抗坏血酸还原钼酸铵分光光度法测定水中痕量磷酸盐

JIANGSU UNIVERSITY OF TECHNOLOGY 本科毕业论文

抗坏血酸还原钼酸铵分光光

度法测定水中痕量磷酸盐

学院名称：化学与环境工程学院

专业：应用化学

班级：09应化1W

学号：09331103

姓名：傅丽凤

指导教师姓名：唐江宏

指导教师职称：教授

二〇一三年六月

抗坏血酸还原钼酸铵分光光

度法测定水中痕量磷酸盐

摘要：磷是生物生长的必需元素之一，但水体中磷含量过高会导致富营养化，使水质恶化。环境中的磷主要来源于化肥、冶炼、合成洗涤剂等行业的废水和生活污水，当这些废水和污水排入水中时，就会使水环境中的磷含量大大增加。因此，对于水中磷酸盐的监测，是水环境监测的重要组成部分。

本实验采用抗坏血酸还原钼酸铵分光光度法测定水中痕量磷酸盐。在酸性条件下，以抗坏血酸还原钼酸铵作为磷钼蓝比色法测定磷含量的显色剂，酒石酸锑钾作为催化剂，形成稳定的磷钼蓝后，体系在687 nm和722 nm出现两个强度相近吸收峰，以722 nm作为测定波长，优化了实验条件。在最佳条件下，磷酸盐的含量与吸光度在20－80 ng/ml范围内呈线性关系，根据3σ/k（σ为空白样品的测定值的标准偏差，k为线性方程的斜率）方法的检出限为0.83 ng/ml，相对标准偏差(RSD)为1.4%。该法用于实际水样的测定，结果令人满意。

关键词：磷酸盐；磷钼蓝；分光光度法

Ascorbic Acid Ammonium Molybdate Spectrophotometric Method for Determination of Trace Phosphate

Abstract：Phosphorus is one of the essential elements for biological growth，but phosphorus in water content is too high will lead to eutrophication and to make the deterioration of the water quality．Phosphorus in the environment comes mainly from fertilizer, smelting, synthetic detergent industry wastewater and domestic sewage, when these waste water and sewage discharged into the water will greatly increase the phosphorus content in the water environment. Therefore, for the monitoring of phosphate in the water is an important part of the water environment monitoring.

In this study，ascorbic acid ammonium molybdate spectrophotometric spectrophotometric determination of trace phosphate．Under acidic conditions，Chromogenic agent ascorbic acid ammonium molybdate as phosphorus molybdenum blue colorimetric determination of phosphorus content.Antimony potassium tartrate as a catalyst．To form a stable phosphorus molybdenum blue．System at 687nm and 722nm two similar intensity absorption peak，as the measurement wavelength to 722nm and optimize the experimental conditions．Under the best conditions，Phosphate content and the absorbance at a linear relationship within the range of 20－80ng/ml．The detection limit of the method according to the 3σ/k（σ as the standard deviation of the measured value of the blank sample，k is the slope of the linear equation) 0.83ng/ml．The relative standard deviation (RSD) of 1.4%．The method used for the determination of actual water samples with satisfactory results.

Key words ：phosphate；Phosphomolybdenum Blue；Spectrophotometry

目录

第1章磷酸盐的介绍及测定方法综述 0

1.1 磷酸盐的基本介绍 0

1.2 磷酸盐的化学特性 0

1.3 磷酸盐的出现形式 0

1.4 磷酸盐的用途 (1)

1.4.1 化学用途 (1)

1.4.2 常规使用 (2)

1.5 磷酸盐的测定方法 (2)

1.5.1 微波消解法测定肉制品中的磷酸盐 (2)

1.5.2 卷烟纸中的磷酸盐的测定 (2)

1.5.3 海产品中磷酸盐的测定 (3)

1.5.4 工业循环冷却水中磷酸盐的测定 (3)

1.5.5 冷冻鱼中磷酸盐的测定 (3)

1.5.6 工业锅炉水中磷酸盐的测定 (3)

1.5.7 矿泉水中磷酸盐含量的测定 (4)

1.6 水样中磷酸盐的一般检测方法 (4)

1.6.1 测试管法 (4)

1.6.2 沉淀分离富集－分光光度法 (4)

1.6.3 流动注射分析法 (4)

1.6.4 容量法 (4)

1.6.5 氨基酸法 (5)

1.6.6 离子色谱法 (5)

1.6.7 双波长K系数方程法 (5)

1.6.8 其他方法 (5)

第2章抗坏血酸还原钼酸铵分光光度法测定水中痕量磷酸盐 (7)

2.1 引言 (7)

2.2 实验部分 (7)

2.2.1 仪器与试剂 (7)

2.2.2 实验方法 (8)

2.3 结果与讨论 (8)

2.3.1 吸收光谱 (8)

2.3.2 溶液酸度的影响 (9)

2.3.3 酒石酸锑钾浓度的影响 (11)

2.3.4 钼酸铵浓度的影响 (11)

2.3.5 抗坏血酸浓度的影响 (12)

2.3.6 显色时间的影响 (13)

2.3.7 平衡温度的影响 (14)

2.3.8 加热时间的影响 (15)

2.3.9 分析特性 (16)

2.3.10样品分析 (17)

2.4 结论 (17)

参考文献 (18)

致谢 (20)

第1章磷酸盐的介绍及测定方法综述

1.1磷酸盐的基本介绍

磷酸盐（phosphorous salts）是几乎所有食物的天然成分之一，作为重要的食品配料和功能添加剂被广泛用于食品加工中。

天然存在的磷酸盐是磷矿石（含磷酸钙），用硫酸跟磷矿石反应，生成能被植物吸收的磷酸二氢钙和硫酸钙，可制得磷酸盐。

磷酸盐可分为正磷酸盐和缩聚磷酸盐：在食品加工中使用的磷酸盐通常为钠盐、钙盐、钾盐以及作为营养强化剂的铁盐和锌盐，常用的食品级磷酸盐的品种有三十多种，磷酸钠盐是国内食品磷酸盐的主要消费种类，随着食品加工技术的发展，磷酸钾盐的消费量也在逐年上升。

1.2磷酸盐的化学特性

磷酸盐离子是一个多原子的离子，其式子是PO43−，而分子量是94.97。它包含一个磷原子，并由四个氧原子所包围，形成一个正四面体。磷酸盐离子带有-3的形式电荷，且是磷酸氢盐离子（HPO42−）的共轭碱；磷酸氢盐离子则是磷酸二氢盐离子（H2PO4−）的共轭碱；而磷酸二氢盐离子又是磷酸（H3PO4）的共轭碱。它是一个超价分子（磷原子在其价壳层有着10个电子）。磷酸盐亦是一个有机磷化合物，其化学式为OP(OR)3。除了一些碱金属外，大部份磷酸盐，在标准状态下，都是不可溶于水的。在稀释的水溶液中，磷酸盐以四种形式存在。在强碱环境下，磷酸盐离子（PO43−）会较多；而在弱碱的环境下，磷酸氢盐离子（HPO42−）则较多。在弱酸的环境下，磷酸二氢盐离子（H2PO4−）较为普遍；而在强酸的环境下，则水溶的磷酸（H3PO4）是主要存在的形式。

1.3磷酸盐的出现形式

磷酸盐是元素磷自然产生的形态，在多种磷酸盐矿物中可以找到。元素的磷或是磷化物是很难发现的（只有极少量在陨石中可以找到）。在矿物学及地质学，磷酸盐是指含有磷酸盐离子的石或矿石。

在北美洲最大型的磷矿粉矿床位于美国的佛罗里达州中部、爱德荷州的索达斯普陵、北卡罗莱那州沿岸区域。而其次的是位于蒙大拿州、田纳西州、佐治亚州及南卡罗莱那州近查尔斯顿。瑙鲁这个细少的岛国就曾经是有着大量高质素的磷酸盐矿产，但现时已被大量挖掘。磷矿粉亦可以在纳弗沙岛、摩洛哥、突尼斯、以色列、多哥及约旦找到，这些地方亦有大量的磷酸盐矿在生物中，磷是以溶液中游离的磷酸盐离子的形态出现，称为“无机磷酸盐”，这是要与其他在磷酸酯中的磷酸盐作出区别的。无机磷酸盐是会以Pi来表示，它可以是由焦磷酸盐（以Pi来表示）水解而得。

但是，磷酸盐最普遍是以一磷酸腺苷（AMP）、二磷酸腺苷（ADP）、三磷酸腺苷（ATP）、脱氧核糖核酸（DNA）及核糖核酸（RNA）的形式出现，且可以经由水解ADP或ATP而被释放出来。对于其他的二磷或三磷核苷亦有相似的反应。在ADP及ATP，或其他二磷及三磷核苷中的磷酸酐键，包含着大量的能量，所以它们在生物中有着重要的地位。它们一般会被称为高能磷酸磷，就像在肌肉组织中的磷酸肌酸一样。一些如磷的化合物在有机化学上亦会被使用，但它却似乎没有自然的相应物。

