低分子柑橘果胶在肿瘤治疗中的研究进展

果胶

柑橘果皮中天然产物的提取和评价 一、实验目的： 1、了解柑橘果皮中的天然产物组份都有哪些。 2、了解果胶的性质和提取原理。 3、掌握果胶的提取工艺。 4、学习果胶的检验方法和果酱的制备方法。 二、实验原理： 果皮中含大量的功能性物质，如香精油、果胶、类胡萝卜素、橙皮苷、柠檬苦诉等等。 果胶是一组聚半乳糖醛酸，是由半乳糖醛酸组成的多糖混合物，它含有许多甲基化的果胶酸。天然果胶是以原果胶，果胶，果胶酸的形态广泛分布于植物的果实、根、茎、叶中的多糖类高分子化合物，是细胞壁的一种组成成分，伴随纤维素而存在。它具有水溶性，工业上即可分离，其分子量约5万一30万。在适宜条件下其溶液能形成凝胶和部分发生甲氧基化（甲酯化，也就是形成甲醇酯），其主要成分是部分甲酯化的a(l,4)一D一聚半乳糖醛酸。 在可食的植物中，有许多蔬菜、水果含有果胶。柑橘、柠檬、柚子等果皮中约含30％果胶，是果胶的最丰富来源。柑桔为芸香科柑桔属，其产量居于水果之首。而柑桔皮约占柑桔果重的20％，其中果胶含量约为30％。目前，柑桔皮除少量药用外，大从柑桔皮中提取的果胶不仅是对柑桔皮的“废物利用”，可解决废物处理问题，还可提高柑桔生产加工的经济效益，是柑桔综合利用的很好途径。

果胶的提取主要采用传统的无机酸提取法（酸法萃取）。该法的原理是是利用果胶在稀酸溶液中能水解，将果皮中的原果胶质水解为溶性果胶，从而使果胶转到水相中，生成可溶于水的果胶。然后在分离出果胶。提取液经过滤或离心分离后,得到的是粗果胶液,还需进一步纯化沉淀,本实验采用醇沉淀法。其基本原理是利用果胶不溶于醇类有机溶剂的特点，将大量的醇加入到果胶的水溶液中，形成醇—水混合溶剂将果胶沉淀出来，一般将果胶提取液进行浓缩，再添加60 %的异丙醇或乙醇，使果胶沉淀,然后离心得到果胶沉淀物，用更高些浓度的异丙醇或乙醇洗涤沉淀数次，再进行干燥、粉碎即可。 三、主要仪器试剂： 烧杯（100、250ml），电炉，纱布，电子天平，锥形瓶，胶头滴管，石棉网，PH试纸，玻璃棒，温度计，恒温水浴锅，蒸发皿，表面皿，洗瓶。 柑橘皮，0.25%～0.3%HCL溶液，1%氨水，95%乙醇。 四、实验步骤： 1.原材料预处理 称取新鲜柑橘皮40g用水漂洗干净后，于250ml烧杯中加水约120ml，加热到90℃（先加热到90℃再放果胶），（加热柑橘皮的目的是灭酶，以防果胶发生酶解。）保持10分钟。取出用水冲洗后切成尺寸约1cm大小的颗粒，在250ml烧杯中用50～60℃的热水漂洗。2.酸法萃取 将洗净的果皮放入锥形瓶中，加水50～60ml，加0.25%～0.3%

果胶生产工艺研究进展

果胶生产工艺研究进展 茹正耀 广东工业大学轻工化工学院09制药2班 摘要：浅谈果胶及生产原理。分析我国目前果胶生产现状，结合目前国内外生产工艺，指出我国果胶生产工艺发展前景和研究进展。 关键词：果胶生产现状生产工艺 天然果胶是以原果胶、果胶、果胶酸的形态广泛分布于植物的果实、根、茎、叶中的多糖类高分子化合物,以果实中果胶的含量最高。比如苹果、柑桔等的果实含量颇丰。此外,胡罗卜的肉质根、向日葵[1]的花盘等也富含果胶。目前商品果胶的原料主要是柑橘皮(含果胶30 %) 、柠檬皮(含果胶25 %) 及苹果皮(含果胶15 %) ,真正具有工业生产价值的果胶来源 首推柑桔果皮和苹果榨汁废滓[2]。另据文献报道,甘薯渣的果胶含量达31 % ,且甘薯果胶凝胶特性与苹果的相似[3]。 果胶具有良好的乳化、增稠、稳定和胶凝作用,在食品、纺织、印染、烟草、冶金等领域得到了广泛的应用。同时,由于果胶具有抗菌、止血、消肿、解毒、降血脂、抗辐射等作用,还是一种优良的药物制剂基质[4] ,近年来,其在医药领域的应用较为广泛。 1.果胶生产的原理 果胶在植物体内一般以不溶于水的原果胶形式存在，在果蔬成熟过程中，原果胶在果胶酶的作用下逐渐分解为可溶性果胶，最后分解为不溶于水的果胶酸。 在生产果胶时，原料经酸、碱或酶处理，在一定的温度条件下分解，形成可溶性果胶，然后在果胶液中加入酒精或多价金属盐类，使果胶沉淀析出，经漂洗、干燥和精制而成商品。 我国果胶生产现状 2.果胶资源 我国果胶资源丰富,柑桔皮甜菜压粕、苹果皮渣,柠檬皮渣、向日葵盘等均含有大量果胶。已成为具有工业化生产价值的主要原料[6]。目前国内以柑桔皮为主要原料生产果胶。 3.果胶生产技术现状 果胶生产工艺主要分预处理、萃取、浓缩、沉淀、干燥等5 个步骤,其关键步骤为提取和沉淀。目前国内果胶生产多采用传统方法[7 ] ,其工艺技术路线为:原料处理→酸萃取→过滤→真空浓缩→酒精沉淀→低温干燥→粉碎、标准化→成品。但此工艺乙醇用量大,能耗大,生产成本高。少数企业采用盐析法,因其工艺条件要求严格,不易控制,往往使产品灰分高、溶解性差。 4.目前国内外果胶生产工艺概况 4.1 预处理 果胶原料的预处理各不相同。如果是鲜皮渣应及时处理,以免原料中产生果胶酶类水解

