在线二维液相色谱法快速测定桂枝茯苓胶囊中芍药苷、丹皮酚、苦杏仁苷和肉桂酸的含量

在线二维液相色谱法快速测定桂枝茯苓胶囊中芍药苷、丹皮酚、苦杏仁苷和肉桂酸的含量

高效液相色谱已成为中药复杂体系研究的重要技术，随着新型色谱柱填料和键合技术的发展，为中药中各类成分的分离提供了多种选择，然而中药的复杂性已远远超出了人们的设想，Davis 等[1] 曾经指出用一维分离方法对含有100 个随机组分的样品进行分离，完全分离82个组分，至少需要400 万的理论板数，且当色谱峰的数量超过峰容量的37%时，系统的分离度会大大降低，所以在现有技术条件下，期望如此高的柱效和峰容量是不切实际的。多维液相色谱分离是液相色谱发展的一个重要方向，它是将多种不同分离机制的色谱体系进行联用，增加了色谱系统的分离能力，扩大了分离空间，提高了系统的峰容量，可以满足复杂样品的分离要求。在多维色谱分离手段中，二维分离最为常见。二维色谱根据一维组分是否直接进入到第二维进行分离可分为离线[2-4] 和在线[5-6]2 类，其中在线方法具有自动化程度高、避免人为误差及加快样品分析效率等优点，二维液相色谱分离技术已被越来越多的应用到中药的研究中[7-9] 。

桂枝茯苓胶囊系汉代张仲景《金匮要略》古方桂枝茯苓丸的改进剂型，经现代制造工艺精制而成为纯中药制剂，由桂枝、牡丹皮、桃仁、赤芍和茯苓组成。在2010 年版《中国药典》中收载的桂枝茯苓胶囊含量测定项下分别采用3 种高效液相色谱法

测定丹皮酚、芍药苷和苦杏仁苷的含量[10] ，不仅实际样品的分析效率较低，且缺乏来自桂枝中的指标性成分。本文利用双梯度高效液相系统（dual gradient liquid chromatography ，DGLC）在线二维色谱分离技术，样品提取后，溶液直接进样分析，并同时测定了肉桂酸的含量，含量测定结果与原方法基本一致，且样品分析效率大大提升，可用于桂枝茯苓胶囊的质量分析。

1材料

双三元液相色谱RS系统（美国赛默飞世尔公司），配置6 通道真空脱气机SRD36O0双梯度分析型色谱泵DGP3600RS自动进样器WPS3000TSL柱温箱TCC-3000 （配有1个六通阀和1 个十通阀），二极管阵列检测器DAD3000RS变色龙色谱管理软

件Chromeleon 6.8 SR11; Acclaim PAH （4.6 mnh< 150 mm 3 卩m, 美国赛默飞世尔公司，批号063191） ; Acclaim C18色谱柱（3.0 mm< 150 mm 3 a m,美国赛默飞世尔公司，批号063691 ）。

磷酸二氢钾（分析纯，国药集团化学试剂XX公司）；乙腈、

甲醇（色谱级，Fisher公司）；去离子水（18.2 MQ ,

Millipore ）; 丹皮酚对照品（paeonol ，纯度96.8%，中国食品药品检定研究院，批号110821-201112 ）;芍药苷（peniflorin ，纯度>98%，上海安谱，STA-07013001）;苦杏仁苷（amygdaloside，纯度>99% 上海安谱，STA-20107007）;肉桂酸（cinnamic acid ,纯度>99% 上海安谱，STA-43200000）。桂枝茯苓胶囊（江苏康缘药业

XX

公司，产品批号110625，110626，110730）。

2方法和结果

2.1色谱条件一维分析泵的流动相A 为乙腈，流动相B 为

0.08%磷酸+0.08%三乙胺，Acclaim 120 C18 为一维分析柱，流速为0.5 mL?min-1,梯度洗脱，0〜10 min, 15%A 10〜25 min, 15%^75%A 25〜30 min, 75%〜85%A 30〜33 min, 85%A 33〜35 min , 85%〜15%A二维分析泵的流动相A为乙腈，流动相B 为20 mmol, pH 3.0 的磷酸二氢钾，Acclaim PA II C18 为二维分析柱,梯度洗脱程序, 0〜5 min , 5%A, 5〜15 min , 5%〜40%A, 15〜15.2 min , 40%〜5%A, 15.2〜20 min , 5%A, 20〜30 min , 5%〜70%A 30〜35 min, 70%A 流速0.8 mL?min-1,柱温35 C, 检测波长0〜10 min，230 nm，10〜15 min，218 nm，15〜35 min，275 nm,进样量5 L。

2.2对照品溶液的制备分别精密称取肉桂酸、芍药苷、苦杏仁苷和丹皮酚对照品适量，按照2010 年版《中国药典》桂枝茯苓胶囊项下对照品溶液制备方法，制得各对照品质量浓度分别为0.63，