由于磷酸盐对生物的重要性，所以在生态学上，它是高度被采集。因此，它在环境中往往是限量试剂，而它的可得性则决定生物成长的速度。将大量的磷酸盐加入缺乏磷酸盐的环境或微生物环境中，会对生态有着重大的影响[1-3]。例如，某一种生物的暴涨会使其他生物死亡，及某种生物数量的减少会令如氧等资源的缺乏等。在污染的问题下，磷酸盐是总溶解固体量（一种主要的水质指标）的主要成份。

1.4磷酸盐的用途

1.4.1化学用途

磷酸盐一般会用在清洁剂中作为软水剂(water softener)，但是因为藻类的繁荣衰退周期会影响磷酸盐在分水岭的排放，所以在某些地区磷酸盐清洁剂是受到管制的。

在农业上，磷酸盐是植物的三种主要养份之一，且是肥料的主要成份[4]。磷矿粉是从沉积岩的磷层中开采。以前它在开采后不用加工便可使用，但现时未加

工的磷酸盐只会用在有机耕种上。一般它都是会化学加工制成过磷酸石灰、重过磷酸钙或磷酸二氢铵，它们的浓度都较磷酸盐高，且较易溶于水，所以植物可以较快吸收。

肥料级数一般有三个数字：第一个是指氮的数量，第二个是指磷酸盐的数量（以P2O5作基准），而第三个是指碱水（以K2O作基准）。所以一个10－10－10的肥料就每种成份各有10%，而其他的则是填充物。

从过度施肥的农地径流的磷酸盐会是富营养化、赤潮及其后缺氧的起因。这就像磷酸盐清洁剂一样会引起鱼类及其他水中生物的缺氧症。

1.4.2常规使用

在食品加工中使用的磷酸盐通常为钠盐、钙盐、钾盐以及作为营养强化剂的铁盐和锌盐，常用的食品级磷酸盐的品种有三十多种，磷酸钠盐是中国食品磷酸盐的主要消费种类，随着食品加工技术的发展，磷酸钾盐的消费量也在逐年上升。

为充分发挥各种磷酸盐以及磷酸盐与其他添加剂之间的协同增效作用，满足食品加工技术的发展需求，在实际应用中常常使用各种复配型磷酸盐作为食品配料和功能添加剂，复配型磷酸盐的研究与开发日益成为磷酸盐类食品添加剂开发与应用的发展方向。

1.5磷酸盐的测定方法[5]

磷酸盐在我们的日常生活中无处不在，肉制品、卷烟纸、海水、地面水以及海产品等中都大量存在。下面就来介绍一下不同情况下磷酸盐的检测方法：

1.5.1微波消解法测定肉制品中的磷酸盐[6]

使用微波消解仪，在肉与肉制品中加入硝酸密闭消解，消解液用磷钼蓝分光光度法在660 nm波长处测定样品中磷的含量。微波消解技术可将样品消解完全，采用磷钼蓝分光光度法测定体系中磷酸盐(以磷酸根计)的含量在0－150 μg时，磷酸盐的含量与吸光度呈线性关系,相关度较好。该法操作简单，试剂用量少、重现性好，用微波消解技术大大缩短了样品前处理时间。

1.5.2卷烟纸中的磷酸盐的测定

1.5.

2.1 磷钼黄法测定卷烟纸中的磷酸盐[7]

磷酸根离子在酸性介质中与钒酸铵、钼酸铵反应生成黄色的磷钼酸铵可溶性溶液，在一定范围内其浓度和吸光度符合比耳定律，可进行吸光度定量。此方法操作简单易行，结果稳定可靠，精密度高。

1.5.

2.2 吐温－80增敏光度法测定卷烟纸中的磷酸盐[8]

在硫酸介质中，磷与适量的钼酸根形成磷钼杂多酸，在非离子表面活性剂(吐温－80)存在下，形成微乳液体系来测定。采用这种方法，在一定范围内其浓度和吸光度符合比耳定律，操作简单易行，结果稳定可靠，精密度较高。

1.5.3 海产品中磷酸盐的测定[9]

多聚磷酸盐是高品质的海产品添加剂，可有效的保持海产品特有的风味，增强口感，能减少加工损耗，改善质地，使产品表面富有光泽，鲜亮有韧性，可明显提高产品的档次。在线渗析－离子色谱法采用英蓝技术渗析单元处理样品，样品无需特殊处理即可除去蛋白，整个过程完全在线．减少了手工操作的繁琐和误差。这种方法测定海产品中的磷酸盐，结果良好。方法简单、准确、快速，易于推广。

1.5.4 工业循环冷却水中磷酸盐的测定

采用向样品中加入按一定比例用硫酸配制的钼酸铵溶液以及抗坏血酸溶液，在特定波长下测定其吸光度的方法来检测工业循环冷却水中的磷酸盐，准确度和灵敏度都很高。

1.5.5 冷冻鱼中磷酸盐的测定

冷冻鱼制品在冻藏过程容易出现脱水干耗，磷酸盐作为保水剂被广泛地应用于冷冻鱼制品. 采用灰化法前处理冷冻鱼制品样品，经显色剂显色后，利用分光光度计进行定量测定。本方法对仪器设备和检测人员要不高，检出限低、回收率高，分析快速准确。

1.5.6工业锅炉水中磷酸盐的测定[10]

何好启等通过大量实验，研制出了一种适合工业锅炉水磷酸盐的快速测定试纸。该试纸浸入含有磷酸根的水溶液后，再滴加显色剂在试纸上会发生显色反应，利用显色深浅与磷含量的关系，直接比色测定水溶液中磷酸盐含量。通过实验筛

选出最佳测定条件，以高分子材料作为表面活性剂浸纸，使显色均匀、集中，灵敏度很高。

1.5.7矿泉水中磷酸盐含量的测定[11]

矿泉水中磷酸盐含量测定的国标方法是分光光度法。其原理是在强酸性溶液中磷酸盐与钼酸铵作用生成磷钼杂多酸，能被还原剂(氯化亚锡等)还原，生成蓝色络合物，在一定浓度范围内，其颜色强度与磷酸盐含量成正比。

1.6水样中磷酸盐的一般检测方法

1.6.1测试管法[12]

在非离子表面活性剂聚乙烯醇存在下，磷钼杂多酸和孔雀绿于硫酸介质中形成绿色离子缔合物，这是一种能简便、快速测定水中磷酸盐的分析法，该方法测定磷酸盐的线性范围为0.004－0.14 mg/L。

1.6.2沉淀分离富集－分光光度法[13]

十六烷基三甲基溴化铵可与磷钼蓝生成水难溶的PMB-CTAB离子缔合物沉淀，从而分离富集水溶液中的PMB。该沉淀易溶于硫酸乙醇溶液，溶液在700 nm有强吸收。该方法消耗试样体积少、测定速度快。

1.6.3流动注射分析法[14]

利用磷铝杂多酸与孔雀绿碱性阳离子染料离子缔合物的高灵敏度和高选择性，采用在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵－孔雀绿显色剂反应生成绿色离子缔合物，以聚乙烯醇稳定显色液在特定波长处测定吸光度的方法来检测。这种方法采用流动注射分析技术，对磷酸盐的含量进行快速分析，操作简单，工作效率高，灵敏度好、检出限低。

1.6.4 容量法[15]

测试磷矿石中五氧化二磷的方法是通过在含有柠檬酸的酸性溶液中，磷酸根与钼酸钠、喹啉生成磷钼酸喹啉沉淀。将沉淀溶于过量的氢氧化钠标准溶液中，用酸回滳过量的碱，从而计算得磷量。参考这种方法，用磷钼酸喹啉容量法直接

测试重钙、磷铵等磷肥废水中磷酸盐。该方法中干扰离子有NH4+和硅酸，NH4+的存在会生成磷钼酸铵沉淀而影响结果，加入丙酮后可消除；硅酸存在会生成硅钼酸喹啉沉淀影响结果，加入柠檬酸后可消除。该方法简便、快速，准确度和精密度均令人满意。

1.6.5氨基酸法[16]

在酸性条件下，磷酸盐与钼酸氨反应，生成的磷钼杂多酸，由于氨基酸的还原作用，转变成蓝色络合物，使样品呈淡蓝色，可直接在仪器的屏幕上读出废水中磷酸盐(mg/L)，该方法操作快速、简便、稳定，并且体积小，能较好地满足应急事故现场监测的要求。

1.6.6离子色谱法[17]

离子色谱法的原理是根据分离柱对不同亲和度的各阴离子进行分离，电导检测器测量各阴离子组份的电导率，以保留时间定性，峰高或峰面积定量。离子色谱法具有快速、灵敏、选择性好及同时测定多种组份等优点。

1.6.7双波长K系数方程法[18]

双波长K系数方程法同时测定水样中的砷和磷酸盐，是指选定两个测定波长λ1、λ2，将磷酸盐、砷在λ2处的吸光度转化为λ1处的吸光度，列出一个方程组A l=A l砷+A1磷；A2=A2磷+A2砷。其中A1、A2分别为共存体系在波长λ1、λ2处的吸光度(A1、A1砷、A1磷、A2、A2磷、A2砷均为扣除试剂空白后的吸光度)，其值分别等于磷酸盐、砷在波长λ1、λ2处的吸光度的和。解方程可得磷酸盐、砷在λ1处的吸光度，进而求得水样中的磷酸盐、砷含量。该方法的优点为简便快速，灵敏度较高。

