谱仪标准操作程序。 2 范围：本规程适用于安捷伦1200高效液相色谱仪的操作。 3 责任：相关操作人员。 4 程序： 4.1 原则与定义 4.1.1高效液相色谱法是将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液为流动相，用高压泵将流动相压入装有填充剂的色谱柱，注入供试品，经流动相带入柱内，在填充剂上分离后，各组分先后进入检测器，用记录仪记录色谱图，各供试品谱图与标准或对照品谱图比对，经一定的数据处理进行化合物的定性和定量分析。 4.1.2 除另有规定者外，都应按现行版《中国药典》附录（高效液相色谱法）的要求测定。 4.2 仪器及用具 4.2.1 安捷伦1200高效液相色谱仪系统 4.2.2 DAD紫外检测器 4.2.3 色谱柱 4.2.4 色谱工作站 4.2.5 溶剂过滤系统 4.2.6 样品过滤系统 4.2.7 其他用具和试剂应符合现行版《中国药典》规定或仪器说明书上指明的要求。 4.3 准备工作 4.3.1流动相临用前过滤并脱气。 4.3.2供试品溶液和标准品(或对照品)溶液应按药品标准中有关规定配制过滤。 4.4 操作方法 4.4.1 开机准备好流动相并安装色谱柱。依次打开仪器各部件电源开关（在线脱气机、输液泵、自动进样器、柱温箱、检测器等），约15min 后，仪器进入待机状态，此时仪器各部件指示灯应无色或呈黄色。计算机进入工作站的操作页面。色谱条件的设定,当色谱参数设置完成后，单击工作站流程图右下角的【on】，仪器开始运行。 4.4.2 样品测定 4.4.3 分析报告的打印 4.4.4 关机，分析结束后，按规定程序彻底冲洗色谱柱及所用的仪器流路。4.4.5 实验结束工作 4.4.6 全部分析工作结束后，依次关闭电脑、检测器、电源开关。 4.4.7 泵流量调到零，关闭泵电源。 4.4.8 仪器参数设定及操作方法同药典仪器操作规程安捷伦1100。

Agilent-1100高效液相色谱工作站基本操作说明

Agilent 1100型HPLC操作规程一、开机 1、开机前准备：流动相使用前必须过0.45um的滤膜（有机相的流动相必须为色谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。A瓶：为水相；B瓶：为有机相。 2、打开电脑，选Windows 2000，进入Windows 2000界面。 3、双击CAG Boodp server图标，放大CAG Boodp server小图标，出现窗口，5分钟内打开液相各部件电源开关，等待1100广播信息后，表示通讯成功连接，关闭CAG Boodp server窗口。 4、双击online图标，仪器自检，进入工作站。该页面主要由以下几部分组成： ——最上方为命令栏，依次为File，Run Control，Instrumen…等； ——命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等； ——中部为工作站各部件的工作流程示意图；依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告； ——中下部为动态监测信号； ——右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。 4、从“View”菜单中选择“Method and Control”画面。二、编辑参数及方法 1、开始编辑完整方法：从“Method”菜单中选择“New method”，出现DEF-LC.M，从“Method”菜单中选择“Edit entire method”，选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项，单击“OK”，进入下一画面。 2、方法信息：在“Method Comments”中加入方法的信息，如方法的用途等。单击OK，进入下一画面。 3、泵参数设定：进入“Setup pump”画面，在“Flow”处输入流量，如1ml/min；在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0，（A=100-B），也可在Insert 一行“Timetable”，

(完整版)Agilent1260液相色谱系统操作规程

1目的规范Agile nt 1260系列高效液相色谱的日常使用和维护保养，保证仪器的正常运转，确保检测工作的顺利进行。 2适用范围适用于Agile nt 1260系列高效液相色谱系统的日常使用和维护。 3职责实验室分析人员负责Agile nt 1260系列高效液相色谱系统的日常使用和维护。 4系统组成 4.1 Agile nt 1260 系列四元泵（G1311C）和脱气机； 4.2可变波长紫外检测器（VWD G1314F ； 4.3 Chemstation A.01.04 色谱工作站 4.4国产柱温箱（AT-550）色谱柱； 4.5电脑、打印机等辅助设备。 5定义无 6操作程序 6.1开机前的准备 6.1.1检查仪器校验标识，确认仪器处于校验周期内。 6.1.2检查上次《实验室仪器设备使用记录表》和仪器状态，确认仪器处于正常状态； 6.1.3流动相的制备： 6.1.3.1按《高效液相色谱法流动相配制标准操作规程》配制需要的流动相。 6.1.3.2用前超声脱气（一般10?20min）。 6.1.4更换流动相： 6.1.4.1将泵的吸滤器从旧流动相中取出，用新流动相冲洗后放入新流动相的储液瓶中，并盖好瓶盖； 6.1.4.2将排液管的出口端放入废液瓶中，并盖好瓶盖。 6.1.5供试溶液的配制：