1.11 ，0.66，1.32 g?L-1 。

2.3 样品溶液的制

备取桂枝茯苓胶囊10 粒，将内容物至研钵中研匀，取细粉约0.25 g ，精密称定，置具塞的锥形瓶中，加入50%甲醇25 mL，

密塞，称定质量，超声提取30 min ，放冷，再称定质量，补足失重，摇匀，滤过，取续滤液适量，即得。

2.4 专属性试验分别取缺少桂枝、桃仁、白芍和牡丹皮的阴性制剂，按照2.3 项下方法制备阴性样品。按照上述色谱条件

进样分析，对照品、样品、阴性样品的分离谱图见图1〜3。从

阴性样品叠加谱图可以看出，不干扰目标物的测定，方法专属性较好。其中，0〜10 min为一维色谱分离过程，波长230 nm 10〜15 min 为二维色谱分离过程，波长218 nm；15〜25 min 为一维色谱分离过程，波长275 nm；25〜35 min 为二维色谱分离过程，波长为275 nm。

2.5线性关系考察分别取各对照品溶液2 mL （肉桂酸对照品200卩L）至10 mL量瓶中，加50卿醇至刻度，作为混合对照溶液1，再分别从对照品溶液1 中精密量取5.0，2.5，1.0，0.5 , 0.25 mL至10 mL量瓶中，加50卿醇稀释至刻度，摇匀，制成系列混合对照品溶液。按照2.1 项下色谱条件进样分析，以峰面积为纵坐标，质量浓度为横坐标，进行线性回归，肉桂酸、芍药苷、苦杏仁苷、丹皮酚分别在0.315〜12.6，5.55〜222.0，

3.3〜132，6.6〜264 mg?L-1 线性关系良好，r 分别为0.999 7 ，0.999 7 ，

0.999 8 ，0.999 5 。

2.6精密度试验取混合对照品溶液连续进样5 次，结果表

明，肉桂酸、芍药苷、苦杏仁苷和丹皮酚峰面积的RSD分别为

0.33%，0.51%，0.39%，0.64%。

2.7稳定性试验取待测样品溶液，分别于配制后0，2，4，6，10，12 h 进样，测定待测成分的峰面积，结果表明，肉桂酸、芍药苷、苦杏仁苷和丹皮酚峰面积的RSD分别为1.4%, 0.45%, 1.1%，0.46%。

2.8重复性试验取同一批号的桂枝茯苓胶囊样品粉末5 份，每份0.25 g ，精密称定。按照样品溶液制备方法制备样品，按照上述色谱条件进行测定，结果表明，肉桂酸、芍药苷、苦杏仁苷和丹皮酚含量的RSD分别为0.39%, 0.65%, 0.68%, 0.78%。

2.9加样回收率试验取已知含量的样品6份，每份0.1 g ，精密称定,置锥形瓶中,加入芍药苷、苦杏仁苷、丹皮酚和肉桂酸对照品溶液适量, 按照供试品溶液制备方法制备样品并测定含量,计算回收率,结果见表1。

2.10含量测定取批号为110730, 110625, 110626的桂枝茯苓胶囊0.25 g ,精密称定,按照样品前处理方法制备样品溶液,分别采用本法与药典方法测定,结果见表2。

3讨论

3.1 分析流路构建样品中芍药苷与丹皮酚的含量较高,样品基质成分干扰较少, 利用一维色谱进行分离, 而苦杏仁苷与肉桂酸的含量较低, 受到基质成分干扰影响较大, 因此采用中心切割的二维分离方法,将2 种成分分别切至二维色谱中进行分离。为避免在切换转移过程中系统压力的骤然变化对色谱柱造成的影响,试验中采用定量环储存样品。为减少一维溶剂效应的影响, 试验中米用300卩L的定量环，并尽量减小一维色谱柱的柱体积。同时在一维和二维色谱柱的柱后通过1 个六通阀实现了检测器的共用,使方法更具普适性。整个系统流路和阀切换过程见图4, 表3。

3.2色谱条件确定本文为实现一维和二维分离选择的正交

性，在色谱柱选择上先后尝试了PFP+C18 PFP+P/SC18, C18+P如C18等组合，最终确定C18+P如C18组合（柱选择性对比函数

FS=61[11]）。可获得良好的峰形和分离度；在流动相选择上，试验中曾尝试在一维和二维分离中的有机相分别采用甲醇和乙腈，但由于苦

杏仁苷与肉桂酸的色谱峰在一维分离过程中峰宽较大，切割过程中可能会造成损失，若一维分离的有机相也采用乙腈，则2 种成分的峰宽较小，且与二维色谱流动相相溶性较好。在水相选择上，本文为