1.6.8其他方法

施丽芳等[19]研究Tb3+-钛铁试剂(TR)络合物荧光猝灭法测定无机磷酸盐的新方法，在10 ml比色管中加入一定体积和一定浓度的Tb3+标准溶液和TR溶液，再加入3.0 ml 0.4 mol/L六次甲基四胺－HCl缓冲溶液，用去离子水定容至10 ml，然后在荧光计上测定没有碘酸盐共存时铽的特性荧光强度F0；同样，在加入一定体积、一定浓度的Tb3+标准溶液和TR溶液以及3.0 ml 0.4 mol/L六次甲

基四胺－HCl缓冲溶液的比色管中，再加入待测的磷酸盐溶液，定容后测定磷酸盐共存时铽的特性荧光强度F。以荧光强度的变化△F=F0-F作为磷酸盐检测的物理量。

第2章抗坏血酸还原钼酸铵分光光度法测

定水中痕量磷酸盐

2.1引言

水是人类社会赖以生存和发展的基础，然而世界各国的湖泊和封闭性水体都面临着富营养化问题[20-22]。我国是世界上蓝藻水华暴发最严重、分布最广泛且水华蓝藻种类最多的国家之一，近年来，频繁暴发的蓝藻水华导致局部水域水质严重恶化，生态灾害事件频发，危及供水安全。三湖(太湖、滇池和巢湖)更是时有大面积蓝藻水华发生，已发展成为一种“生态灾害”。

大量研究证实：磷是动植物所必需的重要元素之一，以广泛多样的形式参与有机体的生长、代谢和繁殖过程[23]。但大量的含磷废水排入水体易导致水体的富营养化，造成藻类的大量繁殖，水环境恶化[24]，故磷是大多数水体中藻类生长的主要控制元素。磷酸盐是磷元素在自然界存在的重要形式，它的快速、准确、及时检测对水质监测具有重要意义。一般的磷钼蓝分光光度法对水样中活性磷的检出限为10 μg/ml[25]，而水环境中磷含量远低于该方法的检出限。

本实验采用抗坏血酸还原钼酸铵分光光度法测定水中痕量磷酸盐[26]。在酸性条件下，以抗坏血酸还原钼酸铵作为磷钼蓝比色法测定磷含量的显色剂，酒石酸锑钾作为催化剂，形成稳定的磷钼蓝后，以蒸馏水为参比溶液，体系在687 nm 和722 nm出现两个强度相近吸收峰，以722 nm作为测定波长，优化了实验条件，该法用于实际水样的测定，结果令人满意。

2.2实验部分

2.2.1 仪器与试剂

Cary 50－Probe UV－Visible Spectrophotometer ；722型分光光度计(上海棱光技术有限公司)；数显恒温水浴锅(国华电器有限公司)；AL204电子天平(梅特

勒－托利多仪器（上海）有限公司)。

KH2PO4系列标准溶液：由在110℃干燥至恒重的KH2PO4 (上海化学试剂总厂，分析纯)配制成浓度为l000 mg/L的标准储备液逐级稀释得到。

0.03 mol/L钼酸铵溶液：称取3.7056 g(NH4)6Mo7O24•4H2O(上海国药集团，许可证编号XK 13-2010282013分析纯)配成l00mL溶液。

0.01 mol/L酒石酸锑钾：称取0.3336 gC4H4KO7Sb•0.5H2O(中国天津市巴斯夫化工有限公司，分析纯)配成l00mL溶液。

0.0l mol/L抗坏血酸（天津市巴斯夫化工有限公司，批号：GB/T 15347，分析纯)溶液当天配制。

2.2.2 实验方法

移取适量的磷酸盐标准溶液于10 ml比色管中，依次加入0.50 mL 4.0 mol/L 硫酸溶液、0.12 mL 0.01 mol/L 酒石酸锑钾、0.40 mL 0.03 mol/L 钼酸铵和0.2 mL 0.01 mol/L 抗坏血酸，混合均匀，用二次蒸馏水稀释至大约9 ml，室温显色12 min，用二次蒸馏水定容至l0 mL，在80℃水浴中加热l2 min后，以蒸馏水为参比溶液，在紫外－可见分光光度计上，从波长400－900 nm对体系进行谱图扫描，确定体系的最大吸收波长，以此作为样品的测定波长，测量溶液的吸光度A。

2.3结果与讨论

2.3.1 吸收光谱

取4支10 mL比色管分别编号为1、2、3、4，分别移取适量的磷酸盐标准溶液于比色管中，依次加入 4.0 mol/L 硫酸溶液0.50 mL、0.01 mol/L 酒石酸锑钾0.12 mL 、0.03 mol/L 钼酸铵0.40 mL和0.01 mol/L 抗坏血酸0.20 mL，混合均匀，用二次蒸馏水稀释至大约9 ml，室温显色12 min，用二次蒸馏水定容至l0 mL，在80℃水浴中加热l2 min后。以蒸馏水为参比溶液，扫描磷钼蓝溶液的紫外－可见吸收光谱图（图2-1），从图中可以看出，体系在687 nm和722 nm出现两个强度近似的吸收峰，本实验以722 nm作为测定波长。

0.00

0.05

0.10

0.150.20

吸光度A 波长λ/nm

图2-1 磷钼蓝吸收光谱图

磷酸盐的浓度（a-d ）：20、40、60、80 ng/ml 2.3.2 溶液酸度的影响

磷钼蓝的形成需要在酸性条件下进行，强酸条件下磷酸盐以磷酸形式存在才能形成磷钼蓝。因此，溶液的酸度是影响显色反应速度及生成的磷钼蓝化合物稳定性的重要因素。在其他条件相同的情况下，保证酸度相同，分别加入4.0 mol/L 的H 2SO 4 0.50 ml ，HCl 和HNO 3各 1.00 ml ， 考察三大强酸的影响（见图2-2），由图可知，使用H 2SO 4 效果最好。

HCl H2SO4HNO30.0

0.1

0.2

0.3

0.4

吸光度A H 2SO 4

HCl HNO 3

图2-2 三大强酸的影响 此外，考察了H 2SO 4用量对体系吸光度的影响（图2-3）。

由图可知，在0.05－0.30 mol/L 范围内，吸光度先逐渐增大；高于0.20 mol/L 后，吸光度随H 2SO 4浓度进一步增加而减小(见图2-3)。因此，该实验选择控制溶液中H 2SO 4 浓度为0.20 mol/L 。

吸光度A

硫酸浓度C mol/L

图2-3 硫酸浓度的影响 1.00 mg/L 磷酸盐标准溶液：0.40 mL ；0.01 mol/L 酒石酸锑钾：0.12 mL ；

0.03 mol/L 钼酸铵：0.40 mL ；0.01 mol/L 抗坏血酸：0.20 mL ；

4.0 mol/L 硫酸溶液：0.10、0.20、0.30、0.40、0.50、0.60、0.70、0.80 mL

2.3.3 酒石酸锑钾浓度的影响

实验还考察了酒石酸锑钾浓度对体系吸光度影响（见图2-4）。结果显示，一开始随着酒石酸锑钾浓度的增加，吸光度基本上随之增大，当浓度达到1.2×10-4 mol/L 后，吸光度趋于最大值。因此，该实验选用酒石酸锑钾浓度为 1.2×10-4 mol/L 。

吸光度A C:10-4mol/L

图2-4 酒石酸锑钾浓度的影响

1.00 mg/L 磷酸盐标准溶液：0.40 mL ；4.0 mol/L 硫酸溶液：0.50 mL ；

0.03 mol/L 钼酸铵：0.40 mL ；0.01 mol/L 抗坏血酸：0.20 mL ；

0.01 mol/L 酒石酸锑钾：0.04、0.06、0.08、0.10、0.12、0.14、0.16、0.18 mL

2.3.4 钼酸铵浓度的影响

钼酸铵浓度对体系吸光度的影响见图2-5。由图可知，当钼酸铵浓度过小时，磷钼蓝反应不完全，随着钼酸铵浓度的增加，反应趋向完全，当浓度达至1.20×10-3 mol/L 后，吸光度趋于最大值，说明形成的磷钼蓝量最大。因此，该实验选用钼酸铵浓度为1.20×10-3 mol/L 。

吸光度A C:10-3mol/L

图2-5 钼酸铵浓度的影响

1.00 mg/L 磷酸盐标准溶液:0.40 mL; 4.0 mol/L 硫酸溶液:0.50 mL;

0.01 mol/L 酒石酸锑钾:0.12 mL; 0.01 mol/L 抗坏血酸:0.20 mL;

0.03 mol/L 钼酸铵:0.20、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、0.5、0.55、0.6、0.65、0.7、0.75mL

2.3.5 抗坏血酸浓度的影响

抗坏血酸浓度对体系吸光度影响见图2-6。由图可知，随着抗坏血酸浓度的增加，样品吸光度随之增大，当浓度达到2.0×10-4 mol/L 后，吸光度达到最大，说明在该实验条件下对磷钼蓝的形成最为有利。因此，后续实验中选用抗坏血酸浓度为2.0×10-4 mol/L 。

