检出限、校准曲线、空白值

检出限、测定限、最佳测定范围、校准曲线及分析空白

第一节：检出限

1.检出限

为某特定分析方法在给定的置信度内可从样品中检出待测物质的最小浓度或最小量。所谓“检出”是指定性检出，即判定样品中存有浓度高于空白的待测物质。

检出限除了与分析中所用试剂和水的空白有关外，还与仪器的稳定性及噪声水平有关。在灵敏度计算中没有明确噪声的大小，因而操作者可以将检测器的输出信号，通过放大器放到足够大，从而使灵敏度相当高。显然这是不妥的，必须考虑噪声这一参数，将产生两倍噪声信号时，单位体积载气或单位时间内进入检测器的组分量称为检出限。则：

D = 2N / S

式中：N---噪声（mV或A）；

S---检测器灵敏度；

D---检出限，其单位随S不同也有三种：

Dg=2N / Sg, 单位为mg/ml

Dv=2N / Sv, 单位为ml/ml

Dt=2N / St, 单位为g/s

有时也用最小检测量（MDA）或最小检测浓度（MDC）作为检测限。它们分别是产生两倍噪声信号时，进入检测器的物质量（g）或浓度(mg/ml)。

不少高灵敏度检测器，如FID、NPD、ECD等往往用检出限表示检测器的性能。

灵敏度和检出限是两个从不同角度表示检测器对测定物质敏感程度的指标，前者越高、后者越低，说明检测器性能越好。

从而可见，测量方法的检出限于分析空白值、精密度、灵敏度密切相关。他是分析方法的一个综合性的重要计量参数。

2. 检出限的计算方法

1）在《全球环境监测系统水监测操作指南》中规定：给定置信水平为95%时，样品测定值与零浓度样品的测定值有显著性差异即为检出限（D.L）。这里的零浓度样品是不含待测物质的样品。

D.L = 4.6σ

式中：σ—空白平行测定（批内）标准偏差（重复测定20次以上）。

2) 国际纯粹和应用化学联合会（IUPAC）对分析方法的检出限D.L作如下规定。

在与分析实际样品完全相同的条件下，做不加入被测组分的重复测定（即空白试验），测定次数尽可能多（试验次数至少为20次）。算出空白观测值的平均值X b和标准偏差S b。在一定置信概率下，被检出的最小测量值X L 以下式确定：

X L= X b+ K’S b

式中：X b——空白多次测得信号的平均值；

S b ——空白多次测得信息的标准偏差；

K’——根据一定置信水平确定的系数。

与X L-X b (即K’ S b)相应的浓度或量即为检出限:

D.L = X L- X b/ K = k’S b/ K

式中：k ——方法的灵敏度（即校准曲线的斜率）。

为了评估X b和S b，实验次数必须至少20次。

1975年，IUPAC建议对光谱化学分析法取k’=3。由于低浓度水平的测量误差可能不遵从正态分布，且空白的测定次数有限，因而与k’=3相应的置信水平大约为90%。

此外，尚有将K’取为4、4.6、5及6的建议。

3）美国EPASW-846中规定方法检出限：

MDL=3.143δ(δ重复测定7次)

4）在某些分光光度法中，以扣除空白值后的与0.01吸光度相对应的浓度值为检出限。

5）气相色谱分析的最小检测量系指检测器恰能产生与噪声相区别的响应信号时所需进入色谱柱的物质的最小量，一般认为恰能辨别的响应信号，最小应为噪声的两倍。

最小检测浓度系指最小检测量与进样量（体积）之比。

6）某些离子选择电极法规定：当校准曲线的直线部分外延的延长线与通过空白电位且平行于浓度轴的直线相交时，其交点所对应的浓度值及为该离子选择电极法的检出限。

光度分析中，虽然吸光度最小测读值为0.001，灵敏度也以A=0.001所相应的被测物浓度表示，但实际上惯常以A=0.05相应的被测物浓度作为有充分置信度的测定限，即最小能够可靠测定的浓度。这是因为，在吸光度A接近零的情况下，测定值与真实值之比即相对误差趋向无限大。

其次，由于比色皿的成对性不易做到完全匹配，尤其是使用已久的比色皿的成对性不易保证，因此吸光度很小的测量值在不同操作者、不同试验室之间常会不一致，除非操作者很有经验，十分注意比色皿成对性对测量的影响，并在每次测量时予以试验校正。

第二节测定限

测定限为定量范围的两端，分为测定上限与测定下限。

1.测定下限

在测定误差能满足预定要求的前提下，用特定方法能准确地定量测定待测物质的最小浓度或量，称为该方法的测定下限。

测定下限反映出分析方法能准确地定量测定低浓度水平待测物质的极限可能性。在没有（或消除了）系统误差的前提下，他受精密度要求的限制（精密度通常以相对标准偏差表示）。分析方法的精密度要求越高，测定下限高于检出限越多。

美国EPASW-846中规定4MDL为定量下限（RQL），即4倍检出限浓度作为测定下限，其测定值的相对标准偏差约为10%。日本JIS规定定量下限为10倍的MDL。

2.测定上限

在限定误差能满足预定要求的前提下，用特定方法能够准确地定量测定待测物质的最大浓度或量，称为该方法的测定上限。

对没有（或消除了）系统误差的特定分析方法的精密度要求不同，测定上限也将不同。

测定限对于定量分析，进一步计算才能得到与分析物有关的值（例如，各个结果的平均值）。因此，条件更加苛刻，所以测定限总是高于检出限。

3.检测限有三种常用的表示方式

（1）仪器检测下限

可检测仪器的最小讯号，通常用信噪比来表示,当信号与噪声之比大于等于3时，相当于信号强度的试样浓度，定义为仪器检测下限。

（2）方法检测下限

即某方法可检测的最低浓度。通常用低浓度曲线外推法可求的方法检测下限。

（3）样品检测下限

即相对于空白可检测的样品最小含量。样品检测下限定义为：其信号等于测量空白溶液的信号的标准偏差的3倍时的浓度。

检测下限是选择分析方法的重要因素。样品检测下限不仅与方法检测下限有关，而且与空白样品中空白含量以及空白波动情况有关。只有当空白含量为零时，样品检测下限等于方法检测下限。然而，空白含量往往不等于零，空白大小受环境对样品的污染，试剂纯度、水质纯度、容器的质地及操作等因素的影响。因此，由外推法可求得方法检测下限可能很低，但由于空白含量的存在，以及空白含量的波动，样品检测下限可能要比方法检测下限大得多。从实用中考虑，样品检测下限较为有用和切合实际。

第三节最佳测定范围

1.最佳测定范围（也称有效测定范围）。

指在限定误差能满足预定要求的前提下，特定方法的测定下限至测定上限之间的浓度范围。在此范围内能够准确地定量测定待测物质的浓度或量。

最佳测定范围应小于方法的适应范围。对测量结果的精密度（通常以相对标准偏差表示）要求越高，相应的最佳测定范围越小。

分析方法特性关系如图所示。

低浓度最佳测定范围高浓度

适用范围

分析方法特性关系图

2.方法的线性范围

方法的线性范围是指信号与样品浓度呈线性的工作曲线直线部分。通常把相当于10倍空白的标准偏差相应的浓度定为方法的线性范围的定量检测下限。取工作曲线中高浓度时，弯曲处作为方法的线性范围的定量检测上限。好的分析方法要有宽的线性范围。有的分析方法线性范围只有一个数量级，有的分析方法线性范围可达5～6个数量级。同一分析方法可用常量、微量、痕量的物质分析。

第四节校准曲线

校准曲线包括标准曲线和工作曲线，前者用标准溶液系列直接测量，没有经过预处理过程，这对于样品往往造成较大误差；而后者所使用的标准溶液经过了与样品相同的消解、净化、测量等全过程。