使芍药苷和丹皮酚在一维分离过程中获得良好的峰形和分离度，选择

了0.08%磷酸系统，并加入了0.08%的三乙胺，而二维水相中加入磷

酸缓冲盐，可以减少一维溶剂pH变化对二维分离造成的影响。

3.3含量测定结果比较比较样品的含量测定结果发现，芍药苷、丹皮酚的含量基本一致，但苦杏仁苷的含量差异较大（本法较药典方

法低近5%）。本文首先对比了采用药典方法和本法的样品谱图中苦杏仁苷色谱峰的UV光谱均匀性，结果二者基本一致，且光谱均匀性均

较好，无法通过UV二极管阵列检测器来

判断方法的专属性。因此本文采用二维分离手段，在常规药典方法

基础上，将苦杏仁苷峰的主体中心切割至第二维色谱柱中进行分离，结果见图5，由于一维和二维色谱柱存在分离选择性的差异，结果在

同样检测波长下，在二维分离的谱图中可见明显杂质峰（tR=16.953 min），说明常规药典的分离手段存在基质干扰。

因而造成了最后的含量测定结果偏高。

4结论

中药成分较为复杂，理化性质差异较大且结构类似的化合物较多，因此谱峰重叠现象较常见。通过系统的方法学验证，表明本试验所建立二维色谱分析方法，简便快速，自动化程度高，且可同时进行桂枝茯苓胶囊中4 种成分的含量测定。利用一维和二维色谱柱分离机制的差异，提高了系统的分离能力，消除了基质成分的干扰，测定结果更加准确，对提高分析效率，控制药物质量具有一定意义。

[

含量测定

《中国药典》2010版中规定需要做含量测定的品种如下： 主要用以下方法：1、高效液相色谱法，2、气相色谱法，3、标准曲线法，4、其他方法。 一、高效液相色谱法： 药名对照品检测器色谱柱流动相供试品制备备注一枝黄花芦丁可做含量测定人参人参皂苷Rg1、Re、Rb1 可做含量测定 人参叶人参皂苷Rg1、Re D101型大孔吸附树 脂柱 不可做 三七人参皂苷Rg1、三七皂苷R1 可做含量测定 丁公藤东莨菪内酯不可做（无对照品）儿茶儿茶素、表儿茶素不可做（无对照品）三白草三白草酮不可做（无对照品）三颗针盐酸小檗碱可做含量测定 干姜6-姜辣素不可做（无对照品）炮姜6-姜辣素不可做（无对照品）土贝母土贝母苷甲不可做（无对照品）土荆皮土荆皮乙酸不可做（无对照品）土茯苓落新妇苷不可做（无对照品）大叶紫珠毛蕊花糖苷可做 大豆黄卷大豆苷、染料木苷不可做（无对照品）大青叶靛玉红可做含量测定 大黄芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、 大黄酚、大黄甲醚 可做含量测定 大蒜大蒜素不可做（无对照品）

大蓟柳穿鱼叶苷不可做（无对照品）山豆根苦参碱、氧化苦参碱可做含量测定 山茱萸马钱苷可做含量测定 山香圆叶女贞苷、野漆树苷不可做（无对照品、检测器） 山银花绿原酸、灰毛忍冬皂苷乙、 川续断皂苷乙 蒸发光散射检 测器 可做绿原酸测定 山楂叶金丝桃苷可做含量测定 千里光金丝桃苷可做含量测定 千金子千金子甾苷不可做（无对照品）川牛膝杯苋甾酮不可做（无对照品）川乌乌头碱、次乌头碱四氢呋喃不可做 制川乌苯甲酰无头原碱、苯甲酰次无 头原碱、苯甲酰新无头原碱 四氢呋喃不可做 川芎阿魏酸可做含量测定 川射干射干苷不可做(无对照品) 川楝子川楝素质朴检测器不可做（无对照品）广东紫珠连翘酯苷B、金石蚕苷可做连翘酯苷含量广枣没食子酸不可做（无对照品）小蓟蒙花苷不可做（无对照品）马钱子士的宁、马钱子碱不可做（无对照品）马钱子粉士的宁、马钱子碱不可做（无对照品） 马鞭草齐墩果酸、熊果酸蒸发光散射检 测器 不可做 王不留行王不留行黄酮苷不可做（无对照品）