吸光度A C:10-4mol/L

图2-6 抗坏血酸浓度的影响

1.00 mg/L 磷酸盐标准溶液:0.40 mL; 4.0 mol/L 硫酸溶液:0.50 mL;

0.01 mol/L 酒石酸锑钾:0.12 mL; 0.03 mol/L 钼酸铵:0.40 mL;

0.01mol/L 抗坏血酸:0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50mL

2.3.6 显色时间的影响

显色时间指试样中加入钼酸铵、酒石酸锑钾和抗坏血酸溶液后，生成磷钼蓝所需的时间。实验中研究了不同显色时间对吸光度的影响（见图2-7）。

取8支10 mL 比色管分别编号为1、2、3、4、5、6、7、8，按实验方法进行试验，控制显色时间分别为2、4、6、8、10、12、14、16 min, 然后依次用二次蒸馏水定容至l0 mL ，在80℃水浴中加热l2 min 后。在722分光光度计上，在722 nm 处 ,用1 cm 比色皿，以蒸馏水为参比溶液，测其吸光度。

由图可知，显色时间在12 min 内即可形成稳定的磷钼蓝。因此，实验中选择的显色时间为12 min 。

吸光度A 显色时间 min

图2-7 显色时间的影响

1.00 mg/L 磷酸盐标准溶液:0.40 mL; 4.0 mol/L 硫酸溶液:0.50 mL;

0.01 mol/L 酒石酸锑钾:0.12 mL; 0.03 mol/L 钼酸铵:0.40 mL;

0.01 mol/L 抗坏血酸:0.20 mL;

2.3.7 平衡温度的影响

为了在尽可能低的平衡温度达到最大的吸光度，考察了不同平衡温度对吸光度的影响（见图2-8）。

仅改变平衡温度，按实验方法进行试验，控制水浴温度分别为30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95℃，依次加热12 min 后，以蒸馏水为参比溶液，测其吸光度。

结果表明，随着温度的增加，吸光度随之增大，在75℃水浴时即可达到吸光度的最大值。综合考虑，实验中选择的水浴加热温度为80℃。

水中磷酸盐的测定 分光光度法

实验名称：磷酸盐的测定（磷矾钼黄分光光度法） 实验原理：在0.6NH2SO4的酸度下，磷酸盐与钼酸盐和偏矾酸盐形成黄色的磷矾钼酸。 磷矾钼酸可在420nm的波长下测定。 本法适用于炉水磷酸盐的测定，相对误差为±2%。 实验仪器：分光光度计或者光电比色计（具有420nm左右的滤光片） 实验试剂:磷酸盐贮备溶液（1ml含1mgPO 43-）：称取在105℃干燥过的磷酸二氢钾（KH 2 PO 4 ）1.433g，溶于少量除盐水中，并稀释至 1L。 3.2 磷酸盐工作溶液（1ml含0.1mgPO 4 3-）：取上述标准溶液，用除盐水准确稀释至10倍。 3.3 钼酸铵-偏矾酸铵-硫酸显色溶液（简称钼矾酸显色溶液）的配制： 3.3.1 称取50g钼酸铵和2.5g偏矾酸铵，溶于400ml除盐水中。 3.3.2 取195ml浓硫酸，在不断搅拌下徐徐加入到250ml除盐水中，并冷却至室温。 将按3.3.2配制的溶液倒入按3.3.1配制的溶液中，用除盐水稀释至1L。 实验步骤：工作曲线绘制： 4.1.1 根据待测水样的磷酸盐含量范围，按表16-1-1中所列数值把磷酸盐工作溶液（1ml含0.1mgPO43-），注入一组50ml容量瓶中，用除盐水稀释至刻度。 4.1.2 将配制好的磷酸盐标准溶液分别注入相应编号的锥形瓶中，各加入5ml钼矾酸显色溶液，摇匀，放置2min。 4.1.3 根据水样磷酸盐含量，按表16-1-2选用合适的比色皿和波长，以试剂空白作参比，分别测定显色后磷酸盐标准溶液的吸光度，并绘制工作曲线。

4.2 水样的测定： 4.2.1 取水样50ml注入锥形瓶中，加入5ml钼矾酸显色溶液，摇匀，放置2min，以试剂空白作参比，在与绘制工作曲线相同的比色皿和波长条件下，测定其吸光度。 4.2.2 从工作曲线查得水样磷酸盐含量。 [注释] 1）水样浑浊时应过滤，将最初的100ml滤液弃去，然后取过滤后的水样进行测定。 2）水样温度应与绘制工作曲线时的温度大致相同，若温差大于±5℃，则应采取必要的加热或冷却措施。 3）磷矾钼酸的黄色可稳定数日，在室温下不受其它因素影响。 4）采用72型分光光度计时，若波长在420nm下，空白调不到100%时，可采用略大于420nm的波长。 计算过程： 实验小结：

总磷的测定——钼酸铵分光光度法

总磷的测定——钼酸铵分光光度法 （GB 11893—89） 一、目的和要求 掌握总磷的测定方法与原理。 了解水体中过量的磷对水环境的影响。 二、原理 在中性条件下用过硫酸钾（或硝酸－高氯酸）使试样消解，将所含磷全部氧化为正磷酸盐。在酸性介质中，正磷酸盐与钼酸铵反应，在锑盐存在下生成磷钼杂多酸后，立即被抗坏血酸还原，生成蓝色的络合物。 本标准规定了用过硫酸钾（或硝酸—高氯酸）为氧化剂，将未经过滤的水样消解，用钼酸铵分光光度法测定总磷的方法。 总磷包括溶解的、颗粒的、有机的和无机磷。 本标准适用于地面水、污水和工业废水。 取25mL水样，本标准的最低检出浓度为L，测定上限为L。 在酸性条件下，砷、铬、硫干扰测定。 三、试剂 硫酸，密度为1.84g/mL。 硝酸，密度为1.4g/mL。 高氯酸，优级纯，密度为1.68g/mL。 硫酸（V/V），1+1。 硫酸，约L，将27mL硫酸（）加入到973mL水中。

氢氧化钠溶液，1mol/L ，将40g 氢氧化钠溶于水并稀释至1000mL 。 氢氧化钠溶液，6mol/L ，将240g 氢氧化钠溶于水并稀释至1000mL 。 过硫酸钾溶液，50g/L ，将5g 过硫酸钾（K 2S 2O 8）溶于水，并稀释至100mL 。 抗坏血酸溶液，100g/L ，将10g 抗坏血酸溶于水中，并稀释至100mL 。此溶液贮于棕色的试剂瓶中，在冷处可稳定几周，如不变色可长时间使用。 钼酸盐溶液：将13g 钼酸铵[(NH 4)6MO 7O 24·4H 2O]溶于100mL 水中，将0.35g 酒 石酸锑钾[KSbC 4HO 7·]溶于100mL 水中。在不断搅拌下分别把上述钼酸铵溶液、 酒石酸梯钾溶液徐徐加到300mL 硫酸（）中，混合均匀。此溶液贮存于棕色瓶中，在冷处可保存三个月。 浊度—色度补偿液，混合二体积硫酸（）和一体积抗坏血酸（）。使用当天配制。 磷标准贮备溶液，称取0.2197g 于110℃干燥2h 在干燥器中放冷的磷酸二氢钾（KH 2PO 4），用水溶解后转移到1000mL 容量瓶中，加入大约800mL 水，加5mL 硫酸（），然后用水稀释至标线，混匀。此标准溶液含g μ磷。本溶液在玻璃瓶中可贮存至少六个月。 磷标准使用溶液，将磷标准贮备溶液（）转移至250mL 容量瓶中，用水稀释至标线并混匀。此标准溶液含g μ磷。使用当天配制。 酚酞溶液，10g/L ，将0.5g 酚酞溶于50mL95%的乙醇中。 四、仪器 医用手提式蒸汽消毒器或一般压力锅～1.4kg ／cm 2)。 50mL 比色管。 分光光度计。