低分子肝素钠与低分子肝素钙区别

有区别的，首先分子组成上，肝素阴离子一个是结合一价的钠离子，另一个是结合二价的钙离子。在低分子肝素的应用上，二者的性质是不一样的，现在的医学发展的趋势是低分子肝素钙，是肝素钠的在加工产物。保证了肝素应用过程中的安全性。 低分子肝素前体是肝素，而肝素是从猪大肠提取的。肝素是一类物质。通过裂解得到了依诺肝素、那曲肝素、达肝素、国产低分子肝素（克赛的裂解方式是制造工艺是不能仿制的）。由于裂解方式有差别得到了不同分子量和抗xa 与抗iia的比值不同（克赛比值最大4:1），导致抗凝的效果不同。所以国内的靠离子区分（不严谨）。 注： 低分子肝素是生物制剂，生物制剂的仿制和传统意义上的仿制是不同的。 欧盟理事会、美国食品药品管理局以及美国和欧洲心脏病学会等权威机构的共识是： 不同的生物制剂产品之间是不能互换的。这提示在临床选择药物时，应牢记不能仅凭仿制产品声称具有与依诺肝素相同的分子量、抗因子Xa或抗因子Ⅱa活性，和/或抗Xa/抗Ⅱa比值，就认为两者具有相同的药理学活性、相同的疗效和安全性。 肝素(包括肝素钠、肝素钙、低分子肝素)、都是抗凝血药。 肝素分类 (1)普通(标准)肝素是由猪或羊黏膜提取，平均分子量为15000，相当稳定。 (2)通常把分子量小于6000的称为低分子肝素。低分子肝素与普通肝素比较，其半衰期较长，抗血栓效果好，而抗凝出血倾向较弱，有取代普通肝素的趋势。近年临床常用的有： 达肝素钠(法安明)、依诺肝素钠(克赛)、低分子肝素钙(速避凝、那屈肝素钙)。

(3)目前正在深入研究的肝素制剂中还有低抗凝活性肝素、改构型肝素、类肝素等,这些药物特点是具有低抗凝、高抗栓、作用时间长和出血作用少的优点，很有开发前途。 肝素钠： 本品系自猪的肠黏膜中提取的硫酸氨基葡萄糖的钠盐，属粘多糖类物质，通过激活抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)而发挥抗凝作用。它对凝血过程的三个阶段均有影响，在体内外均有抗凝作用，可延长凝血时间、凝血酶原时间和凝血酶时间。口服不吸收，皮下、肌肉或静脉给药均吸收良好。 肝素钙与肝素钠作用相似，但本品皮下注射后不减少细胞间毛细血管的钙胶质，也不改变血管通透性，基本上克服了肝素钠皮下注射易致出血的副作用。本品还有明显的抗肾素和抗醛固酮的活性

抗凝药物的研究进展及临床应用现状

抗凝药物的研究进展及临床应用现状 张少丽 柳城县人民医院药剂科545200 【摘要】随着血栓疾病发病率的不断提升，抗凝药物的临床应用也越来越广泛，同时关于抗凝药物的临床研究也逐渐深入，更进一步对不同抗凝药物的临床作用机制有详细了解。本文综述目前抗凝药物临床研究文献，探析抗凝药物的研究进展和临床应用现状。 【关键词】抗凝药物；研究进展；临床应用 血栓是因为患者血管腔内，其血液发生凝固或者是血液中有些有形成分发生粘集问题形成的，一般情况下血栓的组成是沉积的血小板、不溶性纤维蛋白、陷入的红细胞或者是集聚的白细胞，属于是一个彼此之间相互作用的遗传和环境作用变化过程。目前血栓疾病已经给人类健康造成严重威胁。在血栓疾病临床治疗中，主要采用的则是抗凝药物。其中传统的抗凝药物主要包括有普通肝素、华法林以及低分子肝素等等，同时这些药物的临床价值已经被广泛了解。目前也出现了一系列新的抗凝药物，其在临床应用中各具特点，同时也是目前临床研究的一个重点。本文重点综述抗凝药物的临床研究和应用。 1、肝素类抗凝药物 在人体中肝素钠是由肥大细胞合成，在临床应用最早的也就是肝素类抗凝药物，一开始由动物体内提取而得，之后逐渐出现人工合成。其作用机制则是增加抗凝血酶III和凝血酶的亲和力，以此对内源性凝血通活通路产生阻止作用，起到抗凝效果。其中肝素钠与低分子肝素均不能够通过胎盘，因此对妊娠妇女和胎儿均具有一定的安全性。 1.1 普通肝素 普通肝素在临床应用中具有起效快、安全性差和抗凝效果稳定性不高的特点。但是其在临床应用中依然具有良好效果。其中王瑜等在临床研究中在儿童原发性肾病综合征临床治疗中，应用小剂量普通肝素，显著改善了患者的尿蛋白以及血清总胆固醇，同时患儿的血小板计数和血纤维蛋白原也得到显著改善，早期应用小剂量普通肝素是儿童原发性肾病综合征临床治疗的一个重要辅助手段，不但效果显著，同时不良反应发生率低。王志勇等则在临床研究中对普通肝素治疗急性脑梗死达到肝素化的影响因素，作了详细分析，得出年龄大、入院活化部分凝血活酶时间值小、合并冠心病、肝素初始剂量大、三酰甘油低、纤维蛋白源低以及不饮酒、不吸烟患者更容易达到肝素化，同时其也是影响普通肝素治疗急性脑梗死达到肝素化的单因素，年龄和肝素起始剂量对其肝素化具有正性作用，其余因素则对肝素化具有负性作用。 1.2 低分子肝素 低分子肝素是在普通肝素的基础上分离得到的，其对于血小板聚集功能的影响作用明显小于普通肝素，在临床使用中出血并发症的发生率较低。林剑萍等在高通量血液透析患者中分别应用普通肝素和低分子肝素，最终得出两组患者的透析器凝血和止血时间差异不大，但是应用低分子肝素组患者的迟发性出血发生率明显低于普通肝素组患者，其差异显著（P＜0.05）。由此可见低分子肝素在血液透析患者中的应用具有更高安全性。周曼云等在短暂性脑缺乏发作临床治疗中，对普通肝素和低分子肝素的临床应用疗效作了对比性分析，最终得出低分子肝素和普通肝素的临床治疗效果差异不大，但是低分子肝素的出血毒副作用比较低，因此在临床中更值得推广应用。杨光等则在临床对低分子肝素在房间隔缺损封堵术后应用时间对血小板的影响作用进行了详细分析，得出在其术后适当的延长低分子肝素应用时间，能够对血小板消耗适当的减少。 2、维生素K拮抗剂 华法林属于是香豆素类维生素K拮抗剂，其主要是对肝脏合成依赖于维生素K的凝血因素II、VII、X以及IX产生干扰作用，以此对血液凝固实施抑制。其是一种口服抗凝药物，主