肉桂中桂皮醛的最新研究进展

肉桂中桂皮醛的最新研究进展 摘要】桂皮醛（cinnamaldehyde，CA）是存在于天然药物肉桂中的一种有效成分，具有广泛的药理作用，活性较强，可用于治疗多种疾病，具有广泛的临床用 途和开发前景。随着科学技术的快速发展，对桂皮醛的研究不断深入，新的药理 作用、新的含量测定方法层出不穷，使桂皮醛的使用更广，更安全可靠。 【关键词】桂皮醛；药理作用；测定方法 【中图分类号】R284.1 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2017）14-0363-03 1.桂皮醛的基本概况 桂皮醛（cinnamaldehyde）别名肉桂醛，是樟科植物肉桂的干皮及树皮经水 蒸气蒸馏得到的挥发油（肉桂油）中的主要成分，呈浅黄色油状液体，有强烈的 桂皮油和肉桂油的香气，香气强烈持久。自然界中天然存在的肉桂醛均为反式结构，该分子结构为一个丙烯醛上连接上一个苯基，因此可被认为是一种丙烯醛衍 生物。桂皮醛颜色呈浅黄色是因为π→π*跃迁而产生的，而共轭结构的存在使得 肉桂醛的吸收光谱进入可见光波段。桂皮醛分子式为C9H8O，分子量为132.15,难溶于水、甘油，在醇、醚和石油醚中易溶。能随水蒸气挥发。在强酸性或者强碱 性介质中不稳定，易导致变色，在空气中易氧化。 桂皮醛作为传统中药肉桂挥发油中的主要成分，具有成本低廉、药理活性强、毒性低的特点。其具有多方面的药理作用，主要表现对中枢神经系统、心血管系 统方面、消化系统以及免疫系统等方面的作用。随着应用化学、临床医学、药理 和制剂等科学技术的飞速发展，桂皮醛制剂的开发和临床应用也必将为人们所重视。而我国的肉桂产量给我们的研究提供了便利的条件，降低研究成本。我国肉 桂产量占世界肉桂产量的80%以上，广西、广东（区）两省肉桂产量占我国肉桂 产量的95%以上[1]。 2.桂皮醛的临床药理研究进展 中药肉桂本身具有能扩张血管、促进血液循环、增加冠状动脉及脑血流量、 抗溃疡、利胆、抗醛糖还原酶活性、抗肿瘤等药理作用；桂皮醛作为肉桂的主要 活性成分，具有解热、扩张皮肤血管、解表、发散（汗）、镇痛、抗真菌、抗肿 瘤等作用，且毒副作用低[2]。动物实验表明，桂皮醛对平滑肌有类似罂粟碱样的 作用可使外周血管扩张、血压下降、缓解肢体疼痛。徐明等[3]通过实验观察不同 浓度桂皮醛静脉连续给药后对麻醉大鼠的心率、血压等各血流动力学指标的影响，结果显示桂皮醛在一定剂量范围内呈剂量依赖性地降低麻醉大鼠血压并在一定剂 量时对其心率也有显著的抑制作用。桂皮醛对麻醉大鼠的显著降压作用也通过了 离体血管灌流试验。还有研究表明，桂皮醛对氧自由基诱导的自发性高血压大鼠 离体主动脉收缩也有抑制作用[4]。 有研究表明，桂皮醛在体内、外均有良好的抗肿瘤效果，在给小鼠注射 50μg/mL的桂皮醛，对痘病毒引起的肿瘤抑制率为100%[5]。黄敬群等[6]采用 MTT法观察桂皮醛对人癌细胞体外增值的抑制作用，建立胃癌裸鼠移植瘤模型， 通过透射电镜观察肿瘤组织细胞凋亡情况，结果表明，桂皮醛体内抗肿瘤作用明显，其机制与抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡有关。此外还有研究表明，桂皮 醛能有效对抗小鼠S180实体瘤，在对人肿瘤细胞发挥细胞毒作用的同时，也诱 导其发生细胞凋亡[7]。 此外，许多学者的研究证实桂皮醛具有解热、镇静、镇痛、抗炎等药理作用。

在体肠段灌流模型在中药吸收研究中的应用

在体肠段灌流模型在中药吸收研究中的应用 【关键词】在体肠段灌流模型中药吸收综述 口服药物的吸收主要在小肠部位,目前,研究药物肠吸收的体外模型有理化模型和生物模型。理化模型[1-2]有数学模型计算推导的方法、磷脂膜色谱法、平行人工膜法；生物模型有离体组织模型(刷状缘囊泡BBMV、外翻肠环法、扩 散池法、外翻肠囊法)、在体动物模型(在体肠段灌流技术、肠肝血管灌流、细胞模型)。这些方法利用统计学拟合药物的多项参数(油/水分配系数logP、极 性等)与小肠吸收的相关性,作为不同药物吸收评价的筛选模型。这些模型都有其自身的优缺点,具体应用需视药物性质和实验目的而定。其中,在体肠段灌流技术通过测定药物经过肠段后从灌流液消失的量来估计药物渗透系数 (Peff)[3]。具有以下优点：①容易通过控制或改变实验条件来观察药物在肠中的整个消除过程和影响因素；②不切断血管及神经,测得的吸收速率等指标与体内法相近,比离体法更接近机体内的真实吸收；③可提高组织存活率和增加取样点；④能避免胃内容物、消化道固有运动等的生理影响；⑤既可用作药物吸收研究亦可用作稳定性研究；⑥比重分析或在回流液中加入无吸收标记物分析小肠水分转运对药物浓度的影响；⑦方法操作简便,准确性较高。笔者现就在体肠段灌流技术及其在中药口服吸收研究方面的应用作一综述。 1 在体肠段灌流技术与药物体内吸收的相关性 小肠吸收模型适用与否取决于由模型测得的参数(如通透性)是否与体内测得的参数(如吸收)之间有较好的相关性,如果存在相关性,则可以用通透性作筛选指标。Zhao YH等[4]通过对158种药物的研究表明,鼠小肠吸收模型与人类 小肠吸收模型相似,用鼠小肠吸收模型所得的数据能够有效应用于人类小肠吸收的预测。 Lennernas H 等[5-7]列出了具不同吸收特点的化合物,对在体鼠肠段灌流模型(A)和人体内空肠局部灌流模型(B)测得的有效Peff进行了测定。被动扩散化合物的Peff值,B比A平均高3.6倍；而对于载体转运化合物,差异波动较大,如D-glucose的转运,B比A要高10倍,但L-dopa的转运,B比A仅高2倍。这表明不同物种吸收载体转运化合物的机制可能有所不同。对于被动转运化合物,尽管A与B测得的结果间存在量的差异, 但具有一定的相关性,均能很好地反映化合物的吸收情况,故适用于这类化合物的吸收研究和评价。对于载体转运化合物,2个模型测得结果间差异波动较大,