凡应用校准曲线的分析方法，都是在样品测得信号值后，从校准曲线上查得其含量（或浓度）。因此，绘制准确的校准曲线，直接影响到样品分析结果的准确与否。此外，校准曲线也确定了方法的测定范围。

1.校准曲线的绘制

用一系列被测物标准溶液，按照标准方法规定的步骤，将被测物转变为有色溶液。制备好的标准系列和空白，在方法选定的波长下，测定吸光度。已被测物浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制校准曲线。

1)对标准系列，溶液以纯溶剂为参比进行测量后，应先作空白校正，然后绘制标准曲线；

2）标准溶液一般可直接测定，但如试样的预处理较复杂致使污染或损失不可忽略时，应和试样同样处理后再测定。

3）校准曲线的斜率常随环境温度、试剂批号和贮存时间等实验条件的改变而变动。因此，在测定试样的同时，绘制校准曲线最为理想，否则应在测定试样的同时，平行测定零浓度和中等浓度标准溶液各两份，取均值相减后与原校准曲线上的相应点核对，其相对差值根据方法精密度不得大于5%～10%，否则应重新绘制校准曲线。

2. 校准曲线的检验

1）线性检验: 即检验校准曲线的精密度。对于以4～6个浓度单位所获得的测量信号值绘制的校准曲线，分光光度法一般要求其相关系数 | r | ≥0.9990，否则应找出原因并加以纠正，重新绘制合格的校准曲线。

2）截距检验：即检验校准曲线的准确度，在线性检验合格的基础上，对其进行线性回归，得出回归方程 y= a+bx ，然后将所得截距a与0作t检验，当取95%置信水平，经检验无显著性差异时，a可做0处理，方程简化为y= bx，移项得x=y/b。在线性范围内，可代替查阅校准曲线，直接将样品测量信号值经空白校正后，计算出试样浓度。

当a与0有显著性差异时，表示校准曲线的回归方程计算结果准确度不高，应找出原因予以校正后，重新绘制校准曲线并经线性检验合格。在计算回归方程，经截距检验合格后投入使用。

回归方程如不经上述检验和处理，就直接投入使用，必将给测定结果引入差值相当于解决a的系统误差。

3) 斜率检验: 即检验分析方法的灵敏度，方法灵敏度是随实验条件的变化而改变的。在完全相同的分析条件下，仅由于操作中的随机误差导致的斜率变化不应超出一定的允许范围，此范围因分析方法的精度不同而异。例如，一般而言，分子吸收分光光度法要求其相对差值小于5%，而原子吸收分光光度法则要求其相对差值小于10%等等。

3. 校准曲线的控制

被测物转变为有色溶液的反应称为显色反应或发色反应。显色反应的介质PH条件、显色剂用量、显色反应的时间和温度、为消除共存物干扰而加入的掩蔽剂、甚至加试剂的顺序，都要按照方法步骤的要求执行。有时，标准系列虽然不像实际试样那样组成复杂，但仍要求与试样进行同样的处理步骤，以便控制校准曲线上的数据点的空白、回收率等因素。

建立校准曲线时，测量吸光度的参比有两种选择。

第一种方法用纯溶剂作参比，两个比色皿都放溶剂时，“样品比色皿”的吸光度测定值为比色皿成对性校正值，此后所有样品吸光度测定值都须扣除

此值，进行校正。然后，以纯溶剂为参比，测定空白及标准系列的吸光度，绘制校准曲线。

第二种方法直接用空白为参比。当两个比色皿都放空白时，测定比色皿成对性校正值，然后测定标准系列的吸光度，绘制校准曲线。两种方法得到的两条校准曲线互相平行，但第一种方法可测定空白的水平，后一种方法不能测定空白，理论上校准曲线通过原点。若空白为零，两条校准曲线重合。无论用什么作参比，实样测定时应该使用与建立校准曲线相同的比色皿和同样的参比。

比色皿的成对性校正对于使用已久的比色皿是必要的，尤其是测量吸光度很小的样品时，校正可保证测量值的可靠性和重复性。

第五节：分析空白

一.分析空白的主要来源和控制措施:

1. 环境对样品的沾污.

主要是由空气中的污染气体和沉降微粒引起的.普遍实验室中每

立方米空气中含有数百微克的微粒.这些微粒含有多种元素,因而可

引起多种和痕量元素的沾污.来自环境的沾污不但显著,而且变动性

大.应采取局部或整个实验室的防尘与空气净化措施.

2. 试剂对样品的沾污

试剂对样品的沾污随试剂用量而变化.对一定的试剂用量是恒定

的.样品处理过程中用量最多的是水和酸。

3.器皿对样品沾污

贮存、处理样品所用的一切器皿，如烧杯、瓶子、过滤器、研钵等，由于其材质不够纯或者未洗涤干净均可能沾污样品。在痕量分析中应选用高纯惰性材料制成的器皿，并运用合适的清洗技术。聚四氟乙烯、透明的合成石英的高压聚乙烯是比较合适的器皿材料。

4.分析测试者对样品的沾污

分析测试者用手触摸样品可引起多种元素的沾污；分析测试者的花妆品常常不知不觉地带来许多元素的沾污；分析测试者使用的内服和外用药物也常常沾污样品；以及分析测试者若不注意个人卫生也会引起样品的沾污。所以，分析测试者不但要具有正确熟练的操作技巧，而且要知道自身对样品可能带来什麽沾污，以采取消除沾污的必要措施。根据有关文献报道，将分析测试者可能引入地沾污概述于表2-6中，

二.分析空白的监测和空白值的扣除

空白值波动较大，往往在百分之几十，甚至百分之几百的水平上波动。因而痕量与超痕量分析中，扣除空白是比较困难的，也是不可靠的。可靠并行之有效的方法是把分析空白降至可以忽略不记的程度，同时在分析过程中作

空白的平行测定，以监视分析过程。若分析空白明显的超过正常值，则表明本次分析测定过程有严重的沾污，平行样品的测定结果不可靠。

在分析空白主要来自试剂的沾污时，空白值比较稳定，若有必要，可以扣除空白值。为获得可靠的空白值，应进行多次重复测定，算出空白值及其置信限：B ±t0.95(S B/n2)。

三坐标测量系统的校准与检定的区别

三坐标测量系统的校准与检定的区别 ISO10012—1《计量检测设备的质量保证要求》标准将“校准”定义为：“在规定条件下，为确定计量仪器或测量系统的示值或实物量具或标准物质所代表的值与相对应的被测量的已知值之间关系的一组操作。” 注： 1校准结果可用以评定计量仪器、测量系统或实物量具的示值误差，或给任何标尺上的标记赋值； 2校准也可用以确定其他计量特性； 3可将校准结果记录在有时称为校准证书或校准报告的文件上； 4有时校准结果表示为修正值、校准因子或校准曲线。 ISO／IEC指南25—1990《校准和检验试验室技术能力的通用要求》将“检定”定义为：“通过校验提供证据来确认符合规定的要求(ISO8402／DADI—3.37，根据本指南的目的增加了注解)。” 注：1为了与计量仪器的管理相衔接，检定的目的是校验计量仪器的示值与相对应的已知量值之间的偏差，使其始终小于有关计量仪器管理的标准、规程或规范中所规定的最大允许误差。 2根据检定的结果对计量仪器作出继续使用、进行调查、修理、降级使用或声明报废的决定。任何情况下，当检定完成时，应在计量仪器的专门记录上记载检定的情况。 国际计量组织对检定给出的定义是：“查明和确认计量器具是否符合法定要求的程序，它包括检查、加标记和(或)出具检定证书。” 根据以上定义，可以看出校准和检定有本质区别。两者不能混淆，更不能等同。 现就两者之间的主要区别做如下讨论。 一、目的不同 校准的目的是对照计量标准，评定测量装置的示值误差，确保量值准确，属于自下而上量值溯源的一组操作。这种示值误差的评定应根据组织的校准规程作出相应规定，按校准周期进行，并做好校准记录及校准标识。校准除评定测量装置的示值误差和确定有关计量特性外，校准结果也可以表示为修正值或校准因子，具体指导测量过程的操作。例如，某机械加工组织使用的卡尺，通过校准发现与计量标准相比较已大出0.2mm，可将此数据作为修正值，在校准标识和记录中标明巳校准的值与标准器相比较大出的0.2mm的数值。在使用这一计量器具(卡尺)进行实物测量过程中，减去大出0.2mm的修正值，则为实物测量的实测值。只要能达到量值溯源目的，明确了解计量器具的示值误差，即达到了校准的目的。 检定的目的则是对测量装置进行强制性全面评定。这种全面评定属于量值统一的范畴，是自上而下的量值传递过程。检定应评定计量器具是否符合规定要求。这种规定要求就是测量装置检定规程规定的误差范围。通过检定，评定测量装置的误差范围是否在规定的误差范围之内。 二、对象不同 校准的对象是属于强制性检定之外的测量装置。我国非强制性检定的测量装置，主要指在生产和服务提供过程中大量使用的计量器具，包括进货检验、过程检验和最终产品检验所使用的计量器具等。 检定的对象是我国计量法明确规定的强制检定的测量装置。《中华人民共和国计量法》第九条明确规定：“县级以上人民政府计量行政部门对社会公用计量标准器具，部门和企业、事