果胶的检测技术

3 果胶的检测技术 在对果胶的研究中，通常以含量、酯化度、相对分子质量、凝胶度等作为评价指标。3.1 果胶含量的测定 目前，测定果胶含量的方法主要有：质量法、咔唑比色法、果胶酸钙滴定法和蒸馏滴定法。果胶酸钙滴定法较适于纯果胶的测定，对于例如柑橘果皮这种有色样品，不易确定滴定终点；而蒸馏滴定法在蒸馏的时候部分糠醛会发生分解，影响回收率，故而运用较少。所以，果胶含量的测定一般采用质量法和咔唑比色法。近年来新的果胶含量检测方法——离子交换色谱法（Ion ex-change chromatogram，IEC）引起了人们的关注，其常用的色谱柱和检测器见表3。 吴玉萍等[1]研究了用高效液相色谱法测定烟草中果胶含量。烟草中的果胶先采用盐酸水解，水解产生的半乳糖醛酸以Waters Sugar-Pak1钙型阳离子交换柱为固定相，0.05g/L EDTA钙钠水溶液为流动相，示差折光仪为检测器测定半乳糖醛酸含量，由半乳糖醛酸含量换算为果胶含量。B.M. Yapo等[2]以高效阴离子色谱-脉冲安培检测（HPAEC-PAD）技术测定果胶含量。采用脉冲安培检测器，离子色谱以CarboPacPA-100柱（250mm×4 mm i.d.）为固定相，流动相为0.1 mol/L NaOH 和0.17 M NaOAc，流速为1 mL/min；柱温30℃，测 表3：检测果胶含量的离子交换色谱法 3.2 果胶酯化度的测定 自然界果实中天然存在的果胶都是高酯果胶，经酸或碱处理高酯果胶降低酯化度后可获得低酯果胶。果胶中含甲氧基的最大理论值为16.3％，若该值以酯化度来表示是100％，则甲氧基含量与酯化度的转换计算式应是： 酯化度= 甲氧基含量/16.3%。 果胶酯化度的检测技术由最早的比色法、滴定法发展到80年代的高效液相和气相、90年代的核磁共振和红外光谱等方法。而近几年，拉曼光谱分析果胶的酯化度的方法也有报导。Synytya等[4]用拉曼谱不仅可测定甲酯化程度，而且还可测定乙酰化程度。果胶钾盐的甲酯和乙酰化化合物在拉曼谱中有特征吸收，它在857 cm-1处的强吸收对果胶的甲酯和乙酰化程度十分敏感。甲酯化程度增加波数减少(最小值:850 cm-1)；乙酰化程度增加波数增加(最大值:862 cm-1)。