钼酸铵分光光度法测定水中总磷问题探讨

钼酸铵分光光度法测定水中总磷问题探讨 摘要：现阶段，随着我国经济的快速发展，全国水污染防治形势发生了新变化，总磷成为重点湖库、区域地表水首要污染物。“十三五”期间，水污染防治工作将 始终坚持以改善水质为核心，由原先重点管控化学需氧量、氨氮等常规污染物向 以断面超标因子为重点、多污染因子协同管控转变。同时，环保部相继出台相关 文件，指导地方落实总磷减排任务，加强对工业企业总磷排放的达标监管。因此，污水和地表水中总磷的分析工作日趋重要。在总磷的测定方法中，钼酸铵分光光 度法（GB11893-1989）是最普遍的方法。本文结合日常工作经验、相关文献资料，总结使用该方法遇到的问题及其对策。 关键词：钼酸铵分光光度法；测定；总磷问题 引言 磷在水体中的存在形式多为磷酸盐，包括正磷酸盐、缩合磷酸盐和与有机物结合的磷， 在溶液、水生生物中广泛存在。总磷是评价水质的一个重要指标，在运用钼酸铵分光光度法 进行水中总磷测定的过程中，常用的消解方法是国标法，但是这种方法存在很多问题，需要 进行相应的改进来保证水样消解的实际效果。 1方法原理 钼酸铵分光光度法是国标规定的方法（GB11893－1989），方法原理是置于高压蒸气消 毒器中加热，待压力达1.1kg/cm2，相应温度为120℃以下，用过硫酸钾使试样消解，将所含 磷全部氧化为正磷酸盐。在酸性介质中，正磷酸盐与钼酸铵反应，在锑盐存在下生成磷钼杂 多酸后，立即被抗坏血酸还原，生成蓝色的络合物。应用此方法进行了精密度偏性实验，对 测定过程中可能出现的问题提出处理意见。 2测定过程中相关问题探讨 2.1试剂的配制 钼酸盐溶液是显色过程中重要的试剂，其配制过程对整个分析过程的影响较大。首先， 所用的硫酸（1+1）应先冷却，否则易造成溶液变质。其次，硫酸最好选用优级纯，配制钼 酸盐溶液所选用的硫酸纯度会影响总磷测定过程中的实验空白值，在其他药剂与配制步骤及 实验室环境均一致的情况下，分别使用同一厂家不同等级不同批次的硫酸配制钼酸铵溶液， 分别用其显色后，总磷空白样品吸光度出现较大的差异，作为氧化剂的过硫酸钾难溶于水， 温度较高时又易氧化分解，故需在控制好温度后水浴加热配制。有研究表明，溶解过硫酸钾 应尽量控制在水温40℃以内，超过40℃的水温在未密封的情况下，过硫酸钾会开始缓慢分解，并释放出难闻的气味。另有研究表明，可以用过硫酸钠代替过硫酸钾消解水样，两者对 同一水样的测定结果接近。又因过硫酸钠其溶解性好，可以考虑用于水中总磷测定的消解过程。 2.2 样品的采集、保存 由于磷酸盐易于吸附，因此采样瓶必须清洗干净，先用稀盐酸清洗，再依次用自来水、 蒸馏水冲洗数次。当采集含磷量较少的水样时，不应使用塑料瓶。因为含磷的水样不稳定，

磷含量的测定(钼酸铵分光光度法)

产品质量检测说明书 ------缓蚀阻垢剂JF-296 pH值的测定 1仪器和设备 酸度计：精确值单位，配有饱和甘汞参比电极、玻璃测量电极或复合电极。 2 分析步骤 将药剂稀释成1%的水溶液待用，将稀释后试样倒入250mL烧杯中，将电极侵入溶液中，在已定位的酸度计上读出pH值。 密度的测定 1仪器和设备 ⑴密度计：分度值为cm3。 ⑵恒温水浴：温度控制在（20±1）℃。 ⑶玻璃量筒：250mL。 ⑷温度计：0~50℃，分度值为1℃。 2 分析步骤 将试样注入清洁、干燥的量筒内，不得有气泡，将量筒置于20℃的恒温水浴中。待温度恒定后，将清洁、干燥的密度计缓缓地放入试样中，其下端应离筒底2cm以上，不得与筒壁接触。密度计的上端露在液面外的部分所占液体不得超过2~3分度。待密度计在试样中稳定后，读出密度计弯月面下缘的刻度（标有读弯月面上缘刻度的密度计除外），即为20℃试样的密度。 药剂中总磷含量的测定 --钼酸铵分光光度法 1主题内容与适用范围 本标准需将药剂精确稀释10000倍，测定水中的总磷含量，以计算药剂中的总磷含量。 本标准规定了水中总磷含量的规定。 本标准适用于含~50mg/L水中磷含量的测定。 2方法提要

在酸性溶液中，用过硫酸钾作分解剂，将聚磷酸盐和有机膦转化为正磷酸盐，正磷酸盐与钼酸盐反应生成黄色的磷钼杂多酸，再用抗坏血酸还原成磷钼蓝，于710nm 最大吸收波长处分光光度法测定。 []O H NH O PMo H H PO H MoO NH O H KSvOC 244012242424122424)(12644++????→?+++- +-[]5234340122106 86O Mo MoO PO H O PMo H O H C ????→?- 3试剂和材料 本标准所用的试剂和水，再没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和蒸馏水或同等纯度的水。 磷酸二氢钾（GB1274） 硫酸（GB625）： 1+35硫酸溶液（1份硫酸，35份水） 抗坏血酸（HG3-536）：20g/L ； 称取10g 抗坏血酸，精确至，称取乙二胺四乙酸二纳(GB 1401) ，精确至溶于200mL 水中，加入甲酸（HG 3-1296），用水稀释至500mL ，混均，贮存于棕色瓶中（有效期一个月）。 3.４钼酸铵(GB657)：26g/L 溶液； 称取13g 钼酸铵，精确至，称取酒石酸锑钾(HG3-321)，精确至溶于200mL 水中，加入230mL 硫酸溶液，混均，冷却后用水稀释至500mL ，混均，贮存于棕色瓶中（有效期二个月）。 3.５过硫酸钾(GB641)，40g/L 溶液： 称取20g 过硫酸钾，精确至，溶于500mL 水中，摇匀，贮存于棕色瓶中（有效期一个月）。 3.６磷标准溶液：1mL 含有； 称取预先在100～105℃干燥并已恒重过的磷酸二氢钾，精确至,溶于约500mL 水中，定量转移至1L 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。 磷标准溶液：1mL 含有 PO 43-； 取磷标准溶液于500mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。 4仪器与设备 分光光度计：带有厚度为1cm 的吸收池。 5分析步骤 工作曲线的绘制 分别去0（空白）、、、、、、、、磷标准溶液于9个50mL 容量瓶中，依次向各瓶中加入约25mL 水，钼酸铵溶液，抗坏血酸溶液），用水稀

钼酸铵分光光度法测总磷

水质总磷的测定钼酸铵分光光度法 1主题内容与适用范围 本标准规定了用过硫酸钾（或硝酸-高氯酸）为氧化剂，将未经过滤的水样消解，用钼酸铵分光光度测定总磷的方法。 总磷包括溶解的、颗粒的、有机的和无机磷。 本标准适用于地面水、污水和工业废水。 取25m l试料，本标准的最低检出浓度为0.01m g/L，测定上限为0.6m g/ L。 在酸性条件下，砷、铬、硫干扰测定。 2原理 在中性条件下用过硫酸钾（或硝酸-高氯酸）使试样消解，将所含磷全部氧化为正磷酸盐。在酸性介质中，正磷酸盐与钼酸铵反应，在锑盐存在下生成磷钼杂多酸后，立即被抗坏血酸还原，生成蓝色的络合物。 3试剂 本标准所用试剂除另有说明外，均应使用符合国家标准或专业标准的分析试剂和蒸馏水或同等纯度的水。 3.1硫酸（H2S O4)，密度为 1.84g/m L。 3.2硝酸（H N O3)，密度为 1.4g/m L。 3.3高氯酸（H C l O4），优级纯，密度为 1.68g/m L。 3.4硫酸（H2S O4),1+l。 3.5硫酸，约c（1/2H2S O4）=1m o l/L：将27m L硫酸（3.1）加入到973m l 水中。 3.6氢氧化钠（N a0H),1m o l/L溶液；将40g氢氧化钠溶于水并稀释至1000m L。 3.7氢氧化钠（N a O H),6m o l/L溶液：将240g氢氧化钠溶于水并稀释至1000 m L。 3.8过硫酸钾，50g/L溶液：将5g过硫酸钾（K2S2O3）溶解于水，并稀释至10 0m L。 3.9抗坏血酸，100g/L溶液：溶解10g抗坏血酸（C6H8O6）于水中，并稀释至100m L。此溶液贮于棕色的试剂瓶中，在冷处可稳定几周。如不变色可长时间使用。 3.10钼酸盐溶液：溶解13g钼酸铵〔（N H4）8M O7024·4H2O〕于100m L水中。溶解0.35g酒石酸锑钾〔K S b C4H407·1/2H2O〕于100m L水中。在不断搅拌下把钼酸铵溶液徐徐加到300m l硫酸（3.4）中,加酒石酸锑钾溶液并且混合均匀。 此溶液贮存于棕色试剂瓶中，在冷处可保存二个月。 3.11浊度-色度补偿液：混合两个体积硫酸（3.4）和一个体积抗坏血酸溶液（3. 9）。使用当天配制。 3.12磷标准贮备溶液：称取0.2197士0.001g于110℃干燥2h在干燥器 中放冷的磷酸二氢钾(K H2P O4),用水溶解后转移至1000m L容量瓶中，加入