移液器自校准SOP

移液器自校准操作程序 1、目的：保证移液器加样的准确性。本标准操作程序的改动，要由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室质量负责人、室技术负责人。 2、范围：各种品牌、型号的固定、可调和多通道移液器。 3、职责：负责工作人员应及时定期送至计量所校准移液器。 4.程序： 4.1、每年送一套枪到时计量所校准，经校准后的移液枪对天平进行校准。 4.2、蒸馏水称量法 4.3、将本室校准的枪，与经计量所校准的枪为标准，再次校准。 5.校准环境和用具要求： 5.1 室温：20-25℃，测定中波动范围不大于土0.5℃ 5.2 电子天平：放置于无尘和震动影响的台面上，房间尽可能有空调。称量时为保证天平内的湿度（相对湿度60%-90%），天平内应放置一装有10ML蒸馏水的小烧杯。 5.3 小烧杯：5-10ML 体积。 5.4 选定标准体积：温度为20-25℃的去气双蒸水。 5.5 选定校准体积 5.5.1 校准最大的体积； 5.5.2 加样器标定体积的中间体积。 5.5.3 最小可调体积（不小于拟校准体积的10%）如为固定体积加样器则只有一种校准体积。 6. 校准步骤 6.1将加样枪调至拟校准体积，选择合适的吸头； 6.2调好天平； 6.3来回吸吹蒸馏水3次，以使吸头湿润，用纱布拭干吸头； 6.4垂直握住加样器，将吸头浸入液面2-3MM处，缓慢（1—3秒）一致的吸取蒸馏水； 6.5 将吸头离开液面，靠近管壁，去掉吸头外面的液体； 6.6 将加样器以30度角放入称量烧杯中，缓慢一致地将加样枪压至第一档，等

待1-3秒，再压至第二档，使吸头里的液体完全排出； 6.7 记录称量值； 6.7.1擦干吸头外面； 6.7.2按上述步骤称量10次； 6.7.3取10次测定结果的均值作为最后加样器吸取的蒸馏水重量，按附表1所列蒸馏水Z因子计算体积。 6.7.4按校准结果调节加样器。 附表：蒸馏水重量与体积在不同温度的换算因子（Z因子） 温度（℃）800 853 907 960 1013 1067 15 1.0018 1.0018 1.0019 1.0019 1.0020 1.0020 15.5 1.0018 1.0018 1.0019 1.002 1.0020 1.0020 16 1.0019 1.0020 1.0020 1.0021 1.0021 1.0022 16.5 1.0020 1.0020 1.0021 1.0022 1.0022 1.0023 17 1.0021 1.0021 1.0022 1.0022 1.0023 1.0023 17.5 1.0022 1.0022 1.0023 1.0023 1.0024 1.0024 18 1.0022 1.0023 1.0024 1.0024 1.0025 1.0025 18.5 1.0023 1.0024 1.0025 1.0025 1.0026 1.0026 19 1.0024 1.0025 1.0025 1.0026 1.0027 1.0027 19.5 1.0025 1.0026 1.0026 1.0027 1.0028 1.0028 20 1.0026 1.0027 1.0027 1.0028 1.0028 1.0029 20.5 1.0027 1.0028 1.0028 1.0029 1.0030 1.0030 2.支持性文件 《全国临床检验操作常规》主编：叶应妩第二版中中华人民共和 国卫生部医政司 1997年 《临床实验室质量管理》主编杨振华人民出版社 2003.1第一版《分子生物学分册》 4.相关表格 移液器自校准登记表

标准曲线

1、标准曲线的本质 分析检测中的标准曲线是指一系列已知含量（浓度/量）的物质与仪器响应/信号之间的关系，数学处理就是曲线方程，图形表示就是标准曲线（图1）。 标准曲线的目的是可以根据标准曲线查出待测物质的含量。当我们得到一系列已知含量的物质的响应后，就会去建立函数关系，数学上称曲线拟合，由于直线最为简单，所以常常用直线方程加以拟合，当然会用到多项式拟合等其他方式。 标准曲线的核心问题要解决： 1、能找到确切浓度的标准物质或标准品。 2、标准系列和待测物质一定要有相同和一致的基体，因为样品基体可能会干扰仪器的响应，从这个意义上讲，样品的前处理实际就是提供标准和样品同样的基体环境，尽量祛除干扰基体。 所以最好的标准系列应该是样品基体匹配的标准系列。而方法建立过程中首先要考虑的当然是基体干扰的问题，推荐用标准加入曲线和Youden曲线分别考察样品基体所带来的乘积性干扰和加和性干扰。 标准加入曲线就是在样品中加入一系列标准，然后考察该标准加入曲线和标准曲线斜率的统计学差异，若有差异需考虑用标准加入法定量；而Youden曲线就是对样品做一系列稀释，然后用稀释倍数如1/10,1/5,1/2,1对仪器响应做曲线，考察该Youden曲线的截距与0的差别，若有差别则提示有加和性干扰，此时测定值要减去该截距才是真实值。 只有解决了标准曲线与样品基体的匹配问题，我们的定量才可靠。 内标法和替代物的使用则是为了解决仪器和前处理的影响问题。

2、标准曲线的做法 按《基于标准样品的线性校准》推荐： 1、标准曲线的浓度范围应覆盖正常操作条件下的被测量范围； 2、标准样品的组分尽量与被测样品组分一致； 3、标准样品的浓度值应等距离的分布在被测量范围； 4、标准样品的个数至少应有3个浓度； 5、每个标准点至少重复2次，这个重复是指从稀释开始；如果国家标准有相应的浓度系列推荐，尽量按国家标准，如果你要偷懒，比如我要减少标准点，至少要有理论标准支撑，比如至少要3个浓度。 工作中我们经常采用线性校准，因为线性方程最为简洁。 3、标准曲线的检验 标准曲线的检验是实际操作中最大的难点，也是工作中误区和争议最多的话题，比如GB/T 就将标准曲线的检验分为：精密度检验，截距检验和斜率检验，但并未出示具体的检验方法。