6.1.5.1供试品用规定溶剂配制成供试品溶液。 6.1.5.2定量测定时，对照品溶液和供试品溶液均应分别配制 2份。 6.1.5.2如有必要，样品需预处理，如过滤等，以免对色谱系统产生污染和色谱干扰。 6.1.6选择色谱柱： 6.1.6.1根据待检供试品的检测方法确定所需的色谱柱； 6.1.6.2检查仪器上安装的色谱柱是否与其相同，若不同则需进行更换。 6.1.7更换色谱柱 6.1. 7.1拆卸原色谱柱：先握住色谱柱，再松动色谱柱出口端螺帽，取下出口端的管线；松动色谱柱入口端螺帽，取下入口端的管线；用止动塞将色谱柱的进出口塞住拧紧后，将色谱柱放回原专用包装盒内 6.1. 7.2安装新色谱柱：从专用包装盒内取出色谱柱，松动并取下色谱柱出入口的止动塞；将与进样器相连的管线一端插入色谱柱入口端，拧紧螺帽；（注意：安装时色谱柱上的流向标志应与管路的流动相流向一致。）将与检测器相连的管线一端插入色谱柱出口端，拧紧螺帽。 6.2开机 6.2.1通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。 6.2.2接通电源，打开计算机和打印机开关 6.2.3等待计算机自检完毕后，进入 Windows 桌面，依次打开泵、进样器、检测器各模块电源。打开柱温箱开关。 6.2.4待各模块自检完成后，点击 6.2.5确定仪器与工作站已连接，若未连接，需关闭工作站，重新连接。注意必须先打开检测器, 再连接工作站。 6.2.6从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面，也可单击工作站画面左侧的“方法和运行控制”项，进入方法和运行控制窗口。 6.3 操作 6.3.1泵的开启和设置 6.3.1.1打开Purge 阀（逆时针），右键点击四元泵下面的空白处，选择“方法”选项，进入泵编辑画面。 Win dows 桌面 lc ”图标进入化学工作站画面

安捷伦1260液相操作规程

安捷伦1260高效液相操作规程及注意事项一开机 1)打开主机各模块电源（从下至上），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器2联机”图标,进入化学工作站， 2)把过滤白头放入流动相溶剂瓶中。 3)旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法” 选项进入泵编辑画面。将泵流量从1mL/min梯度上升至5mL/min，排出管路中的气体2—3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力（若大于10bar，则应更换排气阀内过滤白头），关闭排气阀。 4)重复上述步骤，依此切换到B、C、D溶剂分别排气。 5)将泵的流量设到实验用流速，按照色谱柱使用说明用相应溶液冲洗色谱柱 20—30分钟。 6)点击四元泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，点击“确定”。 7)把缓冲液换成流动相，待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯，观察基线情况，进入平衡系统。二数据采集方法编辑若已创建方法，可在“方法”菜单选择“调用方法”，选择相应的方法。若无，需按下面步骤建立：（1）从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”，钩选“方法信息”、“仪器/采集”、“运行时选项表”三项，点击确定；（2）出现“方法信息”对话框，如有需要可将方法的描述信息输入，也可选择不输入任何信息，点击确定；（3）泵参数设定：在“流量”处输入流量,如1ml/min，在“溶剂 B”处输入80.0,(A=100-B-C-D) ,也可“插入”一行“时间表”,编辑梯度。在“压力限”处输入柱子的最大耐高压,如300bar，以保护柱子。点击“确定”进入下一参数设定。（4）柱温箱参数设定：手动输入规定的温度即可。（5）紫外检测器（VWD）参数设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm，在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式箭头,选择合适的响应时间, 如>0.1min(2s)。在“时间表”中可以“插入”一行，输入随时间切换的波长，如1min，波长=300nm。点击“确定”，进入下一参数设定。（6）在“运行时选项表”中选中“数据采集”，点击“确定”。（7）完整方法编辑完毕。点击“方法”菜单，选中“方法另存为…”，输入一方法名称，点击“确定”。（8）运行样品：从菜单“视图”中选中“在线信号”,选中“信号窗口1”,然后点击“改变…”钮,将所要绘图的信号移到右边的框中,点击“确定”。从“运行控制”菜单中选择“样品信息”选项，输入操作者名称；在“数据文件”中选择“手动”或“前缀/计数器”。（区别:手动--每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖掉。Pr—在前缀/计数器----“前缀”框中输入前缀，在“计数器”框中输入计数器的起始位，仪器会自动命名，如vwd数据0001，vwd数据0002……）点击“确定”，从“仪器”菜单选择“系统开启”。三数据处理