低分子肝素的药理作用和临床应用研究进展

低分子肝素的药理作用和临床应用研究进展 发表时间：2016-06-08T14:32:41.513Z 来源：《健康世界》2016年第4期作者：张玉倩 [导读] 根据LMWH的药理作用，结合临床应用进行深入研究，进行低分子肝素的临床推广。 大连大学 116000 摘要：肝素是临床医疗当中的常用药物，在预防和治疗静脉血栓方面发挥着重要的作用，取得了良好的疗效。随着肝素的深入研究和开发，低分子肝素（LMWH）开始作为新制剂在临床医疗当中得到广泛的应用，具有注射吸收好、生物利用度髙、出血负作用少的优点，对治疗不稳定性心绞痛、深静脉血栓及糖尿病肾病等具有显著的疗效。根据LMWH的药理作用，结合临床应用进行深入研究，进行低分子肝素的临床推广。 关键词：低分子肝素；药理作用；临床应用 引言：低分子肝素（LMWH）是由普通肝素(UFH)酶解或化学降解获得，LMWH是一种混合物，平均相对分子质量（Mr）约为5000，其药理作用主要包括抗凝血、抗血栓、抗炎及抗脂质代谢紊乱等作用，有效调节细胞增殖，能够预防腹部术后粘连，对治疗心脑血管疾病、肾脏疾病、肝脏疾病和预防术后血栓有着良好的疗效，减少了出血、血小板减少症及过敏反应等不良反应的发生，正逐渐取代UFH在临床医疗当中的地位。本文就低分子肝素的药理作用和临床应用研究进展进行综述。 1.低分子肝素的药理作用 1.1抗凝血作用 LMWH主要通过对凝血酶（FIIa）和凝血活性因子（FXa）的抑制作用，依赖于抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）与LMWH的结合。结合AT-Ⅲ的LMWH，与FIIa和FXa的结合能力增强。LMWH由于糖链相对较短（低于18个单糖的长度），不能直接与FIIa结合而起到抑制作用，而对于FXa可以直接发挥抑制作用，LMWH抗FXa的能力更强。研究表明，LMWH抗FXa与抗FIIa的活性之比（2~4）高于UFH（1），减少了出血、血小板减少症及过敏反应等不良反应的发生率。 1.2抗血栓作用 由于FIIa被激活，进而导致血栓的形成。更多的组织纤溶酶原激活因子由于LMWH被血管内皮吸收而释放。在纤维蛋白的溶解作用下，FIIa诱导的血小板聚集力，LMWH能够抑制二磷酸腺苷对血小板聚集的促进作用，通过抑制FXa进而抑制FIIa的激活，LMWH的抗血栓作用明显优于UFH。 1.3抗炎作用 LMWH抗炎作用的研究正在深入进行，目前还未得出统一的结论。一部分人认为LMWH抗炎作用是独立于抗凝血作用之外的性质，而另一部分人认为抗炎作用与LMWH对FXa的抑制作用有关，经由抗凝途径介导而发挥作用。在给予Ball/c小鼠LMWH的实验当中，肿瘤坏死因子α（TNFα）所引起的白细胞滚动、粘连和组织浸润，会由于LMWH的作用而减少。在TNFα之后给予LMWH，减少了白细胞滚动，对白细胞的粘连和组织浸润无影响。由此可见，LMWH的抗炎作用可以通过多种机制和途径来实现。根据研究显示，白细胞抑制黏附分子能够促进LMWH抑制白细胞黏附聚集的作用。在临床应用当中，LMWH可作为有效且安全抗炎制剂来使用[1]。 2.低分子肝素的临床应用研究 2.1脑血管疾病治疗 急性脑梗死、进展性脑梗死以及短暂性脑缺血是主要的脑血管疾病，在以上脑血管疾病的临床治疗当中，都应用了LMWH作为主要的治疗药物。①急性脑梗死：急性脑梗死是一种突发的脑血液循环障碍性疾病，由动脉硬化引发的血管病变。薛东莉提出了LMWH联合阿司匹林治疗急性期脑梗死，但是根据临床疗效来看，LMWH联合阿司匹林治疗急性脑梗死的效果并不十分显著，疗效与单独使用阿司匹林相接近[2]。根据目前的临床研究表明，LMWH联合疏血通治疗急性脑梗死的效果十分理想，治疗简便且安全，充分发挥了LMWH与疏血通治疗方法的协同作用，保证急性脑梗死治疗的安全有效。②进展性脑梗死：进展性脑梗死是由于脑动脉狭窄、闭塞破裂而导致脑血液循环障碍，主要表现为神经系统功能缺失，存在永久性脑功能障碍的症状，患者的病情在发病48h内逐渐加重。黎敏，唐震等提出了LMWH联合依达拉奉治疗进展性脑梗死，通过临床治疗分析和疗效评价，LMWH联合依达拉奉注射液治疗进展性脑梗死具有显著的疗效，明显优于单独使用LMWH的治疗效果[3]。③短暂性脑缺血：短暂性脑缺血是一种短暂的脑血液循环障碍，并伴有局灶症状，容易导致神经功能的损伤，患者表现为失语、瘫痪及感觉障碍等暂时性症状和体征，并会在24h内消失。LMWH钙治疗和血栓通治疗都是治疗短暂性脑缺血有效方法，根据临床试验对照，LMWH钙治疗短暂性脑缺血的效更为显著[4]。 2.2心脏疾病及其他疾病的治疗 根据临床应用试验，基于常规应用抗心绞痛药物治疗，联合应用LMWH和丹参川芎嗪注射液，对不稳定性心绞痛急性心肌梗死具有良好的疗效。LMWH联合尿激酶能够有效预防急性心肌梗死。对于肺源性心脏病的治疗，则采用LMWH联合纳洛酮的治疗方法，以有效环节患者的血液高凝，进而改善通气，有助于患者的康复。在心脏疾病的治疗当中，LMWH有着重要的应用价值[5]。 另外，在治疗肝脏疾病、肾脏疾病、急性胰腺炎、扁平苔藓、癌症等疾病和预防术后血栓的过程中，都需要应用到LMWH，或单独使用LMWH进行治疗，或采用LMWH联合其他治疗方法，可有效改善患者的症状，提升临床治疗的质量和效率，帮助患者快速的恢复。 总结：目前低分子肝素药理作用和临床应用研究取得了突破性的进展，治疗心脑血管疾病、肾脏疾病、肝脏疾病的防治上得到广泛的作用，充分发挥其抗凝血、抗血栓、抗炎等药理作用，并在临床应用实践当中深入的研究，开发出低分子肝素更大的应用价值，给广大患者带来福音，对于临床医疗具有重要的意义。 参考文献： [1]兰志新,林秀山. 低分子肝素的药理分析及临床应用研究[J]. 数理医药学杂志,2016,02:223-224. [2]薛东莉.低分子肝素联合阿司匹林治疗急性期脑梗死疗效观察[J].医学理论与实践,2011,24( 17) :2067. [3]黎敏,唐震宇,沈小平. 低分子肝素联合依达拉奉治疗进展性脑梗死疗效的系统评价[J]. 循证医学,2013,04:218-224+229.