游标卡尺校准及操作规范

1. 目的 为了确保通用卡尺处于良好的运行状态，确保其寿命和精密度，防止损坏，特制订此作业说明。 2. 适用范围 适应于公司卡尺（数显卡尺、带表卡尺）管理与校准。 3. 术语和定义 通用卡尺：是用来测量外尺寸和内尺寸、盲孔、阶梯形孔及凹槽等相关尺寸的量具。 4. 职责与权限 量校员：负责按量仪校准计划按时实施校准。 仪器使用人员：按文件规定使用保养。 5. 输入信息 无 6.输出信息 各登记表及内校记录 7. 工作说明 使用要点 卡尺表面应镀层均匀、标尺标记应清晰，表蒙透明清洁，不应有锈蚀、碰伤、毛刺、镀层脱落及明显划痕，无目视可见的断线或粗细不匀等以及影响外观质量的其他缺陷； 卡尺上必须有制造厂名或商标、标志、分度值和出厂编号； 使用中和修理后的卡尺，允许有不影响使用准确度的外观缺陷； 尺框沿尺身移动应手感平稳，不应有阻滞或松动现象，数显应清晰、完整，无黑斑和闪跳现象，各按钮功能稳定、工作可靠； 紧固螺钉的作用应可靠，微动装置的空程，新制造的应不超过1/4转，使用中和修理后的应不超过1/2转； 卡尺在使用前，使用者应先检查卡尺外表有没有明显的变形、缺角、碰伤、生锈、螺丝松动、以及校准合格证的有效期是否失效等异常现象（如有应立即交到仪校员校准排除异常方可使用），其次检查刻度清晰，指 针能正确归零将其归零，不能归零时应作适当调整后方可进行测量。测量前应先把量爪和被测工件表 面的灰尘、油污等擦干净，以免碰伤游标卡尺量爪面和影响测量精度，同时检查各部位的相互作用。 如尺框和微动装置移动是否灵活,如是数显卡尺，应确认数显卡尺电池电量是否充足（当数显数字不完 整应立即更换电池），以及紧固螺钉是否能起作用等。 使用时，要掌握好测量面与工作表面接触时的压力，既不能太大，也不能太小，在测量面与工件快要接触时，有

移液器校准操作标准程序

杭州迪恩科技有限公司 标准管理规程 1. 目的：建立移液器校准标准程序。 2. 范围：适用于实验室移液器的校准。 3. 责任者：实验员。 4. 程序： 4. 1校准必须用分析天平，天平刻度容量值等级要与移液器测试器量相匹配； 4. 2测试液体 水为去离子蒸馏水，并且静置于称量室24小时以上； 4. 3测试环境 无通风的房间，水温恒定在±0.5℃，移液器和空气温度在20－25℃之间，相对湿度必需在55％以上；

4. 4选定校准体积： 4. 4. 1 拟校准体积； 4. 4. 2 移液器标定体积的中间体积； 4. 4. 3 最小可调体积（不小于拟定体积的10%） 4. 5校准步骤 4. 5. 1 将移液器调至拟校准体积，选择合适的吸头； 4. 5. 2 调节好天平； 4. 5. 3 来回吸吹蒸馏水3次，以使吸头湿润，用干净纸巾拭干吸头； 4. 5. 4 垂直握住移液器，将吸头浸入液面2～3mm处，缓慢（1～3秒）一致地吸取蒸馏水； 4. 5. 5 将吸头离开液面，靠在管壁，去掉吸头外部的液体； 4. 5. 6 将移液器以30°角放入称量烧杯中。缓慢一致地将移液器压至第一档，等待1～3秒，再压至第二档，使吸头里的液体完全排出； 4. 5. 7 记录称量值； 4. 5. 8 擦干吸头外面； 4. 5. 9 按以上步骤称量10次； 4. 5. 10 取10次测量值的均值作为最后移液器吸取的蒸馏水重量，将计算结果比较表1的限定值。如果在表1限定值范围内，移液器的校准为正确，反之，移液器必须再进行调整和校验。 表1

用维修工具进行调整 A、将维修工具套进位于把手顶部外置的调整螺母槽中。 B、顺时针方向转动调整螺母以增加容量，反 时针转动螺母以减少容量。 C、根据上面列出数据在调整后对校准结果。 4. 7准确度（系统误差） 准确度是移液量和移液器选定量两者间的误差值。 A=V- V0 A=准确度 V＝平均容量 V0=各容量 精确度可用相对值表示 A%=100%*A/V 精确度（随机误差） 精确度（CV）反映了移液的重复性误差，它表示标准偏差或变异系数。 CV＝100％*S/V S=标准偏差 V=平均容量 N＝测定次数 4. 8 移液器每个月底校准一次

校准与检定的区别总结

校准与检定的区别 校准与检定的区别 看来大家伙还是经常把“校准”和“鉴定”混淆，以前我已常如此，后来找了些资料，才算明白。现分享给大家，共同学习。 校准与检定的主要区别 在认证审核过程中，一些审核员经常向受审核方提出偏离标准的要求。其中一个明显的表现就是不能将校准和检定的概念加以区分。例如，根据实际需要及我国法制计量管理的规定，组织的测量装置通过校准就可以满足要求，而审核员却开出了“没有检定”的不合格报告，强制要求组织按检定实施控制，并强制要求组织到专业的计量部门进行检定，给组织造成了较大的经济损失。 ISO1OO12—1《计量检测设备的质量保证要求》标准将“校准”定义为： “在规定条件下，为确定计量仪器或测量系统的示值或实物量具或标准物质所代表的值与相对应的被测量的已知值之间关系的一组操作。 注： 1.校准结果可用以评定计量仪器、测量系统或实物量具的示值误差，或给任何标尺上的标记赋值； 2.校准也可用以确定其他计量特性； 3.可将校准结果记录在有时称为校准证书或校准报告的文件上；4 有时核准结果表示为修正值、校准因子或校准曲线。 ISO／IEC指南25—199O 《校准和检验试验室技术能力的通用要求》将“检定”定义为： “通过校验提供证据来确认符合规定的要求（ISO 84O2／DADI—3.37，根据本指南的目的增加了注解）。

注： 1.为了与计量仪器的管理相衔接，检定的目的是校验计量仪器的示值与相对应的已知量值之间的偏差，使其始终小于有关计量仪器管理的标准、规程或规范中所规定的最大允许误差。 2. 根据检定的结果对计量仪器作出继续使用、进行调查、修理、降级使用或声明报废的决定。任何惰况下，当检定完成时，应在计量仪器的专门记录上记载检定的情况。? 国际计量组织对检定给出的定义是： “查明和确认计量器具是否符合法定要求的程序，它包括检查、加标记和（或）出具检定证书。” 根据以上定义，可以看出校准和检定有本质区别。两者不能混淆，更不能等同。现就两者之间的主要区别做如下讨论。 一、目的不同 校准的目的是对照计量标准，评定测量装置的示值误差，确保量值准确，属于自下而上量值溯源的一组操作。这种示值误差的评定应根据组织的校准规程作出相应规定，按校准周期进行，并做好校准记录及校准标识。校准除评定测量装置的示值误差和确定有关计量特性外，校准结果也可以表示为修正值或校准因子，具体指导测量过程的操作。例如，某机械加工组织使用的卡尺，通过校准 发现与计量标准相比较已大出O.2mm，可将此数据作为修正值，在校准标识和记录中标明巳校准的值与标准器相比较大出的O.2mm的数值。在使用这一计量器具（卡尺）进行实物测量过程中，减去大出O.2mm的修正值，则为实物测量的实测值。只要能达到量值溯源目的，明确了解计量器具的示值误差，即达到了校准的目的。 检定的目的则是对测量装置进行强制性全面评定。这种全面评定属于量值统一的范畴，是自上而下的量值传递过程。检定应评定计量器具是否符合规定要求。这种规定要求就是测量装置检定规程规定的误差范围。通过检定，评定测量装置的误差范围是否在规定的误差范围之内。 二、对象不同 校准的对象是属于强制性检定之外的测量装置。我国非强制性检定的测量装置，主要指在生产和服务