单因素方差分析优化桂枝茯苓胶囊中苦杏仁苷浸出率 桂枝茯苓胶囊

单因素方差分析优化桂枝茯苓胶囊中苦杏仁苷 浸出率桂枝茯苓胶囊 摘要：目的：优化乙醇对桂枝茯苓胶囊苦杏仁苷的浸出率。方法：以苦杏仁苷浸率为考核指标，单因素方差分析最佳浸出苦杏仁苷乙醇浓度。用不同浓度乙醇处理桂枝茯苓胶囊，高效液相色谱法测定各乙醇处理液中苦杏仁苷的浓度。色谱柱:;流动相:甲醇和0.2%磷酸水. The mobile phase consisted of methanol and 0.2% phosphoric acid ;柱温室温;流速mL.min-1。流动相乙腈:0.2%磷酸水(24∶ 76),检测波长为210nm。流速mL.min-1;柱温:室温。最小理论塔板数以苦杏仁苷色谱峰计，应≥1500。在此条件下样品分离度大于2，苦杏仁苷拖尾因子小于1.05。
2.3.2 对照品溶液配制精密称取1.25mg,加双蒸水溶解稀定容10mL 。即为0.125mg·mL - 1 对照品溶液。
2.3.3 标准曲线制作分别精密取对照品溶液2.5,5,10,15,20，25（μL）进样,记录苦杏仁苷峰面积。峰面积分别为5.7007、11.741、 23.336、35.511、47.636、59.478。以峰面积值为纵坐标（Y）、进样苦杏仁苷绝对量（μg）为横坐标（X），绘制标准曲线Y=19.141X-0.3375。表明苦杏仁苷在0.3125-3.125μg

呈线性关系。r=0.9999。
2.3.4 精密度试验取对照品溶液10μL连续进样5次,测定峰面积分别为:23.346、23.294、23.393、23.336、23213，峰面积平均值为 23.317,RSD=0.29%。
2.3.5 重复性实验精密称取桂枝茯苓胶囊适量,按照供试品制备方法制备6份,取60％乙醇浸提液样品进样10μL。平均浓度为0.166mg·mL -1,RSD为0.28%。
2.3.6 稳定性试验取同一供试品溶液，按照上述色谱条件测定6次，在0，1，2，4，8， 12h分别进样10μL，测定峰面积。结果RSD为0.37%，表明 样品在12h内稳定性良好。
2.3.7 加样回收率试验精密量取已知含量的一个乙醇浸提液样品（取60%的浸提液），精密加入一定量对照品溶液,用流动相补足定容到2mL 容量瓶，取15μL进样,测定结果。所得平均加样回收率为99.9%,RSD为0.36%（n=6）。
桂枝茯苓胶囊，按照“2.2”制备供试品溶液，每次取15μL进样，重复3次，记录苦杏仁苷色谱峰面积,利用标准曲线方程计算供试品溶液苦杏仁苷浓度。为了计算方便，记录以HPLC测定的10％、40%、60%、80%、95%乙醇浸出液苦杏仁苷浓度的峰面积分析。见表2、表3。
2.5 结果
10％、40%、60%、80%、95%乙醇浸出液苦杏仁苷分别为0.01999、 0.1695、0.1663、0.1613、0.1037mg/mL。且10％、40%、

高效液相色谱法测定藿香正气水中苍术素含量

高效液相色谱法测定藿香正气水中苍术素含量 杨立志;姜雪敏 【摘要】Objective To establish an high Performance liquid chromatograPhic ( HPLC ) technique for the content determination of atractylodin in Huoxiang Zhengqi Liquid. Methods The oPtimized method was achieved for the seParation and detection of the selected constituent on Agilent Extend-C18 column(250 mm × 4. 6 mm,5 μm) using methanol-wather (78 ∶22) as mobile Phase at a flow rate of 1. 0 mL/min,and 340 nm as the detection wavelength. The column temPerature was 30 ℃. Results Atractylodin showed the good linea relationshiP when the amounts were between 0. 021 67 -0. 433 097 μg,r=1. 000 0 ( n=6). The average recovery rate was 97. 44%,RSD=0. 83%( n=6 ). Conclusion The method is simPle,accurate and can be aPPlied for the quality control of Huox-iang Zhengqi Liquid.%目的：建立测定藿香正气水中苍术素含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法色谱柱为Agilent Extend-C18柱（250 mm ×4.6 mm， 5μm），流动相为甲醇-水（78∶22），流速为1.0 mL／min，检测波长为340 nm，柱温为30℃。结果苍术素进样量在0.02167~0.433097μg范围内与峰面积线性关系良好，r=1.0000（ n=6），平均回收率为97.44％，RSD=0.83％（ n=6）。结论该方法操作简便，结果准确，可用于藿香正气水的质量控制。【期刊名称】《中国药业》 【年(卷),期】2016(025)016 【总页数】3页(P70-71,72)