低分子肝素钠与低分子肝素钙区别

有区别的，首先分子组成上，肝素阴离子一个是结合一价的钠离子，另一个是结合二价的钙离子。在低分子肝素的应用上，二者的性质是不一样的，现在的医学发展的趋势是低分子肝素钙，是肝素钠的在加工产物。保证了肝素应用过程中的安全性。 低分子肝素前体是肝素，而肝素是从猪大肠提取的。肝素是一类物质。通过裂解得到了依诺肝素、那曲肝素、达肝素、国产低分子肝素（克赛的裂解方式是制造工艺是不能仿制的）。由于裂解方式有差别得到了不同分子量和抗xa与抗iia的比值不同（克赛比值最大4:1），导致抗凝的效果不同。所以国内的靠离子区分（不严谨）。 注：低分子肝素是生物制剂，生物制剂的仿制和传统意义上的仿制是不同的。欧盟理事会、美国食品药品管理局以及美国和欧洲心脏病学会等权威机构的共识是：不同的生物制剂产品之间是不能互换的。这提示在临床选择药物时，应牢记不能仅凭仿制产品声称具有与依诺肝素相同的分子量、抗因子Xa或抗因子Ⅱa 活性，和/或抗Xa/抗Ⅱa比值，就认为两者具有相同的药理学活性、相同的疗效和安全性。 肝素(包括肝素钠、肝素钙、低分子肝素)、都是抗凝血药。 肝素分类 (1) 普通(标准)肝素是由猪或羊黏膜提取，平均分子量为15000，相当稳定。 (2) 通常把分子量小于6000的称为低分子肝素。低分子肝素与普通肝素比较，其半衰期较长，抗血栓效果好，而抗凝出血倾向较弱，有取代普通肝素的趋势。近年临床常用的有：达肝素钠(法安明)、依诺肝素钠(克赛)、低分子肝素钙(速避凝、那屈肝素钙)。 (3) 目前正在深入研究的肝素制剂中还有低抗凝活性肝素、改构型肝素、类肝素等, 这些药物特点是具有低抗凝、高抗栓、作用时间长和出血作用少的优点，很有开发前途。 肝素钠：本品系自猪的肠黏膜中提取的硫酸氨基葡萄糖的钠盐，属粘多糖类物质，通过激活抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)而发挥抗凝作用。它对凝血过程的三个阶段均有影响，在体内外均有抗

嗜热微生物的研究进展及应用

嗜热微生物的研究进展及应用 宜春学院化学与生物工程学院03生物教育张志刚 指导老师：姜琼 摘要嗜热微生物是一类最适生长温度高于45?C的微生物，嗜热酶是从嗜热微生物中分离得到的一类热稳定性酶，由于嗜热酶分子内部有很多氢键、二硫键及紧密而有韧性的空间结构的存在，所以嗜热酶在高温条件下具有很强的稳定性，高温反应活性，以及对有机溶剂、去污剂和变性剂的较强抗性，嗜热酶在许多方面都有广泛的应用。当前获得嗜热酶的方法主要有：直接从嗜热微生物中提取、利用基因工程技术在中温宿主中表达和利用定向分子进化技术筛选。目前酶的纯化主要采用层析法、高效液相色谱法和电泳法等方法。由于环境恶化,能源危机,全球变暖等原因, 嗜热酶的开发和应用将出现更加诱人的前景。 关键词嗜热微生物；嗜热酶；嗜热机制；应用 Thermophilic microorganism research progress and application Zhang Zhigang College of Chemistry and Bioengineering, Bioengineering (Biology education), YiChun University Advisor: Jiang Qiong Abstract Thermophilic microorganisms is a type of microorganisms that the most suitable growth temperature is above 45?C,the thermophilic enzyme is a type of a thermostable enzyme separated from the thermophilic microorganism, because there is a lot of hydrogen keys and two-sulphur keys in the thermophilic enzyme molecule, so the thermophilic enzyme have a very strong stability in the hot condition, as well as there is a stronger fastness to organic solvent、eradicator and denaturant,the thermophilic enzyme have an extensive application in many fields.The method which obtained the thermophilic enzyme includes three kinds at present: distilled directly from the thermophilic microorganism, expressed in the mild host making use of a genetic engineering technique and sieved with the directional molecule evolution technique. At present the enzyme purification methods are:chromatography、HPLC and electrophoresis. Due to the cause of worsening environment, energy crisis,warmer weather, the development and application of the thermophilic enzyme will appear more captivating foreground. Keywords Thermophilic microorganisms; Thermophilic enzyme; Thermophilic mechanism; Application 最适生长温度高于45?C的微生物称为嗜热微生物，是在高温环境下生存的一类微生物，它们有其自己的适应机制和特定的新陈代谢能力，具有独特的基因类型、特殊的生理机制及代谢产物，是地球上的边缘生命形式。嗜热酶是从嗜热微生物中分离得到的一类热稳定性酶，具有化学催化剂无法比拟的优点，尤其是在高温条件下保持极好的稳定性，使很多高温化学反应得以实现从而将极大的促进生物技术产业的发展。近年来，人们已从嗜热微生物中分离得到多种嗜热酶。今后，还应继续在嗜热酶的结构与功能、应用等方面作深入而全面的研究。本文主要对嗜热酶的研究进展及应用作一综述。 1 嗜热微生物的分类及其酶的种类和特点 1.1 嗜热微生物的分类 嗜热微生物是一类生长温度跨度在40～150℃之间的微生物,它可分为轻度嗜热(最适生长温度低于60℃)、中度嗜热(最适生长温度低于85℃) 和极度嗜热(最适生长温度大于85℃) ,主要分布于地热环境

实验室柑橘皮果胶提取

实验报告 指导老师：翁永根 应101-4 ：张立群 201055501401 王聪 201055501402 崔秋丽201055501403

实验报告 一、实验目的: 1、了解柑橘果皮中的天然产物组分都有那些 2、了解果胶的性质和提取原理 3、掌握果胶的提取工艺 4、学习果胶的检验方法和果酱的制备方法 二、实验原理： 果皮中含有大量的功能性物质，如香精油、果胶、类胡萝卜素、橙皮苷、柠檬苦素等等。 果胶是一种组聚半乳糖醛酸，是由半乳糖醛酸组成的多糖混合物，含有许多甲基化的果胶酸。天然果胶是以原果胶、果胶、果胶酸的形态广泛分布于植物的果实、根、茎、叶中的多糖类高分子化合物，是细胞壁中的一种组成成分，伴随纤维素存在。果胶具有水溶性，工业上可分离其分子量约5万到30万。在适宜条件下其溶液能形成凝胶和部分发生甲基氧化，其主要成分是部分甲基化的a（1,4）—D—聚半乳糖醛酸。 在可食的植物中，有许多蔬菜、水果含有果胶。柑橘、柠檬、柚子等果皮中约含有30%的果胶，是果胶的最丰富来源。 果胶的提取主要是采用传统的无机酸提取法（酸萃取法）。