通用卡尺校准作业指导书3

1.目的 建立通用卡尺校准作业指导书,规范通用卡尺的校准方法,減少人为误差,提高量測准确度.本校准程序可供本实验室相关人員,对于通用卡尺类之校准方法及步骤,作参考遵循依据.另可供本实验室新进人員教育训练,及提升技术能力. 2.适用范围 本程序适用于符合下列条件的游标卡尺、帶表卡尺、数显卡尺： 本作业指导书规定的基本要求,如客戶有特殊要求,可作适当增刪. 3.环境设备条件和校准項目 3.1环境条件 3.1.1环境溫度:20±2℃. 3.1.2相对湿度:40%-60%R.H. 3.1.3无影响仪器正常工作的电磁场和机械振动. 3.2校准项目 3.2.1外观及各部分相互作用; 3.2.2測量面的平面度; 3.2.3圆弧內量爪的基本尺寸; 3.2.4圆弧內量爪的平行度; 3.2.5刀口內量爪的基本尺寸; 3.2.6刀口內量爪的平行度; 3.2.7零值误差;

3.2.8示值变动性: 3.2.9数字显示器的示值稳定性; 3.2.10深度示值误差; 3.2.11示值误差; 3.3校准用设备 3.4校准方法 直接量測法:用待校准卡尺直接量測标准量块. 4.校准程序 4.1外观及各部分相互作用检查 4.1.1目力观察卡尺表面有无锈蚀、碰伤、毛刺等明显划痕，标尺标记是否清 晰，表蒙是否清洁，以及有无其它影响外观质量的缺陷。 4.1.2尺框沿尺身移动是否手感平稳，有无阻滯和松动现象；数字显示是否清 晰、完整；各按鈕及螺钉功能是否稳定、工作可靠。 4.2校准前准备 4.2.1 用99.5%的酒精(配合无尘紙)清洁待校件工作測量面.

4.2.2 将待校件和使用标准件放于平台上恒溫(在以上标准溫度下)2个小时以上. 4.2.3 校准点分布表: 4.3 測量面的平面度 4.3.1 用刀口直尺在外量爪測量面的长边,短边和对角线的位置上进行光隙法 測量,其平面度根据各方位的间隙情況确定. 4.3.2 用刀口直尺在深度測量面(帶深度測量杆)的长边,短边和对角线的位置 上进行光隙法測量,其平面度根据各方位的间隙确定. 4.4 圆弧內量爪的基本尺寸和平行度 4.4.1 闭合待校卡尺外量爪,用外径千分尺在內量爪距外端2mm处开始測量內 量爪平于尺身的內量爪尺寸(全內量爪范围). 4.4.2 內量爪尺寸偏差以測量值与基本尺寸之差來确定. 4.4.3 內量爪平行度以其全长范围的量測最大值与最小值之差工來确定. 4.5 刀口內量爪的基本尺寸和平行度 4.5.1 将尺寸为10mm的量块平持于两外测量爪测量面之间,紧固螺钉,以量 块能在量爪面间滑动面不脱落为准.用外径千分尺沿刀口内量爪在 平行于尺身方向测量,外径千分尺读值记Xi(mm为单位). 4.5.2 刀口內量爪尺寸偏差 △R = Ximax – 10 4.5.3 刀口內量爪平行度

2016年最新检定校准检测检验等名词解释

检定、校准、检测、检验、法定计量检定机构考核、检测校准实验室认可、计量认证、审查认证名词解释 检定（verification） 查明和确认计量器具是否符合法定要求的程序。检定是量值传递式溯源的一种方式。 检定范围主要指《中华人民工和国依法管理的计量器具目录》中强制检定的计量器具。 检定必须依据计量检定规程。检定必须给出计量器具合格与否的判定。检定应按计量检定规程规定的周期执行。 校准（calibration） 是指在规定条件下，为确定计量器具示值与对应的计量标准复现量值之间关系的一组操作。 校准是量值传递溯源的一种方式。 校准范围主要指《中华人民共和国依法管理的计量器具目录》中规定非强制检定的计量器具。校准依据应当优先选择国家校准规范，没有国家校准规范可根据计量检定规程或相关产品标准，使用说明书等技术文件编制校准技术条件，再经技术机构技术负责人批准后，方可使用。 校准只给出与其示值偏离数据或曲线，但不必判定仪器合格与否。校准也应有校准周期。 检测（test） 对给定的产品、材料、设备、生物体、物理现象、工艺过程或服务，按规定程序确定一种或多种特性或性能的技术操作。 从定义可以看出，"检测"仅是一种技术操作，它只需要按规定程序的操作提供所测结果。不需要给出测数据合格与否的判定。 检验（inspection） 对实体的一个或多个特性进行诸如测量、检查、试验和度量，并将其结果与规定的要求进行比较，以确定每项特性的合格情况所进行的活动。 从定义可以看出，"检验"不仅提供数据，还须对规定要求进行比较后，作出合格与否的判定。 法定计量检定机构考核 法定计量检定机构考核是政府计量行政部门对其依法设置或授权建立的计量检定机构进行的全面考核。 它是具有强制要求的行为。其主要考核依据JJF1069-2003《法定计量检定机构考核规范》。由国家和省级政府计量主管部门组织考核，考核合格颁发证书和坚定/校准专用章。 经考核核准项目，依据现行计量检定规程和校准规范，开展计量检定和计量校准。5年考核周期，到期进行复审，周期内可适当进行监督评审。 检测、校准实验室认可 检测、校准实验室认可，是对检测校准实验室具有某类型检测、校准能力的考核。 检测、校准实验室认可采取自愿行为，任何一、二、三方的检测、校准实验室均可申请。其考核依据GB/T15481-2000《检测和校准实验室通用要求》或CNAL/AC01-2000。 由中国实验室国家认可委员会组织专家考核。考核合格后颁发国家实验室认可证书，使用"CNAL"认可标志。考核周期为5年，到期复审。 计量认证 计量认证是国家政府计量行政部门对产品质检机构的能力的考核。 其目的是保证质检机构为社会出具公正数据准确可靠。 计量认证是政府强制性行为。是由国家认监委及地方行政部门组织考核。计量认证主要依据质技监认函[2000]046号文《产品质量检验机构计量认证/审查认可（验收）评审准则》和GB/T15481-2000《检测和校准实验室能力的通用要求》。

通用卡尺校准规范

菲恩（科技）江门有限公司 卡尺校准规范 文件编编号： 发布日期： 实施日期： 1、目的 对内部的卡尺校准，确保准确度和实用性保持完好。 2、规范性引用文件 本规范引用下列文件： JJG 30-2012 通用卡尺检定规程。 3、范围 本规范适用于公司内部分度值或分辨力为：0.01mm,0.02mm,0.05mm;测量范围：0～500mm，各种规格游标卡尺、带表卡尺、数显卡尺的首次校准、使用中校准和后续校准，其它类型卡尺也可参照执行。 4、校准标准 外校合格的标准量块 5、环境条件 5.1 校准室内温度（20±5）℃，恒温时间不少于2h. 5.2 校准室内湿度不超过80%RH 5.3校准前，应将被校卡尺及量块等校准用设备同时置于平大理石平台上或木桌上，其平衡温度时间见 表-1的规定。 表-1 平衡温度时间 6、技术要求 6.1零值误差 通用卡尺量爪两测量面相接触（深度通用卡尺的主标尺基准面和测量面在同一平面）时，由表上的“零”标记和“尾”标记与主标尺相应标记应相互重合。其重合度应符合表-2的规定。 带表卡尺部超过不超过分度值的1/2，数显卡尺不超过0.01mm. 6.3示值误差 应符合表-3的规定，带深度测量杆的卡尺，深度测量杆在20mm点的示值误差应不超过1个分度值。