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高效液相色谱法测定风湿定片中丹皮酚的含 量 【摘要】目的：对风湿定片中的丹皮酚进行含量测定。方式：采纳HPLC法，以Diamonsil C18为色谱柱，以甲醇水（50∶50）为流动相，流速为 mL/min，检测波长为274 nm。结果：丹皮酚在6～70 μg/mL范围内线性关系良好，相关系数r=；平均回收率为%，RSD=% (n=6)。结论：本方式结果准确，重现性好，可用于风湿定片中丹皮酚的含量测定。 【关键词】丹皮酚；风湿定片；高效液相色谱；含量测定 ［Abstract］ Objective: To establish an assay method to determine paeonol in Fengshiding tablets. Methods: By HPLC was employed with Diamonsil C18 as the column, methanol and water (50∶50) as the mobile phase, the flow rate at mL/min and the detection wavelength at 274 nm. Results: The calibration curve of paeonol was linear from 6 μg/mL to 70 μg/mL with r=; the average recovery was % with RSD % (n=6). Conclusions: This reproducible and reliable HPLC analysis provides a quantitation of Fengshiding tablets. ［Key words］ Paeonol; Fengshiding tablets; HPLC; Assay

桃核承气汤物质基准的建立方法

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利说明书 (10)申请公布号CN 113484429 A (43)申请公布日2021.10.08 (21)申请号CN202110551498.0 (22)申请日2021.05.20 (71)申请人广东一方制药有限公司 地址528244 广东省佛山市南海区里水镇旗峰工业开发区 (72)发明人魏梅孙冬梅朱德全程学仁陈向东刘艳梅李素梅毕晓黎鲁云彭致铖(74)专利代理机构44202 广州三环专利商标代理有限公司 代理人胡枫;李素兰 (51)Int.CI G01N30/02(20060101) G01N30/06(20060101) G01N30/86(20060101) 权利要求说明书说明书幅图(54)发明名称 桃核承气汤物质基准的建立方法 (57)摘要 本发明公开了一种桃核承气汤物质 基准的建立方法，其包括：采用薄层色谱 法对桃仁、大黄、肉桂、甘草进行鉴别， 采用理化鉴别法对芒硝进行鉴别；构建特 征图谱对桃核承气汤中的成分进行鉴别； 采用高效液相色谱法对桃核承气汤中的

D‑苦杏仁苷含量、总蒽醌含量、游离蒽醌 含量、肉桂酸含量、桂皮醛含量、甘草酸 含量进行测定，并计算结合蒽醌含量；其 中，结合蒽醌含量＝总蒽醌含量‑游离蒽 醌含量。本发明中的方法可为桃核承气汤 质量控制提供数据基础，有效保证桃核承 气汤产品质量的稳定性和可控性。 法律状态 法律状态公告日法律状态信息法律状态 2021-10-08公开公开 2021-10-26实质审查的生效实质审查的生效2023-06-02授权发明专利权授予

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中药对照制剂自身对照法用于桂枝茯苓胶囊的质量评价

中药对照制剂自身对照法用于桂枝茯苓胶囊的质量 评价 桂枝茯苓胶囊是汉代医圣张仲景《金匮要略》中桂枝茯苓丸的现代制剂。全方由桂枝、茯苓、桃仁、牡丹皮和白芍5味药组成，具有活血化瘀、消癥化积之功效。临床上用于瘀血阻络所致癥块、痛经等症^[1-2]。对于桂枝茯苓胶囊的质量控制研究，2010年版《中国药典》主要采用液相指纹图谱结合多成分含量测定方法进行评价。目前以中药对照指纹图谱为对照整体控制复方质量的评价方法逐渐普及^[4-5]，但是由于该方法易受检测仪器、色谱柱及人为因素等条件的制约，不同实验条件下引入的评价误差差异较大。 近年来，标准可控、质量稳定的“中药对照提取物”的研究模式被越来越多地应用到中药及复方药物的质量控制研究中^[6-7]。本研究在此基础上，首次提出“中药对照制剂”的概念，它是一种可以作为标准物质使用的中药制剂，其主成分含量相对固定，药效物质基础相对明确，可用于中药制剂的质量评价。本文主要采用中药对照制剂结合指纹图谱技术整体控制复方质量，研究思路如下。 对照制剂的制备：筛选多批经法定标准检验合格的桂枝茯苓胶囊样品，每10批混合为1批制成更具有代表性的对照制剂。 对照制剂的质量评价：采用2010年版《中国药典》收录的GZFL 质量标准（指纹图谱和多成分含量测定）对所制成的对照制剂进行质量评价，保证对照制剂与现行质量标准具有良好的相关性。 对照制剂的可行性研究：在不同仪器、色谱柱等实验条件下，分别以对照制剂随行生成指纹图谱和对照指纹图谱为指标对多批出厂检验合格的GZFL样品进行质量评价，对比对照制剂评价和对照指纹图谱评价的结果，考察对照制剂评价复方药物的可行性和优势。