该法的原理是利用果胶在稀酸溶液中能水解的特性，将果皮中的原果胶质水解成溶性果胶，从而是果胶转到水相中，生成可溶于水的果胶。然后分离出果胶。提取液经过滤或离心后，得到的是粗果胶液，还需要进一步的纯化沉淀，本实验采用醇沉淀法。其基本原理是利用果胶不溶于醇类有机溶剂的特点，将大量的醇加入到果胶的水溶液中，形成醇—水混合溶剂将果胶沉淀出来，一般将果胶提取液浓缩，在添加60%的异丙基或乙醇，使果胶沉淀，然后离心得到果胶沉淀物，用更高浓度的异丙醇或乙醇洗涤沉淀数次再进行干燥、粉碎即可。 三、主要仪器试剂： 烧杯（150，250mL），电炉，纱布，电子天平，锥形瓶，胶头滴管，石棉网，PH试纸，玻璃棒，温度计，恒温水浴锅，蒸发皿，表面皿，洗瓶，布氏漏斗，真空泵， 柑橘皮，0.3%盐酸溶液，1%氨水，95%乙醇 四、实验步骤： 1、原材料的预处理 称取新鲜的柑橘皮40.19g用水漂洗干净。于250mL烧杯中加水约120mL,加热至90℃，将橘子皮放到烧杯中保持十分钟。取出后用水冲洗后切成尺寸大约1cm的小块，在250mL烧杯中用 50~60℃的热水漂洗，漂洗10次。 2、酸法萃取

果胶研究进展

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果胶研究进展 作者：苏艳玲， 巫东堂， SU Yan-ling， WU Dong-tang 作者单位：苏艳玲,SU Yan-ling(晋中学院生物科学与技术学院,山西,晋中,030600)， 巫东堂,WU Dong-tang(山西省农业科学院蔬菜研究所,山西,太原,030031) 刊名： 山西农业科学 英文刊名：JOURNAL OF SHANXI AGRICULTURAL SCIENCES 年，卷(期)：2009,37(6) 参考文献(34条) 1.Iglesias M T Extraction and characterization of sunflower pectin[外文期刊] 2004(3) 2.卢文清果胶的制备及应用 1988(04) 3.Gholamreza Mesbahia A comparative study on functional properties of beet and citrus pectins in food systems[外文期刊] 2005(4) 4.凌关庭果胶的新进展 1999(03) 5.田三德;任红涛果胶生产技术工艺现状及发展前景[期刊论文]-食品科技 2003(01) 6.Henrik Vibe Scheller Biosynthesis of pectin 2007 7.Ridley B L;O'Neill M A;Mohnen D Pectins:Structure,biosynthesis,and oligngalacturonide-related signaling[外文期刊] 2001(06) 8.肖凯军;陈健;李巧玲高频电磁场强化浸取果胶的研究[期刊论文]-食品科学 2001(03) 9.郑志花;曹瑞林;李永祥用微波加热技术从向日葵盘中提取果胶[期刊论文]-华北工学院学报 2003(04) 10.侯春友微波条件下提取果胶的研究[期刊论文]-郑州粮食学院学报 1999(02) 11.龚冉;杨海燕;贺昱微波法萃取甜菜废粕中果胶的研究[期刊论文]-新疆农业大学学报 2004(01) 12.Bartley I M;Knee M;Casimir M A Fruit softening I.Changes in cell wall composition and endo-polygalacturonase in ripening pears[外文期刊] 1982 13.Barrett D M;Gouzalez C Activity of softening enzymes during cherry maturatiou[外文期刊] 1994 14.程杰山;沈火林辣椒果实成熟过程中硬度及相关生理生化指标的变化[期刊论文]-华北农学报 2006(06) 15.李玲;王如福果蔬减压贮藏研究进展[期刊论文]-山西农业科学 2007(03) 16.强煦菁南瓜粉中果胶的提取工艺[期刊论文]-食品工业 2000(03) 17.赵利;王杉果胶的提取及其在食品工业的应用综述 1999(05) 18.李文德纤维素酶提取甜菜果胶的工艺条件[期刊论文]-无锡轻工大学学报 1999(04) 19.张一青;陆兆新;尤华原果胶酶提取柑橘皮中果胶的研究[期刊论文]-食品科学 2005(01) 20.Alexander V;Matora;Viktoria E The applicatiou of bacterial enzymes for extraction of pectin from pumpkin and suger beet[外文期刊] 1995(01) 21.林曼斌;黄传香超声波、盐析法提取仙人掌果胶的研究[期刊论文]-广州食品工业科技 2003(04) 22.Pagan J;Ibarz A Extraction and theological properties of pectin from fresh peach pomace[外文期刊] 1999(2) 23.张鸿发;励建荣;周勤从柑橘皮中提取果胶的工艺研究[期刊论文]-食品科技 2000(06) 24.Anurag Payasi Pectate lyase activity during ripening of banana fruit[外文期刊] 2003 25.Abu-Sarra A F;Abu-Goukh A A Changes in pectinesterase,polygalacturonase and cellulase activity during mango fruit ripening 1992