表-3 通用卡尺的示值误差 5、校准方法 5.1零值误差; 5.1.1 移动通用卡尺的尺框，使通用卡尺的量爪两外侧面接触，分别在尺框紧固和松开的情况下， 用目力观察“零”标记和“尾’标记与主标尺相应标记的重合度。必要时用工具显微镜校准。 5.1.2 对于深度通用卡尺，将尺框基准面与尺身测量面同时与大理石平台接触。 5.2示值变动性 5.2.1在相同条件下，移动尺框，是电子数显卡尺或带表卡尺两外测量面接触，重复测量10次读 数。示值变动性以最大与最小读数的差值确定。 5.3示值误差 5.3.1川3级或5等量块校准 5.3.2受校点的分布：对于测量范围在300mm 内的卡尺，不少于均匀分布3点，如测量范围为（0～ 150mm ）的卡尺，其受教点为30mm;60mm;90mm;如测量范围为（0～300mm ）的卡尺，其受校点为 101.30mm ；102.60mm ；291.90mm ；对于测量范围大于300mm 的卡尺，不少于均匀分布6点，如测量范围为（0～500mm ）的卡尺，其受校点为 80mm ；161.30mm ；240mm ；321.60mm ；400mm ；491.90mm.根据实际使用情况可以适当增加受校点位。 5.3.3校准时每一受校点应在量爪的里端和外端两位置校准，量块工作面的长边和卡尺测量面长 边应垂直如;图-1 图-1 5.3.4对于深度通用卡尺，校准时按受校尺寸依次将两组同一尺寸的量块平行放置在一级平板上， 使深度尺的基准面长边和量块工作面的长边方向垂直接触，在移动尺身，使其深度尺测量面和一级平板面接触。校准时量块分别置于深度尺基准面的里端和外端两位置进行校准；如图-2 里端

移液器使用校准和管理的标准操作规程新

移液器使用校准和管理的标准操作规 程新

移液器使用、校准和管理的标准操作规程 【目的】 本规程规定了移液器使用、校准和管理的标准操作规程，使操作人员和移液器的管理人员能够有章可循，保证移液器的使用、校准和管理符合GLP规范的要求。 【规程】 1 移液器的使用 1.1选择量程合适的移液器：移液器只能在特定量程范围内准确移 取液体，如超出最低或最大量程，会损坏移液器并导致计量不 准； 1.2 设定容量值 1.2.1 粗调：经过调节旋钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值； 1.2.2 细调，当容量值接近设定值以后，应将移液器刻度显示窗平行 放至自己的眼前，经过调节旋钮慢慢地将容量值调至预想 值，从而避免视觉误差所造成的影响； 1.2.3 设定容量值时的注意事项：在调节量程时，如果要从大致积调 为小体积，则按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可。 但如果要从小体积调为大致积时，则应先顺时针旋转刻度旋 钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样能够保证量 取的最高精确度。在设定容量值的过程中，禁止将按钮旋出 量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液器。

1.3吸液嘴（枪头）的装配：把白套筒顶端插入吸液嘴，在轻轻用 力下压的同时，把手中的移液器按逆时针方向旋转至吸液嘴卡紧。切记用力不能过猛，更不能采取剁吸头的方法来进行安装。吸液嘴卡紧的标志是略为超过O型环，并能够看到连接部分形成清晰的密封圈。； 1.4预洗吸液嘴：在安装了新的吸液嘴或增大了容量值以后，应该 把需要转移的液体吸取、排放两到三次，确保移液工作的精度和准度； 1.5吸液：先将四指并拢握住移液器上部，用拇指按住塞杆顶端的 按钮，向下按到第一停点，再将吸头垂直浸入液面2~3mm，缓慢平稳松开按钮，吸上液体，并停留1～2秒钟（粘性大的溶液可加长停留时间）； 1.6 移液：缓慢抬起移液器取出吸液嘴，确保吸液嘴外壁无残留液 体。可用定性滤纸抹去吸嘴外面可能黏附的液滴。小心勿触及吸液嘴口； 1.7 目测吸入的液体体积是否合理； 1.8 放液：将吸液嘴贴到容器内壁并保持20°-40°倾斜，平稳地把按 钮压到第一停点，停1-2s（粘性大的液体要加长停留时间）后，继续按压到第二停点，排出残余液体。松开按钮，然后将吸液嘴沿着内壁向上移开； 1.9 按吸头弹射器除去吸头，吸取不同样本液体时必须更换吸头； 2 移液器的校准

检出限 测定限 最佳测定范围 校准曲线及分析空白

检出限、测定限、最佳测定范围、校准曲线及分析空白 第一节：检出限 1.检出限 为某特定分析方法在给定的置信度内可从样品中检出待测物质的最小浓度或最小量。所谓“检出”是指定性检出，即判定样品中存有浓度高于空白的待测物质。 检出限除了与分析中所用试剂和水的空白有关外，还与仪器的稳定性及噪声水平有关。在灵敏度计算中没有明确噪声的大小，因而操作者可以将检测器的输出信号，通过放大器放到足够大，从而使灵敏度相当高。显然这是不妥的，必须考虑噪声这一参数，将产生两倍噪声信号时，单位体积载气或单位时间内进入检测器的组分量称为检出限。则： D = 2N / S 式中：N---噪声（mV或A）； S---检测器灵敏度； D---检出限，其单位随S不同也有三种： Dg=2N / Sg, 单位为mg/ml Dv=2N / Sv, 单位为ml/ml Dt=2N / St, 单位为g/s 有时也用最小检测量（MDA）或最小检测浓度（MDC）作为检测限。它们分别是产生两倍噪声信号时，进入检测器的物质量（g）或浓度(mg/ml)。 不少高灵敏度检测器，如FID、NPD、ECD等往往用检出限表示检测器的性能。

灵敏度和检出限是两个从不同角度表示检测器对测定物质敏感程度的指标，前者越高、后者越低，说明检测器性能越好。 从而可见，测量方法的检出限于分析空白值、精密度、灵敏度密切相关。他是分析方法的一个综合性的重要计量参数。 2. 检出限的计算方法 1）在《全球环境监测系统水监测操作指南》中规定：给定置信水平为95%时，样品测定值与零浓度样品的测定值有显著性差异即为检出限（D.L）。这里的零浓度样品是不含待测物质的样品。 D.L = 4.6σ 式中：σ—空白平行测定（批内）标准偏差（重复测定20次以上）。 2) 国际纯粹和应用化学联合会（IUPAC）对分析方法的检出限D.L作如下规定。 在与分析实际样品完全相同的条件下，做不加入被测组分的重复测定（即空白试验），测定次数尽可能多（试验次数至少为20次）。算出空白观测值的平均值X b和标准偏差S b。在一定置信概率下，被检出的最小测量值X L 以下式确定： X L= X b+ K’S b 式中：X b——空白多次测得信号的平均值； S b ——空白多次测得信息的标准偏差； K’——根据一定置信水平确定的系数。 与X L-X b (即K’ S b)相应的浓度或量即为检出限:

通用卡尺自校规程

通用卡尺自校标准 1 范围 本标准只适用于本公司内部分度值（游标类和表类）或分辨力（数显类）为0.01和0.02 mm通用卡尺,测量范围上限至500mm通用卡尺的后续检定。 2 参考文献 本标准参考文献：JJG 30—2012《通用卡尺》 3 计量器具控制 3.1 校准条件 3.1.1 检定室内温度(20±5)℃，湿度不超过80％RH。 3.1.2 被校卡尺和量块等校准设备应同时置于木桌上恒温2小时后校准。 4 校准方法 4.1 外观 4.1.1 目力观察。卡尺表面镀层应均匀,标尺标记应清晰,表蒙透明清洁。不应有影响测量的锈锈蚀、碰伤、毛刺、镀层脱落以及明显划痕,无目力可见的断线或粗细不匀。(外观缺陷只要 不影响使用准确度) 4.1.2 卡尺上必须有制造厂名或商标、分度值和出厂编号。 4.2 各部分相互作用 拉动尺框手感应平稳,不应有阻滞或松动现象。数字显示应清晰、完整，无黑斑和闪 跳现象。各按钮功能稳定、可靠。紧固螺钉作用可靠。 4.3 各部分相对位置 目力观察。圆标尺的指针尖端应盖住短标记长度的30％～80％。指针末端与标尺标记 表面之间的间隙应不超过0.7mm（指分度值为0.01和0.02mm的)。 4.4 圆弧内量爪的基本尺寸和平行度表 1 基本尺寸用外径千分尺沿卡尺内量爪在平行于尺身方向校准。圆弧内量爪的尺寸偏差为±0.01mm。 平行度用外径千分尺在内量爪距外端2mm处开始检定，以全长范围内最大与最小尺寸之差确定。不能超出0.01mm。 4.5 刀口内量爪的基本尺寸和平行度 先将1块尺寸为10mm的3级或6等量块的长边夹持于两外量爪测量面之间，紧固螺钉后量块能滑动而不脱落。用测力为（6～7）N的外径千分尺沿刀口内量爪在平行于尺身方向检定。 平行度用外径千分尺沿量爪在平行于尺身方向测量。以刀口内量爪全长范围内最大与最 小尺寸之差确定。 表1 刀口内量爪的尺寸和平行度 mm