化验室磷钒钼黄分光光度法测定正磷酸盐操作规程

化验室磷钒钼黄分光光度法测定正磷酸盐操作规程 一、引用标准 GB/T6913-2023锅炉用水和冷却水分析方法磷酸盐的测定 二、方法提要 在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵溶液反应生成黄色的磷钼盐锑络合物,再用抗坏血酸还原成磷钼蓝后于710nm最大吸收波长用分光光度法测定。 反应式：12（NH4）2MoO4+H2PO4-+24H+→[H2PMo12O40]-+24NH4++12H2O [H2PMo12O40]→H3PO4·10MoO3·Mo2O3 三、测定仪器与试剂 1、紫外/可见分光光度计。 2、磷酸盐的贮备溶液(1mL含0.5mg磷酸根)：称取0.7165g±0.2mg在100℃～105℃下干燥并恒重过的磷酸二氢钾(KH2PO4)，溶于少量除盐水中，并稀释至1000mL。 3、磷酸盐的标液溶液(1mL含0.002mg磷酸根)：取20mL磷酸盐的贮备溶液于500mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。 4、硫酸溶液1:1。 5、抗坏血酸溶液100g/L：溶解10g±0.5g抗坏血酸于100mL±5mL水中摇匀，储存于棕色瓶中，放置于冰箱中可稳定保存2周。

6、26g/L钼酸铵溶液：称取13g钼酸铵，精确至0.5g；称取0.35g酒石酸锑钾（KSbOC4H4O6·1/2H2O），精确至0.01g溶于200mL水中，加入230mL硫酸溶液。混匀，冷却后加水稀释至500mL，混匀储存于棕色瓶中（有效期2个月）。 四、测定过程 1、工作曲线绘制 磷酸盐工作溶液取0.00，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00，6.00，7.00，8.00mL于9个50mL容量瓶中，用水稀释至约40mL，依次加入2mL钼酸铵溶液，1.0mL抗坏血酸溶液，用水稀释至刻度，摇匀。在室温下放置10min，用1cm比色皿在波长710nm处以溶剂作空白参比，分别测定显色后磷酸盐标准溶液吸光度，以测得的吸光度为纵坐标，相对应的PO43-浓度为横坐标绘制工作曲线。 2、水样的测定：取适量水样注入50mL容量瓶中加入2mL钼酸铵溶液，1.0mL抗坏血酸溶液，用水稀释至刻度，摇匀。在室温下放置10min，并以溶剂作空白参比，用1cm比色皿在波长710nm条件下，测定其吸光度。五、测定结果计算 正磷酸盐(以PO43-计)含量以质量浓度ρ1计，数值以mg/L表示，按下式计算：

水中磷和磷酸盐的测定(二)

水中磷和磷酸盐的测定（二） 三、测定办法目前常常检测的项目为溶解性总磷和总磷。水样中的测 定办法有分光光度法、离子色谱法、电感耦合等离子体质谱法等。分光光度法测定的是正磷酸盐；离子色谱法可在适当的条件下对某些形式的可溶性分离测定；电感耦合等离子体质谱法是对磷元素举行测定，办法敏捷度高，但所用仪器过于复杂昂贵。应用最多的是分光光度法，按照所用试剂或技术，分光光度法又可分为分光光度法、钒酸铵分光光度法和流淌注射分光光度法及延续流淌分光光度法等数种。钒酸铵分光光度法挑选性好，干扰少，但敏捷度比较低，多用于高含量磷的分析；目前常用的是钥酸铵分光光度法，它分为钼蓝分光光度法和钼锑抗分光光度法，两者区分主要在于用法的还原剂不同，前者以SnCl2为还原剂，因为SnCI2的还原能力强，反应过程中剩余的SnC12尚能还原钼酸铵，造成显色不稳定；后者是以抗坏血酸为还原剂，在锑盐()存在下发生反应，因为抗坏血酸是中等强度还原剂，克服了SnCl2 的缺点，显色越发稳定。 1．分光光度法 (1)钼酸铵分光光度法(钼蓝光度法)：水中的正磷酸盐在酸性条件下，与钼酸铵反应生成淡黄色的磷钼杂多酸，再用还原剂SnC12还原，生成深蓝色协作物(钼蓝)，一定浓度范围内，其色彩深浅与正磷酸盐含量成正比，于700nm波长测定吸光度，与标准比较定量。本办法适用于生活饮用水及其水源水或生活污水中总磷的测定，其最低检测质量浓度(以PO43-计)为0.1mg/L，若取50ml水样测定，则最低检测质量为5ug，测定上限为10mg/L。移取一定体积消解液于比色管中，依次加入钼酸铵-硫酸溶液和氯化亚锡溶液，混合匀称，10分钟后，测其吸光度，标准曲线法定量。注重事项：①生活饮用水和其水源水组成容易，测定溶解性总磷时，经0.45um滤膜或中速滤纸过滤的滤液无需消解，可挺直测定。②钼酸铵浓度、还原剂含量、反应温度准时间均对显色产生影响；温度上升1℃，色泽增强1%，因此水样和标准溶液的显色温度应全都，如室温变动显然，需重新制作标准曲线。温度上升可以加快显色反应的速度，因此，可按照 第1页共5页

钼酸铵分光光度法测定磷

钼酸铵分光光度法测定磷 简介 钼酸铵分光光度法是一种常用于测定磷含量的分析方法。通过钼酸盐与磷的反应生成磷酸盐沉淀，然后使用分光光度仪测量沉淀的吸光度来确定磷的浓度。本文将详细介绍钼酸铵分光光度法测定磷的原理、实验步骤和注意事项。 原理 钼酸铵分光光度法基于磷与钼酸盐在酸性条件下反应生成磷酸盐沉淀的原理。具体的反应方程式如下： HPO42- + 12MoO42- + 15H+ → （NH4）3PO4·12MoO3 + 3H2O 反应产物为黄色的磷酸盐沉淀，其吸光度与磷的浓度成正比关系。 实验步骤 1. 样品处理 1.准备待测样品，可以是水样、土壤样品、肥料样品等。 2.如果样品中含有有机物，首先需要进行蒸发干燥，然后加入硝酸等酸性溶液 进行溶解。 2. 标准曲线的绘制 1.准备一系列已知浓度的磷标准溶液。 2.将每个标准溶液分别进行处理，按照样品处理的步骤进行操作。 3.使用分光光度仪，以无样品处理的溶液为对比参照，测量各个标准溶液的吸 光度。 4.将吸光度值与对应的磷标准溶液的浓度绘制曲线。 3. 测定样品的磷含量 1.对待测样品进行样品处理。 2.使用分光光度仪，测量样品的吸光度。

3.根据标准曲线，计算出样品中磷的浓度。 注意事项 1.实验操作过程中，必须保持酸性条件，以促进磷与钼酸盐的反应。 2.为了获得准确的测量结果，应避免样品中存在其他干扰物质。如有必要，可 进行样品预处理，如过滤、沉淀等。 3.使用分光光度仪时，应校准仪器，并确保仪器的线性范围适合测量样品浓度。 4.测量前，最好进行预实验，确定合适的样品稀释倍数，以避免浓度过高或过 低的情况。 结论 钼酸铵分光光度法是一种可靠、准确的测定磷含量的方法。通过该方法测定样品中磷的含量，可以得到样品中磷的浓度值，为环境监测、农业生产等领域提供支持和参考。在进行分析实验时，需要严格按照实验步骤进行操作，并注意样品处理和仪器校准等细节，以获得准确的测量结果。

水质磷酸盐测定方法确认实验报告(磷钼蓝分光光度法)

水质磷酸盐测定方法确认实验报告 1.方法依据 水质磷酸盐的测定磷钼蓝分光光度法 GB/T 5750.5-2006 2.方法原理 在强酸性溶液中，磷酸盐与钼酸铵作用生成磷钼杂多酸，能被还原剂（氯化亚锡等）还原，生成蓝色的络合物，当磷酸盐含量较低时，其颜色强度与磷酸盐的含量成正比。 3.仪器 3.1可见分光光度计 3.2 实验室常规玻璃仪器 4.试剂 详见磷钼蓝分光光度法 GB/T 5750.5-2006 5.分析 5.1 校准曲线的绘制 分别吸取磷酸盐标准溶液0 mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL、4.00 mL、6.OO mL、8.OO mL、10.OO mL，置于50 mL比色管中，加纯水至50 mL。加入4 mL铝酸铵一硫酸溶液摇匀。加入1滴氯化亚锡溶液，再摇匀，10 min后比色或于650 nm波长处测其吸光度。 5.2 取50 mL水样，置于50 mL比色管中。以下按绘制标准曲线的步骤进行显色和测量。减去空白试验的吸光度，并从校准曲线上查出含磷量。 下表为标准曲线的测定结果： 6讨论 6.1适用范围：本方法适用于生活饮用水及其水源水中磷酸盐的测定。 6.2测定范围：最低检测质量为5μg，若取50 rnL水样测定，则其最低检测质量浓度为0.1 mg／L。本法适用于测定磷酸盐（HPO43-）浓度为10 mg/L以下的水样。如果水样浑浊或带色可加入少量活性碳处理后测定。 6.3检出限的评定：根据国际纯粹应用化学联合会IUPAC规定，检出限是指能以适当的置信水平检出的最小分析信号(X L)所对应的分析物浓度,这个最小仪器响应值(X L)由下式规定： X L=X b+ KS bL 式中X b是空白溶液测量值的平均值，S bL是20次以上空白溶液测量值的标准偏差，K是一个选定的常数，一般K=3。与X L-X b（即KS bL）相应的浓度或量即为检出限D.L。 所以：D.L= X L-X b/k=KS bL /k （k为校准曲线的斜率） 根据这个评定准则，分别测量元素20次空白，所得数据进行统计，所得检出限结果见下表