产脂肪酶的微生物研究进展

产脂肪酶细菌的筛选与鉴定 姓名：范丽萍学号：0911040203 班级：生09级6班 前言 1.脂肪酶的简介 脂肪酶(Lipase，EC3．1．1．3，甘油酯水解酶)是分解脂肪的酶u J。在动植物体和微生物中普遍存在，它是一类特殊的酯键水解酶，催化如下反应：甘油三酯+水=甘油+游离脂肪酸。它的另一重要特征是只作用于异相系统，即在油(或脂)一水界面上作用，对均匀分散的或水溶性底物无作用即使作用也极缓慢，因此脂肪酶也可说是专门在异相系统或水不溶性系统的油(脂)一水界面上水解酯的酶。 2.微生物产脂肪酶的研究历程 脂肪酶是最早研究的酶类之一(见表1)。从1834年兔胰脂肪酶活性的报道至如今的微生物脂肪酶已有上百年的历史。微生物发酵法的应用前景要远远大于提取法及化学合成法。如今，黑曲霉、白地霉、毛霉等微生物来源的酶已制成结晶。根霉、圆柱假丝酵母、德氏根霉、多球、，粘质色杆菌等也得到高度提纯，并对它们的理化性质[1]开展进一步研究。早在60年代，假丝酵母[2]、曲霉、根霉等菌产生的脂肪酶相继在日本进入商品生产(见表2)。我国60年代也已开展脂肪酶的研究开发。1967年，中科院微生物所筛选到解脂假丝酵母(Candida lipolytica)AS2．1203并于1969年制成酶制剂供应市场。 表1 常见的产脂肪酶的徽生物 菌名 黑曲霉荧光假单胞菌 白地霉无根根霉 毛霉圆柱假丝酵母 巢子须霉德氏根霉 多球菌棉毛状酶 圆弧青霉粘质色杆菌 表2 常见商品酶 enzyme abbreviation manufacturer Candida cylindraces CC Sigina,amano Aspergillus niger AN Amino,fluka Rhisopus delemar RD amano 就微生物脂肪酶而言，虽然在产酶菌株选育、培养条件、酶的性质及工业应用上已研究了几十年，但由于脂肪酶的结构及性质的多样性、酶的不稳定性、底物的水不溶性、酶的来源不足、提纯困难以及应用范围不广泛等问题，脂肪酶的研究进展及工业应用与蛋白酶、淀粉酶相比要慢得多，窄得多。因此在微生物产脂肪酶方面还有很大的研究空间，本实验主要就是通过对微生物的培养，筛选出产脂肪酶活力高的细菌。 3.微生物产脂肪酶的用途

从柑橘类果皮中提取果胶的研究 (104-108号)

从柑橘类果皮中提取果胶的研究 一、目的要求 1、学习研究性实验设计的一般程序，培养科学研究过程的基本技能、技术和能力； 2、掌握天然产物提取方向实验研究的一般方法； 3、进一步了解果胶质的有关知识； 4、通过实验研究，获得尽可能高的果胶提取率及较好质量的果胶产品。 二、实验原理 果胶物质广泛存在于植物中，主要分布于细胞壁之间的中胶层，尤其以果蔬中含量为多。果胶为白色、浅黄色到黄色粉末，有非常好的特殊水果香味，五以为，五固定熔点和溶解度，不溶于乙醇甲醇等有机溶剂中。粉末果胶的主要成分为多聚Ｄ－半乳糖醛酸，各醛酸单位间经α－１，４糖苷键联接，具体结构如图１： 在植物体中，果胶一般以不溶于水的原果胶形式存在，不同的果蔬含果胶物质的量不同，山楂约为6.6%，柑橘约为0.7～1.5%，南瓜含量较多，约为7%～17%。在果蔬中，尤其是在未成熟的水果和果皮中，果胶多数以原果胶存在，原果胶不溶于水，用酸水解，生成可溶性果胶，再进行脱色、沉淀、干燥即得商品果胶。从柑橘皮中提取的果胶是高酯化度的果胶，在食品工业中常用来制作果酱、果冻等食品。

现在常用的果胶提取方法有３种：酶提取法、离子交换法、微生物法。其中，酸提取法包括酸提取法、乙醇沉淀法和酸提取盐沉淀法。其主要过程为：将原料进行与处理后，用稀盐酸水解，水浴恒温并不断搅拌，然后过滤，将滤液在真空中浓缩，再用乙醇或铁铝盐进行沉淀，以析出果胶。本实验讨论酸提取乙醇沉淀法生产果胶。 三、实验药品、仪器 仪器：恒温水浴锅、真空干燥箱、布氏漏斗、抽滤瓶、玻棒、尼龙纱布、表面皿、精密pH试纸、烧杯、电子天平、小刀、真空泵。 药品及试剂：柑橘皮（新鲜）、95%乙醇、无水乙醇、0.2 mol/L盐酸溶液、 6 mol/L氨水、0.5%～1%的活性炭、2%～4%的硅藻土。 四、操作步骤 1、原料与处理 （1）称取新鲜柑橘皮40 g，用清水洗净后，放入烧杯中，加250 mL水，加热至90 ℃保温10min，使酶失活，防止果胶发生酶解； （2）用水冲洗后切成3～5 mm大小的颗粒，在250mL的烧杯中用50-60 ℃的热水漂洗，直至水漂洗为无色，果皮无异味为止（漂洗的目的主要是除去色素等，以影响果胶的色泽和质量）。为了提高漂洗的质量和效果，将果皮颗粒转裹在尼龙布或四层纱布里漂洗，每次漂洗都要把果皮用尼龙布挤干，再进行下一次漂洗。 2、酸法萃取 （1）将漂洗过的果皮粒放入烧杯中，加入0.2 mol/L的盐酸以浸没果皮为度，调溶液的pH 2.0～2.5之间。加热至90 ℃，在恒温水浴中保温1h，保温期间要不断地搅动(由于加热，水盆和盐酸会发，引起PH值得变化，因此在此提取过程中要不断补充水分和盐酸以控制PH值在2.0-2.5之间)； （2）趁热用垫有尼龙布(100目)的或四层纱布的布氏漏斗抽滤，收集滤液； （3）在滤液中加入0.5%～1%的活性炭，加热至80 ℃，脱色20 min，趁热抽滤(如橘皮漂洗干净，滤液清沏，则可不脱色)。