可调式移液器的标准操作、维护保养和校准程序

一、目的：规范仪器设备的操作程序，保证加样器的正常状态。 二、适用范围：本实验室加样器的操作。 三、职责：实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。 四、操作步骤： 1、设定容量值：转动加样器的调节旋钮，反时针方向转动旋钮，可提高设定移 液量。顺时针方向转动旋钮，可降低设定移液量。在调整设定移液量的旋钮时，不要用力过猛，并应注意使移液器显示的数值不超过其可调范围。 2、预洗：当装上一个新吸头时应预洗吸头，先吸入一次液体并将之排回原容器 中。 3、吸液： [1] 选择合适的吸头安放在移液套筒上，稍加扭转压紧吸嘴使之与套筒之间无空 气间隙。 [2] 取液之前，所取液体应在室温（15℃－25℃）平衡。 [3] 把按钮压至第一停点，垂直握持加样器，使吸头浸入液面下2~3 毫米处,然 后缓慢平稳地松开按钮，吸入液体，等一秒钟，然后将吸头提离液面，贴壁停留2-3秒，使管尖外侧的液滴滑落。 4、放液： [1] 将吸头口贴到容器内壁底部并保持100~40°倾斜。 [2] 平稳地把按钮压到第一停点,等一秒钟后再把按钮压到第二停点以排出剩余 液体。 [3] 压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。 [4] 松开按钮。 [5] 按吸头弹射器除去吸头。 5、加样器吸嘴为一次性使用。

一、目的：维护和保养可调式移液器使其正常工作。 二、适用范围：本实验室加样器的操作。 三、职责：实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。 四、操作步骤： 加样器应根据使用频率进行维护，但至少应每 3 个月进行一次，具体方法如下： 1、一般维护可用中性洗涤剂清洁，或者用60﹪的异丙醇，然后用蒸馏水反复 洗涤，去除洗涤剂或异丙醇，晾干。清洁后活塞处可使用一定量的润滑剂。 2、如果有液体进入加样器内的严重污染，可将加样器拆开后进行清洁，具体拆 开步骤参照加样器说明书。 3、高压消毒，有的加样器的吸管部分可高压消毒，但需注意的是消毒时不可超 温超时，也不能挤压放置，以免造成变形。 4、可调式移液器在不使用时应妥善地竖立放于支架上，远离潮湿及腐蚀性物质。 5、在移液操作过程中为防止液体进入加样器套筒内，必须注意：压放按钮时保 持平稳；加样器不得倒转；吸头中有液体时不可将加样器平放。 6、每天开始工作之前应检查移液器的外表面是否有灰尘或污物，若有则小心抹 去。

理化检测中的校准曲线的获得

理化检测中的校准曲线的获得 校准曲线 校准曲线包括标准曲线和工作曲线，标准曲线用标准溶液系列直接测量，被测样品没有经过预处理过程，这对于基体复杂的样品往往造成较大误差：而工作曲线所使用的标准溶液经过了与被测样品相同的前处理、测量等全过程，并且使标准溶液的基体组成与被测样品匹配。凡应用校准曲线的分析方法，都是在测得样品信号值后，从校准曲线上查得其含量(或浓度)。因此，绘制好的校准曲线，直接影响到样品分析结果的准确度。此外，校准曲线也确定了方法的测定范围。 1．校准曲线的绘制 ①对以纯溶剂配制的标准溶液系列，应测量纯溶剂的空白值，作空白校正后再绘制标准曲线； ②标准溶液一般可直接测定，但如被测试样的预处理较复杂致使污染或损失不可忽略时，标准溶液应和试样同样处理后再测定，在测定组成复杂的样品时中十分重要，此时应做工作曲线。 ③校准曲线的斜率常随实验条件的改变而变动。因此，在测定试样的同时，绘制校准曲线最为理想，否则应在测定试样的同时，平行测定零浓度和中等浓度标准溶液各两份，取均值相减后与原校准曲线上的相应点核对。方法精密度高时，相对差值不得大于5％；方法精密度低时，相对差值不得大于10％，否则应重新绘制校准曲线。 2．校准曲线的检验 ①线性检验：即检验校准曲线的精密度。对于以4～6 个浓度值所获得的测量信号值绘制的校准曲线，分光光度法一般要求其相关系数r ≥0.9990 ，否则应找出原因并加以纠正，重新绘制合格的校准曲线。通常至少作5个点（不包括空白）。 ②截距检验：即检验校准曲线的准确度，在线性检验合格的基础上，对其进行线性回归，的出回归方程y=a+bx ，然后将所的截距a 与0 作t 检验，当取95％置信水平，经检验无显著性差异时，a 可作0处理，方程简化为y=bx ，移项得x=y b 。在线性范围内，可代替查阅校准曲线，直接将样品测量信号值经空白校正后，计算出试样浓度。当a 与0有显著性差异时，表示校准曲线的回归方程计算结果准确度不高，应找出原因并予以校正后，重新绘制校准曲线并经线性检验合格，再计算回归方程，经截距检验合格后投入使用。回归方程如不经上述检验和处理，就直接投入使用，必将给测定结果引入差值相当于截距d的系统误差。

移液枪校正

移液器使用规程 一、操作规程 在移取液体时，应注意： 按下按钮或松开按钮的操作必须循序渐进，尤其是吸取高黏度的液体时更应如此，决不允许让按钮急速弹回。移液前应确保洁净的滴头牢固的装进移液器的嘴锥并且滴头外无外来颗粒。 当移液器和滴头的温度与液体的温度相一致时再进行操作。 （一）在吸取血清或需要更换滴头的重复操作时，可采用前进法： 1、将按钮压至第一停点位置。 2、将移液器滴头置于液面以下并慢慢松开按钮，待滴头吸入溶液后，将滴头撤出液面并斜贴在试剂瓶壁上淌走多余的液体。 3、将移液器移至需要加样的位置，轻轻压下操作按钮至第一停点位置。在继续向下压至第二停点，以排尽滴头内的液体。 4、松开按钮使之返回按钮起点位置。 5、更换滴头进行下一轮操作。 （二）在吸取高黏度液体、易起泡沫液体、极微量液体或不更换滴头的重复操作时，可采用重复移液法： 1、将按钮下压至第一停点与第二停点之间或第二停点处。 2、将移液器滴头置于试剂液面以下，然后慢慢松开按钮吸液。待滴头吸满液体后，将滴头撤出液面并斜贴在试剂瓶壁上淌走多余的液体。 3、将移液器移至需要加样的位置，轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出预设定的液体。将按钮保持在第一停点位置，使少量不包括移液量内的液体仍留在滴头内。 4、重复第二步骤进行下一轮操作。 （三）在用于定量移取血液与试剂反应时可采用全血移液法： 1、将按钮压至第一停点位置。 2、将移液器滴头置于液面以下并慢慢松开按钮，待滴头吸入溶液后，将滴头撤出液面并斜贴在试剂瓶壁上淌走多余的液体。 3、用干净的干燥绵纸或滤纸将滴头外的血液擦净。