新方法验证报告(水质 磷酸盐的测定 钼锑抗分光光度法 (水和废水监测分析方法 第四版增补版))

XXXX有限公司 新项目方法验证能力确认报告 水质磷酸盐的测定钼锑抗分光光度法（水和废水监测项目名称： 分析方法第四版增补版） 负责人： 审核人： 日期：

水质磷酸盐的测定钼锑抗分光光度法 《水和废水监测分析方法第四版增补版》 方法验证能力确认报告 1、方法依据及适用范围 本方法最低检出浓度为0.01mg/L（吸光度A=0.01时所对应的浓度）；测定上限为0.6mg/L。 可适用于测定地表水、生活废水及化工、磷肥、机加工金属表面磷化处理、农药、钢铁、焦化等行业的工业废水中的真正磷酸盐分析。 2、方法原理 在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵、酒石酸锑钾反应，生产磷钼杂多酸，被还原剂抗坏血酸还原，则变成蓝色络合物，通常即称磷钼蓝。 3、主要仪器、设备及试剂 除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为新制备的纯水或无氨水。 3.1试剂和材料 ①（1+1）硫酸。 ②10%抗坏血酸溶液：溶解10g抗坏血酸于水中。并稀释至100mL。该溶液贮存在棕色玻璃瓶中，在约4℃可稳定几周。如颜色变黄，则弃去重配。 ③钼酸盐溶液：溶解13g钼酸铵((NH4)6Mo7O24·4H2O)于100mL水中。溶解 0.35g酒石酸锑氧钾(K(SbO)C4H4O6·1/2H2O)于100mL水中。 在不断搅拌下，将钼酸铵溶·液徐徐加到300mL（1+1）硫酸中，加酒

石酸锑氧钾溶液并且混合均匀，贮存在棕色的玻璃瓶中于约4℃保存。至少稳定两个月。 ④浊度-色度补偿液：混合两份体积（1+1）硫酸和一份体积的10%抗坏血酸溶液。此溶液当天配制。 ⑤磷酸盐贮备液：将优级纯磷酸二氢钾（KH2PO4）于110℃干燥2h，在干燥器中放冷。称取0.2197g溶于水，移入1000mL容量瓶中。加（1+1）硫酸5mL，用水稀释至标线。此溶液每毫升含50.0µg磷（以P计）。 ⑥磷酸盐标准溶液：吸取10.00mL磷酸盐贮备液于250mL容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含2.00µg磷。临用时现配。3.1.1新制备的去离子水3.2仪器 3.2.1紫外可见分光光度计。1台，型号：XXXXX，检定证书编号：XXXXX，检定有效期限，XXXX年XX月XX日。 3.2.2一般实验室常用仪器和设备。 4、样品采集及测定 4.1样品采集和保存 参照HJ/T91和HJ/T164 的相关规定采集样品。 总磷的测定，于水样采集后，加硫酸酸化至pH≤1保存。溶解性正磷酸盐的测定，不加任何保存剂，于2～5℃冷处保存，在24h内进行分析。 4.2样品预处理 采集的水样立即经0.45µm微孔滤膜过滤，其滤液供可溶性正磷酸盐的测定。滤液经下述强氧化剂的氧化分解，测得可溶性总磷。取混合水样（包括悬浮物），也经下述强氧化剂分解，测得水中总磷含量。

总磷的测定(钼锑抗分光光度法

、工作原理 在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵、酒石酸锑氧钾反应，生成酸木杂多酸，被还原剂抗坏酸还原，则变成蓝色配合物，通常称钼蓝。 二、水样预处理 取25.0ml 混匀水样于50ml 具塞刻度管中，加过硫酸钾溶液4ml ，加塞后管口包一小块纱布并用线扎紧，以免加热时玻璃塞冲出。将具塞刻度管放在大烧杯中，置于高压蒸汽消毒2 器中加热，待锅内压力达 1.1kgf/cm 时，调节电炉温度使保持此压力30min 后，停止加热，待压力表指针降至零后，取出放冷。 试剂空白和标准溶液系列也经同样的消解操作。 三、方法适用范围 本方法最低检出浓度为0.01mg/L （吸光度A=0.01时所对应的浓度）；测定上限为 0.06mg/L。 可适用于测定地表水、生活污水及化工、磷肥、机加工金属表面磷化处理、农药、钢铁、焦化等行业的工业废水中的正磷酸盐。 四、仪器 1 、分光光度计 2、50ml （磨口）具塞刻度管。 五、试剂 1 、1+1 硫酸。 2、10%抗坏血酸溶液溶解10g抗坏血酸于水中，并稀释至100ml。该溶液贮存在棕色玻璃瓶中，在约4C可稳定几周。如颜色变黄，则弃去重配。

3、钼酸盐溶液溶解13g钼酸铵［（NH?）6Mo7O24 • 4H于OjOOml水中。溶解0.35g 酒石酸锑氧钾［K（SbO）C?H?O6 • ?H?O］OOml 水中。 在不断搅拌下，将钼酸铵溶液徐徐加到300ml1+1硫酸中，加酒石酸锑氧钾溶液平且混合均匀，贮存在棕色的玻璃瓶中约4C保存，至少稳定两个月。 4、浊度-色度补偿液混合两份体积的1+1 硫酸和一份体积的1 0％抗坏血酸溶液。此溶液当天配制。 5、磷酸盐贮备溶液将优级纯磷酸二氢钾（KH?PO）于110C干燥2h，在干燥器中放冷，称取0.2197g溶于水中，移入1000mlml容量瓶中。加1+1硫酸5ml，用水稀释至标线。 此溶液每毫升含50.00 □磷（以P计）。 6、磷酸盐标准溶液吸取10.00ml磷酸贮备液于250ml容量瓶，用水稀释至标线，此溶液每毫升含2.00 □磷，临用时现配。 六、测定步骤 ⑴校准曲线的绘制取数支50ml 具塞比色管，分别加入磷酸盐标准使用溶液 0、0.50ml、 1.00ml、3.00ml、5.00ml、10.0ml、15.0ml，加水至50ml。① 显色向比色管中加入1ml10%抗坏血酸溶液，混匀。30s后加2ml钼酸盐溶液充分混匀，放置 15min。 ② 测量用10mm 或30mm 比色管，于700nm 波长，以零浓度溶液为参比，测量吸光度。 ⑵样品测定分取适量经滤膜过滤或消解的水样（使含磷量不超过30卩）加入50ml 比色管中，用水稀释至标线。以下按绘制校准曲线的步骤进行显色和测 量。减去空白试验的吸光度，并从校准曲线上查出含磷量。 七、结果计算 磷酸盐（P，mg/L）=m/V

钼酸铵分光光度法测定水中总磷的原理

钼酸铵分光光度法测定水中总磷的原理 钼酸铵分光光度法是常用的测定水中总磷的方法之一。它的原理是利用钼酸铵与磷酸 根离子（H2PO4-和HPO4^-2）反应，在酸性条件下生成淡黄色的钼酸铵磷酸根络合物，这种络合物在紫外可见光区域有一个比较显著的特征吸收。利用分光光度计测定水样中的钼酸 铵磷酸根络合物的吸收度，就可以计算出水中总磷的含量。 1. 准备样品：取一定量的水样，加入适量H2SO4至pH=2-3，并加入氨铵巴比妥酸缓 冲液（NH4H2PO4-NH4Cl-Na2EDTA调节缓冲液）进行缓冲校正，让溶液pH=7-8。 2. 处理样品：将缓冲校正后的水样中加入柠檬酸钠，在水中形成稳定的四价磷酸钠，不与试剂中的钼酸铵发生反应。加入适量的钼酸铵试剂，使其与缓冲校正后的水样中的总 磷反应，生成稳定的钼酸铵磷酸根络合物，使溶液呈现淡黄色。 3. 分光光度计测量：将反应后的溶液放入分光光度计中，选择合适的波长进行测量。钼酸铵磷酸根络合物在320-360nm范围内有一个较为显著的吸收峰，可以选择该波长进行 测量。根据溶液的吸光度值，使用标准曲线计算出水中总磷的含量。 钼酸铵分光光度法是一种简单、快速、准确、经济的水中总磷测定方法，广泛应用于 环境保护、水资源管理、水质监测等领域。但是在具体测量时，需要注意样品的准备、试 剂的选择和使用方法等细节问题，才能获得更准确可靠的结果。钼酸铵分光光度法具有优 越的选择性、灵敏度和准确度，可以测定不同类型的水样中总磷的含量，对于环境保护和 水资源管理具有重要的意义。有些因素可能影响钼酸铵分光光度法的测量结果，需引起注意。 样品的准备对测量结果影响很大。对于含有大量有机质的水样，如河水、污水等，会 产生胶体和网状团块，影响测量结果。此时需进行澄清或沉淀处理，使溶液透明清晰。还 需要尽量避免样品中出现氧化剂、铁、铜等影响钼酸铵分光光度法的物质，否则会干扰分 析结果。 试剂的选择和使用对实验结果的准确性也有很大的影响。钼酸铵试剂的纯度会影响到 反应的结果，应尽量选用质量好的试剂。在试剂的使用中也需要注意正确的操作方法和加 入量，否则会产生试剂过量或不足的问题，影响测量结果的准确性。 钼酸铵分光光度法在测量过程中需要严格控制试剂的浓度和反应时间，否则会产生误差。如果试剂过高浓度，在与样品反应时会出现过量反应，导致稳定性差。反之，如果试 剂浓度过低，则会影响到灵敏度和准确度。反应时间过长或过短也会影响测量结果，钼酸 铵磷酸根络合物的稳定时间有限，因此应该控制在适当的范围内，不宜过长或过短。 钼酸铵分光光度法是测定水中总磷含量的一种可靠方法，但在实际应用中需要注意样 品的准备、试剂的选择和使用方法等因素，才能获得更加准确可靠的结果。在进行水中总