低分子肝素治疗不明原因复发性流产的研究进展

低分子肝素治疗不明原因复发性流产的研究进展 发表时间：2019-08-14T16:22:37.557Z 来源：《中国医学人文》(学术版)2019年3月下第6期作者：龚晓红 [导读] 复发性流产也可称之为习惯性流产，是多种妊娠疾病的共同结局。根据相关临床研究资料表明，在孕龄妇女中复发性流产的发病率在1-5%之间，子宫畸形、宫腔粘连、免疫因素异常、胚胎染色体异常、宫颈内口松弛以及甲状腺功能低下等均为其常见原因。成都市温江区妇幼保健院妇产科四川成都 611130 复发性流产也可称之为习惯性流产，是多种妊娠疾病的共同结局。根据相关临床研究资料表明，在孕龄妇女中复发性流产的发病率在1-5%之间，子宫畸形、宫腔粘连、免疫因素异常、胚胎染色体异常、宫颈内口松弛以及甲状腺功能低下等均为其常见原因。近年来，在研究中显示抗凝治疗是复发性流产较为有效方式，临床上以阿司匹林与低分子肝素等为主，其中低分子肝素在药物治疗中占有最为重要作用。在临床治疗中不仅仅具有抗凝作用，同时联合其他方式对子宫内膜上皮上对囊胚的侵入与黏附造成影响，最终促进胎盘的形成，并且 滋养细胞增殖。除此之外，还可在一定程度上降低抗磷脂抗体间的结合，减轻炎症反应，进而对复发性流产患者的妊娠结局造成影响。 1 低分子肝素药物基础 低分子肝素主要由酶催化裂解制备或者普通肝素经化学分解所致的分子量较低肝素总称，该药物的主要成为为葡萄胺聚糖，与普通肝素相比，分子量更低，属于抗凝血酶III依赖性凝血酶抑制剂。在临床应用中，低分子肝素所具有的优势如下：①在皮下注射后，低分子肝素生物利用度可在90%以上；②大部分的普通肝素中抗凝血酶III与戌糖结构联合，从而对凝血因子Xa与凝血酶IIa活动予以抑制，进而起到抗凝作用；③因低分子肝素具有较大分子量，同时还伴有大量的负电荷，因而不会更加容易通过胎盘屏障；④由于血小板因子难以与低分子肝素发生联合，因此在应用后不会减少血小板数量；⑤为患者皮下注射低分子肝素能够会导致纤溶酶原转化为纤溶酶，进而加强纤维溶解；⑥与普通肝素相比，低分子肝素能够促进内皮细胞的合成，并且确保释放出更高活性的组织因子途径抑制饮食，通过与凝血因子Xa或者组织因子形成复合物的方式来进一步减弱外源性凝血途径；⑦与普通肝素相比，为患者皮下注射低分子肝素后半衰期的3-6h是其2-4倍，且大多数药物会经患者肾脏予以排泄。 2 低分子肝素治疗进展 2.1 用药剂量 低分子肝素的用药剂量通常可以分为治疗与预防剂量两种，其中预防剂量主要应用于近期无明确血管栓塞或者相关病史症状，而治疗剂量则更加适用于近期存在明确血管栓塞或相关病史者。通常情况下，预防剂量可采用40mg Qd伊诺肝素，5000IU Qd达肝素，30mg Bid伊诺肝素，40mgQd达肝素。但需要注意的是，在临床治疗过程中药物剂量需根据患者体重给药。现阶段，临床上有关于低分子肝素钙治疗的相关研究，其中包括5000IU Qd低分子肝素钙注射液、40ml Bid肝素钙以及4100IU Qd速碧林等，均具有较好的应用效果。 2.2 临床疗程 针对临床上非典型性的复发性流产阳性患者，若三次及以上非连续不明原因流产、两次妊娠不足10w不明原因流产以及抗磷脂抗体实验室检测为低滴度的阳性患者等，在临床治疗中需对根据患者实际病情予以个性化处理，在临床用药中还需对患者胚胎发育状况予以严密监测，并对患者抗磷脂抗体情况予以定期检查。如果患者抗磷脂抗体连续3次检查结果呈现为阴性，且胚胎发育良好，同时纤溶、血凝以及胎龄等临床指标呈现为异常状况时，则需根据患者病情重新用药。除此之外，针对妊娠10w后有1次及以上流产者或存在复发性流产病史者，一旦确诊为妊娠后，则需立即予以低分子肝素治疗，并于终止前的24h停止药物治疗。 2.3 联用治疗 低分子肝素联合其他药物是治疗复发性流产患者的常用方式，临床经常将低分子肝素联合小剂量阿司匹林作为标准治疗方式，能够改善患者妊娠结局，进而提高生存率。有研究人员表明，对复发性流产患者联合赛能、丙种球蛋白以及低分子肝素治疗，除了能够起到抗栓以及抗凝作用外，还能在一定程度上予以患者免疫保护，从而最大限度地减少产妇发生感染的风险，降低流产，进而取得较高临床效果。但是仍需要对药物选择、用药调整以及抗感染用药时间等进行研究。 2.4 不良反应 经低分子肝素治疗患者在临床上可能会办法血小板减少、骨质疏松、出血以及母体过敏性反应等一系列不良反应，且大剂量、长期应用低分子肝素会造成肝功能异常，因而需对临床相关指标予以严密监测，并且对药物剂量进行调整。在临床治疗中，低分子肝素会在一定程度上诱导可溶性血管内皮生长因子受体释放，当该物质过量表达时，则会导致蛋白尿、高血压以及低蛋白血症等症状的发生，同时还会在一定程度上增加患者子痫前期风险。而采用维生素D则能对可溶性血管内皮生长因子受体释放起到抑制作用，预防骨质疏松的发生。鉴于此，这就要求临床上采用低分子肝素治疗时，联合维生素D则提高治疗安全性。且因其难以通过母体的胎盘屏障，从而可确保胎儿的安全性，同时因该药物不会分泌于孕妇乳汁中，因而可以在哺乳期间服用。 3总结 综上所述，在复发性流产患者治疗中采用低分子肝素具有积极作用，但也存在一定缺陷与不足，因而确定明确指标、用药剂量、疗效判定等具有重要作用。为提高临床疗效，可联合维生素D、阿司匹林以及免疫球蛋白等药物，并且在临床治疗中对胎儿发育状况、肝功能、血凝、纤溶、肌酐以及胎儿发育情况等指标进行监测，并及时根据患者病情对用药剂量进行调整，旨在确保母婴生命安全。