高效液相色谱仪(Agilent 1100型)操作步骤

一、开机 1、开机前准备：流动相使用前必须过0.45um的滤膜（有机相的流动相必须为色谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。A瓶：为水相；B瓶：为有机相。 2、打开电脑，选Win 2000，进入Win 2000界面。 3、双击CAG Boodp server图标，放大CAG Boodp server小图标，出现窗口，5min内打开液相各部件电源开关，等待1100广播信息后，表示通讯成功连接，关闭CAG Boodp serve窗口。 4、双击online图标，仪器自检，进入工作站。该页面主要由以下几部分组成： ——最上方为命令栏，依次为File，Run Control，Instrumen…等； ——命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等； ——中部为工作站各部件的工作流程示意图；依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告； ——中下部为动态监测信号； ——右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。 4、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。二、编辑参数及方法 1、开始编辑完整方法：从“Method”菜单中选择“New method”，出现DEF-LC.M，从“Method”菜单中选择“Edit entire method”，选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项，单击OK，进入下一画面。 2、方法信息：在“Method Comments”中加入方法的信息，如方法的用途等。单击OK，进入下一画面。 3、泵参数设定：进入“Setup pump”画面，在“Flow” 处输入流量，如1ml/min；在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0，（A=100-B），也可在Insert 一行“Timetable”，编辑梯度；输入保留时间；在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。单击OK，进入下一画面。 4、DAD检测器参数设定：进入“DAD signals”画面，输入样品波长及其带宽、参比波长及其带宽（参比波长带宽默认值为100nm）；选择Stoptime：as Pupm；在“Spectrum”中输入采集光谱方式“store”：选All；如只进行正常检测，则可选None；范围Range：可选范围为190~950nm；步长Step可选2.0nm；阀值：选择需要的灯； Peak width（Response time）即响应值应尽可能接近要测的窄峰峰宽，可选“2s”或4s； Slit-：狭窄缝，光谱分辨率高；宽时，噪音低。可选4nm

安捷伦1100操作规程

安捷伦1100高效液相色谱仪操作规程 1、操作前的准备流动相的配制，流动相应用0.22μm或0.45μm的滤膜过滤，超声。 2、仪器的操作 2.1接通电源，打开电脑，双击桌面上的“仪器1联机”，进入工作站；单击菜单栏中的“运行控制”选择“样品信息”输入“操作者姓名”或者单击菜单栏中的“序列”选择“序列参数”中输入“操作者姓名”；将A、B、C、D四个通道的溶剂量设置好。 2.2排气逆时针旋松排空阀，将流速设为5ml/min，四个通道逐个进行排液，排液至整个管路没有气泡为止。 2.3首选项的设置单击菜单栏中的“视图”选择“全部菜单”，再单击菜单栏中的“视图”选择“首选项”，在“路径”选项卡中分别设定“序列路径”、“数据路径”、“方法路径”，（具体操作时只要单击“添加”后选择相应的路径即可）单击“确定”。 2.4编辑仪器方法 2.4.1单击“方法”选择“编辑完整方法”，根据需要钩选项目，“方法信息”，“仪器/采集”，“数据分析”，“运行时选项表”，单击“确定”。 2.4.2 出现“方法信息”窗口，如有需要输入方法信息（方法用途等），单击“确定”。 2.4.3出现“设置泵”窗口，根据方法需要设置“流速”、“停止时间”、“流动相比例”，将压力上限设为400bar，单击“确定”。 2.4.4出现“设置进样器”窗口，根据需要选择进样方法“标准进样”、“洗针进样”、“使用进样程序进样”（一般选择“标准进样”），输入相应的“进样量”，单击“确定”。 2.4.5出现“柱温箱温控方法”，输入“柱温”或“不控制”，单击“确定”。 2.4.6出现“VWD信号”窗口，输入所要的检测波长，单击“确定”。 2.4.7出现“信号细节”窗口，单击“确定”。 2.4.8出现“编辑积分事件”窗口，单击“确定”。 2.4.9出现“报告设定”窗口，选择所需的“报告格式”，“信号选项”中设定好图谱的量程，单击“确定”。 2.4.10出现“仪器曲线”窗口，单击“确定”。 2.4.11出现“运行时选项表”，根据需要设定相关的参数，一般在设定方法时，只要单击“确定”即可。（若遇到编辑冲柱方法时，“运行前命令/宏”设为“LAMPALL