水质总磷的测定 钼酸铵分光光度法

测总磷钼酸铵分光光度法 1.空白取25ml蒸馏水加入50ml的比色管中 2.水样取10ml加入50ml的比色管中 3.空白跟水样都用蒸馏水标定到25ml刻度线 4.空白与水样都加入4ml 5%的过硫酸钾溶液，加盖混匀，用消毒纱布分别将管口包裹起来 5.放入高压锅加热（120-124度，35分钟） 6.加热完成后打开纱布放凉 7.放凉后加蒸馏水至50ml刻度线标定 8.分别加入1ml 10%抗坏血酸溶液 9.分别加入2ml钼酸铵溶液，加盖混匀 10.15分钟后用紫外分光光度计测波长700

药品配置 1、5%过硫酸钾溶液：溶解5g于水中，并稀释至100ml 2、10%抗坏血酸溶液：溶解10g抗坏血酸于水中，并稀释至100ml.该溶液贮存在棕色玻璃瓶中，在约4度可稳定几周，如颜色变黄，则弃去重配 3、钼酸盐溶液: ①溶解13g钼酸铵于100ml水中 ②溶解0.35g酒石酸锑氧钾于100ml水中 ③在不断搅拌下，将钼酸铵溶液徐徐加到300ml(1+1）硫酸中，加酒石酸锑氧钾溶液并且混合均匀.贮存在棕色的玻璃瓶中于约4c保存，至少稳定两个月 4、磷酸盐贮备溶夜:将优及纯磷酸二氢钾于110度干燥2h，在干燥器中放凉，称取0.2197g溶于水，移入1000ml 容量瓶中,加(1+1)硫酸5ml，用水稀释至标线.此溶液每毫升含50.0ug磷 5、磷酸盐标准溶液:吸取10ml磷酸盐贮备液于250mL 容量瓶中，用水稀释至标线.此溶液每毫升含2.00ug磷,临用时现配

曲线做法 磷酸盐标准溶液：吸取10ml磷酸盐储备液于250ml 容量瓶中，用水稀释至标线，此溶液每毫升含2.00ug磷，临用时现配 1.分别吸取0，0.5, 1.00，3.00, 5.00，10.00, 15.00ml 磷酸盐储备液于50ml比色管中，加蒸馏水至25ml刻度线 2.都加入4ml 5%的过硫酸钾溶液，加盖混匀，用消毒纱布分别将管口包裹起来 3.放入高压锅加热（120-124度，35分钟） 4.加热完成后打开纱布放凉 5.放凉后加蒸馏水至50ml刻度线标定 6.分别加入1ml 10%抗坏血酸溶液 7.分别加入2ml钼酸铵溶液，加盖混匀 8.15分钟后用紫外分光光度计测波长700

钼酸铵分光光度法测总磷原理

钼酸铵分光光度法测总磷原理 一、总磷的定义和来源 总磷是指水中存在的各种磷酸盐总和，包括无机磷和有机磷。水中总磷来源主要包括天然水体、废水和生活污水等，其中废水和生活污水中磷含量较高，会对周围环境和水质产生很大影响。对于水质监测以及环境保护来说，准确测量水中总磷的含量是很有必要的。 二、分光光度法测量总磷的基本原理 利用分光光度法测量总磷的测定原理是将含有总磷的水样与钼酸铵溶液反应，生成显色物，然后利用紫外可见分光光度计进行测量。在分光光度法中，测定总磷含量的原理是根据磷酸盐物质与钼酸铵溶液在酸性条件下反应生成黄色的磷酸钼钨酸铵化合物。该化合物在紫外可见光谱区存在较强的吸收峰，在波长为660nm处有最大吸收峰，该峰的吸光度与水样中总磷的量成线性关系，因此可以利用紫外可见分光光度计对其进行测定，从而得到水样中总磷的含量。 三、实验操作步骤 1.准备样品 首先需要取得待测样品，如果是自来水或地表水样品，可以在直接使用前用滤器进行过滤，如果是废水或生活污水，需要先用硫酸将样品进行消化处理。然后将样品用蒸馏水定容至所需体积（如100mL），制备样品原液。 2.制备标准曲线 将已知浓度的标准磷酸盐溶液分别用蒸馏水稀释成不同浓度的溶液，一般可选取4个浓度级别。然后按照相同的操作步骤，将标准溶液和样品原液与钼酸铵溶液进行反应，生成黄色显色物。根据不同溶液的吸光度值，可以制备出标准曲线，以便后续计算。 3.进行样品测定 将样品原液与钼酸铵溶液反应生成黄色显色物，然后使用紫外可见分光光度计在波长为660nm处进行测定。根据标准曲线可以得出样品中总磷的含量。 四、实验注意事项 1.禁止直接用手接触药品和样品，操作时要带手套。 2.在制备标准曲线时要注意将稀释好的标准溶液与钼酸铵溶液反应完全。

抗坏血酸还原钼酸铵分光光度法测定水中痕量磷酸盐

JIANGSU UNIVERSITY OF TECHNOLOGY 本科毕业论文 抗坏血酸还原钼酸铵分光光 度法测定水中痕量磷酸盐 学院名称：化学与环境工程学院 专业：应用化学 班级：09应化1W 学号：09331103 姓名：傅丽凤 指导教师姓名：唐江宏 指导教师职称：教授 二〇一三年六月

抗坏血酸还原钼酸铵分光光 度法测定水中痕量磷酸盐 摘要：磷是生物生长的必需元素之一，但水体中磷含量过高会导致富营养化，使水质恶化。环境中的磷主要来源于化肥、冶炼、合成洗涤剂等行业的废水和生活污水，当这些废水和污水排入水中时，就会使水环境中的磷含量大大增加。因此，对于水中磷酸盐的监测，是水环境监测的重要组成部分。 本实验采用抗坏血酸还原钼酸铵分光光度法测定水中痕量磷酸盐。在酸性条件下，以抗坏血酸还原钼酸铵作为磷钼蓝比色法测定磷含量的显色剂，酒石酸锑钾作为催化剂，形成稳定的磷钼蓝后，体系在687 nm和722 nm出现两个强度相近吸收峰，以722 nm作为测定波长，优化了实验条件。在最佳条件下，磷酸盐的含量与吸光度在20－80 ng/ml范围内呈线性关系，根据3σ/k（σ为空白样品的测定值的标准偏差，k为线性方程的斜率）方法的检出限为0.83 ng/ml，相对标准偏差(RSD)为1.4%。该法用于实际水样的测定，结果令人满意。 关键词：磷酸盐；磷钼蓝；分光光度法

Ascorbic Acid Ammonium Molybdate Spectrophotometric Method for Determination of Trace Phosphate Abstract：Phosphorus is one of the essential elements for biological growth，but phosphorus in water content is too high will lead to eutrophication and to make the deterioration of the water quality．Phosphorus in the environment comes mainly from fertilizer, smelting, synthetic detergent industry wastewater and domestic sewage, when these waste water and sewage discharged into the water will greatly increase the phosphorus content in the water environment. Therefore, for the monitoring of phosphate in the water is an important part of the water environment monitoring. In this study，ascorbic acid ammonium molybdate spectrophotometric spectrophotometric determination of trace phosphate．Under acidic conditions，Chromogenic agent ascorbic acid ammonium molybdate as phosphorus molybdenum blue colorimetric determination of phosphorus content.Antimony potassium tartrate as a catalyst．To form a stable phosphorus molybdenum blue．System at 687nm and 722nm two similar intensity absorption peak，as the measurement wavelength to 722nm and optimize the experimental conditions．Under the best conditions，Phosphate content and the absorbance at a linear relationship within the range of 20－80ng/ml．The detection limit of the method according to the 3σ/k（σ as the standard deviation of the measured value of the blank sample，k is the slope of the linear equation) 0.83ng/ml．The relative standard deviation (RSD) of 1.4%．The method used for the determination of actual water samples with satisfactory results. Key words ：phosphate；Phosphomolybdenum Blue；Spectrophotometry