牡丹皮的含量

丹皮酚的含量测定及其分析方法的验证 李超中药学 2015201225004 摘要：丹皮酚是常用中药牡丹皮、徐长卿、芍药等中药中的主要挥发性成分之一，是衡量牡丹皮、徐长卿等中药材及其组方的多种制剂质量控制的重要指标。为评价丹皮酚药材及其复方制剂的质量，人们对丹皮酚的测定方法进行了许多研究。该文就丹皮酚的含量测定及分析方法进行了评述与探讨。 关键词：丹皮酚；含量测定；分析方法 丹皮酚(paeonol)为毛茛科植物牡丹Paeonia suffruticosa Andr.的根皮及萝摩科植物徐长卿Cynanchum paniculatum(Bunge)Kitagawa.的根或全草中的挥发性成分之一。为小分子酚类化合物，白色或微黄色有光泽的针状结晶，化学名称为 2-轻基-4-甲氧基苯乙酮（如图1，分子式为C 9H 10 O 3 ；分子量166.18）。气味微辣， 极性较低，熔点49℃-51℃，易溶于乙醇和甲醇，溶于乙醚、丙酮、苯、氯仿及二硫化碳中，稍溶于水，不溶于冷水，在热水中可溶解，能随水蒸气挥发[1]。丹皮酚味苦、辛，丹皮酚具有抗心律失常、抗动脉粥样硬化、抗血栓形成、扩张管、降血压、降血糖等，还具有抗炎、抗菌抗病毒及调节免疫功能等作用[2]。 丹皮酚是衡量牡丹皮、徐长卿等中药材及以其组方的多种制剂质量控制的重要指标。2015版药典规定牡丹皮按干燥品计算，含丹皮酚不得少于1.2%，徐长卿按干燥品计算，含丹皮酚不得少于 1.3%[3]。为评价含丹皮酚药材及其复方制剂的质量，人们对丹皮酚的测定方法进行了许多研究。本文就丹皮酚的含量测定的分析方法作一概述。 1薄层扫描法 薄层扫描法准确、灵敏，重现性好，专属性强，可作为其质量控制标准。章

中药及其制剂中丹皮酚的含量测定

中药及其制剂中丹皮酚的含量测定 摘要：丹皮酚的含量是衡量牡丹皮、徐长卿等中药材及以其组方的制剂六味地黄丸等质量控制的重要指标。本文综述了近年含丹皮酚的中药材及中药制剂测定时的前处理条件和各种测定方法。 关键词：丹皮酚;牡丹皮;徐长卿;药物分析 牡丹皮为毛茛科芍药属牡丹(PaeoniasuffruticosaAndr.)的干燥根皮，徐长卿为摩萝科植物徐长卿(Cynanchumpaniculatum(Bge.)kitag.)的根及全草。两者均是具有抗菌消炎作用的常用中草药，其主要有效成分均是丹皮酚(patpnol)。在常见的中药制剂六味地黄丸、金匮肾气丸、麦味地黄丸、当归养血丸等十余种中成药处方中均有配伍使用。丹皮酚含量是评价这些中成药质量的重要定量指标。中国药典(一九九五年版)规定六味地黄丸中丹皮酚含量是其定量指标之一[1]。由于中药材及其制剂成分十分复杂，若需要测定其中某一成分，样品的前处理是关键的一步，而处理方法又必须与选定的分析方法相适应。现将含丹皮酚的中药材及其制剂的样品处理和含量测定方法综述如下。 1、光谱法 1.1紫外-可见分光光度法(Ultravioet-VisibleSpectrophotometry，UV) 紫外-可见分光光度法具有操作简单、费用较低等优点。但由于该法基本上没有分离能力，样品处理要求严格，故常被用于一般要求不很严格的测定以及中药材炮制方法、处理条件的比较、制剂工艺选择等方面。丹皮酚具有一定的挥发性，光谱法中样品处理一般都用水蒸气蒸馏或直接蒸馏法提取，以减少混入杂质，通常蒸馏液稀释后于274nm处测定吸收度。周玉生等[2]用该法测定了牡丹皮中丹皮酚含量，比较了不同加工方法的丹皮酚的含量：取已加工的牡丹皮样品适量，置蒸馏瓶中，加水约120mL，蒸馏后得馏出液约有95mL，稀释后在274nm测定吸收度。结果发现，水洗50℃烘干损失率最高，为34.96%;白酒喷淋晾干，损失率最低，为11.19%。毛黎明等[3]用水蒸汽蒸馏法测定了六味地黄的浓缩丸、口服液、胶囊三类制剂中丹皮酚含量，将试样蒸馏后，收集馏液约450mL，加水稀释，定容后，在270nm处测定吸收度。结果发现不同制剂含量有明显差别。周海梅等[4]将样品置烧瓶中，加水后直接蒸馏，收集蒸馏液，稀释后用UV测定，结果与水蒸气蒸馏提取测定无明显差异。陈文斗[5]利用丹皮酚能与对硝基氯化重氮苯在碳酸钠溶液(pH10.5～11.5)中偶合呈色的原理，测定了制剂中丹皮酚含量。其方法是将牡丹皮样品在P2O5真空干燥器中干燥至恒重，取粉末100mg 加0.2%NaOH溶液振摇，静置过滤，取续滤液适量，加入乙酸钠缓冲液和偶合试剂，反应2min，再加入碳酸钠溶液，反应3min，定容，以溶剂加试剂同样处理后为空白，在480nm处测定吸收度，结果丹皮酚在6.02～30.1μmol/L范围成良好线性关系，丹皮酚回收率达(99.97±0.97)%。 1.2胶束荧光法(MicellarFluorimetry，MCF)