安捷伦1100及安捷伦1200高效液相色谱仪泵的日常维护

安捷伦1100及1200液相泵的日常维护安捷伦, 液相, 日常, 维护安捷伦1100及1200液相泵的日常维护泵是液相色谱的核心，泵将流动相从溶剂瓶输送到液相流路系统中，并要在高压下保持流量和压力的稳定。泵的状态正常是液相色谱准确分析的基础，所以平日一定要重视对泵的维护。下面就安捷伦1100/1200液相色谱泵的日常维护进行简要的介绍。 1. 流动相的准备为了防止颗粒性物质对泵组件的磨损，流动相（特别是水相）应该新鲜配置并且过滤。上机前对流动相进行适当的超声脱气，以保证更好的在线脱气和在线混合的效果。 2.比例阀溶剂通道的分配四元泵的比例阀有A、B、C、D四个通道，建议将盐溶液接在下面的通道（A或D），将有机溶剂接在上面的通道（B 或C）上,也就是有机通道最好在盐溶液通道的上面。且建议用水定期冲洗所有比例阀通道除去可能在阀口析出的盐结晶。 3．过滤白头的维护过滤白头位于排气阀内，是一种聚四氟乙烯材质的微孔过滤芯，用于过滤流动相中的微粒，是经常需要维护的地方。当系统压力有异常增高时，首先需要检查过滤白头是否阻塞了。判断的方法是：打开排气阀，以纯水作流动相，将流速设为5mL/min，如果泵压超过10bar，则说明过滤白头需要更换了。对过滤白头的预防性维护通常可以是1~2个月更换1次，更换时同时检查一下过滤白头前面的密封金垫，如果发现变形，也应及时更换。如果过滤白头更换过于频繁，则需要认真检查一下流动相的品质，确保流动相上机前过滤，确保使用了合适的过滤膜。如果流动相有长菌现象，除了配置新的溶剂，还应对相应的溶剂管线和脱气机通道进行彻底的清洗。 4．柱塞杆与柱塞密封圈的维护柱塞密封圈套在柱塞杆上用于隔离泵与外界，工作时，它和柱塞杆进行频繁的往复摩擦，使用一段时间后，会有一定的磨损，因而密封圈需要定期更换以保证系统的密封性。更换活塞密封垫时检查活塞杆上是否有

安捷伦1260型高效液相色谱仪详细操作规程

1.目的：规范Agilent 1260高效液相色谱仪维修、保养、校正操作。 2.适用范围：本公司化验室Agilent 1260高效液相色谱仪的维修、保养。 3.有关责任：化验室精密仪器室 4.引用标准：仪器说明书及Agilent化学工作者现场操作培训教材 5.规程内容： 5.1开机前准备 5.1.1根据实验要求配制流动相，须经0.45μm滤膜过滤，之后再进行脱气处理，使用前必须用超声波振荡l0-15min，按无机相和有机相分开别装入溶剂瓶A（装有洗盐装置，最好固定盛放无机盐水相）、B中；对照品和样品溶液进样前要经0.45μm滤膜过滤。 5.1.2若流动相中含有缓冲盐,则必须以每分钟2～3滴的速度虹吸10%的异丙醇水冲洗seal-wash，以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。 5.2.采样前准备 5.2.1打开计算机,进入 Windows 系统, 从上到下依次打开各模块电源。5.2.2待各模块自检完成后，双击桌面上的“仪器1联机”图标，将自动进入化学工作站画面。 5.2.3从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,也可单击工作站画面左侧的“方法和运行控制”项，进入方法和运行控制窗口。 5.2.4打开Purge阀（逆时针），右击“泵”图标出现参数设定菜单单击“设定泵”选项进入泵编辑画面。 5.2.5设“流量”逐步增大流速至5ml/min ，A通道设到100%，单击“确