4、将滴头浸入试剂，然后将按钮压至第一停点位置。为避免起泡，可将滴头浸入液面以下。 5、缓慢松开按钮，使按钮回到起点位置，此时滴头内已吸入液体。 6、按下按钮至第一停点位置，然后慢慢松开按钮。重复此项操作直至滴头内壁的液体充分洗干净位置。 7、最后，按下按钮至第二停点把滴头内的液体彻底排尽。 移液枪校正 用0.0001g或0.001g的电子天平。 按如下校都正：1000ul纯净水=1000mg 重复三次，符合，说明校正成功。 10ul，50ul，200ul的枪可以类似方法进行，但10ul 枪的校正的效果不是很理想，但绝对可用，其他三个型号的结果都很好。 校正通过墙后面的一个旋钮，每套枪都配有专门的调节该旋钮的小扳手，详可查看枪的配套说明书。 基本方法是这样。 但是不太可能你次次正好1000mg，实际上也不太可能做到。 一定量程的的枪其每个刻度有一定的误差范围。 国产的一般是： 量程 体积体积误差范围重复性 5－20ul 5ul 5.0% <1.5 10ul 3.0% <1.0 20ul 3.0% <0.8 20-100ul 20ul 3.0% <1.0 50ul 2.0% <0.5

PCR室移液器校准标准操作程序

PCR室移液器校准标准操作程序 1.目的：保证加样器加样的准确性。 2.适用范围：各种品牌、型号的可调和多通道加样器。 3.职责：本SOP由室负责人执行落实。 4.校准程序 4.1校准环境和用具要求： 4.1.1 室温：20～25℃，测定中波动范围不大于±0.5℃。 4.1.2电子天平：放置于无尘和震动影响的台面上，房间尽 可能有空调。称量时为保证天平内的湿度（相对湿度60～90％），天平内应放置一装有10ml蒸馏水的小烧杯。 4.1.3 小烧杯：5～10ml体积。 4.1.4 测定液体：温度为20～25℃的去气双蒸水。 4.1.5 选择校准体积：⑴拟校准体积；⑵加样器标定体积 的中间体积；⑶最小可调体积（不小于拟校准体积的1％）。(4)如为固定体积加样器，则只有一种校准体积。 4.2校准步骤： 4.2.1 将加样器调至拟校准体积，选择合适的吸头； 4.2.2 调节好天平； 4.2.3 来回吸吹蒸馏水3次，以使吸头湿润，用纱布拭干吸头； 4.2.4 垂直握住加样器，将吸头浸入液面2～3mm处，缓慢（1～3秒）一致的吸取蒸馏水；

4.2.5 将吸头离开液面，靠在管壁，去掉吸头外部的液体； 4.2.6 将加样器以30℃角放入称量烧杯中，缓慢一致地将加 样器压至第一档，等待1～3秒，再压致第二档，使吸头里的液体完全排出； 4.2.7 记录称量值； 4.2.8 擦干吸头外面； 4.2.9 按上述步骤称量10次； 4.2.10取10次称量值的均值作为最后加样器吸取的蒸馏水 重量，按附表Ⅰ所列蒸馏水Z因子计算体积：体积=重量/Z因子 4.2.11按校准结果调节加样器 4.3 新购的合格的移液器出厂前经过厂家校准，使用前无需校准。 4.4 每年移液器进行校准一次，由广西计量检测局校准。 4.5 做好校准记录。 5.引用的表格：设备校正记录表---附表08 注意：移液器校准由计量部门校准，每年一次。此程序仅供参考。

校准曲线运用说明

校准曲线包括标准曲线和工作曲线，前者用标准溶液系列直接测量，没有经过预处理过程，这对于样品往往造成较大误差;而后者所使用的标准溶液经过了与样品相同的消解、净化、测量等全过程。凡应用校准曲线的分析方法，都是在样品测得信号值后，从校准曲线上查得其含量(或浓度)。因此，绘制准确的校准曲线，直接影响到样品分析结果的准确与否。此外，校准曲线也确定了方法的测定范围。1.校准曲线的绘制用一系列被测物标准溶液，按照标准方法规定的步骤，将被测物转变为有色溶液。制备好的标准系列和空白，在方法选定的波长下，测定吸光度。已被测物浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制校准曲线。1)对标准系列，溶液以纯溶剂为参比进行测量后，应先作空白校正，然后绘制标准曲线; 2)标准溶液一般可直接测定，但如试样的预处理较复杂致使污染或损失不可忽略时，应和试样同样处理后再测定。3)校准曲线的斜率常随环境温度、试剂批号和贮存时间等实验条件的改变而变动。因此，在测定试样的同时，绘制校准曲线最为理想，否则应在测定试样的同时，平行测定零浓度和中等浓度标准溶液各两份，取均值相减后与原校准曲线上的相应点核对，其相对差值根据方法精密度不得大于5%～10%，否则应重新绘制校准曲线。2. 校准曲线的检验1)线性检验: 即检验校准曲线的精密度。对于以4～6个浓度单位所获得的测量信号值绘制的校准曲线，分光光度法一般要求其相关系数| r | ≥0.9990，否则应找出原因并加以纠正，重新绘制合格的校准曲线。2)截距检验：即检验校准曲线的准确度，在线性检验合格的基础上，对其进行线性回归，得出回归方程y= a+bx ，然后将所得截距a与0作t检验，当取95%置信水平，经检验无显著性差异时，a可做0处理，方程简化为y= bx，移项得x=y/b。在线性范围内，可代替查阅校准曲线，直接将样品测量信号值经空白校正后，计算出试样浓度。当a与0有显著性差异时，表示校准曲线的回归方程计算结果准确度不高，应找出原因予以校正后，重新绘制校准曲线并经线性检验合格。在计算回归方程，经截距检验合格后投入使用。回归方程如不经上述检验和处理，就直接投入使用，必将给测定结果引入差值相当于解决a的系统误差。3) 斜率检验: 即检验分析方法的灵敏度，方法灵敏度是随实验条件的变化而改变的。在完全相同的分析条件下，仅由于操作中的随机误差导致的斜率变化不应超出一定的允许范围，此范围因分析方法的精度不同而异。例如，一般而言，分子吸收分光光度法要求其相对差值小于5%，而原子吸收分光光度法则要求其相对差值小于10%等等。 3. 校准曲线的控制被测物转变为有色溶液的反应称为显色反应或发色反应。显色反应的介质PH条件、显色剂用量、显色反应的时间和温度、为消除共存物干扰而加入的掩蔽剂、甚至加试剂的顺序，都要按照方法步骤的要求执行。有时，标准系列虽然不像实际试样那样组成复杂，但仍要求与试样进行同样的处理步骤，以便控制校准曲线上的数据点的空白、回收率等因素。建立校准曲线时，测量吸光度的参比有两种选择。第一种方法用纯溶剂作参比，两个比色皿都放溶剂时，“样品比色皿” 的吸光度测定值为比色皿成对性校正值，此后所有样品吸光度测定值都须扣除此值，进行校正。然后，以纯溶剂为参比，测定空白及标准系列的吸光度，绘制校准曲线。第二种方法直接用空白为参比。当两个比色皿都放空白时，测定比色皿成对性校正值，然后测定标准系列的吸光度，绘制校准曲线。两种方法得到的两条校准曲线互相平行，但第一种方法可测定空白的水平，后一种方法不能测定空白，理论上校准曲线通过原点。若空白为零，两条校准曲线重合。无论用什么作参比，实样测定时应该使用与建立校准曲线相同的比色皿和同样的参比。比色皿的成对性校正对于使用已久的比色皿是必要的，尤其是测量吸光度很小的样品时，校正可保证测量值的可靠性和重复性。