在体肠段灌流模型在中药吸收研究中的应用

在体肠段灌流模型在中药吸收研究中的 应用 （作者： _________ 单位：___________ 邮编： ___________ ） 【关键词】在体肠段灌流模型中药吸收综述口服药物的吸收主要在小肠部位，目前,研究药物肠吸收的体外模型有理化模型和生物模型。理化模型［1-2］有数学模型计算推导的方法、磷脂膜色谱法、平行人工膜法；生物模型有离体组织模型（刷状缘囊泡BBMV外翻肠环法、扩散池法、外翻肠囊法）、在体动物模型（在体肠段灌流技术、肠肝血管灌流、细胞模型）。这些方法利用统计学拟合药物的多项参数（油/水分配系数logP、极性等）与小肠吸收的相关性，作为不同药物吸收评价的筛选模型。这些模型都有其自身的优缺点，具体应用需视药物性质和实验目的而定。其中,在体肠段灌流技术通过测定药物经过肠段后从灌流液消失的量来估计药物渗透系数（Peff）［3］。具有以下优点：①容易通过控制或改变实验条件来观察药物在肠中的整个消除过程和影响因素；②不切断血管及神经，测得的吸收速率等指标与体内法相近，比离体法更接近机体内的真实吸收；③可提高组织存活率和增加取样点；④能避免胃内容物、消化道固有运动等的生理影响；⑤既可用作药物吸收研究亦可用作稳定性研究；

⑥比重分析或在回流液中加入无吸收标记物分析小肠水分转运对药物浓度的影响；⑦方法操作简便，准确性较高。笔者现就在体肠段灌流技术及其在中药口服吸收研究方面的应用作一综述。 1在体肠段灌流技术与药物体内吸收的相关性 小肠吸收模型适用与否取决于由模型测得的参数（如通透 性） 是否与体内测得的参数（如吸收）之间有较好的相关性，如果存在相关性,则可以用通透性作筛选指标。Zhao YH等［4］通过对158种药物的研究表明，鼠小肠吸收模型与人类小肠吸收模型相似，用鼠小肠吸收模型所得的数据能够有效应用于人类小肠吸收的预测。 Lennernas H等［5-7］列出了具不同吸收特点的化合物，对 在体鼠肠段灌流模型（A）和人体内空肠局部灌流模型（B）测得的有效Peff进行了测定。被动扩散化合物的Peff值,B比A平均高3.6倍；而对于载体转运化合物，差异波动较大，如D-glucose的转运,B比A 要高10倍,但L-dopa的转运,B比A仅高2倍。这表明不同物种吸收载体转运化合物的机制可能有所不同。对于被动转运化合物，尽管A 与B测得的结果间存在量的差异， 但具有一定的相关性，均能很好地反映化合物的吸收情况，故适用于这类化合物的吸收研究和评价。对于载体转运化合物,2个模型测得

高效液相色谱技术在药物分析中的应用(精选)

高效液相色谱技术在药物分析中的应用 本科生毕业论文 论文题目: 高效液相色谱技术在药物分析中的应用 学生姓名:孙琮莘 学号:20XX0000 学院:药学院 专业方向:中药学 班级:20XX级03班 指导教师:李* 论文完成日期:20XX年4月 毕业论文(设计)诚信声明书 本人声明:本人孙琮莘(学号:20XX0000)所提交的毕业论文《高效液相色谱技术在药物分析中的应用》是本人在指导教师李*老师指导下独立研究、写作的成果，论文中所引用他人的无论以何种方式发布的文字、研究成果，均在论文中加以说明；有关教师、同学和其他人员对本文的写作、修订提出过并为我在论文中加以采纳的意见、建议，均已在我的致谢辞中加以说明并深致谢意。 论文作者:(签字) 时间: 20XX年 6 月日 指导教师已阅:(签字) 时间: 20XX年 6 月日 毕业论文(设计)版权使用授权书 本毕业论文《高效液相色谱技术在药物分析中的应用》是本人孙琮莘(学号:20XX0000)在校期间所完成学业的组成部分，是在指

导教师李*老师的指导下独立完成的。因此，本人特授权山东中医药大学药学院可将本毕业论文的全部或部分内容编入《山东中医药大学药学院本科生优秀毕业论文集》(非正式出版)。 论文作者: (签字) 时间: 20XX年 6 月日 指导教师已阅: (签字) 时间: 20XX年 6 月日 高效液相色谱技术在药物分析中的应用 孙琮莘 (20XX级中药学专业03班学号:20XX0000) [摘要]本文着重阐述了高效液相色谱技术在药物分析中的应用，主要包括对于天然药物、抗生素、手性药物、毒性药物、违禁药物、体内药物的分析及杂质检查，并对高效液相色谱技术的应用进行了展望。 [关键词]高效液相色谱技术；药物分析；应用 The application of high performance liquid chromatography inpharmaceutical analysis [Abstract] This paper focuses on the the application of high performance liquid chromatography inpharmaceuticalanalysis. It mainly includes the analysis of natural drugs, antibiotics, chiral drugs, toxic drugs, illegal drugs, internal medicine and impurity test. The application of high performance liquid chromatography was prospected. [Key words]high performance liquid