定

”。 5.2.6单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“泵控制“选项选中“开”单击“确定”则系统开始Purge，直到管路内由溶剂瓶A到泵入口无气泡为止；切换B通道(B通道设到100%)继续Purge直到所有通道管路内均无气泡为止。(查看柱前压力，若大于10Bar，则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。) 5.2.7将泵的流量设到0.5ml/min，若使用双泵则应设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）；再将流量设到0.8ml/min，2分钟后设定至方法所需流速，冲洗色谱柱20-30min。 5.2.8单击泵下面的瓶图标，输入溶剂瓶A、B内流动相的实际体积（为保护泵和色谱柱，请按实际体积输入）和停泵的体积单击“确定”，如果各溶剂瓶溶剂体积小于停泵体积，泵将自动停止。 5.2.9把缓冲液（用于柱子过渡的，与流动相等比例的乙腈/水、甲醇/水或10%的水溶液）换成流动相，排气后，逐步增加至所需流速，待柱压基本稳定后，打开检测器等，观察基线情况。 5.3.数据采集 5.3.1采集方法编辑 5.3.1.1编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，选中除“数据分析”外的三项，单击“确定”进入下一画面。 5.3.1.2方法信息：在“方法注释”栏中加入（如方法的用途等），单击“确定”进入下一画面。

Agilent1100液相色谱基本使用方法

基本操作： 1.开机：先打开电脑电源，然后开启液相各组件电源，boopt sever显示电脑与仪器联接的情况。（注：电脑与液相之间通过DAD上接口联接；若未连接上，在boopt sever打开的情况下，仅关开一次DAD即可联接成功），然后再打开“仪器1 联机”。 2.脱气：拧松purge阀（逆时针旋开2圈），在溶剂瓶中加入足够量的流动相，开泵，流速设为5ml/min 约5分钟。（注：脱气时需单个进行，如脱A则设置A为100%，脱B则设B为100%；所需用到的流动相都须脱气） 3.溶剂过渡：以0.8ml/min 的流速用10%甲醇水，拧紧purge阀，跑至压力恒定不变，约10min。（过渡的作用是冲稀流路内的有机溶剂，使水的比例占搞使缓冲盐不易析出堵塞系统损坏色谱柱，当使用Na、K、磷酸盐等在有机溶剂中溶解度低的缓冲盐时，此步十分重要）（先将流速调低再拧紧purge阀）4.跑基线：调用分析样品的方法跑基线，然后拧紧purge阀，以平衡柱子，约30min左右。（为延长检测器灯的寿命，可在跑基线20min后再开检测器电源，直接点开开关即可） 5.进样分析：将样品液过0.45um过滤器注入样品瓶，置于自动进样器样品盘上，设置序列（样品瓶位置，名称，分析方法，进样次数。其中后两者为必须的，缺一则报告错误，前两者非必须，当样品瓶位置空缺时只运行方法不进样；设置时将鼠标指针置于样品序列视图上，左键单击即可弹出对话框。） 6.洗柱：样品分析完毕，对于反相柱使用10%甲醇、100%甲醇各冲稀30min，最后柱子须充满100%甲醇保存。（洗柱方法：洗柱.M；使用洗柱方法时，最好设定自动关机。序列/序列参数/后运行：macro “shutdown .MAC”，go。也可以在样品序列上添加洗柱程序）。 7.关机：关闭电脑和仪器各组件电源。（关闭操作界面时要注意弹出对话框内容，关闭灯等）（先关闭电脑，然后再关闭液相各开关）编辑完整方法 1.点击方法/编辑完整方法：点击确定 2.进入泵参数设置界面：设置流速、分析时间、溶剂比例